CN101738447B - 利用相对校正因子测定化合物含量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种用高效液相色谱法测定易于在溶液中发生构型转化的化合物含量的方法。取待测化合物样品溶液，测定已转化的异构体和未转化的异构体的峰面积，将已转化的异构体峰面积乘以相对校正因子C，再加上未转化的异构体的峰面积，由此结果计算出待测化合物标示含量。用上述方法测定卡泊三醇制剂中卡泊三醇标示含量，取得了满意的结果。本发明的方法简便，实用，结果准确。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用相对校正因子测定化合物含量的方法，具体涉及用高效液相色谱法测定容易发生构型转化的化合物含量的方法。
背景技术
许多具有生物活性的物质都具有一个或多个手性中心，存在多种异构体。即使单一异构体化合物，在一定的条件下，如制备成溶液或在适当的温度下，单一异构体也会发生转化，尤其是在溶液中加热或冷却情况下。
尤其是药物制成非固体制剂，因药物处于非固体基质或溶液中，对于有手性中心的药物，往往容易发生构型转化，且不同的条件下(如溶剂不同，或温度不同时)，转化程度不一。这给药物标示含量的测定带来了较大难度。
如用于治疗寻常性银屑病的卡泊三醇(化学名为(5Z，7E，22E，24S)-24-环丙基-9，10-开环胆甾-5，7，10(19)，22-四烯-1α，3β，24-三醇)，制备成溶液后会部分转化为异构体前卡泊三醇，两种异构体均为卡泊三醇药物制剂中的有效成分。
卡泊三醇 前卡泊三醇
前卡泊三醇和卡泊三醇可以互相转化，在不同溶剂中转化程度不一。卡泊三醇及前卡泊三醇的紫外吸收系数也不同。
丹麦利奥制药有限公司测定卡泊三醇制剂标示含量的方法比较耗时，需要将提取的样品溶液在75℃条件下保温2小时后，方可用高效液相色谱法测定。
因此非常需要找到一种方法，能够得到转化异构体含量的相对校正系数，测定含量后通过校正便可以得到比较准确的待测物含量。
发明内容
本发明的目的是建立一种测定易于在溶液中发生构型转化的化合物含量的简便方法，
本发明通过测算已转化的异构体的相对校正因子，达到了上述发明目的。
详述本方法如下：
一种用高效液相色谱法测定溶液中易发生构型转化的化合物含量的方法，特征为：
取待测化合物样品溶液，测定已转化的异构体和未转化的异构体的峰面积，将已转化的异构体峰面积乘以相对校正因子C，再加上未转化的异构体的峰面积，由此结果计算出待测化合物标示含量；
所述相对校正因子C通过以下步骤测算：
①配制待测化合物标准品溶液，立即测定未转化异构体的初始峰面积A0；
②分别测定待测化合物标准品配制溶液后若干个不同时刻未转化的异构体的峰面积At和已转化的异构体的峰面积Bt，所述若干是3-10；
③按下式分别计算各不同时刻相对校正因子Ct：Ct＝(A0-At)/Bt；
④计算Ct平均值，得到相对校正因子C。
本发明人用上述方法测定卡泊三醇制剂中卡泊三醇标示含量，取得了满意的结果，与现有技术方法相比，测定的标示含量结果吻合。其步骤为：
1、测算前卡泊三醇相对校正因子：
①配制卡泊三醇标准品溶液，立即测定卡泊三醇的初始峰面积A0；
②配制卡泊三醇标准品溶液后，分别选3-5个不同时刻测定卡泊三醇的峰面积At和前卡泊三醇的峰面积Bt；
③按下式分别计算各不同时刻相对校正因子Ct：
Ct＝(A0-At)/Bt (式1)
④计算Ct平均值，得到相对校正因子C。
在本方法中，高效液相色谱的色谱柱和流动相不同，相应的相对校正因子C不同。
本发明用上述方法进行了两种色谱条件下前卡泊三醇相对于卡泊三醇的相对校正因子测算：
其中，色谱条件1：乙腈-水(50～60:40～50)(V/V)为流动相，色谱柱为ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，柱温为40℃，流速为1.0ml/分钟，所测相对校正因子是2.02；
色谱条件2：0.01mol/L磷酸氢二铵水溶液(PH＝6.0)-甲醇-乙腈(25～35:25～35:35～45)(V/V)为流动相；色谱柱为VP-ODS-C18(250mm×4.6mm，柱温为30℃，流速为1.2ml/分钟，5μm)，所测相对校正因子是2.42。
2、用前卡泊三醇相对校正因子测定卡泊三醇制剂中卡泊三醇标示含量的方法：
