CN101945658A - 用于预防婴儿肠道不适的包含婴儿双歧杆菌及低聚果糖和低聚半乳糖的组合物 - Google Patents

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CN101945658A CN2009801049671A CN200980104967A CN101945658A CN 101945658 A CN101945658 A CN 101945658A CN 2009801049671 A CN2009801049671 A CN 2009801049671A CN 200980104967 A CN200980104967 A CN 200980104967A CN 101945658 A CN101945658 A CN 101945658A
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Abstract

提供包含双歧杆菌和低聚半乳糖和低聚果糖的组合物，其支持在食用婴儿配方奶粉或母乳的婴儿的饮食中引入固体断奶食物。

Description

用于预防婴儿肠道不适的包含婴儿双歧杆菌及低聚果糖和低聚半乳糖的组合物
发明领域
本发明涉及支持在食用婴儿配方奶粉(infant milk formula)或母乳的婴儿的饮食中引入固体断奶食物的组合物。
发明背景
ProbiostartTM为婴幼儿配制以支持健康的消化力和免疫力。一包probiostart包含10小袋，每小袋净重1.5g并包含低聚果糖和益生菌培养物(probiotic culture)(嗜酸乳酸杆菌罗塞尔-52(Lactobacillus acidophilus Rossell-52)，婴儿双歧杆菌罗塞尔-33(Bifodobacterium infantis Rosell-33)和两歧双歧杆菌罗塞尔-71(Bifodobacterium bifidum Rosell-71))。
Scholtens等(J Pediatr Ga stroenterol Nutr，2006，42：553-559)描述了在固体食物中加入益生元低聚糖(prebioitic oligosaccharides)引起断奶期肠道菌群中双歧杆菌的粪便比例的提高。
WO02/060276涉及到益生菌组合，其包含乳酸杆菌、丙酸细菌和/或双歧杆菌的不同组合。益生菌优选与合适的益生元组合形成合生元(synbiotics)。本发明的组合自身可以食用，或者可以与合适的食物或药物产品组合，并且它可以治疗性地例如用于刺激免疫系统和用于一般的健康改善。
发明概述
本发明人发现，在除婴儿配方奶粉或母乳喂养之外引入固体和可匙(spoonable)食物时，婴儿肠道菌群发生显著变化。发现婴儿双歧杆菌(B.infantis)百分比显著下降而其他细菌保持稳定。另外，在引入固体食物后，多种短链脂肪酸(SCFA)分布发生变化。特别地，粪便乙酸盐百分比显著下降而丙酸盐百分比显著上升，见实施例1。
向婴儿饮食中引入固体食物经常会引起肠问题。这些问题特别地由肠道环境的变化引起，特别地如果饮食变化突然出现。本发明人发现，在固体食物引入时，重要特征发生变化。优选地，在向婴儿饮食中引入固体食物(例如除人乳或婴儿配方奶粉之外)时，减少和平和菌群和短链脂肪酸类型的变化，从而更逐渐地发生变化，并且婴儿免受肠道不适。本发明提供减少双歧杆菌群和短链脂肪酸水平的变化、由此避免和/或减少肠道不适的方法和组合物。
本发明涉及婴儿双歧杆菌组合低聚半乳糖和低聚果糖的施用，以钝化由固体断奶食物的摄入引起的变化。婴儿双歧杆菌的添加限制了在固体食物引入饮食期间观察到的肠道婴儿双歧杆菌的减少。低聚半乳糖和低聚果糖的混合物最适地增加了乙酸盐的产生，同时引起有限的丙酸盐产生。
婴儿双歧杆菌的主要代谢产物是乙酸盐，乙酸盐产生的减少被认为至少部分是由于婴儿双歧杆菌的减少的发生。因此，婴儿双歧杆菌与低聚半乳糖和低聚果糖的共施用协同增加乙酸盐产生，同时保持多余的丙酸盐产生的最小化。
本发明人发现，低聚半乳糖和低聚果糖的混合物比其他益生原更有效地刺激乙酸盐产生，同时引起有限的丙酸盐产生，见实施例2。由于饮食中引入固体食物，婴儿中丙酸盐产生已经增加，因此有限的丙酸盐产生是期望的。
有利地是，婴儿双歧杆菌、低聚半乳糖和低聚果糖的组合加入固体断奶食物例如果糊或其他婴儿食物中。
