CN101637146A

CN101637146A - Oletf大鼠空腹血糖升高模型的制备方法

Info

Publication number: CN101637146A
Application number: CN200910306270A
Authority: CN
Inventors: 田凤石; 雒荣; 赵紫琴; 姚瑞栋; 郑喜兰
Original assignee: TIANJIN PUBLIC SECURITY HOSPITAL
Current assignee: TIANJIN PUBLIC SECURITY HOSPITAL
Priority date: 2009-08-28
Filing date: 2009-08-28
Publication date: 2010-02-03

Abstract

本发明公开了一种OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法，属于动物学的医学用模型，或专用于特定动物的饲料。本发明于OLETF鼠于6－8周龄开始喂养高脂饲料，所述的高脂饲料是按以下重量百分比的原料组成的，60－65％标准饲料，10－12％蛋黄粉、10－12％猪油、8－12％无糖全脂奶粉、2－4％蔗糖、水1－2％。这样喂养的OLETF鼠更加模拟人类2型糖尿病的发病过程，更加有利于对2型糖尿病的研究，同时，本发明还缩短了OLETF大鼠发展成为糖尿病的时间，加速造模，节省实验时间周期，降低试验成本。

Description

OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法

技术领域

本发明涉及动物学的医学用模型，或专用于特定动物的饲料，具体是一种OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法。

背景技术

糖尿病动物模型主要分为三类：自发遗传性动物模型、实验性动物模型、转基因动物模型。

1、自发性2型糖尿病动物模型：自发性糖尿病是指动物未经过任何有意识的人工处置，在自然情况下发生的DM。OLETF大鼠就是其中一种，但其自然病程较长。

2、实验性2型糖尿病动物模型：

(1)特殊膳食诱导，即高脂饮食。

(2)链脲菌素(streptozocin，STZ)诱导。

(3)STZ/四氧嘧啶加膳食诱导的模型(STZ and diet induced diabetes)：给予实验动物少量STZ，破坏一部分胰岛β细胞功能，同时饲以高脂肪饲料。

3、基因敲除复制2型糖尿病模型：研究者按照自己的意愿，借助于实验手段来控制实验动物的特定基因组分及其表达等，而使动物表现特有的遗传性状。

现在实验室多采用喂养+药物诱发型(如链脲佐菌素，STZ)联合居多。药物诱导虽具有发病率高、造模时间短、病情严重程度较统一等特点，但由于对胰腺的破坏，故并不能完全模拟大多数自然人群的早期代谢异常状态。

OLETF(Otskua Long-Evnas Tokushima Fatty)大鼠是1982年日本大家公司从加拿大购进Long一Evnas大鼠进行远交系杂交，选择体重＞400g的雄性子代与体重大致正常的9一10周雌性子代交配，经过20代的传代筛选，于1984年成功建立的一种自发性2型糖尿病鼠种。其胆囊收缩素(CCK)-A受体mRNA的表达完全缺失，携带的ODB1和ODB2基因与糖尿病的发病有关。多食、少动、肥胖和出现糖尿病的临床表现为主要特征。文献报道？，OLETF自8周龄起餐后血糖明显高于对照，但空腹血糖升高始终不很明显。OLETF大鼠早期胰腺胰岛素分泌功能与对照组无差异，12周龄发生胰岛细胞功能损坏。24周龄时血浆胰岛素代偿性增加，40周龄后胰岛分泌功能降低。同时血脂水平也明显升高。尿蛋白自30周龄起明显增多，且随年龄增加而加重。65周以后，血糖值高达25mmol/L，而免疫反应性胰岛素(IRI)水平却低于40pmol/L。该模型早期以胰岛素抵抗以及糖脂代谢紊乱为主，以后随着病程发展，逐渐出现胰腺功能减退，合并出现糖尿病肾脏病变，其不同阶段的病理生理变化，与临床2型糖尿病患者的病理表现极为相似。

高脂饮食是2型糖尿病及胰岛素抵抗综合征发病的重要环境因素。高脂喂养非遗传性2型糖尿病大鼠本身可诱发大鼠胰岛素抵抗。自发性2型糖尿病大鼠OLETF由于其饲养时间长限制了其在试验中的使用。

