CN101548679A - 苦参碱型生物碱微乳及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是苦参碱微乳及其制备方法，它克服了苦参碱溶解性差，生物利用度低的缺点，提高了苦参碱微乳的稳定性。本发明涉及以微乳作为药物载体，制备苦参碱O/W型微乳，制成粒径为1～100nm的液滴，提高包封药物的分散度，促进植物表面角质层的透皮吸收，增强杀虫害疗效，从而为其理论和应用研究提供科学依据。本发明还涉及将苦参碱掺入到油中并形成稳定的水包油乳剂的方法。该组合物包括苦参碱，油相，水和表面活性剂。在优选实施方案中，油为吐温－80，乳化剂为油酸乙酯，助乳化剂为无水乙醇。通过形成苦参碱O/W型微乳提高苦参碱微乳可溶性水剂的药物含量，增强药效，节约成本，使药物更加有效地被农作物吸收。

Description

苦参碱型生物碱微乳及其制备方法

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及苦参碱微乳及其制备方法，具体涉及农业用苦参碱型生物碱(包括前体脂质体)微乳及其制备方法。

背景技术：

苦参碱是豆科属植物苦参、广豆根、苦豆子及其它植物中提取分离出的主要生物碱之一，经药理学研究证明，有多种生物活性，如抗肿瘤、抗炎、抗心率失常、防止肝纤维化、改善肝功能等作用。由于苦参本身可直接作为中草药临床应用，故其制剂对人、畜、环境安全，不伤害害虫天敌，有利于生态平衡，具有一定的杀虫防病作用，可与常用的化学合成农药混用，表现出显著的增效作用，大大降低化学农药的用量，减少化学合成农药对环境的污染。

在我国农村将苦参碱作为杀菌剂防治农作物无害化生产方面，得到越来越广泛的应用。但我国在研究此项目上起步比较晚，其中一点有待解决的突出问题是剂型单一，本研究重在提高苦参碱微乳可溶性水剂的药物含量，增强药效，节约成本，使药物更加有效地被农作物吸收。

目前苦参碱的上市剂型包括注射用苦参碱、苦参碱氯化钠注射液、苦参碱葡萄糖注射液、苦参碱栓，非静脉给药制剂如苦参碱栓剂、非静脉用苦参碱注射剂的低生物利用度，针剂肌肉注射时明显的局部疼痛，普通静脉用水针剂的血管刺激性和毒性反应等，以及药物水溶性并不理想，稳定性差，尤其水针灭菌后易发生降解而变黄，长期贮存其质量及安全难以控制等都影响其疗效和临床使用。

20世纪90年代以来，药物剂型和制剂研究已进入药物释放系统时代，新型药物释放系统已成为药学领域的重要发展方向。微乳越来越成为很有前景的药剂学剂型，微乳是由表面活性剂、助表面活性剂、油相和水相按适当比例形成的一种均匀、低粘度、热力学稳定的透明或半透明分散体系，具有极高的稳定性和对溶质的高度分散性及吸附能力。

因此制备一种稳定、高效、低毒副作用、良好的生物相容性且易于制备的苦参碱制剂是当前农业和医药领域急于解决的问题。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种苦参碱微乳及其制备方法。

本发明是按照如下技术方案实现的：

本研究以微乳作为药物载体，制备苦参碱水包油型微乳组合物，制成粒径为1～100nm的液滴，提高包封药物的分散度，促进植物表面角质层的透皮吸收，增强杀虫害疗效，从而为其理论研究和临床应用提供一些科学资料。在研制药用微乳载体时，一方面应努力寻找高效低毒的表面活性剂和助表面活性剂，另一方面采用改良的三角相图法研究微乳形成的条件，通过优化微乳的工艺条件，尽量减少表面活性剂和助表面活性剂的用量，以节约生产的成本。

该组合物包括苦参碱型生物碱，油相，水相，乳化剂，助乳化剂和渗透促进剂，其处方组成如下：

苦参碱型生物碱  1.0～3.0％(g/g)

乳化剂          25.0～30.0％(g/g)

助乳化剂        10.0～20.0％(g/g)

油相            2.0～8.0％(g/g)

渗透促进剂      0.2～0.6％(g/g)

