CN101849986A - 一种乳仔猪用免疫增强剂及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明属于中草药饲料添加剂领域,公开一种乳仔猪用免疫增强剂,其以按比例配比的黄芪、白术和防风为原料,在中药多功能提取罐中将原料依次做水提浓缩和醇沉提取后,所得产物再经过冷冻干燥处理制得成品;所述乳仔猪用免疫增强剂按饲料重量的0.2-0.8%添加即可应用。本发明获得的中草药免疫增强剂能有效增强猪体的抵抗力,尤其适用于断奶仔猪的生长发育。
Description
技术领域
本发明属于中草药添加剂领域,具体涉及一种乳仔猪用免疫增强剂。
背景技术
中草药饲料添加剂具有天然、资源丰富、无抗药性、多功能性和环境保护性的优点,在促进生长,提高饲料报酬、抗菌驱虫、抗病毒、增强免疫力、预防疾病,提高生产性能和繁殖力、减小应激作用,改善动物的耐受力、肉品品质、肉品风味、促进泌乳和改善乳的品质等方面的作用已得到证实。但目前中草药饲料添加剂多为经干燥、粉碎、混合而成的散剂,添加剂量普遍较大,一般为饲料重量的0.5%-4%,不仅增加了中草药饲料添加剂的成本,且不便于运输,影响了添加剂的适口性,还稀释了饲料的营养浓度,从而限制了中草药饲料添加剂的使用。
动物免疫增强剂是指通过不同的作用方式,如增强巨噬细胞吞噬功能、提高免疫活性细胞功能、增强抗原物质免疫原性和稳定性等,从而非特异性地增强动物机体非特异性和特异性免疫力的药物添加剂。断奶仔猪由于生理机能未发育成熟,环境、饲料等的突然改变,容易引起以生长迟缓、免疫力低下和腹泻等为主要症状的断奶仔猪综合征。
目前,关于中草药类的猪饲料的文献报道不多,如中国发明专利CN200610046819.7提供的一种复合型猪饲料添加剂,它是以中草药添加剂、微量元素和多种维生素按4-6∶2-4∶1-3的质量比构成为核心要素,经过研磨、搅拌、提取等精制过程得到粉状添加剂,其中中草药添加剂是由山楂、板蓝根、黄柏、五加皮、茴香、贯众、苍术、陈皮、甘草、麦芽、枳壳、苦参、茯苓、马齿苋和枸杞子按比例组成,其一,此技术方案的中药添加剂中中药种类多,无疑会增加生产成本,其二,其产品不是专门针对断奶乳仔猪设计的;中国发明申请CN200510017602.9提供一种猪中草药饲料添加剂,由黄芪、山楂、党参、蒲公英、甘草、小茴香和石膏按比例混合而成,其一,其是中药原料粉碎为粉状直接添加,需要量大,其二,其产品不是专门针对断奶乳仔猪设计;中国发明专利CN200610012570.8提供一种用于养殖业的中草药饲料添加剂,其一,其是中药原料粉碎为粉状直接添加,需要量大,其二,其产品不是专门针对断奶乳仔猪设计,其三,此技术方案的中药添加剂中中药种类多,无疑会增加生产成本;中国发明专利CN 200410040695.2提供一种猪用中草药多功能新型饲料添加剂,其以杜仲、女贞子、黄芪、山楂和薏苡仁为原料,通过称重配料、粉碎混合、醇浸提取、水浸提取、浓缩乙醇提取液、浓缩水提取液、混合浓缩的乙醇提取液和水提取液和喷雾干燥得到药粉,其在中药原料选择和制备方法上都与本发明有本质不同。
组方黄芪、白术和防风,是中医扶正固本的经典名方,具有益气、固表、止汗的作用,人医临床多用于预防风寒感冒、呼吸道感染、变态反应性鼻炎、支气管哮喘等疾病。研究发现,黄芪、白术、防风具有明显的免疫增强作用,对免疫系统有广泛影响。黄芪是一种常见的扶正补气中药,性味甘、微温,具有益气固表、补中益气的功效,为主药;白术性味甘、性温,健脾益气,协助黄芪固表止汗,为辅药;防风性味甘、微温,具有走表散风祛寒的功效,为佐使药。三药相合,使邪去则外无所扰而汗止,卫和则奏理固密而邪不复侵,健脾则正气复而内有所据,相须为用。现代中医药免疫学研究表明:黄芪、白术与防风的组合具有保护免疫器官,增强免疫器官重量的作用;改善对单核吞噬细胞系统的作用;增强对T细胞免疫功能、B细胞及其抗体产生的作用;提高对红细胞免疫功能和细胞因子生成的调节作用。
