CN101881775A - 一种肌钙蛋白i和肌钙蛋白t的双通道检测卡 - Google Patents
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Abstract
一种肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡，属于血液检测技术领域。检测卡外壳内有测试条，测试条由支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜，两端部上分别粘贴吸水膜和样品垫，其内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部之间夹置粘贴两段胶体金膜，分别是含肌钙蛋白I单抗胶体金标记物及肌钙蛋白T单抗胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带，分别含抗肌钙蛋白I抗体及抗肌钙蛋白T抗体，另有一条质孔带含抗鼠抗体。样品垫和硝酸纤维素膜分别正对加样孔与检测窗孔。本发明的优点是能同时检测出患者血清或血浆中含有的肌钙蛋白I和肌钙蛋白T，本检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
Description
技术领域
一种同时检测肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡，涉及一种同时检测肌钙蛋白的器具，属于血液检测技术领域。
背景技术
肌钙蛋白(troponin，Tn)是与心肌收缩有关的调节蛋白，调节心肌的收缩和舒张。由肌钙蛋白I(tropomyosin inhibitory component，TnI)、肌钙蛋白T(tropomyosin-binding component，TnT)、肌钙蛋白C(calinmbinding component，TnC)3个亚基组成。TnI分子量为21kD，是肌原纤维ATP酶的抑制性亚单位，它可抑制肌球蛋白与肌动蛋白的偶联，松弛骨骼肌或心肌。TnT分子量为37kD，是与原肌球蛋白结合的亚单位，它将肌钙蛋白C和肌钙蛋白I连接到肌动蛋白和原肌蛋白上，从而在肌纤维收缩和舒展工程中发挥中介作用。其为一球形单链，分子量可随种属不同而略有差异。TnC分子量为18kD，呈晶体结构，是肌钙蛋白的Ca2+结合亚基，是仅有的与钙离子结合的亚单位，骨骼肌和心肌中的TnC是相同的，与钙离子结合后促使细胞丝活化，引起肌纤维收缩。3个亚单位结合与原肌球蛋白一起构成Tm-Tn复合体，调节肌肉收缩和舒张的力量和速度。
心肌细胞胞浆游离cTnI只占4.1％，大部分cTnI与肌钙蛋白T及C亚单位结合在一起以复合体的形式存在。当心肌因缺血、缺氧而发生变化性和坏死时，游离于胞浆内的cTnI可迅速透过受损细胞膜进入细胞间质，随之进入血管和淋巴管内，血清水平于3-5h内升高；而结合的cTnI由于分子质量相对较大，延迟透出胞膜进入血流，其肌原纤维不断崩解破坏并逐渐分解出cTnI，血清水平于15-24h达高峰，可升高至正常人的5-50倍，5-20d后降至正常。
心肌细胞内游离于胞浆的cTnT约5％，约95％的cTnT结合于肌钙蛋白-原肌球蛋白复合物中。在心肌细胞受到可逆性损害时，细胞膜的完整性被破坏，游离的cTnT首先释放入血液中，构成短暂而迅速的升高；如发生不可逆的心肌细胞损伤，结合部分的cTnT继续从细肌丝上降解下来，导致血清cTnT持续性升高。在这个过程中，可形成2个高峰，一般于2-4h内血中cTnT开始上升，于第22h左右形成第一个高峰，此时血清中cTnI为正常人的40-120倍，然后缓慢下降，第2-5天出现第二个高峰，峰值为正常人的30-40倍，持续半个月左右后降至正常。
目前，心肌肌钙蛋白的检测在心肌缺血损伤的临床诊断和预后判断中的应用非常广泛。如急性冠状动脉综合症(包括隐性心绞痛和不稳定心绞痛，急性心肌梗死等)、心肌炎、心肌创伤、围手术期心脏并发症、脓毒血症导致的左心衰竭等等。此外还可用于溶栓治疗效果观察，心肌损伤面积的估计，心脏移植后排异反应观察，某些药物疗效观察等。
目前，现有技术对于心肌肌钙蛋白的检测主要采用酶免疫检测试剂盒、自动化免疫分析仪等，也有单一检测肌钙蛋白I或肌钙蛋白T的胶体金快速检测卡。但到目前为止，没有同时检测这两种物质的检测器具。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能同时检测肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的器具，克服现有技术进行单独检查的缺陷，能有效地应用于心肌缺血损伤的临床诊断和预后判断。
本发明的技术方案：一种肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡，它是在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4)，测试条(2)是由支承背板(5)上粘贴五种元件组成：支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜(10)，另一端部上叠置粘贴样品垫(9)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴两段胶体金膜(7)和(8)，胶体金膜(7)是含抗肌钙蛋白I抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，胶体金膜(8)是含抗肌钙蛋白T抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带和1条质控带，检测带(11)含抗肌钙蛋白I抗体，检测带(12)含抗肌钙蛋白T抗体，质控带(13)含抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔(4)，硝酸纤维素膜正对检测窗孔(3)。
本发明的有益效果：用本发明检测卡能同时检测出患者血清或血浆中的肌钙蛋白I和肌钙蛋白T，该检测卡易于制备，且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
附图说明
