发明内容
本发明的目的,就是针对目前大獭蛤人工育苗方法空白的现状,提供一种工厂化育苗方式以获取大批量优质受精卵,进而培育出大批量大獭蛤人工种苗的育苗方法。
本发明目的的实现是因为采取了以下技术方案,大獭蛤的人工育苗方法,包括以下步骤:
1.亲贝的选择及培育:亲贝一般选择体表光滑无损伤,健康强壮,水管及斧足部伸缩有力,规格为16-20个/公斤的成年贝。采捕回来后用5ppm的高锰酸钾海水溶液浸泡5-30分钟进行体表消毒后置于亲贝培育框中放入亲贝培养池,培养池水深1-3米,亲贝培育密度控制在每立方米水体30-40个。亲贝培养期间控制海水温度及盐度,采取升降式悬浮吊养方式,白天把亲贝培育框沉降至育苗池底部,夜晚再升上来悬浮于水面,每日吸污换水1-2次,换水量40%-50%,投喂优质单胞藻饵料,投喂量是在每10立方米培育水体中投放3-30万个细胞/毫升的单胞藻饵料300-500升,如此强化培养5~7天;
2.人工授精:取上述培养后的亲贝,剖开分出雌、雄亲贝,按雄贝比雌贝1∶5-10的比例,分别从贝中取出精子和卵子,把卵子细胞放入浓度50-90ppm的含氨海水中,静置激化10-30分钟,将两者混合均匀进行人工授精,由于大獭蛤受精卵为沉性卵,可待全部卵子受精后,去除上清液,收集沉入底部的优质受精卵;
3.人工孵化:在孵化池中加入消毒海水,控制孵化水温及孵化海水盐度,按每毫升海水分布10-15个受精卵的密度,把优质受精卵放入孵化池中进行集中孵化,通过微充气使受精卵处于半悬浮的运动状态,经过30-40分钟孵化分裂为二细胞,5-7个小时进入多细胞期,8-10个小时原肠腔基本形成,12-14小时单轮幼虫出现,此时幼虫开始慢慢旋转上升,至18-22小时发育成直线绞合幼虫即“D”型幼虫;
4.幼体选优:大部分大獭蛤受精卵经过18-22小时的人工孵化,都能发育成直线绞合幼虫即“D”型幼虫,并出现上浮集群现象,而那些先天不足幼虫大都未能上浮而暂时停留在孵化池的中下层,此时用300目的筛绢网袋来收集优质幼虫;
5.幼体培育:将优质幼虫按前期3-5个/毫升海水的密度放入育苗池中进行人工培育,采取全程避光培育的方式进行,培育期间杜绝一切光源,在幼虫生长到后期,体长达到120-150微米时进行二次分池,控制密度在0.5-1.5个/毫升海水,培育期间每天1-3次投喂单胞藻饵料,投喂量是在每10立方米培育水体中投放3-30万个细胞/毫升的单胞藻饵料50-500升,培育期控制水温及盐度,培育过程连续常规充气增氧,幼虫进入育苗池70-80小时开始换水,日换水两次,每次换水量是20%-50%,经过8-10天的培育,幼虫体长达到300微米左右时可见棒状足在两壳缘间伸缩,此时投放附着基诱导其变态附着;
6.稚贝培育:附着在附着基上的种苗在育苗池中继续培育,期间每日彻底换水两次,每天1-3次投喂单胞藻饵料,投喂量是在每10立方米培育水体中投放3-30万个细胞/毫升单胞藻饵料50-500升,培育期间控制水温及盐度,经过20-40天培育,即得到能进入埋栖生活的体长达2-3毫米的稚贝种苗。
所述培育池中温度20~30℃,盐度23‰~35‰,PH值8.0~8.6,溶解氧(DO)4-8,化学耗氧(COD)0.5-1.0毫克/升,氨氮(NH3-N)0.2-0.6毫克/升;
所述消毒海水指的是用1-2PPM含氯消毒剂处理过,经过1-3天曝晒后的海水;
所述单胞藻饵料指的是自然生长环境下采收的亚心型扁藻、小球藻、等鞭金藻、叉鞭金藻或牟氏角毛藻的一种或任意组合的含藻液体;
所述附着基指的是细沙、粗沙、筛绢网片或由厚度是1-3毫米,直径是5-20厘米做成的圆形或方形或不规则形状的中心穿洞塑料簿片,用塑料绳或金属线或纤维线穿过簿片中心而串成的塑料串;
采取上述措施的本发明,工艺流程科学合理,可操作性强。实现了大獭蛤批量性工厂化育苗,以卵子细胞计算,育苗成活率达到了5-15%,结束了大獭蛤的野生历史。本发明方法占用资源不多,成本低廉,充分利用了自然资源。本发明对大獭蛤养殖业的发展具有极大的促进作用,具有独创性和先进性,有较高的学术水平和实用价值,而且对保护和开发海洋资源、繁荣经济、改善区域海水养殖品种结构和贯彻可持续发展战略都具有重要意义。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明的技术方案进行进一步的说明。
