CN101516363A - 新颖的营养药物组合物和药物组合物及其用于治疗、共治疗或预防关节中软骨损伤或软骨退化的用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及新颖的营养药物组合物和药物组合物及其用于治疗、共治疗或预防关节病症的用途，所述组合物包含至少一种通式I的化合物，所述通式I如上所示，其中R¹和R²彼此独立地为C_1－8－烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1－8－烷氧基。

Description

新颖的营养药物组合物和药物组合物及其用于治疗、共治疗或预防关节中软骨损伤或软骨退化的用途

本发明涉及新颖的营养药物组合物和药物组合物，以及这些组合物用于治疗、共治疗或预防关节病症或维护关节健康的用途，所述组合物包含至少一种通式I的化合物。

已经发现，所述组合物特别适用于治疗、共治疗或预防关节中的软骨退化或软骨损伤，同样适用于治疗关节病症(例如退化性关节病症如骨关节炎)的软骨退化部分；或运动损伤。

软骨退化在本发明的范围内定义为关节软骨的代谢紊乱，其特征在于提高的软骨退化酶(如基质金属蛋白酶)生产。

骨关节炎是非炎性来源的关节慢性退行性疾病，其由于衰老期间关节的磨损消耗(wear and tear)而发生，并导致疼痛和减小的关节功能。骨关节炎的症状包括一个或多个关节中疼痛、僵硬和丧失活动性(mobility)。过量的关节负荷提高了骨关节炎的风险，因此骨关节炎主要影响负重关节如脊柱、膝盖和髋，但是拇指和指关节也被影响。关节病症也可由伤害(即微损伤(microdamage)或钝伤，骨折，对腱、半月板或韧带的损伤)引起，或可以由过度机械应激引起，或由例如损伤或肥胖症造成的其它生物力学不稳定性引起。

归因于软骨退化的关节病症是老年人中残疾和功能障碍的主导原因；60岁以上的人中有几乎80％显示这些病症的一些迹象。年龄、遗传因素、肌肉废用(muscle disuse)和虚弱、创伤、肥胖症和解剖学异常会促使该病症的发生。

关节病症难以治疗。迄今为止，主要用非类固醇抗炎药物治疗症状。药物被用于控制疼痛和抑制肿胀，但是不能预防或治疗对软骨的损伤。经历严重软骨损伤的患者频繁地需要手术，包括关节置换手术。因此，人们非常需要对治疗或预防软骨损耗和损伤的药剂，而本发明解决了该需要。

在第一方面中，本发明涉及至少一种通式I的化合物用于制造营养药物组合物或药物组合物的用途

其中R¹和R²彼此独立地为C_1-8-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-8-烷氧基，所述组合物用于治疗、共治疗或预防关节中的软骨退化或软骨损伤，用于软骨再生或软骨维护，或用于维护关节健康。

优选的是下述通式I的化合物：

其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-6-烷氧基，进一步更优选的是通式I的化合物，其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或甲氧基。

本发明上下文中使用的术语“烷基”表示任选地被取代的直链或支链或环烃基团，其含有1到8个碳原子，优选地含有1到6个碳原子，例如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、异丁基、戊基、新戊基、己基、2-乙基-己基、环己基和辛基。任选地存在的取代基可选自卤素、羟基或烷氧基或其混合物。优选地，烷基是未经取代的。

“烯基”表示不饱和的直链或支链或环烃基团，其含有1到8个，优选地1到6个碳原子，如烯丙基或异戊二烯基。

“烷氧基”是指饱和的直链或支链或环醚基团(-O-烷基)，其含有1到8个，优选地1到6个碳原子，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等。

最优选地，式I的化合物是这样的化合物，其中R¹和R²均为异戊二烯基且其中R³和R⁴均为甲氧基(该化合物被称作“α-曼果斯廷(α-mangostin)”)：

在本发明一些优选的实施方案中，具有上文给出的R¹到R⁴定义和优选级的式I的化合物是存在于组合物/药物中的唯一的Garcinia mangostanaL./山竹果类化合物。

术语“式I的化合物”还包括包含这类式I的化合物的任何植物材料或提取物。植物材料或提取物中通式I的化合物的用量不是关键性的。优选地，植物材料或提取物以下述用量含有通式I的化合物，所述用量以所述植物材料或提取物的总重为基础为至少1重量％，更优选地至少50重量％，进一步更优选地至少90重量％。本发明上下文中使用的术语“植物的材料”和“植物材料”表示植物的任何部分。

