CN101646673A

CN101646673A - 作为pkc抑制剂的3-氨基-吡咯并[3,4-c]吡唑-5(1h,4h,6h)甲醛衍生物

Info

Publication number: CN101646673A
Application number: CN200880009707.1A
Authority: CN
Inventors: H·李; 贯井齐治; S·A·斯凯尔斯; M·藤; C·殷
Original assignee: SmithKline Beecham Ltd
Current assignee: SmithKline Beecham Ltd; Pfizer Inc
Priority date: 2007-02-07
Filing date: 2008-02-04
Publication date: 2010-02-10
Anticipated expiration: 2028-02-04
Also published as: CN101646673B; UA96618C2

Abstract

本发明涉及式A和B的化合物及其药学可接受的盐，其中A，B，R¹，R²，R³，R⁴，R⁵，R⁶，R⁷，R⁸，R⁹和R¹⁰如说明书中定义的。本发明另外涉及包括所述化合物和药学可接受的盐的药物组合物以及治疗糖尿病及其并发症、癌症、缺血、炎症、中枢神经系统病症、心血管疾病、阿尔茨海默氏病和皮肤病pression、病毒病、炎症性病症、或其中肝脏为目标器官的疾病的方法。

Description

作为PKC抑制剂的3-氨基-吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H，4H，6H)甲醛衍生物

本申请要求2007年2月7日提交的美国临时申请60/888,749、2007年11月19日提交的美国临时申请60/989,086、和2008年1月14日提交的美国临时申请61/020,965的权益，所述申请被全文并入本文作为参考。

发明领域

本发明涉及新的化合物、包括所述化合物的药物组合物、以及所述化合物在药物中和用于制备药物的用途，所述药物作用于人的蛋白激酶C，特别是βII同工型(pkcβII)。

发明背景

蛋白激酶C(PKC)是与多重信号转导途径有关的脂质激活的Ser/Thr激酶超家族。已经识别了十三种PKC同工型并且根据它们受细胞信号分子例如甘油二酯、磷脂、和钙的调节分类。蛋白激酶C同工酶α、β(两种拼接变体PKCβI和PKCβII)和γ的完全活化需要膜磷脂、钙和二酰基甘油佛波醇(diacylglycerolphorbol)酯。PKC的δ、ε、η、θ形式的活化模式是独立于钙的。PKC的ξ和λ形式对钙和甘油二酯都是不依赖的，并且认为其活化只需要膜磷脂。

PKC同工型的组织特异性表达和活化提示，单独的PKC同工型可能是潜在的治疗靶标。对于糖尿病来说，已经在糖尿病患动物的组织中证明了PKC-β的活化，并且涉及与高血糖状态有关的微血管异常的进展。在II型糖尿病的日本患者中，已经在PKCβ基因的5’-侧上游区域确定了遗传多态性。这种PKCβ遗传变异与发展为糖尿病性血管并发症和大血管疾病例如冠心病的敏感性显著增加有关。

在Joslin Diabetes Center进行的大的病例对照研究中，在PKCβ启动子区域确定了另外的多形性，其伴随有I型糖尿病(持续时间＜24年)和糖尿病性肾病发展的更大危险。在糖尿病动物模型中给予PKCβ抑制剂例如甲磺酸芦波妥林(LY333531，Lilly)表现出预防或改善与糖尿病性肾病、糖尿病性外周神经病、和糖尿病性视网膜病有关的血液动力学改变和血管损害。Way，K.J.等人，Diabet.Med.18：945-959(2001)；Vinik，A.，Expert Opin.Investig.Drugs 14：1547-1559(2005)。与得自甲磺酸芦波妥林用于治疗糖尿病和糖尿病性微血管并发症的II期和III期临床研究的另外的数据一起，有充实的证据支持如下的理论：PKCβ可以起糖尿病并发症的分子靶标的作用并且用于开发选择性的PKCβ抑制剂作为可能的治疗剂。

本发明的化合物是蛋白激酶CβII抑制剂，因此被认为可用于治疗与糖尿病及其并发症、癌症、缺血、炎症、中枢神经系统病症、心血管疾病和皮肤疾有关的病况。

发明内容

本发明涉及式A的化合物或药学可接受的盐，

其中

X为C-R¹¹或N，其中R¹¹为H、卤素、OH、C₁-C₃烷基、CF₃、或CN；

A和B独立地为C或N；

R¹、R²和R³各自独立地选自H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；其中R²和R³可以任选地合起来环化形成与它们所连接的6元含N杂芳基稠合的饱和或不饱和的3-7元杂环基；并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、苯基或3-15元杂环基中的任一个可以独立地进一步任选地被0-3个R¹²基团取代；

R⁴和R⁵各自独立地选自H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基或3-15元杂环基中的任一个独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代，

R⁶和R⁷各自独立地为H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；其中R⁶和R⁷可以任选地合起来环化形成C₃-C₇环烷基并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基或3-15元杂环基中的任一个独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代；

R⁸为H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-((R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、苯基、或3-15元杂环基中的任一个独立地任选地进一步被1-3个选自以下的基团取代：-F、C₁-C₃烷基、C₁-C₃全氟烷基、羟基、C₁-C₆烷氧基、或氧代；

R⁹和R¹⁰各自独立地为C₁-C₂烷基或可以合起来环化形成环丙基或环丁基；

每个R¹²独立地为H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O--(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、苯基、或3-15元杂环基中的任一个独立地任选地进一步被1-3个选自以下的基团取代：-F、C₁-C₃烷基、C₁-C₃全氟烷基、羟基、C₁-C₆烷氧基或氧代；

每个R^a、R^b和R^c独立地选自H、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、-(R^d)_m-(C₃-C₈环烷基)、-(R^d)_m-(C₃-C₈环烯基)、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-苯基、或-(R^d)_m-(3-7元杂环基)，并且每个R^a、R^b和R^c独立地任选地进一步被1-3个选自以下的基团取代：卤素、羟基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆全氟烷基、C₁-C₆烷氧基和C₁-C₆烷基氨基；或者，在连接于同一氮时，R^a和R^b可以任选地合起来形成3-7元杂环基，其可以任选地进一步被0-3个选自以下的基团取代：卤素、羟基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆全氟烷基、C₁-C₆烷氧基或C₁-C₆烷基氨基；

每个R^d和R^e独立地为-(C₁-C₃亚烷基)-、-(C₂-C₅亚烯基)-、或-(C₂-C₅亚炔基)-；

每个m独立地为0或1；

条件是，在X为N时，R⁶和R⁷不都是H，并且在X为C-R¹¹时，R⁶和R⁷都是H。

在本发明的一个实施方案中，R⁹和R¹⁰都是甲基。

在本发明的另一个实施方案中，X为N，R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₆烷基，但不都是H。

在本发明的一个实施方案中，A为N，B为C。在可选方案中，A为C且B为N。

在本发明的另一个实施方案中，R⁶和R⁷都是甲基。在可选方案中，R⁶为H且R⁷为甲基。

在本发明的一个实施方案中，R⁴为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O--(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a--(R^e)-OR^b；其中所述R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基、3-15元杂环基、独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代。

在本发明的另一个实施方案中，R⁴为甲基。

在本发明的另一个实施方案中，R¹为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a--(R^e)-OR^b；其中所述-R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基，所述3-15元杂环基独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代。

在本发明的另一个实施方案中，R¹为-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、或-(R^d)_m-NR^aR^b。在本发明的另一个实施方案中，R⁸为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-OR^a、或-(R^d)_m-NR^aR^b。

在本发明的另一个实施方案中，每个R^d和R^e独立地为-(C₁-C₃亚烷基)。

本发明另外涉及式B的化合物或药学可接受的盐，

其中

A和B独立地为C或N；

R¹为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、苯基或3-15元杂环基中的任一个可以独立地进一步任选地被0-3个R¹²基团取代；

R²和R³各自独立地选自H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；其中R²和R³可以任选地合起来环化形成与它们所连接的6元含N杂芳基稠合的饱和或不饱和的3-7元杂环基；并且其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、苯基或3-15元杂环基中的任一个可以独立地进一步任选地被0-3个R¹²基团取代；

R⁴和R⁵各自独立地选自H、R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a-(R^e)-OR^b；其中所述烷基、烯基、炔基、R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基或3-15元杂环基中的任一个独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代、

每个R^a、R^b和R^c独立地选自H、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、-(R^d)_m-(C₃-C₈环烷基)、-(R^d)_m-(C₃-C₈环烯基)、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-苯基、或-(R^d)_m-(3-7元杂环基)、和每个R^a、R^b和R^c独立地任选地进一步被1-3个选自以下的基团取代：卤素、羟基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆全氟烷基、C₁-C₆烷氧基和C₁-C₆烷基氨基；或者，在连接于同一氮时，R^a和R^b可以任选地合起来形成3-7元杂环基，其可以任选地进一步被0-3个选自以下的基团取代：卤素、羟基、-CN、C₁-C₆烷基、C₁-C₆全氟烷基、C₁-C₆烷氧基或C₁-C₆烷基氨基；

每个m独立地为0或1。

在式(B)的一个本发明实施方案中，A为N和B为C。

在式(B)的另一个实施方案中，其中R⁹和R¹⁰都是甲基。

在式(B)的另一个实施方案中，R⁴为-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基或C₂-C₈炔基。在另一个实施方案中，R⁴为甲基。

在式(B)的另一个实施方案中，R¹为-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、或-(R^d)_m-NR^aR^b。

在式(B)的另一个实施方案中，每个R^d和R^e独立地为-(C₁-C₃亚烷基)-。

本发明涉及选自以下的化合物或药学可接受的盐：

N4-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N2-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺，

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-5-氟-N²，N²-二甲基嘧啶-2，4-二胺，

N2-环丙基-N4-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-5-氟嘧啶-2，4-二胺

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-5-氟-N²-甲基嘧啶-2，4-二胺，

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-5-氟-N²-异丙基嘧啶-2，4-二胺，

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²-乙基嘧啶-2，4-二胺，

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²，N²-二甲基嘧啶-2，4-二胺，

5-{[(8S)-6，8-二甲基-6，9-二氮杂螺[4.5]癸-9-基]羰基}-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N⁴-(5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺，

N⁴-(5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺，

N²-乙基-5-氟-N⁴-(5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺乙酸盐，

N⁴-(6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺，

4-[(6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)氨基]嘧啶-2-甲腈，

N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

2-((5S)-4-{[3-[(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(5-氟-2-丙基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(5-氟-2-异丙基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-([(3S，8a S)-3，8a-二甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-5-{[(3S，8a S)-3-甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-5-([(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(4-甲氧基嘧啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-N-(4-甲基嘧啶-2-基)-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-N-[4-(三氟甲基)嘧啶-2-基]-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-N-(4-甲基嘧啶-2-基)-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[4-乙基(2S，5R)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-5-{[(2S，5R)-4-(2-甲氧基乙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-[5-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]-5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-[5-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-[5-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

2-((5S)-4-{[3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇，

5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-N-[5-氟-2-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-N-[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

2-((5S)-4-{[3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇。

本发明另外涉及药物组合物，其包括有效量的前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐、和药学可接受的载体。

本发明另外涉及一种方法，用于治疗糖尿病及其并发症、癌症、缺血、炎症、中枢神经系统病症、心血管疾病、阿尔茨海默氏病和皮肤病压力(dermatological disase pression)、病毒病、炎性病症、或其中肝脏为靶器官的疾病，所述方法包括对哺乳动物给予有效量的前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐。

本发明另外涉及治疗糖尿病及其并发症的方法，所述方法包括对哺乳动物给予有效量的前述权利要求中任一项的化合物。在本发明的另一个实施方案中，所述并发症包括糖尿病性视网膜病(包括黄斑水肿)、肾病和神经病。

定义

如本文中使用的，术语“包括”和“包含”以其开放的非限制性含义使用。如本文中使用的，术语“C₁-C₈”或“C₂-C₈”等分别是指具有1-8个或2-8个碳原子的基团。

术语″烷基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括具有直链或支链部分的饱和的单价烃基。示例性的烷基部分具有1-8个碳原子、1-6个碳原子或1-4个碳原子范围内的碳原子数。

术语″烯基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括具有至少一个碳-碳双键的烷基部分，其中所述烷基如上述定义的，并且包括所述烯基部分的E和Z异构体。

术语″炔基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括具有至少一个碳-碳三键的烷基部分，其中所述烷基如上述定义的。

术语″烷氧基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括O-烷基，其中烷基如上述定义的。

术语“羟基”，如本文中使用的，除非另有说明，包括-OH。

术语“氨基”，如本文中使用的，除非另有说明，意在包括-NH₂基团，以及在N原子上的任何取代作用。

术语“卤素”和“卤代”，如本文中使用的，除非另有说明，表示氯、氟、溴或碘。

术语“三氟甲基”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示-CF₃基团。

术语“全氟烷基”，如本文中使用的，意在表示烷基基团，其中所有与碳连接的氢都被氟代替，例如CF₃、CF₂-CF₃、C(CF₂)(CF₂)等。

术语“三氟甲氧基”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示-OCF₃基团。

术语“氰基”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示-CN基团。

术语“CH₂Cl₂”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示二氯甲烷。

术语“C₃-C₁₂环烷基”或“C₅-C₈环烷基”，如本文中使用的，除非另有说明，是指本文中所述的非芳香族的、饱和或部分饱和的、单环或稠合的、螺环或未稠合的二环或三环烃，分别包含总共3-12个碳原子/或5-8个环碳原子。示例性的环烷基包括具有3-10个碳原子的环，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、和金刚烷基。说明性的环烷基的实例衍生自以下结构，但不限于以下结构：

术语″芳基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括通过从芳香族烃除去一个氢衍生的有机基，例如苯基或萘基。

术语“(3-15)-元杂环基”、″(3-7)-元杂环基″、″(6-10)-元杂环基″、或″(4-10)-元杂环基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括包含一到四个各自选自O、S和N的杂原子的芳香族和非芳香族杂环基团，其中每个杂环基团分别在其环状系统中具有3-15、3-7、6-10、或4-10个原子，条件是所述基团的环不包含两个相邻的O或S原子。非芳香族的杂环基团包括在其环状系统中只有3个原子的基团，但是芳香族的杂环基团必需在其环状系统中具有至少5个原子。所述杂环基团包括苯并稠合的环状系统。3元杂环基团的实例为氮丙啶，4元杂环基团的实例为氮杂环丁基(衍生自氮杂环丁烷)。5元杂环基团的实例为噻唑基，7元环的实例为氮杂

基，10元杂环基团的实例为喹啉基。非芳香族杂环基团的实例为吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、噻噁烷基、哌嗪基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、硫杂环丁基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基(thiepanyl)、氧氮杂环庚烷基、二氮杂

基、硫氮杂

基、1，2，3，6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1，3-二氧杂环戊烷基、吡唑啉基、二硫杂环己烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己烷基、3-氮杂双环[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。杂环包括单环和多环的芳族环结构，“(5-12)-元杂芳基”是指在环状系统中具有5-12个原子的杂环的杂芳基。“(5-12)-元杂芳基”的实例为吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、1，2-二氮杂萘基、吲唑基、中氮茚基、2，3-二氮杂萘基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、喋啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、1，5-二氮杂萘基、和呋喃并吡啶基。前述基团，例如衍生自上述列举的基团的那些，可以是C-连接的或在可能时为N-连接的。例如，衍生自吡咯的基团可以是吡咯-1-基(N-连接的)或吡咯-3-基(C-连接的)。另外，衍生自咪唑的基团可以是咪唑-1-基(N-连接的)或咪唑-3-基(C-连接的)。上述杂环基团可以任选地在每个环的任何环碳、环硫、或环氮原子上被一到两个氧代基团取代。其中2个环碳原子被氧代部分取代的杂环基团的实例为1，1-二氧代-硫代吗啉基。4-10元杂环基的其它说明性实例衍生自以下杂环，但不限于以下杂环：

