CN101967149B

CN101967149B - 18F取代硝基标记的吡唑并[1,5-a]嘧啶类化合物及制备和应用

Info

Publication number: CN101967149B
Application number: CN 200910157361
Authority: CN
Inventors: 齐传民; 刘航; 李桂霞; 贺勇; 许荆立; 丁瑞; 张淑婷; 王潇; 冯曼
Original assignee: Beijing Normal University
Current assignee: Beijing Normal University
Priority date: 2009-07-28
Filing date: 2009-07-28
Publication date: 2013-01-16
Anticipated expiration: 2029-07-28
Also published as: CN101967149A

Abstract

本发明设计了一类新型以硝基为标记位点进行¹⁸F标记的吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物，其特征在于：一端为母体结构3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶；另一端为2-氟18-4-硝基苯甲酰结构或3-氟18-5-硝基苯甲酰结构；两端通过中间一个含取代基的二胺连接，此二胺中间碳链长度为n+1(n＝1，2，3，4)，取代基位于远离母体结构吡唑并[1，5-a]嘧啶的胺基的α位，为氢、甲氧酰基、羧基，连结点位于母体结构吡唑并[1，5-a]嘧啶的7位，其结构如式A。该种化合物合成简单、标记率高。该种化合物在肿瘤组织中吸收多，且清除较慢，而在正常组织和血液中摄取低或清除快。且具有很高的肿瘤/血液比值和肿瘤/正常组织比值，其中肿瘤/脑正常组织比值很高。本发明还涉及该种化合物作为PET脑肿瘤显像剂的应用。

R₁＝H，COOCH₃，COOHR₂＝(2-¹⁸F-4-dinitro)，(3-¹⁸F-5-dinitro)n＝1，2，3，4 式A

Description

18F取代硝基标记的吡唑并[1,5-a]嘧啶类化合物及制备和应用

技术领域：

本发明涉及一类新型通过硝基离去法进行¹⁸F标记的吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物及其化学制备方法和作为正电子发射断层显像(PET)的肿瘤(尤其是脑肿瘤)显像剂的应用。

背景技术：

肿瘤的早期诊断是当今医学的一大热点，而正电子发射断层显像(PET)作为一种越来越普及的手段受到极大重视，因而肿瘤的早期诊断的突破有赖于PET肿瘤显像剂的开发。

放射性核素¹⁸F因为其优良的核素性质，非常适合作为PET的显像核素。

肿瘤的发生与细胞周期直接相关。细胞周期蛋白E与细胞周期依赖性蛋白激酶2(CyclinE-CDK₂)复合物在细胞周期G₁/S期的转换点直接相关，是多种癌基因的下游靶点基因，在许多肿瘤发生中起关键作用。临床研究发现CDK₂在肿瘤细胞中有过量表达，其在肿瘤细胞中的含量与在正常组织细胞中的含量有明显差异。

吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物是一类新型的CDK₂抑制剂，是近年来抗肿瘤药物的研究热点之一。由于CDK₂单晶结构的测定，吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物作用于CDK₂的构效关系已较为明确，对这种CDK₂小分子抑制剂的研究已经到了比较成熟的阶段。虽然¹⁸F标记的吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物作为PET肿瘤显像剂的研究尚未见报道，但是CDK₂在肿瘤细胞中有过量表达，作为CDK₂抑制剂的吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物进行¹⁸F标记后，有其成为特异性和靶向性PET肿瘤显像剂的潜在可能性。

发明内容：

第一、本发明提供了肿瘤摄取高、特异性好的放射性¹⁸F标记的吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物。其特征在于：一端为母体结构3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶；另一端为2-氟18-4-硝基苯甲酰结构或3-氟18-5-硝基苯甲酰结构；两端通过中间一个含取代基的二胺连接，此二胺中间碳链长度为n+1(n＝1，2，3，4)，取代基位于远离母体结构吡唑并[1，5-a]嘧啶的胺基的α位，为氢、甲氧酰基、羧基，连结点位于母体结构吡唑并[1，5-a]嘧啶的7位，其结构如式A：

