CN102108095A - 一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 - Google Patents
一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102108095A CN102108095A CN2009102488466A CN200910248846A CN102108095A CN 102108095 A CN102108095 A CN 102108095A CN 2009102488466 A CN2009102488466 A CN 2009102488466A CN 200910248846 A CN200910248846 A CN 200910248846A CN 102108095 A CN102108095 A CN 102108095A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- iron ion
- affinity chromatography
- iron
- immobilization
- integral post
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 44
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 title claims abstract description 42
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 title claims abstract description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 13
- -1 iron ion Chemical class 0.000 claims abstract description 44
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 24
- 239000000463 material Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims abstract description 13
- LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N dodecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCO LQZZUXJYWNFBMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 239000000178 monomer Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000003999 initiator Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 5
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims abstract description 4
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 16
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 14
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 12
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 claims description 6
- YXMISKNUHHOXFT-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) prop-2-enoate Chemical compound C=CC(=O)ON1C(=O)CCC1=O YXMISKNUHHOXFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 claims description 4
- 159000000014 iron salts Chemical class 0.000 claims description 4
- VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N propan-2-yl n-propan-2-yloxycarbonyliminocarbamate Chemical compound CC(C)OC(=O)N=NC(=O)OC(C)C VVWRJUBEIPHGQF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000007789 sealing Methods 0.000 claims description 4
- 229920002379 silicone rubber Polymers 0.000 claims description 4
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 claims description 3
- VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N Fe3+ Chemical class [Fe+3] VTLYFUHAOXGGBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 claims description 2
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- MVFCKEFYUDZOCX-UHFFFAOYSA-N iron(2+);dinitrate Chemical compound [Fe+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O MVFCKEFYUDZOCX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H iron(3+) sulfate Chemical compound [Fe+3].[Fe+3].[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O.[O-]S([O-])(=O)=O RUTXIHLAWFEWGM-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims description 2
- 229910000360 iron(III) sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 claims description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 claims description 2
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 abstract description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 4
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M Acrylate Chemical compound [O-]C(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 abstract 1
