CN101759493B

CN101759493B - 一种生物防病有机肥及其制备方法

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Publication number: CN101759493B
Application number: CN2009102292126A
Authority: CN
Inventors: 姜兴民; 李涛; 张�诚; 孙应胜; 李大刚
Original assignee: SHANDONG GUANGDA FERTILIZER TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: SHANDONG GUANGDA FERTILIZER TECHNOLOGY Co Ltd
Priority date: 2009-10-21
Filing date: 2009-10-21
Publication date: 2011-04-13
Anticipated expiration: 2029-10-21
Also published as: CN101759493A

Abstract

本发明涉及一种生物防病有机肥及其制备方法，原料质量份组分为：腐熟有机物65～85份，木霉菌菌剂5～15份，放线菌发酵液5～15份；所述的腐熟有机物是以糠醛渣45～65份、烟渣20～35份、风化煤8～20份为原料，加入微生物发酵菌剂1～2份堆积发酵，晾至水分含量25～35％制得。本发明的生物防病有机肥防病效果好、安全环保、成本低。

Description

一种生物防病有机肥及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种利用生防木霉菌、放线菌和腐熟的有机物为主要原料生产的防病有机肥及其制备方法，属于有机肥料生产技术领域。

背景技术

植物病害是影响农业生产的主要因素之一，目前施用化学农药仍是防治植物病害的主要措施，但化学农药存在易造成残留污染、诱发病原菌抗药性和伤害非靶标生物等不利影响。在寻求安全有效的防治措施过程中，植物病害的生物防治日益引起人们的关注。生物防治将成为控制植物病害，保护农田生态环境，生产无公害农产品的重要措施。

木霉菌因为其具有广泛的适应能力、对植物病原真菌的良好的拮抗活性、对非靶标生物安全及不污染环境等优点，已成为最有开发潜力的生防微生物之一。利用木霉作为植物病害的生防真菌，已有较多的研究并取得了可喜的成绩。在农业上应用木霉菌防治土传病害已有许多成功的报道

放线菌是具有巨大实用价值的一类微生物，目前从微生物中发现的大约8000种生物活性物质中，近70％为放线菌的次级代谢产物，而放线菌在土壤中通过产生拮抗代谢产物或分解真菌细胞壁酶类，对病原真菌生长起拮抗作用，使土壤中植物病原菌生长受到抑制，从而避免或减轻植物病害。

在农业生产中，土壤中存在多种真菌性病原菌，这些病菌可以长期寄生于土壤，在条件适宜时侵染作物。近年来，由于复种指数提高和连作，这些土传病害发生越来越严重，例如，辣椒根腐病、棉花枯萎病等已经严重影响了产量的提高和经济效益。利用生物农药防治是重要的措施之一，但农药生产成本高，使用不方便。生产具有生物防治作用的有机肥则可以克服上述缺陷，迄今为止没有这种产品公开报道。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明提供一种具有生物防病作用的有机肥及其制备方法，将木霉菌、放线菌发酵液加入到腐熟的有机物中生产具有防治土传病害的有机肥，并进行了大田试验，取得了好的效果。

本发明的技术方案如下：

本发明的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物65～85份，木霉菌菌剂5～15份，放线菌发酵液5～15份。

所述的腐熟有机物是以糠醛渣45～65份、烟渣20～35份、风化煤8～20份为原料，加入微生物发酵菌剂1～2份堆积发酵，晾至水分含量25～35％wt制得。

所述的木霉菌菌剂是由液体木霉菌菌种接种在高温灭菌过的棉籽壳培养料上培养而成，木霉菌菌种优选拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)。所述的放线菌发酵液是按常规技术发酵而成，放线菌菌种优选枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

木霉菌和放线菌菌种由中国普通微生物保藏管理中心购得。

所述微生物发酵菌剂是EM复合菌剂(EM是EffectiveMicroorganesms的简称)，它是将光合菌群、酵母菌群、乳酸菌群、放线菌群、菌根菌群等5科10属80多种微生物在同一状态中复合培养成的一种定型菌剂。呈棕色半透明状液体，pH值在3.5～4.5之间。市场有售。

所述糠醛渣是玉米芯为主要原料制造糠醛过程中的废渣；所述烟渣是卷烟生产过程中废弃的烟叶残渣。优选的，所述糠醛渣、烟渣的粉碎粒径≤20目，其中，糠醛渣的水分含量低于40％，有机质含量大于30％。烟渣的有机质含量大于50％。均为质量百分比。优选的，所述风化煤的粒径60～80目。均为市场可购产品。