取待测样品溶液，测定卡泊三醇和前卡泊三醇的峰面积，将前卡泊三醇的峰面积乘以相对校正因子C，再加上卡泊三醇的峰面积，由此结果计算出卡泊三醇标示含量。
本发明分别用上述两种流动相进行了多种卡泊三醇制剂中卡泊三醇标示含量的测定，并分别利用上述两个相对校正因子进行测算，并逐一与现有技术的测定方法进行了比较，均取得了满意的结果。
所述卡泊三醇制剂包括油膏剂、乳膏剂、搽剂，还包括卡泊三醇复方制剂，如卡泊三醇与皮质激素类的复方制剂。
本发明的方法简便，实用，结果准确。
附图说明：
图1 卡泊三醇标准品溶液0分钟色谱图
图2 卡泊三醇标准品溶液75℃保温120分钟色谱图
具体实施方式：
以下实施例用高效液相色谱仪进行测定，实施例中除特别说明，测定条件均按如下进行：
高效液相色谱仪(美国waters)，2695四元梯度泵，2487紫外检测器，Empower化学工作站。
试剂：甲醇、乙腈，色谱纯；纯水；磷酸氢二铵，分析纯；
卡泊三醇标准品(批号：20070601生产厂家：重庆华邦制药股份有限公司，含量：95.0％)；甲基睾丸素(批号：449724/1生产厂家：Sigma-Aldricn，含量：97.0％)。
提取溶剂：乙腈-甲醇-0.01mol/L磷酸氢二铵水溶液(20:50:30)(V/V)，除特别说明外，用此提取溶剂。
色谱条件1：乙腈-水(55:45)(V/V)为流动相，色谱柱为ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，柱温为40℃，流速为1.0ml/分钟。
色谱条件2：0.01mol/L磷酸氢二铵水溶液(PH＝6.0)-甲醇-乙腈(30:30:40)(V/V)为流动相；色谱柱为VP-ODS-C18(250mm×4.6mm，柱温为30℃，流速为1.2ml/分钟，5μm)。
检测波长：265nm
进样量：20μl
理论板数按卡泊三醇峰计算应不低于3000
实施例1 前卡泊三醇相对校正因子的测定(色谱条件1)
1)配制标准品溶液
取卡泊三醇标准品10mg置50ml量瓶中，加甲醇10ml使溶解，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，取10.0ml置100ml中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，分别取适量置西林瓶中，加盖密封，分别置75℃水浴中水浴30、60、120分钟，取出，迅速冷却。
2)取上述75℃恒温水浴中保温不同时间点的标准品溶液，分别按色谱条件1进样20μl。记录色谱图，分别测定前卡泊三醇峰面积与卡泊三醇峰面积，计算相对校正因子，测定结果见表1。
表1 前卡泊三醇相对校正因子(色谱条件1)
测定结果：在用色谱条件1的情况下测得的前卡泊三醇相对校正因子为2.02。
表2 卡泊三醇标准品溶液保温0分钟测定结果
| 峰号 | 峰名 | 保留时间(min) | 峰面积 | 峰面积(％) | 对称因子 | 分离度 |
| 1 | 前卡泊三醇 | - | - | - | - | - |
| 2 | 杂质1 | 12.817 | 2578 | 0.24 | 1.08 | 2.07 |
| 3 | 卡泊三醇 | 13.946 | 1075283 | 99.49 | 1.05 | 3.03 |
| 4 | 杂质2 | 16.570 | 2988 | 0.28 | 1.08 | 6.12 |
表3 卡泊三醇标准品溶液保温120分钟测定结果
| 峰号 | 峰名 | 保留时间(min) | 峰面积 | 峰面积(％) | 对称因子 | 分离度 |
| 1 | 前卡泊三醇 | 12.231 | 86874 | 6572 | 1.06 | |
| 2 | 杂质1 | 12.832 | 2624 | 185 | 1.03 | 2.05 |
| 3 | 卡泊三醇 | 13.958 | 899630 | 60113 | 1.06 | 2.96 |
| 4 | 杂质2 | 16.622 | 3186 | 186 | 1.05 | 6.15 |
实施例2 前卡泊三醇相对校正因子的测定(色谱条件2)
1)配制标准品溶液
取卡泊三醇标准品10mg置50ml量瓶中，加甲醇10ml使溶解，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，取10.0ml置100ml中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，分别取适量置西林瓶中，加盖密封，分别置75℃水浴中水浴30、60、120分钟，取出，迅速冷却。
