CN101665466A

CN101665466A - 一种喹唑啉二硫二氮衍生物的制备方法

Info

Publication number: CN101665466A
Application number: CN 200910034320
Authority: CN
Inventors: 张建康; 周杏琴; 钦晓峰; 徐希杰; 邹美芬
Original assignee: Jiangsu Institute of Nuclear Medicine
Current assignee: Jiangsu Institute of Nuclear Medicine
Priority date: 2009-08-24
Filing date: 2009-08-24
Publication date: 2010-03-10
Anticipated expiration: 2029-08-24
Also published as: CN101665466B

Abstract

一种喹唑啉二硫二氮衍生物的制备方法，属于放射性药物标记前体化合物合成技术领域。本发明提供一种N－[[4－(3－碘苯基)氨基]－喹唑啉－6－基]－2－[N－(2－巯基乙基)－N－[[N－(2－巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(IQNS)制备方法，用于制备锝标记的放射性药物^99mTc－IQNS。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95％以上，方便进一步用于生物学特性的研究。

Description

一种喹唑啉二硫二氮衍生物的制备方法

技术领域

本发明设计一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺制备方法，属于放射性药物标记前体化合物合成技术领域。

背景技术

N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(简称IQNS)，其结构式如上，分子式为C₂₂H₂₅IN₆O₂S₂，可以与同位素锝方便地形成稳定的络合物^99mTc-IQNS。

肿瘤受体显像是21世纪肿瘤核医学的一个新领域，近年来从分子医学水平上探讨受体功能与肿瘤产生及发展的关系，并用于诊断治疗，是国际上医学科学研究领域的前沿。利用放射性核素进行肿瘤受体显像，是分子核医学应用于肿瘤医学研究的新技术。

表皮生长因子受体(EGFR)是一种具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白受体。EGFR几乎在所有人类上皮源性肿瘤中均有较高的表达，如非小细胞癌、乳腺癌、食管癌、胃癌、膀胱癌等。EGFR与配体结合或受辐射刺激后，其分子形成二聚体并内陷，使细胞内酪氨酸激酶磷酸化，通过激活细胞内多条重要的信号传导通路来发挥作用。抑制EGFR酪氨酸激酶活性，可以抑制肿瘤生长。以EGFR为靶点进行靶向治疗肿瘤是当今癌症治疗中十分活跃的领域之一，在临床研究中已经取得显著的疗效。

放射性核素标记EGFR抑制剂用于肿瘤的早期定性、定位诊断、优化治疗方案、判断疗效以及靶向放射治疗正引起越来越多的肿瘤学者的注意。国外有用¹⁸F，¹¹C和¹²⁴I标记4-氨基喹唑啉类EGFR抑制剂用于EGFR受体显像的研究，而关于^99mTc标记氨基喹唑啉类EGFR抑制剂报道较少。^99mTc具有良好的性质适合SPECT显像，以及^99mTc方便易得，因此设计^99mTc标记4-氨基喹唑啉类EGFR抑制剂具有更好的临床推广意义。

^99mTc-IQNS是我们设计的一种新型的4-氨基喹唑啉类EGFR受体显像剂。在CA上无登记号，国内外也没有相关报道。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95％以上，方便进一步用于生物学特性的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，用于制备锝标记的放射性药物^99mTc-N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺，用于肿瘤EGFR受体显像。

本发明的技术方案：

一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，其特征是反应方程式为：

(1)、化合物I4-氯-6-硝基喹唑啉的合成

6-硝基喹唑啉酮和过量摩尔比的氯化亚砜，在N，N-二甲基甲酰胺催化下，回流3小时，减压蒸出多余的氯化亚砜，得化合物I，化合物I 0℃保存，无需纯化直接用于下一步反应；

(2)、化合物II6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成

将化合物I和2.5倍化合物I摩尔量的间碘苯胺溶于异丙醇，先室温搅拌10min，产生亮黄色沉淀，然后再升温回流反应4小时，冷却，过滤，异丙醇洗涤，真空80℃烘干，得化合物II；

