CN102058733B - 鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物及其制备方法，其中药材配方为：五倍子1份～5份，大黄5份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参10份～70份。本配方取五倍子的止血、解毒，大黄泻热通肠、凉血解毒、逐瘀生新是肾脏代谢加强，茵陈祛肝胆湿热，蒲公英清热解毒，虎杖散瘀之功，败酱草善于降下，紫花地丁解表消肿之用，党参扶正固本。本发明的药物组合物能有效消除鳗鱼皮肤脱粘、肝胆肿大、出血等病症，具有配方合理，起效快，安全无毒、疗效稳定等特点。

Description

鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种渔药，特别是涉及一种治疗气单胞菌感染引起鳗鱼皮肤脱粘、肝胆肿大、败血症等病症的鳗鱼细菌性疾病治疗药物及其制备方法。

背景技术

气单胞菌在自然界中分布广泛，是水中常居菌群，可以从生水、氯化水、污染水、水产养殖水、水生生物体中分离到，每年的5月至11月，该菌群在水中的含量最高。气单胞菌在习惯上被认为是一类条件致病菌，包括嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌、温和气单胞菌、维隆气单胞菌等，在免疫力低下时引起机会感染。它有致病性菌株和非致病性菌株之分。致病性菌株具有宿主范围广、感染力强等特点，可感染鱼类、两栖类、爬行类、鸟类和哺乳类等动物。人亦可因致病性气单胞菌感染而发生肠道内和肠道外的感染。此外临床上还可表现为急性出血性败血症，慢性感染表现为皮肤溃疡等。鳗鱼感染致病性气单胞菌出现皮肤脱粘、肝胆肿大、败血症等症状，致病性气单胞菌已成为鳗鱼养殖病害的主要病原之一。长期以来一直使用抗生素和化学合成类抗菌药治疗气单胞菌感染引起的疾病，但是由于大范围滥用化学类抗菌药物造成致病菌的耐药性不断增强，且目前国际上严格限制鳗鱼产品中的化学药物残留量，导致鳗鱼养殖生产中出现无药可用的现状，一旦感染致病性气单胞菌，将造成鳗鱼大量死亡，经济损失巨大。当前渔药市场上仍未见已研制开发的防治气单胞菌感染的高效、绿色环保、安全药物。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种药用功效发挥充分、起效快、易于吸收的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物。

本发明的目的另一个在于提供一种制备操作简单、易行、有利于工业化大规模生产的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法。

为实现上述目的，本发明的技术解决方案是：

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，所述药物的中药原料包括：按照重量份数，五倍子1份～5份，大黄 5份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参10份～70份。

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，所述药物的中药原料包括：按照重量份数，五倍子2份～5份，大黄 9份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参15份～60份。

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，所述药物的中药原料包括：按照重量份数，五倍子3份，大黄 15份，虎杖20份，蒲公英20份，紫花地丁20份，茵陈20份，败酱草20份，党参30份。

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法，它包括以下步骤：

(1) 按照用量比，将五倍子、虎杖加水10倍量煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，静置、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(2) 按照用量比，将大黄、蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3)将步骤（2）中的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4) 合并步骤（1）、（2）和（3）的三种清膏，浓缩至相对密度为60℃的波美度1.35～1.38的稠膏，减压干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法，它包括以下步骤：

(1)按照用量比，将五倍子、虎杖、大黄,采用冷冻超微粉碎机进行粉碎，粉碎至300目以上的超微粉，备用；

(2) 按照用量比，将蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3) 将步骤（2）的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4)合并步骤（1）的超微粉、步骤（2）和（3）的两种清膏，经减压干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。 

采用上述方案后，本发明具有以下优点：

(1) 本发明以中医学理论为基础（如中医学认为，细菌外邪或湿热内蕴为主，邪气阻滞气血运行、气血失和、瘀阻自生。是肝肾罴极之本失调，从而表现为肝肾肿大乃至出血而亡。一般早期宜袪邪为主，扶正为辅，强调扶正不留邪，袪邪不伤正，攻补兼施）科学合理地配置中药原料中的各组分药物和用量，使各组分的药效能够有机的结合起来，综合发挥药用效果，药物的治疗效果好，毒副反应小。本方取五倍子的止血、解毒，大黄泻热通肠、凉血解毒、逐瘀生新是肾脏代谢加强，茵陈祛肝胆湿热，蒲公英清热解毒，虎杖散瘀之功，败酱草善于降下，紫花地丁解表消肿之用，党参扶正固本。