2)取上述75℃恒温水浴中保温不同时间点的标准品溶液，分别按色谱条件2进样20μl。记录色谱图，分别测定前卡泊三醇峰面积与卡泊三醇峰面积，计算相对校正因子，测定结果见表4。
表4 前卡泊三醇相对校正因子(色谱条件2)
测定结果：在用色谱条件2的情况下测得的前卡泊三醇相对校正因子为2.42。
结论：用实施例1、2两种色谱条件测得的前卡泊三醇相对校正因子分别是2.02和2.42，且卡泊三醇与前卡泊三醇分离良好，前卡泊三醇与卡泊三醇之间有另一杂质峰，杂质与前卡泊三醇分离良好。
实施例3 卡泊三醇油膏标示含量测定
一、测试样品：
样品1～样品3：卡泊三醇油膏(批号：20080301、20080302、20080303，生产厂家：重庆华邦药股份有限公司)。
样品4：卡泊三醇油膏(批号：EA8695，爱尔兰利奥制药有限公司)。
油膏空白基质(批号：20080201，生产厂家：重庆华邦药股份有限公司)。
卡泊三醇标准品：称取两份，每份测定两次。
样品：每个样品称取两份，每份样品测定一次。
二、用相对校正因子法测定卡泊三醇油膏标示含量
(1)色谱条件：同色谱条件1
(2)内标贮备液的制备取甲基睾丸素20mg置100ml量瓶中，加提取溶剂溶解并加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(3)标准品贮备液的制备精密称取卡泊三醇标准品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇10ml超声使卡泊三醇溶解，加提取溶剂溶解稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)样品溶液制备避光操作。精密称取1g卡泊三醇油膏样品置50ml具塞比色管中，精密加入内标贮备液5ml、提取溶液15ml，置75℃恒温水浴中缓缓加热使油膏融化，加正庚烷10ml，将凡士林涂于塞子表面适量，塞紧塞子，用力振摇10分钟，在4000转/分钟的离心条件下离心10分钟，取下层溶液，滤过，取续滤液作为样品溶液。
(5)标准品溶液制备避光操作。取卡泊三醇油膏空白基质1g置50ml具塞比色管中，精密加入内标贮备液5ml，精密加入标准品贮备液5ml、提取溶液10ml，置75℃热水浴中缓缓加热使油膏融解，同样品溶液方法得标准品溶液。
(6)标示含量测定分别取样品1～4溶液和标准品溶液进样20μl，按内标法以峰面积(卡泊三醇校正峰面积用前卡泊三醇峰面积乘以相对校正因子2.02加上卡泊三醇峰面积)计算，即得，结果见表5-1及表5-2。
(7)计算公式
式中：
f：校正系数
mr：标准品称量(g)；
0.950：卡泊三醇标准品含量系数；
A内：内标峰峰面积；
Ar：计算的标准品中卡泊三醇峰面积，Ar＝Ar卡+C×Ar前卡；
m内：内标称量(g)；
As：计算的样品中卡泊三醇峰面积，As＝As卡+C×As前卡；
ms：样品称量(g)；
15g：0.00075g：卡泊三醇油膏规格；
As卡：样品卡泊三醇峰面积；
As前卡：样品前卡泊三醇峰面积；
C：2.02。
表5-1 相对校正因子法标示含量校正系数
注：
A内——标准品或样品中内标峰面积；
A卡——标准品或样品中卡泊三醇峰面积；
A前卡——标准品或样品中前卡泊三醇峰面积。
标准品1-1、1-2分别表示同一份标准品测定的两个平行样
表5-2 相对校正因子法标示含量测定结果
样品1-1、1-2代表样品1称取的两份平行样
三、现有方法测定卡泊三醇油膏标示含量
采用丹麦利奥制药有限公司的进口卡泊三醇油膏质量标准(H20050125)方法进行检测。
(1)色谱条件：色谱柱为ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，以乙腈-0.01mol/L磷酸氢二铵(PH＝6.0)-甲醇(20:30:50)(V/V)为流动相，检测波长265nm，柱温40℃，流速1.0ml/分钟。
(2)内标贮备液的制备与标准品贮备液的制备同本实施例二。