近代药理和临床研究证明,黄芪含1.3%-3.3%多糖、40余种三萜皂甙、100多种黄酮类化合物等,具有免疫作用。白术含挥发油、多糖等,具有增强机体免疫的作用,增强吞噬细胞的吞噬功能,并提高淋巴细胞转化率,增强细胞免疫功能,还有保肝利胆、抑制消化道溃疡的作用。防风含多糖、香豆素类、挥发油和色原酮类化合物,主要有抑菌、抗炎,提高吞噬细胞的吞噬能力、抗氧化的作用。其中多糖是三味药物的共有成分,也是主要有效成分。
近年来,对黄芪、白术、防风在体液免疫、细胞免疫、免疫调节及清除体内自由基等方面进行了较深入的探讨,并取得了一定的进展,但有关黄芪、白术和防风的组方在兽医领域的系统研究应用较少。
发明内容
针对上述现有技术存在的问题和不足,发明人首先是提供一种乳仔猪用免疫增强剂,其是选用黄芪、白术和防风进行组方,通过中药多功能提取器提取其有效生物活性物质,再经冷冻干燥制得的产品。将所述的乳仔猪用免疫增强剂产品添加到饲料中,从而达到提高乳仔猪免疫功能和生产性能的目的。
本发明的目的是通过以下技术方案得以实施的:
一种乳仔猪用免疫增强剂,其是以黄芪、白术和防风为原料,按下述方法制备获得:
(1)备料:
按重量比3:1-2:1-2称取黄芪、白术和防风,粉碎并混匀;
(2)水提并浓缩:
上述原料加入其重量67倍的蒸馏水,煮沸1-3个小时,过滤并超滤处理后,所得滤液调pH值至5.0-7.0,然后加热浓缩,浓缩液脱色处理得到透明液体;
(3)醇沉提取:
步骤(2)得到的透明液体,离心处理后,上清液中加入3-5倍(w/v)的乙醇,静置12-24小时,沉淀物用丙酮洗涤后过滤,然后沉淀物内加入其重量2-3倍的淀粉,加热搅拌至溶解;
(4)冷冻干燥:
步骤(3)得到的产物快速降温至-20℃冻结处理1-2个小时;冻结产物于真空度为10±2Pa、冻结产物厚度为5-10mm条件下升华干燥处理18-24小时;所得产物再在温度30-40℃下解析干燥处理3-5个小时既得产品。
本发明通过将原料放入中草药多功能提取罐中,经水提浓缩和乙醇沉淀提取的方法,将三味中药材中的有效成份,特别是多糖物质提取出来,然后再在真空冷冻干燥设备中经冷冻干燥处理制成使用方便的成品,同时也较好的保留了提取出来的有效成份。发明人通过使用水煮法研究各种配伍中总多糖含量变化,研究得知:不论是合煎还是煎液合并,其出膏率及多糖含量都不是单味药出膏率多糖含量的简单加和,而是方内诸药综合作用的体现。经过大量实验研究和探索,发明人总结出本发明的技术方案。本发明产品的抗炎试验也表明:方中黄芪是君药,抗炎效果显著,但不如复方好,而白术、防风单独使用对小鼠没有明显的抗炎作用,说明配伍药增强了君药的作用。
本发明上述的步骤(1)的中药原料粉碎按本领域常规方法处理即可,药材粉碎所需达到的规格没有特殊要求,如粉碎后过80目筛即可。本发明上述的步骤(2)中的pH值调节,根据前序步骤产物滤液的酸碱度,选用NaOH、HCl调节到所需pH值5.0-7.0之间即可;所述的加热浓缩至一定量即可,如加热浓缩至浓缩液重量为原液的1/3以下,加热浓缩的目的是去除一些水份,同时可节约后序步骤中生产材料的使用量,降低生产成本,此外还可以减少冷冻干燥时液体表面积,大大节约冷冻干燥的时间,提高干燥效果。本发明上述步骤(3)中沉淀物用丙酮洗涤可根据实际情况进行数次,如2-4次。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(2)中的超滤处理采用中空纤维;脱色处理采用吸附树脂,如AB-8吸附树脂,其用量为每100毫升浓缩液中加入0.2-0.5g,可有效去除杂质。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(2)中的过滤得到的滤渣同法煮沸一次以上,过滤,滤液用中空纤维超滤超滤处理。所述的同法煮沸即滤渣中加入其重量6-7倍的蒸馏水,煮沸1-3个小时。为充分提取有效成份多糖等物质,对于滤渣可根据实际情况做数次煮沸、过滤和超滤处理,然后将所有得到的滤液合并后再调节pH值。这样做可以提高产品提取率,也可降低生产成本。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(2)中的pH值调节至6.5。发明人研究发现,此pH值的情况下,能最大限度析出杂质,提高溶液纯度。