CN101484457B

CN101484457B - 作为用于治疗增殖病症的蛋白激酶PLK1抑制剂的4,5-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-f]蝶啶

Info

Publication number: CN101484457B
Application number: CN200780021866.9A
Authority: CN
Inventors: J·-D·沙里耶; D·凯; R·克内特尔
Original assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Current assignee: Vertex Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2006-04-12
Filing date: 2007-04-12
Publication date: 2014-09-03
Anticipated expiration: 2027-04-12
Also published as: CN101484457A; ZA200809016B

Abstract

本发明涉及可用作蛋白激酶抑制剂的式(I)的化合物。本发明还提供了包括所述化合物的药学上可接受的组合物和在治疗多种疾病、障碍或病症中使用所述组合物的方法。本发明还提供了用于制备本发明的化合物的方法。

Description

作为用于治疗增殖病症的蛋白激酶PLK1抑制剂的4,5-二氢-[1,2,4]三唑并[4,3-f]蝶啶

优先权要求

本申请要求2006年4月12日提交的美国申请序号60/791,327和2006年8月18日提交的美国申请序号60/838,720的优先权，这两篇文献通过引用结合到本文中。

发明技术领域

本发明涉及可用作蛋白激酶抑制剂的化合物。本发明还提供含本发明化合物的药学上可接受的组合物，和用这些组合物治疗各种病症的方法。本发明还提供制备本发明化合物的方法。

发明背景

近年来，对与疾病有关的酶和其它生物分子的结构更确切的了解对寻找新的治疗药物有很大帮助。作为本发明研究对象的一类重要的酶是蛋白激酶。

多种蛋白激酶组成结构相关的酶的大家族，这些酶的作用是控制细胞中多种信号转导处理(参见Hardie，G and Hanks，S.TheProtein Kinase Facts Book，I and II，Academic Press，San Diego，CA：1995)。据认为，由于它们的结构保守性和催化功能，蛋白激酶由共同祖基因进化产生。几乎所有激酶含相似的250-300氨基酸催化域。可按照它们进行磷酸化的相应底物(例如蛋白-酪氨酸、蛋白-丝氨酸/苏氨酸、脂质等)将激酶分为多个家族。已鉴定出通常响应这些激酶家族中各激酶的序列基元(参见例如Hanks，S.K.，Hunter，T.，FASEB J.1995，9，576-596；Knighton et al.，Science 1991，253，407-414；Hiles et al，Cell1992，70，419-429；Kunz et al，Cell 1993，73，585-596；Garcia-Bustos etal，EMBO J 1994，13，2352-2361)。

一般而言，通过将三磷酸核苷的磷酰基转运到涉及信号途径的蛋白受体上，蛋白激酶介导细胞内信号。这些磷酸化事件起分子开/关转换的作用，分子开/关转换可调节或调控靶蛋白生物功能。这些磷酸化事件最终被触发，以响应多种细胞外和其它刺激。此类刺激的实例包括环境和化学应激信号(例如休克、热休克、紫外线辐照、细菌内毒素和H₂O₂)、细胞因子(例如白介素-1(IL-1)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)，和生长因子(例如粒细胞巨噬细胞-集落刺激因子(GM-CSF)和成纤维细胞生长因子(FGF))。细胞外刺激可影响一种或多种细胞反应，这些反应与细胞生长、迁移、分化、激素分泌、转录因子激活、肌肉收缩、葡萄糖代谢、蛋白合成控制、细胞周期的保留和调节有关。

许多疾病与由上述蛋白激酶-介导的事件引发的异常细胞反应有关。这些疾病包括但不限于癌症、自身免疫性疾病、炎性疾病、骨病、代谢疾病、神经和神经变性疾病、心血管疾病、过敏和哮喘、早老性痴呆和激素相关疾病。因此，已在药物化学中付出了大量努力，以寻找作为有效治疗药物的蛋白激酶抑制剂。

马球样(Polo-like)激酶(Plk)属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族，这些激酶在从酵母到人的不同种之间高度保守(在Lowery DM et al.，Oncogene2005，24；248-259中的综述)。Plk激酶在细胞周期中具有多种作用，这些作用包括控制进入有丝分裂和通过有丝分裂递进。

Plk1是Plk家族成员中被最充分表征的一员。Plk1在有丝分裂指数高的组织中广泛表达，且最丰富。在有丝分裂中，Plk1的蛋白水平升高并达到峰值(Hamanaka，R et al.，J Biol Chem 1995，270，21086-21091)。据报道，Plk1的底物是已知调节进入有丝分裂和通过有丝分裂递进的所有分子，它们包括CDC25C、细胞周期蛋白B、p53、APC、BRCA2和蛋白酶体。在多种类型的癌症中，Plk1上调，表达水平与疾病的严重程度相关(Macmillan，JC et al.，Ann Surg Oncol 2001，8，729-740)。Plk1是致癌基因，可转化NIH-3T3细胞(Smith，MR et al.，Biochem Biophys Res Commun 1997，234，397-405)。通过siRNA、反义、显微注射抗体去除或抑制Plk1或将Plk1的显性负构件转染到细胞中，可减少体外肿瘤细胞增殖和生存力(Guan，R et al.，Cancer Res2005，65，2698-2704；Liu，X et al.，Proc Natl Acad Sci U S A2003，100，5789-5794，Fan，Y et al.，World J Gastroenterol 2005，11，4596-4599；Lane，HA et al.，J Cell Biol 1996，135，1701-1713)。去除Plk1的肿瘤细胞激活纺锤体关卡，且在纺锤体形成、染色体排列和分离以及胞质分裂中造成缺陷。据报道，生存力丧失是诱导凋亡的结果。相反，据报道，正常细胞在去除Plk1后仍保持生存力。通过siRNA体内剔除Plk1或使用显性负构件，导致异种移植模型中肿瘤生长抑制或退化。

Plk2主要在细胞周期的G1期表达，定位在分裂间期细胞中的中心体。剔除Plk2的小鼠发育正常，可生育且存活率正常，但比野生型小鼠小约20％。剔除Plk2的动物细胞在整个细胞周期比正常小鼠的细胞发育慢(Ma，S et al.，Mol Cell Biol 2003，23，6936-6943)。通过siRNA去除Plk2或将激酶钝化突变体转染到细胞可阻断中心粒复制。部分通过抑制p53响应，Plk2下调也使肿瘤细胞对紫杉醇增敏，且促进有丝分裂突变(Burns TF et al.，Mol Cell Biol 2003，23，5556-5571)。

Plk3在整个细胞周期中均表达，并从G1增加至有丝分裂。在高度增殖的卵巢肿瘤和乳腺癌中表达被上调，它与预后恶化有关(Weichert，W et al.，Br J Cancer 2004，90，815-821；Weichert，W et al.，Virchows Arch 2005，446，442-450)。除调节有丝分裂外，据信，Plk3还涉及细胞周期中高尔基体断裂和DNA-损伤响应。据报道，通过显性负表达抑制Plk3可促进DNA损伤后p53非依赖型凋亡，和抑制肿瘤细胞的集落形成(Li，Z et al.，J Biol Chem 2005，280，16843-16850。

Plk4的结构与其它Plk家族成员更不相同。去除该激酶可造成癌细胞凋亡(Li，J et al.，Neoplasia 2005，7，312-323)。剔除Plk4的小鼠在E7.5停滞，进行有丝分裂的细胞比例高，且部分染色体分离(Hudson，JW et al.，Current Biology 2001，11，441-446)。

