CN101564389B - 盐酸阿比多尔在制备预防和治疗犬瘟热病毒药物中的用途 - Google Patents

盐酸阿比多尔在制备预防和治疗犬瘟热病毒药物中的用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了盐酸阿比多尔在预防和治疗犬瘟热病毒中的应用。通过体外实验证明，盐酸阿比朵尔对犬瘟热病毒具有显著的抑制作用，可作为预防和治疗犬瘟热病毒的药物应用于临床。

Description

盐酸阿比多尔在制备预防和治疗犬瘟热病毒药物中的用途
技术领域
本发明公开一种盐酸阿比多尔在制备预防和治疗犬瘟热病毒药物中的用途，提供了盐酸阿比多尔的一种新用途，属于兽医药技术领域。
技术领域
盐酸阿比朵尔(Arbidol hydrochloride)是一种新的抗病毒药物和免疫刺激剂，为非核苷类抗病毒新药，化学名为6-溴-4-(二甲氨甲基)-5-羟基-1-甲基-2-(苯硫甲基)-1H-吲哚-3-羟酸乙酯盐酸盐水合物。由前苏联研制开发，已被批准在俄联邦内使用，用于预防和治疗流行性感冒及其它呼吸道病毒感染。1993年第九届国际病毒学会议上报告了其抗流感病毒的活性，是一种新的抗病毒药物和免疫刺激剂。在流感和其它严重呼吸道病毒感染病流行期间，服用药物可减少7.5倍被传染的风险，可减轻流感和严重呼吸道病毒感染的疾病过程并防止其并发症的发生或发展。阿比朵尔对A、B型抗原的流感病毒的抗病毒活性最为显著，其作用与2，5-寡腺苷酸合成酶的活化有关，它通过激活2，5-寡聚腺苷酸合成酶，特异性抑制病毒囊膜与宿主细胞膜的融合，从而，阻断病毒的复制。
发明内容
本发明公开一种盐酸阿比多尔在制备预防和治疗犬瘟热病毒药物中的用途，提供了盐酸阿比多尔的一种新用途。
通过以下实验说明本发明盐酸阿比朵尔对预防和治疗犬瘟热病毒的作用：
实例1、盐酸阿比朵尔体外抗犬瘟热病毒试验
1实验材料
1.1药品 盐酸阿比朵尔 利巴韦林
1.2病毒和细胞
犬瘟热病毒(CDV-TH)本室分离和保存；非洲绿猴肾细胞(Vero)本室保存。
1.3主要试剂
营养液为DMEM(含10％小牛血清)，维持液为DMEM(含2％小牛血清)。
2病毒扩增及毒力测定
Vero细胞接种于96孔板，每孔100μl，含细胞2×104个/孔，37℃5％CO2培养24h，细胞长成单层。将病毒原液用培养液依次10倍稀释，即10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8和10-9共9个浓度，分别加至细胞培养板孔内，每浓度4孔，37℃，5％CO2培养箱培养。每天用倒置显微镜观察细胞病变(CPE)。细胞病变数在25％以下为+，26％-50％病变数为++，51％-75％病变数为+++，76％-100％病变数为++++。记录细胞病变程度，用Reed-Muench法计算病毒半数毒性浓度(TCID50)
3MTT法测定药物对细胞的最大无毒浓度(TC0)
Vero细胞接种于96孔板，每孔100μl，含细胞2×104个/孔，37℃5％CO2培养24h，细胞长成单层。吸去上清，盐酸阿比多尔浓度分别为40、20、10、5、2.5μg/ml，利巴韦林浓度分别为400、200、100、50μg/ml。每浓度4孔，并设细胞对照。观察5d后加MTT染色4h，吸去液体加DMSO溶解0.5h，酶联检测仪在570nm测定吸收值，试验重复三次，找出药物的最大无毒浓度，Reed-Muench法计算半数毒性浓度(TC50)。
4药物体外抗病毒试验
Vero细胞接种于96孔板，每孔10μl，含细胞2×104个/孔，37℃5％CO2培养24h，细胞长成单层。每孔加入100TCID50病毒100μl，吸附2h后，弃去病毒。药物以最大无毒浓度为起点对倍稀释5个浓度，每浓度4个复孔。同时，设病毒对照(细胞+病毒+培养液)、细胞对照(细胞+培养液)、药物对照(最高浓度的药物+细胞+培养液)。当病毒对照孔细胞病变为++++时，记录细胞病变结果，MTT染色法测定细胞活性。试验重复三次。用Reed-Muench法计算药物对病毒的半数抑制浓度IC50。
5结果
病毒毒力测定：病毒半数毒性浓度(TCID50)为10-6；
盐酸阿比朵尔对细胞的最大无毒浓度(TC0)为20μg/ml，见表1。
表1药物对细胞毒性测定结果
Figure G2009100670680D00021
Figure G2009100670680D00031
“+”细胞病变，“-”细胞正常
药物的抗病毒作用：盐酸阿比朵尔对犬瘟热病毒的IC50为16.97±1.22μg/ml，远远小于利巴韦林的IC50(77.31±9.42μg/ml)，表明盐酸阿比朵尔对犬瘟热病毒具有较强的抑制作用，见表2。
表2药物对犬瘟热病毒的抑制作用
Figure G2009100670680D00032
结论：
鉴于上述盐酸阿比朵尔的抗病毒作用，通过体外筛选实验证明盐酸阿比朵尔对犬瘟热病毒是否敏感，判定盐酸阿比朵尔对犬瘟热病毒的治疗效果。从而获得治疗犬瘟热病毒感染的治疗药物。
具体实施方式
盐酸阿比朵尔可制成医药学中的任何药物制剂。

Claims (1)

1.盐酸阿比朵尔在制备治疗和预防犬瘟热病毒药物中的应用。
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