CN102000410A - 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法 - Google Patents

一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102000410A
CN102000410A CN 201010509732 CN201010509732A CN102000410A CN 102000410 A CN102000410 A CN 102000410A CN 201010509732 CN201010509732 CN 201010509732 CN 201010509732 A CN201010509732 A CN 201010509732A CN 102000410 A CN102000410 A CN 102000410A
Authority
CN
China
Prior art keywords
concentration
white
pyrene
rot fungi
nutrient medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN 201010509732
Other languages
English (en)
Other versions
CN102000410B (zh
Inventor
高大文
温继伟
梁红
张博
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Northeast Forestry University
Original Assignee
Northeast Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Northeast Forestry University filed Critical Northeast Forestry University
Priority to CN2010105097325A priority Critical patent/CN102000410B/zh
Publication of CN102000410A publication Critical patent/CN102000410A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102000410B publication Critical patent/CN102000410B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法，它解决了目前利用生物降解芘的方法只能用于低浓度芘降解的问题。利用白腐真菌共代谢降解芘的方法：将芘加入含有白腐真菌的液体培养基中，在28℃、120r/min条件下降解21±1天，即完成芘的生物降解。本发明方法用于对芘的生物降解。

Description

一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法
技术领域
本发明涉及一种利用微生物共代谢降解芘的方法。
背景技术
白腐真菌是一类使木材呈白色腐朽的真菌，能够分泌胞外氧化酶降解木质素，且降解木质素的能力优于降解纤维素的能力，这些酶可以促使木质腐烂成为淡色的海绵状团块——白腐，故称为白腐真菌。
PAHs(多环芳烃)是人类活动和自然热解导致的一类重要的全球性污染物，它是由矿物燃料的不完全燃烧而形成，并通过大气沉降进入土壤，主要存在于土壤、沉积物、大气颗粒中。多环芳烃在其生成、迁移、转化和降解过程中通过呼吸道、皮肤、消化道进入人体，极大地威胁着人类的健康，有很强的致畸、致癌、致突变作用。特别是多环芳烃中的“芘”，芘作为有机合成原料可用于染料、合成树脂、分散性染料和工程塑料，酰化后可制还原染料艳橙GR及其他多种染料，并可用于制杀虫剂、增塑剂等。由于芘被广泛使用，所以其污染程度及危害程度也较为严重。
虽然，之前曾有利用混合菌系降解芘(中国发明专利其公开号为CN101195810A)，但该混合菌系是由多种微生物按一定比例混合制成，存在配制复杂的缺陷，而且该混合菌系只能用于低浓度芘的降解，芘的浓度大于30mg/L将抑制该混合菌系的生长。
发明内容
本发明是为了解决目前利用生物降解芘的方法只能用于低浓度芘降解的问题，而提供的一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法。
本发明利用白腐真菌共代谢降解芘的方法按以下步骤实现：利用白腐真菌共代谢降解芘的方法按以下步骤实现：将芘加入含有白腐真菌的液体培养基中，并向每升含有白腐真菌的液体培养基中加入5g农业废弃物作为共代谢底物，在28℃、120r/min条件下降解21±1天，即完成芘的生物降解；其中，白腐真菌为偏肿拟栓菌，每50mL液体培养基中加入3片直径为10mm的偏肿拟栓菌菌片；含有白腐真菌的液体培养基每一升由0.44g氯化铵、0.2gKH2PO4、0.05g MgSO4、0.01g CaCl2、1.0g吐温80、1mL无机溶液、0.5mL维生素溶液和余量的双蒸馏水制成；农业废弃物为麸皮。
