CN102058787B - 抗焦虑的药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种抗焦虑的药物及其制备方法，抗焦虑的药物是如下重量份的原料制成的：红景天5～25份，贯叶连翘5～15份，天麻5～15份，熟地5～18份。本发明药物配伍合理，组方简单，效果明显。动物实验表明，能明显升高血清中抑制性神经递质γ-氨基丁酸GABA的分泌水平，显著提高小鼠抗焦虑的行为能力，且长期服用不会对学习记忆能力产生抑制性副作用。

Description

抗焦虑的药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种具有抗焦虑作用的药物，具体地说是以药食同源中草药为原料制备的抗焦虑药物，本发明还涉及药物的制备方法。

背景技术

随着社会工作节奏加快，竞争压力加剧，心理应激性疾病发病率逐年上升。据估计，目前世界十大疾病第五位的抑郁症到2020年，将上升为仅次缺血性心脏病外的第二大致死性人类疾病。

目前抗焦虑药虽有很大进展，但仍缺乏理想的药物。一些新药虽然见效较快但长期服用药物副作用较大。比如临床现采用较多的抗焦虑西药一苯二氮卓类药物地西泮等，长期服用容易导致中枢神经系统不同部位的抑制，导致嗜睡、学习记忆能力下降，严重时甚至发生昏迷。焦虑症的机理研究表明，起源于不同核团的多条神经递质通路，如苯二氮卓-γ-氨基丁酸能、去甲肾上腺素能、5-羟色胺能、多巴胺能神经通路均与焦虑的生物学特性直接相关，这些通路或单独或联合发挥调节作用，影响个体的注意、唤醒、镇静、恐惧反应等不同生理特征反应。不同个体因为这些调节的不同整合而表现出焦虑的不同类型与程度。西药虽然靶向性强，但整体调理作用不如中药，而且中药多药食同源能避免药物纯化潜在的毒副作用问题。我国中草药资源广博、研究历史悠久，国内潜在的需求市场大，但是目前获得临床批号的抗焦虑中药品种非常少，仅有近年刚上市的九味镇心颗粒一种。无论从品种、剂型还是疗效的优先选择上都远远无法满足各类患者的需要：如冲剂类因含糖较高和易潮解等特性，不适合低糖摄入患者或长期湿度较大环境下工作人员保健的需要。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗焦虑的药物及其制备方法，以满足人们的需要。

本发明药物是如下重量份的原料制成的：

红景天5～25份贯叶连翘5～15份天麻5～15份熟地5～18份

优选的，本发明药物是如下重量份的原料制成的：

红景天10～20份贯叶连翘8～15份天麻7～12份熟地10～15份

最优选的，是如下重量份的原料制成的：

红景天15份贯叶连翘10份天麻9份熟地12份；

本发明的药物可以采用中药制剂的常规方法，制备成为任何常规的制剂，优选的，本发明所述的抗焦虑的药物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将红景天、贯叶连翘、天麻和熟地粉碎至100～300目，用体积浓度为30～95％的乙醇浸泡8～12h，避光煎煮提取0.5～2h，重复3～4次，合并提取液，静置8～16h，然后液固分离，收集滤液，滤液浓缩至45℃～55℃时的相对密度为1.25～3.00；

(2)加入盐酸调节pH值为3-7后，加入重量浓度为2～5％的明胶溶液至不再产生沉淀，沉淀的主要成分是鞣质，根据药典可知四味原料药各自的鞣质含量；

(3)然后经液固分离，收集滤液，加蒸馏水至0.1～1.0g生药/ml，于20～40℃时加入重量浓度为0.01～0.5％的壳聚糖胶体溶液，30～50r/min搅拌2～5min，静置8～16h，过滤，收集滤液，即可为本发明的抗焦虑的药物；

或者，将滤液浓缩或加水定容，灭菌，灌装密封，得到口服药液；

或者，将滤液采用本领域公知的方法，制备为片剂、丸剂等常见可服用制剂。

该生产方法中调节适宜的PH值为4～5，壳聚糖胶体最适当的溶液浓度为0.1％。

本发明的药物，能够用于治疗焦虑症，剂量一般为1g～10g生药/Kg·天，具体可根据患者的年龄病情等由医师决定。

本发明的技术方案，是基于祖国医学对焦虑症及其发病机理的认识和调理原则，参考现代药理研究成就，从祖国医药宝库中筛选出可以养心安神、平肝定惊、滋补脾肾、药膳同源的天然植物药。按中医理论组方，提取精华，对与焦虑病因直接相关的神经递质通路发挥双向调节与综合治理作用，一方面起到镇静安神、减少恐惧反应的作用，另一方面改善学习与记忆能力，增强机体的应激反应水平。

