CN101912036B - 一种畜禽全血水解物的制备方法 - Google Patents

一种畜禽全血水解物的制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种畜禽全血水解物的制备方法。收集畜禽新鲜全血后,按全血重量的2.5%添加百分比浓度为10%的柠檬酸钠溶液,进行抗凝处理,然后按抗凝处理后全血重量加入链霉素,搅拌均匀后升温至55℃,按全血重量添加Neutrase 0.8L中性蛋白酶,55℃保温水解16-18小时,水解过程中每2小时搅拌5分钟;将经过蛋白酶水解处理的全血升温至90℃,保持10分钟,然后冷却至30℃,按全血体积的5%接种碳黑曲霉二级种子,28-30℃,通风量80-90m3/小时,发酵60-65小时;将经过发酵的全血直接进行喷雾干燥,获得的深棕色粉末物质即为全血水解物。

Description

一种畜禽全血水解物的制备方法
(一)技术领域
本发明涉及一种畜禽全血水解物的制备方法,具体涉及一种采用酶工程和生物发酵技术相结合的办法,将畜禽全血中的蛋白质、血纤维、血细胞壁水解为小分子可溶性物质,属生物工程领域。
(二)背景技术
我国畜禽血液的利用,70年代以前,利用量很少,主要作为食用,加工成传统血豆腐、血肠、血肉丸子,另有极少部分作饲用血粉,绝大部分血液作为废弃物放掉。70年代术期和80年代初期,国家开始重视血液的综合利用,国家科委、商业部和一些省市的有关厅、局、公司、肉联厂以及科研单位和工厂,把血液的综合利用作为重点课题进行攻关,相继开发研究出一些血液的产品。近几年来血液的利用取得很大进展,相继出现了许多重大科研成果,使血液利用的经济效益和社会效益大幅度提高。从血液营养的丰富程度和目前开发利用的广度和深度对比来讲,畜禽血资源的开发利用是远远不够的。目前畜禽血的利用率不到30%。我国每年屠宰生产的动物鲜血量达200多万吨,仅猪血就约有150万吨,是最大的动物性蛋白资源之一。我国每年屠宰生猪近5亿头,占世界生猪屠宰总量的45%。猪血资源十分丰富,但目前除少量用于制作血豆腐、血肠或直接食用外,基本未得到开发利用,不仅浪费了资源,同时又严重污染了环境。动物的血液由血细胞和血浆两部分组成,血细胞包括红细胞(红血球)、白细胞(白血球)和血小板。红细胞除含65%一68%的水外,主要含血红蛋白,占30%一35%,其他蛋白质占0.05%一1%,以及磷脂、胆固醇等。目前,我国利用猪血资源开发的产品还比较单调,除了一小部分被加工成血粉或发酵血粉作为饲料添加剂及用于生化制药生产血红素、超氧化物歧化酶、蛋白陈外,相当大的一部分都作为废弃物排出,既污染了环境,又浪费了宝贵的蛋白资源。
为了提高动物血的价值,本发明采用酶工程和生物发酵技术相结合的办法,将畜禽全血中的蛋白质、血纤维、血细胞壁水解为小分子可溶性物质,产品作为营养成分及功效物质适量添加于饲料中,可以明显提高动物的机体免疫力。本发明的实施不仅可以扩大畜禽血液的应用范围,同时减少了畜禽血液的任意排放,符合国家节能减排、发展循环经济的产业政策,具有非常深远的现实意义。
(三)发明内容
本发明目的在于提供一种畜禽全血水解物的制备方法。
本发明的目的是这样实现的:
1.水解酶及发酵微生物的选择
1.1蛋白水解酶的选择
本发明首现选择蛋白水解酶对血浆蛋白进行部分水解,经过多次试验最终选择诺维信Neutrase 0.8L中性蛋白酶。
1.2发酵微生物的选择
本发明将Neutrase 0.8L中性蛋白酶水解后的全血进行碳黑曲霉继续水解,选择的微生物购于中国微生物菌种保藏中心,菌种名称:碳黑曲霉Aspergillus carbonarius,编号:40093。
2.畜禽全血水解物的制备
2.1全血预处理
收集畜禽新鲜全血后,按全血重量的2.5%添加百分比浓度为10%的柠檬酸钠溶液,进行抗凝处理,然后按抗凝处理后全血重量加入链霉素,添加量为:4000万单位/吨,搅拌均匀。
2.2蛋白酶水解
将预处理后的全血升温至55℃,按全血重量添加Neutrase 0.8L中性蛋白酶,添加量为1升/吨,55-58℃保温水解16-18小时,水解过程中每2小时搅拌5分钟。
