CN101705219B - 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 - Google Patents
可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101705219B CN101705219B CN 200910112854 CN200910112854A CN101705219B CN 101705219 B CN101705219 B CN 101705219B CN 200910112854 CN200910112854 CN 200910112854 CN 200910112854 A CN200910112854 A CN 200910112854A CN 101705219 B CN101705219 B CN 101705219B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- fish
- protease
- production method
- proteolytic enzyme
- preparation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 title claims abstract description 51
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 title claims abstract description 46
- 239000004365 Protease Substances 0.000 title claims abstract description 44
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 title claims abstract description 18
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 13
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 title claims abstract 8
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 title claims description 6
- 235000021190 leftovers Nutrition 0.000 title abstract description 6
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 claims abstract description 22
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 claims abstract description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 19
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 18
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 18
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims abstract description 10
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 claims description 43
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 10
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 9
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 8
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims description 8
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 5
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims description 5
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 4
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 229940062054 oxygen 30 % Drugs 0.000 claims description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims description 3
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 claims 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 claims 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims 1
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 claims 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 claims 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims 1
- 239000012092 media component Substances 0.000 claims 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 20
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 20
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 abstract description 14
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 10
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 abstract description 9
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 abstract description 4
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 abstract description 3
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 34
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 17
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 8
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 7
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 3
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 3
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 3
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 3
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 3
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 108091005508 Acid proteases Proteins 0.000 description 2
- 108090000145 Bacillolysin Proteins 0.000 description 2
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 description 2
- 102000035092 Neutral proteases Human genes 0.000 description 2
- 108091005507 Neutral proteases Proteins 0.000 description 2
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000008934 Muscle Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010074084 Muscle Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 1
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 210000001557 animal structure Anatomy 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000009776 industrial production Methods 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000013028 medium composition Substances 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 1
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种新型蛋白酶的生产方法，用该方法生产出的蛋白酶具有较强的弹性蛋白酶活性，能高效地水解淡水鱼及鱼类加工下脚料。该蛋白酶的生产方法可概述为：用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期，加入从鱼鳞或鱼皮提取的胶原蛋白及triton-100，将发酵温度提高2-3℃，继续发酵16h，弹性蛋白酶活力可达到650U/mL，总蛋白酶活力可达到2216U/mL；提取蛋白酶并制成粉状酶制剂，该酶制剂的总蛋白酶活力为1.8万U/g，弹性蛋白酶活力为5423U/g；用该蛋白酶制剂对淡水鱼及鱼类加工下脚料进行水解，可大大提高水解效率。
Description
技术领域
本发明涉及一种利用枯草芽孢杆菌发酵生产新型蛋白酶及其制剂的方法，特别是涉及一种可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法，其制备技术属于发酵工程及生物化工技术领域，其应用技术涉及医药、食品、化妆品领域。
背景技术
用酶水解低值鱼及鱼类加工下脚料生产高附加值产品是低值鱼及鱼类综合利用的重要途径。淡水鱼及鱼类下脚料含有丰富的胶原蛋白及较少的内源弹性蛋白酶，用目前的商品蛋白酶(碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等)对其进行水解时，普遍存在水解得率低、水解不彻底等问题；因此，如何生产出能高效水解淡水鱼和鱼类加工下脚料的新型蛋白酶制剂对于淡水鱼的精加工及综合利用具有重要意义。
弹性蛋白酶(EC 3.4.4.7，Elastase)是一种以水解不溶性弹性硬蛋白(elastin，如胶原蛋白)为特征的蛋白水解酶，它不仅能高效地水解弹性蛋白，也可以高效地水解肌肉蛋白，因此，用具有弹性蛋白酶活性的新型蛋白酶水解淡水鱼及富含胶原蛋白的鱼类加工下脚料，可大大提高水解效率。