中国专利101095958公开了一种“2型糖尿病大鼠模型的制备方法”，其其是先用链脲佐菌素造成新生鼠胰岛β细胞对糖反应性降低，对断乳大鼠再次小剂量注射链脲佐菌素，造成胰岛轻度损伤，同时给予高糖高脂饮食诱导，使产生胰岛素抵抗，得到2型糖尿病大鼠模型。采用本发明方法制备的大鼠模型具有高空腹血糖、高胰岛素血症、糖耐量低减、胰岛素抵抗等2型糖尿病的典型症状，是理想的2型糖尿病大鼠模型，并且缩短了造模时间，模型成功率高。

发明内容

本发明就是为了解决OLETF大鼠造模时间长、饲养时间长的问题，而提供一种加速造模的OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法。

本发明是按照以下技术方案实现的。

一种OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法，其特征在于OLETF鼠于6-8周龄开始喂养高脂饲料，所述的高脂饲料是按以下重量百分比的原料组成的，60-65％标准饲料，10-12％蛋黄粉、10-12％猪油、8-12％无糖全脂奶粉、2-4％蔗糖、1-2％水；

所述OLETF大鼠于8周龄开始喂养高脂饲料，所述高脂饲料是按以下重量百分比的原料组成的，60％标准饲料，10％蛋黄粉、12％猪油、12％无糖全脂奶粉、4％蔗糖、2％水。

这样设计的本发明使高脂饮食的环境因素和遗传性相结合，使OLETF大鼠造模更加模拟人类2型糖尿病的发病过程，更加有利于研究人员对2型糖尿病的研究；与此同时本发明还缩短了OLETF大鼠发展成为糖尿病的时间，加速造模，节省实验时间周期，降低试验成本。

具体实施方式

一、依据

根据胰腺的病理改变可将OLETF大鼠的病程分为三个阶段。

早期：6-20周，此阶段胰腺结构及功能基本正常。

胰腺增生期：20-40周，此阶段胰岛出现纤维化，并且纤维化逐渐加重。由于胰岛被纤维组织分割或完全替代，此阶段开始出现胰岛的增生。

晚期：40周以后胰岛被结缔组织取代更为严重。

因此本方法决定于8周时给大鼠以高脂饲料。

一、喂养时间

本发明自8周开始以一种高脂饲料喂养OLETF大鼠，

二、喂养饲料

所述高脂饲料是采用600g标准饲料，100g蛋黄粉、120g猪油、120g无糖全脂奶粉、40g蔗糖、20ml水混合均匀，揉挤成面团状。即食即做；或依据饲养情况，制作后-4℃保存。由于含脂肪较高，故呈软料状态，而非常规饲料的硬质状态。

这样制成的高脂饲料中脂肪含量21％，这21％的脂肪几乎都来自猪油，其主要成分为饱和脂肪酸。

所述标准饲料的组分及其配比采用的是：玉米粉34％、大麦粉30％、麸皮18％、豆粕12％、骨粉4％、酵母1％、植物油0.5％、盐0.5％。

标准饲料的营养素热量组成比例为脂肪10％、蛋白22％、碳水化合物68％。

四、结果

空腹血糖诊断标准：空腹血糖＞11.1mmol/L。

按照上述方法制备的高脂饲料喂养OLETF大鼠，至40周时已有50％的大鼠空腹血糖升高达到糖尿病的诊断标准，44周时已有60％大鼠达到诊断标准，参见表1-2。

2、葡萄糖耐量降低(IGT)诊断标准：血糖峰值＞16.8mmol/L，或120分钟血＞11.2mmol/L。

喂养上述高脂饲料48周时80％的OLETF大鼠已发展为葡萄糖耐量降低，

血糖峰值＞16.8mmol/L，或120分钟血糖＞11.2mmol/L。参见表3-4。

表1糖尿病累计发病率

表2不同周龄空腹血糖比较

表3不同周龄OGTT实验(mmol/L)

(OGTT：葡萄糖负荷后血浆葡萄糖水平)

表4糖耐量减低发生率

Claims

1.一种OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法，其特征在于OLETF大鼠于6-8周龄开始喂养高脂饲料，所述的高脂饲料是按以下重量百分比的原料组成的，60-65％标准饲料，10-12％蛋黄粉、10-12％猪油、8-12％无糖全脂奶粉、2-4％蔗糖、1-2％水。

2.根据权利要求1所述OLETF大鼠空腹血糖升高模型的制备方法，其特征在于OLETF大鼠于8周龄开始喂养高脂饲料，高脂饲料是按以下重量百分比的原料组成的，60％标准饲料，10％蛋黄粉、12％猪油、12％无糖全脂奶粉、4％蔗糖、2％水。