CN102093989A - 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 - Google Patents
微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102093989A CN102093989A CN 201010162658 CN201010162658A CN102093989A CN 102093989 A CN102093989 A CN 102093989A CN 201010162658 CN201010162658 CN 201010162658 CN 201010162658 A CN201010162658 A CN 201010162658A CN 102093989 A CN102093989 A CN 102093989A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- liquid
- low temperature
- enzyme
- temperature
- low
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 13
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 17
- 229940111205 diastase Drugs 0.000 title abstract 5
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 title abstract 4
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 title abstract 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 74
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 74
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 48
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 25
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 19
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 11
- 238000009472 formulation Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 7
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims abstract description 6
- 230000002478 diastatic effect Effects 0.000 claims description 46
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 claims description 23
- 239000008107 starch Substances 0.000 claims description 23
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 claims description 19
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 17
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 14
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 11
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 11
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 11
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 11
- 230000032696 parturition Effects 0.000 claims description 9
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 8
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 8
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 8
- 239000008399 tap water Substances 0.000 claims description 8
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 claims description 8
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims description 7
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 7
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 claims description 5
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 claims description 5
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 5
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 claims description 5
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 5
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- 241000933979 bacterium 14 Species 0.000 claims description 2
- 238000003825 pressing Methods 0.000 claims description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract description 7
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 abstract 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 abstract 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 abstract 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 abstract 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 abstract 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 abstract 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 9