实施例1
育苗步骤:
1.亲贝的选择培育:在我国南方近海海域捕捞上来的野生大獭蛤群体中挑选个体大、无病、健壮,性腺饱满优质亲贝113斤,用5ppm的高锰酸钾海水溶液浸泡30分钟进行体表消毒后置于亲贝培育框中放入亲贝培养池,培养池水深1米,亲贝培养期间控制海水温度28~29℃,海水盐度是25‰-30‰,白天把亲贝培育框沉降至育苗池底部,夜晚再升上来悬浮于水面,每日吸污换水1次,换水量40%-50%,每天投喂1次扁藻及角毛藻饵料,投喂量按每10立方米培育水体中投放5-12万个细胞/毫升的扁藻及角毛藻饵料500升,如此强化培养5天;
2.人工授精:取上述培养后的亲贝,剖开分出雌、雄亲贝,其中雌贝55斤,另挑选出11斤优质雄贝,分别取出精子和卵子,把卵子细胞放入浓度50ppm的含氨海水中,静置激化10-30分钟,将两者混合均匀进行人工授精,受精30分钟,洗去多余精子及体液,平均受精率为86.3%,此时受精卵为沉性卵,受精卵沉入底部,去除上清液,收集沉入底部的优质受精卵;
3.人工孵化:在孵化池的海水中加入含氯消毒剂,使海水含氯量达到1-2PPM,经过2天曝晒后得到消毒海水,控制孵化水温25-28℃,海水盐度26-28‰,把干净的受精卵同时放于五个30立方米的育苗池中进行孵化,经过18个小时,其间通过风机送风,使育苗池中受精卵处于半悬浮的运动状态,经过30-40分钟孵化分裂为二细胞,5-7个小时进入多细胞期,8-10个小时原肠腔基本形成,12-14小时单轮幼虫出现,此时幼虫开始慢慢旋转上升,至18-22小时发育成直线绞合幼虫即“D”型幼虫;
4.幼体选优:此时,“D”型幼虫大小约80微米,选用350目的筛绢网袋,采用虹吸的方法收取优质“D”型幼虫,分别放入12个底面积为20m2海水深度为1.5m的育苗池中进行培育;
5.幼体培育:将优质幼虫按前期3-5个/毫升海水的密度放入育苗池中进行人工培育,采取全程避光培育的方式进行,培育期间杜绝一切光源,用遮光材料把光源遮住,在幼虫生长到后期,体长达到120-150微米时进行二次分池,控制密度在0.5-1.5个/毫升海水,培育期间每天上午8点和下午6点各投喂一次,前期投喂金藻和角毛藻,后期加投扁藻,投喂量按每10立方米培育水体中投放5-15万个细胞/毫升的单胞藻饵料300升,培育期控制水温28-29℃,盐度25‰~32‰,培育全程用3千瓦风机连续向1000立方米的水体充气增氧,幼虫进入育苗池70-80小时开始换水,日换水两次,每次换水量是20%-50%,经过8天的培育,幼虫体长达到300微米左右时可见棒状足在两壳缘间伸缩,面盘消失,此时用150目的筛绢网袋将全部幼虫收集起来,分别放入二十个容积均为30m3的稚贝培育池,池水温度28℃,盐度25-30‰,同时投放连接成串的塑料片为附着基诱导其变态附着,本次育苗的平均变态率为26.5%;
6.稚贝培育:附着在塑料片上的种苗在育苗池中继续培育,期间每日彻底换水两次,每天2次主要投喂扁藻,搭配金藻和角毛藻,按每10立方米培育水体中投放5-15万个细胞/毫升的单胞藻饵料500升的量投喂,控制水温26~29℃,盐度28-30‰,经过21天的培育稚贝壳长达到2~5mm,平均单位面积出苗量达2.69万,本次育苗经过以上步骤,成功培育出规格2~5mm的大獭蛤人工苗种1076万粒。
实施例2
育苗步骤:
1.亲贝的选择培育:在我国南方近海海域捕捞上来的野生大獭蛤群体中挑选个体大、无病、健壮,性腺饱满的优质亲贝83斤,用5ppm的高锰酸钾海水溶液浸泡20分钟进行体表消毒后置于亲贝培育框中放入亲贝培养池,培养池水深1米,亲贝培养期间控制海水温度25~28℃,海水盐度是25‰-30‰,白天把亲贝培育框沉降至育苗池底部,夜晚再升上来悬浮于水面,每日吸污换水1次,换水量40%-50%,每天投喂1次扁藻及角毛藻饵料,投喂量按每10立方米培育水体中投放6-20万个细胞/毫升的扁藻及角毛藻饵料400升,如此强化培养3天;