本共生组合优选施用较长时间段，如2或3个月，也就是从婴儿配方奶粉到更多固体食物的过渡期。因此，在另一方面，本发明提供具有特定剂量的婴儿双歧杆菌、低聚半乳糖和低聚果糖的容器(例如小袋)。本发明也提供包含多个容器的包装，所述容器具有特定剂量的婴儿双歧杆菌、低聚半乳糖和低聚果糖。
发明详述
断奶期是婴儿逐渐适应成人固体食物的时期。一般，婴儿在4-6个月龄时进食固体食物。在本文中，断奶被定义为从奶喂养到固体食物的过渡。如本文所用，断奶食物是指婴儿在断奶期所食用的食物组合物。
本发明涉及包含婴儿双歧杆菌和低聚半乳糖和低聚果糖的组合物在制备用于治疗和/或预防因婴儿饮食中引入断奶食物而引起的该婴儿肠道不适的食物产品中的用途。
在本发明一实施方案中，所述食物产品的制备是通过将包含婴儿双歧杆菌和低聚半乳糖和低聚果糖的组合物a)和作为即用食物产品的组合物b)组合，其中所述食物产品优选为断奶食物。组合物b)优选在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度。组合物a)与组合物b)的重量比优选为0.005-0.1。组合物a)的量优选为0.5g-10g。
因此，本发明也涉及用于治疗和/或预防因婴儿饮食中引入食物产品而引起的婴儿肠道不适的组合物c)，其中组合物c)通过将0.5-10g组合物a)和组合物b)组合而制备，其中：
组合物a)包含
i.婴儿双歧杆菌；和
ii.低聚半乳糖和低聚果糖；
组合物b)是食物产品，其在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度；所述食物产品优选为断奶食物；和
组合物a)与组合物b)的重量比为0.005-0.1。
另一方面，本发明涉及制备食物产品的方法，包括将组合物a)加入组合物b)来获得组合物c)，其中：
组合物a)包含
i.婴儿双歧杆菌；和
ii.低聚半乳糖和低聚果糖；
组合物b)是食物产品，其在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度，所述食物产品优选为在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度的断奶食物；和
组合物a)与组合物b)的重量比为0.005-0.1。
另一方面，本发明涉及包含0.5-10g粉末的包装的粉末组合物，其包含低聚半乳糖、低聚果糖和婴儿双歧杆菌。本发明也提供包含这类包装的组合物中的至少5个的容器。
双歧杆菌
本组合物优选包含婴儿双歧杆菌、更优选地婴儿-长双歧杆菌(Bifidobacterium infantis-longum)。本组合物优选包含与模式菌株婴儿双歧杆菌(株系LMG 8811T种名：长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)Reuter 1963AL，ATCC 15697)相比，具有与16S rRNA序列的至少95％一致性、更优选地至少97％一致性的细菌。确定与16S rRNA的百分比一致性的方法由Haaman和Knol在Quantitative real-time PCR assays to identify and quantify fecal Bifidobacterium species in infants receiving a prebiotic infant formula(使用定量实时PCR测定法鉴定并定量食用益生元婴儿配方的婴儿的粪便双歧杆菌物种)Appl.Environ.Microbiol.2005；71(5)：2318-24中描述。上述具有16S rRNA序列的至少95％、优选地至少97％的一致性的菌株在本文中是指婴儿双歧杆菌。
根据优选的实施方案，本组合物包含至少一种选自B.longum spp.infantis M-63的双歧杆菌。
本组合物a)优选包含每克组合物干重102-1013菌落形成单位(cfu)婴儿双歧杆菌，每克本组合物a)干重优选地104-1012、更优选地105-1010婴儿双歧杆菌。本组合物a)优选包含每克总的非可消化糖104-1012、更优选地105-1010菌落形成单位(cfu)婴儿双歧杆菌。所述婴儿双歧杆菌优选以每日剂量102-1013、更优选地105-1011菌落形成单位(cfu)施用。
非可消化低聚糖