术语″(12-15)-元杂环基″，如本文中使用的，除非另有说明，包括部分稠合或螺环构造的芳香族和非芳香族杂环基团，并且其包含至少一个N和任选的另外的1-5个各自选自O、S和N的杂原子，其中杂环基团在其环状系统中分别具有12-15个原子，条件是所述基团的任何环都不包含两个相邻的O或S原子。所述杂环基团包括三环稠环和螺环系统。13元三环螺环杂环基团的实例为3，4-二氢吡嗪并[1，2-a]苯并咪唑，15-元三环螺环杂环基团的实例为3，4-二氢-1’H-螺色烯(spirochromene)。

除非另有说明，术语“氧代”是指＝O。

“溶剂合物”意在表示具体化合物的药学可接受的溶剂合物形式，其保留了这种化合物的生物有效性。溶剂合物的实例包括与以下溶剂结合的本发明化合物：水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO(二甲基亚砜)、乙酸乙酯、乙酸、或乙醇胺。

短语″药学可接受的盐″，如本文中使用的，除非另有说明，包括可能存在于式(A)或式(B)的化合物中的酸性或碱性基团的盐。性质上为碱性的式(A)或式(B)的化合物能够与各种无机酸和有机酸形成各种各样的盐。可以用于制备式(A)或式(B)的这种碱性化合物的药学可接受的酸加成盐的酸为形成无毒的酸加成盐的那些，所述无毒的酸加成盐即包含药理学可接受的阴离子的盐，例如乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、硼酸盐、溴化物、乙二胺四乙酸钙盐、右旋樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、克拉维酸盐、柠檬酸盐、二盐酸盐、乙二胺四乙酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、乙基琥珀酸盐、富马酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基对氨基苯基砷酸盐(glycollylarsanilate)、己基间苯二酚盐(hexylresorcinate)、哈胺(hydrabamine)、氢溴酸盐、盐酸盐、碘化物、异硫代硫酸盐(isothionate)、乳酸盐、乳糖酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、双羟萘酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐/二磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐、三乙基碘化物(triethiodode)、和戊酸盐。

术语″治疗(treating)″，如本文中使用的，除非另有说明，意思是逆转、减轻、抑制应用这种术语的病症或病况或这种病症或病况的一种或多种症状的进展、或预防所述病症或病况或这种病症或病况的一种或多种症状。术语″治疗(treatment)″，如本文中使用的，除非另有说明，是指进行“治疗(treating)”的行为，该治疗如上述刚刚定义的。

短语″治疗有效量″，如本文中使用的，是指引起研究人员、兽医、医生或其它人所寻求的组织、系统、动物、或人的生物学或医学应答的药物或药物制剂的量。

术语“取代的”是指所说明的基团或部分带有一个或多个取代基。术语“未被取代的”是指所说明的基团没有带有取代基。术语“任选地被取代的”是指所说明的基团为未被取代的或被一个或多个取代基取代。

根据惯例，在本文的一些结构式中，没有明确地示出碳原子和它们所结合的氢原子例如，表示甲基基团，

表示乙基基团，

表示环戊基基团，等等。此外，任何环状基团(芳基、杂环或环烷基)具有没有直接连接于环原子的键的描述，例如

表示该连接点可以是在该环状基团的任何可用环原子上。

某些式(A)或式(B)的化合物可以具有不对称中心，并且因此以不同的对映体形式存在。式(A)或式(B)的化合物的所有旋光异构体和立体异构体、及其混合物都被认为是在本发明范围内。关于式(A)或式(B)的化合物，本发明包括其外消旋物、一种或多种对映体形式/一种或多种非对映体形式、或其混合物的用途。所述式(A)或式(B)的化合物还可以作为互变异构体存在。本发明涉及所有这种互变异构体及其混合物的用途。

包含在本发明的化合物内的某些官能团可以被生物等排基团代替，所述生物等排基团即具有与母体基团相似的空间或电子需要但是表现出不同或改善的物理化学或其它性能的基团。适合的实例为本领域技术人员公知的，包括但不限于在Patini等人，Chem.Rev，1996，96，3147-3176以及其中引用的参考文献中描述的部分。

本发明还包括同位素标记的化合物，其与式(A)或式(B)中所述的化合物相同，不同之处在于一个或多个原子被具有原子质量或质量数与通常在自然界中发现的原子质量或质量数不同的原子所代替。可以被并入到本发明中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如分别为²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³¹P、³²P、³⁵S、¹⁸F和³⁶Cl。包含上述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明的化合物和所述化合物的药学可接受的盐或溶剂合物在本发明范围内。某些同位素标记的本发明化合物，例如其中并入有放射性同位素例如³H和¹⁴C的那些，可用于药物和/或底物组织分布测定。氚化的(即，³H)和碳-14(即，¹⁴C)同位素由于容易制备和可检测性是特别优选的。另外，用重同位素例如氘(即，²H)取代可以提供来源于更大代谢稳定性的某些治疗利益，例如延长体内半衰期或降低剂量需要，因此在一些情况中是优选的。本发明的同位素标记的式(A)或式(B)的化合物通常可以通过实施以下反应路线和/或实施例中公开的操作通过用容易得到的同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来制备。

术语“mmol”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示毫摩尔。术语“equiv”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示当量。术语“mL”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示毫升。术语“U”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示单位。如本文中使用的术语“mm”，除非另有说明，意在表示毫米。术语“g”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示克。术语“kg”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示千克。术语“h”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示小时。术语“min”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示分钟。术语“μL”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示微升。术语“μM”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示微摩尔。术语“μm”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示微米。术语“M”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示摩尔。术语“N”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示正相的。术语“nm”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示纳米。术语“nM”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示纳摩尔。术语“amu”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示原子质量单位。术语“℃”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示摄氏度。术语“m/z”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示质量/电荷比。术语“wt/wt”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示重量/重量。术语“v/v”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示体积/体积。术语“mL/min”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示毫升/分钟。术语“UV”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示紫外线。术语“APCI-MS”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示大气压力化学电离质谱法。术语“HPLC”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示高效液相色谱法。色谱法在约20℃的温度下进行，除非另有说明。术语“LC”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示液相色谱法。术语“LCMS”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示液相色谱-质谱法。术语“TLC”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示薄层色谱法。术语“SFC”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示超临界流体色谱法。术语“sat”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示饱和的。术语“aq”，如本文中使用的，意在表示含水的。术语“ELSD”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示蒸发光散射检测。术语“MS”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示质谱法。术语“HRMS(ESI)”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示高分辨质谱法(电喷射离子化)。术语“Anal.”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示分析值。术语“Calcd”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示计算值。术语“N/A”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示未检测到。术语“RT”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示室温。术语“Mth.”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示方法。术语

如本文中使用的，除非另有说明，意在表示白色固体硅藻土过滤剂，购自位于美国加利福尼亚州洛杉矶的World Minerals。术语“Eg.”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示例如。

使用了术语诸如例如-(CR³R⁴)_t或-(CR¹⁰R¹¹)_v，R³、R⁴、R¹⁰和R¹¹可以随大于1的t或v的每次重复而变化。例如，在t或v为2时，术语-(CR³R⁴)_v 或-(CR¹⁰R¹¹)_t可以相当于-CH₂CH₂-、或-CH(CH₃)C(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃)-，或者落入R³、R⁴、R¹⁰和R¹¹的定义范围内的任意数目类似部分。

术语“K_i”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示酶抑制常数的值。术语“K_iapp”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示表观的K_i。术语“IC₅₀”，如本文中使用的，除非另有说明，意在表示用于至少50％酶抑制作用所需的浓度。

本发明的其它方面、优点、和特征从以下发明详述来看变得显而易见。

发明详述

以下反应路线举例说明本发明化合物的制备方法。除非另有说明，在反应路线和随后的讨论中的R¹到R¹²和R^a到R^e如上述定义的。

详细描述

式I-III的化合物可以根据反应路线1和反应路线2中的合成路线制备。在反应路线1和反应路线2以及随后的说明中，“BOC”、“Boc”或“boc”表示N-叔丁氧基羰基；DCM表示CH₂Cl₂；DIPEA(也称为Hunig’s碱)表示二异丙基乙基胺；DMA表示二甲胺；″DMF″表示二甲基甲酰胺；“DMSO″表示二甲基亚砜；Et表示-CH₂CH₃；″MTBE″表示甲基叔丁基醚；NMP表示1-甲基-2-吡咯烷酮；TEA表示三乙胺；TFA表示三氟乙酸；THF表示四氢呋喃。尽管反应路线1和2和所述说明涉及化合物I，但是反应路线1和2和所述说明同样适用于化合物II和III。

反应路线1

反应路线1举例说明用于制备式I的化合物的中间体I(A)的合成方法。将被取代的氨基酸I(A)的氨基基团烷基化，得到化合物I(B)。这典型地可以在碱的存在下用烷化剂处理化合物I(A)来进行。通常使用的烷化剂是活化的亲电子性双键部分。用活化的亲电子性双键部分烷基化I(A)的典型的反应条件是在强碱的存在下用活化的双键部分处理I(A)。随后进行含水后处理，得到化合物I(B)。然后用boc基团保护化合物I(B)的氨基，得到化合物I(C)。这典型地可以在碱的存在下用Boc试剂处理化合物I(B)来进行。典型的条件是在溶剂MeCN中在Me₄NOH的存在下用(Boc)₂O处理化合物I(B)。然后将化合物I(C)的羧酸基团转化为化合物I(D)的甲基酯。将羧酸基团转化为甲基酯的典型的条件是在碱的存在下在DMF中用碘甲烷处理I(C)。化合物I(D)然后经过分子内的醛醇缩合，得到化合物I(E)。这典型地可以在非质子性溶剂中用强碱处理化合物I(D)来进行。典型的条件是在甲苯中用t-BuOK处理化合物I(D)。随后进行含水后处理，得到化合物I(E)。化合物I(E)然后与肼部分进行2+3环化，形成化合物I(F)。环化的典型条件是使化合物I(E)与肼和乙酸在EtOH中回流。然后将化合物I(F)的游离碱吡唑氮酰化，得到化合物I(G)。酰化作用的典型条件是在THF中用氯代甲酸乙酯(chloro ethyl carbonate)处理化合物I(F)。

用于反应路线1的化合物I(G)的更详细合成条件可以在美国专利申请公布2003/0171357和PCT公布WO 02/12242中找到，其公开内容被并入本文作为参考。

反应路线2

反应路线2举例说明了可以从中间体I(G)得到式I的化合物的两条途径。在反应路线2的第一途径中，化合物I(G)经历与R^a亲电子试剂部分进行的亲核反应。所述亲核反应可以是酰化、烷基化、磺酰化、还原胺化或胺官能度进行的许多其它反应之一。典型的酰化反应条件是在溶剂例如二氯甲烷中在碱例如2当量DIPEA的存在下用酰化剂例如R^a-COCl处理化合物I(G)。将反应混合物在0℃至室温之间搅拌12小时。随后进行含水后处理，得到化合物II(A)。然后除去化合物II(A)的吡咯氮上的Boc基团，得到化合物II(B)。这典型地可以通过用强酸处理II(A)来进行。典型的反应条件是用含4N HCl的二氧杂环己烷和DCM处理化合物II(A)。随后进行含水后处理，得到化合物II(B)。然后将化合物II(B)的吡咯NH转化为氯甲酸酯II(C)。这典型地可以使用光气、三光气、或一些等价物来进行。典型的反应条件是在0℃在DCM中用2当量的三光气处理II(B)四小时。随后用饱和NaHCO₃进行温和碱性的后处理和纯化，得到化合物II(C)。然后用R^a亲核试剂部分处理化合物II(C)。所述亲核试剂可以是醇、胺或可以与亲电子试剂II(C)反应的任何其它官能度之一。典型的反应涉及在溶剂例如DME中在2当量的碱例如K₂CO₃的存在下用亲核试剂例如1.5当量的醇处理II(C)。将反应加热到80℃，保持八小时，并且除去溶剂。或者，可以在溶剂例如THF中在1当量碱例如DIPEA的存在下用1.5当量的胺处理II(C)。随后在质子性溶剂例如甲醇中在碱例如TEA的存在下进行后处理，随后纯化，得到式I化合物。

或者，然后化合物II(B)可以与(COR^b)亲电子试剂进行亲核反应，得到化合物II(D)。用于这种转化所进行的亲核反应可以是烷基化、酰化、磺酰化、还原胺化。II(B)得到II(D)的酰化反应通过在碱的存在下用酰化试剂处理化合物II(B)来进行。典型的反应条件是将化合物II(B)与过量的碱例如DIPEA在DCM中混合并且在0℃将得到的溶液添加到异氰酸酯中。将反应搅拌2小时，随后进行含水后处理，得到化合物II(D)。除去化合物II(D)的吡唑氮上的乙基酯保护基，得到式I的化合物。这典型地可以通过用碱处理化合物II(D)来进行。典型的反应条件是使化合物II(D)在2-3当量的LiOH的存在下在二氧杂环己烷和DCM中回流。随后的含水后处理得到式I的化合物。

在反应路线2的第二途径中，除去吡咯氮上的Boc基团，得到化合物III(A)。反应典型地可以通过用强酸处理化合物I(G)来进行。典型的反应条件是用含4N HCl的二氧杂环己烷和DCM处理化合物I(G)。随后的含水后处理得到化合物III(A)。或者，然后化合物III(A)可以与(COR^b)亲电子试剂进行亲核反应，得到化合物III(B)。由于与化合物III(A)的吡唑所连接的-NH₂基团的反应性低于III(A)的吡咯氮，所以可以在无需保护化合物III(A)的吡唑-NH₂基团的情况下进行III(A)到III(B)的转化。用于这种转化所进行的亲核反应可以是烷基化、酰化、磺酰化、还原胺化。为了实现反应选择性，优选相对温和的反应条件。III(A)得到III(B)的酰化反应通过在碱的存在下用酰化试剂处理化合物III(A)来进行。典型的反应条件是将化合物III(A)与过量的碱例如DIPEA在DCM中混合并且在0℃将得到的溶液添加到异氰酸酯中。将反应混合物在0℃保持约二小时，随后进行含水后处理，得到化合物III(B)。

然后，化合物III(B)进行与R^a亲电子试剂部分的亲核反应。所述亲核反应可以是酰化、烷基化、磺酰化、还原胺化或胺官能度进行的许多其它反应之一。典型的酰化反应条件是在溶剂例如二氯甲烷中在碱例如2当量DIPEA的存在下用酰化剂例如R^a-NCO处理化合物III(B)两个小时。或者，可以在溶剂例如1，2-二氯乙烷中在碱例如2当量的DIPEA的存在下用酰化剂例如R^a-COOR处理III(B)，其中R为活化基团例如对硝基苯基。随后进行含水后处理，得到化合物III(C)。化合物III(C)的吡唑氮上的乙基酯保护基典型地用碱除去，得到游离碱化合物I。典型的反应条件是在质子性溶剂例如甲醇中将化合物III(C)与TEA混合，随后进行纯化，得到式I的化合物。

或者，除去化合物III(B)的吡唑氮上的乙基酯保护基，得到游离碱化合物III(D)。这典型地可以通过用碱处理化合物III(B)来进行。典型的反应条件是使化合物III(B)在2-3当量的LiOH的存在下在二氧杂环己烷和DCM中回流。随后的含水后处理得到化合物III(D)。然后，化合物III(D)进行与R^a亲电子试剂部分的亲核反应。所述亲核反应可以是酰化、烷基化、磺酰化、还原胺化或胺官能度进行的许多其它反应之一。典型的酰化反应条件是在溶剂例如二氯甲烷中在碱例如2当量DIPEA的存在下用酰化剂例如R^a-COCl处理化合物III(D)。将反应混合物搅拌四小时，随后进行含水后处理和纯化，得到式I的化合物。

