CN101627733A - 一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法 - Google Patents
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Abstract
一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法,其特征是先剥离成熟贝类获得卵子和精子,对剥离的卵子进行过滤和洗卵,然后用0.005%-0.01%浓度的氨水处理10-15分钟后洗卵,再用0.001M-0.002M 5-羟色胺处理30-45分钟后洗卵,经体外促熟的卵子与精子结合完成人工授精,授精的受精卵孵化发育到正常D型幼虫。所述的贝为鲍鱼、魁蚶、缢蛏、文蛤、珍珠贝或贻贝。本方法利用氨水和5-羟色胺的互补作用,二者降低了各自的副作用,提高受精率和孵化率,并且畸形很少,操作简单,完全可以应用于育苗生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种能使贝类卵子体外促熟的方法,特别是涉及一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法。
背景技术
进行体外受精的贝类,精子入卵时机有二种,一种是初级卵母细胞处于第一次减数分裂之前,有胚泡存在,精子进入后胚泡消失,如近江牡蛎等;另一种是初级卵母细胞处于第一次减数分裂的中期,胚泡已经消失,才有受精可能,如栉孔扇贝、合浦珠母贝、贻贝、皱纹盘鲍等,这些贝类在配子发生时期,卵母细胞的减数分裂停滞于第一次减数分裂前期,即发生前期阻滞,所以,通过剥离获得的卵子一般是不能受精的。这就需要对剥离的贝类卵子进行一定的处理,使其在体外进一步发育成熟和激活,从而达到受精的目的。
目前主要使用氨水对卵子进行体外促熟,但是,氨海水虽能使全部卵子胚泡破裂,但是对卵子的伤害比较严重,因此,受精率、孵化率都比较低,而且胚胎畸形严重。
发明内容
本发明的目的是提供一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法,它能克服现有技术的上述缺点。
一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法,其特征是先剥离成熟贝类获得卵子和精子,对剥离的卵子进行过滤和洗卵,然后用0.005%-0.01%浓度的氨水处理10-15分钟后洗卵,再用0.001M-0.002M 5-羟色胺处理30-45分钟后洗卵,经体外促熟的卵子与精子结合完成人工授精,授精的受精卵孵化发育到正常D型幼虫。
本方法利用氨水和5-羟色胺的互补作用,二者降低了各自的副作用,提高受精率和孵化率,并且畸形很少,操作简单,完全可以应用于育苗生产。
具体实施方式
本发明以正常剥离不能完成受精的栉孔扇贝为例,取栉孔扇贝种贝,通过剥离,分别获取精、卵,对卵子进行过滤、洗卵等处理,然后将处理后的精子和卵子收集于桶中,先用0.005%-0.01%体积百分比浓度的氨水处理10-15分钟后洗卵,再用0.001M-0.002M浓度的5-羟色胺处理30-45分钟后洗卵,之后进行精、卵结合进行人工受精,受精率可达40%以上,受精卵的孵化率为50%-70%。
上述实施例也适用于其他产卵性海洋贝类如鲍鱼、魁蚶、缢蛏、文蛤、珍珠贝或贻贝等剥离取卵不能受精的种类,均能获得类似的效果。
Claims (2)
1、一种能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法,其特征是先剥离成熟贝类获得卵子和精子,对剥离的卵子进行过滤和洗卵,然后用0.005%-0.01%浓度的氨水处理10-15分钟后洗卵,再用0.001M-0.002M 5-羟色胺处理30-45分钟后洗卵,经体外促熟的卵子与精子结合完成人工授精,授精的受精卵孵化发育到正常D型幼虫。
2、如权利要求1所述的能使剥离的贝类卵子体外促熟的方法,其特征是所述的贝为鲍鱼、魁蚶、缢蛏、文蛤、珍珠贝或贻贝。
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