CN101607978A - 藤黄中的两个新化合物、其制备方法和药物用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及从藤黄中提取分离得到的两个新化合物2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸和10α-羟基表藤黄酸,其制备方法和药物用途。本发明所述的两个新化合物结构由式I和II表示,化合物I:2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸可用于制备预防和治疗肿瘤、艾滋病等疾病的药物;化合物II:10α-羟基表藤黄酸可用于制备预防和治疗肿瘤等疾病的药物。本发明还提供了两个新化合物2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸和10α-羟基表藤黄酸的制备方法。
Description
技术领域
本发明涉及从藤黄中得到的两个新的化合物、其制备方法和它们在预防和治疗肿瘤、艾滋病等疾病中的药物用途。
背景技术
藤黄(Gamboge)为藤黄科(Guttiferae)植物藤黄树(Garcinia hanbaryi)所分泌的胶状树脂,主要产于柬埔寨、泰国、越南、中国。同科属植物在我国南方广东省和海南省也有分布。其生物学活性在中国古代医书上早有记载,具有消肿、化毒、止血、杀虫的功效。我国药理和临床工作者最早发现藤黄具有抗癌作用,并经多次实验证明其主要的有效成分为以藤黄酸(gambogic acid)为代表的桥环化合物,对藤黄酸抗肿瘤作用的研究表明,藤黄酸能选择性地杀死癌细胞,而对正常的外周血中白细胞无明显影响。临床上用于治疗乳腺癌、淋巴肉瘤、皮肤癌均取得一定的疗效.
目前已分离出的主要活性成分有藤黄酸、表藤黄酸、新藤黄酸、新藤黄酸、和别藤黄酸等20余个类似的化合物。本发明从藤黄中分离得到新的藤黄酸类衍生物和白桦酯酸类衍生物,它们均具有较强的抗肿瘤活性,另外,白桦酯酸类衍生物含还具有抗艾滋病的活性。
现有技术没有提供任何与本发明提供的新的藤黄酸类衍生物和白桦酯酸类衍生物有关的信息。既没有化合物结构确证的公开报道,也没有企图从动、植物中提取分离或化学合成制备该化合物的方法的报道,更没有与该化合物有关的生物活性的公开报道。
发明内容
本发明的目的在于提供两种从藤黄中分离得到的新化合物。
本发明的另一目的在于提供从藤黄中提取分离本发明的新化合物的方法。
本发明的另一目的是上述新化合物在预防和治疗肿瘤、艾滋病等疾病方面的药物用途。
本发明的目的通过下列技术措施实现。
发明人从藤黄中分离得到两种新的化合物I和II,其立体结构如下图所示:
新化合物I和II从藤黄中分离得到,其方法包括以下步骤:
a.取藤黄干燥树脂,用溶剂提取,回收提取液,得到稠浸膏。
b.将稠浸膏经过正相或反相色谱层析分离,得到目标化合物。
提取溶剂可以是水、乙醇、甲醇、丙醇、丁醇丙酮、氯仿、乙酸乙酯、或任意比例的醇、水混合溶剂,优选含水5%---100%的乙醇或甲醇。提取方法可以是煎煮、回流、冷浸、渗漉、微波提取或超声提取,优选冷浸和超声提取。
提取液浓缩后可通过极性或非极性大孔吸附树脂柱,用水洗去杂质,用含水低于80%的乙醇或甲醇洗脱,将含有目标物的洗脱液浓缩,得到精制液。也可以用各类正向或方向硅胶,其中优选正向硅胶,用洗脱液洗脱,收集分别含有目标化合物I和II的洗脱液浓缩,分别得到精制液。
浓缩后的精制液分别可在硅胶或氧化铝等正相吸附材料中进行色谱分离,也可在硅烷键合硅胶、含有氨基或氨基的硅烷键合硅胶等反相材料中进行色谱分离,收集含有目标物的洗脱液。洗脱液重结晶或蒸干溶剂后分别得到新化合物I和II。
发明人发现化合物I和II具有良好的抗肿瘤生物活性,化合物I还具有预防和治疗艾滋病的活性,并且毒性很低。
附图说明
图1.新化合物I的高分辨质谱图
图2.新化合物I的1HNMR图
图3.新化合物I的13CNMR图
图4.新化合物II的高分辨质谱数据
图5.新化合物II的1HNMR图
图6.新化合物II的13CNMR图
具体实施例
下列实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明,但不以任何方式限制本发明。
实施例1.新化合物I(2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸)的制备。
藤黄干燥树脂1000g,粉碎后用无水乙醇冷浸提取3次,每次4.5升,合并提取液、过滤,滤液减压回收溶剂,得稠浸膏(475g)。稠浸膏用正相硅胶进行柱层析分离,梯度洗脱、溶剂系统为石油醚-丙酮、丙酮、甲醇,根据馏分薄层层析情况粗分成八个部分(GhA-GhH)。GhD(25g)经反复硅胶柱层析和制备柱层析分离得到化合物2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸,经高效液相检测,纯度为99.3%。
2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸
白色针状结晶
分子式:C32H50O5
电喷雾质谱(ESI-MS):准分子离子峰m/z513.23[M-H]-和m/z537.21[M+Na]+
HR-EI-MS显示分子离子峰m/z514.3644[M]+(计算值514.7401),分子式C32H50O5。
红外光谱(IR):cm-1:3508,2972,2941,2870,1726,1703,1637,1452,1377,1369,1259,1186,1061,1047,1032,885。
核磁共振氢谱(1H-NMR):(400M DMSO-D6)δ,ppm
1.86(dd,1H,C1-βH),0.78(t,1H,C1-αH),3.58(brs,1H,C2-H),4.34(d,1H,C3-H),0.83(m,1H,C5-H),2.24~2.17(m,1H,C13-H),1.39(m,1H,C15-βH),1.08~1.06(m,1H,C15-αH),2.10~2.06(m,1H,C16-βH),1.36(m,1H,C16-αH),1.50(t,1H,C18-H),2.92(m,1H,C19-H),1.85~1.70,(m,1H,C21-βH),1.29(m,1H,C21-αH),1.85~1.70(m,1H,C22-βH),1.42(m,1H,C22-αH),0.73(s,3H,C23-H),0.74(s,3H,C24-H),0.82(s,3H,C25-H),0.84(s,3H,C26-H),0.93(s,3H,C27-H),4.54(d,1H,C29-H),4.66(d,1H,C29-H),1.63(s,3H,C30-H),4.53(d,1H,C2-OH),2.00(s,3H,C32-H)
核磁共振碳谱(13C-NMR):(100M DMSO-D6)δ,ppm
48.10(C1,仲碳),65.53(C2,叔碳),84.45(C3,叔碳)39.41(C4,季碳),55.16(C5,叔碳),18.52(C6,仲碳),34.35(C7,仲碳),40.96(C8,季碳),50.39(C9,叔碳),38.36(C10,季碳),21.28(C11,仲碳),25.66(C12,仲碳),38.23(C13,叔碳),42.73(C14,季碳),29.86(C15,仲碳),32.37(C16,仲碳),56.11(C17,季碳),49.18(C18,叔碳),47.29(C19,叔碳),150.98(C20,季碳),30.80(C21,仲碳),37.00(C22,仲碳),28.98(C23,伯碳),18.15(C24,伯碳),17.76(C25,伯碳),16.38(C26,伯碳),14.99(C27,伯碳),177.93(C28,季碳),110.33(C29,仲碳),19.65(C30,伯碳),171.00(C31,季碳),21.77((C32,伯碳)。
新化合物I(2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸)的质谱见图1,核磁共振1H谱见图2,核磁共振13C谱见图3。
实施例2.新化合物II(10-α-羟基表藤黄酸)的制备
藤黄干燥树脂1000g,粉碎后用无水乙醇冷浸提取3次,每次4.5升,合并提取液、过滤,滤液减压回收溶剂,得稠浸膏(475g)。稠浸膏用正相硅胶进行柱层析分离,梯度洗脱、溶剂系统为石油醚-丙酮、丙酮、甲醇,根据馏分薄层层析情况粗分成八个部分(GhA-GhH)。GhB(33.7g)经反复硅胶柱层析和制备柱层析分离得到化合物10α-羟基表藤黄酸,经高效液相检测,纯度为98.5%。
10α-羟基表藤黄酸
黄色粉末
分子式:C38H46O9
电喷雾质谱(ESI-MS):m/z647.5[M+H]+和m/z669.3034[M+Na]+
HR-ESI-MS显示分子离子峰m/z669.3034[M+Na]+(计算值669.3040),分子式C38H46O9。
红外光谱(IR):cm-1:2968,2926,1730,1643,1628,1454,1435,1373,1177,1155,1124,1109,1045,739。
紫外光谱(UV):λmaxnm290,358。
核磁共振氢谱(1H-NMR):(400M CDCl3)δ,ppm
5.42(d,1H,C3-H),6.64(d,1H,C3-H),3.18(s,1H,C9-H),4.80(d,1H,C10-H),2.66(d,1H,C11-H),1.36(s,3H,C19-H),1.80~1.76(m,1H,C20-H),1.62(m,1H,C20-H),1.90(m,1H,C21-H),1.40(m,1H,C21-H),2.43(d,1H,C22-H),1.12(s,3H,C24-H),1.34(s,3H,C25-H),3.2(m,2H,C26-H),6.63(m,1H,C27-H),1.94(s,3H,C30-H),3.2(m,2H,C31-H),5.01(m,1H,C32-H),1.72(s,3H,C34-H),1.62(s,3H,C35-H),2.08~2.01(m,2H,C36-H),5.15(m,1H,C37-H),1.56(s,3H,C39-H),1.65(s,3H,C40-H)