本发明方法中利用单一白腐真菌——偏肿拟栓菌(记载于公开号为CN101235354A的中国发明专利)对芘进行生物降解。本发明方法可用于芘初始浓度为90mg/L以内的生物降解。
具体实施方式
本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式，还包括各具体实施方式间的任意组合。
具体实施方式一：本实施方式利用白腐真菌共代谢降解芘的方法按以下步骤实现：将芘加入含有白腐真菌的液体培养基中，并向每升含有白腐真菌的液体培养基中加入5g农业废弃物作为共代谢底物，在28℃、120r/min条件下降解21±1天，即完成芘的生物降解；其中，白腐真菌为偏肿拟栓菌，每50mL液体培养基中加入3片直径为10mm的偏肿拟栓菌菌片；含有白腐真菌的液体培养基每一升由0.44g氯化铵、0.2g KH2PO4、0.05g MgSO4、0.01g CaCl2、1.0g吐温80、1mL无机溶液、0.5mL维生素溶液和余量的双蒸馏水制成；农业废弃物为麸皮。
本实施方式所用到的液体培养基与现有白腐真菌液体培养基不同，本实施方式含有白腐真菌的液体培养基中以芘为唯一碳源，而且用氯化铵代替了酒石酸铵，同时没有添加pH为7的HAc-NaAc的缓冲溶液，不必对液体培养基的pH值进行调解。本实施方式中偏肿拟栓菌的漆酶酶活达到24.12U/mL，漆酶酶活水平大幅提升。
本实施方式方法可用于芘初始浓度为90mg/L以内的生物降解。
本实施方式在检测生物降解后液体培养基中芘的含量、计算芘降解率的过程中对投加入液体培养基的菌片也进行提取(采用超声提取：用环己烷和丙酮混合液对菌片进行提取，超声频率为40KHz，超声功率为80瓦，超声提取20min，环己烷和丙酮混合液按环己烷与丙酮1∶1的体积比组成)，以保证被白腐真菌吸附的芘全部脱附出来，消除了因白腐真菌吸附作用而对芘降解率产生的干扰。
具体实施方式二：本实施方式与具体实施方式一的不同点是：含有白腐真菌的液体培养基中的无机溶液中MnSO4的浓度为0.5g/L，NaCl的浓度为1g/L，FeSO4·7H2O的浓度为100mg/L，CoSO4的浓度为100mg/L，ZnSO4的浓度为100mg/L，CuSO4·5H2O的浓度为10mg/L，A1K(SO4)2的浓度为10mg/L，H3BO3的浓度为10mg/L，NaMoO4的浓度为10mg/L。其它步骤及参数与实施方式一相同。
具体实施方式三：本实施方式与具体实施方式一或二的不同点是：含有白腐真菌的液体培养基中的维生素溶液中生物素的浓度为2mg/L，叶酸的浓度为2mg/L，维生素B1的浓度为5mg/L，维生素B2的浓度为5mg/L，维生素B6的浓度为10mg/L，烟酸的浓度为5mg/L。其它步骤及参数与实施方式一或二相同。
具体实施方式四：本实施方式与具体实施方式一、二或三的不同点是：芘在含有白腐真菌的液体培养基中的浓度为10～90mg/L。其它步骤及参数与实施方式一、二或三相同。
具体实施方式五：本实施方式将芘加入含有白腐真菌的液体培养基中，并向每升含有白腐真菌的液体培养基中加入5g农业废弃物作为共代谢底物，在28℃、120r/min条件下降解21天，即完成芘的生物降解；其中，白腐真菌为偏肿拟栓菌，每50mL液体培养基中加入3片直径为10mm的偏肿拟栓菌菌片；含有白腐真菌的液体培养基每一升由0.44g氯化铵、0.2gKH2PO4、0.05g MgSO4、0.01g CaCl2、1.0g吐温80、1mL无机溶液、0.5mL维生素溶液和余量的双蒸馏水制成；农业废弃物为麸皮。
含有白腐真菌的液体培养基中的无机溶液中MnSO4的浓度为0.5g/L，NaCl的浓度为1g/L，FeSO4·7H2O的浓度为100mg/L，CoSO4的浓度为100mg/L，ZnSO4的浓度为100mg/L，CuSO4·5H2O的浓度为10mg/L，AlK(SO4)2的浓度为10mg/L，H3BO3的浓度为10mg/L，NaMoO4的浓度为10mg/L。
含有白腐真菌的液体培养基中的维生素溶液中生物素的浓度为2mg/L，叶酸的浓度为2mg/L，维生素B1的浓度为5mg/L，维生素B2的浓度为5mg/L，维生素B6的浓度为10mg/L，烟酸的浓度为5mg/L。
如果采用以芘作为唯一碳源和能源，不加入共代谢底物麸皮，液体培养基中芘初始浓度为10mg/L其它降解条件相同的情况下，芘的降解率仅为28.3％。
采用本实施方式生物降解，液体培养基中芘初始浓度为10mg/L的情况下，芘的降解率达90％以上；液体培养基中芘初始浓度为30mg/L的情况下，芘的降解率达43％；液体培养基中芘初始浓度为50mg/L的情况下，芘的降解率达31％；液体培养基中芘初始浓度为70mg/L的情况下，芘的降解率达27％；液体培养基中芘初始浓度为90mg/L的情况下，芘的降解率达22％。
本实施方式中以麸皮为共代谢底物对芘进行降解，提高了偏肿拟栓菌对芘的耐受度和降解率。
本实施方式可增加农业废弃物的利用率，变废为宝，而且农业废弃物对人体和环境无毒无害，不会对生物降解操作人员造成二次伤害。
用玉米粉替代本实施方式中的农业废弃物麸皮，并调节生物降解条件，液体培养基中芘初始浓度为10mg/L的情况下，芘的最高降解率仅为41.6％。本实施方式利用麸皮不仅能够变废为宝、降低成本；而且与使用农作物玉米粉相比不仅节约了粮食，芘的降解率也更高。

