CN101548643B

CN101548643B - 北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法

Info

Publication number: CN101548643B
Application number: CN200910027995XA
Authority: CN
Inventors: 余桂红; 柏文娟; 马鸿翔; 周淼平; 张旭; 孙晓波; 任丽娟
Original assignee: Jiangsu Academy of Agricultural Sciences
Current assignee: Jiangsu Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2009-05-15
Filing date: 2009-05-15
Publication date: 2011-01-12
Anticipated expiration: 2029-05-15
Also published as: CN101548643A

Abstract

本发明涉及一种北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法，使用的萌发生芽培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NaCl 8.0g/L；增殖培养基为MS+TDZ1.0mg/L+BA 2.0mg/L+NaCl 8.0mg/L；生根培养基为1/2MS+IBA 0.3mg/L+KT 0.1mg/L+活性炭0.5mg/L+麦芽提取物0.5mg/L+NaCl 8.0mg/L；培养过程为：北美海蓬子的种子接种在萌发生芽培养基上萌发健壮的丛生小植株；将截取丛生小植株的茎尖、茎段在增殖培养基、生根培养基上继代增殖、生根；将具有3～6条根的幼苗移栽于由河沙、泥炭土和园土三者按体积比1∶1∶1配制的基质中，移栽成活的幼苗定植于大田中。

Description

北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法

技术领域

本发明涉及北美海蓬子的繁苗方法，尤其是一种北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法。

技术背景

北美海蓬子(Salicornia Bigelovii Torr.)，又简称为海蓬子，属于藜科(Chenopodiaceae)、海蓬子属(Salicornia)，也有译作盐角草属，是一种耐盐性极强的真盐生植物。可以用海水直接浇灌，可以在沿海滩涂种植。耐盐极限达到5％NaCl浓度。海蓬子是由美国亚利桑那大学环境研究室从全球范围内搜集到的1300多种野生盐生植物中筛选出的最具有经济价值的真盐生植物，可作为无公害蔬菜、动物青饲料和生物能源物质栽培应用。作为蔬菜栽培，采其幼嫩茎叶和幼嫩籽荚，清炒、做色拉或腌制。2001年，海蓬子在江苏盐城沿海滩涂引种成功。目前海蓬子在江苏盐城地区海边滩涂推广面积达到2000亩，作为有机和无公害海水蔬菜进入高档宾馆的餐桌，供不应求。我国海岸线长，适合种植海蓬子的海边滩涂面积巨大。

传统的北美海蓬子繁殖方法主要采用种子播种的繁殖方法，海蓬子幼苗在早期生长极其缓慢，管理困难，幼苗成活率低，需要花费较大的人力物力。此外，海蓬子的品种较为单一，海蓬子通过组织培养快速繁苗方法的建立，为海蓬子进行遗传改良操作提供了新的途径。

CW Lee(1992年)取在盆钵中生长2个月的海蓬子幼苗茎尖，进行组织培养，建立了海蓬子的组培繁苗体系(CW Lee.In Vitro Propagation ofSalicornia bigelovii by Shoot-tip Cultures.Hortscience，1992，27(5)：472.)。但是海蓬子幼苗生长极其缓慢，管理困难，成活率低。本研究直接取海蓬子的种子，在培养基上诱导丛生芽，操作更为简便，繁殖系数更高，在同样的时间内可以繁殖更多的海蓬子幼苗。

发明内容

本发明的目的在于：针对传统的北美海蓬子繁殖方法存在的问题，提供一种通过组织培养的快速繁苗方法。

本发明的目的是这样实现的：一种北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法，组织培养的基本培养基为MS基本培养基，其特征在于：萌发生芽培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NaCl 8.0g/L；增殖培养基为MS+TDZ1.0mg/L+BA 2.0mg/L+NaCl 8.0mg/L；生根培养基为1/2MS+IBA0.3mg/L+KT 0.1mg/L+活性炭0.5mg/L+麦芽提取物0.5mg/L+NaCl 8.0mg/L；具体培养过程为：

a)北美海蓬子的种子接种在萌发生芽培养基上萌发健壮的丛生小植株；

b)将截取丛生小植株的茎尖、茎段在增殖培养基上继代增殖；

c)将继代增殖后的小苗在生根培养基上生根；

d)将具有3～6条根的北美海蓬子幼苗移栽于由河沙、泥炭土和园土三者按体积比1∶1∶1配制的基质中，移栽成活的幼苗定植于海边滩涂的大田中。

在本发明中：所述的北美海蓬子的种子接种在萌发生芽培养基上萌发健壮的丛生小植株是指：将北美海蓬子种子在自来水下冲洗干净，去除漂浮的发育不良的种子，用酒精含量为75％的溶液浸泡1分钟，用无菌水冲洗一次，用升汞含量0.1％的表面消毒液消毒20分钟，再用无菌水水洗六次后，接种于萌发生芽培养基上，置于黑暗的条件下培养，萌发白化的丛生小植株后，再移到光照下培养，形成健壮的丛生小植株。

在本发明中：所述的将截取丛生小植株的茎尖、茎段在增殖培养基上继代增殖是指：将健壮的丛生小植株的茎尖或切成1.2～1.8cm大小的茎段接种到增殖培养基上继代增殖。

在本发明中：所述的将继代增殖后的小苗在生根培养基上生根是指：将继代增殖后高于2.0cm的北美海蓬子幼苗接种到生根培养基上诱导生根。

本发明的优点在于：应用组织培养的手段，克服北美海蓬子常规育苗苗期生长缓慢，管理困难，幼苗成活率低，需要花费较大的人力物力等缺点，达到工厂化快速育苗，以适应生产上对北美海蓬子的大量需求。同时，由于组织培养时直接选取北美海蓬子的种子，拓宽了北美海蓬子组培快繁的取材范围，组织培养中能对每个环节实施监控，大大提高了繁殖速度和移栽成活率。