本发明的配伍方案是以藏药红景天为主药。此药味甘、性寒、归脾经，有益气键脾养阴之工效。近年研究发现其具增强脑功能、改善心脑损伤修复以及镇静安眠、抗抑郁、改善应激引起的神经内分泌紊乱等作用，这些都体现了中医养心安神、平肝镇静的作用。在此方中取其养心血、健脾安神之工效。贯叶连翘具有安神、抗焦虑作用，此方中作为辅药，配伍红景天使用，加强其养心安神镇静的功效。熟地入手三阴经，本方中入足少阴以滋肾水，肾水旺以清心火，使心神不为虚火所扰，此方中以其为佐药加强辅助红景天安神养心之功，同时治疗心肾阴亏所致的烦躁等焦虑症状。天麻为本方使药，取其平肝定惊之功效。在此方中一方面协同其它药发挥养心安神、补益肝肾的功效。另一方面，由于其归肝经，为肝经之要药，可以引药直达病所。以上诸药配伍，主、辅、佐、使明确，诸药合用，共同达到养心安神、补益肝肾的作用。

本发明的一个重要特点是制剂加工过程中，使用明胶去除了绝大部分的鞣质，使口服液尝起来无涩味，长期存放基本无沉淀产生，提高了口服液的口感和品质；继而又使用壳聚糖去除了提取液中残留的明胶、树脂、重金属等杂质，减少添加剂残留。

本发明药物配伍合理，组方简单，效果明显。动物实验表明，能明显升高血清中抑制性神经递质γ-氨基丁酸GABA的分泌水平，显著提高小鼠抗焦虑的行为能力，且长期服用不会对学习记忆能力产生抑制性副作用。

具体实施方式

下面通过实施例的方式进一步说明本发明，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。

实施例1

选取红景天375g、贯叶连翘250g、天麻225g、熟地300g，粉碎至300目，用10L体积浓度为75％的乙醇浸泡10h，避光煎煮提取1h(共重复3次)，合并提取液，静置12h以上，然后过滤(或离心)，滤液浓缩至相对密度2.0。于45℃时加入盐酸调节PH值为4.0后，加入重量浓度为3％明胶溶液至不再产生沉淀；经离心后加蒸馏水至1.0g生药/ml，于40℃时加入重量浓度为0.1％的壳聚糖胶体溶液，50r/min搅拌5min。静置12h离心取上清液，加蒸馏水至1000ml，得到药物提取液。静置12h，滤过，搅拌均匀，装入瓶内，试验备用。

实施例2

采用实施例1方法获得的药物提取液进行试验。

1.药物对小鼠焦虑行为的影响

雄性昆明种小鼠，体重(20士2)g，经1周适应性饲养后，随机分组。地西泮组前3天灌胃生理盐水，后4天灌胃5mg/Kg·d地西泮；盐水组连续灌胃7天等容积的生理盐水(1ml)；药物组分别连续灌胃7天不同剂量的本发明药物的提取液，其中：低剂量、中剂量、高剂量药物组生药含量分别为5g/Kg·d、10g/Kg·d、20g/Kg·d。所有动物按组别分笼喂养，自由进食饮水，7天后开始进行行为学检测。行为学检测结束即刻，将小鼠摘眼球取血，血样经常规处理分离出血清，用ELISA检测方法行γ-氨基丁酸含量检测。实验数据使用Excel软件的数据分析库进行单因素方差统计分析，组间差异使用LSD-t方法进行多个样本均数间的两两比较。

研究发现，组配的抗焦虑药物能够明显提高小鼠在旷场实验、探洞实验等自发行为实验中探索行为的活动次数、时间和活动路程，且以中剂量药物组效果最为明显(表1，表2)。同样，在高架十字迷宫实验中，中剂量药物组也能够明显提高小鼠开臂进入次数、停留时间和运动路程百分比(表3)。当动物面临未知的新环境时，出于自我保护的安全保守行为与好奇探索的天性形成心理上的矛盾基础，构成焦虑产生的应激源。实验数据表明，服用抗焦虑药物能够明显改善小鼠的焦虑行为症状，且以中剂量组(10g/kg·d)的药效最为显著和稳定。

表1药物灌胃给药对小鼠旷场行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表2药物灌胃给药对小鼠探洞行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

表3药物灌胃给药对小鼠高架十字迷宫行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

2.药物对小鼠血清GABA水平的影响

γ-氨基丁酸(GABA)是一种天然存在的功能性氨基酸，是神经中枢最重要的抑制性氨基酸递值。前人研究表明，GABA及其受体的表达水平下降与焦虑症发生直接相关。通过ELISA酶标检测方法对各药物组动物血清中的GABA进行检测，发现药物组可以明显提高小鼠血清中的GABA水平，且以中剂量药物组的药效最佳(表4)，与盐水组比较有明显显著差异(P＜0.01)。

表4药物对小鼠血清GABA水平的影响(ng/ml)