蛋白激酶家族的分子涉及肿瘤细胞生长、增殖和存活。因此，非常需要开发可用作蛋白激酶抑制剂的化合物。有关Plk激酶是细胞分裂要素的证据很可信。阻断细胞周期是已认可的抑制肿瘤细胞增殖和存活的临床方法。因此，需要开发可用作Plk家族蛋白激酶(例如Plk1、Plk2、Plk3和Plk4)的抑制剂，此类抑制剂可抑制肿瘤细胞的增殖和减少肿瘤细胞的成活力，尤其是对开发新的癌症的治疗药物存在非常强烈的医学需要。

发明概述

本发明涉及式I的化合物

其中：

环A是5元杂芳基环，其中所述环任选地被以下基团取代：C_1-6卤代烷基、卤素、NO₂、-OH、-CN或任选被取代的C_1-6烷基；

X¹是键、-O-、-NR⁸-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；

R¹是H、C_1-10脂族(基团)、C_3-10环脂族(基团)、C_6-10芳基、5-10元杂芳基或3-10元杂环基，其中所述R¹任选地被0-5个J¹取代；

每一个R²和R³独立地是H、C_1-10脂族(基团)或C_3-10环脂族(基团)，其中每一个R²和R³任选地并且独立地分别被0-5个J²和J³取代，或者

R²和R³，与它们所连接的碳原子一起，形成3-8元饱和或部分不饱和的含0-4个独立地选自O、N和S的杂原子的单环，其中所述由R²和R³形成的单环任选地被0-4个J²³取代；

R⁴是H、-C(O)R、-C(O)OR、-C(O)NRR′、C_1-10脂族(基团)、C_3-10环脂族(基团)、C_6-10芳基、C_5-10杂芳基、3-10元杂环基、(C_1-6脂族)-(C_3-10环脂族(基团))、(C_1-6脂族)-(C_6-10芳基)或(C_1-6脂族)-(5-10元杂芳基)，其中所述R⁴任选地被0-5个J⁴取代；

R⁸是H、C_1-6脂族(基团)、C_3-8环脂族(基团)、-C(O)R、-C(O)OR或-C(O)NRR′；

每一个J¹独立地是C_1-6卤代烷基、卤素、NO₂、CN、Q或-Z-Q，或者结合在一起的两个J¹可能任选地形成＝O；

每一个Z独立地是C_1-6脂族(基团)，其中所述C_1-6脂族(基团)中的0-3个-CH₂-单元任选地被替换为-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-C(＝NR)-、-C(＝NOR)-、-S(O)-或-S(O)₂-，其中所述C_1-6脂族(基团)中的任何未被替换的-CH₂-单元任选地被0-2个J^Z取代；

每一个Q独立地是H、C_1-6脂族(基团)、3-8-元芳族或非芳族的具有0-3个独立地选自O、N和S的杂原子的单环或8-12元芳族或非芳族的具有0-5个独立地选自O、N和S的杂原子的双环体系，其中每一个Q任选地被0-5个J^Q取代；

每一个J²和J³独立地是C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)或-(C_1-4烷基)_n-V¹，其中

n是0或1，

每一个V¹独立地是卤代(C_1-4脂族(基团))、-O(卤代C_1-4脂族(基团))、卤素、NO₂、CN、OH、OR＂SH、SR＂、NH₂、NHR＂、N(R＂)₂、COH、COR＂、CO₂H、CO₂R＂、CONH₂、CONHR＂、CONR＂₂、OCOR＂、OCONH₂、OCONHR＂、OCON(R＂)₂、NHCOR＂、NR＂COR＂、NHCO₂R＂、NR＂CO₂R＂、NHCO₂H、NR＂CO₂H、NHCONH₂、NHCONHR＂、NHCON(R＂)₂、SO₂NH₂、SO₂NHR＂、SO₂N(R＂)₂、NHSO₂R＂、NR＂SO₂R＂，或者

V¹是选自C_3-6环脂族(基团)、苯基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的环状基团，其中所述环状基团任选地被0-3个J^V取代；

每一个R＂独立地是未被取代的C_1-4脂族(基团)，或者键合至相同原子的相同的J²和J³中的两个，一起可能任选地形成＝O；

每一个J^Z和J^V独立地是卤素、C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)、NO₂、CN、OH、NH₂、NH(C_1-4脂族(基团))、N(C_1-4脂族(基团))₂、-O(C_1-4脂族(基团))、-CO₂H、-CO₂(C_1-4脂族(基团))、-O(卤代C_1-4脂族(基团))或卤代(C_1-4脂族(基团))；

每一个J^Q、J⁴和J²³独立地是-M或-Y-M；

每一个Y独立地是未被取代的C_1-6脂族(基团)，其中所述C_1-6脂族(基团)中的0-3个-CH₂-单元任选地被替换为-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-S(O)-或-S(O)₂-；

每一个M独立地是H、C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)、卤代(C_1-4脂族(基团))、O(卤代C_1-4脂族(基团))、3-6元杂环基、卤素、NO₂、CN、OH、OR′、SH、SR′、NH₂、NHR′、N(R′)₂、COH、COR′、CO₂H、CO₂R′、CONH₂、CONHR′、CONR′₂、OCOR′、OCONH₂、OCONHR′、OCON(R′)₂、NHCOR′、NR′COR′、NHCO₂R′、NR′CO₂R′、NHCO₂H、NR′CO₂H、NHCONH₂、NHCONHR′、NHCON(R′)₂、SO₂NH₂、SO₂NHR′、SO₂N(R′)₂、NHSO₂R′或NR′SO₂R′；

每一个R独立地是H或未被取代的C_1-6脂族(基团)；和

每一个R′是未被取代的C_1-6脂族(基团)，或者两个R′基团，与它们键接的原子一起，形成未被取代的3-8元饱和或部分不饱和的具有0-1个独立地选自O、N和S的杂原子的单环。

本发明化合物及其药学上可接受的组合物是有效的蛋白激酶抑制剂。在某些实施方案中，这些化合物是有效的PLK蛋白激酶抑制剂；在某些实施方案中，是PLK1蛋白激酶抑制剂。这些化合物或其药学上可接受的盐具有本文中定义的式I。

这些化合物及其药学上可接受的组合物可用于治疗或预防多种疾病、障碍或病症，它们包括但不限于自身免疫性、炎性、增殖或过度增殖疾病、神经变性疾病或免疫介导的疾病。由本发明提供的化合物也可用于在生物学和病理学现象中的激酶研究；由此类激酶介导的细胞内信号转导途径的研究和新的激酶抑制剂的对比评价。

本发明化合物包括本文中所述的那些化合物，通过本文中公开的类、亚类和具体化合物进一步说明(参见例如实施方案1-22)。除另有说明外，采用本文中使用的以下定义。对于本发明的目的，按照Periodic Table of the Elements，CAS version，Handbook of Chemistryand Physics，第75版鉴定化学元素。另外，有关有机化学的一般性原则参见＂Organic Chemistry＂，Thomas Sorrell，University Science Books，Sausalito：1999和＂March′s Advanced Organic Chemistry＂，第5版，Ed.：Smith，M.B.and March，J.，John Wiley & Sons，New York：2001所述，这些文献的全部内容通过引用结合到本文中。

本文中所述原子的特定数目范围包括其中任何整数。例如，具有1-4个原子的组可具有1、2、3或4个原子。

本文中所述本发明化合物可任选被一个或多个取代基取代，例如以上一般性所述或通过本发明特定类、亚类和具体化合物举例说明的那些。应认识到，短语“任选取代的”与短语“取代的或未被取代的”可互换使用。一般而言，术语“取代”无论位于术语“任选”之前或之后，均指在给定结构中氢原子团被特定取代基置换。除另有说明外，任选取代的基团在基团的各可取代位置可具有取代基，且当在任何给定结构中一个以上的位置可被选自指定基团的一个以上的取代基取代时，在每个位置中的取代基可相同或不同。本发明设想的取代基组合优选是导致形成稳定的或化学上可行的化合物的那些取代基组合。

