CN101966199B - 土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用涉及医药、保健技术领域,其特征在于制备各种内外科手术后、产科手术后、肿瘤化疗期间、烧烫伤医疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂,以及制备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品或保健食品添加剂。具有高效无毒,安全性高的特点。
Description
技术领域
本发明属于医药、保健开发技术领域,涉及中草药土党参的医药新用途,具体的说就是土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用。
背景技术
手术是一把“双韧剑”,在治疗的同时,也会对机体产生一定创伤,从而引起一系列内分泌及代谢的改变,导致消耗增加,还会引起出血、疼痛、水肿、便秘、感染等系列并发症。术后可能因为微栓塞、麻药、低氧、低血、低灌注、系统炎症反应引起神经元损害,神经递质失调,神经元可塑性受抑,进而导致术后认知功能障碍,精神行为障碍以及由于焦虑、恐惧、欣快感和感情淡漠引起的睡眠周期障碍,增加患者住院时间和医疗费用,并导致患者社会活动能力减退,严重影响生活质量。
多糖是许多中药的活性成分之一,也是食品的重要营养成分,在生物体内作为能量物质,存在于一切细胞膜结构中,参与细胞的各种生理活动。近年来,人们发现中药多糖具有提高免疫力,抗病毒、细菌感染疗效、降低伤口处感染的几率,防止由此诱发的伤口发炎、反复破裂等问题;促进伤口细胞的再生,可以帮助加快伤口愈合,缓解机体对于疼痛的敏感性,能够降低疼痛给病人带来的痛苦。多糖容易吸收,在补充营养的同时,不会给身体增加任何负担,同时还具有增强胃肠道功能的作用。中药多糖无毒副作用,是一类有很大开发潜力的免疫调节剂。
土党参为桔梗科植物金钱豹Campanumoea javanica Bl.的根,在民间习用药食资源,具有健脾益气,补虚润肺,通乳止咳,通血等功效,主治气虚乏力,肺虚咳嗽,脾虚泄泻,产后体虚,病后或手术后体虚、产后流血不止,神经衰弱等症。常被用来炖鸡、炖瘦肉、煎水等。我们课题组在开展民族药中具有神经营养作用的物质研究时,从众多植物中筛选出黔产药食兼用植物土党参,提取制备得到土党参多糖,于2005年申请国家专利《土党参多糖、衍生物及其制备方法和应用》,已获国家专利授权,专利号:ZL200510200024.2。为了更好、更快的开发NGF样土党参多糖,我们开展了土党参多糖作为促进术后恢复的应用研究。
发明内容
本发明的目的是对专利《土党参多糖、衍生物及其制备方法和应用》(专利号:ZL200510200024.2)所制备的粗多糖和纯多糖的应用进一步研究,特别是在制备药物和保健食品中的应用。
为实现上述目的,本发明对土党参多糖的应用开展了以下研究:
1、药物急性毒性试验及给药剂量研究;
2、药物改善认知功能障碍功能性评价;
3、药物对低血低氧灌注脑损伤的预防作用;
4、药物对低血低氧灌注脑损伤的治疗作用;
5、药物抗疲劳功能性评价;
6、药物耐缺氧功能性评价;
7、药物促进消化吸收功能性评价;
8、药物造血功能功能性评价;
9、药物增强免疫功能性评价;
10、药物促进创伤愈合作用;
11、药物抗肿瘤以及化疗后增效减毒功效。
根据上述研究发现:
1、土党参多糖无任何毒副作用,经小鼠急性毒性实验表明,在灌服3.75g/kg剂量(为成人用量的185倍)后未见死亡。
2、土党参多糖具有保健作用,研究证明土党参多糖具有促进消化吸收、抗疲劳、耐缺氧、提高免疫力、增强造血功能和改善认知功能障碍的作用,可以广泛用于制备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品。