上述定义的任何上述式(A)和(B)的化合物都可以通过标准化学操作转化为另一个类似化合物。除非另有说明，所有的起始原料、试剂、和溶剂都是市售的并且是本领域技术人员已知的。这些化学操作是本领域技术人员已知的，包括(a)通过在T.W.Greene and P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2nd Ed.，John Wiley andSons，New York，1991中所述的方法除去保护基；(b)用伯胺或仲胺、硫醇或醇置换离去基团(卤素、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯等)，以便分别形成仲胺或叔胺、硫醚或醚；(c)用异氰酸酯、酰基氯(或其它活化的羧酸衍生物)、烷基/芳基氯甲酸酯或磺酰氯处理伯胺和仲胺，以便提供相应的脲、酰胺、氨基甲酸酯或磺酰胺；(d)使用醛对伯胺或仲胺进行还原胺化。

本发明的化合物可具有不对称碳原子。可以基于物理化学差异通过本领域技术人员已知的方法将非对映体混合物分离为个别的非对映体，例如通过色谱法或分级结晶。可以如下分离对映异构体：通过与适当的光学活性化合物(例如，醇)反应将对映异构体混合物转化为非对映体混合物，分离非对映体并且将单独的非对映体转化(例如，水解)为相应的纯的对映异构体。包括非对映体混合物和纯的对映异构体在内的所有这种异构体都被认为是本发明的一部分。

性质上为碱性的式(A)或式(B)的化合物能够与各种无机酸和有机酸形成各种各样不同的盐。尽管这种盐对于对动物给药来说必需是药学可接受的，但是在实践中经常期望将式(A)或式(B)的化合物最初作为药学不可接受的盐从反应混合物分离，然后通过用碱性试剂处理简单地将其转化为游离碱化合物，随后将游离碱转化为药学可接受的酸加成盐。本发明的碱化合物的酸加成盐可以容易地通过在含水溶剂介质中或在适合的有机溶剂例如甲醇或乙醇中用基本上相当量的所选无机酸或有机酸处理碱化合物来制备。在小心地蒸发溶剂之后，容易地得到所需的固体盐。还可以通过加入适当的无机酸或有机酸而使所需的酸性盐从游离碱的有机溶剂溶液中沉淀出来。

在性质上为酸性的那些式(A)或式(B)的化合物能够与各种药理学可接受的阳离子形成碱盐。这种盐的实例包括碱金属盐或碱土金属盐，特别是钠盐和钾盐。这些盐全部都是通过常规方法制备的。作为用于制备本发明的药学可接受的碱盐的试剂的化学碱是与酸性的式(A)或式(B)的化合物形成无毒碱盐的那些。这种无毒的碱盐包括衍生自药理学可接受的阳离子的那些，所述药理学可接受的阳离子如钠、钾、钙、和镁等。这些盐容易地通过用包含所需药理学可接受的阳离子的水溶液处理相应的酸性化合物，然后将得到的溶液蒸发(优选在减压下)到干燥来制备。或者，还可以通过将酸性化合物的低级链烷醇(alkanolic)溶液与期望的碱金属醇盐混合在一起，然后以与前述相同的方法将得到的溶液蒸发到干燥来进行制备。在任一情况中，优选使用化学计量量的试剂，以便确保反应完全以及所需最终产品的最大收率。

本发明的化合物是蛋白激酶C的抑制剂，并且优选选择性地抑制蛋白激酶C的β-1、β-2和可选的α同工酶。特别地，关于β-2同工酶，本发明的化合物具有低于100nM的Ki值。

作为蛋白激酶C的抑制剂，所述化合物可用于治疗其中蛋白激酶C在病理学中起到作用的病况。本领域中已知的病况包括：糖尿病及其并发症、癌症、缺血、炎症、中枢神经系统病症、心血管疾病、阿尔茨海默氏病和皮肤学疾病。

蛋白激酶C已经牵涉糖尿病的几个不同的方面。蛋白激酶C的过度活性已经牵涉胰岛素信号传导缺陷，因此牵涉II型糖尿病中可见的胰岛素抵抗。Karasik，A.等人，J.Biol.Chem.265：10226-10231(1990)；Chen，K.S.等人，Trans.Assoc.Am.Physicians 104：206-212(1991)；Chin，J.E.等人，J.Biol.Chem.268：6338-6347(1993)。另外，研究已经证明，在已知在暴露于高血糖情况时易感染糖尿病并发症的组织中，蛋白激酶C活性显著升高。Lee，T.S.等人，J.Clin.Invest.83：90-94(1989)；Lee，T.S.等人，Proc. Natl.Acad.Sci USA 86：5141-5145(1989)；Craven，P.A.和DeRubertis，F.R.J.Clin.Invest.83：1667-1675(1989)；Wolf，B.A.J.Clin.Invest.87：1643-1648(1991)。

蛋白激酶C活性长久以来与细胞生长、肿瘤诱发和癌症有关。Rotenberg，S.A.和Weinstein，I.B.Biochem.Mol.Aspects Sel. Cancer 1：25-73(1991)。Ahamd等人，Molecular Pharmacology：43，858-862(1993)。已知的是，蛋白激酶C抑制剂在动物中在预防瘤生长方面是有效的。Meyer，T.等人，Int.J.Cancer 43：851-856(1989)；Akinagaka，S.等人，Cancer Res.51：4888-4892(1991)。新近，蛋白激酶Cβ抑制剂恩扎啕林(Enzastauring)(LY317615.HCl)表现出通过诱导凋亡和抑制增殖的培养的肿瘤细胞，特别是对于人成胶质细胞瘤和结肠癌而具有直接的肿瘤效果。Graff等人，Cancer Res.16：7462-7469(2005)。本发明的化合物还作为多药耐药逆转(MDR)药起作用，使得它们在与其它化疗剂共同给药时是有效的。

蛋白激酶C抑制剂已经表现出阻断炎性应答，例如嗜中性粒细胞氧化猝发(oxidative burst)、T-淋巴细胞中的CD3向下调节、和佛波醇诱导的爪水肿。Towemy，B.等人，Biochem.Biophys.Res.Commun. 171：1087-1092(199))；Mulqueen，M.J.等人，Agents Actions 37：85-89(1992)。因此，作为PKC的抑制剂，本发明的化合物可用于治疗炎症。

蛋白激酶C活性在中枢神经系统的功能中起着重要作用。Huang，K.P.Trends Neurosci.12：425-432(1989)。另外，蛋白激酶C抑制剂已经表现出预防在局部和中枢的缺血性脑损伤和脑水肿中所见的损害。Hara，H.等人，J.Cereb..Blood Flow Metab.10：646-653(1990)；Shibata，S.等人，Brain Res.594：290-294(1992)。还测定到蛋白激酶C与阿尔茨海默氏病有牵连。Shimohama，S.等人，Neurology 43：1407-1413(1993)。因此，本发明的化合物可用于治疗阿尔茨海默氏病和缺血性脑损伤。

蛋白激酶C活性还在心血管疾病中起重要作用。脉管系统中的增加的蛋白激酶C活性已经表现出引起增加的血管收缩和高血压。已知的蛋白激酶C抑制剂预防这种增加。Bilder，G.E.等人，J.Pharmacol. Exp.Ter.252：526-430(1990)。因为蛋白激酶C抑制剂显示对嗜中性粒细胞氧化猝发的抑制作用，蛋白激酶C抑制剂还可以用于治疗心血管性缺血和在缺血后改善心脏功能。Muid，R.E.等人，FEBS Lett.293：169-172(1990)；Sonoki，H.等人，Kokyu-To Junkan 37：669-674(1989)。蛋白激酶C在血小板功能中的作用也得到研究，并且表明，蛋白激酶C水平升高与对激动剂的应答增加有关。Bastyr III，E.J.和Lu，J.Diabetes 42：(Suppl.1)97A(1993)。PKC已经涉及在微管渗透性的血小板活动因子调节中的生物化学通道。Kobayashi等人，Amer.Pjus.Soc.H1214-H1220(1994)。有效的蛋白激酶C抑制剂已经显示影响激动剂诱导的血小板聚集。Toullec，D.等人，J.Biol. Chem.266：15771-15781(1991)。蛋白激酶C抑制剂还阻断激动剂诱导的平滑肌细胞增殖。Matsumoto，H.和Sasaki，Y.Biochem.Biophys， Res.Commun.158：105-109(1989)。因此，本发明的化合物可用于治疗心血管疾病、动脉粥样硬化和再狭窄。

蛋白激酶C的异常活性还涉及皮肤学病症，例如银屑病。Horn，F.等人，J.Invest.Dermatol.88：220-222(1987)；Raynaud，F.和Evain-Brion，D.Br.J.Dermatol.124：542-546(1991)。银屑病的特征在于角化细胞的异常增殖。已知的蛋白激酶C抑制剂已经表现出以其类似于作为PKC抑制剂的效力平行的方式抑制角化细胞增殖。Hegemann，L.等人，Aarch.Dermatol.Res.283：456-460(1991)；Bollag，W.B.等人，J.Invest.Dermatol.100：240-246(1993)。因此，PKC抑制剂可用于治疗银屑病。

本发明的化合物还具有同工酶选择性。所述化合物择优地抑制蛋白激酶Cβ-1和β-2同工酶和可选的α同工酶，对前述同工酶的选择性优于对其余的蛋白激酶C同工酶(即，γ、δ、ε、ξ和η)的选择性。本发明的化合物在比对于最小抑制其它PKC同工酶所需浓度低得多的浓度抑制蛋白激酶C的β-1、β-2同工酶和可选的α同工酶。

本发明的化合物特别地可用于治疗其中涉及蛋白激酶C同工酶β-1、β-2、和可选的α的那些疾病状态。例如，糖尿病中所见的血糖水平升高导致脉管组织中β-2同工酶的同工酶特异性升高。Proc. Natl Acad.Sci.USA 89：11059-11065(1992)。在人血小板中的与糖尿病相关的β同工酶升高已经涉及其对激动剂的应答发生变化。Bastyr III，E.J.和Lu，J.Diabetes 42：(Suppl 1)97A(1993)。人维生素D受体已经表现出选择性被蛋白激酶Cβ磷酸化。这种磷酸化作用已经涉及受体功能的变化。Hsieh等人，Proc.Natl.Acad.Sci. USA 88：931509319(1991)；Hsieh等人，J.Biol.Chem.268：15118-15126(1993)。另外，最近的工作表明，β-2同工酶负责红白血病细胞增殖，而α同工酶涉及这些前述细胞的巨核细胞分化。Murray等人，J.Biol.Chem.268：15847-15853(1993)。

除了上述讨论的β-1和β-2同工酶之外，蛋白激酶Cα同工酶已经表现出可能用于治疗肾病：患有STZ诱导的糖尿病的PKC-α敲除小鼠表现出肾病改善。Menne等人，Diabetes 53：2101-2109(2005)。PKCα与心脏收缩力有关，Braz等人，Nature Medicine 10：248-254(2004)；并且与内皮细胞的Akt活化和eNOS磷酸化的调节有关。Partovian & Simons，Cellular Signalling 16：951-957(2004)。

测定法

蛋白激酶Cβ2(PKCβII)催化从ATP产生ADP，伴随着磷酰基转移到PKC假底物肽上(A-＞S，RFARKGSLRQKNV)。这种转移是偶合至通过丙酮酸激酶(PK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性进行氧化的β-NADH。通过使用Molecular Devices SPECTRA max PLUS分光光度计观察的在340nm的吸光度降低(e＝6.22cm^-1mM^-1)监控β-NADH转化为NAD+。

典型的测定法在Molecular Devices分光光度计中在96孔透明微量滴定板上在0.1mL的测定缓冲液中在30℃测量20分钟来进行，所述测定缓冲液包含50mM HEPES，pH 7.4，5nM PKC、23单位的丙酮酸激酶、33单位的乳酸脱氢酶、0.15mM肽、0.1mM ATP、1mM DTT、4mM PEP、8mM MgCl₂、0.3mM NADH、60mM CaCl₂、10mg/mL PS、50ng/mL PMA、7.5％DMSO和约10,000nM至0.169nM化合物抑制剂。在添加测定缓冲液之前将3-sn-磷脂酰基-L-丝氨酸(PS)和佛波醇-12-肉豆蔻酸酯-13-乙酸酯(PMA)超声处理30秒，并且通过添加100μM ATP引发试验。

通过将初始速度数据对Michaelis-Menten方程进行拟合来测定在饱和磷酸-受体肽底物浓度(0.15mM)的bi-bi激酶反应的稳态动力学参数。

v＝V_max[S]/(K_M+[S])

其中v为测量的起始速度，V_max为最大的酶速度，[S]为ATP底物浓度，和K_M为ATP的米氏常数。根据k_cat＝V_max[E]测定酶转换数值(k_cat)，其中[E]为总的酶浓度。通过基于Morrison方程将不同抑制剂浓度的初始速度对ATP竞争性抑制模型进行拟合测定酶抑制常数(表观K_i值)。Morrison，J.F.，Biochim.Biophys Acta 185：269-286(1969)。

药物组合物/制剂、剂量和给药方式

制备含有特定量活性化合物的各种药物组合物的方法是已知的，或者是本领域技术人员显而易见的。另外，本领域技术人员熟知制剂和给药技术。这种主题在例如Goodman和Gilman′s The Pharmaceutical Basis of Therapeutics，最新版本，Pergamon Press；和Remington′s Pharmaceutical Sciences，最新版本，MackPublishing，Co.，Easton，PA中讨论。这些技术可用于本文中所述的方法和组合物的适当的方面和实施方案中。提供以下实施例只是用于说明性的目的，而非意味着限制本发明。

式(A)和(B)的化合物可以作为适合的局部、口服和非肠道药物制剂提供，用于治疗PKCβII介导的疾病。本发明的化合物可以口服给药，作为片剂或胶囊、作为油性或水性悬浮液、锭剂、糖锭剂、粉剂、颗粒剂、乳液、糖浆或酏剂的形式。用于口服应用的组合物可以包括一种或多种调味剂、甜味剂、着色剂和防腐剂，以便生产药学上精致和适口的制备物。片剂可以包含药学可接受的赋形剂以便生产这种片剂。作为本领域中的惯例，这些片剂可以用药学可接受的肠溶衣进行包衣，例如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯，以便延迟在胃肠道中的崩解和吸收，以提供更长的持续作用时间。

用于口服使用的制剂可以是硬胶囊的形式，其中活性成分与惰性固体稀释剂例如碳酸钙、磷酸钙或高岭土混合。它们还可以是软胶囊的形式，其中活性成分与水或油介质例如花生油、液体石蜡或橄榄油混合。

水性悬浮液通常包含与适合于生产水性悬浮液的赋形剂混合的活性成分。这种赋形剂可以是助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，其可以是天然存在的磷脂例如卵磷脂、环氧乙烷和长链脂肪酸的缩合产物例如聚氧乙烯硬脂酸酯、环氧乙烷和长链脂族醇的缩合产物例如十七(氧化乙烯)十六烷醇(heptadecaethylenoxycetanol)、环氧乙烷和衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯，或环氧乙烷和脂肪酸己糖醇酐的缩合产物例如聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯。

所述药物组合物可以是无菌的可注射水性悬浮液或油性悬浮液的形式。这种悬浮液可以根据已知的方法配制，使用上述那些适合的分散剂或润湿剂和助悬剂。无菌的可注射制备物还可以配制为在无毒的非肠道可接受的稀释剂或溶剂中的悬浮液，例如配制为在1，3-丁二醇中的溶液。可以使用的可接受的媒介物和溶剂为水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。为此可以使用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯。另外，可以将脂肪酸例如油酸用于可注射的制备物中。

式(A)和(B)的化合物还可以以栓剂的形式给药，用于药物的直肠给药。这些组合物可以通过将药物与适合的无刺激性赋形剂混合来制备，所述赋形剂在大约25℃为固体，但是在直肠温度为液体，因此在直肠中融化以便释放药物。这种材料包括可可脂和其它甘油酯。

对于局部用制备物来说，可以使用包含本发明化合物的例如霜剂、软膏剂、胶体溶液、或悬浮液。

式(A)和(B)的化合物还可以作为脂质体递送系统的形式给药，例如小单层囊泡、大单层囊泡、和多层囊泡。脂质体可以由各种磷脂形成，例如胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱。