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 238000005360 mashing Methods 0.000 description 6
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 5
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 5
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 4
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 3
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 3
- 238000011177 media preparation Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 238000004134 energy conservation Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 240000003183 Manihot esculenta Species 0.000 description 1
- 235000016735 Manihot esculenta subsp esculenta Nutrition 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000046109 Sorghum vulgare var. nervosum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明所述的一种微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法是将产生生淀粉糖化酶的微生物逐级低温驯化，使其在低温环境中生长良好；将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在14～20℃逐级扩大培养，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在14～20℃培养72～144h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集的液体即为粗酶液；根据不同需要和使用对象不同，将粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。
Description
技术领域
本发明涉及微生物学、酶工程、发酵工程、生物化学等领域，具体涉及一种低温生淀粉糖化酶微生物发酵生产方法。该发明生产的低温生淀粉糖化酶主要应用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织工业、医药行业以及其它淀粉糖化酶应用行业。可以提高原料的利用率、转化率和生产率，降低生产成本，改善并提高产品质量。
背景技术
生淀粉糖化酶是指能将不经过蒸煮糊化的生淀粉直接水解成葡萄糖的酶类，其作用特点是能够将淀粉糖化传统工艺中的糊化、液化、糖化三步合并为一步(王岁楼，食品与发酵工业，1988)。生淀粉糖化酶作为生物制剂，已经广泛应用于粮食加工、食品工业、酿造、发酵、纺织工业、医药行业以及其它淀粉糖化酶应用行业。国内外对生淀粉糖化酶进行了大量的工作，目前应用的生淀粉糖化酶主要为中温和高温生淀粉糖化酶，研究主要集中在中温生淀粉糖化酶高效菌株选育、发酵条件优化等(Haiyan Sun，et al.Appl Biochem Biotechnol，2009)。有关低温生淀粉糖化酶的研究及其产业化、规模化生产和应用还未见报道。低温生淀粉糖化酶与高温、中温生淀粉糖化酶相比具有很大的应用优势，因为低温生淀粉糖化酶在低温条件下具有高酶活力及高催化效率；可减少加工工艺，缩短加工过程的时间并省却昂贵的加热或冷却费用；在节能方面有相当大的优势；经过温和的热处理可使低温酶的活力丧失；低温或适温处理有助于提高产品品质和质量(朱非等，微生物学报，2002)，低温生淀粉糖化酶上述特性有助于其推广和应用。低温生淀粉糖化酶的应用将对传统的粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品、医药等领域产生深远的影响，利用微生物发酵生产的低温生淀粉糖化酶，按原料重量0.1‰～0.5‰的量添加于生料发酵、食品加工和多孔淀粉生产等领域中，在8～20℃处理0.5～1.5h，可以提高原料的转化率13.5％～22.6％，降低了生产成本，改善并提高产品质量。可以从根本上摆脱中温、高温酶的加热、冷却设备和工艺。低温生淀粉糖化酶将为人类摆脱发展中所面临的资源、能源危机以及环境污染等问题提供现实的机遇。低温生淀粉糖化酶具有非常广阔的开发潜力和应用前景。
发明内容
本发明的目的是提供一种微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法，该方法主要是微生物经过低温驯化后，在14～20℃液体发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法，这种生产方法获得的低温生淀粉糖化酶粗酶液活性可以达到140U/mL，如再经过分离和纯化，可以得到不同浓度和纯度的酶制剂。当该酶制剂活性为1000U/mL或1000U/g，0.1‰～0.5‰的量应用于生料发酵、食品加工和多孔淀粉生产等领域中，在8～20℃处理0.5～1.5h，可以提高原料的转化率13.5％～22.6％。该酶制剂应用操作简单、方便、快捷、成本低。可以从根本上避免中温、高温酶的加热、冷却设备和工艺。
本发明所述的一种微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法具体包括以下步骤：
(1)将产生生淀粉糖化酶的微生物逐级低温驯化，驯化温度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低温环境中生长良好；
(2)按常规方法将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在14～20℃逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；
(3)将液体一级种子或二级种子，按发酵液体积的3～9％接种量接入产酶培养基中，在14～20℃培养72～144h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；
(4)将(3)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集到的液体即为粗酶液；
(5)根据不同需要和使用对象不同，将(4)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。
