CN101628912A - 一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 - Google Patents
一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101628912A CN101628912A CN200910012277A CN200910012277A CN101628912A CN 101628912 A CN101628912 A CN 101628912A CN 200910012277 A CN200910012277 A CN 200910012277A CN 200910012277 A CN200910012277 A CN 200910012277A CN 101628912 A CN101628912 A CN 101628912A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- compound
- holes
- heterocyclic structure
- tumor
- triazole
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用,属于药物化学技术领域。该类含三氮唑杂环结构的化合物是在萘酰亚胺母体结构上经过氨基缩合、溴代、叠氮取代、链接反应等反应方式以侧链形式引入五元1,2,3-三氮唑环。该类含三氮唑杂环结构的化合物对肿瘤细胞增殖抑制的实验,是选用四氮唑盐还原法对7721肝癌细胞进行试验,还选用磺酰罗丹明B蛋白染色法对MCF-7乳腺癌细胞进行试验。结果表明具有广泛的抗肿瘤活性,对肝癌、乳腺癌等不同组织来源的肿瘤细胞的正常生长具有较好的抑制作用。
Description
技术领域
本发明涉及一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用,属于药物化学技术领域。
背景技术
在芳环上引入含氮杂原子取代基的萘酰亚胺类化合物具有良好的抗癌活性,其中活性最好的amonafide(N-(β-二甲基氨基乙基)-3-胺基-1,8-萘酰亚胺)(Malviya V K,Liu P Y,Alberts D S,et al.Am.J.Clin.Oncol.,1992,15:41-44.)和mitonafide(N-(β-二甲基氨基乙基)-3-硝基-1,8-萘酰亚胺)(Brana M.F,Santos A.,Roldan C.M.,et al.Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther.,1981,16,207-212)已经进入二期临床试验。该类化合物能够有效地抑制肿瘤细胞的生长,其作用机理是嵌插入DNA的碱基对之间,抑制DNA和RNA的合成,并能够抑制拓扑异构酶II,从而达到抑制肿瘤的目的。但是,在mitonafide的对人临床试验中,发现它有非常严重的中枢神经系统(CNS)毒性,并且其临床活性有限;amonafide在临床试验中的表现也不尽如人意,引起骨髓抑制、呕吐、皮疹以及中等程度的静脉炎等副作用。
三唑类化合物可以作为芳香化酶抑制剂、血管生成抑制剂、酶抑制剂等发挥抗癌作用,现用于临床的Anastrozole、Letrozole和Vorozole是第三代芳香化酶抑制剂,具有高效、可逆、专一等特点,但其长期使用存在骨质丢失和骨质疏松的风险。
发明内容
为了克服现有技术中存在的问题,本发明提供一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用。其目的是在萘酰亚胺芳环上或侧链上引入具有良好生物活性的三氮唑类基团,改善分子的生物学活性,从而提高其抗肿瘤性能。一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物是在萘酰亚胺母体上以侧链的方式引入五元三氮唑环,设计合成对体外肿瘤细胞生长具有抑制能力的一类含有1,2,3-三氮唑环类萘酰亚胺化合物。
本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是:一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物,其化学分子结构通式如下:
通式(A)中:
(1)当时,R2=吗啉、硫代吗啉、六氢吡啶、吡咯烷、哌嗪或甲基哌嗪;R3=H;R4=H或苯环,n=2~6;
上述的抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物(1)的合成路线如下:
即以4-溴-1,8萘酐(a)为起始原料,与相应的仲胺在乙二醇单甲醚中反应得式(b)化合物;由式(b)化合物与相应的醇胺在无水乙醇中反应得式(c)化合物;将式(c)化合物与PBr3在乙酸乙酯中反应得式(d)化合物;式(d)化合物与NaN3在DMF中反应得到式(e)化合物;式(e)化合物通过“链接”化学即在CuSO4和抗坏血酸钠存在下,于溶剂叔丁醇和水中加入苯乙炔或通入乙炔气得到目标化合物(f)。
上述的抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物(2)的合成路线如下:
即以4-溴-1,8萘酐(a)为起始原料,与相应的胺在无水乙醇中反应得式(g)化合物;由式(g)化合物与相应的醇胺在乙二醇单甲醚中反应得式(h)化合物;由式(h)化合物与PBr3在乙酸乙酯中反应得式(i)化合物;由式(i)化合物与NaN3在DMF中反应得式(j)化合物;式(j)化合物通过链接化学,即在CuSO4和抗坏血酸钠存在下,于溶剂叔丁醇和水中加入苯乙炔或通入乙炔气得到目标化合物(k)。