式A

其制备主要分为标记前体化合物的合成及前体化合物的¹⁸F标记和后处理两个部分。具体步骤如下：

一.标记前体化合物(式B)的合成

式B

1.1吡唑并[1，5-a]嘧啶母核(式C中标号4)的合成，合成路线如式C：

式C

1.1.1乙氧亚甲基丙二睛(式C中标号1)的合成：

将丙二睛9.9g(150mmol)、原甲酸三乙酯33.3g(225mmol)和醋酸酐38.4g(376.5mmol)加入到250ml单口烧瓶中。回流反应6h后，冷却，加入活性炭后加热回流30min，热过滤，用热乙醇洗涤滤饼后，滤液置于冰箱中过夜，抽滤得淡黄色片状晶体，产率84％。

1.1.2 3-氨基-4-氰基吡唑(式C中标号2)的合成：

乙氧亚甲基丙二睛(式C中标号1)15g(123mmol)在室温下缓慢加入到85％水合肼12ml(248mmol)中，水浴加热反应一小时，在反应体系中加入10ml水。冰箱中放置过夜，抽滤，水洗滤饼，烘干得淡黄色固体，产率81％。

1.1.3 3-氰基-5-甲基-7-羟基吡唑并[1，5-a]嘧啶(式C中标号3)的合成：

将3-氨基-4-氰基吡唑(式C中标号2)4g(37mmol)和乙酰乙酸乙酯5g(4.2ml，38mmol)加入33ml冰乙酸中，回流反应4h。反应完毕后冷却至室温，过滤，依次用冰醋酸和水淋洗滤饼各3次，得黄色固体。用乙酸乙酯重结晶得到纯品，产率78％。

1.1.4 3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶(式C中标号4)的合成：

在250ml的四颈瓶中加入3-氰基-5-甲基-7-羟基吡唑并[1，5-a]嘧啶(C中标号3)1.67g(9.95mmol)后，加入吡啶0.82ml(10.55mmol)后，缓慢滴加三氯氧磷4.05ml(43.2mmol)，加毕缓慢加热至85℃后开始搅拌，于120℃反应1h。冷却至60℃以下后加入氯仿150ml。回流反应1h。冷却至0-5h加入冷水90ml，抽滤除去不溶物，分出有机相，水洗两次，每次水90ml。悬蒸除去氯仿后得橙黄色固体3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶(式C中标号4)，产率87％。

1.2对母核的支链进行修饰，合成标记前体化合物(式B)，合成路线如式D：

式D

1.2.1式D中化合物5的合成：

1)R₁＝H时：将碳链长为n+1的二胺40mmol加入到60ml乙醇中，搅拌过程中逐批加入3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶(式D中标号4)，加热回流反应4h，冷却后减压蒸馏除去大部分溶剂，抽滤，滤饼用甲醇和乙醚重结晶，得到固体产品。

2)R₁＝COOCH₃时：将R₁取代为COOCH₃(R构型)碳链长为n+1的二胺盐酸盐1mmol溶解到20ml重蒸乙腈中，加入重蒸TEA 0.42mL(3mmol)后搅拌反应10min，加入3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶(式D中标号4)0.19g(1mmol)后，加热回流反应约15min，TLC显示反应完全后，冷却，旋蒸除去乙腈，得到粗产品，不进一步纯化直接用于下一步反应。

1.2.2式D中化合物6(标记前体化合物)的合成：

将3mmol式D中化合物5溶解到20ml二氯甲烷中后，一次性加入重蒸三乙胺0.42ml(3mmol)后搅拌反应5min，加入2，4-二硝基苯甲酸或3，5-二硝基苯甲酸2mmol和HOBt(1-羟基苯并三氮唑)0.30g(2.2mmol)，反应混合物冷却到0℃后，滴加DCC 0.46g(2.2mmol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕后继续低温反应0.5h后升至室温反应过夜，TLC显示反应结束后，抽滤除去生成的大量白色沉淀，有机相以饱和碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠水溶液洗涤后无水硫酸钠干燥，旋去溶剂，以乙酸乙酯和石油醚为展开剂，硅胶柱柱层析得到固体产品，用乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂重结晶得到纯品。

