CN101710126A - 特种蛋白定量检测方法 - Google Patents

Abstract

特种蛋白定量检测方法属于医疗检测技术领域。现有方法通过肉眼观察特种蛋白检测卡检测线的灰度变化，判断待测特种蛋白的有无，无法定量检测。本发明之方法为，配制某种特种蛋白系列试样，该系列试样的特种蛋白浓度值已知并依次由零到高变化；采用特种蛋白检测卡检测各试样，显现不同浓度试样的灰度不同的检测线；采用图像探测器摄取各个灰度不同的检测线图像，经光电转换得到与不同灰度对应的具有不同电压的电信号，作为预置信号存入计算机；采用特种蛋白检测卡实测某一试样，显现灰度检测线，采用图像探测器摄取该检测线图像，并将相应的电信号送入计算机；由计算机找到与该实测试样灰度上下相邻的两个预置信号，通过插值运算得到实测试样中待测特种蛋白的浓度值。

Description

特种蛋白定量检测方法

技术领域

本发明涉及一种特种蛋白定量检测方法，使用特种蛋白检测卡检测，通过特种蛋白检测卡上的质控线、检测线的灰度变化，确定试样中待测特种蛋白是否存在以及其含量，属于医疗检测技术领域。

背景技术

申请号为200410011165.5、名称为“氮末端脑利钠肽前体的免疫胶体金的快速定性检测盒”一件中国专利申请公开了一项有关特种蛋白检测的技术方案，在该方案中，使用特种蛋白检测卡检测试样中是否存在待检特种蛋白。在特种蛋白检测卡1正面有加样孔2、显示窗口3，见图1所示，在特种蛋白检测卡1内部，硝酸纤维素膜从加样口2延续到显示窗口3。依据胶体金免疫技术实现检测。根据检测的特种蛋白的不同，采用不同的标记抗体处理硝酸纤维素膜。自加样口2滴入试样，因毛细作用试样沿着硝酸纤维素膜渗透，并在显示窗口3处的硝酸纤维素膜上与标记抗体相遇。如果发生质控反应则显现质控线4，证明特种蛋白检测卡1有效。如果还发生检测反应，即试样中的待测特种蛋白与标记抗体结合形成抗原抗体复合物，则显现检测线5，说明试样中存在待测特种蛋白，见图2所示。通过肉眼观察上述过程，判断试样中是否携带了待测特定蛋白。检测线5的灰度较浅，则认为试样没有携带待测特定蛋白。这种采用特种蛋白检测卡1检测的方法只能实现定性检测，即判断试样中待测特种蛋白的有无，而无法定量检测，即无法检测试样中待测特种蛋白的含量。

发明内容

本发明目的在于实现特种蛋白的定量检测。为此，我们发明了一种特种蛋白定量检测方法。

本发明是这样实现的，见图3所示，第一步，配制某种特种蛋白系列试样，该系列试样的特种蛋白浓度值已知并依次由零到高变化。第二步，采用特种蛋白检测卡检测各试样，显现不同浓度试样的灰度不同的检测线。第三步，采用图像探测器摄取各个灰度不同的检测线图像，经光电转换得到与不同灰度对应的具有不同电压的电信号，作为预置信号存入计算机，形成浓度——电信号关系标准数据体系。第四步，采用特种蛋白检测卡实测某一试样，显现灰度检测线，采用图像探测器摄取该检测线图像，并将相应的电信号送入计算机。第五步，由计算机在浓度——电信号关系标准数据体系中找到与该实测试样灰度上下相邻的两个预置信号，再通过插值运算得到实测试样中待测特种蛋白的浓度值。

在上述过程中，配制待测特种蛋白某一浓度的试样，或者说该试样浓度已知，由特种蛋白检测卡显现具有某一灰度的检测线，再通过装置取得该检测线的具有某一电压的图像电信号，建立起浓度——电信号关系标准数据。所述技术方案其效果在于，能够在30秒～3分钟内完成检测试样中待测特种蛋白的定量检测。

