CN101967519A - 一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法 - Google Patents
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Abstract
一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱方法，其特征在于包括以下步骤：先提取凡纳滨对虾基因组并稀释备用，再利用凡纳滨对虾fx151微卫星DNA核心序列，在其序列两端设计特异性引物，然后使用该引物对凡纳滨对虾不同群体或者群体内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶检测；利用产物出现的条带银染显色后进行分析，确定每个个体的基因型，从而获得凡纳滨对虾在fx151遗传标记基因座位的多态性遗传变异图谱。本发明可快捷的获得凡纳滨对虾fx151遗传标记基因座位呈现高度遗传变异的多态性图谱，方便简单，所得结果可直观检测出凡纳滨对虾每个个体的基因型。
Description
技术领域
本发明属于分子生物学DNA标记技术与应用领域，具体涉及海洋经济动物对虾属凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）fx151微卫星DNA标记的鉴定遗传变异图谱的方法。
背景技术
凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei），俗称南美白对虾（Penaeus vannamei），属节肢动物门（Arthropoda）、甲壳纲（Crustacea）、十足目（Decapoda）、游泳亚目（Natantia）、对虾科（Penaeidae）、对虾属（Penaeus）、Lito-penaeus亚属，是广温广盐性热带虾类，是目前世界上三大养殖对虾（中国对虾、斑节对虾、凡纳滨对虾）中单产量最高的虾种，在对虾渔业及养殖业中占有重要地位。
1988年7月，凡纳滨对虾由中国科学院海洋研究所从美国夏威夷引进我国，1992年8月人工繁殖获得了初步的成功，1994年通过人工育苗获得了小批量的虾苗，1999年深圳天俊实业股份有限公司与美国三高海洋生物技术公司合作，引进美SPF凡纳滨对虾种虾和繁育技术，成功地培育出了SPF凡纳滨对虾苗。至此，凡纳滨对虾在我国被广泛养殖。
近年来，凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）在我国不论是海水，还是低盐度海水及淡水中养殖都取得了一定的进展。目前，凡纳滨对虾已是我国养殖对虾的绝对优势品种。2007年，我国凡纳滨对虾养殖产量101万吨，占我国对虾养殖产量的80 % , 同年，我国对虾养殖产量126万吨，占世界对虾养殖总产量的 37 %。但病害和养殖使得凡纳滨对虾资源迅速衰减，尤其自90年代虾病爆发以来，凡纳滨对虾养殖业受到重挫，虾病的流行使抗病品系选育成为必要和需要解决的问题。
本发明做出之前，国内外有类似的研究报告，国内中科院海洋研究所徐鹏等（2001）发表的《中国对虾微卫星DNA的筛选》，张留所（2006）等发表的《凡纳滨对虾分子标记筛选、连锁图谱构建和QTL定位》国外Franklin Pérez等（2005）在凡纳滨对虾中找到了112对微卫星，目前，利用微卫星标记在凡纳滨对虾多态性图谱的构建、特异性遗传标记等方面的应用尚未报道。
发明内容
本发明的目的是为了简便快速的鉴定凡纳滨对虾fx151遗传标记基因座位的遗传变异图谱，丰富现有的凡纳滨对虾微卫星标记，寻找更多的多态性好、稳定性高的微卫星标记，提供了一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法。
本发明是通过以下方案实现的：一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于包括以下步骤：首先提取凡纳滨对虾基因组并稀释备用，再利用凡纳滨对虾fx151微卫星DNA核心序列，在其序列两端设计特异性引物；然后使用该引物对凡纳滨对虾不同群体或者群体内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶检测；利用产物出现的条带银染显色后进行分析，确定每个个体的基因型，从而获得凡纳滨对虾在fx151遗传标记基因座位的的多态性遗传变异图谱（如图1所示）。
提取凡纳滨对虾基因组DNA，将其稀释成50ng/ul，每个反应加入1ul，反应总体积为20ul。