α-曼果斯廷(1，3，6-三羟基-7-甲氧基-2，8-二(3-甲基-2-丁烯基)-9H-氧杂蒽-9-酮)可以从植物中分离，所述植物如Garcinia mangostana(见Journalof American Chemical Society 1958，80，1691ff.；Phytochemistry 1996，43(5)，1099-1102)，但不仅限于此。

因此，该表述还包括以下述用量包含α-曼果斯廷的这些植物的任何材料或提取物或任何其它植物材料或提取物，所述用量以植物材料或提取物的总重为基础优选地为至少1重量％，更优选地为至少50重量％，进一步更优选地为至少90重量％。“α-曼果斯廷”既表示“天然的”(经分离的)又表示“合成的”(制造的)α-曼果斯廷。

除了(纯净的)化合物α-曼果斯廷之外，优选的是植物材料和植物提取物，特别是以下述用量含有这些化合物的植物材料和植物提取物，所述用量以植物材料/提取物的总重为基础至少为10重量％，优选地至少为50重量％，更优选地至少为90重量％。

包含至少一种通式I的化合物的根据本发明的组合物是特别吸引人的，因为患者对具有温和的作用并且不具有大的副作用的被认为是“天然的”治疗具有特殊兴趣，因为包含至少一种通式I的化合物的根据本发明的组合物可用于疾病预防和用作辅助治疗。

本发明的组合物特别适用于治疗、共治疗和预防关节中的软骨退化或软骨损伤，同样适用于治疗关节病症(例如退化性关节病症如骨关节炎)的软骨退化部分；或运动损伤。本发明的组合物可具有一种或多种以下的特性：其维持和/或改善关节健康，其预防关节僵直，其促进关节活动性，其提供柔软和/或灵活的关节，其润滑关节，其缓解关节炎疼痛，其减少关节问题，其提够关节保健，其治疗或预防关节退化，其提供关节完整性，其延迟或预防关节损伤的发展，其支持关节功能，其促进关节健康和功能，其天然地支持活泼个体的关节健康和活动性，其维持关节的活性灵活性(flexibility)，其促进关节灵活性和促进关节活动性(mobility)。

优选地，根据本发明的组合物中使用的通式I的化合物是α-曼果斯廷。

根据本发明的组合物中使用的通式I的化合物优选地以下述浓度使用，所述浓度使得对动物(包括人)施用至少0.005mg/kg体重/天。优选地，以通式I的纯净化合物重量为基础，动物(包括人)的每日消耗在0.01到50mg/kg体重/天的范围内，最优选地为0.1到15mg/kg体重/天的用量。

在本发明的范围内，动物表示任何动物，包括哺乳动物，其例子包括人。除人之外优选的哺乳动物例子是非反刍类或反刍类动物，包括猫、犬、单峰骆驼、骆驼、大象和马。

在另一实施方案中，本发明涉及营养药物组合物，其包含至少一种通式I的化合物和营养药物可接受的载体。

本文使用的术语营养药物组合物包括食物制品、食品、膳食补剂、营养补剂或用于食物制品或食品的补剂组合物。

优选地，营养药物组合物是膳食补剂、饮料或食物或动物饲料如宠物食物。

本文使用的术语食物制品是指适用于被人或动物消耗的任何食物或饲料。食物制备可以是经制备和包装的食物(例如蛋黄酱、色拉酱、面包或乳酪食物)或动物饲料(例如挤压和成粒的动物饲料、粗混合饲料或宠物食物组合物)。本文使用的术语食品是指适合人或动物消耗的任何物质。术语“食品补剂”是指用于补充人或动物膳食的小量化合物，其被包装在单个或多个剂量单位中。膳食补剂通常不提供大量的卡路里，但是可含有其它微量营养物(例如维生素或矿物)。术语营养补剂是指包含与卡路里来源组合的膳食补剂的组合物。在一些实施方案中，营养补剂是肉替代物或补剂(例如营养或能量棒或营养饮料或浓缩物)。