图1：肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡及测试条在外壳内的安置图。1、检测卡外壳，2、测试条，3、检测窗孔，4、加样孔。
图2：肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡的检测试条结构示意图。6、硝酸纤维素膜，11、含抗肌钙蛋白I抗体的检测带，12、含抗肌钙蛋白T抗体的检测带，13、含抗鼠抗体的质控带。
图3：检测试条的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。5、支承背板，6、硝酸纤维素膜，7和8、胶体金膜，9、样品垫，10、吸水膜。
具体实施方式
结合具体实施例参见附图进一步说明如下：
一种肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳状壳体，长7cm，宽2cm，厚0.5cm，薄壳壁厚0.1cm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。
测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约6.0cm，片宽约0.4cm，厚度小于2.5mm。测试条2是多层结构：底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0.5mm，长6.0cm，宽0.4cm；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0.5mm，长2-2.5cm，宽0.4cm。硝酸纤维素膜6上有三条间隔开的横向显示印迹带，参见附图3，三条显示印迹带中，一条是检测带11，含抗肌钙蛋白I抗体，另一条是检测带12，含抗肌钙蛋白T抗体，第三条是质控带13，含抗鼠抗体。支承背板5一端部上叠置粘贴吸水膜10，支承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫9，吸水膜10内端与样品垫9内端各自分别与硝酸纤维素膜6一端搭接，在样品垫9与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之间夹置粘贴两段胶体金膜7和8，胶体金膜7是含抗肌钙蛋白I抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，胶体金膜8是含抗肌钙蛋白T抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7及胶体金膜8各厚0.5-0.8mm，长0.5-0.6cm，宽0.4cm。样品垫9厚0.5-0.8mm，长2cm，宽0.4cm。吸水膜10厚0.5-0.8mm，长1.6-2cm，宽0.4cm。胶体金膜7、胶体金膜8、样品垫9及吸水膜10与硝酸纤维素膜搭接长度为0.1-0.2cm。吸水膜10材料是吸水纸，样品垫9材料是吸水玻璃纤维膜。
测试条置外壳内，样品垫9正对加样孔4，硝酸纤维素膜6正对检测窗孔3。
检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金标记抗肌钙蛋白I和抗肌钙蛋白T，在测试带上分别吸附抗肌钙蛋白I和抗肌钙蛋白T，以及质控带抗抗鼠抗体反应。若样品中含有相应的待检肌钙蛋白I和/或肌钙蛋白T存在，即与相应的胶体金标记抗肌钙蛋白I和/或抗肌钙蛋白T发生反应，结合的免疫结合物与在硝酸纤维素膜上的抗肌钙蛋白I和/或抗肌钙蛋白T反应，而呈现棕红色印迹带。样品中若不含相应的待检肌钙蛋白I和/或肌钙蛋白T时，不呈现棕红色印迹带。主要反应的结果有以下5种情况：
1、如果显示检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阳性，说明被检测样品中含有待测的肌钙蛋白I和肌钙蛋白T。
2、反之，检测带11、12不显示颜色，只有质控带13显现棕红色印迹，检测结果为阴性，表明被检测样品中不含有待测的肌钙蛋白I和肌钙蛋白T。
3、如果检测带11不显示颜色，检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中含有肌钙蛋白T。
4、如果检测带12不显示颜色，检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测结果为阳性，表明被检测样品中含有肌钙蛋白I。
5、如果检测带11、12和质控带13均不显色，则表明检测试条失效。
Claims (1)
1.一种肌钙蛋白I和肌钙蛋白T的双通道检测卡，它是在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4)，其特征在于测试条(2)是由支承背板(5)上粘贴五种元件组成：支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜(10)，另一端部上叠置粘贴样品垫(9)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴两段胶体金膜(7)和(8)，胶体金膜(7)是含抗肌钙蛋白I抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，胶体金膜(8)是含抗肌钙蛋白T抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带和1条质控带，检测带(11)含抗肌钙蛋白I抗体，检测带(12)含抗肌钙蛋白T抗体，质控带(13)含抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫正对加样孔(4)，硝酸纤维素膜正对检测窗孔(3)。
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| CN102636651A (zh) * | 2012-04-06 | 2012-08-15 | 上海领潮生物科技有限公司 | 多项心肌标志物并行检测方法及系统、芯片试纸 |
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