CN101643647B - CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于半导体和生物标记技术领域，具体涉及荧光探针的制备方法。本发明采用表面修饰技术，以盐酸多柔比星与纯化后的橙红色CdTe溶液混合，调节体系的pH值，在氮气的保护下，加热，冷凝回流制得CdTe-盐酸多柔比星荧光探针。该荧光探针在紫外灯照射下可得到很强的荧光，通过光谱分析，发现CdTe-盐酸多柔比星探针具有良好的荧光特性。CdTe-盐酸多柔比星探针与多肽存在着较强的相互作用，并已经成功地用于肝癌细胞的标记。本发明具有材料合成方法简单，组成易于控制，成本相对低廉，得到的量子点探针荧光特性好等优点。

Description

CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法
技术领域
本发明属于半导体和生物标记技术领域，具体涉及荧光探针的制备方法。
背景技术
由于生物体系的特殊性和复杂性，为了能测定更多的生物活性物质，对激光激发生物荧光探针有很高的要求。目前，应用最为普遍的荧光探针是有机染料，但是，它们的激发光谱都较窄，所以很难同时激发多种组分；而其荧光发射光谱又较宽，并且分布不对称，因此要同时检测多种组分较为困难。有机染料最严重的缺陷还有光化学稳定性差，光漂白与光解使每个染料探针能够发出的荧光光子平均数量不可能太多，光解产物又往往会对生物体产生杀伤作用。利用半导体量子点作为生物荧光探针就能较好的解决这些问题。首先与传统的有机染料荧光探针相比，量子点的激发光谱宽，且连续分布，这使得单个波长的光可同时激发所有的量子点。在生物材料荧光标记领域中的主要优点是可以使用同一激发光源同时进行多通道的检测。其次，量子点的发射波长可通过控制它的大小和组成来“调谐”，因而可获得多种可分辨的颜色。如：紫外-蓝光(ZnS，ZnSe)；可见光(CdS，CdSe，CdTe)；近红外光(CdS/HgS/CdS，InP，InAs)。第三，量子点发射光谱呈对称分布且宽度窄，半高峰宽(Full Widths HalfMax，FWHM)常常只有40nm或更小。这样就允许同时使用不同光谱特征的量子点，而发射光谱不出现交叠，或只出现很少交叠，使所标记的生物分子的荧光光谱易于区分和识别。第四，与有机荧光染料相比，量子点具有较好的光稳定性，不易被光解或漂白，荧光光谱几乎不受周围环境(如溶剂、pH值、温度等)的影响，它可以经受反复多次激发，而不像有机荧光分子那样容易发生荧光漂白，量子点的发光寿命比普通荧光标记染料的寿命长1-2个数量级，量子点的荧光强度是罗丹明6G(R6G)的20倍，稳定性是它的100倍，光谱线宽只有其三分之一。最后，量子点具有很好的生物相容性，而有机荧光染料则不具有这种优越性。量子点优良的荧光性质使得它在生物荧光探针标记、荧光能量转移等许多生物医学研究领域有着广泛的应用前景。但是目前研究主要致力于生物标记上，具有双功能作用(标记和治疗)量子点探针还未见报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法。
本发明的具体步骤如下：
1.原料的制备：
将0.06g的碲粉、0.06gNaBH4和0.5mL去离子蒸馏水加入氮气饱和了的反应瓶里，用磁子搅拌器进行搅拌。约过30分钟，溶液为白色絮状，用去离子蒸馏水将其稀释至50mL，得到0.01mol·L-1NaHTe溶液。
另取0.03gCdCl2.2.5H2O，21μL TGA，100mL去离子蒸馏水置于三角烧瓶中，用稀的NaOH溶液将其pH值调至9.0，然后边搅拌边通入N2(约0.5h)，用注射器注入2.5mL已经制备好的NaHTe溶液，在100℃的条件下回流1h和12h。
用异丙醇纯化CdTe原溶液，再离心、分离，再稀释到所需浓度。
2.所需设备：
三颈圆底烧瓶，电热套，氮气
3.合成步骤：
取0.0007g-0.0014g盐酸多柔比星溶于20.0-30.0mL二次蒸馏水中，以CdTe/盐酸多柔比星摩尔比为3/1-8/1，与纯化后的橙红色CdTe溶液混合，调节体系的pH值为中性，在氮气的保护下，将反应体系加热到40-80℃，冷凝回流20min-40min，即得CdTe-盐酸多柔比星荧光探针。以上原料配比可按比例放大。
本发明采用表面修饰技术，得到新型量子点荧光探针，在紫外灯照射下可得到很强的荧光，通过光谱分析，发现CdTe-盐酸多柔比星探针具有良好的荧光特性。研究发现，采用本发明制备的CdTe-盐酸多柔比星探针与多肽存在着较强的相互作用，并已经成功地用于肝癌细胞的标记。
本发明具有材料合成方法简单，组成易于控制，成本相对低廉，得到的量子点探针荧光特性好等优点。
附图说明
图1为CdTe-盐酸多柔比星探针的荧光光谱图
图2为CdTe量子点与CdTe-盐酸多柔比星探针在紫外灯下的照片
图3为CdTe-盐酸多柔比星探针的电镜照片
图4为CdTe-盐酸多柔比星探针标记肝癌细胞照片
具体实施方式
合成实例1：
取0.0014g的盐酸多柔比星溶于20mL二次水中，加入6mL用NaHTe还原CdCl2制备得到并经异丙醇纯化后的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到40℃，冷凝回流20min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。
合成实例2：
取0.0008g的盐酸多柔比星溶于30mL二次水中，加入9mL按上述实例1方法制得的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到80℃，冷凝回流40min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。
合成实例3：
取0.0007g的盐酸多柔比星溶于24mL二次水中，加入6mL按上述实例1方法制得的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到40℃，冷凝回流20min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。
合成实例4：
取0.0007g的盐酸多柔比星溶于24mL二次水中，加入6mL按上述实例1方法制得的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到60℃，冷凝回流20min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。
合成实例5：
取0.0007g的盐酸多柔比星溶于24mL二次水中，加入6mL按上述实例1方法制得的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到60℃，冷凝回流40min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。
合成实例6：
取0.0014g的盐酸多柔比星溶于24mL二次水中，加入6mL按上述实例1方法制得的CdTe溶液，调节pH为中性。在氮气的保护下，将反应体系加热到50℃，冷凝回流30min，即得CdTe-盐酸多柔比星探针。

Claims (1)

1.CdTe-盐酸多柔比星荧光探针的制备方法，其特征是具体步骤如下：
取0.0007g-0.0014g盐酸多柔比星溶于20.0-30.0mL二次蒸馏水中，以CdTe/盐酸多柔比星摩尔比为3/1-8/1，与纯化后的橙红色CdTe溶液混合，调节体系的pH值为中性，在氮气的保护下，将反应体系加热到40-80℃，冷凝回流20min-40min，即得CdTe-盐酸多柔比星荧光探针。
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