CN101953974A - 一种治疗eb病毒感染者的中药 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗EB病毒感染者的中药,其是由如下重量百分含量的原料制成:黄芪10-30%、甘草5-10%、太子参10-30%、黄芩10-30%、野菊花10-30%、重楼10-30%、五指毛桃10-30%、石上柏10-30%、猫爪草5-25%;本发明的中药主要应用于鼻咽癌高发区之EB病毒感染人群,即鼻咽癌高危人群的治疗,通过治疗EB病毒感染进而达到早期防治鼻咽癌之目的。
Description
技术领域
本发明属于中药领域,特别是一种抗EB病毒感染的中药。
背景技术
鼻咽癌是我国华南地区高发的恶性肿瘤,目前研究认为,鼻咽癌的发生是由包括遗传、环境和饮食、EB病毒(Epstein-Barr Virus,EB病毒)感染等多种因素综合所引起的,其中EB病毒感染是引起鼻咽癌的重要原因之一;若能通过防治EB病毒感染进而防治鼻咽癌,则可真正实现鼻咽癌的一级(病因)预防,意义重大。
EB病毒是人类疱疹病毒家族成员之一,系DNA病毒。最早于1964年由Epstein和Barr在研究非洲儿童恶性淋巴瘤时发现,现以发现者命其名。无论在鼻咽癌高发区还是在低发区其血清中的EB病毒检出率都较高,利用原位杂交技术研究发现,EB病毒编码RNA可以在几乎所有的鼻咽癌肿瘤细胞中表达,但在临近的正常组织中很少表达(除少数淋巴细胞外),在癌前期的鼻咽上皮组织中也检测出EB病毒;EB病毒潜伏基因在鼻咽癌及早期异常组织中持续表达,鼻咽癌患者血浆存在着游离于细胞外的大量的EB病毒-DNA,EB病毒的DNA检出率高达96%,而正常对照组仅为7%。EB病毒DNA及其基因片段的检测对于鼻咽癌患者的分期、诊断、判断疗效和监测复发及转移都具有重要的临床意义。在我国南方进行的大规模筛查结果显示,EB病毒VCA/IgA阳性人群中有大约百分之十的人发展为鼻咽癌,绝大部分的鼻咽癌都是由EB病毒IgA/VCA阳性人群发展而来。由于EB病毒在相关肿瘤的某个特定阶段确实起到病因的作用,世界卫生组织的国际抗癌联盟(internationalagency for research on cancer,IARC)于1997年正式将EB病毒列为第一致癌物(Henle G,Henle W.Epstein-Barrvirus-specific IgA serum an-tibodies as an outstandingfeature of nasopharyngeal carcinoma[J].Int J Cancer,1976;17(1):1-7)。目前在广东等鼻咽癌高发区已将EB病毒血清学检查作为鼻咽癌早期诊断的普查项目。
而经过普查后即出现了EB病毒感染者,在经相关的鼻咽内镜及影像学检查排除鼻咽癌后,此类人群迫切需要宣教和治疗,但目前对此类人群的研究相对较少,一般从事基础研究较多,到目前为止全国还未有针对EB病毒感染的专门治疗药物。国内中山大学肿瘤研究所及广西医科大学、广西苍梧鼻咽癌防治所等均进行过中药研究,田道法等以复方黄连汤治疗(由黄连、黄芪等药物组成)EBV抗体阳性者31例,有效率达83.87%,认为该方对EBV感染活力有较强的抑制作用。田道法为观察益气解毒颗粒对鼻咽癌高危人群EB病毒感染活性的抑制作用。将111例鼻咽癌高危惠者随机分为2组,分别予益气解毒颗粒(主要由黄芪、黄连、白花蛇舌草等药物组成)及鼻咽清毒剂,连用3月,观察其对壳抗原抗体(IgA/vCA)和早期抗原抗体(IgA/EA)滴度的影响。结果治疗组显效率51.72%,总有效率87.93%,对照组显效率7.55%,总有效率24.53%,组间差异均为P<0.01,说明益气解毒颗粒对鼻咽癌高危者EB病毒惑染活性有很强的抑制作用。催英等报道黄芪提取液对巴豆油、正丁酸联合激发的EBV壳抗原(EBV-VCA)表达有明显抑制作用,抑制率随药物浓度增加而提高。提示黄芪抑制EBV-VCA表达的效果好,有望在鼻咽癌预防方面起一定作用。