优选的，用于病害较重的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物70份，木霉菌菌剂15份，放线菌发酵液15份。

优选的，用于病害较轻的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物85份，木霉菌菌剂10份，放线菌发酵液5份。

优选的，用于病害中等程度的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物80份，木霉菌菌剂10-15份，放线菌发酵液10-15份。

本发明的生物防病有机肥的制备方法，步骤如下：

(1)腐熟有机物的制备

以质量份计，将糠醛渣45～65份、烟渣20～35份、风化煤8～20份、微生物发酵菌剂1～2份充分混合均匀。调整混合料的水分为58～70％wt，C/N为23～28质量比，pH7～7.5。

将上述混合料堆成高1.5～2.0米的梯形堆，长度不限，自顶部往下打孔，每平方米孔数8～15个，盖上塑料薄膜，进行有氧发酵。待堆温升至50℃开始计时，发酵3～5天。翻堆，再发酵2～3天，发酵过程完成。将发酵好的有机肥水分含量晾至25～35％wt，备用。

(2)木霉菌菌剂的制备

棉籽壳培养料的制备：棉籽壳90～95份，磷酸二氢钾1～2份，过磷酸钙2～4份，氯化镁1～2份，水120～140份，充分混匀，调节pH值6.5～7.5，高压灭菌在0.12～0.15兆帕下保持3～4小时。

木霉菌株在PDA(土豆、葡萄糖、琼脂培养基)斜面培养基上培养2天，转移至PD(土豆、葡萄糖培养基)液体培养基中，28℃振荡培养2～3天，再以2～5％wt的接种量接种于灭菌棉籽壳上，28℃培养5～10天，待其长满孢子后即可作为木霉菌菌剂使用。菌活指数是1×10¹⁰个/克以上。

(3)放线菌发酵液的制备，以放线菌为菌种经过斜面和液体培养得放线菌发酵液，菌活指数是1×10⁸个/毫升以上。

(4)将腐熟有机物65～85份、木霉菌菌剂5～15份、放线菌发酵液5～15份充分混匀，常温下晾至水分含量20～22％wt，得生物防病有机肥。

上述步骤(1)所述的打孔是孔径3～5厘米，孔深到料堆的底部。

上述步骤(1)所述的翻堆是将料堆表面的料翻入内部，原来内部的料翻到外部。

上述步骤(3)放线菌发酵液的制备，可按现有技术，本发明提供如下具体操作条件，但不限于此：

斜面种子：培养基配方：NaCl 19.5克，MgCl₂25.9克，Na₂SO₄3.3克，CaCl₂21.9克，蛋白胨5.0克，酵母膏1.0克，琼脂15～20克，水1000毫升，pH 7.5～8.0。在0.12兆帕压力下灭菌30分钟，斜面制作完后在无菌条件下接种原始放线菌种，放置在28℃恒温培养箱中培养2天。

液体种子：培养基配方为葡萄糖15.0克，甘露醇5.0克，蛋白胨10.0克，酵母膏1.0克，牛肉膏2.0克，NaCl 20.0克，CaCO₃ 1克，水1000毫升，pH 7.5。将斜面种子接到装有50毫升液体培养基的种子瓶中，28℃，200个往复/分钟振荡培养2天，得到种子液。

发酵液：以5％wt的接种量把种子液接入发酵瓶，28℃，200个往复/分钟振荡培养4天，得放线菌发酵液。

本发明的优良效果：

1.对农产品安全

拮抗木霉菌在寄生过程中产生了一系列降解病原菌细胞壁的水解酶，如几丁质酶、纤维素酶、木聚糖酶、葡聚糖酶等。这些酶对植物病原真菌的细胞壁具有强烈的水解作用，从而抑制病原菌孢子萌发并引起菌丝以及孢子的消解，而且酶之间具有协同作用。通过酶的作用使真菌细胞壁遭到破坏，继而引起原生质解体。放线菌是创制抗生素的主要菌类，作为农用抗生素的一大生产源被广泛开发利用。这些酶类和抗生素对人、畜无毒副作用，也不易在植物体内残留，对农产品安全。

2.防病效果好

作物病害特别根系病害应以预防为主，一旦发病再用药时已经造成了一定的危害。本肥料采用在作物播种或移栽时施入主要根区，对防止病菌侵入根系、危害幼苗具有良好作用。同时，肥料中含有丰富的营养物质，如氨基酸、微量元素、有机质等，它们具有与防病物质协同作用的效果，因此防病效果好。