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(3)中的离心处理为1800-2000r/min离心10-15min;乙醇的浓度为80-95%。作为更优选的方案,乙醇的浓度为90%,以提高中草药原料中的有效成份物质的溶出。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(3)中的沉淀物用丙酮洗涤前,沉淀物再次做醇沉处理。所述的再次做醇沉处理即沉淀物中再加入3-5倍(w/v)的浓度为80-95%的乙醇,静置12小时,倾去上清液得到所需沉淀物。通过2次醇沉过程,可最大限度的提取原料中的有效成分,提高产品的纯度。此处3-5倍的含义是,如1g的上清液中加入3-5mL的乙醇。
作为优选方案,根据本发明所述的乳仔猪用免疫增强剂,其中,所述步骤(4)中的快速降温中降温速度为10-15℃/min。
本发明还提供上述的乳仔猪用免疫增强剂在饲料中的应用,其中,所述乳仔猪用免疫增强剂占饲料重量的0.2-0.8%。将本发明的乳仔猪用免疫增强剂添加量控制在饲料重量的0.2-0.8%范围内,即可达到提高乳仔猪免疫功能和生产性能的目的,又不会产生适口性问题。
作为优选方案,所述乳仔猪用免疫增强剂占饲料重量的0.4-0.8%。发明人研究发现,发明的乳仔猪用免疫增强剂添加量控制在饲料重量的0.4-0.8%范围内,乳猪可获得更强的免疫功能和生产性能。
作为优选方案,所述的饲料是指乳猪饲料,包括教槽料、断奶过渡料和保育料。
本发明的产品经紫外分光光度法检测分析得知:总多糖含量可达65.0%以上。产品被证明对机体免疫系统产生重要影响,其总多糖是全方免疫干预作用的重要有效部位之一。
本发明中,如无特别说明,出现的专业术语或名词,其含义是本领域通常所指的含义。
本发明具有以下有益效果和优点:
(1)复方中草药合理搭配使用,三药相合,互为补充,能发挥复方中草药添加剂的最大功效。
(2)抛弃了简单的干燥、粉碎、混合的中草药添加剂制作方法,采用中草药多功能提取罐和冷冻干燥设备,结合发明人研究的优化工艺,有效提高了中草药添加剂的生物活性,同时,本发明产品加入载体淀粉制成了预混剂,更便于质量控制,提高产品混合均匀度,方便保存、运输和使用。
(3)制剂后的中草药添加剂使用剂量只需控制在饲料的0.2%-0.8%(质量分数)就能达到较好提高乳仔猪免疫力的效果,有效避免了普通中草药添加剂添加剂量大而引起的饲料适口性差、稀释饲料营养浓度等问题。
(4)该免疫增强剂具有保护免疫器官,增强免疫器官重量的作用;改善对单核吞噬细胞系统的作用;增强对T细胞免疫功能、B细胞及其抗体产生的作用;提高对红细胞免疫功能和细胞因子生成的调节作用。
(5)饲料中添加该中草药添加剂可以提高仔猪免疫球蛋白含量和免疫细胞中CD4(T辅助细胞)和CD8(T抑制细胞)的比例,增加血清的补体、IL-2、γ-干扰素等成分,在一定程度上提高猪体内非特异性免疫水平,增强猪体的抵抗力,有利于断奶仔猪的生长发育。
(6)尤其是饲料中添加0.8%本发明中草药添加剂的乳仔猪,其腹泻率比不添加组降低了77.0%以上,料肉比提高了9.0%以上。
具体实施方式
下面结合实施例,更具体地说明本发明的内容。应当理解,本发明的实施并不局限于下面的实施例,对本发明所做的任何形式上的变通和/或改变都将落入本发明保护范围。
在本发明中,若非特指,所有的份、百分比均为重量单位,所有的设备和原料等均可从市场购得或是本行业常用的。
主要设备:
中草药多功能提取罐(湖南衡阳市万科制药机械制造有限公司,型号:DTG-0.05-6立方米)
真空冷冻干燥机(江阴市港裕机械厂;型号:THJ-200。)
实施例1
产品按下述方法制备:
(1)称重配料:按质量比为3∶1∶1称取黄芪、白术、防风原料;将称取的中草药原料粉碎成粗粉过80目筛并混合均匀;
(2)水提并浓缩:将混合均匀的中草药粗粉装入“中草药多功能提取罐”中,加入中草药粗粉重量6倍的蒸馏水煮沸1小时,用四层纱布过滤,滤渣用同样方法煮沸2次,过滤,滤液用中空纤维超滤后,合并滤液,采用本领域通用技术调pH值至5.0,加热浓缩至浓缩液为原液重量的1/3,再用AB-8吸附树脂对浓缩液做脱色处理,每100mL浓缩液中加入AB-8吸附树脂0.5g,然后过滤得到透明液体。该透明液体进入步骤(3);