本文中使用的术语“稳定的”是指为了本文中公开的一个和多个目的，当经历允许它们的制备、检测、回收、纯化和使用的条件时，基本上未改变的化合物。在某些实施方案中，稳定的化合物或化学上可行的化合物是当在40℃或更低温度下保存至少一周时，在无水分存在或其它化学反应条件下基本上未改变的化合物。

本文中使用的术语“脂族”或“脂族基团”表示直链(即非支链)或支链，取代的或未被取代的烃链，该烃链完全饱和或含一个或多个不饱和单元，其与分子的其余部分有一个连接点。

除另有说明外，脂族基团含1-20个脂族碳原子。在某些实施方案中，脂族基团含1-10个脂族碳原子。在其它实施方案中，脂族基团含1-8个脂族碳原子。在还其它实施方案中，脂族基团含1-6个脂族碳原子，在又其它实施方案中，脂族基团含1-4个脂族碳原子。合适的脂族基团包括但不限于直链或支链，取代的或未被取代的烷基、烯基或炔基。具体实例包括但不限于甲基、乙基、异丙基、正丙基、仲丁基、乙烯基、正丁烯基、乙炔基和叔丁基。

术语“脂环族”(或“碳环”或“碳环基”或“环烷基”)是指完全饱和或含一个或多个不饱和单元的单环C₃-C₈烃或双环C₈-C₁₂烃，但这些烃不是芳族，与分子其余部分有一个连接点，其中在所述双环环系统中的任何单个环具有3-7个成员。合适的脂环族基团包括但不限于环烷基和环烯基。具体实例包括但不限于环己基、环戊烯基和环丁基。

本文中使用的术语“杂环”、“杂环基”或“杂环的”表示非芳族单环、双环或三环环系统，其中一个或多个环成员是独立选择的杂原子。在某些实施方案中，“杂环”、“杂环基”或“杂环的”基团具有3-14个环成员，其中一个或多个环成员是独立选自氧、硫、氮或磷的杂原子，且系统中的各环含3-7个环成员。

合适的杂环包括但不限于3-1H-苯并咪唑-2-酮、3-(1-烷基)-苯并咪唑-2-酮、2-四氢呋喃基、3-四氢呋喃基、2-四氢噻吩基、3-四氢噻吩基、2-吗啉代、3-吗啉代、4-吗啉代、2-硫代吗啉代、3-硫代吗啉代、4-硫代吗啉代、1-吡咯烷基、2-吡咯烷基、3-吡咯烷基、1-四氢哌嗪基、2-四氢哌嗪基、3-四氢哌嗪基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、1-吡唑啉基、3-吡唑啉基、4-吡唑啉基、5-吡唑啉基、1-哌啶基、2-哌啶基、3-哌啶基、4-哌啶基、2-噻唑烷基、3-噻唑烷基、4-噻唑烷基、1-咪唑烷基、2-咪唑烷基、4-咪唑烷基、5-咪唑烷基、二氢吲哚基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、苯并硫杂环戊烷(benzothiolane)、苯并二噻烷(benzodithiane)和1，3-二氢-咪唑-2-酮。

环状基团(例如脂环族和杂环)可以是线型稠合环、桥环或螺环。

术语“杂原子”表示氧、硫、氮、磷或硅中的一个或多个(包括氮、硫、磷或硅的任何氧化形式；任何碱性氮的季铵化形式；或杂环的可取代的氮例如N(如在3，4-二氢-2H-吡咯基中)、NH(如在吡咯烷基中)或NR⁺(如在N-取代的吡咯烷基中))。

本文中使用的术语“不饱和”表示具有一个或多个不饱和单元的部分。

本文中使用的术语“非芳族”描述饱和或部分不饱和的环。

本文中使用的术语“烷氧基”或“烷硫基(thioalkyl)”是指前文中定义的烷基通过氧(“烷氧基”)或硫(“烷硫基”)原子连接。

术语“卤代烷基”、“卤代烯基”、“卤代脂族基团”和“卤代烷氧基”表示视情况而定可被一个或多个卤素原子取代的烷基、烯基或烷氧基。术语“卤素”、“卤基”和＂卤代＂表示F、Cl、Br或I。

单独或作为更大部分如在“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中的一部分使用的术语“芳基”是指具有总数5-14个环成员的单环、双环和三环环系统，其中系统中的至少一个环是芳环，和其中系统中的各环含3-7个环成员。术语“芳基”可与术语“芳环”互换使用。

单独或作为较大部分如在“杂芳烷基”或“杂芳基烷氧基”中的一部分使用的术语“杂芳基”是指具有总数5-14个环成员的单环、双环和三环环系统，其中系统中至少一个环是芳环，系统中至少一个环含一个或多个杂原子，和其中系统中的各环含3-7个环成员。术语“杂芳基”可与术语“杂芳环”或术语“杂芳族”互换使用。合适的杂芳环包括但不限于2-呋喃基、3-呋喃基、N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基、苯并咪唑基、3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基、2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基、N-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基、哒嗪基(例如3-哒嗪基)、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、四唑基(例如5-四唑基)、三唑基(例如2-三唑基和5-三唑基)、2-噻吩基、3-噻吩基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基(例如2-吲哚基)、吡唑基(例如2-吡唑基)、异噻唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，3-三唑基、1，2，3-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、嘌呤基、吡嗪基、1，3，5-三嗪基、喹啉基(例如2-喹啉基、3-喹啉基、4-喹啉基)和异喹啉基(例如1-异喹啉基、3-异喹啉基或4-异喹啉基)。

本文中使用的术语“保护基”和“保护基团”可互换使用，是指用于临时性封闭具有多个活性部位的化合物中的一个或多个需要的官能团的试剂。在某些实施方案中，保护基具有一个或多个，或优选所有以下特性：a)可选择性加入官能团，得到高收率的保护底物，即b)对在一个或多个其它反应部位发生的反应稳定；和c)可通过不进攻再生的脱保护的官能团的试剂以好的收率选择性除去。如本领域技术人员理解的，在一些情况中，该试剂不进攻化合物中的其它反应性基团。在其它情况中，该试剂也可以与化合物中的其它反应性基团反应。在Greene，T.W.，Wuts，P.G在＂Protective Groups in OrganicSynthesis＂，第3版，John Wiley & Sons，New York：1999(和该书的其它版本)中对举例说明的保护基有详细描述，其全部内容通过引用结合到本文中。本文中使用的术语“氮保护基”是指用于临时性封闭多官能化合物中的一个或多个需要的氮反应部位的物质。优选的氮保护基也具有以上举例说明的特性，在Greene，T.W.，Wuts，P.G在＂ProtectiveGroups in Organic Synthesis＂，第7章，第3版，John Wiley & Sons，NewYork：1999中对某些举例说明的氮保护基也有详细描述，其全部内容通过引用结合到本文中。

在某些实施方案中，烷基或脂族链可任选被另一个原子或基团置换。这意味着烷基或脂族链的亚甲基单元任选被所述其它原子或基团置换。此类原子或基团的实例包括但不限于-NR-、-O-、-C(O)-、-C(＝N-CN)-、-C(＝NR)-、-C(＝NOR)-、-S-、-SO-或-SO₂-。这些原子或基团可以结合而形成更大的基团。这样的基团的实例包括但不限于-OC(O)-、-C(O)CO-、-CO₂-、-C(O)NR-、-C(＝N-CN)、-NRCO-、-NRC(O)O-、-SO₂NR-、-NRSO₂-、-NRC(O)NR-、-OC(O)NR-和-NRSO₂NR-，其中R的定义同本文。

除另有说明外，该任选的置换形成化学稳定的化合物。任选的置换可发生在链中和链的任一末端；即发生在连接点和/或末端。只要可形成化学稳定的化合物，两个任选的置换也可在链中彼此相邻发生。任选的置换也可完全置换链中的所有碳原子。例如C₃脂族基团可任选被-NR-、-C(O)-和-NR-置换，形成-NRC(O)NR-(脲)。