本发明中使用的菌种来源于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，初期活化和生长条件按菌种保藏单位提供的说明进行。生淀粉糖化酶产生菌(例如，CGMCC菌种编号：1.2323T或1.447或1.504或3.2790等)，菌株先活化，再经过逐级低温驯化，进行低温生淀粉糖化酶发酵生产时按本发明方法进行培养。低温驯化后的菌株斜面在4℃环境中可保存2个月，用25～45％甘油制成的菌悬液在零下80℃条件下可以长期保藏。
具体实施方式：
实施例一：
(1)、培养基制备
①菌种活化培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，NaCl 5.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值7.0，121℃高压蒸气灭菌30min。
②菌种低温驯化培养基：生淀粉0.5～5.0g，蛋白胨0.1～2.0g，牛肉膏0.1～2.0g，NH4NO30.5～5.0g，K2HPO40.5～5.0g，MgSO4.7H2O 0.1～2.0g，FeSO4.7H2O 0.01～0.5g，KCl 0.1～2.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
③液体种子培养基：蛋白胨5.0～20.0g，酵母膏5.0～20.0g，葡萄糖0.5～2.0g，K2HPO41.0～5.0g，自来水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。
④产酶培养基：玉米生淀粉30.0～100.0g，牛肉膏10.0～20.0g，NaCl 3.0～5.0g，FeSO4·7H2O 0.01～0.2g，K2HPO43.0～5.0g，MgSO4·7H2O 0.2～2.0g，自来水1.0L，pH值6.0，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生玉米淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
(2)将产生生淀粉糖化酶的菌种，按中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)提供的菌株说明进行初始活化；
(3)将(2)活化好的菌种逐级低温驯化，驯化温度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低温环境中生长良好；
(4)按常规方法将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在14～16℃培养48～72h，按5％的接种量进行逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；
(5)将(4)制备的二级种子按发酵液体积3～5％的接种量接入10L的产酶培养基中，在14～16℃培养120～144h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；
(6)将(5)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集到的液体即为粗酶液；
(7)根据不同需要和使用对象不同，将(6)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的低温生淀粉糖化酶制剂。
实施例二：
(1)、培养基制备
①菌种活化培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，NaCl 5.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值7.0，121℃高压蒸气灭菌30min。
②菌种低温驯化培养基：生淀粉0.5～5.0g，蛋白胨0.1～2.0g，牛肉膏0.1～2.0g，NH4NO30.5～5.0g，K2HPO40.5～5.0g，MgSO4.7H2O 0.1～2.0g，FeSO4.7H2O 0.01～0.5g，KCl 0.1～2.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
③液体种子培养基：蛋白胨5.0～20.0g，酵母膏5.0～20.0g，葡萄糖0.5～2.0g，K2HPO41.0～5.0g，自来水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。
④产酶培养基：玉米生淀粉30.0～100.0g，牛肉膏10.0～20.0g，NaCl 3.0～5.0g，FeSO4·7H2O 0.01～0.2g，K2HPO43.0～5.0g，MgSO4·7H2O 0.2～2.0g，自来水1.0L，pH值6.0，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生玉米淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
(2)将产生生淀粉糖化酶的菌种，按中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)提供的菌株说明进行初始活化；
(3)将(2)活化好的菌种逐级低温驯化，驯化温度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低温环境中生长良好；
(4)按常规方法将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在16～18℃培养48～72h，按5％的接种量进行逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；
(5)将(4)制备的二级种子按发酵液体积5～7％的接种量接入50L的产酶培养基中，在16～18℃培养96～120h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；
(6)将(5)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集到的液体即为粗酶液；
(7)根据不同需要和使用对象不同，将(6)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的低温生淀粉糖化酶制剂。
实施例三：
(1)、培养基制备
①菌种活化培养基：蛋白胨10.0g，牛肉膏3.0g，NaCl 5.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值7.0，121℃高压蒸气灭菌30min。
②菌种低温驯化培养基：生淀粉0.5～5.0g，蛋白胨0.1～2.0g，牛肉膏0.1～2.0g，NH4NO30.5～5.0g，K2HPO40.5～5.0g，MgSO4.7H2O 0.1～2.0g，FeSO4.7H2O 0.01～0.5g，KCl 0.1～2.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
③液体种子培养基：蛋白胨5.0～20.0g，酵母膏5.0～20.0g，葡萄糖0.5～2.0g，K2HPO41.0～5.0g，自来水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。