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 abstract 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 abstract 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 abstract 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract 1
- 239000003361 porogen Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 18
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 108091005981 phosphorylated proteins Proteins 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 238000001597 immobilized metal affinity chromatography Methods 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000620 organic polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001441 Phosphopeptides Proteins 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N iminodiacetic acid Chemical compound OC(=O)CNCC(O)=O NBZBKCUXIYYUSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 229910001463 metal phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 1
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000009822 protein phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
Images
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
Abstract
本发明涉及一种固定化亲和色谱整体柱的制备方法，首先在毛细管中以N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺为功能单体，乙叉二甲基丙烯酸乙酯为交联剂，环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺的混合物为致孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂聚合而得的多孔整体柱基质；整体柱基质继而通过表面修饰反应，使其表面键合上含羧基的功能团，以用于后续的铁离子固定；最后通入含铁离子的溶液，实现铁离子的固定化，完成铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备。本发明的优点为：制备方法简便，所得基质材料微观结构均一。与其他金属离子固定化亲和色谱整体柱制备方法相比，本方法所得铁离子固定化亲和色谱整体柱制备重现性好，整体柱性能稳定，对磷酸化肽段有很好的特异性富集能力。
Description
技术领域
本发明涉及用于在线或离线磷酸化肽段选择性富集分离的固定化亲和色谱整体柱，具体地说是一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备。
背景技术
蛋白质磷酸化是最普遍的翻译后修饰之一，在生命过程中扮演着信号传导、代谢调节、细胞功能调控等重要作用。然而，磷酸化蛋白/肽段通常含量较低，在质谱分析中常受到大量非磷酸化蛋白/肽段的干扰。因此，发展针对磷酸化肽段的选择性富集技术对于深入开展磷酸化蛋白质组研究至关重要。
基于固载金属离子与磷酸根间的特异相互作用的固定化金属亲和色谱是目前最常用的磷酸化富集技术之一(Chaga G S.J.Biochem.Biophys.Methods.2001，49，313-334)。次氨基三乙酸是一种具有四齿结构的螯合化合物，其与金属离子的结合能力要大于三齿配体亚氨基二乙酸。因此，目前以次氨基三乙酸为配体，以硅胶、树脂或琼脂糖为基质材料的固定化金属亲和色谱材料已成功用于磷酸化肽段的选择性富集(Dunn J D；Watson J T；Bruening M L.Anal.Chem.2006，78，1574-1580)。然而尽管硅胶具有较好的机械性能，但耐酸碱性能差；树脂和琼脂糖适用的pH范围较宽，但机械强度差。
近年来，有机聚合物整体材料因具有制备简单、结构容易控制、易实现化学修饰、传质效率高及耐酸碱等优点受到广泛关注(Vizioli N M，RusellM L；Carbajal M L；Carducci C N；Grasselli M.Electrophoresis，2005，26，2942-2948)。然而现有的有机聚合物整体材料的功能基团一般为传统的环氧基，其表面官能团活性低，需经过高温以及强酸碱处理以进行化学修饰(Duan J C；Sun L L；Liang Z；Zhang J；Wang H；Zhang L H；Zhang W B；ZhangY K.J.Chromatogr.A，2006，1106，165-174)。这不仅会影响材料的结构以及基质与管壁的键合，而且操作步骤繁琐、反应时间长、制备的材料重现性较差。在磷酸化蛋白组学研究中，磷酸化肽段富集的重现性是获得可靠分析结果的必需条件。因此，发展具有高活性官能团的固定化金属离子亲和色谱整体柱对于实现磷酸化肽段分离鉴定具有重要意义。
发明内容
本发明的目的在于提供一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法，以期解决金属离子固定化亲和色谱整体柱制备过程中化学修饰时间长，操作过程繁琐，固定化金属离子亲和色谱整体柱制备重现性差，所得亲和色谱整体柱性能不稳定等缺点。该铁离子固定化亲和色谱整体柱主要用于在线或离线选择性富集磷酸肽。
为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：
根据样品预处理量的不同选用不同管径的熔融毛细管柱。以N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺为功能单体，乙叉二甲基丙烯酸乙酯为交联剂，环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺的混合物为致孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂聚合而得的多孔整体柱基质。整体柱基质继而通过表面修饰反应，使其表面键合上含羧基的功能团，以用于后续的铁离子固定。最后通入含铁离子的溶液，实现铁离子的固定化。
具体为：
1)将N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺、乙叉二甲基丙烯酸乙酯、环己醇、十二醇、N，N-二甲基甲酰胺、偶氮二异丁腈混合均匀后，于室温下通氮气以除去溶解其中的氧气；随后将该反应液通入处理后的熔融石英毛细管中，并立即用硅橡胶封闭毛细管两端，置于52-58℃水浴中反应14-18h完成基质聚合反应。
3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
功能单体、交联剂和致孔剂三者之间的质量比例范围为2∶3∶5-2.2∶2.9∶4.9；