本发明化合物的剂量水平为约0.5mg/kg体重至约100mg/kg体重的量级。优选的剂量比例为约30mg/kg体重至约100mg/kg体重。然而，应该理解，用于任何特定患者的具体剂量水平取决于许多因素，包括要给药的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物联合和所治疗的特定疾病的严重程度。为了增强本发明化合物的治疗活性，可以将它们与其它口服活性的抗糖尿病化合物并行给药，例如磺酰脲类(例如，甲苯磺丁脲)等。

对于向眼睛给药而言，在药学可接受的眼科媒介物中递送本发明的化合物，使得化合物保持与眼睛表面接触充分的时间段，以允许化合物渗透角膜和/或巩膜和眼睛的内部区域，包括例如前房、后房、玻璃体、眼房水、玻璃体液、角膜、虹膜/睫状体、晶状体、脉络膜/视网膜和巩膜。药学可接受的眼科媒介物可以是软膏剂、植物油、或包囊材料。还可以将本发明的化合物直接注射到玻璃体液或眼房水中。

另外，化合物还可以通过公知的可接受的方法给药，例如眼球筋膜囊下(subtenon)和/或结膜下注射。如眼科领域中公知的，斑点主要由视网膜锥体构成，并且是视网膜中视敏度最大的区域。眼球囊(tenon)或眼球膜位于巩膜上。结膜覆盖异组织边缘(球结膜)后面的眼球的少量区域，并且向上(上盲管)或向下(下盲管)折叠，以便分别覆盖上眼睑和下眼睑的内部区域。结膜位于眼球囊的顶部。巩膜和眼球囊限定了眼球的外表面。为了治疗年龄相关的黄斑变性(ARMD)、脉络膜新血管化、视网膜病(例如糖尿病性视网膜病(包括黄斑水肿)、早产的视网膜病)、视网膜炎、葡萄膜炎、黄斑囊样水肿(CME)、青光眼和眼睛后段的其它疾病或病况，优选将特定量的眼科可接受的药学活性剂的储库直接设置在巩膜外表面上和眼球囊下。另外，在ARMD和CME的情况中，最优选将储库直接设置在巩膜的外表面上、眼球囊下，并且通常在斑点上方。

化合物可以配制为储库制备物。这种长效制剂可以通过植入(例如，皮下或肌肉内)、肌肉注射或通过上述眼球筋膜囊下或玻璃体内注射。或者，活性成分可以是粉末形式，用于在使用之前用适合的媒介物(例如无菌的无热原的水)构造。

在特别优选的本发明实施方案中，化合物可以制备为用于在盐水中局部给药(与任何通常用于眼睛制备物的防腐剂和抗微生物剂组合)，并且以滴眼剂形式给药。溶液或悬浮液可以制备为其纯的形式并且每天给药几次。或者，如上所述制备的本发明组合物还可以直接对角膜给药。

在优选实施方案中，用结合于角膜的粘膜粘合性聚合物制备组合物。因此，例如，化合物可以与适合的聚合物材料或疏水性材料(例如，作为在可接受的油中的乳液)或离子交换树脂配制，或者作为微溶的衍生物(例如微溶的盐)配制。

用于疏水性化合物的药用载体为包括苄醇、非极性表面活性剂、与水可互溶的有机聚合物、和水相的共溶剂系统。所述共溶剂系统可以是VPD共溶剂系统。VPD为3％w/v苄醇、8％w/v非极性表面活性剂聚山梨酸酯80、和65％w/v聚乙二醇300制得的定容无水乙醇溶液。VPD共溶剂系统(VPD:5W)包含用5％葡萄糖水溶液以1∶1稀释的VPD。这种共溶剂系统很好地溶解疏水性化合物，并且本身在系统给药时产生低的毒性。当然，共溶剂系统的比例可以显著变化而不破坏其溶解度和毒性特征。此外，共溶剂的组分可以变化：例如，可以使用其它低毒性的非极性表面活性剂代替聚山梨酸酯80；聚乙二醇的级分大小可以变化；可以使用其它生物相容的聚合物代替聚乙二醇，例如，聚乙烯基吡咯烷酮；以及可以使用其它糖或聚糖代替葡萄糖。

或者，可以使用用于疏水性药用化合物的其它递送系统。脂质体和乳液是已知用于疏水性药物的媒介物或载体的实例。还可以使用某些有机溶剂(例如，二甲基亚砜)，尽管通常是以更大的毒性为代价。另外，化合物可以使用持续释放系统递送，例如包含治疗剂的固体疏水性聚合物的半渗透性基体。已经确定了各种持续释放材料并且是本领域技术人员已知的。取决于化学性质，持续释放胶囊可以释放化合物达几周直到超过100天。取决于治疗剂的化学性质和生物学稳定性，可以使用用于蛋白质稳定化的另外的策略。

所述药物组合物还可以包括适合的固相或凝胶相载体或赋形剂。这种载体或赋形剂的实例包括碳酸钙、磷酸钙、糖、淀粉、纤维素衍生物、明胶、和聚合物例如聚乙二醇。

一些本发明的化合物可以作为与药学相容的平衡离子形成的盐提供。药学相容的盐可以与许多酸类形成，包括盐酸、硫酸、乙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、琥珀酸等。盐倾向于比相应的游离碱形式更易溶解于含水或其它质子性溶剂中。

在以下实施例中详细描述本发明的优选化合物的制备，但是技术人员会认识到，所述的化学反应可以容易地加以改造，以便制备许多其它的本发明化合物。例如，本发明的未举例说明的化合物的合成可以通过本领域技术人员显而易见的改变进行，例如，适当地保护干扰基团、更换为本领域中已知的其它适合的试剂、或进行反应条件的常规改变。或者，应该认识到，本文中公开的或本领域中已知的其它反应可用于制备本发明的其它化合物。

实施例

以下提供的实施例和制备方法进一步的阐明和举例说明本发明的化合物以及制备化合物的方法。应该理解，本发明的范围不受以下实施例和制备方法的任何方式的限制。在以下实施例中，除非另作说明，具有一个手性中心的分子作为外消旋混合物存在。除非另作说明，基于两个或更多个手性中心的那些分子作为非对映体的外消旋混合物存在。可以通过本领域技术人员已知的方法得到单独的对映异构体/非对映体。

化合物的结构通过元素分析或NMR证实，其中在适当的情况中存在有为标题化合物的特征性质子指定的峰。¹H NMR位移(δ_H)以距离内标的低磁场方向的百万分率(ppm)给出。

下面参考以下实施例描述本发明。不应将这些实施例看作是限制本发明的范围，而是只用作说明的目的。表1提供了本发明的化合物的完整列表并且在可得到的情况中包括相应的H NMR数据和Ki值。

实施例A1：N4-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基] 羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N2-乙基-5-氟嘧啶 -2，4-二胺

中间体A1(i)：向0℃的5-叔丁基1-乙基3-氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯(16.2g，49.9mmol)在THF(100mL)溶液中分三个部分加入NaH(2.4g，59.9mmol)。将反应在冰浴中搅拌15分钟，然后10分钟内加入氯甲酸乙酯(6.5g，59.9mmol)。使反应温热到室温并且搅拌16小时，然后用NH₄Cl(饱和)淬灭并用EtOAc萃取(2×50mL)。合并的萃取液用盐水洗涤，然后干燥(MgSO₄)过滤并且浓缩，得到期望的化合物A1(i)(19.8g，99％)。质谱：C₁₈H₂₉N₄O₆(M+H)的计算值：397。实测值397。

中间体A1(ii)：5-(氯羰基)-3-[(乙氧基羰基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向A1(i)(19.8g，49.9mmol)的二氧杂环己烷(20mL)溶液中加入HCl(60mL，4M，在二氧杂环己烷中)。将反应在室温搅拌3小时然后浓缩并且真空干燥。将3-[(乙氧基羰基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯的盐酸盐溶解在CH₂Cl₂(60mL)中。加入DIPEA(16.1g，125mmol)并将反应混合物在冰浴中冷却。缓慢加入光气(30mL，20％，在甲苯中)，然后使反应温热到室温并且进行过夜。将反应浓缩，然后溶解在EtOAc(100mL)和水(100mL)中。水相用EtOAc萃取(2×25mL)，然后合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。粗的物质通过硅胶柱色谱法纯化，使用CH₂Cl₂-含2％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物A1(ii)，为白色固体(9.58g，54％)。质谱：C₁₄H₂₀ClN₄O₅(M+H)的计算值：359。实测值359。

中间体A1(iii)：3-[(乙氧基羰基)氨基]-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向密封管加入(5S)-1，2，2，5-四甲基哌嗪(2.8g，20mmol)，DIPEA(7.63g，59.1mmol)和THF(40mL)，随后加入A1(ii)(7.1g，20mmol)。将管密封并且置于80℃的油浴中并且加热16小时。将反应冷却到室温，然后浓缩并且通过硅胶柱色谱法纯化，使用CH₂Cl₂-含3％(7N NH₃/MeOH)的CH₂Cl₂，得到标题化合物A1(iii)(4.62g，51％)。质谱：C₂₂H₃₇N₆O₅(M+H)的计算值：465。实测值465。

中间体A1(iv)：6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向微波管加入A1(iii)(4.6g，10mmol)，MeOH(45mL)和LiOH(6.4g，40mmol)。将反应在微波中在110℃加热20分钟。将粗的反应混合物浓缩并且溶解在THF(75mL)中。将不溶性物质滤掉并将滤液浓缩，得到标题化合物A1(iv)(2.3g，72％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)ppm1.02(s，3H)，1.08-1.18(m，6H)，1.66(s，3H)，1.76(s，3H)，2.22(s，3H)，2.25-2.41(m，1H)，2.59-2.70(m，1H)，2.70-2.91(m，2H)，3.42-3.57(m，1H)，4.28-4.51(m，2H)。质谱：C₁₆H₂₉N₆O(M+H)的计算值：321。实测值321。

中间体A1(v)：N-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向A1(iv)(1.92g，5.9mmol)和2，4-二氯-5-氟嘧啶(1.0g，5.9mmol)的DMSO(8mL)溶液中加入磷酸二氢钾(0.82g，5.9mmol)，随后加入H₃PO₄(0.12g，1.2mmol)。将反应置于90℃油浴中并且加热20小时。粗的反应冷却到室温，然后倾倒在冰冷却的NaHCO₃(30mL)中并用EtOAc萃取(2×30mL)。合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。粗的固体与EtOAc研磨，然后滤液通过硅胶柱色谱法纯化，使用含1％-4％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物A1(v)，为白色固体(1.4g，53％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 0.90(s，3H)，1.00(s，3H)，1.06(d，J＝6.4Hz，3H)，1.58(s，3H)，1.69(s，3H)，2.08(s，3H)，2.14-2.25(m，1H)，2.55-2.64(m，2H)，2.73-2.89(m，1H)，3.38-3.51(m，1H)，4.51-4.72(m，2H)，7.95-8.45(m，1H)，10.68(s，1H)，11.81-12.75(m，1H)。质谱：C₂₀H₂₉ClN₈O(M+H)的计算值：451。实测值451。

实施例A1：N4-(6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N2-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺。

向微波管加入A1(v)(200mg，0.44mmol)和乙胺(5mL，2M在MeOH中)。将管在微波中加热到150℃，保持1.5小时。将粗的样品浓缩，然后通过硅胶柱色谱法纯化，使用含1％-4％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到期望的产物A1，为黄色固体(161mg，79％)。NMR数据参见以下表1。

实施例A2-A9：

实施例A2到A9使用与上述实施例A1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例A10：5-{[(8S)-6，8-二甲基-6，9-二氮杂螺[4.5]癸-9-基] 羰基}-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

中间体A10(i)：5-{[(8S)-6，8-二甲基-6，9-二氮杂螺[4.5]癸-9-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

使用与制备上述中间体A1(iv)相同的方法，标题中间体通过快速色谱法纯化，使用含5％7N NH₃-甲醇溶液的二氯甲烷洗脱，得到黄色固体(506mg，90％)。关于螺环戊基哌嗪的合成，请参见哌嗪的一般合成。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 1.13(3H，d，J＝6.32Hz)，1.36-1.41(1H，m)，1.52-1.64(8H，m)，1.66(3H，s)，1.77(3H，s)，2.20-2.22(3H，m)，2.23-2.29(1H，m)，2.60(1H，dd，J＝11.75，3.66Hz)，2.78-2.89(2H，m)，3.49(2H，s)，3.52-3.56(1H，m)，3.64(1H，s)，4.33-4.44(2H，m)。

中间体A10(ii)：4-氯-5-氟-2-甲基嘧啶

将氢化钠(60％，5.0g，125mmol)用己烷洗涤以除去矿物油并且干燥，然后悬浮在THF(50mL)中并且冷却到0℃。将氟乙酸乙酯(13.30g，125mmol)和甲酸乙酯(15.14mL，187mmol)混合在一起并且加入到搅拌的悬浮液中。使反应缓慢温热到环境温度并且搅拌3天。除去溶剂。将盐酸乙脒(11.81g，125mmol)，乙醇钠(8.86g，125mmol)，和乙醇(60mL)的混合物加入到反应中，随后回流过夜。减压除去乙醇。将残余物溶解于最少量的水中并且用浓盐酸酸化到pH＝6。然后通过从水相盐析萃取粗产物并且用4∶1 CHCl₃/异丙醇彻底地洗涤。将合并的有机相干燥(MgSO₄)并且蒸发。粗的固体通过硅胶色谱法纯化，使用5-90％EtOAc/己烷洗脱，得到白色固体(0.95g，6％)。R_f＝0.08(75％EtOAc/己烷)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ2.25(d，J＝1.0Hz，3H)，7.93(d，J＝3.8Hz，1H)，12.95(br，1H)。LCMS 129。2-甲基-5-氟尿嘧啶(1.04g，7.21mmol)和N，N-二甲基苯胺(1.80mL)在POCl₃中在110℃加热90分钟。在冷却之后，将反应小心地加入到冰中。产物用乙醚萃取。醚层顺序地用2N HCl，水，和盐水洗涤，随后干燥(MgSO₄)。小心地减压除去乙醚，得到挥发性液体(0.39g，34％)，其不经进一步纯化使用。R_f＝0.26(10％EtOAc/己烷)。¹H NMR(400MHz，DMSO-d₆)：δ3.91(s，3H)，8.79(s，1H)。

实施例A10：5-{[(8S)-6，8-二甲基-6，9-二氮杂螺[4.5]癸-9-基]羰基}-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

使用与上述对于中间体A1(v)所述相同的方法，将标题化合物A10纯化为白色粉末(49.7mg，24％)。NMR数据参见以下表1。

实施例A11：N ⁴ -(5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4- 基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C] 吡唑-3-基)-N ² -乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺

中间体A11(ii)和A11(iii)：(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪和 A11(iii)((2R，5S)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪

将化合物A11(i)(800g，7mol)溶解于12.8L的EtOH中。在室温将苄基溴(1kg，5.8mol)滴加在1.6L EtOH中的溶液。将反应混合物室温搅拌过夜。TLC(CH₂Cl₂∶MeOH＝10∶1)显示反应完成。真空除去溶剂。残余物用32L水稀释并将得到的混合物室温搅拌30分钟，然后过滤。滤液用CH₂Cl₂萃取(8L×3)。有机相用Na₂SO₄干燥并且浓缩到干燥，得到化合物A11(ii)和A11(iii)的混合物(800g，56％)，为棕色油状物。

中间体A11(iv)((2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪)：

向搅拌的化合物A11(ii)和A11(iii)(300g，1.48mol)的MeOH(1L)溶液中加入L-(+)-酒石酸(444g，2.96mol)在MeOH(2L)中的溶液。在将混合物室温搅拌20分钟，将其在0℃静置24小时。通过过滤收集形成的固体，将其从MeOH(2L)重结晶，得到固体。将固体溶解于1.6L水。将得到的混合物用Na₂CO₃饱和水溶液碱化到pH＝9-10。然后将混合物用CH₂Cl₂萃取(1.5 L×2)。有机相用Na₂SO₄干燥并且浓缩到干燥，得到A11(iv)(122g，81％)，为黄色液体。¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ7.21-7.13(m，5H)，4.02(d，1H)，3.00(d，1H)，2.82-2.51(m，4H)，2.15(m，1H)，1.57(m，2H)，1.05(d，3H)，0.85(d，3H)。

中间体A11(v)：(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪。

向微波管加入A11(iv)(7.50g，36.7mmol)，(溴甲基)四氢吡喃(6.57g，36.7mmol)，三乙胺(12.8mL，91.8mmol)和MeOH(9mL)。将反应混合物在微波中加热到150℃，保持2小时，这时将得到的固体与MeOH研磨，过滤和干燥，得到期望的产物，为白色固体A11(v)(6.1g，55％)。质谱：C₁₉H₃₁N₂O(M+H)的计算值：303。实测值：303。

中间体A11(vi)：(2R，5S)-2，5-二甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪.