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

实施例3

该实施例的过程与实施例2相同，雄性昆明种小鼠，体重(20士2)g，经1周适应性饲养后，随机分组。动物分组设计为：生理盐水组、地西泮组、药物组、拆方1组、拆方2组、红景天组和贯叶连翘组。地西泮组前3天灌胃生理盐水，后4天灌胃5mg/Kg·d地西泮；盐水组连续灌胃7天等容积的生理盐水(1ml)；药物组、各拆方组和各单方组分别连续灌胃7天相应的药物提取液。其中，药物组生药含量为最优剂量10g/Kg·d的本发明药物；拆方1组为缺少主成分红景天的药物组，拆方2组为缺少主成分贯叶连翘的药物组，各拆方组生药含量均为10g/Kg·d；红景天组和贯叶连翘组分别为红景天、贯叶连翘的单方药物提取液，生药含量均为10g/Kg·d。所有动物按组别分笼喂养，自由进食饮水，7天后分别进行行为学检测和血清γ-氨基丁酸含量检测。具体检测方法和统计方法同实施例2。

1.药物对小鼠焦虑行为的影响

药物组经与各单方组和各拆方组分别进行比较，发现抗焦虑药效明显优于其它各组。与拆方组比较，能够明显增加小鼠旷场行为实验的中央区活动时间、路程和穿梭时间(表5)，提高探洞行为次数(表6)，延长高架十字迷宫中开臂停留时间和运动路程的百分比(表7)，且均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)。与单方组比较，能延长小鼠高架十字迷宫中开臂停留时间、运动路程的百分比(表7)，且均有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01)，说明组成复方后药效较之单方有一定的协同和增益作用。

表5药物的拆方实验-对小鼠旷场行为的影响

注：与拆方1组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01，与拆方2组比较^#P＜0.05，^##P＜0.01。

表6药物的拆方实验-对小鼠探洞行为的影响

注：与拆方1组比较^**P＜0.01，与拆方2组比较^#P＜0.05。

表7药物的拆方实验-对小鼠高架十字迷宫行为的影响

注：与药物组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

2.药物对小鼠血清GABA水平的影响

实验结果显示，药物组在提高小鼠血清GABA水平上的药效明显优于各拆方组和红景天组(表8)。药物组与生理盐水组比较，有明显显著差异(P＜0.01)，而拆方组则无统计学差异(P＞0.05)。药物组与红景天组比较有显著差异(P＜0.05)。

表8药物对小鼠血清GABA水平的影响(ng/ml)

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，^**P＜0.01。

实施例4

选取雄性SD大鼠18只，体重180±20g。适应性饲养1周后，随机等分为生理盐水组、氯硝西泮组和药物组，每组各6只。氯硝西泮组和药物组分别以5mg/kg·d的氯硝西泮水溶液和10g/Kg·d的本发明药物的提取液进行灌胃，所有实验组进行灌胃的药液总容积均为1ml。灌胃1h后将实验鼠装入特制的不锈钢船型笼具中，用隔板将每只动物单独隔成小室，给予垫料和食物。将装入实验鼠的船型笼具放入造波池内，以频率0.25Hz，波高15cm的人造波浪给予1h的前庭器官刺激。刺激完毕后即刻进行Morris水迷宫学习能力检测，此为第1天。之后的第2、3天灌胃1h后，直接进行Morris水迷宫空间学习记忆能力检测。至第4天，正常灌胃1h后，再次接受与第1天相同时间、频率、波高的人造波浪对前庭器官的刺激，并在刺激后即刻和第5天灌胃后1h进行Morris水迷宫记忆能力检测。

利用人工造波方式刺激大鼠前庭器官，可以诱导动物产生舰船运动适应不良的行为表现，其中包括学习与记忆能力的下降。实验结果表明(表9)，在连续服药的7天内，本发明药物与抗焦虑西药氯硝西泮相比，对学习记忆能力的保持具有明显地促进作用，长期服药不会对学习记忆中枢产生抑制性副作用。具体分析，在接受第1次造波刺激兼服药的第1-3天内，为训练大鼠空间探索能力的学习过程，药物组较生理盐水组、氯硝西泮组比较，能明显促进大鼠空间探索的学习能力(P＜0.05)。接受第2次造波刺激兼服药的第4-5天内，为大鼠空间探索能力的记忆保持过程，药物组较生理盐水组、氯硝西泮组比较，能明显促进大鼠空间探索的记忆能力(P＜0.05)。抗焦虑西药氯硝西泮，无论在第1次造波还是在第2次造波阶段，与生理盐水组比较均无显著性差异(P＞0.05)。

表9药物对大鼠Morris水迷宫学习与记忆能力的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05，与氯硝西泮组比较^#P＜0.05。

