CN102106316A - 丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，尤其涉及培养过程中对虫卵的消毒以及幼虫的消毒。本发明所述的虫卵消毒方法是先将卵块浸入0.5-1％的亚硫酸钠溶液中摇晃3-5min，使粘着的卵块相互分离，过滤后再将虫卵浸入5-6％次氯酸钠溶液中消毒3-5min；幼虫消毒方法是采用0.3-0.5％碘伏溶液和0.1％新洁尔灭溶液分两步对幼虫进行消毒。本发明所述的方法对蝇卵的生命活力影响小，死亡率为0％，幼虫消毒作用迅速而持久，毒性低，受有机物影响小；既能保持虫体有效传代，又能使消毒后的丝光绿蝇幼虫保持活力，而且操作简单，容易掌握，适合大范围的推广应用。
Description
技术领域
本发明涉及一种昆虫的培养与昆虫活体的消毒方法，具体的说是一种丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法。
背景技术
临床上用于治疗感染创面的昆虫幼虫主要是丝光绿蝇的幼虫。丝光绿蝇别名绿头苍蝇，呈世界性分布。属双翅目，成蝇体长5mm～10mm。体色绿，带金属光泽，颊部银白色，中胸背板上的鬃毛发达，腋瓣上无毛。肩鬃后区小毛在6根以上，在额的最狭处。第五腹板茎部的长度大于侧叶长的1/2。肛尾叶后视端部向末端尖削。丝光绿蝇一生要经过卵、幼虫(蛆)、蛹、成虫(蝇)四个时期，其幼虫期可作为医用昆虫，具有食腐性，自然环境中繁殖生长能力很强，但在室内人工饲养、繁殖和消毒没有成熟的方法。目前有应用亚硫酸和甲醛联合对虫卵消毒，然后在无菌的环境下孵化，用消毒的食物饲养，并应用于临床，这样可以避免继发感染，但是应用亚硫酸和甲醛对虫卵消毒会导致虫卵死亡的几率增大，不利于稳定传代。也有应用3％煤酚皂溶液对虫卵进行消毒，并且无菌饲养传代，但是仍然有20-30％的死亡率。因此，目前临床上急需开发一种既能保持虫体有效传代，又能使消毒后的丝光绿蝇幼虫保持活力的制备方法。
参考文献
[1]Mumcuoglu KY.Clinical applications formaggots in wound care[J].Am J Clin Dermatol，2001，2：219-227.
[2]Sherman RA.Maggot versus conservative debridement therapy for the treatment of p ressure ulcers[J].Wound RepairRegen，2002，10：208-214.
[3]Smith KE，WallR.The use of carrion as breeding sites by the blowfly Lucilia sericata and other Calliphoridae[J].Med Vet Entmol，1997，11(1)：38-44.
[4]Amin AR，Shoukry A，Morsy TA，et al.Studies of wound myiasis among sheep and goats in North Sonai Governorate [J].J Egyp t SocParasitol，1997，27(3)：719-737.
[5]许兵红，陈正跃，艾予川.丝光绿蝇饲养初步研究[J].新乡医学院学报，1999，16(1)：30-31.