向A11(v)(6.10g，20.0mmol)的MeOH(200mL)溶液中加入10％炭载钯(0.600g，0.570mmol)。将悬浮液抽空并且用氢气回填(x3)并将其在氢气下搅拌15小时。悬浮液通过硅藻土过滤，滤饼用CH₂Cl₂洗涤，将滤液浓缩，得到期望的产物，为无色油状物A11(vi)(4.3g，88％)。质谱：C₁₂H₂₅N₂O(M+H)的计算值：213。实测值：213。

实施例A11：N⁴-(5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)-N²-乙基-5-氟嘧啶-2，4-二胺。

标题化合物使用与实施例A1相似的方法制备，不同之处在于使用A11(vi)代替(5S)-1，2，2，5-四甲基哌嗪。NMR数据参见以下表1。

实施例AA1：5-{[(2S，5R)-4-乙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-N-(5-氟-2-甲氧基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

将5-{[(2S，5R)-4-乙基-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺(289mg，0.9mmol)和4-氯-5-氟-2-甲氧基嘧啶(257mg，2eq)在5mL的含50％乙酸的水中的溶液在微波中在80℃加热30分钟。如实施例A1中所述进行纯化，得到标题化合物AA1，为白色粉末(13.1mg，3％)。NMR数据参见以下表1。

实施例AA2-AA5：

实施例AA2到AA5使用与实施例AA1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例B1：N ² -乙基-5-氟-N ⁴ -(5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺乙酸盐

中间体B1(i)：3-氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向5-叔丁基1-乙基3-氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯(25.00g，77.1mmol)在MeOH(50mL)中的浆状物加入LiOH(1.92g，77.1mmol)。将反应室温搅拌2小时，然后浓缩。将粗的反应混合物溶解在EtOAc(50mL)中，然后用NaHCO₃(20mL)和水(20mL)洗涤。将有机层干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩，得到橙色固体，将其与ACN研磨，然后过滤并用ACN(50mL)漂洗，得到标题化合物B1(i)，为白色固体(14.8g，76％)¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.40-1.46(m，9H)，1.47-1.54(m，6H)，4.03-4.17(m，2H)，4.95(br.s.，1H)，11.15(s，1H)。质谱：C₁₂H₂₁N₄O₂(M+H)的计算值：253。实测值253。

中间体B1(ii)：3-[(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向B1(i)(8.01g，31.7mmol)和2，4-二氯-5-氟嘧啶(5.30g，31.7mmol)的DMSO(40mL)溶液中加入磷酸二氢钾(4.32g，31.7mmol)，随后加入H₃PO₄(0.62g，6.4mmol)。将反应置于95℃油浴中并且加热20小时。将粗的反应冷却到室温，然后倾倒在冰冷却的NaHCO₃(饱和，100mL)中，随后加入EtOAC(75mL)。将得到的混合物过滤，得到期望的化合物B1(ii)，为白色固体(6.1g，50％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.35-1.50(m，9H)，1.56-1.65(m，6H)，4.37-4.64(m，2H)，8.09-8.42(m，1H)，10.70(br.s.，1H)，12.53(br.s.，1H)。质谱：C₁₆H₂₁ClFN₆O₂(M+H)的计算值：383。实测值383。

中间体B1(iii)：3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯

向密封管加入B1(ii)(7.64g，20.0mmol)和乙胺(40.0mL，2M在MeOH中)。将密封管在油浴中在150℃加热16小时。使反应冷却至室温并且将得到的固体过滤并用冷的MeOH漂洗，得到标题化合物B1(iii)，为白色固体(6.1g，78％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm1.10(t，J＝7.2Hz，3H)，1.39-1.48(m，9H)，1.53-1.61(m，6H)，3.18-3.27(m，2H)，4.23-4.37(m，2H)，7.06(br.s.，1H)，7.93(s，1H)，10.10(br.s.，1H)，12.45(br.s.，1H)。质谱：C₁₈H₂₇FN₇O₂(M+H)的计算值：392。实测值392。

中间体B1(iv)：5-叔丁基1-乙基3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯

将B1(iii)(5.14g，13.1mmol)在THF(60mL)和DIPEA(4.24g，13.1mmol)中的溶液在冰浴中冷却，然后滴加氯甲酸乙酯(1.42g，13.1mmol)。使反应混合物缓慢温热到室温并且搅拌5小时，然后用水(50mL)淬灭并用EtOAc萃取(2×100mL)。合并的萃取液用盐水(50mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。粗的物质通过硅胶柱色谱法纯化，使用含10-40％EtOAC的CH₂Cl₂，得到标题化合物B1(iv)，为白色泡沫状物(5.8g，95％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.01-1.11(m，3H)，1.33(t，J＝7.2Hz，3H)，1.38-1.49(m，9H)，1.70-1.83(m，6H)，3.13-3.27(m，2H)，4.28-4.50(m，4H)，6.54-6.86(m，1H)，7.94(m，1H)，10.06-10.41(m，1H)。质谱：C₂₁H₃₁FN₇O₄(M+H)的计算值：464。实测值464。

中间体B1(v)：5-(氯羰基)-3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯

向B1(iv)(4.43g，9.6mmol)在二氧杂环己烷(25mL)中的悬浮液加入HCl(20mL，4M，在二氧杂环己烷中)。将反应室温搅拌2小时，然后浓缩。向3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯的盐酸盐(1.27g，2.7mmol)的CH₂Cl₂(40mL)溶液中加入DIPEA(1.57g，12.1)。将反应冷却到-78℃并且在15分钟内用加料漏斗CH₂Cl₂(10mL)溶液加入三光气(0.48g，0.6mmol)。反应在-78℃用水淬灭，然后温热到室温。用NaHCO₃将混合物调节到pH 8-9并用CH₂Cl₂萃取(2×15mL)。合并的萃取液用盐水洗涤(15mL)，然后干燥，过滤并且浓缩。粗的物质通过硅胶柱色谱法纯化，使用含0-3％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到期望的化合物B1(v)，为白色泡沫状物(489mg，36％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.07(t，J＝7.2Hz，3H)，1.33(t，J＝7.2Hz，3H)，1.78-1.84(m，6H)，3.12-3.28(m，2H)，4.42(q，J＝7.2Hz，2H)，4.78(s，2H)，6.69-6.97(m，1H)，7.77-8.08(m，1H)，10.41(s，1H)。质谱：C₁₇H₂₂ClFN₇O₃(M+H)的计算值：426。实测值426。

侧链B1(c)的制备：

中间体B1(a)：(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪

向起始原料(3.00g，9.85mmol)的CH₂Cl₂(100mL)溶液中加入含4N HCl的1，4-二氧杂环己烷(20mL)。将溶液搅拌1小时，这时真空除去挥发物，以定量的收率得到期望的产物，为白色固体。质谱：C₁₃H₂₁N₂(M+H)的计算值：205。实测值：205。

中间体B1(b)：(2S，5R)-1-苄基-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪

向微波管加入起始原料(1.60g，5.77mmol)，1-溴-3-甲氧基丙烷(3.09g，20.2mmol)，三乙胺(6.03mL，43.3mmol)，THF(6mL)和MeOH(6mL)。将悬浮液在微波中在150℃加热2小时。冷却的溶液用EtOAc(20mL)稀释并将有机层用NaHCO₃(饱和水溶液)(3×25mL)和盐水(1×25mL)洗涤。有机层用MgSO₄干燥并且浓缩，得到期望的产物，为棕色油状物(1.5g，92％)。质谱：C₁₇H₂₉N₂O(M+H)的计算值：277。实测值：277。

中间体B1(c)：(2R，5S)-1-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪

向起始原料(1.50g，5.43mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入10％炭载钯(0.150g，1.41mmol)。将悬浮液排空并用氢气回填(x3)并且在氢气下搅拌15小时。将悬浮液过滤通过硅藻土，滤饼用CH₂Cl₂洗涤并将滤液浓缩，得到期望的产物，为棕色泡沫状物(0.83g，82％)。质谱：C₁₀H₂₃N₂O(M+H)的计算值：187。实测值：187。

实施例B1：N²-乙基-5-氟-N⁴-(5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)嘧啶-2，4-二胺乙酸盐

向密封管加入B1(v)(393mg，0.92mmol)的THF(10mL)溶液，随后加入DIPEA(537mg，4.2mmol)和B1(c)(172mg，0.92mmol)。将反应置于85℃油浴中并且加热16小时。将粗的反应浓缩，然后溶解在MeOH(5mL)和Et₃N(5mL)中，然后搅拌另外的16小时。使用5-50％ACN/H₂O(0.1％AcOH)进行制备性HPLC，得到标题化合物B1，为白色固体(185mg，36％)。NMR数据参见以下表1。

实施例B2-B5：

实施例B2到B5使用与上述实施例B1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例B6：4-[(6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1- 基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基)氨基]嘧啶-2-甲腈

实施例B6使用与上述实施例B1相似的方法制备，不同之处在于使用(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐代替中间体B1(b)和在制备中间体B1(ii)的过程中使用4-氯嘧啶-2-甲腈代替2，4-二氯-5-氟嘧啶。NMR数据参见以下表1。

实施例B7：N-(5-氟-2-吗啉-4-基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺。

实施例B7使用与上述实施例B1相似的方法制备，不同之处在于使用(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐代替中间体B1(b)和在制备中间体B1(iii)的过程中使用吗啉代替乙胺。NMR数据参见以下表1。

实施例C1：N ² -乙基-5-氟-N ⁴ -{5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基}嘧啶-2，4- 二胺

中间体C1(i)：3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向5-叔丁基1-乙基3-{[2-(乙基氨基)-5-氟嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯(4.43g，9.6mmol)在二氧杂环己烷(25mL)中的悬浮液加入HCl(20mL，4M，在二氧杂环己烷中)。将反应室温搅拌2小时，然后浓缩，得到标题化合物C1(i)，为三盐酸盐(3.8g，84％)。质谱：C₁₆H₂₃FN₇O₂(M+H)的计算值：364。实测值364。

实施例C1：N²-乙基-5-氟-N⁴-{5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-基}嘧啶-2，4-二胺

向密封管加入C1(i)(400mg，0.85mmol)的THF(10mL)溶液，随后加入DIPEA(492mg，3.8mmol)和4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物(228mg，1.3mmol)。将反应在油浴中在80℃加热16小时，然后浓缩并且溶解在MeOH(3mL)和Et₃N(5mL)中并且搅拌另外的10小时。将粗的反应浓缩，然后通过硅胶柱色谱法纯化，使用含1-3％7NNH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物C1，为黄色固体(175mg，47％)。NMR数据参见以下表1。

实施例D1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺

中间体D1(i)：N-(5-氟-2-乙烯基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向隔膜覆盖的密封管加入N-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺(109mg，0.242mmol)，4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(dioxaborolane)(122mg，0.725mmol)，Na₂CO₃(77mg，0.73mmol)和二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(40mg，0.048mmol)，随后加入DME(2.5mL)和水(0.5mL)。将反应混合物用氩气吹扫2分钟，然后置于预热的100℃油浴中并且搅拌16小时。将粗的反应浓缩，溶解在EtOAc(15mL)中并用水(10mL)洗涤。将EtOAc溶液干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化，使用含1-3％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物D1(i)，为黄色固体(45mg，42％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δppm0.99(s，3H)，1.05(s，3H)，1.18(d，J＝6.4Hz，3H)，1.72(s，3H)，1.83(s，3H)，2.19(s，3H)，2.25-2.36(m，1H)，2.63-2.75(m，1H)，2.76-2.95(m，2H)，3.52-3.73(m，1H)，4.57-4.81(m，2H)，5.65(m，1H)，6.40(m，1H)，6.76(m，1H)，8.13-8.31(m，1H)，8.53(s，1H)。质谱：C₂₂H₃₂FN₈O(M+H)的计算值：443。实测值443。

实施例D1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向包含D1(i)(54mg，0.12mmol)的氮气吹扫的烧瓶加入Pd/C(6.5mg，0.006mmol)和MeOH(3mL)。应用H₂气球并将反应搅拌16小时。粗的混合物倾倒在硅藻土垫上并用MeOH(30mL)漂洗，然后浓缩并且通过柱色谱法纯化，使用含1-3％7N NH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物D1，为浅黄色固体(33mg，61％)。NMR数据参见以下表1。

实施例E1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺乙酸盐

中间体E1(i)：3-[(5-氟-2-乙烯基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯

向隔膜覆盖的密封管加入3-[(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯(2.00g，5.22mmol)，4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2二氧杂环戊硼烷(2.41g，15.7mmol)，Na₂CO₃(1.66g，15.7mmol)和二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(850mg，1.04mmol)，随后加入DME(50mL)和水(12mL)。将反应混合物用氩气吹扫2分钟，然后置于预热的100℃油浴中并且搅拌16小时。将粗的反应浓缩，然后溶解在EtOAc(100mL)中并且用水(50mL)洗涤。将EtOAc溶液干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。通过硅胶柱色谱法进行纯化，使用含1-10％7NNH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到期望的化合物E1(i)，为橙色固体(1.8g，91％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δppm 1.45-1.58(m，9H)，1.65-1.78(m，6H)，4.45-4.71(m，2H)，5.58-5.71(m，1H)，6.34-6.46(m，1H)，6.68-6.82(m，1H)，7.99(s，1H)，8.12-8.32(m，1H)。质谱：C₁₈H₂₄FN₆O₂(M+H)的计算值：375。实测值375。

中间体E1(ii)：3-[(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向包含E1(i)(1.71g，4.50mmol)的氮气吹扫的烧瓶加入Pd/C(241mg，0.277mmol)和MeOH(30mL)。应用H₂气球并且将反应搅拌16小时。粗的混合物倾倒在硅藻土垫上并用MeOH(75mL)漂洗，然后浓缩。将深棕色固体与Et₂O(35mL)研磨，得到标题化合物E1(ii)，为灰白色固体(1.02g，60％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.21(t，J＝7.5Hz，3H)，1.40-1.49(m，9H)，1.52-1.65(m，6H)，2.60-2.87(m，2H)，4.37-4.68(m，2H)，8.01-8.55(m，1H)，9.75-10.42(m，1H)，11.60-12.54(m，1H)。质谱：C₁₈H₂₆FN₆O₂(M+H)的计算值：377。实测值377。

中间体E1(iii)：5-叔丁基1-乙基3-[(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯

将E1(ii)(1.00g，2.66mmol)在THF(40mL)和DIPEA(858mg，6.64mmol)中的溶液在冰浴中冷却。加入氯甲酸乙酯(317mg，2.92mmol)并且使反应温热到室温并且搅拌16小时。反应用水(50mL)淬灭并用EtOAc萃取(2×100mL)。合并的萃取液用盐水(50mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。通过硅胶柱色谱法进行纯化使用含0-40％EtOAc的CH₂Cl₂，得到标题化合物E1(iii)，为黄色固体(879mg，74％)。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δppm 1.28-1.34(m，3H)，1.47(t，J＝7.2Hz，3H)，1.50-1.56(m，9H)，1.79-1.90(m，6H)，2.75-2.87(m，2H)，4.45-4.56(m，2H)，4.74-4.77(m，2H)，7.65(s，1H)，8.06-8.31(m，1H)。质谱：C₂₁H₃₀FN₆O₄(M+H)的计算值：449。实测值449。