二.¹⁸F目标化合物(式A)的放射化学合成

2.1前体化合物的¹⁸F标记，标记路线如式E：

式E

¹⁸F^-被阴离子柱QMA捕获后，用含10mg K2.2.2和3mg K₂CO₃的1mL乙腈和0.5mL水的混合液将其冲洗到反应瓶中，向反应瓶中加入0.5mL的无水乙腈，加热到100℃，不断的通入氮气，利用乙腈和水共沸除水，待将溶剂吹干后，再分别加入0.5mL的无水乙腈，重复此操作两次，将5mg前体化合物(式B)溶于无水N，N-二甲基甲酰胺溶液倒入反应瓶中，迅速升温至120℃，维持该温度反应30min左右，停止反应，加入大约10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-Pak C18柱，将滤液收集到1号瓶中(主要是没有参与反应的¹⁸F^-)，然后再用10ml水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中(确保将没有参与反应的¹⁸F^-彻底淋洗干净)，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2ml乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，得到¹⁸F标记产物，HPLC纯化后，放射化学纯度＞99％。

2.2部分标记物(式E中标号7a-2、7b-2)的水解，如式F：

式F

¹⁸F标记的化合物(式F中标号7a-2、7b-2)用氮气将溶液中的乙腈吹干后，在水和甲醇的混合溶液中用一定量的氢氧化锂水解，再用一定量的1mol/L的盐酸酸化，得到¹⁸F标记产物(式F中标号8a、8b)。

第二、本发明上述¹⁸F标记对硝基苯甲酰基氨基酸衍生物物作为PET肿瘤显像剂的应用。

本发明具有以下优良特性：

1)本发明中用于进行¹⁸F标记前体化合物合成简便，原料廉价易得。标记总时间短，有效放射性损失少。

2)本发明的¹⁸F标记的化合物具有适宜肿瘤显像，特别是脑肿瘤显像的优良生物性能。主要有以下几点：

2.1本发明的化合物在血液、肌肉组织和脑内清除速率很快，在肿瘤中有较高初始摄取且清除相对较慢，在其它脏器中初始摄取低或清除很快，从而能在注射后较短时间达到一个肿瘤/背景高比值的时段，尤其是在半小时和一小时之间，肿瘤和相关组织的比值较大，有实验为证：

按实施例制得的¹⁸F标记化合物的乙腈溶液，用氮气吹干乙腈，再用生理盐水将产物稀释为8-10gCi/0.1mL作为注射液。取出三份0.1mL的注射液，分别加入9.9mL生理盐水，混匀后，从每份中分别再取出0.1mL，作为标准溶液，待测定小鼠各组织和脏器的放射性计数的同时测定其放射性计数，取平均值即1％ID使用。

将昆明鼠随机分为五组，每组3只。从尾静脉注射¹⁸F标记产物的注射液0.1mL(8-10gCi)，分别于注射后的5min、15min、30min、60min、120min将各组小鼠断头处死，将其迅速解剖，取脑、心、肝、肺、肾、后腿骨、肌肉、小肠、大肠、脾、血液、肿瘤等组织和脏器，擦干后称重，并测量其各自的放射性计数，计算出其各组织和脏器的放射性摄取量％ID/g，每次实验取三组平行数据。

实施例中¹⁸F标记产物(式A中R₁＝H、R₂＝2-氟18-4-硝基、n＝1)实验结果如表1所示：

表1¹⁸F标记产物(式A中R₁＝H、R₂＝2-氟18-4-硝基、n＝1)的荷S180瘤小鼠的体内生物分布数据

(％ID/g±SD，n＝3)

注：T表示肿瘤

由表1可以看出，该¹⁸F标记产物肿瘤初始摄取量可观且滞留较好；肝、肾等非靶组织均显示了较快的清除速率并且在血中清除很快且彻底。该¹⁸F标记产物的肿瘤/脑、肿瘤/血和肿瘤/肉值较大，特别是肿瘤/脑的值，其比值在30min时达到峰值10.44，之后到60min仍有最大值的83％，而此时肿瘤/血和肿瘤/肉比值分别达到最大值1.66和1.57。虽然肿瘤/脑、肿瘤/血和肿瘤/肉的最佳值没有重合，但是数据表明60min可以作为PET肿瘤显像较为合适的时间。