(2) 本发明的药物组合物能有效消除鳗鱼皮肤脱粘、肝胆肿大、出血等病症，具有配方合理，起效快（防脱粘出血的起效时间3-5天，肝胆肿大的消退时间17-18天，治愈所需时间36天），安全无毒、疗效稳定等特点。经养殖现场用药观察，病鳗摄食情况好转，摄食量明显增加，病症明显减轻，疗效好且无毒副作用。在4-9月份发病季节拌于饲料中喂服，可预防气单胞菌感染疾病的爆发。

(3) 本发明的药物组合物在制备过程中将浸提与冷冻超微粉碎相结合，使药物组合物的有效药物含量高，而且经过超微粉碎，药物的有效成分更有利于鱼体吸收，最大程度地发挥药物作用，而且制备操作易行，有利于工业化大规模生产。

下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明。

具体实施方式

一、配方：

本发明是一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，所述药物的中药原料包括：按照重量份数：五倍子2份～5份，大黄 9份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参15份～60份。

实施例1

最佳配方：其按照重量份数，五倍子3份，大黄 15份，虎杖20份，蒲公英20份，紫花地丁20份，茵陈20份，败酱草20份，党参30份。

实施例2

其按照重量份数，五倍子2份，大黄 10份，虎杖30份，蒲公英30份，紫花地丁30份，茵陈30份，败酱草30份，党参50份。

实施例3

其按照重量份数，五倍子5份，大黄 20份，虎杖35份，蒲公英5份，紫花地丁5份，茵陈5份，败酱草5份，党参10份。

实施例4

其按照重量份数，五倍子4份，大黄18份，虎杖20份，蒲公英20份，紫花地丁30份，茵陈25份，败酱草25份，党参45份。

实施例5

其按照重量份数，五倍子1份，大黄 5份，虎杖50份，蒲公英50份，紫花地丁50份，茵陈50份，败酱草50份，党参70份。

实施例6

其按照重量份数，五倍子5份，大黄 20份，虎杖35份，蒲公英5份，紫花地丁5份，茵陈5份，败酱草5份，党参10份。

实施例7

最佳配方：其按照重量份数，五倍子3份，大黄 15份，虎杖20份，蒲公英20份，紫花地丁20份，茵陈20份，败酱草20份，党参30份。

实施例8

其按照重量份数，五倍子2份，大黄 10份，虎杖30份，蒲公英30份，紫花地丁30份，茵陈30份，败酱草30份，党参50份。

实施例9

其按照重量份数，五倍子5份，大黄 20份，虎杖5份，蒲公英15份，紫花地丁15份，茵陈15份，败酱草15份，党参30份。

本发明所用的中药原料：

五倍子：本品为同翅目（Homoptera）蚜虫科的角倍蚜（Malaphis chinensis）或倍蛋蚜雌虫寄生于漆树科（Anacardiaceae）植物“盐肤木”（Rhus javanica Thunberg）及其同属其他植物的嫩叶或叶柄，刺伤而生成一种囊状聚生物虫瘿（cecidium），经烘倍干燥后所得。

大  黄：本品为蓼科大黄属Polygonaceae Rheu植物掌叶大黄、唐古特大黄或药用大黄等的干燥根和根茎。

虎  杖：本品为蓼科 Polygonaceae 植物虎杖 Polygonum cuspidatum Sieb. et Zucc.，的干燥根茎和根。

蒲公英：本品为菊科植物蒲公英Taraxacum mongolicum Hand．-Mazz．、碱地蒲公英Taraxacum sinicum Kitag．或同属数种植物的干燥全草。

紫花地丁：本品为堇菜科植物紫花地丁Viola yedoensis Makino的干燥全草。

茵  陈：本品为菊科植物茵陈蒿Artemisia capillaris Thunb.的干燥全草。

败酱草：本品为败酱科植物白花败酱Patrinia villosa Juss. 的干燥全草。

党  参：本品为桔梗科Campanulaceae植物党参、素花党参、川党参Codonopsis tangshen Oliv.及其同属多种植物的干燥根。

二、制备方法：

实施例1：一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法：

(5)按照用量比，将五倍子、虎杖加水10倍量煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，静置、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(6) 按照用量比，将大黄、蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(7) 步骤（2）的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(8)  合并步骤（1）、（2）和（3）的三种清膏，浓缩至相对密度为60℃的波美度1.35～1.38的稠膏，减压干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。