食物制品或食品为例如饮料(如非酒精饮品和酒精饮品)以及要被添加进饮用水和液体食物中的液体制剂，非酒精饮品为例如软饮、运动饮品、果汁(例如橙汁、苹果汁和葡萄汁)；柠檬水、茶、接近水的饮品和乳和其它乳制品饮品(例如酸乳饮品)和减肥饮品。在另一实施方案中，食物制品或食品是指包含本发明的组合物的固体或半固体的食物。这些形式可包括，但不限于烘焙的商品如蛋糕和曲奇、布丁、乳制品、糖膏(confection)、点心食物或冷冻糖膏或新产物(novelties)(例如冰激凌、奶昔)，制备的冷冻肉、糖果、点心制品(例如薯片)，液体食物如汤、涂抹物、酱、沙拉酱、制备的肉制品、乳酪、酸乳和任何其它含脂肪或油脂的食物，和食物成分(例如小麦粉)。

术语食物制品或食品还包括功能性食物和制备的食物制品，后者是指适合人消耗的任何预先包装的食物。

包括宠物食物组合物的动物饲料有利地包括旨在补充必需膳食需要的食物，以及调剂物(treats)(例如狗饼干)或其它食物补剂。包含本发明的组合物的动物饲料可以是干燥组合物(例如粗粒)、半潮湿组合物、潮湿组合物，或其任何混合物的形式。或者或另外，动物饲料是补剂，例如肉汤、引用水、酸乳、粉末、悬浮液、咀嚼物(chew)、调剂物(例如饼干)或任何其它递送形式。

本发明的膳食补剂可以以任何合适的方式被递送。在优选的实施方案中，膳食补剂被配制为用于口递送。本发明的膳食补剂的成分包含在可接受的用于口消耗的赋形剂和/或载体中。载体和由此产生的膳食补剂自身的实际形式不是关键的。载体可以是液体、凝胶、软胶囊、胶囊、粉末、固体片剂(包衣或非包衣的)、茶等等。膳食补剂优选地以片剂或胶囊的形式，最优选以硬明胶胶囊的形式。合适的赋形剂和/或载体包括麦芽糖糊精、碳酸钙、磷酸二钙、磷酸三钙、微晶纤维素、葡萄糖、米粉、硬脂酸镁、硬脂酸、交联羧甲基纤维素钠、淀粉羟乙酸钠、交聚维酮、蔗糖、植物胶、乳糖、甲基纤维素、聚维酮、羧甲基纤维素、玉米淀粉等等(包括其混合物)。优选的载体包括碳酸钙、硬脂酸镁、麦芽糖糊精及其混合物。使用传统的技术将多种成分和赋形剂和/或载体混合并形成想要的形式。本发明的片剂或胶囊可以用肠包衣包裹，所述肠包衣在约6.0到7.0的pH下溶解。在小肠中溶解而不在胃中溶解的合适肠包衣是醋酸邻苯二甲酸纤维素(cellulose acetate phthalate)。配制和施用技术的更多细节可见于最新版的Remington′s Pharmaceutical composition Sciences(MaackPublishing Co.，Easton，PA)。

在其它一些实施方案中，膳食补剂作为适合被消费者添加进食物或饮料中的粉末或液体提供。例如，在一些实施方案中，膳食补剂可以以粉末的形式被施用给个体，所述粉末例如要通过混合进饮料中使用，或通过搅拌进半固体的食物(如例如布丁、馅料(topping)、酱、浓汤(puree)、烹调的谷物或沙拉酱)中使用，或通过以其它方式添加进食物中使用。膳食补剂可含有一种或多种惰性成分，特别是如果期望限制由膳食补剂添加进食谱中的卡路里数时。例如，本发明的膳食补剂也可以含有任选的成分，包括例如草药、维生素、矿物、强化剂、着色剂、甜味剂、调味剂、惰性成分等等。

在一些实施方案中，膳食补剂还含有维生素和矿物，包括但不限于三碱基的(tribasic)磷酸钙或醋酸钙；二碱基的磷酸钾；硫酸镁或氧化镁；盐(氯化钠)；氯化钾或醋酸钾；抗坏血酸；正磷酸铁；烟酰胺；硫酸锌或氧化锌；泛酸钙；葡萄糖酸铜；核黄素；β-胡萝卜素；盐酸吡哆醇；硫胺单硝酸酯；叶酸；生物素；氯化铬或chromium picolonate；碘化钾；硒酸钾；钼酸钠；叶绿醌；维生素D3；氰钴铵素；亚硒酸钠；硫酸铜；维生素A；维生素C；肌醇；碘化钾。维生素和矿物的合适剂量可以通过参考U.S.RDA指南获得。

