CN101831400B - 青鳉鱼受精卵收集及分离方法 - Google Patents

青鳉鱼受精卵收集及分离方法 Download PDF

Info

Publication number
CN101831400B
CN101831400B CN2009100472800A CN200910047280A CN101831400B CN 101831400 B CN101831400 B CN 101831400B CN 2009100472800 A CN2009100472800 A CN 2009100472800A CN 200910047280 A CN200910047280 A CN 200910047280A CN 101831400 B CN101831400 B CN 101831400B
Authority
CN
China
Prior art keywords
egg
ringer
zygotes
disposable
separating
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN2009100472800A
Other languages
English (en)
Other versions
CN101831400A (zh
Inventor
么宗利
来琦芳
周凯
王慧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
East China Sea Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences
Original Assignee
East China Sea Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by East China Sea Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences filed Critical East China Sea Fishery Research Institute Chinese Academy of Fishery Sciences
Priority to CN2009100472800A priority Critical patent/CN101831400B/zh
Publication of CN101831400A publication Critical patent/CN101831400A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN101831400B publication Critical patent/CN101831400B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Landscapes

  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

青鳉鱼受精卵收集及分离方法，涉及鱼类受精卵分离技术，需要解决的技术问题是提供一种收集分离青鳉鱼受精卵可避免刺破卵膜的方法，本发明的技术方案采用柔软小抄网、一次性工程塑料接种环、大口吸管及培养皿，其特征是用柔软小抄网将产卵后1h～6h内腹部挂卵的雌鱼捞至水面，用一次性接种环将卵块取下，取下的卵块移至盛有Ringer′s培养液的玻璃培养皿中进行分离；左右手各握一只接种环，相互拉伸使卵丝断裂，受精卵得到分离，再用大口吸管将已分离的单个卵粒吸取到另外一盛有Ringer′s培养液培养皿中进行孵化，孵化温度控制在25℃～26℃。本发明用于胚胎观察实验。

Description

青鳉鱼受精卵收集及分离方法
技术领域
本发明属于鱼类受精卵分离技术。
背景技术
青鳉(Oryzias latipes)是起源于东亚的一种小型鱼类，易于饲养。成鱼体长3cm左右，是已知最小的脊椎动物之一。与试验动物斑马鱼和小鼠相比世代更短，为2～3个月。人工环境下，青鳉能够全年每天产卵，可以通过控制光照时间来控制产卵时间。透明的受精卵使其在胚胎观察及显微操作非常方便。由于产卵是可控的，1994年，青鳉作为脊椎动物的代表被送上太空，完成了从受精到个体的整个发育过程，实现了真正意义的“太空育种”。日本在上个世纪初就开始青鳉的研究工作，在生理学、生态学、内分泌学等各方面被广泛利用，并在培育、饲养管理、实验操作等进行系统的研究，是鱼类实验动物较好的例子。
青鳉不同与其它鱼类，自然条件下，雌鱼产出的受精卵依靠卵丝，以葡萄串状挂在生殖孔进行孵化。而一般的养殖水体由于溶氧相对较低，导致自然条件下的孵化率较低。如果进行关于青鳉鱼胚胎观察相关实验，则必须对其进行收集及分离。
现有的收集及分离方法直接使用大口吸管或镊子等玻璃或金属器具将卵块取下、分离。这些器具均较坚硬，容易使亲鱼受伤，影响后续的产卵，尤其是在分离卵块时，容易刺破卵膜，导致孵化的失败。
发明内容
本发明需要解决的问题是提供一种收集分离青鳉鱼受精卵并可避免刺破卵膜的方法。
本发明的技术方案采用柔软小抄网、一次性工程塑料接种环、大口吸管及培养皿，其特征是用柔软小抄网将产卵后1h～6h内腹部挂卵的雌鱼捞至水面，用一次性接种环将卵块取下，取下的卵块移至盛有Ringer′s培养液(内含氯化钠0.85％、氯化钾0.03％、氯化钙0.033％)的玻璃培养皿中进行分离；左右手各握一只接种环，相互拉伸使卵丝断裂，受精卵得到分离，再用大口吸管将已分离的单个卵粒吸取到另外一盛有Ringer′s培养液培养皿中进行孵化，孵化温度控制在25℃～26℃，以用于后续胚胎观察实验。
本发明应用一次性接种环收集、分离青鳉鱼受精卵，以用于胚胎观察实验，该方法分离获得的受精卵在24℃～28℃的培养液中的孵化率可达90％以上，破损率显著低于现有技术方法，适用于诸如胚胎毒理学等胚胎发育实验研究。
附图说明
图1表示用接种环收集挂在雌鱼腹部卵块的示意图。
图2表示用接种环分离受精卵、大口吸管吸取受精卵的示意图。
具体实施方式
本发明利用市场销售的一次性接种环收集分离受精卵，该接种环采用柔软而富弹性的工程塑料材料制作。青鳉鱼的受精卵大小为1mm左右，购买时选择孔径稍大于卵径的接种环为宜。
本发明配备辅助工具为小抄网、玻璃培养皿、大口吸管，柔软小抄网用于捞取亲鱼；受精卵分离在9～12cm大小的玻璃培养皿中进行；用大口吸管辅助吸取分离卵粒。
操作方法按以下步骤进行(见附图1、2)：
产卵后1h～6h内用柔软小抄网将腹部挂卵的雌鱼捞至水面(不要离开水面)；
用一次性接种环2将卵块1取下，注意操作要轻以免雌鱼受伤；
取下的卵块1移至盛有Ringer’s培养液的玻璃培养皿4中进行分离，Ringer’s培养液内含氯化钠0.85％、氯化钾0.03％、氯化钙0.033％；
左右手各握一只接种环2，相互拉伸使卵丝断裂，受精卵得到分离。再用大口吸管3将已分离的单个卵粒5吸取到另外一盛有Ringer’s培养液培养皿中进行孵化，孵化温度控制在25℃～26℃最为适宜。