fx151微卫星DNA序列的特异性引物核苷酸序列分别为：正链 5’- TGCCAATAAACAAGTTGAGCC -3’，负链 5’- GTTACTCATTACTTGCCTTCC -3’，退火温度为50℃。
其PCR反应加样参数为：正反向引物各为0.2 uM, 0.2 mM dNTP, 1*PCR Buffer, 2.0 mM Mg2+, 0.6 U Taq酶，50 ng DNA模板，用双蒸水补足到20ul。使用该引物的时设置PCR程序参数为：94℃预变性5min；然后94℃变性 30s，50℃退火1 min，72℃延伸 1 min，重复这个循环35次；之后延伸5 min，4 ℃保存。
PCR产物的检测：基因组DNA模板进行PCR扩增，其产物在聚丙烯酰胺凝胶上电泳，利用长度差异为50 bp的DNA ladder及PBR322 Marker（上海生工）作为分子量标记，扩增产物用6%-8%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染系统进行检测： PCR产物中加上变性Buffer 之后95℃变性5分钟，之后立刻置于冰上降温，使用微量进样器上样5ul，85 W 恒功率电泳至溴酚兰带至胶板的底端，约120 分钟， 1‰的硝酸银染色，显色液（30 g NaOH，0.5g四硼酸钠， 8 ml 37 % 的甲醛溶解至2 L超纯水）显色，超纯水终止显色，干燥放在UTA-2100XL 型号扫描仪中扫描保存图片，分析多态性，确定各个个体的基因型，并进一步得到凡纳滨对虾fx151遗传标记基因座位的多态性图谱。
本发明适用于凡纳滨对虾种质资源和遗传多样性分析，家系鉴定，分子群体遗传学，遗传图谱的构建，重要经济性状的定位，功能基因的研究，进一步用于辅助凡纳滨对虾分子遗传育种和养殖。
现有的凡纳滨对虾微卫星标记还不够丰富，建立凡纳滨对虾遗传连锁图谱，物理图谱，以及QTL定位需要更多的多态性好、稳定性高的微卫星标记。与现有技术相比，本发明具有以下优点：
（1）本发明可以简便快速的鉴定凡纳滨对虾fx151微卫星遗传标记基因座位的遗传变异图谱，方法简便，所得结果可直观的检测出凡纳滨对虾每个个体的基因型。
（2）本发明的核心是fx151微卫星DNA标记特异性引物，其核苷酸序列为：正链 5’- TGCCAATAAACAAGTTGAGCC -3’，负链 5’- GTTACTCATTACTTGCCTTCC -3’，可在凡纳滨对虾总群检测中呈现高度遗传变异的多态性。
（3）本发明主要应用于凡纳滨对虾种质资源和遗传多样性分析，家系鉴定，分子群体遗传学，遗传图谱的构建，重要经济性状的定位，功能基因的研究。
附图说明
图1 本发明的fx151微卫星DNA标记在57尾凡纳滨对虾个体中的基因型图谱，编号1-57为凡纳滨对虾的57个个体，M为PBR322标准分子量。
具体实施方式
实施例
首先提取凡纳滨对虾基因组并稀释备用，再利用凡纳滨对虾fx151微卫星DNA核心序列，在其序列两端设计特异性引物；然后使用该引物对凡纳滨对虾不同群体或者群体内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶检测；利用产物出现的条带银染显色后进行分析，确定每个个体的基因型，从而获得凡纳滨对虾在fx151遗传标记基因座位的多态性图谱（如图1所示）。
1 提取凡纳滨对虾基因组
1）取凡纳滨对虾肌肉30 mg置于2.0 ml的离心管中，剪碎，加入600 ul STE裂解缓冲液（100 mmol/L NaCl，10 mmol/L Tris-Cl，pH 8.0；1 mmol/L EDTA，pH 8.0），50 μl SDS以及5 μl蛋白酶K（20mg/ml），混匀
2）56 ℃ 消化处理，直到裂解液澄清， 6000 rpm 离心3 min
3）取上清，加入等体积饱和酚（250 μl）、氯仿/异戊醇（24:1）（250 μl），轻轻上下颠倒混匀数分钟，抽提去除蛋白， 10000转离心10 min
4）取上清液，重复一次步骤3，直至水相和有机相之间无蛋白层为止
5）取上清液，加入等体积氯仿/异戊醇（500 μl），轻轻晃动20分钟，10000转离心10分钟
6）取上清液，加入十分之一体积的 NaAc（3 mol/L，PH 值为 5.2），缓慢摇匀，加2倍体积的预冷的无水乙醇，放置于-80℃冰箱中大约30分钟，10000转离心10 min。将核酸沉淀于管底
7）弃上清，加70 %乙醇（1 ml）洗涤沉淀,4℃ 离心5 min（8000 rpm）
8）弃酒精，将离心管放在真空干燥器中干燥沉淀，直到乙醇全部挥发
9）加入一定量（100 μl）无菌超纯水或1×TE缓冲液和5 μl RNaseA（10 mg/ml），37℃消化RNA 30 min，-20℃保存备用。