发明内容
本发明提供了一种丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，在室内条件下对丝光绿蝇进行人工饲养并有效传代，对虫卵和幼虫进行消毒，获得了具有生命活力的活体丝光绿蝇幼虫。
本发明的技术方案包括丝光绿蝇虫卵收集、虫卵消毒、幼虫饲养与传代、幼虫的选择与无菌处理，其具体步骤如下：
第一步、丝光绿蝇虫卵收集：
根据现有技术，本领域的技术人员熟知如何操作收集虫卵，本发明人建议收集丝光绿蝇在蓝点马鲛鱼(鲅鱼)鱼目中所产的虫卵；
第二步、虫卵消毒：
①将卵块浸入0.5-1％的亚硫酸钠溶液中摇晃3-5min，使粘着的卵块相互分离，避免在消毒过程中有害物质残留于卵块之间；
②在无菌条件下滤出液体，将虫卵浸入5-6％次氯酸钠溶液中消毒3-5min；
③虫卵用无菌生理盐水漂洗3-5次；
④无菌吸水纸吸干虫卵表面水分；
⑤取500ml无菌瓷罐作为养虫罐，罐中放入经过高温灭菌的鲤鱼鱼目研磨而成的鱼目粉50g，无菌蒸馏水40ml，作为饲料，将卵块接种入养虫罐中，每罐约接种虫卵300-500粒，再用无菌透气黑色棉布包扎罐口；
第三步、幼虫饲养与传代：
①饲养条件：丝光绿蝇饲养室的室内面积为10m×10m，室内温度保持22-25℃，空气湿度为50-55％；室内放置饲养笼，其大小为100cm×100cm×120cm，四面为纱窗，底面采用铁制，正面开口处用网布做成袖状，以便手伸入笼内换取材料；在蝇笼上方设置两个40瓦日光灯管，平行放置在饲养笼顶端，每日持续保持光照8-10小时，蝇笼中需要放置水盘(放入吸水的棉花或海棉，水面不要超过棉花以避免成虫溺毙)、成蝇食盘(配料鲤鱼鱼目粉20克)、养虫罐(鲤鱼鱼目粉50克、无菌蒸馏水40ml)；水盘及食盘每晚八点进行更换，养虫罐保持潮湿；
②饲养方法：发现有丝光绿蝇幼虫长成，需要每天更换饲料，将幼虫连同饲料倒入无菌盆中，幼虫有避光性，会渐渐潜到盆底，移走上面的饲料分离出幼虫，更换饲料；虫体化蛹前颜色开始变黄，将幼虫转移到装有无菌细沙的瓷罐(500ml)中，用无菌透气黑棉布扎紧瓶口；幼虫化蛹后，收集蝇蛹，置于蝇笼中，每笼置蛹500个，待蛹羽化成蝇后，丝光绿蝇第一次传代结束；每天察看蝇笼，若发现新生的虫卵，则将其放入新的养虫罐中，重复上述虫卵消毒、幼虫饲养和传代过程，每代需更换新的无菌饲养设备；连续培养三代，发现了人工无菌培养的丝光绿蝇从卵(1天)、幼虫(各虫龄期，5-7天)、蛹(7-8天)到成虫(13-14天)的时间规律及稳定传代特点；
第四步、幼虫的选择与无菌处理：
①丝光绿蝇幼虫的选择与虫龄观察：
丝光绿蝇幼虫有三个龄期：1龄幼虫体长1～3mm，仅有后气门；蜕皮后变为2龄幼虫，长3～5mm，有前气门，后气门有2裂；再次蜕皮即为3龄幼虫，长5～13mm，后气门3裂；鉴于幼虫各龄期的特点，3龄幼虫虫体较大，摄食和分泌能力较强，本制备方法选择在无菌环境下，培养的丝光绿蝇3龄幼虫；
②丝光绿蝇幼虫虫体消毒法：
I将在无菌环境下培养的3龄幼虫放在0.3-0.5％碘伏溶液中4-5min，然后用蒸馏水洗涤三遍，每遍2min；
II再将幼虫放入0.1％新洁尔灭溶液中4-6min，然后用蒸馏水洗涤三遍，每遍2min；
其中所有百分数为质量分数。
采用以上方法消毒后的幼虫均保持生命活力，随机选取虫体100条充分匀浆，浆液成分经细菌检验(平板培养法)和病毒学检验(酶联免疫吸附试验)，未见细菌和病毒生长(见表)。
表(丝光绿蝇幼虫细菌和病毒学检测)
本发明的优点和积极效果在于：
(1)以往方法应用亚硫酸和甲醛对蝇卵消毒会导致蝇卵死亡的几率增大，不利于稳定传代；应用3％煤酚皂溶液进行消毒，并且无菌饲养传代，此消毒方法对蝇卵的生命活力影响较小，但是仍然有20-30％的死亡率；采用5-6％次氯酸钠溶液消毒虫卵3-5min，对蝇卵的生命活力影响大大减小，死亡率为0％；
(2)以往方法应用鱼粉作为虫卵饲料，而本发明遵循了丝光绿蝇喜欢在鱼目中产卵的生活习性，在养虫罐中放入经过高温灭菌的鲤鱼鱼目研磨而成的鱼目粉作为饲料，鱼目粉增加了丝光绿蝇的进食能力和传代繁殖能力；