附图说明

图1是现有特种蛋白检测卡结构及检测时显现质控线示意图。图2是现有特种蛋白检测卡结构及检测时显现质控线、检测线示意图。图3是本发明之方法步骤框图，该图兼作为摘要附图。

具体实施方式

第一步，配制某种特种蛋白系列试样，该系列试样的特种蛋白浓度值已知并依次由零到高变化。如配制人心肌肌钙蛋白系列血样，浓度由零到高依次为：

0.0ng/ml、0.75ng/ml、1.5ng/ml、3.0ng/ml、6.0ng/ml、12.0ng/ml、24.0ng/ml、48.0ng/ml、96.0ng/ml、192.0ng/ml。

或者配制人肌酸激酶同工酶蛋白系列血样，浓度由零到高依次为：

0.0ng/ml、1.0ng/ml、2.0ng/ml、4.0ng/ml、8.0ng/ml、16.0ng/ml、32.0ng/ml、64.0ng/ml、128.0ng/ml、256.0ng/ml、512.0ng/ml。

第二步，采用特种蛋白检测卡检测各试样，显现不同浓度试样的灰度不同的检测线。

第三步，采用图像探测器摄取各个灰度不同的检测线图像，经光电转换得到与不同灰度对应的具有不同电压的电信号，作为预置信号存入计算机。所述的图像探测器由CCD器件及其驱动和数据采集电路构成。

每一种浓度的试样检测多次，如3～100次，剔除偏差较大的试样，取其他试样测量结果的平均值作为标准值，将该标准值作为预置信号存入计算机，形成浓度——电信号关系标准数据体系。

第四步，采用特种蛋白检测卡实测某一试样，显现灰度检测线，采用图像探测器摄取该检测线图像，并将相应的电信号送入计算机。

第五步，由计算机在浓度——电信号关系标准数据体系中找到与该实测试样灰度上下相邻的两个预置信号，再通过插值运算得到实测试样中待测特种蛋白的浓度值。

运算公式如下：

$f\left(x\right)=(x-b)\frac{f\left(a\right)-f\left(b\right)}{a-b}+f\left(b\right)$

其中：x表示某一灰度检测线的图像信号电压；

f(x)表示与某一灰度检测线的图像信号电压对应的试样中待测特种蛋白的浓度；

a、b表示与x上下相邻的两个预置信号，其中a大于b；

f(a)、f(b)表示所述两个预置信号a、b对应的特种蛋白的浓度。

Claims (3)

1.一种特种蛋白定量检测方法，其特征在于：

第一步，配制某种特种蛋白系列试样，该系列试样的特种蛋白浓度值已知并依次由零到高变化；

第二步，采用特种蛋白检测卡检测各试样，显现不同浓度试样的灰度不同的检测线；

第三步，采用图像探测器摄取各个灰度不同的检测线图像，经光电转换得到与不同灰度对应的具有不同电压的电信号，作为预置信号存入计算机，形成浓度——电信号关系标准数据体系；

第四步，采用特种蛋白检测卡实测某一试样，显现灰度检测线，采用图像探测器摄取该检测线图像，并将相应的电信号送入计算机；

第五步，由计算机在浓度——电信号关系标准数据体系中找到与该实测试样灰度上下相邻的两个预置信号，再通过插值运算得到实测试样中待测特种蛋白的浓度值。

2.根据权利要求1所述的特种蛋白定量检测方法，其特征在于，每一种浓度的试样检测3～100次，剔除偏差较大的试样，取其他试样测量结果的平均值作为标准值，将该标准值作为预置信号存入计算机，形成浓度——电信号关系标准数据体系。

3.根据权利要求1所述的特种蛋白定量检测方法，其特征在于，运算公式如下：

$f\left(x\right)=(x-b)\frac{f\left(a\right)-f\left(b\right)}{a-b}+f\left(b\right),$

式中：x表示某一灰度检测线的图像信号电压；

f(x)表示与某一灰度检测线的图像信号电压对应的试样中待测特种蛋白的浓度；

a、b表示与x上下相邻的两个预置信号，其中a大于b；

f(a)、f(b)表示所述两个预置信号a、b对应的特种蛋白的浓度。

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