3.使用方便

本发明药、肥一起施用，减少了发病时的施药次数，节省了用工成本，提高了经济效益。

4.生产成本低

与生产生物农药比较，本发明所生产的木霉菌、放线菌发酵液不需要提取或分离有效成分，而是直接加入到腐熟的有机物中，既能保证效果又节约了生产成本。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步说明，但不限于此。原料说明如下：

微生物发酵菌剂是EM复合菌剂，江西省天意生物技术开发有限公司生产。

木霉菌是拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)中国普通微生物保藏管理中心菌种目录编号3.3002，放线菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中国普通微生物保藏管理中心菌种目录编号1.933，中国普通微生物保藏管理中心购得。

糠醛渣是河南宏业化工有限公司以玉米芯为主要原料制造糠醛过程中的废渣，粉碎粒径≤20目，糠醛渣的水分含量35％wt，有机质含量38％wt。

烟渣是河南中烟工业公司卷烟生产过程中废弃的烟叶残渣，烟渣的粉碎粒径≤20目，烟渣的有机质含量55％。

风化煤的粒径60～80目，内蒙古乌海市蒙唐商贸有限公司售。

实施例中的原料用量份数均为质量份，所有的比例均为质量比，所有的百分比均为质量百分比。

实施例1：

(1)腐熟有机物的制备：

以质量份计，将粉碎过20目的糠醛渣50份、烟渣30份、风化煤19份、EM复合菌剂1份充分混合均匀。调整混合料的水分为60％，C/N为25，pH7.5。将混合料堆成高1.5米的梯形堆，自顶部往下打孔，每平方米孔数8个，盖上塑料薄膜，进行有氧发酵。待堆温升至50℃以上开始计时，发酵4天。翻堆，堆温升至50℃以上时再发酵3天。将上述发酵好的有机肥水分含量晾至30％备用。

(2)木霉菌菌剂的制备：

棉籽壳培养料的制备：棉籽壳92份，磷酸二氢钾2份，过磷酸钙4份，氯化镁2份，水120份，充分混匀，调节pH值6.5，高压灭菌在0.12兆帕下保持4小时。

木霉菌株在PDA斜面培养基上培养2天，转移至PD液体培养基中，28℃振荡培养3天，以2％的接种量再接种于灭菌棉籽壳上，28℃培养6天。

(3)放线菌发酵液的制备：

斜面种子：培养基配方为NaCl 19.5克，MgCl₂ 25.9克，Na₂SO4 3.3克，CaCl₂ 21.9克，蛋白胨5.0克，酵母膏1.0克，琼脂15克，水1000毫升，pH 7.5。在0.12兆帕压力下灭菌20分钟，斜面制作完后在无菌条件下接种原始放线菌种，放置在28℃恒温培养箱中培养2天。

发酵液：以5％的接种量把种子液接入发酵瓶，28℃，200个往复/分钟振荡培养4天，得放线菌发酵液。

(4)将腐熟的有机物70份、木霉菌菌剂15份、放线菌发酵液15份充分混匀，常温下晾至水分含量21％，得生物防病有机肥。

本肥料适合病害较重的土壤。

实施例2：

(1)腐熟有机物的制备：

以质量份计，将糠醛渣60份、烟渣25份、风化煤13份、EM复合菌剂2份充分混合均匀。调整混合料的水分为65％，C/N为28，pH 7。将混合料堆成高2.0米的梯形堆，自顶部往下打孔，每平方米孔数12个，盖上塑料薄膜，进行有氧发酵。待堆温升至50℃以上开始计时，发酵5天。翻堆，堆温升至50℃以上时再发酵2天。将上述发酵好的有机物水分含量晾至25％备用。