除另有说明外，如果置换发生在末端，则置换原子与末端上的H连接。例如，如果-CH₂CH₂CH₃任选被-O-置换，得到的化合物可以是-OCH₂CH₃、-CH₂OCH₃或-CH₂CH₂OH。

除另有说明外，本文中所示结构还要包括所有异构形式(例如该结构的对映异构、非对映异构、几何异构、构象异构和旋转异构的形式)。例如各不对称中心的R和S构型，(Z)和(E)双键异构体和(Z)和(E)构象异构体都包括在本发明内。如本领域技术人员理解的，取代基可围绕任何可旋转键自由旋转。例如，所示取代基也代表

因此，本发明化合物的单一立体化学异构体和对映异构、非对映异构、几何异构、构象异构或旋转异构的混合物在本发明范围内。

除另有说明外，本发明化合物的所有互变异构体均在本发明范围内。

另外，除另有说明外，本文中所示结构还要包括不同之处仅在于存在一个或多个同位素富集原子的化合物。例如，具有本发明结构，但不同之处在于氢被氘或氚取代或碳被¹³C-或¹⁴C-富集碳置换的化合物在本发明范围内。此类化合物可用于例如生物测定的分析工具或探针。

本发明化合物能够以治疗用的游离形式存在，或适当时，以药学上可接受的盐的形式存在。

本文中使用的术语“药学上可接受的盐”是指适合预定用途的化合物的盐。在某些实施方案中，盐适用于与人和低级动物的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应等，具有合理的利益/风险比。在其它实施方案中，盐可适用于体外分析、动力学研究、晶体学研究等。

在本领域中熟知药学上可接受的盐。例如，S.M.Berge etal.在J.Pharmaceutical Sciences，1977，66，1-19中详细论述了药学上可接受的盐，其通过引用结合到本文中。本发明化合物药学上可接受的盐包括由合适的无机和有机酸和碱衍生的那些盐。在化合物最后分离和纯化期间，可原位制备这些盐。可通过1)使游离形式的纯化化合物与合适的有机或无机酸反应，2)将由此形成的盐分离，制备酸加成盐。

药学上可接受的无毒酸加成盐实例是与无机酸例如盐酸、氢溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸或与有机酸例如乙酸、草酸、马来酸、酒石酸、柠檬酸、琥珀酸或丙二酸或通过用本领域中使用的其它方法例如离子交换形成的氨基盐。其它药学上可接受的盐包括己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、环戊烷丙酸盐、二葡糖酸盐、十二烷基硫酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、葡庚酸盐、甘油磷酸盐、甘醇酸盐、葡糖酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、氢碘酸盐、2-羟基-乙磺酸盐、乳糖酸盐(lactobionate)、乳酸盐、月桂酸盐、十二烷基硫酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、甲磺酸盐、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、palmoate、果胶酯酸盐(pectinate)、过硫酸盐、3-苯基丙酸盐、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、对甲苯磺酸盐、十一酸盐、戊酸盐等。由适当的碱衍生的盐包括碱金属、碱土金属、铵和N⁺(C_1-4烷基)₄。盐本发明还设想本文中公开化合物的任何碱性含氮基团的季铵化。可通过此类季铵化得到可在水或油中溶解或分散的产物。

可通过1)使酸形式的纯化化合物与合适的有机或无机碱反应，2)将由此形成的盐分离，制备碱加成盐。碱加成盐包括碱金属或碱土金属盐。代表性的碱金属或碱土金属盐包括钠、锂、钾、钙、镁等。当合适时，其它药学上可接受的盐包括无毒铵、季铵和用反荷离子例如卤离子、氢氧根、羧酸根、硫酸根、磷酸根、硝酸根、磺酸低级烷基酯和磺酸芳基酯形成的胺阳离子。其它酸和碱，虽然本身不是药学上可接受的，但可用于制备可用作中间体的盐，通过该中间体得到本发明化合物及其药学上可接受的酸或碱加成盐。

使用以下缩写：

LG 离去基团

TBTU 四氟硼酸O-(苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲鎓

DMSO 二甲亚砜

DMA 二甲基乙酰胺

TCA 三氯乙酸

ATP 三磷酸腺苷

DEAD 偶氮二羧酸二乙酯

HEPES 4-(2-羟基乙基)-1-哌嗪乙磺酸

BSA 牛血清白蛋白

DTT 二硫苏糖醇

MOPS 4-吗啉丙磺酸

NMR 核磁共振

HPLC 高效液相色谱

LCMS 液相色谱-质谱

TLC 薄层层析

Rt 保留时间

发明详述

在一些方面中，本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的式I的化合物或药学上可接受的盐

其中：

X¹是键、-O-、-NR⁸-、-S-、-S(O)-或-S(O)₂-；

n是0或1，

每一个V¹独立地是卤代(C_1-4脂族(基团))、-O(卤代C_1-4脂族(基团))、卤素、NO₂、CN、OH、OR＂、SH、SR＂、NH₂、NHR＂、N(R＂)₂、COH、COR＂、CO₂H、CO₂R＂、CONH₂、CONHR＂、CONR＂₂、OCOR＂、OCONH₂、OCONHR＂、OCON(R＂)₂、NHCOR＂、NR＂COR＂、NHCO₂R＂、NR＂CO₂R＂、NHCO₂H、NR＂CO₂H、NHCONH₂、NHCONHR＂、NHCON(R＂)₂、SO₂NH₂、SO₂NHR＂、SO₂N(R＂)₂、NHSO₂R＂、NR＂SO₂R＂，或者

每一个J^Q、J⁴和J²³独立地是-M或-Y-M；

每一个R独立地是H或未被取代的C_1-6脂族(基团)；和

在一些实施方案中，环A是三唑环，其任选地被以下基团取代：C_1-6卤代烷基、卤素、NO₂、OH、CN或任选被取代的C_1-6烷基。

在某些实施方案中，环A是咪唑环，其任选地被以下基团取代：C_1-6卤代烷基、卤素、NO₂、OH、CN或任选被取代的C_1-6烷基。

在一些实施方案中，X¹是-O-、-NR⁸-或-S-。

在其它实施方案中，X¹是-NR⁸-。

在一些实施方案中，R⁸是H或-C(O)OR，其中R是C_1-6烷基；例如R⁸是-C(O)OCH₃。

在某些实施方案中，R¹是H、任选被取代的C_6-10芳基、任选被取代的芳烷基或任选被取代的C_5-10杂芳基。

在一些实施方案中，R¹任选地被-O-Q、卤素、-C(O)N(R)-Q或Q取代，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

在一些实施方案中，R¹是苯基，该苯基任选地在对位被-C(O)N(R)-Q取代并且任何剩余位置被-O-Q、卤素或Q取代，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

在一些实施方案中，J^Q是C_1-6脂族(基团)，其任选被C_3-6环脂族(基团)、卤代(C_1-4脂族(基团))、O(卤代C_1-4脂族(基团))或3-6元杂环基取代。

在一些实施方案中，R¹是杂芳基，该杂芳基被-C(O)N(R)-Q取代并且任何剩余位置被-O-Q或Q取代，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

在一些实施方案中，-C(O)N(R)-Q中的Q是H、C_1-4脂族(基团)、C_1-4卤代脂族(基团)、C_3-7环脂族(基团)、C_3-7杂环脂族(基团)、C_1-6烷氧基、(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基或C_1-6卤代烷氧基。

在一些实施方案中，其中R¹是苯基，该苯基在对位被Q取代，该苯基在任何剩余位置任选地被卤素、C_1-4脂族(基团)、C_1-4卤代脂族(基团)、C_3-7环脂族(基团)、C_3-7杂环脂族(基团)、C_1-6烷氧基、(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基或C_1-6卤代烷氧基取代。

