CN101792493A

CN101792493A - 一种白花蛇舌草多糖的制备方法

Info

Publication number: CN101792493A
Application number: CN201010132779A
Authority: CN
Inventors: 朱缨
Original assignee: Suzhou Vocational Health College
Current assignee: Suzhou Vocational Health College
Priority date: 2010-03-26
Filing date: 2010-03-26
Publication date: 2010-08-04

Abstract

本发明涉及一种操作简便、污染小、能耗少的白花蛇舌草多糖的制备方法。工艺步骤为：取白花蛇舌草，加入蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，合并萃取液，滤过，通过大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，通过分子截留量为5000-50000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到70-90％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得。采用本发明制备白花蛇舌草多糖，产品纯度高，易于实现产业化放大。

Description

一种白花蛇舌草多糖的制备方法

技术领域

本发明涉及一种白花蛇舌草多糖的制备方法，尤其是一种从植物中提取白花蛇舌草多糖的制备方法。

背景技术

白花蛇舌草为茜草科植物白花蛇舌草Oldenlandia diffusa(Willd.)Roxb.的全草，现收载于《中国药典》2005年版(一部)附录III(成方制剂中本版药典未收载的药材及饮片)，其性寒，味苦、甘，归心、肝、脾经，具有清热解毒、利尿消肿、抗菌消炎等功效。临床常用于肿瘤和自身免疫性疾病的治疗，其中的多糖类物质具有抗肿瘤、抗菌消炎和提高机体免疫等作用，是其重要的活性成分。

现有技术中记载了一些白花蛇舌草多糖的制备方法，如《白花蛇舌草多糖的提取纯化工艺研究》[杨培民，等.齐鲁药事，2009，28(9)：549]一文中记载的方法：白花蛇舌草药材预先加12倍量水浸泡2h，加热至70℃，提取3次，每次1.5h，采用鞣酸沉淀法联合活性炭可有效去除多糖中的蛋白质和色素等杂质；《白花蛇舌草多糖除蛋白工艺研究》[刘志刚，等.中华中医药学刊，2008，26(10)：2283]一文中记载了白花蛇舌草多糖除蛋白的工艺：白花蛇舌草多糖以1倍量5％三氯乙酸溶液除蛋白1次，静置2h后离心。

现有技术在制备白花蛇舌草多糖的过程中往往存在长时间加热、加入大量有机溶剂等问题，既不利于节能减排又有可能导致多糖链断裂影响产品质量。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种能耗少、污染小、利于大生产操作、产品纯度高的白花蛇舌草多糖的制备方法。

为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案：

取白花蛇舌草，加入其重量3-6倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分钟，合并萃取液，滤过，通过大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集3-8倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为5000-50000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到70-90％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得。

微波萃取条件优选为：加入药材重量5倍量蒸馏水，萃取功率450W，萃取2次，每次5分钟。

大孔吸附树脂选自AB-8型、D101型、D102型大孔吸附树脂中的一种。

蒸馏水洗脱液的收集量优选为5倍量柱体积。

聚砜超滤膜的分子截留量优选为30000道尔顿。

浓缩液加入乙醇使溶液达到的含醇量优选为80％。

采用本发明制备白花蛇舌草多糖，大大缩短了加热的时间，既节约了能耗又有利于糖链的保护；减少了有机溶剂的使用量，减小了污染；产品含量高。

采用本发明制备所得白花蛇舌草多糖的含量测定方法如下：

试验1多糖含量测定

1.1标准曲线绘制：精密称取105℃干燥至恒重的D(+)-无水葡萄糖标准品28.0mg置于250mL量瓶中，加水溶解，稀释至刻度，摇匀，即得浓度为112μg/mL的标准品溶液。精密量取标准品溶液0，0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL分别置具塞试管中，各加蒸馏水至1.0mL再加5％苯酚溶液1.0mL摇匀后再加入浓硫酸5.0mL摇匀，室温下放置5min，沸水浴中恒温15min，取出，水浴冷却至室温，以蒸馏水作为空白，在490nm处测吸光度。以吸光度为纵坐标，D(+)-无水葡萄糖浓度为横坐标，绘制标准曲线，计算得回归方程。

1.2样品含量测定：取白花蛇舌草多糖0.2g，精密称定，置于100mL量瓶中，加蒸馏水使溶解，稀释至刻度，摇匀，精密量取1mL置于10mL量瓶中加蒸馏水至刻度，摇匀，得白花蛇舌草多糖供试品溶液，精密量取1mL置具塞试管中，按1.1项下操作，测定吸光度值，计算多糖提取粗品中多糖含量。

下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1

取白花蛇舌草，加入其重量3倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率300W，萃取1次，每次3分钟，合并萃取液，滤过，通过AB-8大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集3倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为5000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到70％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得白花蛇舌草多糖112.4g，按试验1方法测得含量为87.4％。

实施例2

取白花蛇舌草，加入其重量6倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率600W，萃取3次，每次10分钟，合并萃取液，滤过，通过大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集8倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为50000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到90％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得白花蛇舌草多糖100.7g，按试验1方法测得含量为91.7％。

实施例3

取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率450W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，滤过，通过AB-8大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集5倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为30000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使含醇量达到80％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得白花蛇舌草多糖146.8g，按试验1方法测得含量为89.3％。

实施例4

取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率450W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，滤过，通过D101大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集5倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为30000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使含醇量达到80％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得白花蛇舌草多糖125.3g，按试验1方法测得含量为86.6％。

实施例3

取白花蛇舌草10Kg，加入其重量5倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率450W，萃取2次，每次5分钟，合并萃取液，滤过，通过D102大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集5倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为30000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使含醇量达到80％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得白花蛇舌草多糖118.8g，按试验1方法测得含量为84.1％。

Claims

1.一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述的方法由下列步骤组成：取白花蛇舌草，加入其重量3-6倍量蒸馏水，置微波萃取装置中萃取，萃取功率300-600W，萃取1-3次，每次3-10分钟，合并萃取液，滤过，通过大孔吸附树脂吸附，蒸馏水洗脱，收集3-8倍量柱体积的洗脱液，通过分子截留量为5000-50000道尔顿的聚砜超滤膜超滤、浓缩，浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到70-90％，静置24小时，滤过，取滤渣，洗涤、干燥即得。

2.根据权利要求1所述一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述的微波萃取条件为：加入药材重量5倍量蒸馏水，萃取功率450W，萃取2次，每次5分钟。

3.根据权利要求1所述一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述的大孔吸附树脂选自AB-8型、D101型、D102型大孔吸附树脂中的一种。

4.根据权利要求1所述一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述蒸馏水洗脱液的收集量为5倍量柱体积。

5.根据权利要求1所述一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述聚砜超滤膜的分子截留量为30000道尔顿。

6.根据权利要求1所述一种白花蛇舌草多糖的制备方法，其特征在于所述浓缩液加入乙醇使溶液含醇量达到80％。