(3)避光操作。取本品1g，精密称定，精密加入内标贮备液5ml与提取溶液15ml，置蒸汽浴中微微加热融解，加正庚烷10ml，振摇30分钟，静置，取下层溶液离心，取上清液作为样品溶液，另取空白基质1g，精密称定，精密加入标准品贮备液5ml、内标贮备液5ml与提取溶液10ml，置蒸汽浴中微微加热融解，加正庚烷10ml，振摇30分钟，静置，取下层溶液离心，取上清液作为标准品溶液。取样品溶液和标准品溶液，分别75℃恒温水浴中加热2小时，迅速冷却至室温，分别取样品溶液和标准品溶液各20μl，注入液相色谱仪，按内标法以峰高计算，即得。结果见表6-1及表6-2：
(4)f值和标示含量的计算
f值按式2计算，标示含量按式3计算
表6-1 现有技术方法校正系数
表6-2 现有技术方法标示含量测定结果
结论：相对校正因子法和丹麦利奥制药有限公司测定方法相比，标示含量测定结果无明显差异，相对校正因子法具有分离度好、灵敏度高、准确度好，简单快速，且测定结果两种方法比较无明显差异。
实施例4 卡泊三醇乳膏标示含量测定
一、测试样品
样品1～样品3(批号：20071001、20071002、20071003，生产厂家：重庆华邦药股份有限公司)。
二、相对校正因子法测定卡泊三醇乳膏标示含量
(1)色谱条件：同色谱条件2。
(2)内标贮备液的制备 取甲基睾丸素20mg置100ml量瓶中，加提取溶剂溶解并加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(3)标准品贮备液的制备 精密称取卡泊三醇标准品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇10ml超声使卡泊三醇溶解，加提取溶剂溶解稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)样品溶液制备 避光操作。精密称取卡泊三醇乳膏1g置15ml烧杯中，精密加入内标贮备液5ml，加提取溶液15ml，置热水浴中缓缓加热使乳膏融解，转移至50ml离心管中，置冰水浴中放置20分钟，取出，在4000转/分钟的离心条件下离心10分钟，取下层溶液，滤过，取续滤液作为样品溶液。
(5)标准品溶液制备 避光操作。精密加入内标贮备液5ml及标准品贮备液5ml，加提取溶液10ml摇匀，作为标准品溶液。
(6)标示含量测定 分别取样品溶液和标准品溶液进样20μl，按内标法以峰面积计算，即得，结果见表7-1及表7-2。
(7)f值和标示含量的计算
f值按式2计算，标示含量按式3计算，其中C＝2.42
表7-1 相对校正因子法含量校正系数
表7-2 相对校正因子法标示含量测定结果
三、现有方法测定卡泊三醇油膏标示含量
采用丹麦利奥制药有限公司的进口卡泊三醇油膏质量标准(X20010238)方法进行检测。
(1)色谱条件：色谱柱为ZORBAX SB-C18柱(250mm×4.6mm，5μm)，以乙腈:甲醇：0.01mol/L磷酸氢二铵(PH＝6.0)(20:50:30)为流动相，检测波长265nm，柱温40℃，流速1.0ml/分钟。
(2)内标贮备液的制备与标准品贮备液的制备同本实施例二。
(3)避光操作。取本品1g，精密称定，精密加入内标贮备液5ml与提取溶液15ml，置蒸汽浴中微微加热融解，加正庚烷10ml，振摇30分钟，静置，取下层溶液离心，取上清液作为样品溶液，另取空白基质1g，精密称定，精密加入标准品贮备液5ml、内标贮备液5ml与提取溶液10ml，置蒸汽浴中微微加热融解，加正庚烷10ml，振摇30分钟，静置，取下层溶液离心，取上清液作为标准品溶液。取样品溶液置和标准品溶液，分别置75℃恒温水浴中加热2小时，迅速冷却至室温，分别取样品溶液置和标准品溶液各20μl，注入液相色谱仪，按内标法以峰高计算，即得。结果见表8-1及8-2：
(4)f值和标示含量的计算
f值按式2计算，标示含量按式3计算
表8-1 现有技术方法校正系数
表8-2 现有技术方法标示含量测定结果
结论：相对校正因子法和丹麦利奥制药有限公司测定方法相比，标示含量测定结果无明显差异，相对校正因子法具有分离度好、灵敏度高、准确度好，简单快速，且测定结果两种方法比较无明显差异。
实施例5 卡泊三醇搽剂标示含量测定
一、样品来源：
样品1～样品3(批号：20080701、20080702、20080703，生产厂家：重庆华邦药股份有限公司)。
二、相对校正因子法测定卡泊三醇搽剂标示含量
(1)色谱条件：同色谱条件1。