在一些实施方案中，-C(O)N(R)-Q的Q是甲基、乙基、1-甲基哌啶-4-基、环丙基、环戊基、3-呋喃基、3-氟代吡咯烷-1-基或3，3-二氟环丁基。

在一些实施方案中，R¹是任选被取代的C_1-6烷基或C_3-7环烷基。

在某些实施方案中，R¹是苯基，该苯基在苯基的对位被至少一种/个Q取代，并且Q是氟、羧基、三氟甲基、4-甲基哌嗪-1-基、二氟甲氧基、吗啉-1-基、吡唑-1-基或吡咯烷-1-基。

在有些情况下，R¹是杂芳基，该杂芳基被-C(O)N(R)-Q取代并且在任何剩余位置被-O-Q或Q取代，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

在一些实施方案中，-C(O)N(R)-Q中的Q是H、C_1-4脂族(基团)、C_1-4卤代脂族(基团)、C_3-7环脂族(基团)、C_3-7杂环脂族(基团)、 C_1-6烷氧基、(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基或C_1-6卤代烷氧基。

在更进一步的实施方案中，-C(O)N(R)-Q中的Q是甲基、乙基、1-甲基哌啶-4-基、环丙基、环戊基、3-呋喃基、3-氟代吡咯烷-1-基或3，3-二氟环丁基。

在有些情况下，R¹是任选被取代的C_1-6烷基或C_3-7环烷基。在更进一步的情况中，R¹是H、乙基、环丙基或环戊基。

在一些实施方案中，R¹是在对位被Q或-ZQ取代的苯基。在有些情况下，在对位的取代基是氟、羧基、三氟甲基、4-甲基哌嗪-1-基、二氟甲氧基、吗啉-1-基、吡唑-1-基或吡咯烷-1-基。

在一些实施方案中，R¹是噻吩-2-基、吡啶-3-基、吡啶-4-基或6-三氟甲基吡啶-3-基。

在某些实施方案中，R²和R³中的每一个独立地是H或C_1-3烷基，其任选地且独立地被0-5个J²和J³取代。在有些情况下，R²是H而R³是C_1-3烷基，如乙基。

在其它实施方案中，R²和R³，与它们所连接的碳原子一起，形成3-8元饱和或部分不饱和的含0-4个独立地选自O、N和S的杂原子的单环，其中所述由R²和R³形成的单环任选地被0-4个J²³取代。

在有些情况下，J²³是H、卤素、C_1-4烷基、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基或氨基。

在某些实施方案中，每一个J²和J³独立地是C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)或-(C_1-4烷基)_n-V¹，其中

n是0或1，

V¹是选自C_3-6环脂族(基团)、苯基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基的环状基团，其中所述环状基团任选地被0-3个J^V取代；和

每一个R＂独立地是未被取代的C_1-4脂族(基团)，或者键合至相同原子的相同的J²和J³中的两个，一起可能任选地形成＝O。

在有些情况下，每一个J²和J³独立地是C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)或-(C_1-4烷基)_n-V¹，其中

n是0或1，

每一个V¹独立地是卤代(C_1-4脂族(基团))、-O(卤代C_1-4脂族(基团))、卤素、NO₂、CN、OH、SH、NH₂、、COH、CO₂H、CONH₂、OCONH₂、NHCO₂H、NHCONH₂、SO₂NH₂，或者V¹是环状基团，其选自C_3-6环脂族(基团)、苯基、5-6元杂芳基或3-6元杂环基，其中所述环状基团任选地被0-3个J^V取代；和

在其它实施方案中，每一个J²或J³独立地是氨基、酰胺基、CN、OH、C_1-4烷氧基或C_1-4卤代烷氧基和V¹是H、卤素、C_1-4烷基、OH、C_1-4烷氧基、C_1-4卤代烷氧基或氨基。

在一些实施方案中，R⁴是C_1-6脂族(基团)、C_3-10环脂族(基团)、C_3-10杂环脂族(基团)、C_6-14芳基或C_5-14杂芳基，每一个任选被0-5个J⁴取代。

在一些实施方案中，R⁴是环戊基。

在一些实施方案中，每一个J^Q、J⁴和J²³独立地是-M或-Y-M。

在某些实施方案中，每一个Y独立地是未被取代的C_1-6脂族(基团)，其中所述C_1-6脂族(基团)中的0-3个-CH₂-单元任选地被替换为-NR-、-O-、-S-、-C(O)-、-S(O)-或-S(O)₂-；

在其它实施方案中，每一个M独立地是H、C_1-6脂族(基团)、C_3-6环脂族(基团)、卤代(C_1-4脂族(基团))、O(卤代C_1-4脂族(基团))、3-6元杂环基、卤素、NO₂、CN、OH、OR′、SH、SR′、NH₂、NHR′、N(R′)₂、COH、COR′、CO₂H、CO₂R′、CONH₂、CONHR′、CONR′₂、OCOR′、OCONH₂、OCONHR′、OCON(R′)₂、NHCOR′、NR′COR′、NHCO₂R′、NR′CO₂R′、NHCO₂H、NR′CO₂H、NHCONH₂、NHCONHR′、NHCON(R′)₂、SO₂NH₂、SO₂NHR′、SO₂N(R′)₂、NHSO₂R′或NR′SO₂R′。

在其它情况中，每一个M独立地是H、C_1-6脂族(基团)、 C_3-6环脂族(基团)、卤代(C_1-4脂族(基团))、O(卤代C_1-4脂族(基团))、3-6元杂环基，

在一些实施方案中，本发明的化合物可以由式II表示；

其中X¹、R¹、R²、R³和R⁴是如前所述的和J^A是H、C_1-4烷基、或OH。

在一些实施方案中，本发明的化合物表示在表1中。

表1

通用合成方法

一般而言，可通过方法例如以下通用方案所示那些和随后的制备实施例制备本发明化合物。除另有说明外，以下方案中所有变量的定义同本文。

方案1

以上方案1显示了为得到用于以下所述的工序(sequence)的起点1a的合成路线(参见US20040176380)。化合物A的4位上的氯在丙酮(或己烷)中置换为氨基酯而得到B。硝基的还原，随后原位分子内环化作用而得到化合物1a。

方案2

以上方案2显示了用于制备本发明的化合物的通用合成路线。在已知条件下激活1中的内酰胺官能团(参见US20040176380)，其中LG是合适的离去基团，而得到化合物2(X可以是，但非局限于卤素、烷氧基和磷酸根)。然后化合物2在1-2步骤的工序中使用(取决于环A)而得到化合物4。或者，1中的羰基酰胺可以被转化为硫代羰基而提供硫代内酰胺3。化合物3然后被转化为化合物2(X＝烷基硫基)或者直接地在1-2步骤的工序中使用(取决于环A)而得到化合物4。LG可以最后用作用于制备式I的化合物的处理(handle)。在该最后一步中，LG能够例如用胺置换或者用于已知的钯辅助的偶联反应，例如Suzuki、Stille或Buchwald反应。

方案3

以上方案3显示了用于制备本发明的化合物的通用合成路线，其中环A是三唑。2A中的氯亚氨酸根(chloroimidate)(X＝Cl)或2A中的磷酸根(X＝OP(O)(OEt)₂)与肼反应而得到中间体5。5与原酸酯J^aC(OR)₃的反应得到化合物4A，其中环A是三唑。或者2A中的氯亚氨酸根或磷酸根(X＝OP(O)(OEt)₂)可以与酰肼J^aC(O)NHNH₂反应而直接得到化合物4A，其中环A是三唑。LG可以最后用作用于制备式IA的化合物的处理(handle)。在该最后一步中，LG能够例如用胺置换或者用于为本领域技术人员所知的钯辅助的偶联反应(例如Suzuki、Stille或Buchwald)。