Claims (1)

1.青鳉鱼受精卵收集及分离方法，采用柔软小抄网、一次性工程塑料接种环、大口吸管及培养皿，其特征是用柔软小抄网将产卵后1h～6h内腹部挂卵的雌鱼捞至水面，用一次性接种环将卵块取下，取下的卵块移至盛有Ringer′s培养液的玻璃培养皿中进行分离，Ringer′s培养液内含氯化钠0.85％、氯化钾0.03％、氯化钙0.033％；左右手各握一只接种环，相互拉伸使卵丝断裂，受精卵得到分离，再用大口吸管将已分离的单个卵粒吸取到另外一盛有Ringer′s培养液培养皿中进行孵化，孵化温度控制在25℃～26℃。
CN2009100472800A 2009-03-09 2009-03-09 青鳉鱼受精卵收集及分离方法 Expired - Fee Related CN101831400B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100472800A CN101831400B (zh) 2009-03-09 2009-03-09 青鳉鱼受精卵收集及分离方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2009100472800A CN101831400B (zh) 2009-03-09 2009-03-09 青鳉鱼受精卵收集及分离方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101831400A CN101831400A (zh) 2010-09-15
CN101831400B true CN101831400B (zh) 2012-05-30

Family

ID=42715620

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009100472800A Expired - Fee Related CN101831400B (zh) 2009-03-09 2009-03-09 青鳉鱼受精卵收集及分离方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN101831400B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102578006B (zh) * 2011-12-22 2015-02-25 国家海洋环境监测中心 海水青鳉的实验室周年养殖方法
CN104823882B (zh) * 2015-04-09 2017-08-01 中国水产科学研究院珠江水产研究所 一种分散福寿螺卵块的方法
CN108522372B (zh) * 2018-03-21 2020-11-06 浙江师范大学 一种黑珍珠鳉鱼休眠卵的收集保存方法
CN109156392A (zh) * 2018-11-13 2019-01-08 中国水产科学研究院黑龙江水产研究所 一种快速分离葡萄串状青鳉受精卵为单个受精卵并清理受精卵卵膜表面的方法
CN110839570B (zh) * 2019-11-29 2021-05-07 塔里木大学 一种裂腹鱼类孵化卵收集装置
CN110876344A (zh) * 2019-12-16 2020-03-13 福州大学 一种锦鳉鱼卵的无水孵化方法

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1818623A (zh) * 2005-02-07 2006-08-16 北京大学 幼鱼或鱼受精卵的dna鉴定性别的方法
CN101423817A (zh) * 2008-08-20 2009-05-06 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 一种用昆虫卵建立细胞系的方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1818623A (zh) * 2005-02-07 2006-08-16 北京大学 幼鱼或鱼受精卵的dna鉴定性别的方法
CN101423817A (zh) * 2008-08-20 2009-05-06 中国林业科学研究院森林生态环境与保护研究所 一种用昆虫卵建立细胞系的方法

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
史东杰等.缺帘鱼精子超低温保存的初步研究.《吉林农业大学学报》.2009,第31卷(第04期),467-471. *

Also Published As

Publication number Publication date
CN101831400A (zh) 2010-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101831400B (zh) 青鳉鱼受精卵收集及分离方法
CN104160993B (zh) 一种红尾副鳅鱼苗的人工繁育方法
CN101690469B (zh) 半滑舌鳎卵裂雌核发育鱼苗的诱导方法
CN103461253B (zh) 黄河裸裂尻鱼人工繁殖方法
CN101703016A (zh) 一种利用紫扇贝和海湾扇贝培育单性杂交扇贝的技术
CN102057888A (zh) 大型溞的人工养殖方法和养殖设备
CN102321570B (zh) 一种鸡胚培养及活体电转基因方法
CN103563805B (zh) 一种翘嘴鲌雌核发育诱导方法
CN101422127A (zh) 马尾藻有性繁殖育苗的方法
CN204377730U (zh) 一种果蝇幼虫收集饲养装置
CN111304145B (zh) 一种提高罗氏沼虾胚胎离体培养孵化率的方法
CN104381158A (zh) 一种采用卵生型手段繁育幼生型牡蛎的方法
Leys et al. Isolation of Amphimedon developmental material
CN101664022B (zh) 一种蝇类寄生蜂的野外诱集方法及其诱集载体
CN102440207B (zh) 一种华贵栉孔扇贝自交系的建立方法
CN104488759B (zh) 一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法
CN102106322B (zh) 卤虫封闭式培养系统及培养方法
CN109874712A (zh) 一种凡纳滨对虾的体外授精方法
RU2614644C1 (ru) Способ интенсивного когортного культивирования акарций (морских каланоидных копепод)
CN201709243U (zh) 对虾类幼体孵化装置
CN104067972B (zh) 黄海大头鳕亲本培育及其受精卵孵化方法
CN105123561B (zh) 海绵动物移植的方法
CN104472397B (zh) 一种用于转基因禽制备的种蛋开窗封口方法
CN106614123A (zh) 一种压力休克诱导星斑川鲽减数雌核发育方法
CN102487898B (zh) 一种珊瑚受精卵附着前的培育方法及培育装置

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20120530

Termination date: 20140309