目前，弹性蛋白酶的生产方法是从猪胰腺中提取，产品价格十分昂贵，不适于在食品领域中推广应用。相比从动物脏器中提取弹性蛋白酶，利用微生物发酵法生产弹性蛋白酶具有周期短、效率高、易实现工业化生产等特点，可大大降低弹性蛋白酶的生产成本。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶的生产方法，其工艺步骤包括：(1)菌种活化；(2)种子制备；(3)用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期；(4)加入从鱼鳞或鱼皮中提取的胶原蛋白诱导蛋白酶的产生，添加triton-100并提高发酵温度促进蛋白酶的分泌，这样可以在短期内产生大量的蛋白酶，该蛋白酶具有很强的弹性蛋白酶活性；(5)蛋白酶的分离与制剂。
所用的菌种为枯草芽孢杆菌，所生产的蛋白酶具有很强的弹性蛋白酶活性。
所述步骤(3)中所用的培养基中不包含蛋白胨、牛肉膏等有机氮源，其组分为：葡萄糖1-8％，玉米浆粉0.2-1％，K2HPO30.06-0.2％，MgSO4·7H2O 0.034％，，余量为水。发酵参数为：装料系数0.7，接种量10％，培养温度32-37℃，溶氧30％±5％，pH 7.4±0.2，培养时间为10-16h；溶氧通过与转速偶联而自控，pH值与酸碱偶联而自控。
所述步骤(4)中，当所述步骤(3)结束后，枯草芽孢杆菌处于对数生长期后期，菌体活力旺盛，但缺少氮源，此时，加入来源于鱼鳞或鱼皮的胶原蛋白就可诱导蛋白酶大量表达，同时添加triton-100并提高发酵温度增加细胞膜的透性，促进蛋白酶的分泌。
步骤(3)可产生大量氮源缺乏、但活力旺盛的枯草芽孢杆菌的菌体，在这种情况下进入步骤(4)，即加入胶原蛋白粉作为诱导物，就可大量诱蛋白酶的表达，这种蛋白酶含有较强的弹性蛋白酶活性，步骤(3)和步骤(4)必须共同使用才能获得大量的、能高效水解淡水鱼及鱼类加工下脚料的新型蛋白酶。
所述步骤(5)中蛋白酶的制剂工艺为：发酵液经15000r/m离心10min去除菌体，加入硫酸铵至饱和度为40％，4℃冷藏12h，离心去除沉淀，再次加入硫酸铵使饱和度达到70％，4℃冷藏12h，离心收集沉淀，用超滤法去除硫酸铵并截留分子量为30-60kDa的组分，并浓缩至总蛋白酶活力20000U/mL，加入少量糊精吸附酶液，冷冻干燥保存。
有益效果
本发明采用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌，获得大量活力旺盛，但氮源缺乏的枯草芽孢杆菌的菌体，在这种情况下加下来源于鱼鳞或鱼皮的胶原蛋白粉就可大量诱导蛋白酶的表达；该蛋白酶由于是用胶原蛋白做为诱导物而产生的，因此具有很强的弹性蛋白酶活性，能高效地水解淡水鱼和鱼类加工下脚料；为了促进蛋白酶的分泌，在加入诱导物后，加入Titron-100并将发酵温度提高2-3℃，这样可以提高枯草芽孢杆菌细胞膜的透性，促进蛋白酶的分泌。用该方法发酵蛋白酶，发酵液中弹性蛋白酶活力可达到650U/mL，总蛋白酶活力可达到2216U/mL；制成的粉状酶制剂中，弹性蛋白酶活力为5423U/g，总蛋白酶活力为1.8万U/g；用该方法生产出的蛋白酶制剂不仅具有较强的弹性蛋白酶活性，还具有其他特性的多种蛋白酶蛋白酶活性，用于淡水鱼及鱼类下脚料的水解，可显著提高水解度。
如，在蛋白质浓度为2％，加酶量为400U/g蛋白，适宜温度和pH值(中性蛋白酶的水解温度为55℃，水解pH为7.0；碱性蛋白酶的水解温度为45℃，水解pH值为8.0；酸性蛋白酶的水解温度为45℃，水解pH为3.0；本专利所提供的蛋白酶的水解温度为55℃，水解pH为7.4)的条件下对5种淡水鱼及罗非鱼下脚料进行水解，当水解达到平衡时，测定水解产物的水解度，结果如表1所示。在所试验的5种淡水鱼及罗非鱼下脚料的水解试验当中，用本专利生产的蛋白酶所产生的水解效果都最好。
表1几种蛋白酶水解淡水鱼及鱼加工副产物的比较
具体实施方式
实施方式1
本发明是一种可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法，其工艺步骤包括：(1)菌种活化：菌种活化的培养基组成为：牛肉膏0.4％，蛋白胨0.6％，酵母膏0.2％，NaCl 0.5％，琼脂2％，水分96.3％，pH7.5；菌种活化的培养温度为37℃，培养时间为24h；(2)种子制备：种子制备的培养基组成为：牛肉膏0.4％，蛋白胨0.6％，酵母膏0.2％，NaCl 0.5％，水分98.3％，pH7.5；摇瓶菌种制备是在250ml的三角瓶中进行的，种子培养基装量为20ml，种子培养基制备好以后，将新活化的斜面菌苔接种至培养基中，放入摇床中，在180r/m、32℃的条件下培养24h；车间种子的制备是在种子罐中进行的，培养基的装料系数为0.7，接种量为1％，搅拌转速为120r/m，通气量为0.2vvm，培养温度为32℃，培养时间为14h；(3)用不含有机氮源的培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期，制备枯草芽孢杆菌培养基，培养基的组成为：葡萄糖1％，玉米浆粉0.2％，K2HPO30.06％，MgSO4·7H2O 0.034％，水分98.71％；培养基的装料系数为0.7；培养基灭菌并冷却后，以10％的接种量接入菌种，在发酵温度32℃、溶氧30％±5％、pH 7.4±0.2的条件下培养12h；(4)加入0.1％的诱导物、0.06％的triton-100，将发酵温度提高至34℃并维持发酵溶氧和pH不变，继续发酵16h按工艺说明书步骤(5)提取弹性蛋白酶并制备酶粉。(5)蛋白酶的分离与制剂，蛋白酶的制剂工艺为：发酵液经15000r/m离心10min去除菌体，加入硫酸铵至饱和度为40％，4℃冷藏12h，离心去除沉淀，再次加入硫酸铵使饱和度达到70％，4℃冷藏12h，离心收集沉淀，用超滤法去除硫酸铵并截留分子量为30-60kDa的组分，并浓缩至总蛋白酶活力20000U/mL，加入少量糊精吸附酶液，冷冻干燥保存。
实施方式2