附图说明

图1是北美海蓬子种子在萌发生芽培养基上形成白化丛生芽；

图2是组织培养后的具有3～6条根的北美海蓬子幼苗。

具体实施方式

实施例1

萌发生芽培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NaCl 8.0g/L。

将北美海蓬子的种子用自来水冲洗干净，去掉漂浮的发育不良的种子，置于1升的烧杯中，用酒精含量为75％溶液浸泡1分钟，用无菌水冲洗一次，再用升汞含量0.1％的表面消毒液消毒20分钟，用无菌水水洗六次。接种于萌发生芽培养基上，置于黑暗的条件下培养。接种后3天开始萌发，1月左右可以形成4～5个丛生小植株，2月左右可以形成15～20个丛生小植株，丛生小植株白化，移到光照的条件下培养10天左右，即可转绿，形成健壮的丛生小植株。

实施例2

增殖培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+BA 2.0mg/L+NaCl 8.0mg/L。

取实施例1获得的健壮的丛生小植株的茎尖，并将丛生小植株的茎切成1.2～1.8cm大小的茎段接种于增殖培养基上，使茎尖及小茎段在增殖培养基上快速继代增殖，形成北美海蓬子丛生小苗，月增殖倍数可达CW Lee建立的海蓬子的组培繁苗体系的1.5倍以上。

实施例3

生根培养基为1/2MS+IBA 0.3mg/L+KT 0.1mg/L+活性炭0.5mg/L+麦芽提取物0.5mg/L+NaCl 8.0mg/L。

将实施例2增殖后高于2cm的幼苗接种在生根培养基上，7天左右开始有不定根萌发，20天左右平均每株根数可达到3～6条，形成北美海蓬子幼苗。

实施例4

将具有3～6条根的幼苗移栽于由河沙、泥炭土和园土三者按体积比1∶1∶1的比例配制的基质中，浇NaCl含量为1％的盐水，移栽时苗高一般为3cm左右，移栽的成活率可以达到95％以上。移栽1个月左右即可将北美海蓬子幼苗移植于海边滩涂的大田。

实施例5

常规播种育苗：2月中旬取海蓬子种子进行盆钵播种，三个重复，每个重复播种100粒，播种在5个盆钵中，每个盆钵20粒。出苗率在40％左右，由于海蓬子幼苗早期在盆钵生长极其缓慢，成活率低，播后3月左右，100粒种子平均只有10％～20％的成活率。

以CW Lee(1992年)报道的方法进行育苗：在盆钵育苗阶段，与常规播种育苗相似，幼苗成活率低，成活率10％～20％，可取的用于培养的茎尖材料数量较少。按照CW Lee(1992年)报道的方法，播种100粒种子进行育苗，播种2月后取茎尖培养，增殖培养2月后，取幼苗进行生根培养，生根培养2月后移栽，1月后移栽成活。由于用该方法培养的幼苗根部有较多的愈伤组织，虽然根数较多，但移栽成活率仍然相对较低，在80％左右。从播种，经组织培养到移栽成活需要7个月左右的时间，100粒种子可以繁殖400株左右的幼苗。

以本发明的方法，种子直接播种在萌发生芽培养基上，出芽率在50％左右，2月左右每个发芽的种子可增殖形成15～20个丛生小植株，此后移至增殖培养基上，单个茎尖或1.2～1.8cm大小的茎段可增殖15倍以上。增殖培养基上形成的幼苗移到生根培养基上20天左右，每株形成3～6条健壮的根，即可进行移栽。在本发明中幼苗在生根培养基上茎基部只形成根系，而不形成愈伤组织，因此幼苗移栽成活率高，达到95％以上。本发明方法从在萌发生芽培养基上播种开始到移栽成活，约需5个月，100粒种子可以繁殖10000株以上的幼苗。远远高于CW Lee(1992年)报道的方法和常规播种育苗方法。

以上各实施例不是对本发明的具体限制。

Claims

1.一种北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法，组织培养的基本培养基为MS基本培养基，其特征在于：萌发生芽培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+NaCl 8.0g/L；增殖培养基为MS+TDZ 1.0mg/L+BA 2.0mg/L+NaCl8.0mg/L；生根培养基为1/2MS+IBA 0.3mg/L+KT 0.1mg/L+活性炭0.5mg/L+麦芽提取物0.5mg/L+NaCl 8.0mg/L；具体培养过程为：

c)将继代增殖后的小苗在生根培养基上生根；

2.根据权利要求1所述的北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法，其特征在于：所述的北美海蓬子的种子接种在萌发生芽培养基上萌发健壮的丛生小植株是指：将北美海蓬子种子在自来水下冲洗干净，去除漂浮的发育不良的种子，用酒精含量为75％的溶液浸泡1分钟，用无菌水冲洗一次，用升汞含量0.1％的表面消毒液消毒20分钟，再用无菌水水洗六次后，接种于萌发生芽培养基上，置于黑暗的条件下培养，萌发白化的丛生小植株后，再移到光照下培养，形成健壮的丛生小植株。

3.根据权利要求1所述的北美海蓬子通过组织培养基的快速繁苗方法，其特征在于：所述的将截取丛生小植株的茎尖、茎段在增殖培养基上继代增殖是指：将健壮的丛生小植株的茎尖或切成1.2～1.8cm大小的茎段接种到增殖培养基上继代增殖。

4.据权利要求1所述的北美海蓬子通过组织培养的快速繁苗方法，其特征在于：所述的将继代增殖后的小苗在生根培养基上生根是指：将继代增殖后高于2.0cm的北美海蓬子幼苗接种到生根培养基上诱导生根。