本组合物a)优选包含低聚半乳糖。如本文所用，术语“低聚半乳糖”指非可消化低聚糖，其中至少30％、优选地至少50％、更优选地至少60％的糖单元为半乳糖单元。乳糖被认为是可消化的。本组合物优选包含DP为2-100、更优选地DP为2-10的低聚半乳糖。低聚半乳糖的糖优选为β-连接。许多人乳低聚糖核心结构也为β-连接。
本组合物a)优选包含选自反式低聚半乳糖、乳糖-N-四糖(LNT)和乳糖-N-新四糖(新-LNT)的低聚半乳糖。在特定优选实施方案中，本组合物包含反式低聚半乳糖。反式低聚半乳糖具有[半乳糖]n-葡糖糖和/或[半乳糖]n-葡萄糖-([半乳糖])m的化学结构，其中n和/或m是1至且包含60的整数，也就是2，3，4，5，6，....，59，60；n优选为2，3，4，5，6，7，8，9和/或10。m优选为2，3，4，5，6，7，8，9和/或10。本组合物优选包含[半乳糖]n-葡糖糖，其中n是1至且包含60的整数。n优选为2，3，4，5，6，7，8，9和/或10，n更优选为2，3，4，5，6和/或7。反式低聚半乳糖(TOS)例如以商标VivinalTM(Borculo Domo Ingredients，荷兰)和Oligomate 55TM(养乐多)销售。低聚半乳糖的糖单元优选主要为β-连接。
本组合物a)优选包含每100g干重0.01-10g、优选地0.1-5g、更优选地0.25-2g的低聚半乳糖。
本组合物a)优选包含低聚果糖。如本文所用，术语“低聚果糖”指非可消化多糖碳水化合物，其包含至少2个β-连接的果糖单元的链，具有2-250、优选地7-100、更优选地20-60的DP。优选采用菊糖。菊糖可自商品名Raftilin HP(Orafti)获得。本低聚果糖的平均DP优选为至少7、更优选地至少10、优选地低于100。所用低聚果糖优选具有(占大多数的)以β(2→1)键连接的果糖单元。用于低聚果糖的其他术语包括菊糖，多聚果糖(fructopolysaccharide)，多果糖(polyfructose)，果聚糖和寡果糖(oligofructose)。本组合物优选包括DP为2-100、更优选DP为7-60的低聚果糖。
本组合物a)优选包含每100g干重0.01-10g、优选地0.1-5g、更优选地0.25-2g的低聚果糖。
因此，本组合物a)优选包括具有不同平均聚合度(DP)的至少2种非可消化低聚糖。优选地，所述重量比为：
i.(DP 2-5的非可消化低聚糖)∶(DP 6，7，8和/或9的非可消化低聚糖)＞1；和/或
ii.(DP 10-60的非可消化低聚糖)∶(DP 6，7，8和/或9的非可消化低聚糖)＞1
优选地，一个或两个重量比大于2、更优选地大于5。这些组合提供最适乙酸盐产生。
为进一步的改进，本非可消化低聚糖优选具有相对高含量的短链低聚糖，因为这些强烈刺激乙酸盐产生。优选地至少50wt.％、更优选地至少75wt.％的非可消化低聚糖具有2-9(即2，3，4，5，6，7，8和/或9)的DP。在本组合物a)中，优选地至少75wt.％的总低聚半乳糖具有2-7的DP，和至少75wt.％的总低聚果糖具有6-60的DP。
本组合物a)优选包含0.01-10g、优选地0.1-5g、更优选地0.25-2g的非可消化低聚糖。每100g干重？？？
方法
本发明涉及制备食物产品的方法，包括将组合物a)加入组合物b)，来获得组合物c)。
组合物a)优选包含婴儿双歧杆菌和(ii)低聚半乳糖和低聚果糖。组合物a)优选重量低于100克、最优选低于10克、更优选低于5克。组合物a)优选包装在容器、优选地小袋内。组合物a)的单个包装能够精确组分的给予和防止过量给予。组合物a)优选为粉末形式。粉末形式的细菌具有延长的保存期。组合物a)的水活度(aw)优选为低于0.5，更优选为低于0.3，最优选为低于0.2。
组合物b)优选为重量低于1000g和在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度。组合物b)在20℃和剪切速率100s-1下优选具有至少200mPas的粘度、更优选具有至少500mPas的粘度。高粘性组合物并非优选的，特别是对于婴儿。因此，组合物b)优选为在20℃和剪切速率100s-1下粘度低于10000mPas，优选低于5000mPas。组合物b)优选为果糊、可匙乳基谷类组合物或者是适合3-24月龄婴儿的膳食。组合物b)优选为即用食物产品，优选地组合物b)为可购得的食物产品。