在其它一些实施方案中，本发明提供了包含本发明的组合物的营养补剂(例如能量棒或肉代替品棒或饮料)。营养补剂可以作为进餐或点心替换物使用，并通常提供养分卡路里。优选地，营养补剂以平衡的量提供碳水化合物、蛋白质和脂肪。营养补剂还可包含碳水化合物，单糖、中链长度糖或多糖或其组合。单糖可以针对想要的感觉特性选择。未烹饪的淀粉是复杂碳水化合物的一个例子。如果期望其维持其高分子量结构，则食物配制物或其部分中仅应该包含未经烹饪或加热加工的碳水化合物，因为加热会将复杂的碳水化合物分解为单纯的碳水化合物，其中单纯的碳水化合物是单糖或二糖。在一个实施方案中，营养补剂包含三种链长度水平的碳水化合物(简单、适中和复杂；例如蔗糖、麦芽糖糊精和未烹饪的玉米淀粉)来源的组合。

要掺入本发明的营养补剂中的蛋白质来源可以是用于营养配制物中的任何合适的蛋白质，其可包括乳清蛋白、乳清蛋白浓缩物、乳清粉末、卵、大豆粉、大豆乳、大豆蛋白、大豆蛋白分离物、酪蛋白酸盐(例如酪蛋白酸钠、酪蛋白酸钙钠、酪蛋白酸钙、酪蛋白酸钾)、动物和植物蛋白质及其混合物。选择蛋白质来源时，首先应当考虑蛋白质的生物学价值，最高的生物学价值在酪蛋白酸盐、乳清、乳清蛋白、卵清蛋白和全卵蛋白中发现。在一个优选的实施方案中，蛋白质是乳清蛋白浓缩物和酪蛋白酸钙的组合。这些蛋白质具有高生物学价值；即它们具有高比例的必需氨基酸。参阅Modern Nutrition in Health and Disease，eighth edition，Lea &Febiger，publishers，1986，especially Volume 1，pages 30-32。营养补剂可还含有其它成分，如其它维生素、矿物、抗氧化剂、纤维和其它膳食补剂(例如蛋白质、氨基酸、胆碱、卵磷脂、δ-3脂肪酸)的一种或组合。一种或若干种这些成分的选择是配制、设计、消费者偏好和最终用户的一个问题。添加进本发明的膳食补剂中的这些成分的用量是技术人员容易知道的。对这些用量的指南可以由针对儿童和成人的U.S.RDA提供。可以被添加的其它维生素和矿物包括，但不限于三碱基的磷酸钙或醋酸钙；二碱基的磷酸钾；硫酸镁或氧化镁；盐(氯化钠)；氯化钾或醋酸钾；抗坏血酸；正磷酸铁；烟酰胺；硫酸锌或氧化锌；泛酸钙；葡萄糖酸铜；核黄素；β-胡萝卜素；盐酸吡哆醇；硫胺单硝酸酯；叶酸；生物素；氯化铬或chromium picolonate；碘化钾；硒酸钾；钼酸钠；叶绿醌；维生素D3；氰钴铵素；亚硒酸钠；硫酸铜；维生素A；维生素C；肌醇；碘化钾。

营养补剂可以以多种形式和通过多种生产方法提供。在一个优选的实施方案中，为了制造食物棒，液体成分被烹饪；干燥成分与液体成分被添加进混合机中并混合，直到获得生面团相；将生面团放进挤压机中并挤压；将经挤压的生面团切成合适的长度；使产物冷却。除了本文明确列出的成分外，棒还可含有其它养分和填充剂以加强口味。