实施例2：一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法：

(1) 按照用量比，将五倍子、虎杖、大黄,采用冷冻超微粉碎机进行粉碎，粉碎至300目以上的超微粉，备用；

(2) 按照用量比，将蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3) 将步骤（2）的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用。

(4)  合并步骤（1）的超微粉、步骤（2）和（3）的两种清膏，经减压干燥，粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。

三、本发明的药物组合物药效试验

1、长期毒性试验

试验目的：观察健康鳗鱼长期服用治疗气单胞菌感染病的药物组合物所发生的毒性反应及程度，为客观评价其用药安全性提供科学依据。

试验结果：

长期给予本发明的药物组合物对鳗鱼行为外观无明显的毒性影响。

长期给予本发明的药物组合物，在试验中对鳗鱼的心、肝、脾、肺、肾的生长过程无影响。

病理组织学试验

病理组织学检查表明试验中鳗鱼肝胆逐步消肿，出血逐渐消退，而其余脏器组织无病理学变化。

目的：研究本发明的药物组合物的杀菌、抗炎、消肿作用。

方法：选用气单胞菌感染导致脱粘、肝胆肿大、出血的病鳗饲服给药，研究本发明的药物组合物的杀菌、抗炎、消肿作用。

结果：本发明的药物组合物能显著抑制肝脏内感染细菌数量；3-5天皮肤脱粘症状减轻、内脏出血开始消退；17-18天修复受损肝脏，肝胆表面肿大明显减小；免疫球蛋白G水平有所升高。

结论：本发明的药物组合物具有明显的杀菌、抗炎、消肿作用。

治疗有效性试验

养殖生产中投喂药饵试验验证，连续给药36天后观察本发明的药物组合物对气单胞菌发病鳗鱼的影响。

结论：对三种鳗鱼投喂药饵试验组，每尾平均重量均略有增加，存活率亦明显高于对照组。

对美洲鳗的疗效总有效率为86.14%。

对欧洲鳗的疗效总有效率为39.82%。

对日本鳗的疗效总有效率为31.66%。

以上所述，仅为本发明较佳实施例而已，配方的组合形式可有多种，故不能以此限定本发明实施的范围，即依本发明申请专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本发明专利涵盖的范围内。

Claims (5)

1.一种鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，其特征在于：所述药物的中药原料为：按照重量份数，五倍子1份～5份，大黄 5份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参1份～70份。

2.根据权利要求1所述的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，其特征在于：所述药物的中药原料包括：按照重量份数，五倍子2份～5份，大黄9份～20份，虎杖5份～35份，蒲公英5份～35份，紫花地丁5份～35份，茵陈5份～35份，败酱草5份～35份，党参15份～60份。

3.根据权利要求1或2所述的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物，其特征在于：所述药物的中药原料包括：按照重量份数，五倍子3份，大黄15份，虎杖20份，蒲公英20份，紫花地丁20份，茵陈20份，败酱草20份，党参30份。

4.一种根据权利要求1所述的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：

(1)按照用量比，将五倍子、虎杖加水10倍量煎煮三次，每次1.5小时，合并煎液，静置、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(2)按照用量比，将大黄、蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3)将步骤（2）中的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4)合并步骤（1）、（2）和（3）的三种清膏，浓缩至相对密度为60℃的波美度1.35～1.38的稠膏，减压干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。

5.一种根据权利要求1所述的鳗鱼气单胞菌感染病治疗药物的制备方法，其特征在于：它包括以下步骤：

(1)按照用量比，将五倍子、虎杖、大黄,采用冷冻超微粉碎机进行粉碎，粉碎至300目以上的超微粉，备用；

(2)按照用量比，将蒲公英、紫花地丁、茵陈、败酱草、党参，用重量百分比70%乙醇回流三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(3)将步骤（2）的药渣再加水提取三次，每次2小时，合并提取液，回收乙醇、过滤，滤液浓缩至相对密度60℃的波美度1.25～1.28的清膏备用；

(4)合并步骤（1）的超微粉、步骤（2）和（3）的两种清膏，经减压干燥，冷冻粉碎成细粉，制备成治疗鳗鱼气单胞菌感染病的药物组合物。