(3)以往方法采用甲醛、双氧水、稀盐酸三步联合消毒的方法，总共需要13-15min；而本发明采用碘伏和新洁尔灭两步消毒法，总共仅需要8-11min，在保证无菌及保持虫体活力的前提下，消毒步骤得到了简化，消毒时间降低了30％，使得本发明操作简单，容易掌握，适合大范围的推广应用，并且碘伏和新洁尔灭与甲醛、双氧水、稀盐酸相比，消毒作用迅速而持久，毒性低，受有机物影响小；
以上优点保证了本发明对幼虫虫体活力的影响比以往的方法更低，这为对幼虫虫体进行进一步应用和研究打下了良好的基础。
具体实施方式
以下用实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
1.丝光绿蝇虫卵收集：
将市售的蓝点马鲛鱼(鲅鱼)放在丝光绿蝇孽生的地方，收集在其鱼目中所产的卵块；
2.丝光绿蝇虫卵消毒：
①将卵块浸入0.5％的亚硫酸钠溶液中摇晃3min，使粘着的卵块相互分离，用镊子取出鱼目；
②无菌滤网滤出液体，将虫卵浸入5％次氯酸钠溶液中消毒3min，13倍显微镜观察虫卵全部存活；
③虫卵用无菌生理盐水漂洗3次；
④无菌吸水纸吸干虫卵表面水分；
⑤取500ml无菌瓷罐作为养虫罐，罐中放入经过高温灭菌的鲤鱼鱼目研磨而成的鱼目粉50g，无菌蒸馏水40ml，；将卵块接种入养虫罐中，每罐约接种虫卵300粒，再用无菌透气黑色棉布包扎罐口；
3.丝光绿蝇幼虫饲养与传代：
①饲养条件：丝光绿蝇饲养室的室内面积为10m×10m，将两个40瓦日光灯管平行放置在饲养笼顶端，每日持续保持光照8小时，室内温度保持22℃，空气湿度为50％；饲养笼用于饲养成蝇，饲养笼大小为100cm×100cm×120cm，四面为纱窗，底面采用铁制，正面开口处用网布做成袖状，以便手伸入笼内，换取材料；蝇笼中放置水盘(放入吸水的棉花或海棉，水面不要超过棉花以避免成虫溺毙)、成蝇食盘(配料鲤鱼鱼目粉20克)、养虫罐(鲤鱼鱼目粉50克、水40ml)；水盘及食盘每晚八点进行更换，养虫罐要保持潮湿；
②饲养方法：发现有丝光绿蝇幼虫长成，每天更换饲料，将幼虫连同饲料倒入无菌盆中，幼虫有避光性，渐渐潜到盆底，移走上面的饲料分离出幼虫，更换饲料；观察到幼虫虫体开始发黄时，将幼虫转移到装有无菌细沙的瓷罐(500ml)中，用无菌透气黑棉布扎紧瓶口；幼虫化蛹后，收集蝇蛹，置于蝇笼中，每笼置蛹500个，待蛹羽化成蝇，丝光绿蝇第一次传代结束；每天察看蝇笼，若发现新生的虫卵，则将其放入新的养虫罐中，重复上述虫卵消毒、幼虫饲养和传代过程，每代需更换新的无菌饲养设备；
4.丝光绿蝇幼虫的选择与无菌处理：
①丝光绿蝇幼虫的选择与虫龄观察：
丝光绿蝇幼虫有三个龄期：1龄幼虫体长1～3mm，仅有后气门；蜕皮后变为2龄幼虫，长3～5mm，有前气门，后气门有2裂；再次蜕皮即为3龄幼虫，长5～13mm，后气门3裂；本制备方法选择在无菌环境下培养的丝光绿蝇3龄幼虫；
②丝光绿蝇幼虫虫体消毒法：
I将3龄幼虫放在0.3％碘伏溶液中4min，然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；
II再将幼虫放入0.1％新洁尔灭溶液中4min；然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；采用上述方法消毒后的幼虫均保持生命活力，随机选取虫体100条充分匀浆，浆液成分经细菌检验(平板培养法)和病毒学检验(酶联免疫吸附试验)，未见细菌和病毒生长(见表)。
表丝光绿蝇幼虫细菌和病毒学检测
实施例2
1.丝光绿蝇虫卵收集：
将市售的蓝点马鲛鱼(鲅鱼)放在丝光绿蝇孽生的地方，收集在其鱼目中所产的卵块；
2.丝光绿蝇虫卵消毒：
①将卵块浸入1％的亚硫酸钠溶液中摇晃5min，使粘着的卵块相互分离，用镊子取出鱼目；
②无菌滤网滤出液体，将虫卵浸入6％次氯酸钠溶液中消毒5min，13倍显微镜观察虫卵全部存活；
③虫卵用无菌生理盐水漂洗5次；