3、土党参多糖具有促进创伤修复的作用,能促进创伤愈合、或由于创伤造成的机体功能降低,如认知功能障碍、低血低氧灌注损伤,红细胞、白细胞降低,外周血清总蛋白低、食欲不振,精神不好方面功能的恢复,可以用于制备促进术后恢复的药物及药物制剂。
4、土党参多糖具有抗肿瘤以及肿瘤化疗后增效减毒的作用,可以用于制备抗肿瘤以及肿瘤化疗后增效减毒的药物及药物制剂。
本发明土党参多糖在制备药物和保健食品中的应用,在于制备各种内外科手术后、产科手术后、肿瘤化疗期间、烧烫伤医疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂,以及制备对于代谢下降、体弱易病、胃肠功能减退、食欲不振、免疫力低下方面有保健作用的保健食品或保健食品添加剂。。
上述药物制剂是以土党参多糖为原料,或以土党参多糖为原料接受蛋白质、维生素、脂肪酸为辅料加工而成的任何一种药剂学上所述的剂型。
上述促进功能恢复的药物为促进创伤愈合、或由于创伤造成的机体功能降低,如认知功能障碍、低血低氧灌注损伤,红细胞、白细胞降低,外周血清总蛋白低、食欲不振,精神不好方面功能的恢复的药物或药物制剂。
上述肿瘤化疗期间促进功能恢复的药物及药物制剂,是指抗肿瘤以及肿瘤化疗期间增效减毒的药物及药物制剂。
附图说明
图1是小鼠学习记忆获得障碍模型成绩(跳台法)。
图2是东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍实验结果(Y水迷宫法)。
图3是给药10天后小鼠跳台实验记忆潜伏期。
图4是给药20天后小鼠跳台实验记忆潜伏期成绩。
图5是给药30天后小鼠跳台实验记忆潜伏期成绩。
图6是各组小鼠海马区HE切片图(HE×200)。
图7是各组小鼠海马区NGF免疫组化切片图(免疫组化×200)。
图8是各组小鼠海马CA1区凋亡细胞图(TUNEL法,×400)。
图9是各组小鼠术后6h,24h,3d,7d全血中红细胞数目。
图10是各组小鼠术后6h,24h,3d,7d,15d全血中白细胞数目。
图11是各组小鼠术后6h,24h,3d,7d,15d全血中血红蛋白含量。
图12是各组小鼠术后6h,24h,3d,7d外周血血清中白蛋白含量。
图13是各组小鼠术后6h,24h,3d,7d外周血血清中总蛋白含量。
图中标记:CJP1-M.土党参多糖纯品CJP-1中剂量组(150mg/kg),CJP1-H.土党参多糖纯品CJP-1高剂量组(300mg/kg),CJP-L.土党参粗多糖低剂量组(75mg/kg),CJP-M.土党参粗多糖中剂量组(150mg/kg),CJP-H.土党参粗多糖高剂量组(300mg/kg),YX.中药阳性对照银杏叶提取物组(100mg/kg),NMDP.西药阳性对照尼莫地平组(100mg/kg)。
下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明,并非对本发明的限定,依照本领域公知的现有技术,本发明的实施方式并不限于此,因此凡依照本公开内容所作出的本领域的等同替换,均属于本发明的保护范围。
具体实施方式
实施一、土党参多糖作为制备促进术后恢复的用途
土党参药材经水提,醇沉,制备成土党参粗多糖;进一步柱层析纯化,制备土党参多糖纯品CJP-1。再采用常规技术以土党参多糖为原料制备成片剂、胶囊剂、口服液等剂型。
实施二、给药剂量的研究
实验部分参考《中药药理研究方法学》,急性毒性实验表明,小鼠在灌服土党参多糖3.75g/kg剂量(为成人用量的185倍)后未见死亡,表明土党参多糖安全、无毒副作用。
实施三、药物改善改善认知功能障碍作用研究