Claims (4)

1.一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法，其特征在于利用白腐真菌共代谢降解芘的方法按以下步骤实现：将芘加入含有白腐真菌的液体培养基中，并向每升含有白腐真菌的液体培养基中加入5g农业废弃物作为共代谢底物，在28℃、120r/min条件下降解21±1天，即完成芘的生物降解；其中，白腐真菌为偏肿拟栓菌，每50mL液体培养基中加入3片直径为10mm的偏肿拟栓菌菌片；含有白腐真菌的液体培养基每一升由0.44g氯化铵、0.2g KH2PO4、0.05gMgSO4、0.01g CaCl2、1.0g吐温80、1mL无机溶液、0.5mL维生素溶液和余量的双蒸馏水制成；农业废弃物为麸皮。
2.根据权利要求1所述的一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法，其特征在于含有白腐真菌的液体培养基中的无机溶液中MnSO4的浓度为0.5g/L，NaCl的浓度为1g/L，FeSO4·7H2O的浓度为100mg/L，CoSO4的浓度为100mg/L，ZnSO4的浓度为100mg/L，CuSO4·5H2O的浓度为10mg/L，AlK(SO4)2的浓度为10mg/L，H3BO3的浓度为10mg/L，NaMoO4的浓度为10mg/L。
3.根据权利要求1或2所述的一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法，其特征在于含有白腐真菌的液体培养基中的维生素溶液中生物素的浓度为2mg/L，叶酸的浓度为2mg/L，维生素B1的浓度为5mg/L，维生素B2的浓度为5mg/L，维生素B6的浓度为10mg/L，烟酸的浓度为5mg/L。
4.根据权利要求3所述的一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法，其特征在于芘在含有白腐真菌的液体培养基中的浓度为10～90mg/L。
CN2010105097325A 2010-10-15 2010-10-15 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法 Expired - Fee Related CN102000410B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010105097325A CN102000410B (zh) 2010-10-15 2010-10-15 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2010105097325A CN102000410B (zh) 2010-10-15 2010-10-15 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102000410A true CN102000410A (zh) 2011-04-06
CN102000410B CN102000410B (zh) 2012-01-11

Family

ID=43808269

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2010105097325A Expired - Fee Related CN102000410B (zh) 2010-10-15 2010-10-15 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN102000410B (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102443575A (zh) * 2011-12-09 2012-05-09 东北林业大学 微生物混合发酵提高漆酶产量的方法
CN102533709A (zh) * 2012-02-08 2012-07-04 东北林业大学 原油污染土壤复合微生物修复菌剂及其使用方法
CN103691736A (zh) * 2013-11-27 2014-04-02 无锡市金坤生物工程有限公司 一种降解土壤pah污染物的修复复合酶制剂及用其修复土壤的方法
CN105441339A (zh) * 2016-01-05 2016-03-30 上海应用技术学院 一种烟曲霉及其应用
CN108853865A (zh) * 2018-08-30 2018-11-23 广州大学 一种降解呋虫胺的方法
CN109142677A (zh) * 2018-08-03 2019-01-04 昆明学院 一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法
CN115944879A (zh) * 2023-01-16 2023-04-11 广州大学 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1746293A (zh) * 2005-07-21 2006-03-15 南开大学 高效降解芘基因工程菌及其构建
CN101195810A (zh) * 2007-11-30 2008-06-11 华南理工大学 一种多环芳烃高效降解菌系及其应用
CN101235354A (zh) * 2008-03-03 2008-08-06 东北林业大学 一种培养白腐真菌分泌漆酶的培养基
CN101381154A (zh) * 2008-10-28 2009-03-11 南京大学 生物膜深度处理饮用水源苯并芘方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1746293A (zh) * 2005-07-21 2006-03-15 南开大学 高效降解芘基因工程菌及其构建
CN101195810A (zh) * 2007-11-30 2008-06-11 华南理工大学 一种多环芳烃高效降解菌系及其应用
CN101235354A (zh) * 2008-03-03 2008-08-06 东北林业大学 一种培养白腐真菌分泌漆酶的培养基
CN101381154A (zh) * 2008-10-28 2009-03-11 南京大学 生物膜深度处理饮用水源苯并芘方法