用上述合成的含三氮唑杂环化合物分别用四氮唑盐还原法或磺酰罗丹明B蛋白染色法对7721肝癌细胞、MCF-7乳腺癌细胞进行体外抑制肿瘤细胞生长活性的测定,结果表明,该类化合物对肝癌、乳腺癌等多种不同组织来源的细胞具有抑制生长肿瘤活性。
把所述含三氮唑杂环结构的化合物配制成具有不同浓度的药液,用四氮唑盐还原法对7721肝癌细胞进行试验,方法是按不同肿瘤生长速度,将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞以90μL/孔接种于96孔微量培养板内,培养24h后加入配制好的药液10μL/孔,对每个细胞株,每个浓度均为三个复孔。另设无细胞凋零孔、如果配制好的药液有颜色要做相应药液浓度无细胞凋零孔。肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养48h后,加MTT液5mg/mL用生理盐水配制20L/孔;继续培养4h后,加入由10%SDS、5%异丁醇、0.01mol/L HCl组成的三联液50μL/孔,于CO2培养箱中过夜。然后用酶标仪测OD570值。按下列公式计算所述含三氮唑杂环结构的化合物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(对照组OD值-治疗组OD值)/对照组OD值×100%。
把所述含三氮唑杂环结构的化合物配制成具有不同浓度的药液,用磺酰罗丹明B蛋白染色法对MCF-7乳腺癌细胞进行试验,方法是将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞以90μL/孔接种于96孔培养板,贴壁生长24h,再加入配制好的药液10μL/孔。每个浓度设三复孔。并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞凋零孔。肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养72小时,然后倾去培养液,用10%冷TCA固定细胞,4℃放置1h后用蒸馏水洗涤5次,空气中自然干燥。然后加入由1%冰醋酸配制的SRB 4mg/mL溶液100μL/孔,室温中染色15min,去上清液,用1%醋酸洗涤5次,空气干燥。最后加入150μL/孔的Tris溶液,酶标仪520nm波长下测定A值。按下列公式计算所述含三氮唑杂环结构的化合物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(A540对照孔-A540给药孔)/A540对照孔×100%。
本发明的有益效果是:所述含三氮唑杂环结构的化合物对肝癌、乳腺癌等具有明显的抑制肿瘤生长活性,其中带有吗啉基、硫代吗啉基的化合物与其他分子相比表现出更强的抗肿瘤活性,特别是带有硫代吗啉基的化合物在浓度为10μM时对7721细胞抑制率高达100%,其他化合物在此浓度下对7721肝癌细胞的抑制率也均高于85%。同时,该类化合物对7721肝癌肿瘤抑制活性均明显高于MCF-7乳腺癌细胞,表现出良好的选择性。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明作进一步的说明。
实施例1
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三唑)-丙基]-4-吗啉基-1,8-萘酰亚胺(化合物1)的合成:
(1)2.77克4-溴-1,8萘酐(0.01摩尔),加入20ml乙二醇单甲醚中,再向其加入2.6ml吗啉。升温,回流,薄板层析跟踪反应,直至反应完全,静置一夜,过滤,称量固体为2.16克,产率76.5%。
(2)取2克由步骤(1)合成的产物,加入30毫升无水乙醇中,再向其加入0.69克正丙醇胺(0.7ml)。升温,回流,薄板层析跟踪反应,直至反应完全,静置,过滤,得2.0克黄色固体。
(3)取1.5克由步骤(2)合成的产物,加入15ml乙酸乙酯中,室温条件下于20min内缓慢滴入0.8mlPBr3,升温至70~75℃下回流2小时,静置,将反应液倾入冰水中,过滤,洗涤,烘干,得1.24克黄色固体。
(4)取1克由步骤(3)合成的化合物,加入15mlDMF中,再向其加入0.19克NaN3,60℃下反应2小时,静置,将反应液倾入冰水中,过滤,洗涤,烘干,得0.77克黄色固体。
(5)在100ml单口瓶中,加入0.76g(2.0mmol)步骤(4)合成的化合物,0.20g(2.0mmol)苯乙炔以及5t-BuOH和5ml水混合液,再加入44mg(0.2mmol)抗坏血酸钠和5mg(0.02mmol)CuSO4·5H2O在室温下反应8小时,TLC跟踪反应至完全,将反应液倒入50ml冰水中,析出黄色沉淀,静置,过滤,洗涤,烘干的黄色固体0.86g,产率92.3%。
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.46(m,2H),3.26(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),4.02(t,J1=4.4Hz,J2=4Hz,4H),4.32(t,J1=6.8Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=7.2Hz,J2=6.8Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,1H),7.32(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.4(t,J1=7.2Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.4Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),8.04(s,1H),8.42(d,J=8.4Hz,1H),8.53(d,J=8.0Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C27H25N5O3,计算值:467.1957,实测值:467.1963。