土党参多糖对化学品致认知功能障碍有保护作用,作为术后产品具有较理想的预防因麻醉、心理因素等导致的记忆功能障碍。实施内容如下:
1、给药及分组
KM小鼠(体重20±2g,SPF级,重庆医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(渝)2007-001),20±2℃下饲养。经过跳台、Y水迷宫筛选98只合格小鼠,雄性各半,随机分7组,空白组、模型组、脑复康对照(500mg/kg)、土党参粗多糖高剂量(300mg/kg,CJP-H)、土党参粗多糖低剂量(150mg/kg,CJP-M)、土党参多糖纯品高剂量(300mg/kg,CJP1-H)、土党参多糖纯品低剂量(150mg/kg,CJP1-M)。
2、方法及结果
2.1东莨菪碱致记忆获得障碍动物模型连续给药7d,末次给药30min后,空白组注射生理盐水,其他组腹腔注射氢溴酸东莨菪碱3mg/kg,10min后进行跳台训练,记录学习成绩,次日测试记忆成绩;第9、10d进行Y水迷宫训练测试,按上述给药方案注射氢溴酸东莨菪碱,记录第10d成绩。
结果显示,模型组在给予东莨菪碱后学习潜伏期明显增长,与空白组具有极显著差异。与模型组相比,药物组能改善东莨菪碱致记忆障碍,在实验剂量范围显示一定量效关系,与阳性对照脑复康无显著差异(附图1)。
小鼠Y水迷宫游泳学习记忆成绩结果表明,模型组小鼠Y水迷宫游泳的潜伏期大于空白组、药物组、对照组,而药物组之间以及与空白组间没有统计差异,在给定剂量范围内显示出较好的量效关系,药物组与阳性对照脑复康组无显著差异(附图2)。
2.2三氯化铝致动物学习记忆障碍模型连续给药7天,于第8天空白组皮下注射等容量0.9%氯化钠溶液,其余各组每天皮下注射1次氯化铝120mg·kg-1,连续注射3d,进行避暗法测试,记录24h后小鼠进人暗箱的潜伏期,5min内受到电击的次数。
结果见表1,与空白组相比,模型组小鼠错误次数明显增多(P<0.01),说明铝离子在体内大量蓄积使小鼠的学习记忆能力明显下降。与模型组比较,药物组小鼠错误次数明显减少,潜伏期增加。提示,药物能够改善由三氯化铝所致的小鼠学习记忆功能衰退。
注:与模型组比,*p<0.05,**p<0.01
2.3亚硝酸钠致记忆巩固障碍动物模型小鼠连续给药7d,末次给药30min后,进行跳台法训练。训练后,空白组小鼠颈前部皮下注射生理盐水,其它组小鼠颈前部皮下注射120mg/kg亚硝酸钠,24h后测试记忆成绩。
亚硝酸钠可以造成脑部缺氧从而破坏记忆保持,导致记忆巩固障碍。从表2,可以看出,在本实验剂量范围内,与模型组相比,空白组、药物组、对照组(脑复康组)记忆成绩、错误次数有显著差异。模型组潜伏期显著缩短,在5min内错误次数显著增加。
表2是各组小鼠记忆巩固障碍模型成绩(n=9-14)
注:与模型组比,*p<0.05,**p<0.01
2.440%乙醇致记忆再现缺失动物模型小鼠连续给药7d,末次给药30min后,进行暗箱法训练。24h后测试前,对照组灌服生理盐水,其它组灌服40%乙醇0.1mL/10g,30min后测试记忆能力。
暗暗法显示(表3),与模型组相比,空白组、药物组、对照组记忆潜伏期均显著增加,不同剂量药物组呈现量效关系。而与空白组相比,药物组、对照组,小鼠潜伏期和5min内错误次数无统计学差异。
注:与模型组比,*p<0.05,**p<0.01
因此,在实验所选剂量范围,药物具有很好的改善东莨菪碱、亚硝酸钠、40%乙醇和三氯化铝引起的小鼠认知功能障碍的作用,能改善因手术微栓塞、麻药、低氧、低血、低灌注等引起的神经元损害,神经递质失调,神经元可塑性受抑而导致的术后认知功能障碍、精神行为障碍。
实施四、药物对低血低氧灌注脑损伤的预防作用
1、实验动物及分组给药:
