发明内容
为了解决以上问题,本发明提供了一种制备方法简单,提高脑内CAT含量、降低MAO活性,对老年痴呆具有明显治疗作用的功能性食品。
本发明是通过以下措施实现的:
一种改善老年痴呆的功能性食品,原材料由以下重量份的组分组成:深海鱼油10-50份,葡萄籽5-80份,银杏叶10-70份,知母5-40份。
所述的功能性食品,优选以下重量份的组分组成:深海鱼油 30份,葡萄籽30份,银杏叶30份,知母10份。
所述深海鱼油中EPA含量不低于7%,DHA含量不低于28%。
所述的功能性食品,是通过以下步骤制得的:
(1)脱脂葡萄籽用乙醇提取后,制得干浸膏,粉碎备用;
(2)银杏叶用乙醇提取后,制得干浸膏,粉碎备用;
(3)知母用水提取后,制得干浸膏,粉碎备用;
(4)将深海鱼油加热至35℃-45℃,加入步骤(1)、(2)和(3)制得的干浸膏粉,搅拌,研磨均匀,灌装得所述功能性食品胶囊剂。
步骤(4)中使用胶体磨进行研磨。
本发明的有益效果:选用较少的原料、较简单的工艺制备的功能性食品能提高脑内CAT的含量,降低MAO的活性,拮抗氧化反应,同时防止单胺类神经递质的减少,从而起到防治老年痴呆的作用;在防治AD方面,具有整体调节、多靶点作用的优点;且本发明的功能性食品制成胶囊剂,食用、贮存方便,保质期长,胶囊外形美观,易于生产,生物利用度高,使产品更好的发挥保健功能,造福消费者。
具体实施方式
实施例1
一种改善老年痴呆的功能性食品,由以下重量的组分组成:
深海鱼油(含EPA7wt%,DHA 28wt%)10 份,葡萄籽5 份,银杏叶 10 份,知母 5 份。
制备方法:
(1)将5份葡萄籽脱脂粉碎处理后,用60%乙醇溶液回流提取2次,每次30min,得干浸膏,粉碎后备用;
(2)将10份银杏叶烘干粉碎,用60%乙醇, 回流2次,每次1.5h,得干浸膏,粉碎后备用;
(3)将5份知母加8倍量水,在100℃加热2 h,提取 2次,制得干浸膏,粉碎后备用;
(4)将10份深海鱼油加热至35℃-45℃,加入步骤(1)、(2)和(3)制得的干浸膏粉,搅拌,用胶体磨研磨均匀,灌装得1000粒胶囊剂。
实施例2
一种改善老年痴呆的功能性食品,由以下重量份的组分组成:
深海鱼油(含EPA7wt%,DHA 28wt%)50份,葡萄籽80份,银杏叶70份,知母40份。
制备方法:
(1)将10份葡萄籽脱脂粉碎处理后,用60%乙醇溶液回流提取2次,每次30min,得干浸膏,粉碎后备用;
(2)将10份银杏叶烘干粉碎,用60%乙醇,回流2次,每次1.5h,得干浸膏,粉碎后备用;
(3)将20份知母加8倍量水,在100℃加热2 h,提取 2次,制得干浸膏,粉碎后备用;
(4)将50份深海鱼油加热至35℃-45℃,加入步骤(1)、(2)和(3)制得的干浸膏粉,搅拌,用胶体磨研磨均匀,灌装得1000粒胶囊剂。
实施例3
一种改善老年痴呆的功能性食品,由以下重量份的组分组成:
深海鱼油30份,葡萄籽30份,银杏叶30份,知母10份。
制备方法:
(1)将3份葡萄籽脱脂粉碎处理后,用60%乙醇溶液回流提取2次,每次30min,得干浸膏,粉碎后备用;
(2)将3份银杏叶烘干粉碎,用60%乙醇, 回流2次,每次1.5h,得干浸膏,粉碎后备用;
(3)将10份知母加8倍量水,在100℃加热2 h,提取 2次,制得干浸膏,粉碎后备用;
(4)将30份深海鱼油加热至35℃-45℃,加入步骤(1)、(2)和(3)制得的干浸膏粉,搅拌,用胶体磨研磨均匀,灌装得1000粒胶囊剂。