2 微卫星引物的设计
通过微卫星查找软件SSRHunter查找LV_HC_RA074D14f (GeneBank: FE121978.1)EST序列得到核心重复序列(TTGC)n, n=5-10，利用引物设计软件Primer Primer 5.0对上述EST序列上下游进行引物设计，得到LV_HC_RA074D14f微卫星引物，其序列为：
正链 5’- TGCCAATAAACAAGTTGAGCC -3’，负链5’- GTTACTCATTACTTGCCTTCC -3’，退火温度：50℃。
3 PCR扩增
PCR扩增的加样参数：正反向引物各为0.2 uM, 0.2 mM dNTP, 1*PCR Buffer, 2.0 mM Mg2+, 0.6 U Taq酶，50 ng DNA模板，用双蒸水补足到20ul。PCR反应程序：94℃预变性5min；然后94℃变性 30s，55℃退火1 min，72℃延伸 1 min，重复这个循环35次；之后延伸5 min，4 ℃保存。
4电泳检测
PCR扩增产物用6%-8%的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染系统进行检测： PCR产物中加上变性Buffer 之后95℃变性5分钟，之后立刻置于冰上降温，使用微量进样器上样5ul，85 W 恒功率电泳至溴酚兰带至胶板的底端，约120 分钟， 质量比1‰的硝酸银染色，显色液（30 g NaOH，0.5g四硼酸钠， 8 ml 37 % 的甲醛溶解至2 L超纯水）显色5min，超纯水终止显色，干燥放在UTA-2100XL 型号扫描仪中扫描保存图片，分析多态性，得到凡纳滨对虾fx151遗传标记基因座位的多态性图谱（如图1所示）。
Claims (5)
1.一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于包括以下步骤：先提取凡纳滨对虾基因组并稀释备用，再利用凡纳滨对虾fx151微卫星DNA核心序列(TTGC)n, 其中n=5-10，在其序列两端设计特异性引物，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1-2所示；然后使用该引物对凡纳滨对虾不同群体或者群体内个体的基因组DNA进行PCR扩增，对PCR产物进行变性聚丙烯酰胺凝胶检测；利用产物出现的条带银染显色后进行分析，确定每个个体的基因型，从而获得凡纳滨对虾在fx151遗传标记基因座位的多态性遗传变异图谱。
2.根据权利要求1所述的凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于其PCR反应加样参数为：正反向引物各为0.2 uM, 0.2 mM dNTP, 1*PCR Buffer, 2.0 mM Mg2+, 0.6 U Taq酶，50 ng DNA模板，用双蒸水补足到20ul；使用该引物的时设置PCR程序参数为：94℃预变性5分钟；然后94℃变性 30秒，50℃退火1 分钟，72℃延伸 1分钟，重复这个循环35次；之后延伸5 分钟。
3.根据权利要求1所述的凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于对PCR产物的检测：基因组DNA模板进行PCR扩增，其产物在6%-8%聚丙烯酰胺凝胶上电泳，干燥后在扫描保存图片，分析多态性，得到各个个体的基因型，并进一步确定fx151遗传标记基因座位的多态性遗传变异图谱。
4.根据权利要求3所述的凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于在PCR产物的检测中利用长度差异为50 bp的DNA ladder及PBR322 Marker作为电泳的分子量标记。
5.根据权利要求3所述的凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法，其特征在于PCR扩增产物用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳-银染系统进行检测： PCR产物中加上变性Buffer 之后95℃变性5分钟，之后立刻置于冰上降温，使用微量进样器上样5ul，85 W 恒功率电泳至溴酚兰带至胶板的底端，120 分钟后，用质量1‰的硝酸银染色，用30 g NaOH，0.5g四硼酸钠， 8 ml 体积37 % 的甲醛溶解至2 L超纯水的显色液显色，后用超纯水终止显色。
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| CN 201010258776 Pending CN101967519A (zh) | 2010-08-20 | 2010-08-20 | 一种凡纳滨对虾fx151微卫星DNA标记鉴定fx151遗传变异图谱的方法 |