水相            40.0～60.0％(g/g)。

可用的苦参碱型生物碱为苦参碱。

油相为乳剂中常用的油如油酸、油酸乙酯等。由于油酸乙酯的稳定性比油酸好，苦参碱在油酸乙酯中的溶解性好，且油酸乙酯本身具有一定的渗透促进作用，故油相最终选油酸乙酯。

乳化剂常用吐温-80、甘油。由于吐温的融血作用(毒性)与刺激性在表面活性剂中最低，并吐温-80是吐温类之中最安全的，故乳化剂最终选吐温-80。

助乳化剂优选无水乙醇。

苦参碱微乳由药物和基质组成。药物为苦参碱，基质由油相、水相、乳化剂、助乳化剂和渗透促进剂五种成分组成。其中，油相选用油酸乙酯，乳化剂选用吐温-80，助乳化剂选用无水乙醇，渗透促进剂选用二甲基亚砜，水相为去离子水。

药物的组分及其配比优选：

苦参碱       1.0～3.0％(g/g)

吐温-80      25.0～30.0％(g/g)

无水乙醇     10.0～20.0％(g/g)

油酸乙酯     2.0～8.0％(g/g)

二甲基亚砜   0.2～0.6％(g/g)

水相         40.0～60.0％(g/g)

目前国内已经生产出用于农业杀虫的1％浓度的苦参碱水剂。本实验的研究任务是提高苦参碱微乳液剂的含药浓度，达到更有效地防治功能，同时节约了成本。因此，结合前述苦参碱现有制剂的诸多不足之处，以及它良好的油溶性，我们将苦参碱溶入油中并最终制成稳定的水包油乳剂。

以乳剂重量为计，优选以下组分及配比制备苦参碱微乳：

苦参碱       3.0％(g/g)

吐温-80      29.0％(g/g)

无水乙醇     15.0％(g/g)

油酸乙酯     5.0％(g/g)

二甲基亚砜   0.5％(g/g)

水相         余量

苦参碱微乳的制备方法采用如下步骤：

1.超声乳匀法，按比例称取油相、乳化剂和助乳化剂，室温条件下用超声机超声，使这三者充分混合，再加入适量的苦参碱，超声混匀，再加入适量水和二甲基亚砜，然后在室温条件下超声，形成澄明的苦参碱微乳。

2.手工滴加法，将适当比例的油相、乳化剂和助乳化剂混合在一起，搅拌混匀，加入适量苦参碱，搅拌混匀，再加入水相和渗透促进剂，持续搅拌，形成澄明的苦参碱微乳。

通过以上方法制得的微乳粒径在20nm左右，粒径大小均匀，外观澄明。

本发明的优点在于：

(1)快速、高效、广谱性：本发明3％苦参碱杀虫剂能对几十种害虫起到防治作用，其有效率达86～99％，触杀时间在3～5分钟内杀死害虫。

(2)低毒性：该药不仅触杀效果好，而且低毒，经实验证明对动物没有毒性。

(3)无残留特性：该药是以纯天然植物为原料，经科学加工成低毒或微毒产品，具有无残留的特点。

具体实施方式：

实施例1：制备苦参碱微乳

配方及配比：

苦参碱         0.5g

油酸乙酯       2.0g

吐温-80        5.3g

甘油           2.7g

二甲基亚砜     0.1g

制得含药微乳   30.0g

去离子水       19.4g

制备方法为：

按上述配方称取油相、乳化剂和助乳化剂，室温条件下用超声机超声，使这三者充分混合，再加入的苦参碱，超声混匀，再加入去离子水和二甲基亚砜，然后在室温条件下超声，形成果冻状略微浑浊的苦参碱微乳。

实施例2：制备苦参碱微乳

配方及配比：

苦参碱        0.5g

油酸乙酯      1.0g

吐温-80       6.0g

无水乙醇      1.0g

二甲基亚砜    0.1g

制得含药微乳  20.5g

去离子水     10.0g

制备方法为：

按上述配方称取油相、乳化剂和助乳化剂，室温条件下用超声机超声，使这三者充分混合，再加入的苦参碱，超声混匀，再加入去离子水和二甲基亚砜，然后在室温条件下超声，形成澄清的苦参碱微乳。

实施例3：制备苦参碱微乳

配方及配比：

苦参碱        0.6g

油酸          1.0g

吐温-80       6.0g

无水乙醇      3.0g

二甲基亚砜    0.1g

制得含药微乳  26.7g

去离子水      16.0g

制备方法为：

按上述配方称取油相、乳化剂和助乳化剂，室温条件下用超声机超声，使这三者充分混合，再加入的苦参碱，超声混匀，再加入去离子水和二甲基亚砜，然后在室温条件下超声，形成浑浊的苦参碱微乳。