(3)醇沉提取:将步骤(2)所得透明液体以离心速度2000r/min离心处理10min,所得上清液中加入其5倍量浓度为80%乙醇,静置12小时后倾去上清液,所得沉淀物中再加入沉淀物3倍量的浓度为80%的乙醇,静置12小时后倾去上清液。所得沉淀物用丙酮洗涤2次,然后过滤,所得沉淀物内加入其重量2倍量的淀粉,加热搅拌至溶解。所得产物进入步骤(4);
(4)在真空冷冻干燥机中做冷冻干燥处理:将步骤(3)得到的产物快速冻结至-20℃,降温速度为10℃/min,并在此温度下保持1小时,然后进行升华干燥,其中真空度控制在10Pa左右,冻结产物厚度保持5mm,干燥升华18小时;得到的产物进行解析干燥,温度30℃,干燥5小时,既得产品。冷冻干燥得到的干燥药粉即为本发明的中草药免疫增强剂产品。
以实施例1获得的产品为例,对所得产品的效果做了下述考察:
效果试验:
试验Ⅰ:中草药免疫增强剂不同添加量对仔猪免疫功能和生长性能的影响
用于该试验的添加量分别为0.2%、0.4%、0.8%(按基础日粮重量计)。
试验方法:采用单因子4水平试验设计,在同一栋猪舍中进行,将40头10kg(35日龄)左右乳仔猪随机分为4组,每组10头,饲喂方法采用群饲,每日喂料(干拌料)3次,仔猪自由饮水。试验期间按标准程序(每个重复仔猪)饲养于一栏,自由采食、自由饮水,免疫消毒程序按猪场常规方法进行:35日龄断奶后(1)传染性胃肠炎免疫:采用弱毒或灭活苗。免疫剂量1头份。以后每年进行一次。(2)五号病免疫:A、高能灭活苗:免疫剂量为1头份。每半年进行一次免疫;B、一般组织苗:免疫剂量1头份,每三个月进行一次免疫。)进行饲养、管理、驱虫和防疫注射。预饲期7d,正饲期45d,分保育一阶段(27d)、保育二阶段(25d)。正饲期间记录每日采食量和猪群的情况,对患病仔猪给予治疗,饲养结束后,于早晨空腹称重。基础日粮配方和营养水平采用浙江国茂饲料有限公司的“谷王551”产品,试验设处理组和对照组。处理组在基础日粮中添加实施例1中草药免疫增强剂0.8%、0.4%、0.2%(文中均为质量分数),对照组不添加。试验第42天,从每个组的每个重复中随机选择4头仔猪,公母各半,共24头。早晨于仔猪空腹时,采集前腔静脉血液。血样于37℃水浴静置,等析出血清后,吸取血清置离心管中,于3500r.min-1离心10min,制备血清样品,分装于Eppendorf管中,于-20℃中保存,供分析测试使用。
检测项目:血清免疫球蛋白(IgA、IgM、IgG)和补体(C3、C4)含量的检测,均采用半自动生化分析仪,采用散射速率免疫比浊法测定。
试验结果1:生产性能
表1 中草药免疫增强剂不同添加量对断奶仔猪生产性能的影响1
注:同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05),附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。
从表1可以看出,试验Ⅰ中,0.8%中草药免疫增强剂处理组仔猪的腹泻率分别比0.4%、0.2%和0组的降低了44.4%、72.2%和77.7%(P<0.05),料肉比分别提高了4.4%、6.1%和9.4%(P<0.05)。0.4%、0.2%组的腹泻率和料肉比分别比0组有所降低。
试验结果2:
表2中草药免疫增强剂不同添加量对断奶仔猪球蛋白、补体的影响
w/% | IgG | IgM | IgA | C3 | C4 |
0.8 | 2.60±0.06b | 0.72±0.06b | 0.24±0.04b | 0.29±0.01b | 0.16±0.02b |
0.4 | 2.31±0.17a | 0.66±0.16a | 0.20±0.08a | 0.21±0.01a | 0.12±0.04a |
0.2 | 2.29±0.09a | 0.64±0.06a | 0.20±0.06a | 0.22±0.02a | 0.10±0.02a |
0(CK) | 2.30±0.10a | 0.65±0.08a | 0.20±0.07a | 0.20±0.02a | 0.10±0.02a |
