CN101762666A - 一种多维色谱联用分离装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种多维色谱联用分离装置,包括加压毛细管电色谱单元,该加压毛细管电色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀、毛细管色谱柱、缓冲液瓶,与毛细管色谱柱并联的高压电源以及连接在毛细管色谱柱上的检测器。该分离装置还包括毛细管离子交换色谱单元,该毛细管离子交换色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀以及毛细管离子交换色谱柱,毛细管离子交换色谱柱与加压毛细管电色谱单元的进样阀的进样口相连接。该多维色谱联用分离装置具有分离效率高、峰容量大、样品用量小,原料成本低以及污染小的优点,比传统的一维色谱、加压毛细管电色谱、二维液相色谱等均具有更加优异的峰容量及分离能力,更加适合复杂样品的分析。
Description
技术领域
本发明涉及分离分析领域的分离检测装置,尤其涉及一种多维色谱联用分离装置。
背景技术
加压毛细管电色谱(pCEC)是近年发展起来的一种新型微分离分析技术,它整合了毛细管电泳与液相色谱的优点,通过在填充有HPLC填料的毛细管电色谱柱两端施加高压直流电场,样品在毛细管色谱柱中的保留行为同时受到电渗流及其在流动相与固定相之间分配系数的影响,大大提高了样品分离能力,在双重分离机制的作用下,pCEC对于被分离样品细微之处的分辨能力得到了极大的提高。
如公告号为CN 2373793Y的中国发明专利说明书公开了一种“多用加压电色谱装置”,该装置由高压电源、毛细管色谱柱及检测设备构成,并且还包括有高压泵,通过对毛细管色谱柱加压抑制气泡的产生,并能保持高选择性和高柱效。
又如公开号CN 101025408A的中国发明专利申请公布说明书公开了“一种多用加压电色谱装置”,该装置是在上述“多用加压电色谱装置”基础上的改进,其由顺序连接的高压泵、混合阀、进样阀、毛细管色谱柱、检测器及与毛细管柱并联并对其提供高压的高压电源组成,它还包含分流器及电隔离装置,使得该装置得以分析样品的体积、增加了系统的灵活性,对分析方法的建立有促进和优化效果。
但是传统的一维色谱及加压毛细管电色谱所能提供的分离能力、分辨率和峰容量都不足以对复杂样品体系(如蛋白质酶解产物中的多肽分离)进行完全分离;随着生命科学研究的不断深入,高度复杂的生物样品将使传统的一维分离手段更显力不从心,即使将一维分离技术与质谱联用,仍不能将其组分完全分辨。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是一种分离效率高、峰容量大、样品用量小,原料成本低以及污染小的多维色谱联用分离装置,以克服现有技术中的不足。
为了解决上述技术问题,本发明采用如下的技术方案:
一种多维色谱联用分离装置,包括加压毛细管电色谱单元,该加压毛细管电色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀、毛细管色谱柱、缓冲液瓶,与毛细管色谱柱并联的高压电源以及连接在毛细管色谱柱上的检测器,其特征在于:还包括毛细管离子交换色谱单元,该毛细管离子交换色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀以及毛细管离子交换色谱柱,所述毛细管离子交换色谱柱与加压毛细管电色谱单元的进样阀的进样口相连接。
所述毛细管离子交换色谱柱和毛细管色谱柱为毛细管填充色谱柱或毛细管整体柱。
所述检测器为柱上型检测器。
为了能够为毛细管分离体系提供稳定和压力和低流速、流量稳定的流动相,所述加压毛细管电色谱单元的进样阀之后与毛细管色谱柱平行具有一条由分流阀和废液瓶连接形成的分流支路。
所述流动相驱动装置由一个泵或两个泵并联在一个混合阀上构成。混合阀保证了两个泵提供的两流动相混合充分。所述泵为恒流泵或恒压泵。
为了将多余样品排出,所述两个进样阀均连接一个废液瓶。