实施例4：稳定性考察

离心后对稳定性的考察

取苦参碱微乳适量于离心管中，密封管口，置高速离心机中，以4000rpm离心5h，然后观察其外观变化及是否有药物析出。苦参碱微乳经高低速离心结果表明，体系仍为淡黄色澄清透明均一液体，没有发生分层、药物析出现象，判定苦参碱微乳为稳定体系。

不同温度、光照、空气对稳定性的考察

取批苦参碱微乳密封于安瓿瓶中，于4℃、25℃、40℃、50℃、60℃、70℃、光照、空气中放置，于1天、2天、3天、5天、7天、10天、15天、30天、90天取样，对于pH值，含量，外观变化等进行观察和检测，具体过程如下：

精密称取各样品0.0525g于25mL容量瓶中，无水乙醇定容，超声20min，冷却置室温，再精取0.1mL该溶液于10mL容量瓶中，无水乙醇定容，超声20min，冷却置室温，用紫外分光光度仪测其吸光度。

已知苦参碱微乳的原始吸光度A为0.401，浓度C为10μg·mL^-1，根据公式A/A1＝C/C1，A1既为不同条件下各吸光度值，代入公式，得到稀释后浓度值，因为微乳被稀释，所以换算成稀释前倍数，根据公式：25(10C1/0.5)/0.05，得出稀释前浓度，再用(原始微乳浓度-各稀释前浓度)/原始微乳浓度166.94μg·mL^-1，既可求出降解率，见表1。

表1苦参碱乳留样观察试验结果之降解率(％)

表2苦参碱乳留样观察试验结果之pH值

结论

由以上数据可以看出，温度越高，苦参碱微乳降解率越大，药物降解越快；苦参碱微乳在光照和暴露在空气中，降解率都很大，药物降解的快。由于药物本身的性质的原因，该制剂不易高温和光照下放置，否则苦参碱就会转化成氧化苦参碱，导致药物成分的改变。因此苦参碱微乳应在棕色瓶中阴凉处、避光、密封保存。

苦参碱微乳在不同温度下放置90天没有出现分层、絮凝、合并和破裂现象。外观、色泽均无明显变化，保持澄清透明均一状态，但是温度过高时苦参碱易被氧化，使体系呈深黄色。光照实验结果显示，苦参碱在光照条件下易转化成氧化苦参碱。

本发明提供了一种给药新剂型-苦参碱微乳及其制备方法，克服了苦参碱已有剂型存在生物利用度较低、稳定性较差等缺点。本发明以苦参碱为主药，加入不同的辅料制成微乳，能对几十种害虫起到防治作用，该药不仅触杀效果好，而且低毒、无残留，提高了生物利用度，稳定性也大大增强。

Claims (7)

1.苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：包括苦参碱型生物碱，油相，水相，乳化剂，助乳化剂和渗透促进剂，其组分配比如下：

苦参碱型生物碱                    1.0～3.0％(g/g)

乳化剂                            25.0～30.0％(g/g)

助乳化剂                          10.0～20.0％(g/g)

油相                              2.0～8.0％(g/g)

渗透促进剂                        0.2～0.6％(g/g)

水相                              40.0～60.0％(g/g)。

2.根据权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：其中所述苦参碱型生物碱优选苦参碱。

3.根据权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：其中所述油相优选油酸乙酯。

4.根据权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：其中所述乳化剂优选吐温-80。

5.根据权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：其中所述助乳化剂优选无水乙醇。

6.根据权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳，其特征在于：其中所述渗透促进剂优选二甲基亚砜。

7.一种如权利要求1所述的苦参碱型生物碱微乳的制备方法，其特征在于：按比例称取油相、乳化剂和助乳化剂，室温条件下用超声机超声，使这三者充分混合，再加入处方量的苦参碱型生物碱，超声混匀，再加入适量水和渗透促进剂，然后在室温条件下超声，形成澄明的苦参碱微乳；或按比例将油相、乳化剂和助乳化剂混合在一起，搅拌混匀，加入处方量苦参碱型生物碱，搅拌混匀，再加入水相和渗透促进剂，持续搅拌，形成澄明的苦参碱微乳。