核磁共振碳谱(13C-NMR):(100M CDCl3)δ,ppm
81.30(C2,季碳),125.28(C3,叔碳),116.13(C4,叔碳),103.01(C5,季碳),156.66(C6,季碳),101.99(C7,季碳),194.27(C8,季碳),50.32(C9,叔碳),65.84(C10,叔碳),46.85(C11,叔碳),209.79(C12,季碳),82.53(C13,季碳),88.60(C14,季碳),155.97(C16,季碳),109.00(C17,季碳),161.64(C18,季碳),27.42(C19,伯碳),42.05(C20,叔碳),20.46(C21,仲碳),43.08(C22,叔碳),86.77(C23,季碳),27.42(C24,伯碳),29.96(C25,伯碳),28.19(C26,仲碳),140.33(C27,叔碳),127.06(C28,季碳),20.76(C29,伯碳),172.92(C30,季碳),21.71(C31,仲碳),122.82(C32,叔碳),131.36(C33,季碳),18.33(C34,伯碳),25.98(C35,伯碳),23.10(C36,仲碳),124.02(C37,叔碳),132.12(C38,季碳),17.84(C39,伯碳),25.87(C40,伯碳)。
新化合物II(10α-羟基表藤黄酸)的质谱见图4,核磁共振1H谱见图5,核磁共振13C谱见图6。
实施例3.新化合物I(2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸)对HIV病毒的抑制作用
将H9T淋巴细胞株在含有10%小牛血清的培养基中,在5%CO2、37℃的条件下连续培养。取实验样品分别溶解于二甲亚砜中,配制成250、50、10和2μg/ml的不同浓度。取部分H9T淋巴细胞用艾滋病毒(HIV-1)进行感染,达到104感染单位/ml。另取等量的H9T淋巴细胞加入等量的培养基,测定细胞毒活性(IC50)。然后置于37℃和5%CO2中培养4小时,取出,分别洗涤3次,分别加入24孔的平板上,加入不同浓度的试验液,阴性对照组加入等量的培养液,以齐多夫定(AZT)作为阳性对照,然后把平板置于37℃和5%CO2中培养4天。收集去除细胞后的上清夜作P24抗原检测,通过测定HIV壳蛋白的数量直接测定HIV的存在,计算EC50值。经上述方法测定,2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸的IC50值为173.6μg/ml,EC50值为2.64μg/时,治疗指数T100(IC50/EC50)为65.7。
实施例4.新化合物I(2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸)和化合物II(10-α-羟基表藤黄酸)的体外抗肿瘤活性研究
将化合物I和II(纯度大于95%)分别用)二甲亚砜溶解,再用完全RPMI-1640培养基将其稀释成80umol/L的工作液,分别将培养好的人结肠癌细胞HCT-8、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞BGC-823、人非小细胞肺癌细胞A549、人卵巢癌细胞A2780用胰酶消化,并稀释成1.0×104~2.0×104/mL的活细胞悬液,接种于96孔培养板中,每孔180uL,设6个复孔,培养24h后每孔加入不同浓度的药物20uL,使其终浓度分别为16、8、4、3、1.5、0.75umol/L,对照孔则加入20uL完全培养基,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养4天,每孔加入5mg/mL的MTT溶液(RPMI-1640配置)20uL,继续培养4h后,小心吸弃全部上清液,每孔加入150uL DMSO,振荡后,于酶联仪波长570nm处测定各孔吸光度(A)值,计算细胞增殖抑制率。实验重复3次。将浓度和抑制率经一定变换后用非线性回归拟合计算,求得药物的半数抑制浓度(IC50)。
增殖抑制率=(1-A给药/A对照)×100%
表1、表2和表3实验数据表明本发明化合物I和化合物II对人结肠癌细胞HCT-8、人肝癌细胞Bel-7402、人胃癌细胞BGC-823、人非小细胞肺癌细胞A549、人卵巢癌细胞A2780有较强的细胞毒活性,因为常规抗肿瘤化合物的体外活性筛选是以化合物的细胞毒活性来体现的,所以本发明化合物具有抗肿瘤活性,可以与药用载体混合,制备抗肿瘤药物。
表1化合物I对不同癌细胞的增值抑制率
表2化合物II对不同癌细胞的增值抑制率
表3化合物I和化合物II对不同癌细胞增值的半数抑制浓度(IC50,umol/L)
Claims (7)
1.由结构通式I表示的化合物2α-羟基-3β-乙酰氧基白桦酯酸2α-hydroxy-3β-acetoxy-lup-20(29)-en-28-oic acid;