根据本方法，组合物a)和组合物b)被组合以获得组合物c)，例如通过将组合物a)撒在组合物b)上并任选地后接混合。所述方法优选对组合物b)的口味和/或稠度造成最小的影响。因此，组合物a)相对于组合物b)优选具有有限的量。因此，组合物a)与组合物b)的重量比低于0.1，更优选低于0.05。组合物a)与组合物b)的重量比优选高于0.005，更优选高于0.01，和是例如约0.025。
在另一实施方案中，本发明提供具有多个单个包装的组合物a)的容器。本发明提供包含至少5个包装的粉末组合物的容器，其中每一包装的粉末组合物包含0.5和10g粉末，其包含低聚半乳糖、低聚果糖和婴儿双歧杆菌。所述容器优选包含至少5个包装的粉末组合物、优选地至多30个包装的粉末组合物。
健康益处
本发明涉及用于(i)治疗和/或预防因婴儿饮食中引入断奶食物而引起的肠道不适和/或(ii)治疗和/或预防便秘和/或(iii)治疗和/或预防肠痉挛的方法，其通过向婴儿施用组合物c)，其中组合物c)已通过将组合物a)和组合物b)组合而制备。组合物a)和组合物b)如本文上文所述。
组合物c)优选施用于3-24月龄婴儿，更优选地3-12月龄婴儿。优选地，组合物c)每周至少一次地施用于婴儿，持续至少5周的时段。更优选地，组合物c)每周至少三次地施用于婴儿，持续至少2周的时段。最优选地，组合物c)每天至少一次地施用于婴儿，持续至少2周的时段。更频繁的施用会导致肠道菌群从喂乳婴儿至婴儿也进食固体食物的情形的更为逐渐的变化。
实施例
实施例1：肠道菌群的变化
目的
众所周知，哺乳婴儿的肠道菌群以双歧杆菌和乳酸杆菌为优势。表明固体断奶食物的引入可扰乱哺乳婴儿的肠道菌群。本研究意在观察引入常规固体断奶食物的完全哺乳婴儿中肠道菌群及其代谢活性的变化。
方法
本研究是观察性研究，其中自第一次引入固体食物至其后六周跟踪健康的4-6月龄的完全哺乳婴儿。采集引入固体物前、引入固体物后3周、6周的粪便样品。对粪便样品采用荧光原位杂交和定量实时PCR分析双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、青春双歧杆菌(B.adolescentis)、乳酸杆菌、大肠杆菌(E.coli)、梭菌和拟杆菌(Bacteroides)物种的百分比。另外，对粪便的短链脂肪酸(SCFAs)和pH水平进行了分析。此外，每日将排便次数、排便特征以及肠胃不适(溢奶、腹泻、腹痛(colics)、肠胃气胀、便秘、尿布皮炎)的信息记录在研究日志中。所有数据以重复测量ANOVA进行统计学分析。
结果
13名婴儿完成了研究。研究进入时的平均年龄为5.0个月(s.d.0.6月)。喂食了六周固体断奶食物后，观察到乳酸杆菌从3.3％至6.0％(P＜0.0001)的显著增长，和青春双歧杆菌从0.8％至4.1％(P＜0.0001)的显著增长。婴儿双歧杆菌的百分比从35.6％显著下降到28.5％(P＜0.0001)。其他细菌在研究期间保持稳定。多种SCFA的分布在引入固体食物后发生变化。粪便乙酸盐的百分比显著降低，基线和六周后的平均百分比分别为93％和83％(P＝0.010)。丙酸盐百分比从基线的4％显著增长到15％(P＝0.002)。未观测到粪便pH显著变化。在六周的研究期内，粪便稠度从1.7(SEM 0.4)(似水至软布丁样)显著增长到2.7(SEM 0.7)(软成型至干成型)(p＜0.001)。排便频数没有显著变化。
表1
 第0周   第6周   p-值
  青春双歧杆菌  0.8   4.1   p＜0.001
  婴儿双歧杆菌  35.6   28.5   p＜0.001
  乙酸盐  93％   83％   p＝0.010
  丙酸盐  4％   15％   p＝0.002
结论
固体断奶食物的引入与完全哺乳婴儿的微环境变化有关联，如在乳酸杆菌、青春双歧杆菌和婴儿双歧杆菌的百分比转变中所观察到的，和如在肠道菌群代谢活性的变化中所观察到的，其伴随短链脂肪酸乙酸盐和丙酸盐类型的变化。
实施例2：低聚糖对乙酸盐/丙酸盐产生的影响
从奶瓶喂养婴儿(bottle fed babies)的新鲜粪便中获得微生物。合并1-4月龄婴儿的新鲜粪便材料并且在2小时内放入防腐培养基。使用益生元(TOS；9/1(w/w)比的TOS/菊糖(HP)混合物；菊糖；1∶1(w/w)比的寡果糖(OS)/菊糖混合物或无(空白)作为基质。反式低聚半乳糖(TOS)获自Vivinal GOS(Borculo Domo Ingredients，Zwolle，荷兰)。菊糖(HP)自Orafti Active Food Ingredients，Tien en，比利时，即Raftiline HP。