中间体E1(iv)：5-(氯羰基)-3-[(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯

向E1(iii)(879mg，1.96mmol)在二氧杂环己烷(5mL)中的悬浮液加入HCl(10mL，4M，在二氧杂环己烷中)。将反应室温搅拌2小时，然后浓缩。将二盐酸盐溶解在CH₂Cl₂(40mL)中并且加入DIPEA(1.27g，9.8mmol)，然后将反应冷却到-78℃并且用加料漏斗在15分钟内缓慢加入三光气(0.41g，1.37mmol)的CH₂Cl₂(10mL)溶液。反应在-78℃用水淬灭，然后温热到室温。混合物用NaHCO₃调节到pH 8-9并用CH₂Cl₂萃取(2×15mL)。合并的萃取液用盐水(15mL)洗涤，然后干燥，过滤并且浓缩。粗的物质通过硅胶柱色谱法纯化，使用含0-3％7NNH₃/MeOH的CH₂Cl₂，得到标题化合物E1(iv)，为白色固体(244mg，31％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.19-1.30(m，3H)，1.32-1.42(m，3H)，1.69(s，6H)，2.67-2.95(m，2H)，4.47(q，J＝7.0Hz，2H)，4.66-5.51(m，2H)，8.27-8.76(m，1H)，9.73-10.36(m，1H)。质谱：C₁₇H₂₁ClFN₆O₃(M+H)的计算值：411。实测值411。

实施例E1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺乙酸盐

向密封管加入E1(iv)(200mg，0.487mmol)，DIPEA(283mg，2.19mmol)和THF(10mL)。将管置于90℃油浴中并且加热16小时。将反应浓缩，然后溶解在MeOH(5mL)和Et₃N(5mL)中并且在室温搅拌另外的16小时。使用5-50％ACN(0.1％AcOH)进行制备性HPLC，得到标题化合物E1，为乙酸盐(61mg，26％)。NMR数据参见以下表1。

实施例E2和E3：

实施例E2和E3使用与上述实施例E1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例E4：5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3，3，3-三氟丙基)哌嗪 -1-基]羰基}-N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

中间体E4(i)：(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基-4-(3，3，3-三氟丙基)哌嗪

向(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪(2.00g，7.21mmol)在THF(10mL)，MeOH(10mL)和TEA(1.0mL)中的溶液加入3，3，3-三氟丙醛(1.62g，14.4mmol)和AcOH(0.826mL，14.4mmol)，随后加入氰基硼氢化钠(0.907g，14.4mmol)。将反应搅拌2小时，这时将反应用水淬灭(15mL)，然后用NaHCO₃调节为碱性并用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，干燥并且真空浓缩，得到白色粉末(2.0g，90％)。质谱：C₁₆H₂₄N₂F₃(M+H)的计算值：301。实测值：301。

中间体E4(ii)：(2R，5S)-2，5-二甲基-1-(3，3，3-三氟丙基)哌嗪

向E4(i)(1.90g，6.30mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入Pd(OH)₂(1.00g，7.10mmol)。将悬浮液排空/用氢气回填(x3)并且在氢气下搅拌15小时。悬浮液过滤通过硅藻土，滤饼用CH₂Cl₂洗涤，并将滤液浓缩，得到白色固体(1.3g，96％)。质谱：C₉H₁₈N₂F₃(M+H)的计算值：211。实测值：211。

实施例E4：5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(3，3，3-三氟丙基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

实施例E4使用与上述实施例E1相似的方法制备，不同之处在于使用中间体E4(ii)代替(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐。NMR数据参见以下表1。

实施例E5：2-((5S)-4-{[3-[(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇

侧链E5(ii)((S)-2-(苄基氨基)丙酸甲基酯)：

在0℃向化合物E5(i)(27.7g，0.2mol)在CH₃CN(350mL)中的混合物分批加入K₂CO₃，之后在1小时时间内滴加BnBr(34.2g，0.2mol)。在加入之后，将混合物室温搅拌2小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝4/1)显示反应完成。将反应用水(500mL)淬灭，并用乙酸乙酯萃取(400mL×3)。合并的有机层用Na₂SO₄干燥。过滤并且浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝50/1到4/1洗脱)，得到化合物E5(ii)(15g，39％)，为无色液体。¹H NMR CDCl3 1.2(d，3H)，1.9(bs，1H)，3.3(q，1H)，3.6(d，1H)，3.8(d，1H)，3.7(s，3H)，7.1-7.3(m 5H)

中间体E5(iv)((R)-2-(叔丁氧基羰基)-4-甲氧基-4-氧代丁酸)：

向搅拌的化合物E5(iii)(73.5g，0.5mol)在THF(500mL)和水(500mL)中的溶液加入Na₂CO₃(106g，1mol)，随后加入Boc₂O(120g，0.55mol)。然后将混合物室温搅拌过夜。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)显示反应完成。将反应混合物浓缩，并将残余物溶解于水(200mL)中，用乙酸乙酯萃取(500mL×2)。将水层分离，并用1N HCl酸化到pH＝5，用乙酸乙酯萃取(500mL×20)。合并的有机层用Na₂SO₄干燥。过滤并且浓缩，得到化合物E5(iv)(75g，61％)，为油状物。

¹H NMR CDCl3 1.4(s，9H)，2.8(dd，1H)，3.0(dd，1H)，3.6(s，3H)，4.6(m，1H)，5.5(d，1H)，9.3(br，1H)

中间体E5(v)((R)-4-(苄基((R)-1-甲氧基-1-氧代丙烷-2-基)氨基)-3-(叔丁氧基羰基)-4-氧代丁酸甲基酯)：

向搅拌的化合物E5(iv)(117.5g，0.475mol)的DMF(1.5L)溶液中依次加入NMM(80.1g，0.792mol)，HATU(150.6g，0.396mol)。将混合物在0℃搅拌30分钟，然后滴加化合物9(76.5g，0.396mol)。将溶液室温搅拌过夜。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)显示反应完成。将反应溶液倾倒在水(1L)中，并用乙酸乙酯萃取(1L×3)。合并的有机层用1N HCl(200mL×2)、NaHCO₃水溶液(200mL×2)、盐水(400mL)洗涤，用Na₂SO₄干燥，并且浓缩，得到化合物E5(v)(152g，91％)，为油状物，其不经进一步纯化用于下一步。

中间体E5(vi)((R)-2-((R)-2-氨基-N-苄基-4-甲氧基-4-氧代丁酰胺基)丙酸)：

向搅拌的化合物E5(v)(152g，0.362mol)的二氧杂环己烷(200mL)溶液中加入含HCl(g)的二氧杂环己烷(1L)。将溶液室温搅拌过夜。将溶液浓缩，得到化合物E5(vi)(100g，94％)，为油状物，其不经进一步纯化用于下一步。

中间体E5(vii)(2-((2R，5S)-4-苄基-5-甲基-3，6-二氧代哌嗪 -2-基)乙酸甲基酯)：

将化合物E5(vi)(110g，0.307mol)溶解于二氯甲烷/水(1L/500mL)。在搅拌下滴加NaHCO₃水溶液直到pH＝9，然后将溶液室温搅拌一小时。分离二氯甲烷层，并将水层用二氯甲烷萃取(300mL×2)。合并的有机层用Na₂SO₄干燥。过滤并且蒸发，得到化合物E5(vii)(95g，99％)，为油状物。¹H NMR CDCl3 1.3-1.4(d，3H)，2.7-2.8(m，1H)，3.0-3.1(m，1H)，3.6(s，3H)，3.8(m，1H)，4.0(d，1H)，4.4(m，1H)，5.2(d，1H)，7.1-7.3(m，5H)，7.7(br，1H)

中间体E5(viii)(2-((2R，5S)-4-苄基-1，5-二甲基-3，6-二氧代哌嗪-2-基)乙酸甲基酯)：

在0℃向化合物E5(vii)(1.45g，5mmol)的THF(30mL)溶液中分批加入NaH(0.24g，5mmol)。将混合物搅拌20分钟，然后滴加含CH₃I(0.85g，6mmol)的THF(10ml)。然后将混合物室温搅拌5小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)显示反应完成。反应用水(20mL)淬灭，并用乙酸乙酯萃取(30mL×2)。合并的有机层用Na₂SO₄干燥。过滤并且浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱法纯化(用石油醚/乙酸乙酯＝5/1洗脱)，得到化合物E5(viii)(0.7g，46％)，为油状物。¹H NMR CDCl31.4(m，3H)，2.9(s，3H)，3.0-3.2(m，1H)，3.5-3.7(s，3H)，3.8-4.1(m，2H)，4.2-4.4(m，1H)，5.1-5.3(m，1H)，7.1-7.3(m 5H)

中间体E5(ix)(2-((5S)-4-苄基-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇)：

在0℃向化合物E5(ix)(12g，0.04mmol)的THF(250mL)溶液中分批加入LiAlH₄(7.6g，0.2mol)。在加入之后，将反应混合物加热到回流36小时。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)显示反应完成。反应用水(5mL)淬灭，并将混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯洗涤几次。滤液用Na₂SO₄洗涤。过滤并且浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱法纯化(用二氯甲烷/甲醇＝100/1到10/1洗脱)，得到外消旋的化合物E5(ix)(8.3g，84％)，为油状物。

中间体E5(x)-异构体A和B：2-((2R，5S)-4-苄基-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇和2-((2S，5S)-4-苄基-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇

通过使用AS-H(0.46×2.5cm×5μm)柱进行的SFC分离外消旋的化合物E5(ix)，使用5％MeOH(0.025％DEA)和95％CO₂作为流动相，得到化合物E5(x)-异构体A和B(分别为5.2g和1.9g)。E5(x)-异构体A：¹H NMR CDCl3 1.0(d，3H)，1.4(m，1H)，1.7(m，1H)，2.0(m，2H)，2.1(m，1H)，2.2(s，3H)，2.4(m，1H)，2.6(dd，1H)，2.7(dd，1H)，3.0(d，1H)，3.4(m，1H)，3.6(m，1H)，4.0(d，1H)，4.2(br，1H)，7.1-7.3(m，5H)。E5(x)-异构体B：¹H NMR CDCl3 1.0(d，3H)，1.6-1.8(m，2H)，2.2-2.7(m，9H)，3.2(d，1H)，3.4(m，1H)，3.6(m，1H)，3.8(d，1H)，4.8(br，1H)，7.1-7.3(m，5H)。

中间体E5(xi)-异构体A和B：2-((2R，5S)-1，5-二甲基哌嗪-2- 基)乙醇和2-((2S，5S)-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇

将化合物E5(x)-异构体A(5.2g，0.021mol)和Pd/C(0.5g)在MeOH(40mL)中的混合物或化合物E5(x)-异构体B(1.9g，7.7mmol)和Pd/C(0.2g)在MeOH(40mL)中的混合物在50psi H₂下室温搅拌过夜。TLC(二氯甲烷/甲醇＝10/1)显示反应完成。将反应混合物过滤并将滤液浓缩，得到E5(xi)-异构体A(3.1g，94％)，为灰白色固体或E5(xi)-异构体B(1.2g，93％)，为灰白色固体。E5(xi)-异构体A：¹HNMR CDCl3 1.0(d，3H)1.8(m，1H)，2.0(m，1H)，2.4-3.1(m，9H)，3.8(m，2H)。E5(xi)-异构体B： ¹H NMR CDCl3 1.0(d，3H)，1.5(m，1H)，1.8(t，1H)，2.0-2.3(m，2H)，2.4(s，3H)，2.7-3.0(m，4H)，3.7(m，1H)，3.9(m，1H)。

标题化合物使用与上述实施例E1相似的方法制备，不同之处在于使用E5(xi)-异构体A代替((2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪。NMR数据参见以下表1。

实施例F1：5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

中间体F1(i)：3-[(乙氧基羰基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向3-乙氧基羰基氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢-吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸5-叔丁基酯1-乙基酯(5.69g，14.4mmol)的CH₂Cl₂(10mL)溶液中加入含4M HCl的1，4-二氧杂环己烷(20mL)。将溶液搅拌1小时，这时真空除去挥发物，得到期望的产物F1(i)，为白色固体(4.8g，91％)。质谱：C₁₃H₂₁N₄O₄(M+H)的计算值：297。实测值：297。

中间体F1(ii)：3-[(乙氧基羰基)氨基]-5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向压力管加入F1(i)(4.80g，16.2mmol)，4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物(2.45g，13.6mmol)，二异丙基乙胺(9.06mL，52.0mmol)和THF(300mL)。将悬浮液在80℃加热15小时。真空除去挥发物，得到期望的产物F1(ii)，为棕色泡沫状物(5.6g，98％)。质谱：C₂₀H₃₁N₅O₅F(M+H)的计算值：440。实测值：440。

中间体F1(iii)：5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向微波管加入F1(ii)(9.80g，22.0mmol)的MeOH(35mL)溶液和LiOH(2.14g，89.2mmol)。将反应在微波中在110℃加热2小时。将反应混合物真空浓缩，得到期望的产物F1(iii)，为棕褐色的泡沫(4.4g，67％)。质谱：C₁₄H₂₃N₅OF(M+H)的计算值：296。实测值：296。

中间体F1(iv)：N-(2-氯-5-氟嘧啶-4-基)-5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向F1(iii)(1.40g，4.74mmol)和2，4-二氯-5-氟嘧啶(0.791g，4.74mmol)在DMSO(10mL)中的溶液加入磷酸二氢钾(0.645g，4.74mmol)，随后加入H₃PO₄(0.0929g，0.948mmol)。反应加热到95℃，保持15小时。将粗的反应混合物冷却到22℃，然后倾倒在冰冷却的NaHCOx(饱和水溶液)(100mL)中。水层用EtOAc萃取(2×50mL)并将合并的有机层用盐水洗涤(2×50mL)，用硫酸镁干燥，并且浓缩，得到期望的产物F1(iv)，为棕色固体(0.633g，31％)。质谱：计算值C₁₈H₂₃N₇OF₂Cl(M+H)：426。实测值：426。

实施例F1：5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向压力管加入F1(iv)(0.225g，0.528mmol)，三甲基环三硼氧烷(1.47mL，10.6mmol)，碳酸铯(3.44g，10.6mmol)，二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(0.0647g，0.0792mmol)，H₂O(0.8mL)和THF(8.0mL)。将悬浮液用氩气吹扫2分钟，然后在100℃加热15小时。冷却的溶液过滤，以除去未溶解的固体，浓缩并且再溶解于MeOH。使用20-60％ACN/H₂O(0.1％AcOH)进行制备性HPLC，得到期望的产物F1，为白色固体(0.020g，9.3％)。NMR数据参见以下表1。

实施例G1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-5-[(4-氟-1-甲基哌啶 -4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

中间体G1(i)：(5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-N-(5-氟-2-乙烯基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向压力管加入起始原料[3-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基氨基)-6，6-二甲基-4，6-二氢-1H-吡咯并[3，4-C]吡唑-5-基]-(4-氟-1-甲基-哌啶-4-基)-甲酮(0.375g，0.881mmol)，4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2二氧杂环戊硼烷(0.407g，2.64mmol)，Na₂CO₃(0.280g，2.64mmol)和二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(0.144g，0.176mmol)，随后加入DME(10mL)和水(2mL)。反应混合物用氩气吹扫2分钟，然后加热到100℃，保持15小时。将挥发物真空浓缩并将残余物再溶解于EtOAc(15mL)。有机层用水(10mL)洗涤，用MgSO₄干燥，过滤，并且浓缩，得到期望的产物G1(i)，为棕色泡沫状物(0.35g，95％)。质谱：C₂₀H₂₆N₇OF₂(M+H)的计算值：418。实测值：418。

实施例G1：N-(2-乙基-5-氟嘧啶-4-基)-5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向起始原料(0.413g，0.989mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入10％炭载钯(0.0400g，0.380mmol)。将悬浮液排空/用氢气回填三次并且在氢气下搅拌15小时。悬浮液过滤通过硅藻土，滤饼用CH₂Cl₂洗涤，并将滤液浓缩。制备性HPLC得到期望的产物G1，为白色固体(0.018g，4.4％)。NMR数据参见以下表1。