(3)、化合物III6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成

室温搅拌下，将化合物II加入5倍化合物II摩尔量的氯化亚锡二水合物的浓盐酸中，搅拌2小时，过滤，水洗，将滤渣悬浮于水中，滴加氨水调pH至8呈碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶10混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物III；

(4)、化合物IVN-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺的合成

冰浴下，化合物III溶于干燥的四氢呋喃中，加入2.5倍化合物III摩尔量的三乙胺和0.5倍化合物III摩尔量的4-二甲氨基吡啶搅拌15分钟，将化合物III等摩尔量的氯乙酰氯滴加到反应液中，继续搅拌30min，缓慢升至室温搅拌1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，减压蒸出四氢呋喃，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶20混合溶剂为淋洗剂，柱层析纯化得化合物IV；

(5)、化合物VN-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙基)-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙基]氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成

将化合物IV和N-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基)-2-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基氨基)乙酰胺等摩尔反应，5倍化合物IV摩尔量的碳酸钾缚酸剂，化合物IV等摩尔量的碘化钾催化剂，以无水乙腈为反应介质，回流反应24小时，薄层层析检测反应完全，旋干无水乙腈，加入水和二氯甲烷体积比1∶1进行分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷体积比1∶30混合溶剂为淋洗剂，柱层析得化合物V；

(6)、化合物VIN-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成

控温0℃，N₂保护下，将化合物V溶解于三氟乙酸，加2.3倍化合物V摩尔量的干燥苯甲醚，搅拌30min，再加入2倍化合物V摩尔量的醋酸汞，搅拌30min，真空浓缩，得粘稠油状物，油泵抽30min，加入干燥乙醚，超声震荡5min，有黄色固体生成，过滤，滤渣油泵抽干，溶解于无水乙醇-四氢呋喃混合溶剂中，通干燥H₂S反应30min，离心除去黑色粉末状硫化汞，倾出三氟乙酸盐的乙醇溶液，常温下蒸干，油泵抽30min，得黄色固体，即化合物VI的三氟乙酸盐。

本发明的有益效果：本发明合成的N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(IQNS)，分子式为C₂₂H₂₅IN₆O₂S₂，可以与同位素锝方便地形成稳定的络合物^99mTc-IQNS。IQNS与其他辅料一起混合经冷冻干燥可方便地制得药盒，药盒的稳定性较好，标记率达95％以上，方便进一步用于生物学特性的研究。

具体实施方式

实施例1

4-氯-6-硝基喹唑啉(I)

6-硝基喹唑啉酮(9.55g，50mmol)和200ml氯化亚砜，3滴DMF催化下，回流3小时，得到澄清溶液，减压蒸出多余的氯化亚砜，得产物I，产物I零度保存，无需纯化直接用于下一步反应。Mp＝129℃，¹H-NMR(DMSO)δ：8.78(1H，d)，8.56(1H，dd)，8.43(1H，s)，7.88(1H，d)。

实施例2

6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉(II)

将化合物I(10g，0.048mol)和间碘苯胺(26g，0.12mol)溶于异丙醇，先室温搅拌10min，产生亮黄色沉淀，然后再升温回流反应4小时，冷却，过滤，异丙醇洗涤，真空80℃烘干，得产物II(15.05g，80％)。MS(m/z)393(m+1)⁺，¹H-NMR(DMSO)δ：10.56(1H，s)，9.65(1H，d)，8.77(1H，s)，8.59(1H，dd)，8.27(1H，br s)，7.96(2H，m)，7.54(1H，d)，7.23(1H，t)。

实施例3

6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉(III)

室温搅拌下，将产物II(10g，0.026mol)加入到氯化亚锡二水合物(28.9g，0.13mol)的100ml浓盐酸中，搅拌2小时，过滤，水洗，将滤渣溶于水中，滴加氨水调pH至碱性，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，减压蒸干，得粗品，以甲醇∶三氯甲烷(1∶10)为淋洗剂，柱层析纯化得产物III(4.24g，45％)。MS(m/z)363(m+1)⁺，¹H-NMR(DMSO)δ：9.37(1H，s)，8.35(1H，s)，8.32(1H，t)，7.92(1H，dd)，7.52(1H，d)，7.39(1H，d)，7.32(1H，d)，7.24(1H，dd)，7.13(1H，t)，5.60(2H，br s)。