类似方法已经报到在用于将酰胺R¹-NH-CO-R²转化为R¹-三唑-R²的文献中，例如：

·Trends in Het Chem，8，49-60，2002

·J Org Chem，70(7)，2878-2880，2005

·Bioorg Med Chem Lett，15(19)，4359-4362，2005

方案4

以上方案4显示了用于制备本发明的化合物的通用合成路线，其中环A可以是，但不局限于，咪唑1B，或咪唑啉1C。

类似方法已经报到在用于将酰胺R¹-NH-CO-R²转化为R¹-咪唑-R²的文献中，例如：

·Afinidad，45(417)，443-446，1988

·J Org Chem，59(7)，5084-5087，1994

·Hev.Chim.Acta，80(3)，979-987，1997

·US2004132708

·Bioorg Med Chem Lett，12(21)，3219-3222，2002

类似方法已经报到在用于将酰胺R¹-NH-CO-R²转化为R¹-咪唑啉-R²的文献中，例如：

·Afinidad，45(417)，443-446，1988

·J Het Chem，19(1)，193-200，1982

·J Org Chem，50(13)，2220-2224，1985

·Indian J Chem，12(3)，263-269，1974

·Heterocycles，60(6)，1425-1432，2003

类似方法已经报到在用于将酰胺R¹-NH-CO-R²转化为R¹-四氢嘧啶-R²的文献中，例如：

·J Am Chem Soc，126(7)，1971-1979，2004

·Angew Chemie，43(4)，478-482，2004

·J Am Chem Soc，103(14)，4186-4194，1981

·Indian J Chem，12(3)，263-269，1974

本发明的一个实施方案提供了一种用于制备式I的化合物的方法：

其中

X¹、R¹、R²、R³、R⁴和环A是如本文中所限定的。

本文中使用的术语“偶联反应”是指其中在金属催化剂的帮助下形成碳-碳键的反应。通常，碳原子中之一与官能团(“交叉偶联基团”)结合，同时其它碳原子与卤素结合。偶联反应的实例包括但不限于Suzuki偶联、Stille偶联、Negishi偶联和Buchwald偶联。

本文中使用的术语“偶联基团”是指在偶联反应中可与另一个官能团(例如卤素)反应形成碳-碳(＂C-C＂)键或碳-氮(＂C-N＂)键的官能团。在某些实施方案中，在两芳基之间形成C-C键。

本文中使用的术语“偶联条件”是指使偶联反应发生所需要的化学条件(例如需要的温度、反应时间长度、溶剂体积)。

偶联基团及其相应的偶联条件的实例包括但不限于硼酸和硼酸酯和Suzuki偶联条件；SnBu₃和Stille偶联条件；和ZnX和Negishi偶联条件。

所有这3种偶联条件通常涉及使用催化剂、合适的溶剂和任选的碱。Suzuki偶联条件涉及使用钯催化剂、合适的碱和合适的溶剂。合适的钯催化剂的实例包括但不限于PdCl₂(PPh₃)₂、Pd(Ph₃)₄和PdCl₂(dppf)。合适的碱包括但不限于K₂CO₃和Na₂CO₃。合适的溶剂包括但不限于四氢呋喃、甲苯和乙醇。

Stille偶联条件涉及使用催化剂(通常为钯，但有时为镍)、合适的溶剂和其它任选的试剂。合适的催化剂的实例包括但不限于PdCl₂(PPh₃)₂、Pd(Ph₃)₄和PdCl₂(dppf)。合适的溶剂包括但不限于四氢呋喃、甲苯和二甲基甲酰胺。

Negishi偶联条件涉及使用催化剂(钯或镍)和合适的溶剂。合适的催化剂的实例包括但不限于Pd₂(dba)₃、Ni(PPh₃)₂Cl₂、PdCl₂(PPh₃)₂和Pd(Ph₃)₄。合适的溶剂包括但不限于四氢呋喃、甲苯和二甲基甲酰胺。本领域技术人员已知Suzuki、Stille和Negishi条件，在包括＂March′s Advanced Organic Chemistry＂在内的多种参考文献有更详细的阐述。

Buchwald偶联条件包括使用钯催化剂、合适的碱和合适的溶剂。合适的钯催化剂的实例包括但不局限于Pd(OAc)₂与xanthphos、PdCl₂(PPh₃)₂、Pd(Ph₃)₄和PdCl₂(dppf)。合适的碱包括但不局限于Cs₂CO₃、K₂CO₃和Na₂CO₃。合适的溶剂包括但不局限于二氧杂环己烷、四氢呋喃、甲苯和乙醇。

如本领域技术人员所理解的，偶联基团由偶联基团前体形成。“偶联基团前体”是用于形成交叉偶联基团的试剂或试剂的基团。实例包括但不限于在Negishi偶联反应中用于形成硼酸酯(boronateesters)的二硼酸二(频哪醇酯)(bis(pinacolato)diborane)；用于形成硼酸的硼酸三甲酯；用于形成锡烷的Bu₃SnCl；和用于形成锌酸盐的ZnCl₂。合适的偶联基团形成条件的实例包括但不限于通过钯介导的催化制备硼酸酯；通过将硼酸酯水解制备硼酸；通过两步法制备锡烷：1)卤素金属交换，然后2)用Bu₃SnCl进行金属转移；和通过两步法制备锌酸盐：1)卤素金属交换，然后2)加入ZnCl₂。

本发明的另一个方面提供蛋白激酶抑制剂化合物，因此可用于治疗疾病、障碍和病症以及本文中所述其它用途。在本发明的另一个方面，提供药学上可接受的组合物，其中这些组合物包含本文中所述任何化合物和任选包含药学上可接受的载体、助剂或溶媒。在某些实施方案中，这些组合物任选还包含一种或多种其它治疗药物。

本发明提供了可用作蛋白激酶抑制剂的化合物和组合物。在某些实施方案中，蛋白激酶是PLK。在某些实施方案中，PLK1。

作为蛋白激酶抑制剂，本发明化合物和组合物尤其可用于治疗或缓解疾病、病症或障碍的严重程度，其中蛋白激酶与所述疾病、病症或障碍有关。在一个方面，本发明提供治疗或缓解疾病、病症或障碍的严重程度的方法，其中蛋白激酶与疾病状态有关。在另一方面，本发明提供治疗或缓解激酶疾病、病症或障碍的严重程度的方法，其中抑制酶活性与治疗疾病有关。在另一方面，本发明提供用抑制酶活性的化合物治疗或缓解疾病、病症或障碍的严重程度的方法，这些化合物通过与蛋白激酶结合抑制酶活性。另一方面提供了通过用蛋白激酶抑制剂抑制激酶的酶活性来治疗或缓解激酶疾病、病症或障碍的严重程度。

在某些实施方案中，所述蛋白激酶抑制剂是PLK抑制剂。

本发明的一个方面涉及在患者中抑制蛋白激酶活性的方法，该方法包括给予患者式I化合物或含所述化合物的组合物。

在某些实施方案中，所述方法用于治疗或预防选自以下的病症：自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖或过度增殖疾病、免疫介导的疾病、骨病、代谢疾病、神经或神经变性疾病、心血管疾病、激素相关疾病、过敏、哮喘、早老性痴呆。在某些实施方案中，所述蛋白激酶/PLK。在其它实施方案中，所述病症选自增殖障碍和神经变性障碍。

根据所治疗或预防的具体的蛋白激酶介导的病症，通常可将给予的治疗或预防该病症的其它药物与本发明抑制剂一起给予。例如，化疗药物或其它抗增殖药物可与本发明蛋白激酶抑制剂联合治疗增殖疾病。