(2)木霉菌菌剂的制备：

棉籽壳培养料的制备：棉籽壳95份，磷酸二氢钾1份，过磷酸钙2份，氯化镁2份，水140份，充分混匀，调节pH值7.5，高压灭菌在0.15兆帕下保持3小时。

木霉菌株在PDA斜面培养基上培养2天，转移至PD液体培养基中，28℃振荡培养2天，再以5％的接种量接种于灭菌棉籽壳上，28℃培养10天。

(3)放线菌发酵液的制备同实施例1。

(4)将腐熟有机物85份、木霉菌菌剂10份、放线菌发酵液5份充分混匀，常温下晾至水分含量22％，得生物防病有机肥。

本肥料适合病害较轻的土壤。

实施例3：

木霉菌菌剂、放线菌发酵液、有机物腐熟制备方法与实施例1相同，所不同的是：

有机物发酵原料为糠醛渣55份、烟渣35份、风化煤9份、EM复合菌剂1份；生物防病有机肥配方是腐熟有机物80份、木霉菌菌剂15份、放线菌发酵液10份。

本肥料适合病害中等的土壤。

实施例4：

木霉菌菌剂、放线菌发酵液、有机物腐熟制备方法与实施例2相同，所不同的是：

有机物发酵原料为糠醛渣65份、烟渣20份、风化煤13份、EM复合菌剂2份；

生物防病有机肥配方是腐熟有机物80份、木霉菌菌剂10份、放线菌发酵液15份。

本肥料适合病害中等的土壤。

对比例：以质量份计，将糠醛渣60份、烟渣25份、风化煤13份、EM复合菌剂2份充分混合均匀充分混合均匀，按实施例2的方法发酵，发酵结束后直接作为有机肥，不添加木霉菌菌剂和放线菌发酵液。

以上实施例1～4和对比例的应用效果如下：

供试棉花品种为鲁棉研15号，土壤是潮土。供试辣椒品种为青州羊角椒，保护地栽培。所有的肥料均作基肥施用，施用方法是在棉花和辣椒移栽前一次施入栽植沟的底部，与部分土壤混合后栽植秧苗。施用量，棉花每亩100公斤，辣椒每亩150公斤。

Claims

1.生物防病有机肥，其特征在于原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物65～85份，木霉菌菌剂5～15份，放线菌发酵液5～15份；

所述的腐熟有机物是以糠醛渣45～65份、烟渣20～35份、风化煤8～20份为原料，加入微生物发酵菌剂1～2份堆积发酵，晾至水分含量25～35wt％制得；所述微生物发酵菌剂是EM复合菌剂；

所述的木霉菌是拟康氏木霉(Trichoderma pseudokoningii)中国普通微生物保藏管理中心菌种目录编号3.3002，放线菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)中国普通微生物保藏管理中心菌种目录编号1.933。

2.如权利要求1所述的生物防病有机肥，其特征在于用于病害较重的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物70份，木霉菌菌剂15份，放线菌发酵液15份。

3.如权利要求1所述的生物防病有机肥，其特征在于用于病害较轻的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物85份，木霉菌菌剂10份，放线菌发酵液5份。

4.如权利要求1所述的生物防病有机肥，其特征在于用于病害中等程度的土壤的生物防病有机肥，原料组分如下，均为质量份：

腐熟有机物80份，木霉菌菌剂10-15份，放线菌发酵液10-15份。

5.权利要求1所述的生物防病有机肥的制备方法，步骤如下：

(1)腐熟有机物的制备

以质量份计，将糠醛渣45～65份、烟渣20～35份、风化煤8～20份、微生物发酵菌剂1～2份充分混合均匀；调整混合料的水分为58～70wt％，C/N为23～28质量比，pH7～7.5；

将上述混合料堆成高1.5～2.0米的梯形堆，长度不限，自顶部往下打孔，每平方米孔数8～15个，盖上塑料薄膜，进行有氧发酵；待堆温升至50℃开始计时，发酵3～5天；翻堆，再发酵2～3天，发酵过程完成；将发酵好的有机肥水分含量晾至25～35wt％，备用；

(2)木霉菌菌剂的制备

棉籽壳培养料的制备：棉籽壳90～95份，磷酸二氢钾1～2份，过磷酸钙2～4份，氯化镁1～2份，水120～140份，充分混匀，调节pH值6.5～7.5，高压灭菌在0.12～0.15兆帕下保持3～4小时；

木霉菌株在PDA斜面培养基上培养2天，转移至PD液体培养基中，28℃振荡培养2～3天，再以2～5wt％的接种量接种于灭菌棉籽壳上，28℃培养5～10天，待其长满孢子后即可作为木霉菌菌剂使用；菌活指数是1×10¹⁰个/克以上；

(3)放线菌发酵液的制备，以放线菌为菌种经过斜面和液体培养得放线菌发酵液，菌活指数是1×10⁸个/毫升以上；

(4)将腐熟有机物65～85份、木霉菌菌剂5～15份、放线菌发酵液5～15份充分混匀，常温下晾至水分含量20～22wt％，得生物防病有机肥。

6.如权利要求5所述的生物防病有机肥的制备方法，其特征在于步骤(1)所述的打孔是孔径3～5厘米，孔深到料堆的底部。