④产酶培养基：玉米生淀粉30.0～100.0g，牛肉膏10.0～20.0g，NaCl 3.0～5.0g，FeSO4·7H2O 0.01～0.2g，K2HPO43.0～5.0g，MgSO4·7H2O 0.2～2.0g，自来水1.0L，pH值6.0，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生玉米淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
(2)将产生生淀粉糖化酶的菌种，按中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)提供的菌株说明进行初始活化；
(3)将(2)活化好的菌种逐级低温驯化，驯化温度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低温环境中生长良好；
(4)按常规方法将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在18～20℃培养48～72h，按5％的接种量进行逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；
(5)将(4)制备的二级种子按发酵液体积7～9％的接种量接入100L的产酶培养基中，在18～20℃培养72～96h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；
(6)将(5)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集到的液体即为粗酶液；
(7)根据不同需要和使用对象不同，将(6)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的低温生淀粉糖化酶制剂。
实施例四：
按实施例一、二和三方法生产的低温生淀粉糖化酶制剂，平均酶活性为1000U/mL，将活性为1000U/mL或1000U/g的低温生淀粉糖化酶制剂，按原料重量0.1‰～0.5‰的量添加于生料发酵、食品加工和多孔淀粉生产等领域中，在8～20℃处理0.5～1.5h，可以提高原料的利用率、转化率和生产率，降低生产成本，改善并提高产品质量。低温生淀粉糖化酶应用部分实验结果见下表。
| 实验物料 | 低温生淀粉糖化酶添加量(‰) | 处理时间(h) | 转化率(％) | 处理温度(℃) |
| 玉米生淀粉 | 0.1～0.5 | 1.5 | +15.8 | 8～20 |
| 小麦生淀粉 | 0.1～0.5 | 1.2 | +16.4 | 8～20 |
| 高粱生淀粉 | 0.1～0.5 | 1 | +13.5 | 8～20 |
| 木薯淀粉 | 0.1～0.5 | 0.5 | +14.6 | 8～20 |
| 大麦生淀粉 | 0.1～0.5 | 0.5 | +15.1 | 8～20 |
| 马铃薯生淀粉 | 0.1～0.5 | 0.5 | +13.8 | 8～20 |
| 大米生淀粉 | 0.1～0.5 | 1.5 | +22.6 | 8～20 |
实验结果表明：低温生淀粉糖化酶应用于生料发酵、食品加工和多孔淀粉生产等领域中，可以提高原料的利用率、转化率和生产率，降低生产成本，改善并提高产品质量；同时也说明低温生淀粉糖化酶在低温下具有高酶活力及高催化效率，可大大缩短处理过程的时间并省却昂贵的加热或冷却费用；在节能方面有相当大的优势；该酶制剂应用操作简单、方便、快捷、成本低；可以从根本上避免中温、高温酶的加热、冷却设备和工艺。
Claims (2)
1.一种微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法，其包括以下步骤：
(1)将产生生淀粉糖化酶的微生物逐级低温驯化，驯化温度由高到低，25℃→22℃→20℃→18℃→16℃→14℃，使其在低温环境中生长良好；
(2)按常规方法将低温驯化后的生淀粉糖化酶产生菌在14～20℃逐级扩大培养，制备成液体一级种子和二级种子；
(3)将液体一级种子或二级种子，按发酵液体积的3～9％接种量接入液体发酵培养基中，在14～20℃培养72～144h时，即微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶结束；
(4)将(3)的发酵液在4,000～8,000rpm离心收集液体，收集到的液体即为粗酶液；
(5)根据不同需要和使用对象不同，将(4)得到的粗酶液进一步浓缩、分离纯化，制备成不同活性、纯度和剂型的酶制剂。
2.根据权利要求1所述的方法，其中菌种低温驯化培养基、液体种子培养基、产酶培养基分别为：
(1)菌种低温驯化培养基：生淀粉0.5～5.0g，蛋白胨0.1～2.0g，牛肉膏0.1～2.0g，NH4NO3 0.5～5.0g，K2HPO4 0.5～5.0g，MgSO4.7H2O 0.1～2.0g，FeSO4.7H2O 0.01～0.5g，KCl 0.1～2.0g，琼脂20.0g，蒸馏水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
(2)液体种子培养基：蛋白胨5.0～20.0g，酵母膏5.0～20.0g，葡萄糖0.5～2.0g，K2HPO4 1.0～5.0g，自来水1.0L，pH值自然，121℃高压蒸气灭菌30min。
(3)产酶培养基：玉米生淀粉30.0～100.0g，牛肉膏10.0～20.0g，NaCl 3.0～5.0g，FeSO4·7H2O 0.01～0.2g，K2HPO4 3.0～5.0g，MgSO4·7H2O 0.2～2.0g，自来水1.0L，pH值6.0，121℃高压蒸气灭菌30min。其中生玉米淀粉在105℃下干热灭菌2h，然后在常温下无菌操作加入。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 201010162658 CN102093989B (zh) | 2009-12-11 | 2010-04-09 | 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910220658.2 | 2009-12-11 | ||
| CN200910220658 | 2009-12-11 | ||
| CN 201010162658 CN102093989B (zh) | 2009-12-11 | 2010-04-09 | 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102093989A true CN102093989A (zh) | 2011-06-15 |
| CN102093989B CN102093989B (zh) | 2013-03-20 |
Family
ID=44127256
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 201010162658 Expired - Fee Related CN102093989B (zh) | 2009-12-11 | 2010-04-09 | 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102093989B (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103060246A (zh) * | 2013-01-23 | 2013-04-24 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种筛选产生淀粉糖化酶菌株的方法 |