实施例H1：H-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(3S，8a S)-3-甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

中间体H1(i)：3-[(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向压力管加入3-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基氨基)-6，6-二甲基-4，6-二氢-1H-吡咯并[3，4-C]吡唑-5-甲酸叔丁基酯(1.50g，3.90mmol)，三甲基环三硼氧乙烷(10.9mL，78.4mmol)，碳酸铯(25.5g，78.4mmol)，二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(0.480g，0.588mmol)，H₂O(6mL)，和THF(60mL)。将悬浮液用氩气吹扫2分钟，然后在100℃加热15小时。将冷却的溶液过滤，以除去未溶解的固体。通过硅胶柱色谱法纯化，使用含0-10％氨化甲醇的CH₂Cl₂，得到期望的产物H1(i)，为棕色固体(0.80g，56％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.41(s，9H)1.57(s，6H)2.38(s，3H)4.43-4.58(m，2H)8.12(s，1H)10.02(s，1H)12.34(s，1H)。质谱：C₁₇H₂₄N₆O₂F(M+H)的计算值：363。实测值：363。

中间体H1(ii)：5-叔丁基1-乙基3-[(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯。

向0℃的H1(i)(0.800g，2.21mmol)的THF(10mL)溶液加入NaH(在矿物油中的60％分散体，0.124g，3.09mmol)。将溶液在0℃搅拌10分钟，这时加入氯甲酸乙酯(0.421mL，4.41mmol)。将溶液温热到22℃并且搅拌15小时。反应用NH₄Cl(饱和水溶液)(10mL)淬灭并将水层用EtOAc萃取(3×30mL)。合并的有机层用盐水(1×20mL)洗涤，用MgSO₄干燥并且浓缩，得到期望的产物H1(ii)，为棕色固体(0.92g，96％)。质谱：C₂₀H₂₈N₆O₄F(M+H)的计算值：435。实测值：435。

中间体H1(iii)：5-(氯羰基)-3-[(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向H1(ii)(0.919g，2.12mmol)的CH₂Cl₂(5mL)溶液中加入含4MHCl的二氧杂环己烷(10mL)。将溶液搅拌1小时，真空浓缩，并且再溶解于CH₂Cl₂(40mL)和二异丙基乙胺(1.67mL，9.58mmol)。将溶液冷却到-78℃并且在30分钟内滴加含三光气(0.569g，1.92mmol)的CH₂Cl₂(10mL)。反应用H₂O(10mL)淬灭，温热到22℃，并用NaHCO₃调节到pH 8-9。水层用CH₂Cl₂萃取(2×30mL)并将合并的有机层用盐水洗涤(1×30mL)，用MgSO₄干燥，并且浓缩，得到期望的产物H1(iii)，为棕色固体(0.49g，46％)。质谱：C₁₆H₁₉ClN₆O₄F(M+H)的计算值：397。实测值：397。

实施例H1：N-(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(3S，8aS)-3-甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向压力管加入H1(iii)(0.244g，0.615mmol)，(3S，8a S)-3-甲基八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪(0.0862g，0.615mmol)，二异丙基乙胺(0.428mL，2.46mmol)和THF(5mL)。将悬浮液在90℃搅拌2小时。真空除去挥发物并将残余物再溶解于MeOH(10mL)。加入三乙胺(5mL)并将溶液搅拌15小时。使用20-60％ACN/H₂O(0.1％AcOH)进行制备性HPLC，得到期望的产物H1，为白色固体(0.12g，38％)。

实施例H2-H7：

实施例H2到H7使用与上述实施例H1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例H8：4-[((2R，5S)-4-{[3-[(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-2，5-二甲基哌嗪-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-醇

中间体H8(i)：1，6-二氧杂螺[2.5]辛烷

将4-亚甲基四氢-2H-吡喃(1.00g，10.2mmol)的CH₂Cl₂(30mL)溶液置于冰浴中，然后分三个部分加入间氯过氧苯甲酸(2.46g，14.3mmol)。将反应缓慢温热到室温并且搅拌3小时，然后用10％NaOH(aq)(10mL)淬灭并用CH₂Cl₂萃取(2×15mL)。将合并的萃取液干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩，得到中间体H8(i)，为透明的油状物(607mg，52％)。

中间体H8(ii)(4-(((2R，5S)-4-苄基-2，5-二甲基哌嗪-1-基)甲基)-四氢-2H-吡喃-4-醇)：

向微波管加入H8(i)(259mg，2.3mmol)和(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪(464mg，2.3mmol)和5mL的MeOH。将管在微波中加热到150℃，保持2小时。将粗的反应浓缩，得到中间体H8(ii)(723mg，100％)

中间体H8(iii)4-{[(2R，5S)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]甲基}四氢-2H-吡喃-4-醇

向H8(ii)(723mg，2.3mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入Pd/C(72mg，0.07mmol)。反应经历抽空-用H₂气回填(3x)，然后在H₂气氛下进行过夜。将完成的反应混合物过滤通过硅藻土垫，用CH₂Cl₂和MeOH漂洗，然后浓缩，得到标题化合物(500mg，97％)，为橙黄色半固体H8(iii)。

实施例H8：4-[((2R，5S)-4-{[3-[(5-氟-2-甲基嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-2，5-二甲基哌嗪-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-醇。

标题化合物使用与上述实施例H1相似的方法制备。NMR数据参见以下表1。

实施例H9-H10：

实施例H9和H10使用与上述实施例H1相似的方法制备，不同之处在于分别使用E5(xi)-异构体A和B代替(3S，8a S)-3-甲基八氢吡咯并[1，2-a]吡嗪。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例I1：N-(5-氟-2-丙基嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基]-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺。

向压力管加入[3-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基氨基)-6，6-二甲基-4，6-二氢-1H-吡咯并[3，4-C]吡唑-5-基]-((S)-2，4，5，5-四甲基-哌嗪-1-基)-甲酮(0.150g，0.330mmol)，2-烯丙基-4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂环戊硼烷(1.12g，6.66mmol)，碳酸铯(0.543g，1.66mmol)，二氯[1，1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(II)二氯甲烷加合物(0.0408g，0.0498mmol)，H₂O(0.3mL)和THF(3mL)。将悬浮液用氩气吹扫2分钟，然后在100℃搅拌15小时。将冷却的溶液过滤，以除去未溶解的固体并且真空除去挥发物。将残余物再溶解于MeOH(5mL)并且加入10％炭载钯(0.0400g，0.380mmol)。将悬浮液排空并用氢气回填三次并且在氢气下搅拌15小时。将悬浮液过滤通过硅藻土，滤饼用CH₂Cl₂洗涤，并将滤液浓缩。通过制备性HPLC得到期望的产物I1，为白色固体(0.025g，14％)。

实施例I2：

实施例I2使用与上述实施例I1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例J1-J8：

中间体J(i)：3-氨基-6，6-二甲基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

在0℃在氮气下向3-氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯(8.5g，33.9mmol)和二异丙基乙胺(18mL，3.0equiv)在二氯甲烷(dichloromethene)(200mL)中的悬浮液滴加2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物(6.0mL，1.0equiv)。将混合物在0℃在氮气下搅拌2小时，然后温热到室温并且搅拌过夜。将反应混合物浓缩并且通过柱色谱法纯化，得到标题化合物J(i)，为白色固体(2.27g，18％)。1H NMR(400MHz，甲醇-d₄)：δppm 0.81-0.97(m，2H)1.45-1.59(m，9H)1.72(d，J＝5.29Hz，13H)3.53-3.67(m，2H)4.26(d，J＝7.55Hz，2H)5.17(s，2H)。2D-NOESY NMR显示5.17ppm的质子与1.72ppm的质子相关。

中间体J(ii)：3-[(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)氨基]-6，6-二甲基-1-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向装备有冷凝器的烧瓶加入J(i)(4.7g，12.3mmol)，碳酸铯(8.0g，25mmol)，2-溴-3-氟-甲基吡啶(2.6g，14mmol)，Pd₂(dba)₃(600mg，0.6mmol，10mol％Pd)，Xantphos(700mg，1.2mmol，10mol％)和1，4二氧杂环己烷(150mL)。将反应混合物在氮气气氛下搅拌15分钟。在搅拌混合物的同时，加入脱气的水(50)mL。将混合物在氮气气氛下在100℃加热16小时，然后蒸发掉4/5体积的溶剂。加入水并将混合物用乙酸乙酯萃取(3×100mL)。合并的有机物用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(无水硫酸钠)，过滤，浓缩并且通过柱色谱法纯化，得到标题化合物J(ii)，为白色固体(2.9g，48％)。

中间体J(iii)：3-[(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向J(ii)(2.9g，5.9mmol)的THF(100mL)溶液中加入TBAF(7.7g，29.5mmol，5equiv)。将反应混合物在70℃加热16小时，然后蒸发掉4/5体积的溶剂。加入水并将混合物用乙酸乙酯萃取两次。合并的有机物用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，干燥(无水硫酸钠)，过滤，浓缩并且通过柱色谱法纯化，得到标题化合物J(iii)，为白色固体(1.6g，76％)。LCMS(API-ES，M+H⁺)：362。

中间体J(iv)：乙酸乙酯-3-[(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

在0℃在氮气下将氯甲酸乙酯(0.58g，5.35mmol，1.2equiv.)的THF(5mL)溶液缓慢加入到J(iii)(1.6g，4.46mmol)和DIPEA(3.9mL，5equiv)在THF(80mL)中的悬浮液混合物中。将反应在0℃保持2小时，然后温热到室温并且搅拌过夜。将反应混合物浓缩并且通过柱色谱法纯化，得到标题化合物J(iv)，为白色固体(627mg，35％)。

中间体J(v)：乙酸乙酯-N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向J(iv)(627mg，1.45mmol)在二氧杂环己烷(10mL)中的透明溶液加入含4M HCl的二氧杂环己烷(10.8mL，30equiv)。将反应混合物室温搅拌6小时。蒸发溶剂和挥发物，真空干燥，得到标题化合物J(v)，为盐酸盐。

中间体J(vi)(适用于实施例J3-J6)：乙酸乙酯-3-[(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-羰基氯化物。

在0℃在氮气下向三光气(472mg，1.59mmol)在DCM中的透明溶液滴加DIPEA(1.26mL，7.23mmol)(白色烟雾)。滴加粗产物J(v)(489mg，1.27mmol)在DCM(20mL)中的悬浮液。使反应混合物缓慢温热到室温并且在氮气下室温搅拌过夜。蒸发溶剂和挥发物，真空干燥，得到标题化合物J(vi)，为盐酸盐。NMR数据参见以下表1。

实施例J1：5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

将J(v)(68mg，0.17mmol)，4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物(74.2mg，2equiv)和DIPEA(0.18mL)在THF(10mL)中的溶液加热到70℃，保持16小时。将THF浓缩。将反应混合物溶解于CH₃OH(10mL)和Et₃N(5mL)，然后室温搅拌16小时。残余物通过HPLC纯化(0.1％HOAc作为缓冲剂)，得到标题化合物J1，为固体(80mg，20％收率)。NMR数据参见以下表1。

实施例J2-J8：

实施例J2到J8使用与上述实施例J1相似的方法制备，其中实施例J3到J8进一步衍生自上述的中间体J(vi)。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例J9：N-[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基 -5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺

实施例J9使用与实施例J1到J8相似的方法制备，不同之处在于使用A1(iv)代替上述的J(i)。NMR数据参见以下表1。

实施例J10-J16：

实施例J10到J16使用与上述实施例J9相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例K1：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺

中间体K1(i)：3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

通过将7g金属钠溶解在140ml干燥乙醇中制备新鲜的乙醇钠溶液。向装备有磁力搅拌棒的十二个20ml Biotage微波小瓶加入1.2g的氯化物(总计14.4g，38mmol)。向每个小瓶加入10ml的上述的乙醇钠溶液，随后加入5ml无水乙醇。将小瓶密封，并且使用BiotageInitiator微波以分批的方式处理。将每个反应加热到160℃，保持10分钟。在冷却之后，将反应小瓶打开(通过LC-MS证明反应完成)，并将内容物合并。将每个小瓶用5ml乙醇、10ml水(在小瓶底部沉积有固体沉淀物)漂洗，并将洗液与小瓶原来的内容物合并。真空除去乙醇，并将水层用乙酸乙酯萃取(3×150ml)。有机萃取物用硫酸钠干燥，并且真空除去溶剂，得到产物，为略带黄色的固体(14.1g，96％)。其纯度足以直接用于下一步。

注释：长时间(18小时)加热回流不能进行转化。没有尝试使用密封管。在140℃微波加热10分钟引起60％转化(LC-MS)。

中间体K1(ii)：5-叔丁基1-乙基3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯。

向K1(i)(175mg，0.44mmol)的二氯甲烷溶液中加入三乙胺(0.07mL，1.2eq)，随后加入氯甲酸乙酯(0.04mL，1.0eq)。在室温搅拌12小时之后，真空除去溶剂并将残余物在二氯甲烷和水之间分配。分离有机层，然后浓缩，得到黄色固体K1(ii)，其不经进一步的纯化用于下一步。

中间体K1(iii)：5-(氯羰基)-3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯。

向K1(ii)(170mg，0.36mmol)在6mL干燥二氧杂环己烷中的溶液加入1mL的含4M HCl的二氧杂环己烷。在室温搅拌48小时之后，真空除去溶剂并将白色固体残余物在高真空下干燥几小时并且不经进一步的纯化用于下一步。与三光气的反应使用与制备中间体E1(iv)相同的方法进行。¹H NMR(400MHz，氯仿-D)δppm 1.38-1.43(3H，m)，1.49-1.54(3H，m)，1.78-1.86(6H，m)，4.32-4.42(2H，m)，4.61(2H，qd，J＝7.13，1.26Hz)，5.17(2H，d，J＝59.42Hz)，8.08(1H，t，J＝2.39Hz)，10.27(1H，d，J＝9.57Hz)。LCMS(M+H)⁺427.1

实施例K1：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向K1(iii)(70mg，0.16mmol)的四氢呋喃(4mL)溶液中加入(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(108mg，4equiv)和二异丙基乙基胺(0.15mL，6.8equiv)。将得到的混合物在密封管中在80℃加热16小时，然后使其冷却到环境温度。向粗的反应混合物加入溶解于2mL甲醇中的一个氢氧化钠小球并且继续在室温下搅拌一小时。真空除去溶剂并通过反相HPLC纯化残余物，使用在25分钟内渐变的含15％到35％乙腈的水(0.1％乙酸改性剂)的梯度。冷冻干燥过夜，得到标题化合物K1，为白色粉末(37mg，44％)。NMR数据参见以下表1。

实施例K2-K19：

实施例K2到K19使用与上述实施例K1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例K20：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-5-{[(3S，8a S)-3-异丙基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-6，6-二甲基 -1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

实施例K20使用与上述实施例K1相似的方法制备，不同之处在于使用E4(ii)代替(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐。NMR数据参见以下表1。

实施例K21：5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基) 哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

中间体K21(i)：(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪

在0℃向(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基哌嗪(11.0g，53.8mmol)和四氢-4H-吡喃-4-酮(5.39g，53.8mmol)的混合物加入异丙醇钛(IV)(19.2mL，67.3mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜，得到橙色悬浮液。向悬浮液加入EtOH(25mL)和NaCNBH3(4.27g，64.6mmol，1.20eq)。将得到的混合物在室温搅拌24小时。然后反应混合物用水(5.0mL)淬灭，生成黄色固体。悬浮液用EtOAc(400mL)稀释并且过滤。将滤液减压浓缩。残余物再次用EtOAc(500mL)稀释，用Na₂SO₄干燥，并且过滤。收集滤液并且减压浓缩，得到黄色油状物。将油状物在THF(400mL)中稀释并且加入PS-异氰酸酯以除去仲胺。将悬浮液过滤并将滤液浓缩。残余物通过柱色谱法纯化，使用50∶5∶1CHCl3/MeOH/Et3N，得到期望的化合物，为黄色油状物(13.0g，84％)