本领域技术人员理解：其它成分(例如填充剂、乳化剂、防腐剂等)可以被添加进本文所述的这些中，用于加工或制造营养补剂。

另外，调味剂、着色剂、香料、坚果等等可以被掺入营养药物组合物中。调味剂可以是有味的提取物、挥发油、巧克力调味剂、花生酱调味剂、曲奇碎屑、松脆米(crisp rice)、香草或任何可商业获得的调味剂的形式。有用的调味剂的例子包括，但不限于纯净的茴香提取物、仿造的香蕉提取物、仿造的樱桃提取物、巧克力提取物、纯净的柠檬提取物、纯净的橙提取物、纯净的薄荷提取物、仿造的菠萝提取物、仿造的朗姆提取物、仿造的草莓提取物或纯净的香草提取物；或挥发油，如香蜂叶油(balmoil)、月桂叶油、佛手柑油、柏木油(cedarwood oi)、胡桃油、樱桃油、桂皮油、丁香油或薄荷油；花生酱、巧克力调味剂、香草曲奇碎屑、奶油糖(butterscotch)或太妃糖(toffee)。在一个实施方案中，膳食补剂含有可可或巧克力。

乳化剂可以被添加用于营养药物组合物的稳定性。合适的乳化剂的例子包括，但不限于卵磷脂(例如来自卵或大豆)，和/或甘油单酯和甘油二酯。其它乳化剂对技术人员是显而易见的，对合适的乳化剂的选择将部分取决于配制物和最终产物。也可以向营养补剂中添加防腐剂以延长产物的货架寿命。优选地，使用如山梨酸钾、山梨酸钠、苯甲酸钾、苯甲酸钠、或EDTA钙二钠(calcium disodium EDTA)。

除了上述碳水化合物外，营养药物组合物可含有天然或人工的(优选低卡路里的)甜味剂，例如糖类、环己烷氨基磺酸盐(cyclamate)、天冬胺(aspartamine)、天冬甜素(aspartame)、安赛蜜K(acesulfame K)和/或山梨糖醇。如果营养补剂旨在被超重或肥胖的个体或患有II型糖尿病的个体(其易于患高血糖症)消耗，则这类人工甜味剂是期望的。

另外，可以向本发明的营养药物性组合物中添加多种维生素和矿物补剂，以获得一些膳食中缺乏的足够量的必需养分。多种维生素和矿物补剂也可以适用于疾病预防和防止生活方式引起的营养丧失和缺乏。

当然，通过营养药物组合物施用的根据本发明的组合物(其包含至少一种通式I的化合物)的剂量和比例可根据已知的因素改变，并可以由本领域的专家使用常规试验确定，或使用关于营养药物组合物配制的常见考虑决定，所述因素例如具体组合的生理特征及其施用模式和途径；接收者的年龄、健康和体重；症状的性质和程度；共存的治疗种类；治疗的频率；和想要的作用。

优选的是每份包含约0.05mg到500mg，优选地2.0mg到300mg的至少一种通式I的化合物的营养药物组合物。

另一方面，本发明涉及包含至少一种通式I的化合物和可药用载体的药物组合物。

本领域技术人员知道何种载体可以被用作可药用载体。合适的药物载体例如在本领域的标准参考文献——上文Remington′s PharmaceuticalSciences中有所描述。这类可药用载体的例子为适用于口/肠胃外/可注射施用的无机和有机载体材料，其包括水、明胶、阿拉伯胶、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油等等。

药物组合物可还含有常规的药物组合物添加剂和佐剂、赋形剂或稀释剂，其包括但不限于：水、任何来源的明胶、植物胶、木质素磺酸盐、滑石、糖、淀粉、阿拉伯胶、植物油、聚乙二醇、聚亚烷基二醇、调味剂、防腐剂、稳定剂、乳化剂、缓冲液、润滑剂、着色剂、湿润剂、填充剂等等。

在一个优选的实施方案中，药物组合物是粉末、片剂、胶囊、凝胶、液体或固体实施方案的形式。

药物组合物中各个组分的剂量和比例可以由本领域技术人员使用常见的临床前和临床试验确定，或使用关于营养药物组合物配制的常见考虑决定。

在一个优选的实施方案中，通式(I)的化合物通过药物组合物以单剂量或多剂量的方式被施用，以纯净衍生物的重量为基础，其用量为至少0.005mg/kg体重/天，优选地用量为0.01到50mg/kg体重/天，最优选地用量为0.1到15mg/kg体重/天。因此，药物组合物可例如包含每剂量单位(例如每胶囊或片剂)1mg到500mg的用量的通式I的化合物，或每日剂量5mg到每日剂量2000mg的液体配方。