致孔剂中环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺三者之间的质量比例范围为76∶9∶15-72∶8∶20；
引发剂的用量为功能单体、交联剂和致孔剂三者总质量的0.5-1.0％。
2)表面修饰反应过程：在填充了基质材料的毛细管中通入0.02-0.2mol/L的N，N-二羧基甲基-L-赖氨酸溶液，溶液的pH值为8-10.0，在室温下反应0.5-2h，进行基质表面的化学修饰；整体柱基质通过表面修饰反应，使其表面键合上含羧基的功能团，以用于后续的铁离子固定。
在整体柱基质通过表面修饰反应后，用甲酸体积分数为0.05-0.2％的溶液冲洗基质材料至流出液为酸性。
3)铁离子的固定化过程：在填充了基质材料的毛细管中通入0.05-0.2mol/L的三价可溶性铁盐溶液，实现铁离子的固定化；在室温下，使溶液缓慢流过色谱柱，反应时间0.5-2h。
可溶性铁盐为三氯化铁、硝酸铁、硫酸铁或其他可溶于水的三价铁盐中的一种或多种；
制备好的铁离子固定化亲和色谱整体柱用甲酸体积分数为0.05-0.2％的溶液冲洗，去除游离的铁离子。
制备得到的铁离子固定化亲和色谱整体柱可用于在线或离线的磷酸化肽段选择性富集分离，使用后的铁离子固定化亲和色谱整体柱可通过重复铁离子的固定化过程实现再生。
本发明的优点为：(1)本方法制备方法简便，步骤少；(2)制备的整体柱基质微观结构均一；(3)制备的整体柱对磷酸化肽段具有较好的选择性和较高的富集容量；(4)制备的整体柱对生物大分子具有较快的传质速率。
附图说明
图1是铁离子固定化亲和色谱整体柱基质的扫描电镜图(a，×350；b，×2000)。
具体实施方式
按照如下步骤制备一种铁离子固定化亲和色谱整体柱。
取熔融石英毛细管，按以下步骤进行预处理：依次用100倍柱体积的0.1mol/L盐酸溶液、去离子水、0.1mol/L氢氧化钠溶液、去离子水和甲醇冲洗后，置于120℃加热炉中，用氮气吹干；然后将含3-(三甲氧基硅烷基)丙基甲基丙烯酸酯体积分数为50％的丙酮溶液充满整个毛细管，两端用硅橡胶封口后于室温反应24h；最后再用10倍柱体积的丙酮冲洗，并于室温下用氮气吹扫3h。毛细管两端封口后待用。
配制基质反应溶液，其中各组分的最终质量浓度分别为：N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺为16％，乙叉二甲基丙烯酸乙酯为24％，致孔剂为60％(致孔剂为环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺按照质量比76、9、15混合而得的混合物)，；最后再添加引发剂偶氮二异丁腈，其质量为上述基质反应溶液总质量的1％。
以上各组分在室温下混合均匀后通氮气5min以除去溶解其中的氧气。将该反应液通入处理后的熔融石英毛细管中，并立即用硅橡胶封闭毛细管两端，置于55℃水浴中反应16h，完成基质聚合反应。随后取出毛细管通入0.1mol/L的N，N-二羧基甲基-L-赖氨酸溶液，该溶液的pH值为10.0，在室温下反应1h，进行基质表面化学修饰反应。最后用甲酸体积分数为0.1％的溶液冲洗基质材料至流出液为酸性后，通入0.1mol/L的三氯化铁溶液，实现铁离子的固定化。制备好的铁离子固定化亲和色谱整体柱用甲酸体积分数为0.1％的溶液冲洗，去除游离的铁离子后保存于4℃甲酸体积分数为0.1％的溶液中。
应用例1
以本发明的铁离子固定化亲和色谱整体柱为在线或离线磷酸化肽段捕集柱，以含甲酸体积分数为0.1％的水溶液为上样缓冲溶液，可在30min内实现对蛋白样品中磷酸化肽段的选择性捕集。
本发明的优点为：制备方法简便，所得基质材料微观结构均一。与其他金属离子固定化亲和色谱整体柱制备方法相比，本方法所得铁离子固定化亲和色谱整体柱制备重现性好，整体柱性能稳定，对磷酸化肽段有很好的特异性富集能力。
Claims (9)
1.一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法，其特征在于：
首先在毛细管中以N-丙烯酰氧基琥珀酰亚胺为功能单体，乙叉二甲基丙烯酸乙酯为交联剂，环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺的混合物为致孔剂，偶氮二异丁腈为引发剂聚合而得的多孔整体柱基质；
整体柱基质继而通过表面修饰反应，使其表面键合上含羧基的功能团，以用于后续的铁离子固定；最后通入含铁离子的溶液，实现铁离子的固定化，完成铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备。
2.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
功能单体、交联剂和致孔剂三者之间的质量比例范围为2∶3∶5-2.2∶2.9∶4.9；
致孔剂中环己醇、十二醇和N，N-二甲基甲酰胺三者之间的质量比例范围为76∶9∶15-72∶8∶20；
聚合反应过程为，将反应液通入处理后的熔融石英毛细管中，并立即用硅橡胶封闭毛细管两端，置于52-58℃水浴中反应14-18h，完成基质聚合反应。
3.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
引发剂的用量为功能单体、交联剂和致孔剂三者总质量的0.5-1.0％。
4.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
所述表面修饰反应过程为，在填充了基质材料的毛细管中通入0.02-0.2mol/L的N，N-二羧基甲基-L-赖氨酸溶液，溶液的pH值为8-10.0，在室温下反应0.5-2h，进行基质表面的化学修饰；整体柱基质通过表面修饰反应，使其表面键合上含羧基的功能团，以用于后续的铁离子固定。
5.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：
在整体柱基质通过表面修饰反应后，用甲酸体积分数为0.05-0.2％的溶液冲洗基质材料至流出液为酸性。
6.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：所述铁离子的固定化过程为，在填充了基质材料的毛细管中通入0.05-0.2mol/L的三价可溶性铁盐溶液，实现铁离子的固定化；在室温下，使溶液缓慢流过色谱柱，反应时间0.5-2h。
7.按照权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于：制备好的铁离子固定化亲和色谱整体柱用甲酸体积分数为0.05-0.2％的溶液冲洗，去除游离的铁离子。
8.按照权利要求6所述的制备方法，其特征在于：可溶性铁盐为三氯化铁、硝酸铁、硫酸铁或其他可溶于水的三价铁盐中的一种或多种。
9.按照权利要求1所述的制备方法，其特征在于：制备得到的铁离子固定化亲和色谱整体柱可用于在线或离线的磷酸化肽段选择性富集分离，使用后的铁离子固定化亲和色谱整体柱可通过重复权利要求6的铁离子的固定化过程实现再生。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910248846 CN102108095B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910248846 CN102108095B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102108095A true CN102108095A (zh) | 2011-06-29 |
| CN102108095B CN102108095B (zh) | 2013-10-16 |
Family
ID=44172389