④无菌吸水纸吸干虫卵表面水分；
⑤取500ml无菌瓷罐作为养虫罐，罐中放入经过高温灭菌的鲤鱼鱼目研磨而成的鱼目粉50g，无菌蒸馏水40ml，将卵块接种入养虫罐中，每罐约接种虫卵500粒，再用无菌透气黑色棉布包扎罐口；
3.丝光绿蝇幼虫饲养与传代：
①饲养条件：丝光绿蝇饲养室的室内面积为10m×10m，将两个40瓦日光灯管平行放置在饲养笼顶端，每日持续保持光照8小时，室内温度保持22℃，空气湿度为50％；饲养笼用于饲养成蝇，饲养笼大小为100cm×100cm×120cm，四面为纱窗，底面采用铁制，正面开口处用网布做成袖状，以便手伸入笼内，换取材料；蝇笼中放置水盘(放入吸水的棉花或海棉，水面不要超过棉花以避免成虫溺毙)、成蝇食盘(配料鲤鱼鱼目粉20克)、养虫罐(鲤鱼鱼目粉50克、水40ml)；水盘及食盘每晚八点进行更换，养虫罐要保持潮湿；
②饲养方法：发现有丝光绿蝇幼虫长成，每天更换饲料，将幼虫连同饲料倒入无菌盆中，幼虫有避光性，渐渐潜到盆底，移走上面的饲料分离出幼虫，更换饲料；观察到幼虫虫体开始发黄时，将幼虫转移到装有无菌细沙的瓷罐(500ml)中，用无菌透气黑棉布扎紧瓶口；幼虫化蛹后，收集蝇蛹，置于蝇笼中，每笼置蛹500个，待蛹羽化成蝇，丝光绿蝇第一次传代结束；每天察看蝇笼，若发现新生的虫卵，则将其放入新的养虫罐中，重复上述虫卵消毒、幼虫饲养和传代过程，每代需更换新的无菌饲养设备；
4.丝光绿蝇幼虫的选择与无菌处理：
①丝光绿蝇幼虫的选择与虫龄观察：
丝光绿蝇幼虫有三个龄期：1龄幼虫体长1～3mm，仅有后气门；蜕皮后变为2龄幼虫，长3～5mm，有前气门，后气门有2裂；再次蜕皮即为3龄幼虫，长5～13mm，后气门3裂；本制备方法选择在无菌环境下培养的丝光绿蝇3龄幼虫；
②丝光绿蝇幼虫虫体消毒法：
I将3龄幼虫放在0.5％碘伏溶液中5min，然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；
II再将幼虫放入0.1％新洁尔灭溶液中6min，然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；采用以上方法消毒后的幼虫均保持生命活力，随机选取虫体100条充分匀浆，浆液成分经细菌检验(平板培养法)和病毒学检验(酶联免疫吸附试验)，未见细菌和病毒生长(见表)。
表丝光绿蝇幼虫细菌和病毒学检测
实施例3
1.丝光绿蝇虫卵收集：
将市售的蓝点马鲛鱼(鲅鱼)放在丝光绿蝇孽生的地方，收集在其鱼目中所产的卵块；
2.丝光绿蝇虫卵消毒：
①将卵块浸入0.8％的亚硫酸钠溶液中摇晃4min，使粘着的卵块相互分离，用镊子取出鱼目；
②无菌滤网滤出液体，将虫卵浸入5.5％次氯酸钠溶液中消毒4min，13倍显微镜观察虫卵全部存活；
③虫卵用无菌生理盐水漂洗4次；
④无菌吸水纸吸干虫卵表面水分；
⑤取500ml无菌瓷罐作为养虫罐，罐中放入经过高温灭菌的鲤鱼鱼目研磨而成的鱼目粉50g，无菌蒸馏水40ml；将卵块接种入养虫罐中，每罐约接种虫卵400粒，再用无菌透气黑色棉布包扎罐口；
3.丝光绿蝇幼虫饲养与传代：
①饲养条件：丝光绿蝇饲养室的室内面积为10m×10m，将两个40瓦日光灯管平行放置在饲养笼顶端，每日持续保持光照8小时，室内温度保持22℃，空气湿度为50％；饲养笼用于饲养成蝇，饲养笼大小为100cm×100cm×120cm，四面为纱窗，底面采用铁制，正面开口处用网布做成袖状，以便手伸入笼内，换取材料；蝇笼中放置水盘(放入吸水的棉花或海棉，水面不要超过棉花以避免成虫溺毙)、成蝇食盘(配料鲤鱼鱼目粉20克)、养虫罐(鲤鱼鱼目粉50克、水40ml)；水盘及食盘每晚八点进行更换，养虫罐要保持潮湿；
②饲养方法：发现有丝光绿蝇幼虫长成，每天更换饲料，将幼虫连同饲料倒入无菌盆中，幼虫有避光性，渐渐潜到盆底，移走上面的饲料分离出幼虫，更换饲料；观察到幼虫虫体开始发黄时，将幼虫转移到装有无菌细沙的瓷罐(500ml)中，用无菌透气黑棉布扎紧瓶口；幼虫化蛹后，收集蝇蛹，置于蝇笼中，每笼置蛹500个，待蛹羽化成蝇；丝光绿蝇第一次传代结束；每天察看蝇笼，若发现新生的虫卵，则将其放入新的养虫罐中，重复上述虫卵消毒、幼虫饲养和传代过程，每代需更换新的无菌饲养设备；