根据本发明的营养药物和药物组合物可以是适用于施用给动物体(包括人体)的任何盖伦形式(galenic form)，更尤其是口施用中常规的任何形式，例如固体形式，例如作为食物或饲料(用的添加剂/补充剂)、食物或饲料预混物、强化的食物或饲料、片剂、丸剂、颗粒剂、锭剂、胶囊和泡腾配制剂(如粉末和片剂)，或液体形式，例如溶液、乳剂或悬浮液的形式，例如作为饮料、糊剂和油悬浮液。糊剂可以被填充进硬或软壳胶囊中，其中，胶囊具有例如(鱼、猪、家禽、牛)明胶、植物蛋白质和木质素磺酸盐(ligninsulfonate)的混合物。其它应用形式的例子是用于经皮、肠胃外、局部或可注射施用的形式。营养药物和药物组合物可以是受控(延迟)释放的配制剂的形式。药物组合物的例子也包括适用于局部应用的组合物，如霜剂、凝胶、喷雾、干燥胶棒、粉末等。

另外，可以向本发明的营养药物性组合物中添加多种维生素和矿物补剂，以获得一些膳食中缺乏的足够量的必需养分。多种维生素和矿物补剂也可以适用于疾病预防和防止生活方式引起的营养丧失和缺乏。

本发明还涉及在动物(包括人)中治疗、共治疗或预防关节中软骨退化或软骨损伤或用于在动物(包括人)中维护关节健康的方法，所述方法包括对需要的动物(包括人)施用有效量的至少一种通式I的化合物：

其中R¹和R²彼此独立地为C_1-8-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-8-烷氧基，优选地其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-6-烷氧基，进一步更优选地其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或甲氧基，最优选地为α-曼果斯廷。

术语“有效量的根据本发明的组合物”是指获得生理学效用所需的量。生理学效用可通过一次单个剂量或通过重复剂量达成。当然，施用的剂量可根据已知的因素变化并由本领域技术人员调节，所述因素例如具体组合的生理学特征及其施用模式和途径；接收者的年龄、健康和体重；症状的性质和程度；共存的治疗的种类；治疗的频率；和期望的效果。

实施例

α-曼果斯廷例如可商业得自Indofine Chemicals Company Inc，121Stryker Lane Hillsborough，NJ 08844或来自APIN chemicals。

实施例1：软明胶胶囊

通过常规步骤制备软明胶胶囊，其每粒胶囊提供100mg的至少一种通式I的化合物的剂量。合适的每日剂量是1到5粒胶囊。

其它成分：甘油、水、明胶、植物油。

实施例2：硬明胶胶囊

通过常规步骤制备硬明胶胶囊，其每粒胶囊提供基于纯净的衍生物而言75mg至少一种通式I的化合物的剂量。合适的每日剂量是1到5粒胶囊。

其它成分：

填充剂：乳糖或纤维素或纤维素衍生物，适量

润滑剂：硬脂酸镁，如果需要的话(0.5％)

实施例3：片剂

通过常规步骤来制备片剂，其每片提供100mg至少一种通式I的化合物作为活性成分和微晶纤维素、二氧化硅(SiO₂)、硬脂酸镁、交联羧甲基纤维素钠(crosscarmellose sodium)作为赋形剂(加至500mg)。

实施例4：软饮

可从以下的成分制备含有通式I的化合物的软饮：

在不掺入空气的情况下将果汁浓缩物和水溶性香料混合。将着色剂溶于去离子水中。将抗坏血酸和柠檬酸溶于水中。将苯甲酸钠溶于水中。果胶在搅拌下添加并溶解，同时煮沸。冷却溶液。预先混合橙油和油溶性香料。将F中提到的活性成分搅拌进A的果汁浓缩物混合物中。

为了制备软饮，在用Turrax匀化前将所有的组分A-F混合在一起，然后使用高压匀化器(p1＝200bar，p2＝50bar)匀化。

实施例5：α-曼果斯廷对涉及软骨建立(build-up)和分解(break-down)的基因 表达的影响

在关节软骨中，需要维持合成代谢(建立)和分解代谢(分解)事件之间的精密平衡，从而分别预防细胞外基质(ECM)的肥大和过度降解。ECM由胶原和蛋白聚糖建成，其为在合成代谢过程中被活化和表达的胶原基因(例如人胶原I和胶原II或聚集蛋白聚糖(aggrecan))基因)的产物。