KM小鼠(体重26±2g,SPF级,重庆医科大学实验动物中心提供,许可证号:SCXK(渝)2007-001),20±2℃下饲养。分空白组、模型组、土党参多糖组(200mg/kg),雌雄各半,每组12只,按0.4ml/20g灌胃给药,空白组、模型组给予生理盐水,术前连续给药3天。
2、建模及结果
第3天灌胃0.5h后,按照《常用医药研究动物模型》(苗明三编著)制备模型。
术后连续给药,于第3天,处死小鼠,按以下项目开展实验,结果见表4,模型组脑指数、脑组织水分含量显著偏大,主要是缺血再灌注引起的脑水肿,土党参多糖可以起到保护脑组织神经元受损;术后模型组胸腺指数、脾脏指数低于正常值,土党参多糖组可以提高胸腺、脾脏指数。
表4是土党参多糖对小鼠脏器的影响(x±s,n=10)
与模型组比*p<0.05,**p<0.01
实施五、药物对低血低氧灌注脑损伤的治疗作用
1、模型的制备方法
如同实施四中(1)方法造模,整个过程中控制环境温度保持在30℃。
2、分组及给药
小鼠随机分为:①假手术组,②模型组,③土党参多糖高低剂量组(75mg/kg,CJP-L),④土党参多糖中剂量组简称(150mg/kg,CJP-M),⑤土党参多糖高剂量组(300mg/kg,CJP-H),⑥银杏叶片对照组(100mg/kg,YX),⑦尼莫地平片对照组(100mg/kg,NMDP)。
3、检测方法及结果
3.1行为学的检测方法及结果
3.1.1跳台法检测及实验结果
《常用医药研究动物模型》方法(苗明三编著,第6页)。
10天后跳台结果可以看出(附图3),与假手术组相比,模型组、给药组小鼠记忆潜伏期明显缩短(p<0.01),说明建模成功,而药物组间(低、中、高剂量)以及中、西药对照组小鼠记忆潜伏期没有显著差异。
在给药20天后,模型组小鼠记忆潜伏期与假手术相比依然保持极显著差异,与模型组相比,药物组记忆潜伏期显著延长(p<0.05或p<0.01)。药物组在本实验范围能较好的小鼠的学习记忆障碍,与中、西药对照相比,组间差异无统计学意义(附图4)。
30天后小鼠记忆潜伏期测试成绩(跳台法),与10天,20天相比,各组成绩有所提高。与假手术组相比,模型组小鼠记忆潜伏期依然保持极显著差异(p<0.01),与模型组相比,药物组小鼠记忆潜伏期极显著缩短(p<0.01)。药物组在本实验范围具有较好的改善小鼠的认知障碍,与中、西药对照相比,组间差异无统计学意义(附图5)。
3.1.3Y水迷宫法
与假手术组比*p<0.05,**p<0.01;与模型组#p<0.05##p<0.01
由表5中可以看出,建模给药10天后小鼠Y水迷宫学习记忆成绩差异无统计学意义。20,30天后,与假手术组相比,模型组小鼠Y水迷宫学习记忆成绩模型组显著延长(p<0.05),药物组、对照组与假手术相比差异不显著。与模型组相比,给药组和模型组小鼠Y水迷宫学习记忆成绩具有显著差异(p<0.05或者p<0.01),而高剂量组和对照舒血宁组无统计学意义。
与假手术组比*p<0.05**p<0.01;与模型组#p<0.05,##p<0.01
由表6可以看出,小鼠经过连续5天的Y水迷宫训练后,游泳时间(学习记忆潜伏期)呈现出递减规律,模型组小鼠潜伏期变化不是很大,其它组的潜伏期显著缩短。
3.1.4Morris水迷宫法
与假手术组比*p<0.05,**p<0.01;与模型组#p<0.05,##p<0.01
由表7可以看出,小鼠在经过连续5天的Morris水迷宫训练后,游泳时间(学习记忆潜伏期)呈现出递减规律,模型组小鼠潜伏期变化不是很大,其它组的潜伏期显著缩短。在第3天,模型组定向航行时间显著高于假手术组、药物组、银杏叶对照组,说明药物具有提高学习记忆能力。第6,7天撤去平台(表8),药物组、假手术组、中药对照组小鼠经过原相限的时间和次数与模型组相比具有显著性差异(p<0.05或者p<0.01)。