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200910248846 Expired - Fee Related CN102108095B (zh) | 2009-12-28 | 2009-12-28 | 一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102108095B (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103877955A (zh) * | 2012-12-20 | 2014-06-25 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 基于亲水作用机理富集糖肽的酰胺型整体柱及制备和应用 |
| CN106823466A (zh) * | 2017-03-13 | 2017-06-13 | 福州大学 | 一种金属离子固定化改性硅胶整体柱及其制备方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101288844A (zh) * | 2007-04-20 | 2008-10-22 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种固定化金属的亲和色谱固定相及其制备方法 |
-
2009
- 2009-12-28 CN CN 200910248846 patent/CN102108095B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101288844A (zh) * | 2007-04-20 | 2008-10-22 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 一种固定化金属的亲和色谱固定相及其制备方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 张丽媛等: "新型固定化铁离子亲和色谱整体柱的制备及评价", 《分析化学》 * |
| 邵天梦等: "固定化金属离子亲和色谱法纯化猪铜锌超氧化物歧化酶", 《色谱》 * |
| 魏琪等: "固定化金属螯合亲和膜色谱柱制备及纯化铜锌超氧化物歧化酶的研究", 《色谱》 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103877955A (zh) * | 2012-12-20 | 2014-06-25 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 基于亲水作用机理富集糖肽的酰胺型整体柱及制备和应用 |
| CN103877955B (zh) * | 2012-12-20 | 2016-01-06 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 基于亲水作用机理富集糖肽的酰胺型整体柱及制备和应用 |
| CN106823466A (zh) * | 2017-03-13 | 2017-06-13 | 福州大学 | 一种金属离子固定化改性硅胶整体柱及其制备方法 |
| CN106823466B (zh) * | 2017-03-13 | 2019-04-02 | 福州大学 | 一种金属离子固定化改性硅胶整体柱及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102108095B (zh) | 2013-10-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103406109B (zh) | 一种可控、通用的定向表面印迹方法以及所得分子印迹聚合物的应用 | |
| CN109225171B (zh) | 一种表面离子印迹聚合物改性有机无机杂化整体柱的制备方法和应用 | |
| Wang et al. | Enhanced binding capacity of boronate affinity adsorbent via surface modification of silica by combination of atom transfer radical polymerization and chain-end functionalization for high-efficiency enrichment of cis-diol molecules | |
| Bie et al. | Preparation of salbutamol imprinted magnetic nanoparticles via boronate affinity oriented surface imprinting for the selective analysis of trace salbutamol residues | |
| CN102059103A (zh) | 一种亲水性的苯硼酸功能化多孔整体材料及其制法和应用 | |
| CN105056913B (zh) | 一种用于萃取磷酸肽的管内固相微萃取复合物柱的制备方法 | |
| CN103949227B (zh) | 一种外表面亲水性杂化复合固相萃取吸附剂的制备方法 | |
| CN101685051A (zh) | 一种富集磷酸肽或磷酸化蛋白质的开管毛细管柱及方法 | |
| CA3109058C (en) | Benzeneboronic acid solid-phase extraction column packing and preparation method thereof | |
| CN102108095B (zh) | 一种铁离子固定化亲和色谱整体柱的制备方法 | |
| CN101612555A (zh) | 一种整体分子印迹聚合物搅拌棒及其制备方法 | |
| Willie et al. | Immobilization of 8-hydroxyquinoline onto silicone tubing for the determination of trace elements in seawater using flow injection ICP-MS | |
| CN107297086B (zh) | 一种有机整体小柱的制备及有机整体小柱和应用 | |
| CN102872834B (zh) | 一种整体式多孔聚合物吸附萃取搅拌棒及其制备方法 | |
| CN112675825A (zh) | 一种高柱效附聚型离子色谱固定相的制备方法 | |
| Zhou et al. | Selective extraction and analysis of catecholamines in rat blood microdialysate by polymeric ionic liquid-diphenylboric acid-packed capillary column and fast separation in high-performance liquid chromatography-electrochemical detector | |
| CN103990298B (zh) | 一种外表面亲水性大孔有机-无机杂化整体柱的制备方法 | |
| CN101660999A (zh) | 一种基于整体材料富集的微量近红外光谱分析方法 | |
| CN114749221B (zh) | 一种蛋白质组学样品前处理装置及其制备方法与应用 | |
| CN108828114B (zh) | 一种固相微萃取-质谱联用在线富集检测烟草中烟碱类化合物的方法 | |
| CN112090411B (zh) | 一种用于分析磺胺类抗生素的磁性材料及磺胺类抗生素的检测方法 | |
| CN104237333A (zh) | 一种多氢键电化学传感器及其制备方法和在三聚氰胺检测中的应用 | |
| CN102114416A (zh) | 一种蛋白质分子印迹聚合物颗粒的制备方法 | |
| CN102744047A (zh) | 聚合物整体柱及其制备方法与应用 | |
| CN102389645A (zh) | 离子交换型固相萃取搅拌棒及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20131016 |