分解代谢事件由下述基因的表达控制，所述基因例如编码最终降解胶原或蛋白聚糖的基质金属蛋白酶(MMP)的那些基因。在MMP中，MMP-1、MMP-3和MMP-13在软骨降解中起降解ECM的主要作用。

α-曼果斯廷得自APIN chemicals，根据说明书其含有＞98％的α-曼果斯廷。在该实验中，在来自膝的正常人关节细胞(得自Cambrex)中体外测量α-曼果斯廷(12.5和6.25μM)对人胶原I、II和聚集蛋白聚糖以及人MMP-3和12的影响。同时进行无α-曼果斯廷的对照实验，将这些基因的表达与基底水平比较(对照中的基因表达百分比设定为100％)。

用IL-1β处理细胞，IL-1β是诱导软骨分解的天然介质之一，并在骨关节炎软骨组织及其衍生的细胞中被大量检测到。用IL-1β处理细胞能引起涉及分解代谢事件的基因(如MMP)的表达。用IL-1β处理细胞还降低了胶原表达水平(与未处理的细胞比较)。

根据得自生产商的说明书，在细胞培养基上培养正常的人关节细胞(购自Cambrex)。对于实验处理而言，将细胞接种在6孔平板中并培养两天，直到它们几乎达到汇合。然后用具有所示α-曼果斯廷用量的IL1-β(10ng/ml)活化细胞，并孵育4小时。如Richard et al.Mol.Nutr.Food Res.49，431-442，2005所详述的，从培养的细胞中提取总细胞RNA，并进行反转录。还如Richard et al.Mol.Nutr.Food Res.49，431-442，2005中所述，通过定量实时PCR测定不同基因的表达水平。该实验的结果在下表1中展示：

表1.α-曼果斯廷对人软骨细胞(SW1353)中基因表达的影响。

基因	0μMα-曼果斯廷	12.5μMα-曼果斯廷	6.25μMα-曼果斯廷
				人MMP-3	100％	73％	78％
人MMP-13	100％	77％	73％
				人胶原I	100％	105％	126％
人胶原II	100％	247％	127％
				聚集蛋白聚糖	100％	157％	172％

α-曼果斯廷强烈地并且是剂量依赖性地降低了有助于软骨降解的基因(MMP-3和MMP-13)的表达，而又刺激了与软骨建立有关的一些基因(人胶原I、人胶原II、聚集蛋白聚糖)的表达。这些结果表明α-曼果斯廷不仅防止软骨降解，而且帮助再生软骨组织。

Claims (10)

1.至少一种通式I的化合物用于制造营养药物组合物或药物组合物的用途

其中R¹和R²彼此独立地为C_1-8-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-8-烷氧基，所述组合物用于治疗、共治疗或预防关节中的软骨退化或软骨损伤，用于软骨再生或软骨维护，或用于维护关节健康。

2.权利要求1的用途，其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或C_1-6-烷氧基。

3.权利要求1或2的用途，其中R¹和R²彼此独立地为C_1-6-烷基(或烯基)，R³和R⁴彼此独立地为羟基或甲氧基。

4.权利要求1到3中任一项的用途，其中所述通式I的化合物是α-曼果斯廷。

5.营养药物组合物，其包含至少一种权利要求1到4中任一项定义的通式I的化合物和营养药物可接受的载体。

6.权利要求5的营养药物组合物，其为膳食补剂、饮料或食物或动物饲料。

7.权利要求5或6的营养药物组合物，其中至少一种权利要求1到4中任一项定义的通式I的化合物的量在每份0.05mg到500mg的范围内，优选地在每份2.0mg到300mg的范围内。

8.药物组合物，其包含至少一种权利要求1到4中任一项定义的通式I的化合物和药物可接受的载体。

9.在包括人的动物中用于治疗、共治疗或预防关节中的软骨退化或软骨损伤，用于软骨再生或软骨维护，或用于维护关节健康的方法，所述方法包括：向需要其的包括人的动物施用至少一种有效剂量的如权利要求1到4中任一项定义的通式I的化合物。

10.权利要求9的方法，其中包括人的动物选自由人、犬、猫、马和骆驼组成的组。