表8是各组小鼠Morris水迷宫空间探索实验结果(x±s,n=8-9)
与假手术组比*p<0.05,**p<0.01;与模型组#p<0.05,##p<0.01
3.2病理切片的制备
3.2.1、HE切片
HE染色光镜,200倍下观察(附图6):假手术组大脑海马结构层次清楚,神经细胞排列整齐、大小形态正常,核膜完整,核仁清晰,未见细胞变性、坏死。模型组海马区结构层次不清楚,神经细胞排列紊乱,胶质纤维萎缩紊乱,大部分神经细胞肿胀,变性坏死,胞浆红染加深,核膜不清,核及核仁消失。给药低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组,海马病理改变较模型组病变减轻,各层细胞排列尚规则,个别神经元变性坏死,在所给剂量范围内呈现一定的量效关系。
3.2.2免疫组化
(1)各组小鼠脑细胞形态观察结果
假手术组小鼠海马区神经元,排列整齐,形态完整,细胞数量较多,细胞核圆大且核仁明显。模型组可见神经细胞变性坏死,表现为排列紊乱,正常结构破坏消失,细胞数量减少,胞核浓缩呈梭形或三角形或消失。进一步观察发现脑缺血小鼠海马区完整锥体细胞数目与模型组自然恢复相比明显增多(附图7)。
(2)各组小鼠脑海马区脑源性神经生长因子的表达
假手术组光镜下观察脑源性神经生长因子免疫组化染色阳性细胞表现为,神经元的胞浆及突起染成棕黄色,其表达数量较少、染色较浅、光密度较大。模型组脑源性神经生长因子表达与假手术组相比明显增多,神经元的胞浆大量棕黄色颗粒,染色较深,部分神经元可见长的轴突,状如蝌蚪,表现为NGF阳性细胞数增多,光密度较小。给药组、对照组脑源性神经生长因子阳性细胞表达同模型组相比均明显减少,其中给药组光密度和阳性细胞数值接近假手术水平。而海马区中细胞总数,模型组相对数目较少,给药组显示出较好的神经元保护作用,已接近正常水平。由表9可以看出,与模型组相比,假手术组、给药组在实验范围内,光密度、阳性细胞数均有显著差异,而给药做在本实验中与假手术无统计学差异。而对照组与模型组光密度、阳性细胞数相比,具有极显著差异。
与模型组*p<0.05,**p<0.01;与假手术组a p<0.05,aap<0.01
3.2.3TUNEL法测定凋亡细胞
TUNEL阳性细胞,即凋亡细胞,细胞核中有棕色颗粒。计数每张切片1个高倍视野中TUNEL阳性细胞数及总细胞数(附图8)。
缺血再灌注后两组TUNEL染色阳性细胞见表10,药物组TUNEL阳性细胞率均低于模型组,与模型组相比中、高剂量均具有显著性差异(P<0.01),与阳性对照银杏叶相比差异不大。
与模型组比*p<0.05,**p<0.01;与假手术组ap<0.05,aa p<0.013.3化指标检测及结果
3.3.1样品的制备
3.3.1.1外周血
行为学检测完毕后,摘眼球取血,制备抗凝血,-20℃贮藏备用。
3.3.1.210%脑组织匀浆制备
3.3.2指标测定及结果
3.3.2.1自由基损伤
表11显示,与假手术组相比,模型组小鼠大脑组织中MDA、NO明显增高,而GSH、SOD含量显著降低(p<0.01),说明GSH、SOD不足,过量生成MDA、NO的神经毒性作用。而药物组以及对照组能显著降低MDA、NO含量(p<0.05或p<0.01),药物组且有一定的量效关系。而药物组小鼠脑组织中GSH、SOD的含量随着用药剂量的增大,趋于上升,发挥一定的抗自由基损伤作用。
与假手术比,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比,△P<0.05,△△P<0.01
3.3.2.2乙酰胆碱递质的变化
与假手术比,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比,△P<0.05,△△P<0.01;