为了保证进入毛细管离子交换色谱柱中各次样品量一致,所述毛细管离子交换色谱单元的进样阀具有定量环结构。
为了能够浓缩毛细管离子交换色谱柱分离的分离产物,所述加压毛细管电色谱单元的进样阀上装有富集柱。装上富集柱,可实现在线富集,脱盐,两维交换功能。
所述毛细管离子交换色谱柱还可以更换成体积排阻色谱柱或亲和色谱柱或分配色谱柱。通过色谱柱的更换,可以改善该分离装置的分离选择性,形成新的三维分离模式。
采用上述技术方案,本发明的多维色谱联用分离装置,在加压毛细管电色谱中的电泳分离和反相色谱分配机理二维分离机制的基础上,增加多一维的离子交换色谱分离机理,解决了一维色谱分辨率差和峰容量有限的问题。由于加压毛细管电色谱的性能本身具有色谱与电泳的双重分离机制,使得本发明的多维色谱联用分离装置可实现最少三重分离机制同时发挥最用,大大提高了分离效率。加压毛细管电色谱由电渗流推动,反压极小,可制成较长分离柱,大大提高了峰容量。
因此,本发明的多维色谱联用分离装置具有分离效率高、峰容量大、样品用量小,原料成本低以及污染小的优点,比传统的一维色谱、加压毛细管电色谱、二维液相色谱等均具有更加优异的峰容量及分离能力,更加适合复杂样品的分析。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明:
图1为本发明的结构示意图。
图中:
1、泵 2、泵 3、混合阀 4、废液瓶 5、进样阀 6、样品7、毛细管离子交换色谱柱 8、进样阀 9、泵 10、混合阀 11、泵12、废液瓶 13、四通 14、分流阀 15、废液瓶 16、电极17、高压电源 18、毛细管色谱柱 19、检测器 20、电极 21、缓冲液瓶。
具体实施方式
如图1所示,本发明的多维色谱联用分离装置,由毛细管离子交换色谱单元和加压毛细管电色谱单元组成。毛细管离子交换色谱单元包括泵1、泵2、混合阀3构成的流动相驱动装置,进样阀5,毛细管离子交换色谱柱7,废液瓶4。加压毛细管电色谱单元包括泵9、泵11、混合阀10构成的流动相驱动装置,进样阀8,毛细管色谱柱18,高压电源17,检测器19,废液瓶12,缓冲液瓶21。进样阀5和进样阀8均为六通阀。
在毛细管离子交换色谱单元中,泵1和泵2并联在混合阀3,为离子交换分离体系(即第一维分离体系)提供流动相;在加压毛细管电色谱单元中,泵9和泵11并联在混合阀10上构成,为加压毛细管电色谱分离体系(即第二维分离体系)提供流动相;混合阀3、10保证了两泵1、2和9、11提供的流动相混合充分。当然,上述流动相驱动装置也可以由一个泵构成。泵可以为恒流泵,也可以为恒压泵。
在毛细管离子交换色谱单元中,混合阀3的输出端与进样阀5相连,样品6直接引入进样阀5的进样口。进样阀5的一出口连接废液瓶4,一出口与毛细管离子交换色谱柱7相连,当进样阀5处于load状态下时,样品6注入进样阀,多余样品排入废液瓶4,进样阀5内具有定量环结构,可以保证各次样品量一致。当进样阀5切换至inject状态时,进样阀5的一出口与毛细管离子交换色谱柱7相连,为离子色谱提供样品输入。毛细管离子交换色谱柱7为填充毛细管色谱柱,使用目的是对样品进行初级分离。
毛细管离子交换色谱柱7出口与加压毛细管电色谱单元的进样阀8的进样口相连,浓缩毛细管离子交换色谱柱7所分离的分离产物作为加压毛细管电色谱分离体系的样品。进样阀8上可装有富集柱,可实现在线富集,脱盐,两维交换功能。
在加压毛细管电色谱单元中,加压毛细管电色谱分离体系中的混合阀10的出口与进样阀8相连,进样阀8的一出口与废液瓶12相连,另一出口与一个四通13相连,四通13的其中另二个接口分别连有分流阀14、毛细管色谱柱18。分流阀14再连接废液瓶15形成一个分流支路,为加压毛细管电色谱分离体系提供稳定的压力和低流速、流量稳定的流动相。毛细管色谱柱18尾端连接到缓冲液瓶21。高压电源17并联在毛细管色谱柱18上,即高压电源17一端连接电极16,另一端连接电极20,电极16再连接到四通13的一个接口上,电极20再连入缓冲液瓶21中(在两个电极中,一个电极为正电极,另一个则为负电极)。电极16、20与高压电源17组成供电系统为分离提供持续稳定的高压电场。毛细管色谱柱18用于实现第二维的色谱分离。毛细管色谱柱18上开有检测窗口,窗口位置连有检测器19,检测器19用于分离样品的检测,与工作站相连,输出并记录分离图谱。检测器19为柱上型检测器,可以是紫外(UV),激光诱导荧光(LIF)等。