2.3微生物水解
2.3.1微生物种子的制备
2.3.1.1微生物种子培养基的制备
6~7°Bé米曲汁,121℃灭菌20分钟冷却至30℃。
2.3.1.2一级种子制备
量取6~7°Bé无菌米曲汁200ml于1只500ml三角瓶内,用接种环接种碳黑曲霉斜面一环,在28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为一级种子。
2.3.1.3二级种子制备
按培养基体积10%的接种量接种一级种子于6~7°Bé无菌米曲汁中,28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为二级种子。
2.3.2微生物发酵
将经过蛋白酶水解处理的全血升温至90℃,保持10分钟,然后冷却至30℃,按全血体积的5%接种二级种子,28-30℃,通风量80-90m3/小时,发酵时间:60-65小时。
2.3.3全血水解物的制备
将经过发酵的全血直接进行喷雾干燥,获得的深棕色粉末物质即为全血水解物。
采用该方法制备全血水解物,原理在于:蛋白酶水解部分血浆蛋白为低分子肽类及氨基酸,为微生物发酵提供了良好的氮源,碳黑曲霉在发酵过程中产生α-葡萄糖苷酶,作用于血纤维及血细胞壁,将其降解为可溶性多糖或单糖,经过酶解和微生物发酵处理,全血中大分子蛋白及不溶性纤维类物质被水解为小分子可溶性物质,故本产品中含有多种蛋白肽、可溶性多糖、单糖、核酸等营养源,可作为功能性饲料添加剂。
(四)附图说明
图1为炭黑曲霉扫描电镜照片。
(五)具体实施方式
1.收集畜禽新鲜全血后,按全血重量的2.5%添加百分比浓度为10%的柠檬酸钠溶液,进行抗凝处理,然后按抗凝处理后全血重量加入链霉素,添加量为:4000万单位/吨,搅拌均匀后升温至55℃,按全血重量添加Neutrase 0.8L中性蛋白酶,添加量为1升/吨,55℃保温水解16-18小时,水解过程中每2小时搅拌5分钟;
2.量取6~7°Bé无菌米曲汁200ml于1只500ml三角瓶内,用接种环接种碳黑曲霉斜面一环,在28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为一级种子,按培养基体积10%的接种量接种一级种子于6~7°Bé无菌米曲汁中,28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为二级种子;
3.将经过蛋白酶水解处理的全血升温至90℃,保持10分钟,然后冷却至30℃,按全血体积的5%接种二级种子,28-30℃,通风量80-90m3/小时,发酵时间:60-65小时;
4.将经过发酵的全血直接进行喷雾干燥,获得的深棕色粉末物质即为全血水解物。

Claims (1)

1.一种畜禽全血水解物的制备方法,其特征在于按以下步骤进行:
1)、收集畜禽新鲜全血后,按全血重量的2.5%添加百分比浓度为10%的柠檬酸钠溶液,进行抗凝处理,然后按抗凝处理后全血重量加入链霉素,添加量为:4000万单位/吨,搅拌均匀后升温至55℃,按全血重量添加Neutrase 0.8L中性蛋白酶,添加量为1升/吨,55℃保温水解16-18小时,水解过程中每2小时搅拌5分钟;
2)、量取6~7°Bé无菌米曲汁200ml于1只500ml三角瓶内,用接种环从碳黑曲霉斜面取一环进行接种,在28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为一级种子,按培养基体积10%的接种量接种一级种子于6~7°Bé无菌米曲汁中,28-30℃、150转/分钟摇床培养48小时,作为二级种子;
3)、将经过蛋白酶水解处理的全血升温至90℃,保持10分钟,然后冷却至30℃,按全血体积的5%接种二级种子,28-30℃,通风量80-90m3/小时,发酵时间:60-65小时;
4)将经过发酵的全血直接进行喷雾干燥,获得的深棕色粉末物质即为全血水解物。
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