与尼莫地平对照比,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与银杏叶提取物对照比,#P<0.05,##P<0.01
结果如表12,造模30d后,模型组小鼠外周血ACh含量较假手术组有明显的升高(P<0.01),给药组中剂量、高剂量外周血ACh含量接近正常值,低剂量尚未回降至正常水平(P<0.01),但明显高于模型组(P<0.05)。上述结果提示,药物的应用能使小鼠外周血中的ACh含量保持在正常水平。通过组间比较,发现模型组小鼠大脑组织中ACh含量显著低于假手术组(P<0.05),而ACHE的含量却极显著的升高(P<0.01)。与模型组相比,药物3个剂量组乙酰胆碱不同层次的增加,表明给予土党参多糖可以抑制乙酰胆碱酯酶活性,增加脑组织中乙酰胆碱的含量。
3.3.2.3能量代谢异常
如表13,与假手术组相比,模型组大脑组织中Na+-K+-ATP酶、Ca2+Mg2+-ATP酶活力显著减低(P<0.01),葡萄糖和多糖代谢异常(P<0.05或P<0.01)。与模型组相比,药物组低、中、高剂量能不同程度改善小鼠大脑组织代谢障碍,促使恢复到正常水平。
与假手术比,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比,△P<0.05,△△P<0.01;
与假手术比,*P<0.05,**P<0.01;与模型组比,△P<0.05,△△P<0.01;
3.3.2.4NGF活性
NGF具有保护、修复受损神经元的作用,实验表明(附图7),药物具有较好的神经元保护作用。表8显示,与模型组相比,假手术组、药物组在实验范围内,光密度、阳性细胞数均有显著差异,而药物组在本实验中与假手术无统计学差异。而对照组与模型组光密度、阳性细胞数相比,具有极显著差异。
2.5其它
由表14可以看出,30天后,与假手术组相比,模型组小鼠脑组织中多糖含量偏高,而葡萄糖含量、蛋白质含量偏低,主要来自脑代谢异常、脑水肿。而外周血中假手术和模型组多糖含量差异不显著,但葡萄糖含量差异极显著,可见模型组小鼠葡萄糖代谢障碍。与模型组相比,给药组脑组织中多糖含量、葡萄糖含量、蛋白质含量,外周血中多糖含量、葡萄糖含量与模型组有所不同,基本恢复到正常水平。
结果证实土党参多糖可以改善小鼠体内糖代谢,增强GSH、SOD水平,有效清除MDA、NO自由基的神经毒性作用、增加乙酰胆碱的释放、改善能量代谢、发挥NGF的保护作用,对受损神经元具有修复、保护作用,改善低血低氧灌注引起的神经元损伤、认知功能障碍。可见土党参多糖在改善因手术、意外伤害导致的认知障碍、神经元损伤、代谢异常有一定作用。
实施六、药物抗疲劳试验评价
实验参照卫生部颁布《功能学评价检验方法》(2003):
由表15可以看出,在给予药物20d后,与空白组比,给药组小鼠爬杆时间、负重游泳时间显著延长,可见在本实验范围内药物具有抗疲劳作用。结果表明,土党参多糖能够增强体质,可以用于改善体虚体弱、久病初愈者,可用于促进术后恢复保健食品。
与空白组比*p<0.05,**p<0.01
实施七、药物耐缺氧试验评价
实验参照卫生部颁布《功能学评价检验方法》(2003),给药15天后,实验结果如表16:小鼠低温游泳实验表明,土党参多糖纯品(CJP-1)和粗品(CJP)具有较好的耐缺氧功能,纯品优于粗品,呈现一定量效关系;常压耐缺氧实验,空白组小鼠存活时间(25.48±4.63min)低于200mg/kg给药剂量组存活时间(32.38±4.28min);亚硝酸钠中毒实验中,200mg/kg给药剂量组存活时间(20.34±5.74min)大于空白组存活时间(27.72±7.94min)。由此可见,实验动物在给予土党参多糖后表现出一定的耐缺氧能力,有效提高机体载氧及输送能力,改善机体缺氧耐受性,可避免因手术导致体内缺氧引起的缺氧损伤,有利于术后恢复。