药效实验部分
1.动物及分组
健康4月龄Wistar雄性大鼠54只,体重180~250g。以随机数字表法随机分成空白对照组、模型对照组、市售醒脑胶囊组及实施例1胶囊组、实施例2胶囊组、实施例3胶囊组,每组9只。
2.药物及试剂
D-半乳糖、东莨菪碱由上海恒信化学试剂有限公司提供;
市售治疗老年痴呆的醒脑胶囊;
CAT、MAO测试盒由南京建成生物工程研究所提供。
3.仪器
DT-200小鼠跳台仪:香港兴万电子仪器(厦门)有限公司;
HANGPING电子称(型号:JY4001),上海精科公司天平仪器厂;
可控低温冰箱(型号:BCD-183),青岛澳柯玛;
电热恒温水浴锅(型号:HHS21—4),上海医疗器械五厂:
紫外分光光度仪(型号:LIV-120-02),日本岛津仪器厂;
高速离心机(型号:PrimoLXT-64-01),德国Kendro实验仪器厂。
4.造模与给药
第1周内,空白对照组、模型对照组给予等体积生理盐水,其余各组每日10mL/kg给药,市售醒脑胶囊组2.9g/(kg·d),浓度290g/L、实施例1胶囊组0.54g/(kg·d),实施例2胶囊组0.54g/(kg·d),实施例3胶囊组0.54g/(kg·d)。第2~4周,空白组、模型组给予等体积生理盐水,除空白组外其余各组给药同时颈部注射D-半乳糖[按5mL/(kg·d),浓度0.96%]。第5~6周,停D-半乳糖,改为腹腔注射东莨菪碱[2mL/(kg·d),浓度0.3mg/mL],最后1次给药2h后,各组大鼠进行跳台测试。
5.行为学测试
行为学测试用跳台法:将大鼠放置在跳台箱内,适应5min后通电,从大鼠跳到安全台上开始记时,直到从安全台上跳下,此段时间为潜伏期;跳下时大鼠双足同时接触铜栅视为错误反应,训练5min并记录5min内的潜伏期和错误次数作为学习指标。在最后1次给药2h后进行1次跳台测试,记录各组大鼠5min内触电潜伏时间及错误次数,结果见表1。
6.标本采集和处理
在跳台后当天禁食,第2天每组随机选出8只大鼠,1%戊巴比妥纳35mg/kg腹腔注射麻醉后,行一侧颈总动脉插管采血后断头处死,于冰台上取出脑组织,用生理盐水冲洗,沿矢状缝切开,左半称重后加9倍生理盐水制成10%匀浆,以3000r/min离心15min,取上清液,冻存待测。
7.过氧化氢酶、单胺氧化酶的检测
采用化学比色法测定CAT、MAO的活性含量,结果见表2,测定方法按照试剂盒说明程序进行。
8.统计学方法
数据统计采用SPSSll.0软件,各组数据以(x±s)表示,组间均数比较采用方差分析检验。
表1 各组大鼠学习记忆能力的比较(x±s)
注:与空白对照组比较,**P<0.001;与模型对照组比较,##P<0.001
表2各组大鼠脑组织匀浆中CAT、MAO活性含量的比较(x±s)
注:与空白对照组比较,*P<0.05;与模型对照组比较,#P<0.05。
上述实验采用颈部注射D一半乳糖致亚急性衰老,腹腔注射东莨菪碱损伤M型胆碱能受体,制备复合的AD模型,这种复合模型较单因素AD模型更贴近其复杂的病理变化过程。结果表明,本发明功能性食品胶囊相比较于现在市售的醒脑胶囊,潜伏时间更长,错误次数减少,更能提高模型大鼠的学习记忆能力,提高模型大鼠脑内CAT的含量,降低MAO的活性,拮抗氧化反应,同时防止单胺类神经递质的减少,从而起到防治AD的作用。其中实施例3制备的胶囊的效果优于实施例1和2制备的胶囊的效果。