本实施例与第一个实施例基本相同，所不同的是：(3)制备枯草芽孢杆菌培养基，培养基的组成为：葡萄糖8％，玉米浆粉1％，K2HPO30.2％，MgSO4·7H2O0.034％，水分90.77％；培养基的装料系数为0.7；培养基灭菌并冷却后，以10％的接种量接入菌种，在发酵温度37℃、溶氧30％±5％、pH 7.4±0.2的条件下培养16h(4)加入0.1％的诱导物、0.06％的triton-100，将发酵温度提高至40℃并维持发酵溶氧和pH不变，继续发酵16h按工艺说明书步骤(5)提取弹性蛋白酶并制备酶粉。
实施方式3
本实施例与第一个实施例基本相同，所不同的是：(3)制备枯草芽孢杆菌培养基，培养基的组成为：葡萄糖4.5％，玉米浆粉0.6％，K2HPO30.13％，MgSO4·7H2O 0.034％，水分94.74％；培养基的装料系数为0.7；当培养基灭菌并冷却后，以10％的接种量接入新培养的种子，在发酵温度37℃、溶氧30％±5％、pH 7.4±0.2的条件下培养14h后，加入0.1％的诱导物、0.06％的triton-100，将发酵温度提高至37℃并维持发酵溶氧和pH不变，继续发酵16h按工艺说明书步骤(5)提取弹性蛋白酶并制备酶粉。
实施方式4
本实施例与第一个实施例基本相同，所不同的是：(3)制备枯草芽孢杆菌培养基，培养基的组成为：葡萄糖7.4％，玉米浆粉0.66％，K2HPO30.15％，MgSO4·7H2O 0.034％，水分91.76％；培养基的装料系数为0.7；当培养基灭菌并冷却后，以10％的接种量接入新培养的种子，在发酵温度37℃，、溶氧30％±5％、pH 7.4±0.2的条件下培养12h后；(4)加入0.1％的诱导物、0.06％的triton-100，将发酵温度提高至37℃并维持发酵溶氧和pH不变，继续发酵16h按工艺说明书步骤(5)提取弹性蛋白酶并制备酶粉。
Claims (2)
1.一种可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶的生产方法，其工艺步骤包括：
(1)菌种活化；(2)种子制备；(3)用培养基培养枯草芽孢杆菌至对数生长期，所述的培养基组分为：葡萄糖1-8％，玉米浆粉0.2-1％，K2HPO30.06-0.2％，MgSO4·7H2O 0.034％，余量为水；发酵参数为：装料系数0.7，接种量10％，培养温度32-37℃，溶氧30％±5％，pH 7.4±0.2，培养时间为10-16h；溶氧通过与转速偶联而自控，pH值与酸碱偶联而自控；(4)加入从鱼鳞或鱼皮中提取的胶原蛋白诱导蛋白酶的产生，添加triton-100并提高发酵温度促进蛋白酶的分泌，这样可以在短期内产生大量的蛋白酶，该蛋白酶具有很强的弹性蛋白酶活性；(5)蛋白酶的分离与制剂。
2.据根权利要求书1所述的可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法，其特征在于：所述步骤(5)中蛋白酶的制剂工艺为：发酵液经15000r/m离心10min去除菌体，加入硫酸铵至饱和度为40％，4℃冷藏12h，离心去除沉淀，再次加入硫酸铵使饱和度达到70％，4℃冷藏12h，离心收集沉淀，用超滤法去除硫酸铵并截留分子量为30-60kDa的组分，并浓缩至总蛋白酶活力20000U/mL，加入少量糊精吸附酶液，冷冻干燥保存。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910112854 CN101705219B (zh) | 2009-11-12 | 2009-11-12 | 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200910112854 CN101705219B (zh) | 2009-11-12 | 2009-11-12 | 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101705219A CN101705219A (zh) | 2010-05-12 |
| CN101705219B true CN101705219B (zh) | 2013-04-24 |
Family
ID=42375474
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200910112854 Expired - Fee Related CN101705219B (zh) | 2009-11-12 | 2009-11-12 | 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101705219B (zh) |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101886106A (zh) * | 2010-07-02 | 2010-11-17 | 湖北远成药业有限公司 | 一种鱼鳞胶原蛋白肽的提取方法 |
| CN102559537B (zh) * | 2011-11-15 | 2013-06-12 | 中国科学院微生物研究所 | 一株芽孢杆菌及其在生产蛋白酶中的应用 |
| CN104000008A (zh) * | 2014-05-26 | 2014-08-27 | 上海创博食品技术发展有限公司 | 一种利用亚洲鲤鱼制得的蛋白饲料原料及其制备方法 |
| CN105695546A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-06-22 | 广东海洋大学 | 一种利用水产品下脚料发酵制备液态有机肥的方法 |
| CN105724550B (zh) * | 2016-03-09 | 2018-08-03 | 广东海洋大学 | 一种利用微生物发酵进行鱼类下脚料骨肉分离的方法 |
| CN109486730A (zh) * | 2019-01-09 | 2019-03-19 | 上海海洋大学 | 芽孢杆菌h3、由其发酵鱼皮制备胶原蛋白多肽的用途和胶原蛋白多肽 |
| CN110651915A (zh) * | 2019-09-20 | 2020-01-07 | 福建天马科技集团股份有限公司 | 一种用于大黄鱼膨化配合饲料的复合型功能性添加剂，及其制备方法 |