中间体K21(ii)：(2R，5S)-2，5-二甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪。

将(2S，5R)-1-苄基-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪(13.0g，45.1mmol)溶解于MeOH(500mL)。将溶液加入到Shaker容器中，所述容器预先加有湿的10％Pd/C。在40psi氢气压力下在振荡器中进行氢化。反应在12小时之后完成。将反应混合物过滤通过硅藻土并将滤液浓缩，得到期望的化合物(9.0g，100％)。1H NMR(300MHz，氯仿-d)d ppm 1.02(d，J＝3.58Hz，3H)，1.04(d，J＝3.39Hz，3H)，1.44-1.54(m，2H)，1.58(dd，J＝8.57，3.67Hz，2H)，1.78-1.98(m，2H)，2.44-2.67(m，2H)，2.73-2.85(m，2H)，2.85-2.94(m，1H)，3.00-3.15(m，1H)，3.25-3.37(m，1H)，3.37-3.49(m，1H)，4.03(dd，J＝6.97，5.46Hz，2H)。

实施例K21：5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌嗪-1-基]羰基}-N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

标题化合物使用与上述实施例K1相似的方法制备。NMR数据参见以下表1。

实施例K22：4-[((2R，5S)-4-{[3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基) 氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-2，5-二甲基哌嗪-1-基)甲基]四氢-2H-吡喃-4-醇

实施例K22使用与上述实施例K1相似的方法制备，不同之处在于使用H8(iii)代替(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪。NMR数据参见以下表1。

实施例K23-K26：

实施例K23和K24使用与上述实施例K1相似的方法制备，不同之处在于分别使用E5(xi)-异构体A和B代替(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪。实施例K25和K26也使用与上述实施例K1相似的方法制备，不同之处在于分别使用E5(xi)-异构体A和B代替(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪并且使用甲醇钠代替乙醇钠。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例L1：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-5-[(4-氟-1-甲基哌啶 -4-基)羰基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

向3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯二盐酸盐(120mg，0.27mmol)在包含二异丙基乙基胺(0.23mL，4eq)的15mL THF中的溶液加入5mL的4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物(128mg，2.6eq)的THF悬浮液。在65℃加热5小时之后，将反应浓缩到干燥并且不经进一步的纯化进行下一步。向3-[(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)氨基]-5-[(4-氟-1-甲基哌啶-4-基)羰基]-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯的甲醇溶液中加入2mL的10％氢氧化钠的甲醇溶液。在真空除去溶剂之后，如上述实施例K1所述纯化残余物。NMR数据参见以下表1。

实施例L2-L4：

实施例L2到L4使用与上述实施例L1相似的方法制备。命名和NMR数据参见以下表1。

实施例L5：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺

中间体L5(i)：1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-甲酸乙基酯。

向4-哌啶甲酸乙酯(ethylisonipecotate)(3.00g，19.1mmol)在THF(20mL)和MeOH(20mL)中的溶液加入3，3，3-三氟丙醛(2.14g，19.1mmol)和AcOH(1.09mL，19.1mmol)，随后加入氰基硼氢化钠(1.20g，19.1mmol)。将反应搅拌10分钟，这时反应用水(15mL)淬灭，然后用NaHCO₃调节为碱性并用EtOAc萃取。有机层用盐水洗涤，干燥并且真空浓缩，得到白色粉末(3.3g，68％)。质谱：C₁₁H₁₉NF₃O₂(M+H)的计算值：254。实测值：254。

中间体L5(ii)：1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-甲酸。

向1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-甲酸乙基酯(3.30g，13.0mmol)在THF(40mL)和MeOH(40mL)中的溶液加入LiOH-H₂O(1.64g，39.1mmol)。将反应搅拌15小时，这时将溶液过滤，以除去未溶解的固体，并将滤液浓缩。所得物质用水(10mL)稀释，用浓盐酸调节为pH 5，然后真空浓缩，得到白色固体(2.9g，150％)。质谱：C₉H₁₅NF₃O₂(M+H)的计算值：226。实测值：226。

中间体L5(iii)：1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-羰基氯化物。

将1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-甲酸(4.40g，20.0mmol)在亚硫酰二氯(20mL)中的悬浮液加热到80℃，保持15小时。将溶液冷却并且真空浓缩，得到棕色泡沫状物(3.0g，68％)。

实施例L5：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[1-(3，3，3-三氟丙基)哌啶-4-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

标题化合物L5使用与上述制备实施例L1相似的方法制备，不同之处在于将4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物替换为中间体L5(iii)。NMR数据参见以下表1。

实施例L6：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基 -5-{[1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

中间体L6(i)：(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-羰基氯化物

中间体L6(i)使用与上述中间体L5相似的方法制备，不同之处在于使用四氢-2H-吡喃-4-甲醛代替3，3，3-三氟丙醛。

实施例L6：N-(2-乙氧基-5-氟嘧啶-4-基)-6，6-二甲基-5-{[1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

标题化合物L6使用与上述L1相似的方法制备，不同之处在于将4-氟-1-甲基哌啶-4-羰基氯化物替换为中间体L6(i)。NMR数据参见以下表1。

实施例M1：N-(4-乙氧基嘧啶-2-基)-6，6-二甲基 -5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并 [3，4-C]吡唑-3-胺

中间体M1(i)：3-[(4-乙氧基嘧啶-2-基)氨基]-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-羰基氯化物。

向-78℃的N-(4-乙氧基嘧啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺盐酸盐(0.300g，1.09mmol)在CH₂Cl₂(15mL)和二异丙基乙胺(0.952mL，5.47mmol)中的溶液在10分钟内滴加含三光气(0.227g，0.766mmol)的CH2Cl2(5mL)。将反应用H₂O(10mL)淬灭，温热到22℃并用NaHCO₃调节到pH 8-9。水层用CH₂Cl₂萃取(2×30mL)并将合并的有机层用盐水洗涤(1×30mL)，用MgSO₄干燥，并且浓缩，得到期望的产物M1(i)，为棕色固体(0.35g，95％)。质谱：C₁₄H₁₈ClN₆O₂(M+H)的计算值：337。实测值：337。

实施例M1：N-(4-乙氧基嘧啶-2-基)-6，6-二甲基-5-{[(2S，5R)-2，4，5-三甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

向M1(i)(0.350g，1.04mmol)的THF(4mL)溶液中加入(2R，5S)-1，2，5-三甲基哌嗪盐酸盐(0.133g，1.04mmol)和DIPEA(0.905mL，5.20mmol)。将溶液在密封管中加热到90℃过夜。将冷却的溶液过滤，以除去未溶解的固体，浓缩并且再溶解于DMSO。通过制备性HPLC得到期望的产物M1，为白色固体(0.030g，6.7％)。NMR数据参见以下表1。

实施例M2：N-(4-乙氧基嘧啶-2-基)-5-{[(2S，5R)-4-(3-甲氧基丙基)-2，5-二甲基哌嗪-1-基]羰基}-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺

实施例M2使用与上述实施例M1相似的方法制备。NMR数据参见以下表1。

实施例N1：5-{[(2S，5R)-2，5-二甲基-4-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪-1-基]羰基}-N-[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺。

中间体N1(i)：3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯。

向3-氨基-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-甲酸叔丁基酯(3.00g，11.6mmol)和4-氯-5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶(2.06g，11.6mmol)的DMSO(8mL)溶液中加入磷酸二氢钾(1.58g，2.3mmol)，随后加入H₃PO₄(0.29g，2.3mmol)。将反应置于90℃油浴中并且加热20小时。将粗的反应冷却到室温，然后倾倒在冰冷却的NaHCO₃(60mL)中并用EtOAc萃取(2×30mL)。合并的有机萃取物用盐水洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。粗的固体与EtOAc研磨，得到标题化合物N1(i)，为白色固体(3.2g，70％)。¹H NMR(300MHz，DMSO-d₆)δppm 1.44(s，9H)，1.59(s，3H)，1.61(s，3H)，3.34(s，3H)，4.29-4.44(m，2H)，4.45-4.64(m，2H)，8.32(d，J＝3.20Hz，1H)，10.25(br.s.，1H)，12.24(br.s.，1H)。质谱：C₁₈H₂₅FN₆O₃(M+H)的计算值：393。实测值：393。

中间体N1(ii)：5-叔丁基1-乙基3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1，5-二甲酸酯。

将N1(i)(2.90g，13.1mmol)在THF(60mL)和DIPEA(2.39g，18.0mmol)中的溶液在冰浴中冷却，然后滴加氯甲酸乙酯(0.89g，8.1mmol)。将反应混合物缓慢温热到室温并且搅拌5小时，然后用水(50mL)淬灭并用EtOAc萃取(2×100mL)。合并的萃取液用盐水(50mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩，得到标题化合物N1(ii)，为黄色泡沫状物(3.3g，96％)。质谱：C₂₁H₂₉FN₆O₅(M+H)的计算值：465。实测值：465。

中间体N1(iii)：3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-羰基氯化物。

向N1(ii)(3.40g，7.3mmol)的二氧杂环己烷(10mL)溶液中加入HCl(20mL，4M，在二氧杂环己烷中)。将反应室温搅拌3小时，然后浓缩并且真空干燥。将3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-5，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-1(4H)-甲酸乙基酯的盐酸盐溶解在CH₂Cl₂(150mL)中。加入DIPEA(4.26g，5.1mmol)并将反应混合物在干冰/丙酮浴中冷却。在CH₂Cl₂(50mL)溶液中滴加三光气(1.52g，32.9mmol)。冷却的反应用水(100mL)淬灭并且温热到室温，然后用CH₂Cl₂萃取(2×100mL)。合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤并且浓缩。粗的物质与乙醚研磨，得到标题化合物N1(iii)，为白色固体(1.55g，50％)。质谱：C₁₇H₂₀FClN₆O₄(M+H)的计算值：427。实测值427。

向密封管加入N1(iii)(420mg，0.98mmol)的THF(10mL)溶液，随后加入DIPEA(445mg，3.4mmol)和(2R，5S)-2，5-二甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪(209mg，0.98mmol)。将反应置于85℃油浴中并且加热16小时。将粗的反应浓缩，然后溶解在MeOH(5mL)和Et₃N(5mL)中，然后搅拌另外的16小时。将粗的反应浓缩，然后溶解在DCM(10mL)和NaHCO3(饱和)(20mL)中并将固体过滤，用CH₂Cl₂(10mL)知水(10mL)漂洗并且干燥，得到标题化合物N1，为白色固体(245mg，47％)。NMR数据参见以下表1。

实施例N2和N3：

实施例N2和N3使用与上述实施例N1相似的方法制备，不同之处在于分别使用E5(xi)-异构体A和B代替(2R，5S)-2，5-二甲基-1-(四氢-2H-吡喃-4-基甲基)哌嗪。命名和NMR数据参见以下表1。

以下表1描述了本发明进一步实施方案的进一步的Kiapp、结构、命名、和NMR数据。除非另作说明，表1中的化合物从市售的材料开始合成或者使用上述实施例的常规修饰通过已知的方法合成。

表1

尽管已经参考具体的实施方案对本发明进行了说明，但是本领域技术人员会认识到，通过常规的实验和实践本发明可以进行改变和修饰。因此，本发明意在不受前述说明书的限制而是由权利要求及其等价物来限定。给出前述的详细说明和实施例只是用于清楚的理解。

Claims

1.式A的化合物或其药学可接受的盐，

其中

A和B独立地为C或N；

每个m独立地为0或1；

条件是在X为N时，R⁶和R⁷不都是H，并且条件是在X为C-R¹¹时，R⁶和R⁷都是H。

2.权利要求1的化合物或其药物可接受的盐、其中R⁹和R¹⁰都是甲基。

3.权利要求1的化合物或其药物可接受的盐、其中X为N，且R⁶和R⁷各自独立地为H或C₁-C₆烷基，但不同时是H。

4.权利要求1的化合物或其药物可接受的盐、其中A为N，B为C。

5.权利要求1的化合物或其药物可接受的盐、其中A为C，B为N。

6.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R⁶和R⁷都是甲基。

7.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R⁶为H，R⁷为甲基。

8.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R⁴为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O--(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a--(R^e)-OR^b；其中所述R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基、3-15元杂环基独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代。

9.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R⁴为甲基。

10.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R¹为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-C(O)R^a、-(R^d)_m-C(O)OR^a、-(R^d)_m-C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-OR^a、-(R^d)_m-OC(O)R^a、-(R^d)_m-OC(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-O-S(O)R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂R^a、-(R^d)_m-OS(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-OS(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-NO₂、-(R^d)_m-NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)R^b、-(R^d)_m-N(R^a)C(O)OR^b、-(R^d)_m-N(R^c)C(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)₂R^b、-(R^d)_m-N(R^a)S(O)R^b、-(R^d)_m-SR^a、-(R^d)_m-S(O)R^a、-(R^d)_m-S(O)₂R^a、-(R^d)_m-S(O)NR^aR^b、-(R^d)_m-S(O)₂NR^aR^b、-(R^d)_m-O-(R^e)_m-NR^aR^b或-(R^d)_m-NR^a--(R^e)-OR^b；其中所述-R^a、R^b、R^c、R^d、R^e、C₃-C₁₂环烷基、芳基，所述3-15元杂环基独立地任选地进一步被0-3个R¹²基团取代。

11.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R¹为-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、或-(R^d)_m-NR^aR^b。

12.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中R⁸为R^a-O-R^b、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基、C₂-C₈炔基、-(R^d)_m-(C₃-C₁₂环烷基)、-(R^d)_m-苯基、-(R^d)_m-(3-15元杂环基)、-(R^d)_m-(C₁-C₆全氟烷基)、-(R^d)_m-卤素、-(R^d)_m-CN、-(R^d)_m-OR^a或-(R^d)_m-NR^aR^b。

13.前述权利要求中任一项的化合物或其药物可接受的盐，其中每个R^d和R^e独立地为-(C₁-C₃亚烷基)。

14.式B的化合物或其药学可接受的盐，

其中

A和B独立地为C或N；

每个m独立地为0或1。

15.权利要求14的化合物或其药学可接受的盐，其中A为N和B为C。

16.权利要求14或15的化合物或其药学可接受的盐，其中R⁹和R¹⁰都是甲基。

17.权利要求14、15、或16中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R⁴是-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、C₂-C₈烯基或C₂-C₈炔基。

18.权利要求14、15、16或17中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R⁴为甲基。

19.权利要求14、15、16、17或18中任一项的化合物或其药学可接受的盐，其中R¹为-(R^d)_m-OR^a、C₁-C₈烷基、或-(R^d)_m-NR^aR^b.

20.权利要求中任一项的14、15、16、17、18或19的化合物或其药学可接受的盐，其中每个R^d和R^e独立地为-(C₁-C₃亚烷基)-。

21.选自以下组的化合物：

5-{[(3S，8aS)-3，8a-二甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-(3-氟-6-甲基吡啶-2-基)-6，6-二甲基-5-{[(3S，8aS)-3-甲基六氢吡咯并[1，2-a]吡嗪-2(1H)-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

N-[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]-6，6-二甲基-5-{[(2S)-2，4，5，5-四甲基哌嗪-1-基]羰基}-1，4，5，6-四氢吡咯并[3，4-C]吡唑-3-胺，

2-((5S)-4-{[3-{[5-氟-2-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基]氨基}-6，6-二甲基-4，6-二氢吡咯并[3，4-C]吡唑-5(1H)-基]羰基}-1，5-二甲基哌嗪-2-基)乙醇；

或其药学可接受的盐。

22.药物组合物，包括有效量的前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐、和药学可接受的载体。

23.治疗糖尿病及其并发症、癌症、缺血、炎症、中枢神经系统病症、心血管疾病、阿尔茨海默氏病和皮肤病压力、病毒病、炎性病症、或其中肝脏为靶器官的疾病的方法，所述方法包括对哺乳动物给予有效量的前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐。

24.治疗糖尿病及其并发症的方法，所述方法包括对哺乳动物给予有效量的前述权利要求中任一项的化合物或其药学可接受的盐。

25.权利要求24的方法，其中所述并发症包括糖尿病性视网膜病、肾病和神经病。