2.2与目前技术相比，本发明的¹⁸F标记化合物具有创新性，体现在生物性能一些方面的明显的优势，举例如下：

2.2.1与目前临床上PET肿瘤显像应用最广泛的¹⁸F-FDG相比，本发明的¹⁸F标记化合物在肿瘤与脑正常组织的区分上，有一些方面的优势。有实验为证：

按2.1相同实施方法进行¹⁸F-FDG的荷瘤小鼠体内分布实验，整理数据后得到的¹⁸F-FDG的肿瘤/脑比值如表2所示：

表2¹⁸F-FDG在荷S180瘤小鼠体内的肿瘤/脑比值

对比表1、表2可以看出，本发明的¹⁸F标记化合物比¹⁸F-FDG的肿瘤/正常脑组织区分度好。这使得本发明的¹⁸F标记化合物进行脑肿瘤显像时可能得到比¹⁸F-FDG更高质量的图像。

2.2.2与目前具有很大应用潜力的PET肿瘤显像剂¹⁸F-FET相比，本发明的¹⁸F标记化合物在肿瘤与正常组织的区分上，也有明显优势。有实验为证：

按2.1相同实施方法进行¹⁸F-FET的荷瘤小鼠体内分布实验，整理数据后得到的¹⁸F-FDG的肿瘤/正常组织(选取对显像效果影响最明显的脑、血和肌肉组织)比值如表3所示：

表3¹⁸F-FET在荷S180瘤小鼠体内的肿瘤/正常组织比值

对比表1、表3可以看出，本发明的¹⁸F标记化合物在30-60min区段各项肿瘤与正常组织比值明显高于¹⁸F-FET相应值，特别是肿瘤/脑比值更是后者的3倍左右。虽然在60-120min，¹⁸F-FETT/B比值稳定在30-60min水平甚至还有所增加，但考虑到全身分布速率、正常注射剂量的大小及放射性药物按放射性指数衰变规律损失的特性，最佳显像时间应在注射后60min左右，而在此时间点，本发明的¹⁸F标记化合物各项比值对¹⁸F-FET具有明显优势，这使得本发明的¹⁸F标记化合物进行肿瘤显像特别是脑肿瘤显像时可能得到比¹⁸F-FDG更高质量的图像。

综上所述，本发明所提供的¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物与现有技术相比，在肿瘤与某些正常组织的对比上，具有一定优势，具有作为肿瘤显像剂特别是脑肿瘤显像剂的潜力，又具有制备简单、标记步骤短、耗时少的特点。

具体实施方式：

以下通过具体实施方式可以使本发明得到更清楚的说明，但本发明并不局限于以下实施例。

实施例

按照以下步骤制备的是式A中R₁＝H、R₂＝2-氟18-4-硝基、n＝1的化合物，包括标记前体(式B中R₁＝H、R₂＝2-氟18-4-硝基、n＝1的化合物)的合成和前体化合物的¹⁸F标记两个部分。

1)标记前体(式B中R₁＝H、R₂＝2-氟18-4-硝基、n＝1化合物)的合成

1.1乙氧亚甲基丙二睛的合成，见式G：

式G

1.2 3-氨基-4-氰基吡唑的合成，见式H：

式H

乙氧亚甲基丙二睛15g(123mmol)在室温下缓慢加入到85％水合肼12ml(248mmol)中，水浴加热反应一小时，在反应体系中加入10ml水。冰箱中放置过夜，抽滤，水洗滤饼，烘干得淡黄色固体，产率81％。

1.3 3-氰基-5-甲基-7-羟基吡唑并[1，5-a]嘧啶的合成，式I：

式I

将3-氨基-4-氰基吡唑4g(37mmol)和乙酰乙酸乙酯5g(4.2ml，38mmol)加入33ml冰乙酸中，回流反应4h。反应完毕后冷却至室温，过滤，依次用冰醋酸和水淋洗滤饼各3次，得黄色固体。用乙酸乙酯重结晶得到纯品，产率78％。

1.4 3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶的合成，见式J：

式J

在250ml的四颈瓶中加入3-氰基-5-甲基-7-羟基吡唑并[1，5-a]嘧啶1.67g(9.95mmol)后，加入吡啶0.82ml(10.55mmol)后，缓慢滴加三氯氧磷4.05ml(43.2mmol)，加毕缓慢加热至85℃后开始搅拌，于120℃反应1h。冷却至60℃以下后加入氯仿150ml。回流反应1h。冷却至0-5h加入冷水90ml，抽滤除去不溶物，分出有机相，水洗两次，每次水90ml。悬蒸除去氯仿后得橙黄色固体3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶(式C中标号4)，产率87％。