实施例2
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三氮唑)-丙基]-4-硫代吗啉-1,8-萘酰亚胺(化合物2)的合成:
除用硫代吗啉替代吗啉环外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物2
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.46(m,2H),2.97(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),3.50(t,J1=4.4Hz,J2=4.0Hz,4H),4.31(t,J1=6.4Hz,J2=6.8Hz,2H),4.54(t,J1=6.8Hz,J2=7.2Hz,2H),7.22(d,J=8.0Hz,1H),7.32(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.42(t,J1=7.6Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.0Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=8.0Hz,2H),8.04(s,1H),8.36(d,J=8.4Hz,1H),8.51(d,J=8.0Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C27H25N5O2S,计算值:483.1729,实测值:483.1728。
实施例3
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三唑)-丙基]-4-六氢吡啶-1,8-萘酰亚胺(化合物3)的合成:
除用六氢吡啶替代吗啉环外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物3
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):1.89(m,4H),2.45(m,2H),3.24(t,J1=4.0Hz,J2=4.4Hz,4H),3.73(m,2H),4.31(t,J1=6.4Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=7.2Hz,J2=6.8Hz,2H),7.17(d,J=8.4Hz,1H),7.32(t,J1=7.2Hz,J2=7.2Hz,1H),7.42(t,J1=7.6Hz,J2=7.2Hz,2H),7.68(t,J1=8.0Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=8.0Hz,2H),8.04(s,1H),8.39(d,J=8.4Hz,1H),8.49(d,J=8.4Hz,1H),8.58(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C28H27N5O2,计算值:465.2165,实测值:465.2162。
实施例4
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三氮唑)-丙基]-4-吡咯烷基-1,8-萘酰亚胺(化合物4)的合成:
除用吡咯烷替代吗啉环外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物4
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.11(m,4H),2.45(m,2H),3.75(m,4H),4.32(t,J1=6.4Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=6.8Hz,J2=6.8Hz,2H),6.81(d,J=8.4Hz,1H),7.32(t,J1=7.6Hz,J2=7.2Hz,1H),7.40(t,J1=7.2Hz,J2=7.6Hz,2H),7.54(t,J1=8.4Hz,J2=7.6Hz,1H),7.81(d,J=7.6Hz,2H),8.08(s,1H),8.42(d,J=8.4Hz,1H),8.57(d,J=7.6Hz,1H),8.60(d,J=9.6Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C27H25N5O2,计算值:451.2008,实测值:451.2001。
实施例5
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三氮唑)-丙基]-4-甲基哌嗪-1,8-萘酰亚胺(化合物5)的合成:
除用甲基哌嗪替代吗啉环外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物5