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|---|---|
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Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107385094A (zh) * | 2017-09-08 | 2017-11-24 | 中山大学 | 一种用于凡纳滨对虾种质资源鉴定的多重pcr引物、方法及应用 |
| CN108611429A (zh) * | 2018-05-10 | 2018-10-02 | 中山大学 | 凡纳滨对虾抗病性相关est-ssr分子标记及其应用 |
| CN110343767A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-10-18 | 天津市水产研究所 | 凡纳滨对虾微卫星分子标记特异性引物及其在遗传多样性分析中的应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1488764A (zh) * | 2002-10-09 | 2004-04-14 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 中国对虾b683微卫星标记的检测技术 |
| WO2007057915A1 (en) * | 2005-11-21 | 2007-05-24 | Bose Institute | A micro satellite dna marker used for identifying disease resistant populations of penaeus monodon |
-
2010
- 2010-08-20 CN CN 201010258776 patent/CN101967519A/zh active Pending
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1488764A (zh) * | 2002-10-09 | 2004-04-14 | 中国水产科学研究院黄海水产研究所 | 中国对虾b683微卫星标记的检测技术 |
| WO2007057915A1 (en) * | 2005-11-21 | 2007-05-24 | Bose Institute | A micro satellite dna marker used for identifying disease resistant populations of penaeus monodon |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 《上海水产大学学报》 20070131 贾智英等 凡纳滨对虾微卫星DNA的筛选及其特性的研究 第11-15页 1-5 第16卷, 第1期 * |
| 《广东海洋大学学报》 20090831 谢丽等 凡纳滨对虾4个选育群体遗传多样性的SSR分析 第5-9页 1-5 第29卷, 第4期 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107385094A (zh) * | 2017-09-08 | 2017-11-24 | 中山大学 | 一种用于凡纳滨对虾种质资源鉴定的多重pcr引物、方法及应用 |
| CN108611429A (zh) * | 2018-05-10 | 2018-10-02 | 中山大学 | 凡纳滨对虾抗病性相关est-ssr分子标记及其应用 |
| CN108611429B (zh) * | 2018-05-10 | 2022-06-07 | 中山大学 | 凡纳滨对虾抗病性相关est-ssr分子标记及其应用 |
| CN110343767A (zh) * | 2019-06-25 | 2019-10-18 | 天津市水产研究所 | 凡纳滨对虾微卫星分子标记特异性引物及其在遗传多样性分析中的应用 |
| CN110343767B (zh) * | 2019-06-25 | 2023-01-13 | 天津市水产研究所 | 凡纳滨对虾微卫星分子标记特异性引物及其在遗传多样性分析中的应用 |
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