| CN118406613A (zh) * | 2024-05-31 | 2024-07-30 | 江苏海洋大学 | 一种海洋细菌Bacillus sp.G12及其产蛋白酶的方法和应用 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1186658A1 (en) * | 1999-05-27 | 2002-03-13 | Amano Enzyme Inc. | Enzyme liquor and process for producing the same, enzyme preparation, protease preparations and protease-producing bacterium |
| CN1769424A (zh) * | 2005-09-20 | 2006-05-10 | 浙江大学 | 一种芽孢杆菌菌株及其用途 |
-
2009
- 2009-11-12 CN CN 200910112854 patent/CN101705219B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1186658A1 (en) * | 1999-05-27 | 2002-03-13 | Amano Enzyme Inc. | Enzyme liquor and process for producing the same, enzyme preparation, protease preparations and protease-producing bacterium |
| CN1769424A (zh) * | 2005-09-20 | 2006-05-10 | 浙江大学 | 一种芽孢杆菌菌株及其用途 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| J.Labadie 等.Synthesis of collagenase by the phytopathogenic bacterium corynebacterium rathayii.《Journal of applied microbiology》.1990,第69卷(第6期),828-833. * |
| Y.Ellouz 等.Production of protease by bacillus subtilis grown on sardinelle heads and viscera flour.《Bioresource technology》.2001,第80卷(第1期),49-51. * |
| 卢珍华.枯草芽孢杆菌培养液水解鱼蛋白质制备蛋白胨的初步研究.《集美大学学报（自然科学版）》.2006,第11卷(第1期),34-38. * |
| 张娟.产弹性蛋白酶芽孢杆菌的选育及发酵条件的优化.《中国优秀硕士学位论文全文数据库基础科学辑(月刊)》.2008,(第2期),A006-132. * |
| 陈启和.弹性蛋白酶发酵工艺及其发酵动力研究.《中国优秀博硕士学位论文全文数据库（博士）工程科技Ⅰ辑》.2004,(第1期),B018-7. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN101705219A (zh) | 2010-05-12 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101705219B (zh) | 可高效水解淡水鱼及鱼类下脚料的蛋白酶生产方法 | |
| CN103598420B (zh) | 一种香蕉茎叶青贮的微生物复合菌剂及其制备方法 | |
| CN101433270A (zh) | 一种菜籽蛋白饲料及其制备方法 | |
| CN106244658B (zh) | 一种甘薯蛋白多肽的制备方法 | |
| CN105648012A (zh) | 一种固态发酵联合液态酶解的制备水产蛋白活性肽的方法 | |
| CN104878060A (zh) | 一种生产抗菌肽的枯草芽孢杆菌培养基及其应用 | |
| CN105695546A (zh) | 一种利用水产品下脚料发酵制备液态有机肥的方法 | |
| CN103300147B (zh) | 采用两步法制作具有血管紧张素转化酶抑制活性发酵乳的方法 | |
| CN109198167B (zh) | 饲用酵母水解物及其制备方法和应用 | |
| CN103627689A (zh) | 一种利用微生物液态发酵生产弹性蛋白酶酶制剂的方法 | |
| CN102334702B (zh) | 一种紫菜蛋白多糖营养素粉的生产方法 | |
| CN102703407A (zh) | 一种枯草芽孢杆菌工程菌发酵制备亮氨酸氨肽酶的方法 | |
| CN108841882A (zh) | 一种利用谷氨酸发酵废弃菌体发酵生产聚谷氨酸的方法 | |
| CN103045485B (zh) | 米黑根毛霉菌株及其在制备β-葡聚糖酶和凝乳酶中的应用 | |
| CN102093992B (zh) | 微生物发酵生产低温蛋白酶的方法 | |
| CN102787153B (zh) | 微生物发酵补料生产恩拉霉素的方法 | |
| CN101491289A (zh) | 一种菜籽蛋白饲料及其制备方法 | |
| CN104694523A (zh) | 一种精氨酸脱亚胺酶的胞外表达方法及其应用 | |
| CN101912036B (zh) | 一种畜禽全血水解物的制备方法 | |
| CN104388404A (zh) | 脂肪酶的微生物发酵及提取分离方法 | |
| CN101440390B (zh) | 混菌固态发酵制备菜籽活性肽的方法 | |
| CN105200102B (zh) | 从产朊假丝酵母发酵液中提取谷胱甘肽的方法 | |
| CN109321624A (zh) | 一种新鲜猪皮制备活性胶原蛋白肽的酶解工艺 | |
| CN101701206A (zh) | 一种利用废弃生物有机质生产微生物培养基氮源的方法 | |
| CN103865865B (zh) | 一种海参肠道产碱性蛋白酶菌株及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C14 | Grant of patent or utility model | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20130424 |