注:同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05),附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。
从表2可以看出:试验Ⅰ中,0.8%中草药免疫增强剂处理组仔猪血清中的IgG、IgM、IgA、C3和C4含量比0.4%、0.2%和0组的有显著提高(P<0.05);0.4%中草药免疫增强剂组仔猪的IgG、IgM和C4比0.2%、0组的有不同程度的提高。
试验Ⅱ:添加0.8%中草药免疫增强剂对仔猪免疫功能的影响
试验方法:设对照组、试验组,预饲期7d,正饲期50d,分保育一阶段(27d)、保育二阶段(30d)。试验组在基础日粮中添加0.8%中草药免疫增强剂;对照组添加抗生素,每吨饲料添加120g泰乐菌素、25g硫酸抗敌素。其他方法与试验Ⅰ相同。
测定项目:从每个重复中随机选择4头仔猪,公母各半,共24头。采集10mL前腔静脉血,取2mL肝素抗凝血用于T淋巴细胞亚群(CD3、CD4、CD8)数量、淋巴细胞阳性率的测定。分离的血清用于测定白介素(IL-2)、γ-干扰素含量。淋巴细胞阳性率采用酸性?醋酸萘酯染色法测定。IL-2、γ-干扰素含量由ELISA方法检测,IL-2、γ-干扰素试剂盒均由美国MARKET公司提供。采用美国Coulter公司EPICS-XL流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群的数量。
试验结果见表3:
表3 0.8%中草药免疫增强剂对断奶仔猪免疫功能的影响
注:同列数值后附不同字母者表示差异显著(P<0.05),附相同字母者表示差异不显著(P>0.05)。
从表3可以看出,试验Ⅱ中,0.8%试验组仔猪血清中的IL-2、γ-干扰素、淋巴细胞阳性率、CD4/CD8值均比对照组有所提高(P<0.05)。
实施例2
产品按下述方法制备:
(1)称重配料:按质量比为3∶2∶1称取黄芪、白术、防风原料;将称取的中草药原料粉碎成粗粉过80目筛并混合均匀;
(2)水提并浓缩:将混合均匀的中草药粗粉装入“中草药多功能提取罐”中,加入中草药粗粉重量7倍的蒸馏水煮沸3个小时,用四层纱布过滤,滤渣用同样方法煮沸2次,过滤,滤液用中空纤维超滤后,合并滤液,用本领域通用技术调PH值至6.0,加热浓缩至浓缩液为原液重量的1/3,再用AB-8吸附树脂对浓缩液做脱色处理,每100mL浓缩液中加入AB-8吸附树脂0.4g,然后过滤得到透明液体。该透明液体进入步骤(3);
(3)醇沉提取:将步骤(2)所得透明液体以离心速度1800r/min离心12min,所得上清液中加入其3倍量85%乙醇沉淀,静置16小时后倾去上清液,沉淀物中再加入3倍量的85%的乙醇,静置16小时后倾去上清液。所得沉淀物用丙酮洗涤3次,然后过滤,所得沉淀物内加入其重量2倍量的淀粉,加热搅拌至溶解。所得产物进入步骤(4);
(4)在真空冷冻干燥机中做冷冻干燥处理:将步骤(3)得到的产物快速冻结至-20℃,降温速度为13℃/min,并在此温度下保持2小时,然后进行升华干燥,其中真空度控制在10Pa左右,冻结产物厚度保持8mm,干燥升华20小时;得到的产物进行解析干燥,温度35℃,干燥4小时,既得产品。冷冻干燥得到的干燥药粉即为本发明的中草药免疫增强剂产品。
本实施例产品按饲料重量0.2%、0.4%、0.8%添加到饲料中。经试验,本实施例可以得到与实施例1对仔猪免疫功能和生长性能影响同样的效果。
实施例3
产品按下述方法制备:
(1)称重配料:按质量比为3∶1∶2称取黄芪、白术、防风原料;将称取的中草药原料粉碎成粗粉过80目筛并混合均匀;
(2)水提并浓缩:将混合均匀的中草药粗粉装入“中草药多功能提取罐”中,加入中草药粗粉重量7倍的蒸馏水煮沸3小时,用四层纱布过滤,滤渣用同样方法煮沸3次,过滤,滤液用中空纤维超滤后,合并滤液,用本领域通用技术调PH值至6.5,加热浓缩至浓缩液为原液重量的1/3,再用AB-8吸附树脂对浓缩液做脱色处理,每100mL浓缩液中加入AB-8吸附树脂0.2g,然后过滤得到透明液体。该透明液体进入步骤(3);