可由含蛋白激酶抑制剂的化合物或组合物，分别给予作为多剂量方案的一部分的那些其它药物。或者，那些药物可在单一组合物中作为单剂量形式的一部分与蛋白激酶抑制剂混合在一起。

作为蛋白激酶的抑制剂，本发明的化合物和组合物还可用于生物样品中。本发明的一个方面涉及在生物样品中抑制蛋白激酶活性的方法，该方法包括使所述生物样品与式I化合物或含所述化合物的组合物接触。本文中使用的术语“生物样品”表示体外或离体样品，它们包括但不限于细胞培养物或其提取物；从哺乳动物或其提取物得到的活组织检查物；和血液、唾液、尿、粪、精液、泪液或其它体液或其提取物。

生物样品中蛋白激酶活性的抑制可用于本领域技术人员已知的多种目的。此类目的的实例包括但不限于输血、器官移植和生物样品贮存。

本发明的另一个方面涉及蛋白激酶的生物和病理现象的研究；由此类蛋白激酶介导的细胞内信号转导途径的研究；和新的蛋白激酶抑制剂的对比性评价。此类用途的实例包括但不限于生物测定，例如酶测定和基于细胞的(cell-based)测定。

可体外、体内或在细胞系中测定作为蛋白激酶抑制剂的化合物的活性。体外测定包括检测激活的激酶的激酶活性或ATP酶活性抑制的测定。或者，体外测定可定量检测抑制剂与蛋白激酶结合的能力，可通过结合前将抑制剂放射性标记，使抑制剂/激酶复合物分离，测定放射性标记结合的量；或通过进行竞争性实验，其中将新抑制剂与和已知放射性配体结合的激酶一起温育，测量。测定作为PLK1、PLK2、PLK3和PLK4的抑制剂的在本发明中使用的化合物的详细条件阐述在下文的实施例中。

本发明的一个方面提供了可用于治疗以过度或异常细胞增殖为特征的疾病、病症或障碍的化合物。这些疾病包括增殖或过度增殖疾病和神经变性疾病。

增殖或过度增殖疾病的实例包括但不限于癌症。

术语“癌症”包括但不限于以下癌症：乳腺癌；卵巢癌；宫颈癌；前列腺癌；睾丸癌、泌尿生殖道癌；食道癌；喉癌、成胶质细胞瘤；成神经细胞瘤；胃癌；皮肤癌、角化棘皮瘤；肺癌、表皮样瘤、大细胞瘤、小细胞瘤、肺腺癌；骨癌；结肠癌；结肠直肠癌；腺瘤；胰腺癌、腺癌；甲状腺癌、卵泡癌、未分化癌、乳头状癌；精原细胞瘤；黑素瘤；肉瘤；膀胱癌；肝癌和胆道癌；肾癌；骨髓病；淋巴病、霍奇金病、毛细胞瘤；口腔癌和咽癌(口)、唇癌、舌癌、口癌、咽癌；小肠癌；结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌；脑和中枢神经系统癌；慢性粒细胞性白血病(CML)和白血病。

神经变性疾病的实例包括但不限于早老性痴呆。

本发明的一个方面提供治疗或缓解疾病严重程度的方法，所述疾病选自增殖或过度增殖疾病、或神经变性疾病，该方法包括给予有需要的患者有效量的化合物或含化合物的药学上可接受的组合物。

在某些实施方案中，化合物或药学上可接受的组合物的“有效量”是治疗所述疾病的有效量。可用有效治疗或缓解所述疾病的严重程度的任何量和任何给药途径给予通过本发明方法得到的化合物和组合物。

在某些实施方案中，所述疾病是蛋白激酶-介导的病症。在某些实施方案中，所述疾病是PLK-介导的病症。

本文中使用的术语“蛋白激酶-介导的病症”表示蛋白激酶在其中起作用的任何疾病或其它有害病症。此类病症包括但不限于自身免疫性疾病、炎性疾病、增殖和过度增殖疾病、免疫介导的疾病、骨病、代谢疾病、神经和神经变性疾病、心血管疾病、激素相关疾病、过敏、哮喘和早老性痴呆。

本文中使用的术语“PLK介导的病症”表示PLK在其中起作用的任何疾病或其它有害病症。此类病症包括但不限于增殖或过度增殖疾病、或神经变性疾病。

在本发明的另一个方面，提供药学上可接受的组合物，其中这些组合物包含本文中所述任何化合物和任选包含药学上可接受的载体、助剂或溶媒。

在某些实施方案中，这些组合物任选还包含一种或多种其它治疗药物。

例如，化疗药物或其它抗增殖药物可与本发明化合物联合治疗增殖疾病和癌症。

已知的化疗剂的实例包括但不局限于Gleevec^TM、多柔比星、地塞米松、长春新碱、环磷酰胺、氟尿嘧啶、topotecan、紫杉酚、干扰素和铂衍生物。

还可与本发明抑制剂结合的药剂的其它实例包括但不限于：用于早老性痴呆的治疗剂如和用于帕金森氏病的治疗剂如L-DOPA/卡比多巴、恩他卡朋、ropinrole、普拉克索、溴隐亭、培高利特、trihexephendyl和金刚烷胺；用于治疗多发性硬化(MS)的药剂如β干扰素(例如和和米托蒽醌；用于哮喘的治疗剂如沙丁胺醇和用于治疗精神分裂症的药剂如奥兰扎平、维思通、喹硫平和氟哌啶醇；抗炎药剂如皮质类固醇、TNF阻断剂、IL-1RA、硫唑嘌呤、环磷酰胺和柳氮磺吡啶；免疫调节和免疫抑制的药剂如环孢菌素、他克莫司、雷帕霉素、麦考酚酸吗乙酯(mycophenolate mofetil)、干扰素、皮质类固醇、环磷酰胺(cyclophophamide)、硫唑嘌呤和柳氮磺吡啶；神经营养因子如乙酰胆碱酯酶抑制剂、MAO抑制剂、干扰素、抗惊厥剂、离子通道封阻剂、利鲁唑和抗似帕金森氏病的药剂；用于治疗心血管疾病的药剂如β-阻断剂、ACE抑制剂、利尿剂、硝酸盐、钙通道阻断剂和斯特汀；用于治疗肝病的药剂如皮质类固醇、考来烯胺、干扰素和抗病毒药剂；用于治疗血液病的药剂如皮质类固醇、抗白血病的药剂和生长因子；和用于治疗免疫缺陷病症的药剂如γ-球蛋白。

本文中所述本发明药学上可接受的组合物还包含药学上可接受的载体、助剂或溶媒，在本文中，它们包括任何和所有溶剂、稀释剂或其它液体溶媒、分散体或悬浮液助剂；表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂和适合需要的具体剂型的类似物。Remington′s Pharmaceutical Sciences，第16版，E.W.Martin(Mack Publishing Co.，Easton，Pa.，1980)公开了用于配制药学上可接受的组合物的各种载体和制备其的已知技术。除作为不与本发明化合物配伍的任何常规载体介质例如通过产生任何有害生物作用或按有害方式与药学上可接受的组合物的任何其它成分相互作用外，考虑其用途在本发明范围内。

可作为药学上可接受的载体物质的某些实例包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂；血清蛋白例如人血清白蛋白；缓冲物质例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸或山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、羊毛脂；糖例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；黄芪胶粉末；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂例如可可豆脂和栓剂蜡；油例如椰子油、棉籽油；红花油；芝麻油；橄榄油；玉米油和大豆油；二元醇；例如丙二醇或聚乙二醇；酯例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂例如氢氧化镁和氢氧化铝；藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏液；乙醇和磷酸盐缓冲液，以及其它无毒可配伍润滑剂例如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁，以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、矫味剂和香精，也可根据配制配方设计师的判断将防腐剂和抗氧剂加入组合物。