该课题组还采用间接免疫酶法检测广西常见的300余种中草药对B95-8细胞壳抗原表达的抑制作用。结果发现其中黑墨草、野闹、石仙桃、肿节风、一点红、南蛇藤、胡萝卜、藕节、葛根等20种中草药有抑制EBV抗原表达的作用,将对NPC的预防起一定作用。Raji细胞是携带EB病毒基因组的人Burkitt′s淋巴瘤细胞株,只表达EB病毒核抗原(EBNA),在正丁酸钠和巴豆油的联合激发下可产生EBV早期抗原(EA)。刘宗潮等研究发现抗EB病毒口服液(处方由黄芪、败酱草、女贞子、夏枯草、山豆根等组成,含生药1.63g/mL)在无毒浓度下能抑制Raji细胞EBV-EA的表达,亦能抑制B95-8细胞的EBV-VCA的表达,在较高的浓度下对NPC细胞CNE2具有细胞毒作用。另外,该课题组采用克隆形成法测定该口服液对EBV转化B淋巴细胞的作用,结果发现抗EB病毒口服液在无毒浓度下对EBV转化B淋巴细胞能力有抑制作用,表明抗EB病毒口服液对EBV有杀伤的作用。成积儒等应用免疫酶法检测石上柏水提取液对促癌物正丁酸巴豆油联合作用激活EB病毒VCA、EA抗原的表达,发现中草药石上柏药物浓度为1mg/mL时抑制Raji细胞表达EA,抑制率为51.98%;抑制B95-8细胞VCA表达,最高达72.04%。表明石上柏水提取液有阻断EBV在细胞内抗原的表达作用。皮至明等发现,郁金、柴胡、板蓝根这三种抗病毒中药均对EBV-VCA的表达有一定抑制作用,其抑制效果与药物浓度成正相关关系,其中郁金和柴胡的抑制作用较弱,而板蓝根(10mg/ml)效果最好,抑制率达57.89%。另有研究表明,富含有机硒的大米提取液对EBV转化脐血B淋巴细胞抑制率达83.4%,对Raji细胞EBV早期抗原表达的抑制率为20.75%,均提示对EBV有明显的抑制作用。
综上所述,从临床和实验研究结果来看,目前治疗鼻咽癌高危人群主要以补气、清热解毒中药及其复方应用为主,取得了良好效果,说明了中药益气解毒等方药治疗EB病毒感染有效,同时也发现,由于研究者各自研究方向的不同,致实验结果未能真正应用于临床。
发明内容
为了克服现有技术的不足,本发明提供一种治疗EB病毒感染的中药,经过前期多年的基础研究,包括EB病毒感染的病因、病机研究及调查研究,在中医基础理论的指导下,选择益气养阴清热解毒及岭南草药等药物组成的中药,通过中药的双向调节作用(一方面可直接作用于病毒,一方面可增强机体抵抗力),扶正驱邪,治疗EB病毒感染疗效确切。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:
一种治疗EB病毒感染者的中药,其特征在于其是由如下重量百分含量的原料制成:黄芪10-30%、甘草5-10%、太子参10-30%、黄芩10-30%、野菊花10-30%、重楼10-30%、五指毛桃10-30%、石上柏10-30%、猫爪草5-25%。
本发明可以是颗粒制剂,也可以是中药领域中其它常见的制剂。
本发明原料组成中黄芪、猫爪草、黄芩、石上柏益气养阴清热解毒为君药,五指毛桃、甘草、太子参加强益气养阴之功,野菊花、重楼加强清热解毒之功。
本发明的有益效果是:本发明的中药主要应用于鼻咽癌高发区之EB病毒感染人群,即鼻咽癌高危人群的治疗,通过治疗EB病毒感染进而达到早期防治鼻咽癌之目的。
附图说明
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
图1是本发明的高浓度颗粒制剂对Raji细胞EBV-DNA拷贝影响的曲线示意图;
图2是本发明低浓度颗粒制剂颗粒对Raji细胞EBV-DNA拷贝影响的曲线示意图。
图中:纵坐标表示Raji细胞EB病毒复制后其DNA荧光量,横坐标表示Raji细胞EB病毒复制的循环数,图中有三条曲线很相似,说明实验结果重复性良好。
具体实施方式
实施例1