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.46(m,2H),2.58(s,3H),3.26(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),4.01(t,J1=4.4Hz,J2=4Hz,4H),4.32(t,J1=6.8Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=7.2Hz,J2=6.8Hz,2H),7.22(d,J=8Hz,1H),7.31(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.42(t,J1=7.2Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.4Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),8.04(s,1H),8.42(d,J=8.4Hz,1H),8.53(d,J=8.0Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C28H28N6O2,计算值:480.2274,实测值:480.2267
实施例6
N-[3’-(4-苯基-[1,2,3]-三氮唑)-丙基]-4-哌嗪-1,8-萘酰亚胺(化合物6)的合成:
除用哌嗪环替代吗啉环外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物6
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.32(m,1H),2.46(m,2H),3.26(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),4.02(t,J1=4.4Hz,J2=4Hz,4H),4.32(t,J1=6.8Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=7.2Hz,J2=6.8Hz,2H),7.22(d,J=8Hz,1H),7.32(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.40(t,J1=7.2Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.4Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),8.04(s,1H),8.42(d,J=8.4Hz,1H),8.53(d,J=8.0Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C26H26N6O2,计算值:466.2117,实测值:466.2128。
实施例7
N-[2-4′-苯基-([1,2,3]-三氮唑)-丙基]-6-吗啉-萘酰亚胺(化合物7)的合成:
除用乙醇胺代替正丙醇胺外,其他合成及提纯方法同实施例1,得目标化合物7
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):3.20(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),4.03(t,J1=4.4Hz,J2=4Hz,4H),4.32(t,J1=6.8Hz,J2=6.4Hz,2H),4.54(t,J1=7.2Hz,J2=6.8Hz,2H),7.22(d,J=8Hz,1H),7.32(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.4(t,J1=7.2Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.4Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=7.6Hz,2H),8.04(s,1H),8.42(d,J=8.4Hz,1H),8.53(d,J=8Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C26H23N5O3,计算值:467.1801,实测值:467.1811。
实施例8
N-[2-4′-苯基-([1,2,3]-三氮唑)-丙基]-6-硫代吗啉-萘酰亚胺(化合物8)的合成:
除用乙醇胺代替正丙醇胺外,其他合成及提纯方法同实施例2,得目标化合物8
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):2.97(t,J1=4Hz,J2=4.4Hz,4H),3.50(t,J1=4.4Hz,J2=4Hz,4H),4.30(t,J1=6.4Hz,J2=6.8Hz,2H),4.53(t,J1=6.8Hz,J2=7.2Hz,2H),7.22(d,J=8Hz,1H),7.32(t,J1=6.8Hz,J2=7.6Hz,1H),7.4(t,J1=7.6Hz,J2=7.6Hz,2H),7.71(t,J1=8.0Hz,J2=7.6Hz,1H),7.80(d,J=8.0Hz,2H),8.04(s,1H),8.36(d,J=8.4Hz,1H),8.51(d,J=8Hz,1H),8.59(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C26H23N5O2S,计算值:469.1572,实测值:469.1574。
实施例9
N-正丁基-6-[4′-苯基-([1,2,3]-三氮唑)]-乙胺基-萘酰亚胺(化合物9)的合成:
(1)2.77克4-溴-1,8萘酐(0.01摩尔),加入无水乙醇中,再向其加入1.26ml正丁胺。升温,回流,薄板层析跟踪反应,直至反应完全,过滤,称量固体为2.8克,所得固体抽干放置,产率为85%。
(2)2.55克由步骤(1)合成的产物,加入30ml乙二醇单甲醚中,再向其加入6ml乙醇胺及0.19克CuSO4·5H2O,升温,回流,薄板层析跟踪反应,直至反应完全,过滤,称量固体为1.68克。产率70%。
(3)1.49克由步骤(2)合成的产物,加入10ml乙酸乙酯中,室温条件下于20min内缓慢滴入1mlPBr3,升温至70~75℃下回流2小时,静置,将反应液倾入冰水中,过滤,洗涤,烘干,得1.25克黄色固体。
(4)取1.149克由步骤(3)合成的化合物,加入15mlDMF中,再向其加入0.597克NaN3,60℃下反应4小时,静置,将反应液倾入冰水中,过滤,洗涤,烘干,得0.79克黄色固体。
(5)在15ml单口瓶中,加入0.78g(2.31mmol)步骤(4)合成的化合物,0.23g(2.31mmol)苯乙炔以及5t-BuOH和5ml水混合液,再加入44mg(0.23mmol)抗坏血酸钠和5mg(0.02mmol)CuSO4·5H2O在室温下反应8小时,TLC跟踪反应至完全,将反应液倒入50ml冰水中,析出黄色沉淀,静置,过滤,洗涤,烘干的黄色固体0.93g,产率92.3%。
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):0.96(t,J1=7.2Hz,J2=7.2Hz,3H),1.70(m,2H),2.70(m,2H),4.00(t,J1=4.4Hz,J2=4.4Hz,2H),4.15(t,J1=8Hz,J2=7.2Hz,2H),4.31(t,J1=6.4Hz,J2=6.4Hz,1H),4.84(t,J1=4.4Hz,J2=4.4Hz,2H),6.76(d,J=8.4Hz,1H),7.35(t,J1=7.2Hz,J2=7.2Hz,1H),7.42(t,J1=7.6Hz,J2=7.2Hz,2H),7.65(t,J1=8.0Hz,J2=7.6Hz,1H),7.78(d,J=7.2Hz,2H),7.82(s,1H),8.16(d,J=8.4Hz,1H),8.48(d,J=8.4Hz,1H),8.58(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C26H25N5O2,计算值:439.2008,实测值:439.2010
实施例10
N-正丙基-6-[4′-苯基-([1,2,3]-三氮唑)]-乙胺基-萘酰亚胺(化合物10)的合成:
除用正丙胺替代正丁胺外,其他合成及提纯方法同实施例9,得目标化合物10
1HNMR(d6-CDCl3,400MHz):δ(ppm):0.96(t,J1=7.2Hz,J2=7.2Hz,3H),1.70(m,2H),4.00(t,J1=4.4Hz,J2=4.4Hz,2H),4.15(t,J1=8Hz,J2=7.2Hz,2H),4.31(t,J1=6.4Hz,J2=6.4Hz,1H),4.84(t,J1=4.4Hz,J2=4.4Hz,2H),6.76(d,J=8.4Hz,1H),7.35(t,J1=7.2Hz,J2=7.2Hz,1H),7.42(t,J1=7.6Hz,J2=7.2Hz,2H),7.65(t,J1=8.0Hz,J2=7.6Hz,1H),7.78(d,J=7.2Hz,2H),7.82(s,1H),8.16(d,J=8.4Hz,1H),8.48(d,J=8.4Hz,1H),8.58(d,J=7.2Hz,1H)。
HR-MS(m/z):C25H23N5O2,计算值:425.1852,实测值:425.1863
实施例11
体外抑制肿瘤细胞生长活性测定:
用四氮唑盐(microculture tetrozolium,MTT)还原法对7721肝癌细胞进行体外抑制肿瘤细胞生长活性测定。
四氮唑盐(MTT)还原法的具体操作是:按不同肿瘤生长速率,将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞90μL/孔接种于96孔微量培养板内,培养24h后加入药液10μL/孔,对每个细胞株,每个浓度均为三个复孔,另设无细胞凋零孔、如果药物有颜色要做相应药物浓度无细胞凋零孔;肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养48h后,加MTT液5mg/mL用生理盐水配制20L/孔,继续培养4h后,加入由10%十二烷基硫酸钠、5%异丁醇、0.01mol/L HCl组成的三联液50μL/孔,于CO2培养箱中过夜,然后用酶标仪测OD570值;按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(对照组OD值-治疗组OD值)/对照组OD值×100%。
对化合物1~10的体外生测结果如下:
表一化合物对7721肝癌细胞生长的抑制率%
实施例12
体外抑制肿瘤细胞生长活性测定:
用磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)蛋白染色法对MCF-7乳腺癌细胞进行体外抑制肿瘤细胞生长活性测定。
磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)蛋白染色法的具体操作如下:根据细胞生长速率,将处于对数生长期的肿瘤细胞以90μL/孔接种于96孔培养板,,贴壁生长24h,再加药10μL/孔,每个浓度设三复孔,并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞凋零孔;肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养72小时,然后倾去培养液,用10%冷三氯乙酸固定细胞,4C放置1h后用蒸馏水洗涤5次,空气中自然干燥,然后加入由1%冰醋酸配制的SRB 4mg/mL溶液100μL/孔,室温中染色15min,去上清液,用1%醋酸洗涤5次,空气干燥。最后加入150μL/孔的Tris溶液,酶标仪520nm波长下测定A值;按下列公式计算被测物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(A540对照孔-A540给药孔)/A540对照孔×100%。
对化合物1~10的体外生测结果如下:
化合物对MCF-7乳腺癌细胞生长的抑制率%
表二化合物对MCF-7人乳腺癌细胞生长的抑制率%
Claims (3)
2、据权利要求1所述的抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物的应用,其特征在于:把所述含三氮唑杂环结构的化合物配制成具有不同浓度的药液,用四氮唑盐还原法对7721肝癌细胞进行试验,方法是按不同肿瘤生长速度,将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞以90μL/孔接种于96孔微量培养板内,培养24h后加入配制好的药液10μL/孔,对每个细胞株,每个浓度均为三个复孔,另设无细胞凋零孔、如果配制好的药液有颜色要做相应药液浓度无细胞凋零孔;肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养48h后,加MTT液5mg/mL用生理盐水配制20L/孔,继续培养4h后,加入由10%十二烷基硫酸钠、5%异丁醇、0.01mol/L HCl组成的三联液50μL/孔,于CO2培养箱中过夜,然后用酶标仪测OD570值;按下列公式计算所述含三氮唑杂环结构的化合物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(对照组OD值-治疗组OD值)/对照组OD值×100%。
3、据权利要求1所述的抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物的应用,其特征在于:把所述含三氮唑杂环结构的化合物配制成具有不同浓度的药液,用磺酰罗丹明B蛋白染色法对MCF-7乳腺癌细胞进行试验,方法是将一定数量处于对数生长期的肿瘤细胞以90μL/孔接种于96孔培养板,贴壁生长24h,再加入配制好的药液10μL/孔,每个浓度设三复孔,并设相应浓度的生理盐水溶媒对照及无细胞凋零孔;肿瘤细胞在37℃、5%CO2条件下培养72小时,然后倾去培养液,用10%冷三氯乙酸固定细胞,4℃放置1h后用蒸馏水洗涤5次,空气中自然干燥,然后加入由1%冰醋酸配制的SRB 4mg/mL溶液100μL/孔,室温中染色15min,去上清液,用1%醋酸洗涤5次,空气干燥。最后加入150μL/孔的Tris溶液,酶标仪520nm波长下测定A值;按下列公式计算所述含三氮唑杂环结构的化合物对癌细胞生长的抑制率:
肿瘤抑制率=(A540对照孔-A540给药孔)/A540对照孔×100%。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2009100122775A CN101628912B (zh) | 2009-06-25 | 2009-06-25 | 一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN2009100122775A CN101628912B (zh) | 2009-06-25 | 2009-06-25 | 一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN101628912A true CN101628912A (zh) | 2010-01-20 |
CN101628912B CN101628912B (zh) | 2012-07-25 |
Family
ID=41574208
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN2009100122775A Expired - Fee Related CN101628912B (zh) | 2009-06-25 | 2009-06-25 | 一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN101628912B (zh) |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102850337A (zh) * | 2011-06-30 | 2013-01-02 | 四川大学 | 多氮唑联螺烯酮类化合物及其制备方法和用途 |
CN103435560A (zh) * | 2013-08-01 | 2013-12-11 | 大连理工大学 | 一类带柔性侧链的苊并[1,2-b]喹喔啉衍生物的合成及其应用 |
CN104059053A (zh) * | 2014-06-13 | 2014-09-24 | 大连理工大学 | 一类酰胺侧链含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN104072478A (zh) * | 2014-05-22 | 2014-10-01 | 大连理工大学 | 一类萘环4位含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN106478505A (zh) * | 2016-08-28 | 2017-03-08 | 浙江工业大学 | 一种双光子gsh探针及其制备与应用 |