| CN104630165A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-20 | 大连大学 | 微生物发酵生产低温脂肪氧合酶的方法 |
| CN105925594A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-09-07 | 广西大学 | 生淀粉糖化酶及其制备方法与其在生淀粉水解和生料同步糖化发酵产酒精中的应用 |
| CN112391369A (zh) * | 2020-11-24 | 2021-02-23 | 吉林中粮生化有限公司 | 一种显著提升糖化效果的复配糖化酶及制备方法和用途 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103865901B (zh) * | 2014-04-08 | 2015-10-14 | 大连工业大学 | 一种糖化酶的发酵培养基及其发酵方法 |
-
2010
- 2010-04-09 CN CN 201010162658 patent/CN102093989B/zh not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（硕士）工程科技I辑》 20060515 肖长清 生淀粉糖化酶产生菌的分离筛选及其产酶条件 B018-16 1-2 , * |
| 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（硕士）工程科技I辑》 20090315 罗军侠 耐酸生淀粉糖化酶的初步研究 B018-57 1-2 , * |
| 《食品科学》 20011031 郭爱莲等 生淀粉糖化酶的菌种筛选及酶学研究 45-48 1-2 第22卷, 第10期 * |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103060246A (zh) * | 2013-01-23 | 2013-04-24 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种筛选产生淀粉糖化酶菌株的方法 |
| CN104630165A (zh) * | 2015-02-16 | 2015-05-20 | 大连大学 | 微生物发酵生产低温脂肪氧合酶的方法 |
| CN105925594A (zh) * | 2016-06-13 | 2016-09-07 | 广西大学 | 生淀粉糖化酶及其制备方法与其在生淀粉水解和生料同步糖化发酵产酒精中的应用 |
| CN112391369A (zh) * | 2020-11-24 | 2021-02-23 | 吉林中粮生化有限公司 | 一种显著提升糖化效果的复配糖化酶及制备方法和用途 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN102093989B (zh) | 2013-03-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN1807610B (zh) | 微生物发酵生产低温纤维素酶的方法 | |
| CN102093987B (zh) | 微生物发酵生产低温植酸酶的方法 | |
| CN102093988B (zh) | 微生物发酵生产低温脂肪酶的方法 | |
| Carta et al. | Production of fumaric acid by fermentation of enzymatic hydrolysates derived from cassava bagasse | |
| Ge et al. | Improvement of l-lactic acid production from Jerusalem artichoke tubers by mixed culture of Aspergillus niger and Lactobacillus sp. | |
| Zhang et al. | Starch saccharification and fermentation of uncooked sweet potato roots for fuel ethanol production | |
| Ma et al. | The utilization of acid-tolerant bacteria on ethanol production from kitchen garbage | |
| CN104630166A (zh) | 微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法 | |
| CN102093989B (zh) | 微生物发酵生产低温生淀粉糖化酶的方法 | |
| CN105154358A (zh) | 一种芽孢杆菌及其同步糖化发酵生产l-乳酸的方法 | |
| CN104630167A (zh) | 海洋微生物发酵生产低温葡萄糖氧化酶的方法 | |
| CN102093990B (zh) | 微生物发酵生产低温淀粉酶的方法 | |
| CN106754411A (zh) | 一株高产β‑D‑呋喃果糖苷酶的黑曲霉菌株及其液态发酵产酶方法 | |
| CN102559802B (zh) | 一种培养基发酵高产银耳多糖的方法 | |
| CN102093992B (zh) | 微生物发酵生产低温蛋白酶的方法 | |
| CN103045487B (zh) | 一株生产柠檬酸的菌株及其发酵生产柠檬酸的方法 | |
| CN104630195A (zh) | 海洋微生物发酵生产低温γ-内酰胺酶的方法 | |
| CN111394397A (zh) | 一种利用餐厨垃圾发酵生产己酸的方法 | |
| CN101570745A (zh) | 乳糖酶的制备工艺 | |
| CN102653746A (zh) | 微生物发酵生产低温β-半乳糖苷酶的方法 | |
| CN106754486A (zh) | 一株高产海藻糖合酶的假单胞菌及其发酵产酶方法 | |
| CN102653749A (zh) | 微生物发酵生产低温壳聚糖酶的方法 | |
| CN106754829A (zh) | 一种利用芽孢杆菌hs17发酵生产壳聚糖酶的方法及其应用 | |
| CN107058449A (zh) | 一种餐厨垃圾解淀粉芽孢杆菌与鼠李糖乳杆菌混合发酵产乳酸的方法 | |
| CN102766656A (zh) | 一种利用甘蔗渣廉价制备微生物絮凝剂的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20200119 Address after: 553400 e-commerce operation center, South Ring Road, Liuzhi special district, Liupanshui City, Guizhou Province Patentee after: Guizhou Zhang Jiang Industrial Co.,Ltd. Address before: 116622 Dalian economic and Technological Development Zone, Liaoning, Dalian, Dalian University Patentee before: Dalian University |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130320 |