(2)内标贮备液的制备 取甲基睾丸素10mg置100ml量瓶中，加提取溶剂溶解并加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(3)标准品贮备液的制备 精密称取卡泊三醇标准品25mg，置50ml量瓶中，加甲醇10ml超声使卡泊三醇溶解，加提取溶剂溶解稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)标准品溶液制备 避光操作。取空白基质5ml置50ml量瓶中，精密加入内标贮备液5ml及标准品贮备液5ml，加提取溶剂稀释至近刻度，超声使卡泊三醇溶解，放至室温，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为标准品溶液。
(5)样品溶液制备 避光操作。精密量取卡泊三醇搽剂5ml置50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加提取溶剂稀释至近刻度，超声使卡泊三醇溶解，放至室温，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为样品溶液。
(6)标示含量测定 分别取样品溶液和标准品溶液进样20μl，按内标法以峰面积计算，即得，结果见表9-1及表9-2。
(7)f值和标示含量的计算
前卡泊三醇相对校正因子C＝2.02
表9-1 相对校正因子法含量校正系数
表9-2 相对校正因子法标示含量测定结果
三、现有方法测定卡泊三醇搽剂标示含量
采用丹麦利奥制药有限公司的进口卡泊三醇搽剂质量标准(H20020065)方法进行检测。
(1)取预试液50μl注入液相色谱仪，记录色谱图，卡泊三醇与5，6-反式卡泊三醇的分离度不得小于1.3。
(2)色谱条件：色谱柱VP-DS-C18(250mm×4.6mm，5μm)；以乙腈:甲醇：0.01mol/L磷酸氢二铵(PH＝6.0)(20:50:30)为流动相，检测波长265nm，柱温40℃，流速1.0ml/分钟。
(3)预试液的制备取卡泊三醇标准品与5，6-反式卡泊三醇标准品适量，用流动相制成每1ml中含2组份各1.5μg的溶液。精密量取该溶液适量，用水按7:3的比例进行稀释，摇匀。
(4)内标溶液的制备取甲基睾丸素，用流动相制成每1ml中含50μg的溶液，即得。
(5)标准品溶液的制备取卡泊三醇标准品1mg，精密称定，精密加入流动相20ml，振摇使溶解，精密量取该溶液2ml，依法加入内标溶液4ml，流动相16ml与空白2ml，摇匀。
(6)样品溶液的制备精密量取本品1ml，精密称定，精密加入内标溶液2ml与流动相9ml，摇匀，即得。
(7)测定法分别量取上述溶液适量，置50℃水浴中保温15～18小时，取出后，迅速冷却至室温，各精密量取50μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，按内标法以峰面积计算，即得。测定后，色谱柱要用清洗液冲洗1小时。结果见表10-1及表10-2：
(8)按下式计算f值和标示含量
表10-1 现有技术方法校正系数
表10-2 现有技术方法标示含量测定结果
结论：相对校正因子方法和国外方法相比，两种方法标示含量测定结果无明显差异，相对校正因子法具有分离度好、灵敏度高、准确度好，简单快速，且测定结果两种方法比较无明显差异。
实施例6 复方卡泊三醇乳膏中卡泊三醇的标示含量测定
一、样品来源：
样品1～样品3(批号：20080701、20080702、20080703，生产厂家：重庆华邦药股份有限公司，本品为卡泊三醇与二丙酸倍他米松复方制剂，规格为15g中含卡泊三醇0.75mg及二丙酸倍他米松7.5mg)。
二、相对校正因子法测定复方卡泊三醇乳膏中卡泊三醇的标示含量
(1)色谱条件：同色谱条件2。
(2)内标贮备液的制备 取甲基睾丸素20mg置100ml量瓶中，加提取溶剂溶解并加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(3)标准品贮备液的制备 精密称取卡泊三醇标准品10mg，置100ml量瓶中，加甲醇10ml超声使卡泊三醇溶解，加提取溶剂溶解稀释至刻度，摇匀，精密量取此液10ml置100ml量瓶中，加提取溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
(4)操作法 避光操作。精密称取复方卡泊三醇乳膏1.0g置于50ml量瓶中，精密加入内标溶液5ml，加入提取溶剂15ml，置热水浴中超声并振摇15分钟，冰水浴中放置20分钟，在4000转/分钟的离心条件下离心10分钟，取上清液滤过，取续滤液作为样品溶液；精密量取标准品贮备液5ml及内标贮备溶液5ml，加入提取溶剂10ml，混匀，作为标准品溶液；分别取样品溶液和标准品溶液进样20μl，按内标法以峰面积计算，即得卡泊三醇的标示含量。实验结果见表11-1及表11-2。