4.丝光绿蝇幼虫的选择与无菌处理：
①丝光绿蝇幼虫的选择与虫龄观察：
丝光绿蝇幼虫有三个龄期：1龄幼虫体长1～3mm，仅有后气门；蜕皮后变为2龄幼虫，长3～5mm，有前气门，后气门有2裂；再次蜕皮即为3龄幼虫，长5～13mm，后气门3裂；本制备方法选择在无菌环境下培养的丝光绿蝇3龄幼虫；
②丝光绿蝇幼虫虫体消毒法：
I将3龄幼虫放在0.4％碘伏溶液中4.5min，，然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；
II再将幼虫放入0.1％新洁尔灭溶液中5min；然后用蒸馏水洗涤幼虫2min；采用上述方法消毒后的幼虫均保持生命活力，随机选取虫体100条充分匀浆，浆液成分经细菌检验(平板培养法)和病毒学检验(酶联免疫吸附试验)，未见细菌和病毒生长(见表)。
表丝光绿蝇幼虫细菌和病毒学检测
Claims (5)
1.丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，包括丝光绿蝇虫卵收集、虫卵消毒、幼虫饲养与传代、幼虫的选择与无菌处理；其特征在于虫卵消毒的方法是：
①将卵块浸入0.5-1％的亚硫酸钠溶液中摇晃3-5min，使粘着的卵块相互分离；
②在无菌条件下滤出液体，将虫卵浸入5-6％次氯酸钠溶液中消毒3-5min；
③虫卵用无菌生理盐水漂洗3-5次；
④无菌吸水纸吸干虫卵表面水分。
2.根据权利要求1所述的丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，其特征在于幼虫的选择与无菌处理方法是：
①将在无菌环境下培养的3龄幼虫放在0.3-0.5％碘伏溶液中4-5min，然后用蒸馏水洗涤三遍，每遍2min；
②再将幼虫放入0.1％新洁尔灭溶液中4-6min，然后用蒸馏水洗涤三遍，每遍2min。
3.根据权利要求1或2所述的丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，其特征在于所收集的虫卵是丝光绿蝇在蓝点马鲛鱼鱼目中所产的卵。
4.根据权利要求1或2所述的丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，其特征在于所用饲料为鲤鱼鱼目粉。
5.根据权利要求1或2所述的丝光绿蝇幼虫的培养与消毒方法，其特征在于所述的幼虫的饲养条件是每日光照8-10小时，室内温度22-25℃，空气湿度50-55％。
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| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102106316B (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102550495A (zh) * | 2012-03-05 | 2012-07-11 | 厦门联南强生物环保科技有限公司 | 苍蝇蝇种的养殖驯化方法 |
| CN103563857A (zh) * | 2013-11-07 | 2014-02-12 | 中国烟草总公司广东省公司 | 一种耐烟碱家蝇种的筛选方法 |
| CN104799125A (zh) * | 2015-05-20 | 2015-07-29 | 乐山师范学院 | 一种丝光绿蝇饲料及其制作方法 |
| CN104823882A (zh) * | 2015-04-09 | 2015-08-12 | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 | 一种分散福寿螺卵块的方法 |