表16是小鼠给药15天后低温游泳实验(n=10)
与空白组比*p<0.05,**p<0.01
实施八、药物促进消化吸收功能评价
参照卫生部颁布《功能学评价检验方法》(2003)实验,结果表明,空白组(1.54±0.37mmol/l)血液中木糖含量低于给药组(1.61±0.26mmol/l),提示药物能提高肠道吸收,可以改善胃肠道功能。消化吸收功能的提高,利于营养物质的消化吸收,调节因手术带来的机体失衡,充足的营养物质会加速术后恢复的效果。
实施九、药物增强造血功能试验评价
按照《常用医药研究动物模型》(苗明三编著,第509页)制备血小鼠失血性贫血血虚症动物模型,结果(附图9,附图10,附图11)所示,小鼠在失血后红细胞数目、白细胞数目、血红蛋白含量处于动态变化当中,与空白组比较,药物组可以提高小鼠造血功能,提高红细胞数目,血红蛋白含量,增强载氧能力,同时提高白细胞数目,增强免疫。
实施十、药物增强免疫试验评价
由实施五中表4结果可见,术后模型组胸腺指数、脾脏指数低于正常值,而土党参多糖组可以提高胸腺、脾脏指数。由实施9,可见土党参多糖可以提高小鼠体内白细胞水平,提高免疫活性(附图9)。提高免疫活性,增强机体适应能力,避免因手术后免疫低下引起的发炎、感染等不良症状,保障术后又好又快的恢复。
实施十一、促进术后创伤恢复
小鼠颈部手术后,体内营养指标处于动态变化当中,中可以看出术后药物组低剂量组(150mg/kg)、高剂量组(300mg/kg)外周血血清中白蛋白含量高于空白组(附图12)。同时发现术后药物组低剂量组(150mg/kg)、高剂量组(300mg/kg)外周血血清中总蛋白含量高于空白组(附图13)。其中给药组小鼠颈部切开创面愈合时间、创面形态、创面抗拉强度均优于空白组,可见具有NGF样作用的土党参多糖具有促进细胞分化的作用是显著,在促进术后创面恢复的作用是确切的。
实施十二、药物抗肿瘤以及化疗后增效减毒功效
按照《新药药理学研究方法》(吕秋军主编)开展实验,结果如下表17可以看出,的土党参多糖高、低剂量组都有明显的抑瘤效果,以大剂量作用尤为显著,抑瘤率为65.24±19.34%。CJP高、低剂量组分别与CTX合用时的抑瘤率比单用CTX组有所提高,以CJPH+CTX组更为明显;CTX与CJP大、小剂量组联合用药组q>0.85但小于1.25,表明在CTX与高剂量两药合用时有相加作用,提示CJP能提高CTX的抑瘤效果。
从表18可见,CJP与CTX合用时抑瘤率升高,以CJPH+CTX组最为明显。CTX常规剂量组治疗后毒副作用较大,外周血WBC数、胸腺指数和脾指数与阴性对照组比较均显著降低,统计学检验有意义(P<0.01)。CJP与CTX合用后,可使外周血WBC、胸腺指数和脾指数升高,与CTX常规剂量组相比有统计学意义(P<0.05);与阴性对照组相比,WBC、胸腺指数仍比较低,有显著性差异(P<0.05或0.01),而RBC、脾指数与阴性对照组相比无显著性差异(P>0.05)。提示CJP能降低CTX的毒副作用。
由此可见,土党参多糖具有一定抗肿瘤活性,与环磷酰胺联合用药具有增效减毒的功效,可以用作化疗术后的协同治疗或保健作用,降低因化疗带来的毒副作用,有利于机体更好的恢复到正常水平。
与空白对照组比,*P<0.05,**P<0.01;与CTX组比,△P<0.05,△△P<0.01;
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1.土党参多糖在制备药物或保健食品中的应用,其特征是用于制备增强术后免疫的保健食品或促进术后创伤恢复的药物。
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