实验采用以下样品进行：1)85mg TOS 2)85mg菊糖3)85mg9/1(w/w)比的TOS/菊糖和4)85mg 1/1(w/w)比的OS/菊糖。SCFA(乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐)使用装有火焰电离检测器的Varian 3800气相色谱仪(GC)(Varian Inc.，Walnut Creek，美国)定量。
图1描绘发酵不同低聚糖产生的绝对(图1A)和相对(图1B)SCFA谱。图1A表明，2种不同低聚糖的混合物(TOS/菊糖)导致比单一组分显著和协同增加的每克纤维SCFA(特别地乙酸盐)的量，其中所述2种不同的低聚糖具有不同的链长。图1B表明，TOS/菊糖组合的加入有利于更高比例的有益乙酸盐(B)。(将包括图1A和图1B)
实施例3：组合物
小袋的包装的粉末组合物，包含5g粉末，其包含1g低聚半乳糖(95wt.％的低聚半乳糖具有2-7的DP)、0.1g低聚果糖(95wt.％的低聚果糖具有6-100的DP)和106cfu的婴儿双歧杆菌，以及麦芽糊精载体。
将包装的粉末组合物打开，使该粉末与100g苹果糊混合，并喂给6月龄婴儿，以防止作为引入断奶食物结果的便秘。

Claims (10)

1.包含婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)及低聚半乳糖和低聚果糖的组合物在制备用于治疗和/或预防因婴儿饮食中引入断奶食物而引起的该婴儿肠道不适的食物产品c)中的用途，其中所述食物产品c)通过将0.5-10g的包含婴儿双歧杆菌及低聚半乳糖和低聚果糖的组合物a)和作为即用断奶食物的组合物b)组合而制备，其中组合物a)与组合物b)的重量比为0.005-0.1。
2.如权利要求1所述的用途，其中组合物b)在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度。
3.制备食物产品的方法，包括将组合物a)加入组合物b)以获得食物产品c)，其中：
组合物a)包含
i.婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)；和
ii.低聚半乳糖和低聚果糖；
组合物b)是即用的食物产品，其在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度；和
组合物a)与组合物b)的重量比为0.005-0.1。
4.如权利要求1或2所述的用途或者如权利要求3所述的方法，其中组合物b)是果糊、可匙奶基谷类组合物或适合3-24月龄婴儿的膳食。
5.如权利要求1或2所述的用途或者如权利要求3或4所述的方法，其中组合物a)是粉末。
6.如权利要求1或2所述的用途或者如权利要求3-5所述的方法，其中将所述食物产品c)施用于婴儿。
7.如权利要求1或2所述的用途或者如权利要求3-6所述的方法，其中组合物a)具有来自可消化碳水化合物、脂肪和蛋白质的低于10kcal/g、优选地低于5kcal/g、更优选地低于1kcal/g的热焓。
8.包含0.5g和10g粉末的包装的粉末组合物，其包含低聚半乳糖、低聚果糖和婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)和/或双歧杆菌(Bifidobacterium)。
9.容器，其包含至少5个如权利要求7所述的包装的组合物。
10.用于治疗和/或预防因婴儿饮食中引入断奶食物而引起的该婴儿肠道不适的组合物c)，其中通过将0.5-10g的组合物a)与组合物b)组合而制备组合物c)，其中：
组合物a)包含
i.婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)；和
ii.低聚半乳糖和低聚果糖；
组合物b)是在20℃和剪切速率100s-1下具有至少100mPas的粘度的食物产品；和
组合物a)与组合物b)的重量比为0.005-0.1。
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