(5)f值和标示含量的计算
f值按式2计算，标示含量按式3计算，其中C＝2.42
表11-1 复方卡泊三醇乳膏样品溶液测定结果
表11-1 复方卡泊三醇乳膏样品溶液测定结果
Claims (8)
1.一种用高效液相色谱法测定易于在溶液中发生构型转化的化合物含量的方法，配制待测化合物样品溶液，测定已转化的异构体和未转化的异构体的峰面积，按内标法以峰面积计算出待测化合物标示含量，特征为：
将已转化的异构体峰面积乘以相对校正因子C，再加上未转化的异构体的峰面积，且所述相对校正因子C通过以下步骤测算：
①配制待测化合物标准品溶液，立即测定未转化异构体的初始峰面积A0；
②分别测定待测化合物标准品配制溶液后若干个不同时刻未转化的异构体的峰面积At和已转化的异构体的峰面积Bt，所述若干是3-10；
③按下式分别计算各不同时刻相对校正因子Ct：
Ct=(A0-At)/Bt；
④计算Ct平均值，得到相对校正因子C。
2.一种用高效液相色谱法测定卡泊三醇制剂中前卡泊三醇相对校正因子的方法，其步骤为：
①配制卡泊三醇标准品溶液，立即测定卡泊三醇的初始峰面积A0；
②配制卡泊三醇标准品溶液后，分别选3-5个不同时刻测定卡泊三醇的峰面积At和前卡泊三醇的峰面积Bt；
③按下式分别计算各不同时刻相对校正因子Ct：
Ct=(A0-At)/Bt；
④计算Ct平均值，得到相对校正因子C。
3.一种用高效液相色谱法测定卡泊三醇制剂中卡泊三醇标示含量的方法，特征为：
取待测样品溶液，测定卡泊三醇和前卡泊三醇的峰面积，将前卡泊三醇的峰面积乘以按权利要求2方法所得的相对校正因子C，再加上卡泊三醇的峰面积，用内标法计算出卡泊三醇标示含量。
4.权利要求3所述的方法，色谱条件是：
流动相为乙腈和水，乙腈和水用量的体积比为55:45；
色谱柱为ZORBAX SB-C18柱，250mm×4.6mm，5μm，柱温为40℃，流速1.0ml/分钟；
所述相对校正因子C＝2.02。
5.权利要求3所述的方法，色谱条件是：
流动相为磷酸氢二铵水溶液、甲醇和乙腈，三者的用量的体积比为30:30:40，所述磷酸氢二铵水溶液浓度为0.01mol/L，pH为6.0；
色谱柱为VP-ODS-C18，250mm×4.6mm，5μm；柱温为30℃；流速为1.2ml/分钟；
所述相对校正因子C＝2.42。
6.权利要求3～5任一所述的方法，所述卡泊三醇制剂是油膏剂、搽剂或乳膏剂。
7.权利要求3～5任一所述的方法，所述卡泊三醇制剂是复方制剂。
8.权利要求7所述的方法，所述复方制剂是卡泊三醇与皮质激素类的复方制剂。
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Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1086015A (zh) * | 1993-10-22 | 1994-04-27 | 石油大学 | 用微型脉冲裂解气相色谱技术评价乙烯原料的方法 |
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|---|---|---|---|---|
| CN1086015A (zh) * | 1993-10-22 | 1994-04-27 | 石油大学 | 用微型脉冲裂解气相色谱技术评价乙烯原料的方法 |
| CN1428605A (zh) * | 2001-12-27 | 2003-07-09 | 中国科学院山西煤炭化学研究所 | 一种沥青、重质油和焦油中烃族组成的分析方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 中华人民共和国药典编委.内标法加校正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量.《中国药典一部标准附录（2005年版）》.2005,47. * |
| 谭镜明.功能性分子筛催化异构化合成金刚烷的研究.《广东工业大学工学硕士学位论文》.2005,33-34. * |
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