实施例5

选取红景天400g、贯叶连翘240g、天麻240g、熟地288g，粉碎至200目，用12L体积浓度为30％的乙醇浸泡12h，避光煎煮提取2h(共重复4次)，合并提取液，静置16h以上，然后过滤(或离心)，滤液浓缩至相对密度3.0。于55℃时加入盐酸调节PH值为7.0后，加入重量浓度为2％明胶溶液至不再产生沉淀，经离心后加蒸馏水至1.0g生药/ml，于40℃时加入重量浓度为0.01％的壳聚糖胶体溶液，50r/min搅拌5min。静置8h离心取上清液，过滤，收集滤液，试验备用。

实施例6

采用实施例5方法获得的药物提取液进行试验。

1.药物对小鼠焦虑行为的影响

雄性昆明种小鼠，体重(20士2)g，经1周适应性饲养后，随机分组。地西泮组前3天灌胃生理盐水，后4天灌胃5mg/Kg·d地西泮；盐水组连续灌胃7天等容积的生理盐水(1ml)；药物组连续灌胃7天10g/Kg·d生药含量的本发明药物的提取液。所有动物按组别分笼喂养，自由进食饮水，7天后分别进行行为学检测和血清γ-氨基丁酸含量检测。具体检测方法和统计方法同实施例2。

药物组经与盐水组进行比较，发现抗焦虑药效明显优于盐水组，能够明显增加小鼠旷场行为实验的中央区活动时间、路程和穿梭时间(表10)，提高探洞行为次数(表11)，且均有统计学意义(P＜0.05)。

表10药物对小鼠旷场行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05。

表11药物对小鼠旷场行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05。

实施例7

选取红景天250g、贯叶连翘250g、天麻250g、熟地300g，用12L体积浓度为95％的乙醇浸泡8h，避光煎煮提取0.5h(共重复4次)，合并提取液，静置8h，然后过滤(或离心)，滤液浓缩至相对密度1.25。于45℃时加入盐酸调节PH值为3.0后，加入重量浓度为5％明胶溶液至不再产生沉淀，经离心后加蒸馏水至1.0g生药/ml，于20℃时加入重量浓度为0.5％的壳聚糖胶体溶液，30r/min搅拌2min。静置16h离心取上清液，过滤，收集滤液，试验备用。

实施例8

采用实施例7方法获得的药物提取液进行试验。

1.药物对小鼠焦虑行为的影响

雄性昆明种小鼠，体重(20士2)g，经1周适应性饲养后，随机分组。地西泮组前3天灌胃生理盐水，后4天灌胃5mg/Kg·d地西泮；盐水组连续灌胃7天等容积的生理盐水(1ml)；药物组连续灌胃7天10g/Kg·d生药含量的本发明药物的提取液。所有动物按组别分笼喂养，自由进食饮水，7天后分别进行行为学检测和血清γ-氨基丁酸含量检测。具体检测方法和统计方法同实施例2。

药物组经与盐水组进行比较，发现抗焦虑药效明显优于盐水组，能够明显延长高架十字迷宫中开臂停留时间和运动路程的百分比(表12)，明显提高小鼠血清GABA水平(表13)，且均有统计学意义(P＜0.05)。

表12药物对小鼠高架十字迷宫行为的影响

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05。

表13药物对小鼠血清GABA水平的影响(ng/ml)

注：与生理盐水组比较^*P＜0.05。

Claims (6)

1.抗焦虑的药物，其特征在于，是如下重量份的原料制成的：

红景天5～25份贯叶连翘5～15份天麻5～15份熟地5～18份。

2.根据权利要求1所述的抗焦虑的药物，其特征在于，是如下重量份的原料制成的：

红景天10～20份贯叶连翘8～15份天麻7～12份熟地10～15份。

3.根据权利要求1所述的抗焦虑的药物，其特征在于，是如下重量份的原料制成的：

红景天15份贯叶连翘10份天麻9份熟地12份。

4.含有权利要求1～3任一项所述的药物的制剂。

5.根据权利要求4所述的制剂，所述制剂为口服液。

6.根据权利要求1～3任一项所述药物的制备方法，包括如下步骤：

(1)将红景天、贯叶连翘、天麻和熟地粉碎至100～300目，用体积浓度为30～95％的乙醇浸泡后，避光煎煮提取，静置8～16h，然后液固分离，收集滤液，滤液浓缩至45℃～55℃时的相对密度为1.25～3.00；

(2)加入盐酸调节pH值为3-7后，加入重量浓度为2～5％的明胶溶液至不再产生沉淀；

(3)然后经液固分离，收集滤液，加蒸馏水至0.1～1.0g生药/ml，于20～40℃时加入重量浓度为0.01～0.5％的壳聚糖胶体溶液，30～50r/min搅拌2～5min，静置8～16h，过滤，收集滤液，即为所述抗焦虑的药物。