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102443575B (zh) * 2011-12-09 2012-12-05 东北林业大学 微生物混合发酵提高漆酶产量的方法
CN102443575A (zh) * 2011-12-09 2012-05-09 东北林业大学 微生物混合发酵提高漆酶产量的方法
CN102533709A (zh) * 2012-02-08 2012-07-04 东北林业大学 原油污染土壤复合微生物修复菌剂及其使用方法
CN103691736A (zh) * 2013-11-27 2014-04-02 无锡市金坤生物工程有限公司 一种降解土壤pah污染物的修复复合酶制剂及用其修复土壤的方法
CN103691736B (zh) * 2013-11-27 2015-04-29 无锡市金坤生物工程有限公司 一种降解土壤pah污染物的修复复合酶制剂及用其修复土壤的方法
CN105441339A (zh) * 2016-01-05 2016-03-30 上海应用技术学院 一种烟曲霉及其应用
CN105441339B (zh) * 2016-01-05 2019-05-28 上海应用技术学院 一种烟曲霉及其应用
CN109142677B (zh) * 2018-08-03 2021-05-25 昆明学院 一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法
CN109142677A (zh) * 2018-08-03 2019-01-04 昆明学院 一种DOM影响白腐菌降解PAHs的研究方法
CN108853865A (zh) * 2018-08-30 2018-11-23 广州大学 一种降解呋虫胺的方法
CN108853865B (zh) * 2018-08-30 2020-06-12 广州大学 一种降解呋虫胺的方法
CN115944879A (zh) * 2023-01-16 2023-04-11 广州大学 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法
CN115944879B (zh) * 2023-01-16 2024-03-29 广州大学 一种利用白腐真菌降解多环芳烃芘与苯并[a]芘的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN102000410B (zh) 2012-01-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102000410B (zh) 一种利用白腐真菌共代谢降解芘的方法
CN103205382B (zh) 一种用于净化河道污水的微生物菌剂及其制备方法
CN102676492B (zh) 一种高效秸秆降解复合菌剂及其有机肥制备方法
CN102765972B (zh) 一种有机垃圾腐熟菌剂及其制备方法和应用
CN102217708B (zh) 一种绿色饲料添加剂及其制作方法
CN106278493B (zh) 分级酶解法制备含寡糖海藻有机肥的方法
CN109182157A (zh) 一种改善养殖环境的复合菌种制剂及其制备方法
CN102586110A (zh) 兼性厌氧微生物复合菌剂及其制备方法和其在降解秸秆中的应用
CN101591070A (zh) 湖泊水体生态修复方法
CN105062919A (zh) 一种处理污水及污泥的微生物菌剂
CN102020492A (zh) 麦秸秆高效降解复合菌有机肥及其制备方法
CN102745821B (zh) 用于污泥减量的复合微生物菌剂及其制备方法和应用
CN105948842B (zh) 畜禽粪便资源化生产地衣芽孢杆菌微生物肥料
CN105613960A (zh) 一种发酵中草药饲料添加剂及其制备方法
CN101973806A (zh) 纳米化复合型液态生物肥料及生产方法
CN104962290A (zh) 一种菜地土壤专用修复剂
Dulay et al. Records of wild mushrooms in the Philippines: A review
CN102173943B (zh) 一种西洋参复合底肥
CN101817589A (zh) 一种微生物生态床及使用该微生物生态床治理河涌的方法
CN101919488B (zh) 利用黄浆水和废糖蜜发酵生产生物活性饲料的方法
CN105948873A (zh) 一种富含锌、硒元素的茶树专用有机肥及其制备方法
CN110157630A (zh) 一种应用于高盐有机废水的复合菌剂及其制备方法
CN104030750A (zh) 一种抗莲藕腐败病新型环保生物有机肥
CN105087417A (zh) 一种好氧处理食品加工废水的复合微生物菌剂及其应用
CN111747786A (zh) 一种复合发酵的土壤修复剂及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120111

Termination date: 20131015