实施例4

N-[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺(IV)

冰浴下，化合物III(2g，5.5mmol)溶于干燥的四氢呋喃中，加入三乙胺(1.40g，13.8mmol)和4-二甲氨基吡啶(0.034g，0.28mmol)搅拌15分钟，将氯乙酰氯(0.62g，5.5mmol)的四氢呋喃溶液滴加到反应液中，继续搅拌30min，缓慢升至室温搅拌1小时，加入饱和碳酸氢钠溶液，减压蒸出THF，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，蒸干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷(1∶20)为淋洗剂，柱层析纯化得产物IV(1.52g，63％)。MS(m/z)439(m+1)⁺，¹H-NMR(DMSO)δ：10.6(1H，s)，9.90(1H，s)，8.71(1H，s)，8.57(1H，s)，8.26(1H，m)，7.82(2H，m)，7.45(1H，d)，7.19(2H，m)，4.36(2H，s)。

实施例5

N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙基)-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙基]氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(V)

将化合物IV(1.5g，3.42mmol)和N-2-(4-甲氧基苄巯基)乙基)-2-(2-(4-甲氧基苄巯基)乙基氨基)乙酰胺(1.48g，3.42mmol)，碳酸钾(2.36g，17.1mmol)缚酸剂，碘化钾(0.57g，3.42mmol)催化剂，以无水乙腈为反应介质，回流反应24小时，TLC反应完全，旋干无水乙腈，加入水和二氯甲烷分层，有机层水洗至中性，无水硫酸钠干燥，旋干得粗品，以甲醇∶三氯甲烷(1∶30)为淋洗剂，柱层析产物V(1.08g，38％)。MS(m/z)837(m+1)⁺，¹H-NMR(DMSO)δ：10.1(1H)，8.7(1H)，8.6(1H)，8.2(1H)，7.7～1.9(4H)，7.5(1H)，7.1(5H)，6.7～6.8(5H)，3.8～3.9(6H)，3.7(2H)，3.5(2H)，3.4(2H)，3.3(2H)，3.2(2H)，2.8(2H)，2.6(4H)。

实施例6

N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺(VI)

控温0℃，N₂保护下，将化合物V(0.5g，0.6mmol)溶解于10mL三氟乙酸，加(0.15mL，1.38mmol)干燥苯甲醚，搅拌30min，再加入(0.39g，1.20mmol)醋酸汞，搅拌30min，真空浓缩，得粘稠油状物，油泵抽30min，加入干燥乙醚，超声震荡5min，有黄色固体生成，过滤，滤渣油泵抽干，溶解于无水乙醇-四氢呋喃混合溶剂中，通干燥H₂S反应30min，离心除去黑色粉末状硫化汞，倾出三氟乙酸盐的乙醇溶液，常温下蒸干，油泵抽30min，得黄色固体VI的三氟乙酸盐(0.12g，29％)。MS(m/z)597(m+1)⁺，由于化合物VI易吸湿氧化，故未进行核磁表征，充氮气保护低温保存，以备^99mTc标记，进一步研究其生物学特性。

Claims

1、一种N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的制备方法，其特征是反应方程式为：

(1)、化合物I 4-氯-6-硝基喹唑啉的合成

(2)、化合物II 6-硝基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成

(3)、化合物III 6-氨基-4-[(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉的合成

(4)、化合物IV N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-氯乙酰胺的合成

(5)、化合物V N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(4-甲氧基苄巯基乙基)-N-[[N-[2-(4-甲氧基苄巯基)乙基]氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成

(6)、化合物VI N-[[4-(3-碘苯基)氨基]-喹唑啉-6-基]-2-[N-(2-巯基乙基)-N-[[N-(2-巯基乙基)氨基]甲酰甲基]]乙酰胺的合成