取黄芪10克、甘草6克、太子参10克、黄芩15克、野菊花15克、重楼10克、五指毛桃10克、石上柏10克、猫爪草15克,按如下方法制备:取上述药材,适当地切碎或粉碎,置适宜煎煮容器中,加适量水使浸没药材,浸泡15分钟后,加热至沸约20分钟,分离煎出液,药渣依法再煎2次,收集各煎出液。为了减少颗粒剂的服用量和引湿性.常采用水煮醇沉淀法,即将水煎煮液蒸发至一定浓度(一般比重为1∶1左右),冷后加入1-2倍置的乙醇,充分混匀.放置过夜,使其沉淀,次日取其上清液(必要时滤过),沉淀物用少量50%-60%乙醇洗净,洗液与滤液合并,减压回收乙醇后,待浓缩至一定浓度时移置放冷处(或加一定量水.混匀)静置一定时间,使沉淀完全,过滤,滤液低温蒸发至稠膏状,将浓缩的稠膏状物质干燥后粉碎,再经制粒、整粒后分装即得到本发明的治疗EB病毒感染者的中药颗粒制剂。
实施例2
取黄芪20克、甘草8克、太子参20克、黄芩20克、野菊花15克、重楼20克、五指毛桃20克、石上柏20克、猫爪草10克,按如下方法制备:取上述药材,适当地切碎或粉碎,置适宜煎煮容器中,加适量水使浸没药材,浸泡15分钟后,加热至沸约20分钟,分离煎出液,药渣依法再煎2次,收集各煎出液。为了减少颗粒剂的服用量和引湿性.常采用水煮醇沉淀法,即将水煎煮液蒸发至一定浓度(一般比重为1∶1左右),冷后加入1-2倍置的乙醇,充分混匀.放置过夜,使其沉淀,次日取其上清液(必要时滤过),沉淀物用少量50%-60%乙醇洗净,洗液与滤液合并,减压回收乙醇后,待浓缩至一定浓度时移置放冷处(或加一定量水.混匀)静置一定时间,使沉淀完全,过滤,滤液低温蒸发至稠膏状,将浓缩的稠膏状物质干燥后粉碎,再经制粒、整粒后分装即得到本发明的治疗EB病毒感染者的中药颗粒制剂。
实施例3
取黄芪30克、甘草10克、太子参30克、黄芩30克、野菊花25克、重楼30克、五指毛桃30克、石上柏30克、猫爪草20克,将各原料混合即得到本发明的治疗EB病毒感染者的中药。
临床实例
取实施例1和实施例2制备的治疗EB病毒感染者的中药颗粒制剂,将患者分成治疗组和对照组,其中治疗组服用实施例1和实施例2制备的治疗EB病毒感染者的中药颗粒制剂,对照组未服用本发明的中药,EB病毒感染者在服用本发明一月至三月后,结果见表1,从表1可知,服用本发明中药的治疗组其血清EB病毒NA1IgA水平明显降低,有近半数患者EB病毒抗体转阴,临床研究显示总有效率达83.0%,而未用药的对照组,其血清EB病毒NA1IgA水平无明显降低,两组对比,经卡方检验,X2=40.4,P<0.001,差异有非常显著性,鼻咽解毒颗粒可明显降低EB病毒感染者EB病毒NA1IgA水平。
表1本发明对EB病毒感染者EB病毒NA1IgA水平的影响
同时采用血清药理学实验研究方法研究此复方中药的药效,因为EB病毒只感染灵长类动物,一般的动物实验不能进行,故以最接近中药药效的血清药理学方法进行此复方的实验研究。应用巢式荧光定量PCR方法检测此复方中药处理的Raji细胞EBV-DNA拷贝数。为消除因为药物毒性作用影响细胞生长而导致EBV-DNA复制减低,选取非毒性浓度用于实验,即高浓度药稀释1∶16而低浓度药稀释1∶8再处理细胞,观察其对EBV-DNA复制的影响。结果显示,高浓度药物处理后EBV-DNA拷贝数为64.78±55.56/5.0×104细胞,见图1;低浓度药物处理后EBV-DNA拷贝数为42.80±8.93/5.0×104细胞,见图2,而不含药处理组EBV-DNA拷贝数为(3.4±2.9)×107/5.0×104细胞。无论经高浓度或低浓度药物处理后,Raji细胞EBV-DNA拷贝数远远低于对照组,说明此中药复方可明显抑制Raji细胞EBV-DNA的复制。
Claims (2)
1.一种治疗EB病毒感染者的中药,其特征在于其主要是由如下重量百分含量的原料制成:黄芪10-30%、甘草5-10%、太子参10-30%、黄芩10-30%、野菊花10-30%、重楼10-30%、五指毛桃10-30%、石上柏10-30%、猫爪草5-25%。
2.根据权利要求1所述的一种治疗EB病毒感染者的中药,其特征在于:该中药是颗粒制剂。
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