| CN111386972A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-07-10 | 河南科技学院 | 一种食用菌菌棒的接种方法 |
| CN113243339A (zh) * | 2021-04-28 | 2021-08-13 | 华南师范大学 | 一种简便高效的无菌果蝇制备方法 |
-
2010
- 2010-12-29 CN CN201010611090A patent/CN102106316B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 《International Journal of Dematology》 19990831 Kosta Y. Mumcuoglu etc. Maggot therapy for the treatment of intractable wounds 623-627 全文 第38卷, 第8期 2 * |
| 《Medical and Veterinary Entomology，Second Edition》 20090508 Gary Mullen, Lance Durden Clinical Use of Maggot Academic Press 325 1-5 , 1 * |
| 《中国中药杂志》 20091231 张振，王寿宇，刁云鹏，张厚利，黄珊珊，吕德成 五谷虫及活体蛆虫治疗慢性感染创面的研究进展 3162-3164 全文 第34卷, 第24期 2 * |
| 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 20090215 王寿宇 中药五谷虫对感染创面抗菌作用的临床与分子机制研究 14-18 1,3,5 , 第2期 2 * |
Cited By (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102550495A (zh) * | 2012-03-05 | 2012-07-11 | 厦门联南强生物环保科技有限公司 | 苍蝇蝇种的养殖驯化方法 |
| CN103563857A (zh) * | 2013-11-07 | 2014-02-12 | 中国烟草总公司广东省公司 | 一种耐烟碱家蝇种的筛选方法 |
| CN103563857B (zh) * | 2013-11-07 | 2015-11-18 | 中国烟草总公司广东省公司 | 一种耐烟碱家蝇种的筛选方法 |
| CN104823882A (zh) * | 2015-04-09 | 2015-08-12 | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 | 一种分散福寿螺卵块的方法 |
| CN104823882B (zh) * | 2015-04-09 | 2017-08-01 | 中国水产科学研究院珠江水产研究所 | 一种分散福寿螺卵块的方法 |
| CN104799125A (zh) * | 2015-05-20 | 2015-07-29 | 乐山师范学院 | 一种丝光绿蝇饲料及其制作方法 |
| CN104799125B (zh) * | 2015-05-20 | 2018-04-13 | 乐山师范学院 | 一种丝光绿蝇饲料及其制作方法 |
| CN111386972A (zh) * | 2020-04-27 | 2020-07-10 | 河南科技学院 | 一种食用菌菌棒的接种方法 |
| CN113243339A (zh) * | 2021-04-28 | 2021-08-13 | 华南师范大学 | 一种简便高效的无菌果蝇制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102106316B (zh) | 2012-10-03 |
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