(3)醇沉提取:将步骤(2)所得水提液以离心速度2000r/min离心15min,所得上清液中加入其5倍量浓度为95%的乙醇,静置24小时后倾去上清液,所得沉淀物中再加入5倍量的浓度为95%的乙醇,静置24小时后倾去上清液。所得沉淀物用丙酮洗涤4次,然后过滤,所得沉淀物内加入其重量3倍量的淀粉,加热搅拌至溶解。所得产物进入步骤(4);
(4)在真空冷冻干燥机中做冷冻干燥处理:将步骤(3)得到的产物快速冻结至-20℃,降温速度为15℃/min,并在此温度下保持2小时,然后进行升华干燥,其中真空度控制在10Pa左右,冻结产物厚度保持10mm,干燥升华24小时;得到的产物进行解析干燥,温度40℃,干燥3小时,既得产品。冷冻干燥得到的干燥药粉即为本发明的中草药免疫增强剂产品。
本实施例产品按饲料重量0.2%、0.4%、0.8%添加到饲料中。经试验,本实施例可以得到与实施例1对仔猪免疫功能和生长性能影响同样的效果。
尽管发明人已经对本发明的技术方案做了较为详细的阐述和列举,应当理解,对于本领域一个熟练的技术人员来说,对上述实施例作出修改和/或变通或者采用等同的替代方案是显然的,都不能脱离本发明精神的实质,本发明中出现的术语用于对本发明技术方案的阐述和理解,并不能构成对本发明的限制。
Claims (10)
1.一种乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,其是以黄芪、白术和防风为原料,按下述方法制备获得:
(1)备料:
按重量比3∶1-2∶1-2称取黄芪、白术和防风,粉碎并混匀;
(2)水提并浓缩:
上述原料加入其重量6-7倍的蒸馏水,煮沸1-3个小时,过滤并超滤处理后,所得滤液调pH值至5.0-7.0,然后加热浓缩,浓缩液脱色处理得到透明液体;
(3)醇沉提取:
步骤(2)得到的透明液体,离心处理后,上清液中加入3-5(w/v)倍的乙醇,静置12-24小时,沉淀物用丙酮洗涤后过滤,然后沉淀物内加入其重量2-3倍的淀粉,加热搅拌至溶解;
(4)冷冻干燥:
步骤(3)得到的产物快速降温至20℃冻结处理1-2个小时;冻结产物于真空度为10±2Pa、冻结产物厚度为5-10mm条件下升华干燥处理18-24小时;所得产物再在温度30-40℃下解析干燥处理3-5个小时既得产品。
2.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(2)中的超滤处理采用中空纤维;脱色处理采用吸附树脂,其用量为每100毫升浓缩液中加入0.2-0.5g。
3.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(2)中的过滤得到的滤渣同法煮沸一次以上,过滤,滤液用中空纤维超滤处理。
4.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(2)中的pH值调节至6.5。
5.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(3)中的离心处理为1800-2000r/min离心10-15min;乙醇的浓度为80-95%。
6.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(3)中的沉淀物用丙酮洗涤前,沉淀物再次做醇沉处理。
7.如权利要求1所述的乳仔猪用免疫增强剂,其特征在于,所述步骤(4)中的快速降温中降温速度为10-15℃/min。
8.权利要求1-7之一所述的乳仔猪用免疫增强剂在饲料中的应用,其特征在于,所述乳仔猪用免疫增强剂占饲料重量的0.2-0.8%。
9.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的饲料是指乳猪饲料,包括教槽料、断奶过渡料和保育料。
10.如权利要求8所述的应用,其特征在于,所述乳仔猪用免疫增强剂占饲料重量的0.4-0.8%。
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