1.5 3-氰基-5-甲基-7-(2-氨基-乙氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶的合成，见式K：

式K

将乙二胺2.7ml(40mmol)加入到60ml乙醇中，搅拌过程中逐批加入3-氰基-5-甲基-7-氯吡唑并[1，5-a]嘧啶，加热回流反应4h，冷却后减压蒸馏除去大部分溶剂，抽滤，滤饼用甲醇和乙醚重结晶，得砖红色固体，产率81％。mp：203-205℃；IR(KBr)υ(cm^-1)：3354.0，3293.4，3112.1，2943.6，2860.8，2220.5，1636.7，1577.7，1458.9，1310.9，1193.1，944.0；¹H-NMR(DMSO，400MHz)δ(ppm)：8.56(s，1H，Pyrazole-H)，6.44(s，1H，Pyrimidine-H)，3.38-3.36(m，5H，NH₂CH₂CH₂NH-)，2.79-2.75(m，2H，NH₂CH₂CH₂NH-)，2.45(s，3H，-CH₃)；¹³C-NMR(DMSO，100MHz)δ(ppm)：162.67，150.59，147.28，146.16，114.51，88.54，77.77，44.46，40.21，24.54；MS(EI)m/z：216.11，found：217.29[M+H]⁺；Anal.calcd for C₁₀H₁₂N₆：C 55.54，H 5.59，N 38.86，found：C 55.63，H 5.73，N 38.64.

1.6N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-二硝基苯甲酰胺的合成，见式L：

式L

3-氰基-5-甲基-7-(2-氨基乙基氨基)吡唑并[1，5-a]嘧啶(14)0.50g(3mmol)溶解到20ml二氯甲烷中后，一次性加入重蒸三乙胺0.42ml(3mmol)后搅拌反应5min，加入2，4-二硝基苯甲酸0.42g(2mmol)和HOBt(1-羟基苯并三氮唑)0.30g(2.2mmol)，反应混合物冷却到0℃后，滴加DCC 0.46g(2.2mmol)的二氯甲烷溶液5mL，滴加完毕后继续低温反应0.5h后升至室温反应过夜，TLC显示反应结束后，抽滤除去生成的大量土黄色沉淀，有机相以饱和碳酸氢钠水溶液，饱和氯化钠水溶液洗涤后无水硫酸钠干燥，旋去溶剂后得到红色油状物，硅胶柱柱层析(乙酸乙酯∶石油醚＝2∶3)得到黄色固体，用乙酸乙酯和石油醚的混合溶剂重结晶得淡黄色固体。产率51％。mp：243-244℃；IR(KBr)υ(cm^-1：3328.4，3259.3，3089.9，2928.4，2850.8，2224.5，1626.5，1585.1，1537.8，1350.3；¹H-NMR(DMSO，400MHz)δ(ppm)：9.11-9.08(m，1H，-(CO)NHCH₂CH₂NH-)，8.75(d，1H，J＝2.2Hz，Ar-H)，8.75(dd，1H，J¹＝8.4Hz，J²＝2.2Hz，Ar-H)，8.58(s，1H，Pyrazole-H)，8.46-8.44(m，1H，-(CO)NHCH₂CH₂NH-)，7.90(d，1H，J＝8.4Hz，Ar-H)，6.48(s，1H，Pyrimidine-H)，3.61-3.54(m，4H，-(CO)NHCH₂CH₂NH-)，2.46(s，3H，-CH₃)；¹³C-NMR(DMSO，100MHz)δ(ppm)：164.20，162.62，150.47，147.86，147.17，146.91，146.08，136.85，130.57，128.02，119.63，114.32，88.34，77.78，40.79，38.21，24.47；MS(EI)m/z：410.11，found：410.49[M]⁺；Anal.calcd for C₁₇H₁₄N₈O₅：C 49.76，H3.44，N 27.31，found：C 49.52，H 3.83，N 27.12.