2.人工授精:由于亲贝性腺成熟度较好,本次试验大獭蛤受精卵是通过人工诱导亲贝自然排放获得。人工诱导亲贝自然排放主要采取阴干、流水结合的方法进行催产,诱导亲贝批量性产卵,受精卵沉入底部,去除上清液,收集沉入底部的优质受精卵;
3.人工孵化:在孵化池的海水中加入含氯消毒剂,使海水含氯量达到1-2PPM,经过2天曝晒后得到消毒海水,控制孵化水温25-27℃,海水盐度26-28‰,把干净的受精卵同时放于四个30立方米的育苗池中进行孵化,孵化20个小时,其间通过风机送风,使育苗池中受精卵处于半悬浮的运动状态,经过30-40分钟孵化分裂为二细胞,5-7个小时进入多细胞期,8-10个小时原肠腔基本形成,12-14小时单轮幼虫出现,此时幼虫开始慢慢旋转上升,至20小时发育成直线绞合幼虫即“D”型幼虫;
4.幼体选优:此时,“D”型幼虫大小约80微米,选用350目的筛绢网袋,采用虹吸的方法收取优质“D”型幼虫,分别放入8个底面积为30m2海水深度为1.5m的育苗池中进行培育;
5.幼体培育:将优质幼虫按前期3-5个/毫升海水的密度放入育苗池中进行人工培育,采取全程避光培育的方式进行,培育期间杜绝一切光源,用遮光材料把光源遮住,在幼虫生长到后期,体长达到120-150微米时进行二次分池,控制密度在0.5-1.5个/毫升海水,培育期间每天每天上午8点和下午6点各投喂一次,前期投喂金藻和角毛藻,后期加投扁藻,投喂量按每10立方米培育水体中投放5-20万个细胞/毫升的单胞藻饵料200升,培育期控制水温28-29℃,盐度25‰~32‰,培育全程用3千瓦风机连续向1000立方米的水体充气增氧,幼虫进入育苗池70-80小时开始换水,日换水两次,每次换水量是20%-50%,经过10天的培育,幼虫体长达到300微米左右时见棒状足伸缩,面盘萎缩或消失,此时用150目的筛绢网袋将全部幼虫收集起来,分别放入12个容积均为30m3的稚贝培育池,池水温度26℃,盐度25-30‰,同时投放连接成串的塑料片为附着基诱导其变态附着,本次育苗的平均变态率为21.1%;
6.稚贝培育:附着在塑料片上的种苗在育苗池中继续培育,期间每日彻底换水两次,每天2次主要投喂扁藻,搭配金藻和角毛藻,按每10立方米培育水体中投放5-15万个细胞/毫升的单胞藻饵料350升的量投喂,控制水温26~29℃,盐度28-30‰,经过21天的培育稚贝壳长达到2~5mm,平均单位面积出苗量达3.13万,本次育苗经过以上步骤,成功培育出规格2~4mm的大獭蛤人工苗种751.2万粒。
实施例3
育苗步骤
1.亲贝的选择培育:与实施例1基本相同,区别在于:选取成熟、健康、性腺饱满的优质大獭蛤亲贝341斤,用1ppm的高锰酸钾海水溶液浸泡30分钟进行体表消毒,每天投喂1次扁藻及角毛藻饵料,投喂量按每10立方米培育水体中投放5-12万个细胞/毫升的扁藻及角毛藻饵料400升,强化培养5天;
2.人工授精:挑选180斤成熟亲贝进行阴干流水刺激,诱导排放,获取的受精卵在孵化池中进行孵化,再解剖剩余的161斤亲贝,分别吸取精、卵细胞进行人工授精在受精30分钟后,去除多余精子及体液,收集受精卵;
3.人工孵化:与实施例1相同;
4.幼体选优:与实施例1基本相同,区别在于所得“D”型幼虫,分别放入40个底面积为20m2高度为1.5m的育苗池中进行培育;
5.幼体培育:与实施例1基本相同,区别在于:金藻、角毛藻及扁藻的投喂量按每10立方米培育水体投放5-20万个细胞/毫升的单胞藻饵料200升,得到的变态率是23.5%;
6.稚贝培育:附着在塑料片上的种苗在育苗池中继续培育,期间每天流排水6个小时,保持海水清洁干净,每天2次主要投喂扁藻,搭配金藻和角毛藻,按每10立方米培育水体中投放5-25万个细胞/毫升的单胞藻饵料400升的量投喂,控制水温26~29℃,盐度28-30‰,经过22天的培育稚贝壳长达到3-6mm,本次育苗经过以上步骤,成功培育出大獭蛤人工苗种3582万粒。