CN107540608A (zh) * | 2017-07-17 | 2018-01-05 | 大连理工大学 | 4‑取代萘酰亚胺类化合物及其应用 |
CN107698571A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-16 | 大连理工大学 | 萘酰亚胺‑香豆素类dna靶向双嵌入剂及其合成和应用 |
CN107698648A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-16 | 大连理工大学 | 含胆甾醇的萘酰亚胺类衍生物及其合成和应用 |
CN107739367A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-27 | 大连理工大学 | 含三聚氯氰的萘酰亚胺类衍生物及其合成方法和应用 |
CN109369528A (zh) * | 2018-11-26 | 2019-02-22 | 天津医科大学 | 三氟甲基取代环戊酮并喹啉化合物及药学上可接受的盐、其制备方法及应用 |
CN110194741A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-09-03 | 桂林医学院 | 4-苯甲酰哌嗪-3-硝基-1,8-萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用 |
CN115385890A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-25 | 杭州庆正鸿科技有限公司 | 一种1,8萘酰亚胺衍生物及其制备方法与应用 |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101284827B (zh) * | 2008-06-06 | 2010-12-08 | 大连理工大学 | 含三唑环萘酰亚胺抗肿瘤化合物及其制备方法 |
CN101323591A (zh) * | 2008-07-23 | 2008-12-17 | 大连理工大学 | 一类5-位或6-位取代的萘酰亚胺化合物及抗肿瘤应用 |
-
2009
- 2009-06-25 CN CN2009100122775A patent/CN101628912B/zh not_active Expired - Fee Related
Cited By (21)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102850337B (zh) * | 2011-06-30 | 2015-01-07 | 四川大学 | 多氮唑联螺烯酮类化合物及其制备方法和用途 |
CN102850337A (zh) * | 2011-06-30 | 2013-01-02 | 四川大学 | 多氮唑联螺烯酮类化合物及其制备方法和用途 |
CN103435560A (zh) * | 2013-08-01 | 2013-12-11 | 大连理工大学 | 一类带柔性侧链的苊并[1,2-b]喹喔啉衍生物的合成及其应用 |
CN103435560B (zh) * | 2013-08-01 | 2015-06-03 | 大连理工大学 | 一类带柔性侧链的苊并[1,2-b]喹喔啉衍生物的合成及其应用 |
CN104072478A (zh) * | 2014-05-22 | 2014-10-01 | 大连理工大学 | 一类萘环4位含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN104072478B (zh) * | 2014-05-22 | 2016-06-01 | 大连理工大学 | 一类萘环4位含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN104059053A (zh) * | 2014-06-13 | 2014-09-24 | 大连理工大学 | 一类酰胺侧链含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN104059053B (zh) * | 2014-06-13 | 2016-04-13 | 大连理工大学 | 一类酰胺侧链含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 |
CN106478505B (zh) * | 2016-08-28 | 2019-04-09 | 浙江工业大学 | 一种双光子gsh探针及其制备与应用 |
CN106478505A (zh) * | 2016-08-28 | 2017-03-08 | 浙江工业大学 | 一种双光子gsh探针及其制备与应用 |
CN107540608A (zh) * | 2017-07-17 | 2018-01-05 | 大连理工大学 | 4‑取代萘酰亚胺类化合物及其应用 |
CN107698571A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-16 | 大连理工大学 | 萘酰亚胺‑香豆素类dna靶向双嵌入剂及其合成和应用 |
CN107739367A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-27 | 大连理工大学 | 含三聚氯氰的萘酰亚胺类衍生物及其合成方法和应用 |