上述毛细管离子交换色谱柱7可以更换成体积排阻色谱柱或亲和色谱柱或分配色谱柱以及其它类型毛细管色谱柱。本分离装置可以通过毛细管离子交换色谱柱的更换,电压强度和方向的改变,改变混合梯度而实现多模式组合分离,改善分离选择性,形成新的三维分离模式。
本发明的多维色谱联用分离装置,在加压毛细管电色谱中的电泳分离和反相色谱分配机理二维分离机制的基础上,增加多一维的离子交换色谱分离机理,解决了一维色谱分辨率差和峰容量有限的问题。由于加压毛细管电色谱的性能本身具有色谱与电泳的双重分离机制,使得本发明的多维色谱联用分离装置可实现最少三重分离机制同时发挥最用,大大提高了分离效率。加压点色谱由电渗流推动,反压极小,可制成较长分离柱,大大提高了峰容量。
因此,本发明的多维色谱联用分离装置具有分离效率高、峰容量大、样品用量小,原料成本低以及污染小的优点,比传统的一维色谱、加压毛细管电色谱、二维液相色谱等均具有更加优异的峰容量及分离能力,更加适合复杂样品的分析。
当然,在本发明的进一步改进中,在毛细管分离体系前还可以再增加一个毛细管分离体系,比如在加压毛细管电色谱单元之前再连接一个加压毛细管电色谱单元,这样就可以形成三维分离体系。
以上就是本发明的多维色谱联用分离装置,但是,本领域技术人员应该认识到,上述的具体实施方式只是示例性的,是为了更好的使本领域技术人员能够理解本专利,不能理解为是对本专利包括范围的限制;只要是根据本专利所揭示精神的所作的任何等同变更或修饰,均落入本专利包括的范围。
Claims (9)
1.一种多维色谱联用分离装置,包括加压毛细管电色谱单元,该加压毛细管电色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀、毛细管色谱柱、缓冲液瓶,与毛细管色谱柱并联的高压电源以及连接在毛细管色谱柱上的检测器,其特征在于:还包括毛细管离子交换色谱单元,该毛细管离子交换色谱单元包括顺序连接的流动相驱动装置、进样阀以及毛细管离子交换色谱柱,所述毛细管离子交换色谱柱与加压毛细管电色谱单元的进样阀的进样口相连接。
2.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述毛细管离子交换色谱柱和毛细管色谱柱为毛细管填充色谱柱或毛细管整体柱。
3.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述检测器为柱上型检测器。
4.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述加压毛细管电色谱单元的进样阀之后与毛细管色谱柱平行具有一条由分流阀和废液瓶连接形成的分流支路。
5.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述流动相驱动装置由一个泵或两个泵并联在一个混合阀上构成。
6.根据权利要求5所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述泵为恒流泵或恒压泵。
7.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述毛细管离子交换色谱单元的进样阀具有定量环结构。
8.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述加压毛细管电色谱单元的进样阀上装有富集柱。
9.根据权利要求1所述的多维色谱联用分离装置,其特征在于:所述毛细管离子交换色谱柱更换成体积排阻色谱柱或亲和色谱柱或分配色谱柱。
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