2)前体N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2，4-二硝基苯甲酰胺的标记的¹⁸F标记，见式M：

式M

¹⁸F^-被阴离子柱QMA捕获后，用含10mg K2.2.2和3mg K₂CO₃的1mL乙腈和0.5mL水的混合液将其冲洗到反应瓶中，向反应瓶中加入0.5mL的无水乙腈，加热到100℃，不断的通入氮气，利用乙腈和水共沸除水，待将溶剂吹干后，再分别加入0.5mL的无水乙腈，重复此操作两次，将5mgN-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2，4-二硝基苯甲酰胺溶于无水N，N-二甲基甲酰胺溶液倒入反应瓶中，迅速升温至120℃，维持该温度反应30min左右，停止反应，加入大约10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-PakC18柱，将滤液收集到1号瓶中(主要是没有参与反应的¹⁸F^-)，然后再用10mL水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中(确保将没有参与反应的¹⁸F^-彻底淋洗干净)，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2mL乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，得到N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2-氟18-4-硝基苯甲酰胺，经HPLC(带放射性探头)分离纯化(HPLC条件：流速5mL/min，流动相为乙腈∶水＝70％∶30％，保留时间为3.2min)。

脂水分配系数是生物活性化合物的一项重要理化参数，对N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2-氟18-4-硝基苯甲酰胺脂水分配系数测定实施如下：

在离心试管中依次加入2ml正辛醇和1.9mL pH为7.4的磷酸盐缓冲溶液，以及放射性活度约为8-10μCi的N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2-氟18-4-硝基苯甲酰胺的0.1mL水溶液，充分振荡后离心分层5min，分别取有机相和水相各0.1mL于干净试管中，分别测定其放射性计数N，计算分配系数P＝N_有/N_水，重复本操作3次后取平均值，对P取对数，logP即为该¹⁸F标记产物的脂水分配系数。测得N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2-氟18-4-硝基苯甲酰胺的脂水分配系数为0.69。

异常毒性检查：

按中华人民共和国药典2005年版所述方法进行。将10只正常昆明小鼠(18-20g)尾静脉注入0.5mL(37MBq)N-(2-(3-氰基-5-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-7-氨基)乙基-2-氟18-4-硝基苯甲酰胺注射液(相当于数百倍于成人用量)，观察48小时。小鼠生长正常，无死亡及不良反应现象发生。解剖后观察，未见任何器官损伤。异常毒性检查符合放射性药物质量要求。

Claims

1.一种¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物，其结构如式A：

R₁＝H；

R₂＝2-¹⁸F-4-硝基；

n＝1；

式A。

2.权利要求1所述的¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物的前体化合物，其结构如式B：

R₁＝H；

R₂＝2，4-二硝基；

n＝1；

式B。

3.权利要求1所述的¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物的制备方法，包括以下步骤：

¹⁸F^-被阴离子交换树脂柱QMA捕获后，用含10mg K_2.2.2，化学名称为4，7，13，16，21，24-六氧杂-1，10-二氮杂双环[8，8，8]二十六烷，和3mg K₂CO₃的1mL乙腈和0.5mL水的混合液将其冲洗到反应瓶中，向反应瓶中加入0.5mL的无水乙腈，加热到100℃，不断的通入氮气，利用乙腈和水共沸除水，待将溶剂吹干后，再加入0.5mL的无水乙腈，重复此操作两次，将5mg权利要求2所述的前体化合物溶于无水N，N-二甲基甲酰胺，倒入反应瓶中，迅速升温至120℃，维持该温度反应30分钟，停止反应，加入10mL水将反应体系稀释，再通过Sep-Pak C18柱，将滤液收集到1号瓶中，然后再用10ml水洗涤柱子，将滤液收集到2号瓶中，用氮气将Sep-Pak C18柱吹干，用2mL乙腈洗涤C18柱，将滤液收集到3号瓶中，用氮气将溶液中的乙腈吹干后，得到权利要求1中¹⁸F标记的目标产物。

4.权利要求3所述的¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物的制备方法，其特征在于：使用DMF作为反应溶剂，K_2.2.2为相转移催化剂。

5.权利要求1所述的¹⁸F标记吡唑并[1，5-a]嘧啶类化合物作为用于制备正电子发射断层肿瘤显像剂的应用。