CN107698648A (zh) * | 2017-08-30 | 2018-02-16 | 大连理工大学 | 含胆甾醇的萘酰亚胺类衍生物及其合成和应用 |
CN107739367B (zh) * | 2017-08-30 | 2019-05-21 | 大连理工大学 | 含三聚氯氰的萘酰亚胺类衍生物及其合成方法和应用 |
CN109369528A (zh) * | 2018-11-26 | 2019-02-22 | 天津医科大学 | 三氟甲基取代环戊酮并喹啉化合物及药学上可接受的盐、其制备方法及应用 |
CN109369528B (zh) * | 2018-11-26 | 2022-03-04 | 天津医科大学 | 三氟甲基取代环戊酮并喹啉化合物及药学上可接受的盐、其制备方法及应用 |
CN110194741A (zh) * | 2019-07-08 | 2019-09-03 | 桂林医学院 | 4-苯甲酰哌嗪-3-硝基-1,8-萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用 |
CN110194741B (zh) * | 2019-07-08 | 2022-09-09 | 桂林医学院 | 4-苯甲酰哌嗪-3-硝基-1,8-萘酰亚胺衍生物及其制备方法和应用 |
CN115385890A (zh) * | 2022-07-19 | 2022-11-25 | 杭州庆正鸿科技有限公司 | 一种1,8萘酰亚胺衍生物及其制备方法与应用 |
CN115385890B (zh) * | 2022-07-19 | 2023-08-08 | 杭州庆正鸿科技有限公司 | 一种1,8萘酰亚胺衍生物及其制备方法与应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN101628912B (zh) | 2012-07-25 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN101628912B (zh) | 一类抗肿瘤含三氮唑杂环结构的化合物及其应用 | |
CN101284827B (zh) | 含三唑环萘酰亚胺抗肿瘤化合物及其制备方法 | |
CN104072478A (zh) | 一类萘环4位含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 | |
CN112961103B (zh) | 一种含氮芥的三联吡啶配体及其制备方法和应用 | |
CN103450176A (zh) | 一类含2-(4-氨基苯基)苯并噻唑萘酰亚胺化合物及其应用 | |
CN108498503A (zh) | 一类新型细胞信号传导和基因转录激活因子3型(stat3)抑制剂的制备和用途 | |
CN104072493A (zh) | 一类含2-巯基苯并噻唑和三唑杂环的萘酰亚胺化合物,其制备方法及其应用 | |
CN107311937A (zh) | 一类具抗肿瘤活性的甘草查尔酮a二氢氨基嘧啶类化合物及其合成方法 | |
CN102731493B (zh) | 一类抗肿瘤含苯并噻唑杂环结构的化合物及其应用 | |
CN106243044A (zh) | 含卤代丙烯酰胺侧链的嘧啶类衍生物及制备和应用 | |
CN109438323A (zh) | 一类具有抗肿瘤活性的棉酚-靛红席夫碱类化合物及其合成方法 | |
CN104059053B (zh) | 一类酰胺侧链含1,2,3-三唑的萘酰亚胺衍生物的合成及其应用 | |
CN109608371A (zh) | O2-4-(3-(4-胺磺酰基苯基)脲)苯基偶氮鎓二醇盐衍生物、制备方法及用途 | |
CN104059062A (zh) | 含苯并噻唑和三唑双杂环的稠环化合物及其应用 | |
CN109316479A (zh) | 一类新型萘酚类化合物的制备及其在癌症治疗方面的应用 | |
CN103435560A (zh) | 一类带柔性侧链的苊并[1,2-b]喹喔啉衍生物的合成及其应用 | |
CN104016898A (zh) | 3,4-二取代吡咯化合物及其制备方法和应用 | |
CN1786003B (zh) | 硫、氮杂环并萘酰亚胺类化合物及其在肿瘤细胞中应用 | |
CN110590681A (zh) | 一种新型喹唑啉酮类化合物及其制备方法和应用 | |
CN104945414A (zh) | 苯并硫杂蒽类衍生物及其制备方法与应用 | |
CN103435574B (zh) | 一种巯基苯并噻唑取代的苊并杂环类化合物及其应用 | |
CN103044326A (zh) | 5-溴氧化异阿朴啡及其合成方法和应用 | |
CN102058585A (zh) | 罗丹宁衍生物作为抗肿瘤药物的应用 | |
CN114276330A (zh) | 一种新型哌啶酮系化合物及其制备方法和应用 | |
CN104098523A (zh) | 1-异丁酰基-3-苯基-1,4-二氢-1,2,4,5-四嗪及制备和应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C14 | Grant of patent or utility model | ||
GR01 | Patent grant | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20120725 Termination date: 20150625 |
|
EXPY | Termination of patent right or utility model |