3.权利要求1和2中的化合物I和II的制备方法,其制备方法包括以下步骤:
a.取藤黄干燥树脂,用溶剂提取,回收提取液,得到稠浸膏。
b.将稠浸膏经过正相或反相色谱层析分离,得到目标化合物。
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:提取溶剂可以是水、乙醇、甲醇、丙醇、丁醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯等溶剂或任意比例的醇、水混合溶剂。
5.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于:用于色谱层析分离的材料可以是硅胶、氧化铝、硅烷键合硅胶、含有氰基或氨基的硅烷键合硅胶。
6.权利要求1中化合物I在预防和治疗肿瘤、艾滋病等疾病方面的药物用途。
7.权利要求2中化合物II在预防和治疗肿瘤等疾病方面的药物用途。
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Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102372725A (zh) * | 2010-08-26 | 2012-03-14 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种高含量藤黄酸的纯化方法 |
CN103242336A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-08-14 | 东华大学 | 藤黄酸类衍生物及其制备和应用 |
CN103665089A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-03-26 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103665088A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-03-26 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103724313A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-04-16 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN104817569A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-08-05 | 宝鸡文理学院 | 一种同时分离藤黄中四种藤黄酸类成分的方法 |
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Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102372725A (zh) * | 2010-08-26 | 2012-03-14 | 苏州宝泽堂医药科技有限公司 | 一种高含量藤黄酸的纯化方法 |
CN103242336A (zh) * | 2013-06-04 | 2013-08-14 | 东华大学 | 藤黄酸类衍生物及其制备和应用 |
CN103665089A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-03-26 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103665088A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-03-26 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103724313A (zh) * | 2013-11-28 | 2014-04-16 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103665088B (zh) * | 2013-11-28 | 2016-07-13 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN103665089B (zh) * | 2013-11-28 | 2016-08-17 | 江苏康缘药业股份有限公司 | 从藤黄中提取的抗肿瘤化合物及其制备方法与用途 |
CN104817569A (zh) * | 2015-03-07 | 2015-08-05 | 宝鸡文理学院 | 一种同时分离藤黄中四种藤黄酸类成分的方法 |
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