可将蛋白激酶抑制剂或其药用盐配制成给予动物或人的药用组合物。含有效治疗或预防蛋白激酶介导的病症的量的蛋白抑制剂和药学上可接受的载体的这些药用组合物是本发明的另一个实施方案。在某些实施方案中，所述蛋白激酶介导的病症是PLK介导的病症。

治疗需要的化合物的确切量因患者而异，取决于患者的种族、年龄和一般状况；感染的严重程度、具体药物、给药模式等。优选将本发明化合物配制为便于给药和剂量均一性的剂量单位形式。本文中使用的表述“剂量单位形式”是指适合所治疗患者的药物的物理分离单位。但是，可以理解，本发明化合物和组合物的每日用法须由主治医师在合理的医学判断范围内决定。对于任何具体患者或生物体的特定有效剂量水平要取决于多种因素，这些因素包括所治疗的病症和病症的严重程度；所使用的具体化合物的活性；所使用的具体组合物；患者的年龄、体重、一般健康、性别和饮食；给药时间、给药途径和所使用的具体化合物的排泄途径；疗程；与所用的具体化合物联用或同时使用的药物；和医学领域中熟知的类似因素。本文中使用的术语“患者”表示动物，优选哺乳动物，最优选人。

可通过以下途径给予人和其它动物本发明药学上可接受的组合物：口服、直肠、肠胃外、脑池内、阴道内、腹膜内、局部(如通过散剂、软膏剂或滴剂)、含服、口腔或鼻喷雾或取决于所治疗感染严重程度的类似方式。在某些实施方案中，可按约0.01mg/kg-约50mg/kg，优选约1mg/kg-约25mg/kg患者体重/日剂量水平，口服或肠胃外给予本发明化合物，每日一次或多次，得到需要的疗效。

用于口服给药的液体剂型包括但不限于药学上可接受的乳液、微乳、溶液、混悬液、糖浆和酏剂。除活性化合物外，液体剂型可含本领域中常用的惰性稀释剂，例如水或其它溶剂；增溶剂和乳化剂例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(尤其棉籽、落花生、玉米、胚芽、橄榄、蓖麻和芝麻的油)、甘油、四氢糠醇、聚乙二醇和脱水山梨醇的脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀释剂外，口服组合物也可包含助剂例如湿润剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香精。

可按照已知技术，用合适的分散或湿润剂和悬浮剂配制注射制剂，例如无菌注射水或油混悬剂。无菌注射制剂也可是用无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂配制的无菌注射溶液、混悬液或乳液，例如以1，3-丁二醇为溶剂的溶液。其中，可使用的可接受的溶媒和溶剂是水、林格氏液、U.S.P.和等渗氯化钠溶液。另外，无菌非挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。因此，可使用任何非刺激性非挥发油，它们包括合成甘油单酯或甘油二酯。另外，脂肪酸例如油酸还用于制备注射剂。

例如通过除菌滤器或通过加入无菌固体组合物形式的杀菌剂，将注射剂灭菌，临用前，可将无菌固体组合物溶于或分散于无菌水或其它无菌注射介质。

为延长本发明化合物的作用，通常需要延缓通过皮下或肌内注射的化合物的吸收。可通过使用水溶性差的结晶或无定形物质的液体混悬液实现。然后化合物的吸收速度取决于其溶出速度，溶出速度又可取决于结晶大小和晶型。或者，可通过将化合物溶于或悬浮于油溶媒，完成延迟吸收的肠胃外给药的化合物形式。通过在可生物降解聚合物例如聚丙交酯-聚乙交酯中形成化合物的微囊骨架制备注射贮库形式。根据化合物与聚合物的比例和具体使用的聚合物的性质，可控制化合物的释放速度。其它可生物降解的聚合物的实例包括聚(原酸酯)和聚(酐)。也可通过用与身体组织相容的脂质体或微乳捕获化合物，制备贮库注射制剂。

用于直肠或阴道给药的组合物优选为栓剂，可通过使本发明化合物与合适的非刺激性赋形剂或载体混合，制备栓剂，例如在环境温度下为固体但在体温下为液体因此在直肠或阴道腔熔化和释放活性化合物的可可豆酯、聚乙二醇或栓剂蜡。

用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物与至少一种惰性药学上可接受的赋形剂或载体例如柠檬酸钠或磷酸氢二钙和/或以下物质混合：a)填充剂或补充剂例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合剂例如羧甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶，c)保湿剂例如甘油，d)崩解剂例如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠，e)溶液阻滞剂例如石蜡，f)吸收促进剂例如季铵化合物，g)湿润剂例如鲸蜡醇和甘油单硬脂酸酯，h)吸收剂例如高岭土和皂土，和i)润滑剂例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包含缓冲剂。

相似种类的固体成分也可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，在此类胶囊中使用此类赋形剂如乳糖或奶糖(milk sugar)和高分子量聚乙二醇等。可用包衣剂和壳例如肠溶包衣剂和药剂领域中熟知的其它包衣剂制备固体剂量形式的片剂、糖锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。它们可任选含遮光剂并也可为以下组合物：该组合物仅在或优先在肠道的某个部分任选以缓释方式释放活性成分。可使用的包埋成分的实例包括高分子物质和蜡。相似种类的固体成分也可用作软和硬填充明胶胶囊中的填充剂，此类胶囊使用此类赋形剂如乳糖或奶糖和高分子量聚乙二醇等。

活性化合物也可以是含一种或多种上述赋形剂的微囊形式。可用包衣剂和壳例如肠溶包衣剂、控释包衣剂和药剂领域中熟知的其它包衣剂制备固体剂量形式的片剂、糖锭剂、胶囊剂、丸剂和颗粒剂。在此类固体剂型中，活性化合物可与至少一种惰性稀释剂例如蔗糖、乳糖或淀粉混合。按其通常惯例，此类剂型还可包含非惰性稀释剂的其它物质，例如压片润滑剂和其它压片助剂如硬脂酸镁和微晶纤维素。在胶囊剂、片剂和丸剂的情况下，剂型也可包含缓冲剂。它们可任选含遮光剂并也可为以下组合物：该组合物仅在或优先在肠道的某个部分任选以缓释方式释放活性成分。可使用的包埋成分的实例包括高分子物质和蜡。

用于局部或透皮给予本发明化合物的剂型包括软膏剂、糊剂、霜剂、洗剂、凝胶剂、散剂、溶液剂、喷雾剂、吸入剂或贴剂。在无菌条件下，将活性成分与药学上可接受的载体和可能需要的任何防腐剂或缓冲剂混合。还可考虑眼药制剂、滴耳剂和滴眼剂在本发明的范围内。另外，本发明还考虑使用透皮贴剂，该透皮贴剂具有提供控制递送化合物至身体的额外优点。可通过将化合物溶于或分散于合适介质制备此类剂型。也可用吸收促进剂增加透过皮肤的化合物通量。可通过提供速度控制膜或通过使化合物分散在聚合物基质或凝胶中，控制速度。

除本发明化合物外，也可在组合物中使用本发明化合物的药学上可接受的衍生物或前药，治疗或预防以上确定的病症。

本发明的化合物还可以以药学上可接受的衍生物的形式存在。

“药学上可接受的衍生物”是给予有需要的患者后可直接或间接提供本文中另外所述化合物或其代谢物或其残基的加合物或衍生物。药学上可接受的衍生物的实例包括但不限于酯和此类酯的盐。

“药学上可接受的衍生物或前药”表示给予接受者后本发明化合物的酯或其它衍生物的任何药学上可接受的酯、盐能够直接或间接提供本发明化合物或抑制性活性代谢物或其残基。尤其有利的衍生物或前药是与母体化合物相比，当给予患者此类化合物(例如通过让口服给予的化合物更容易吸收到血液中)时，增加本发明化合物生物利用度或促使母体化合物递送到生物房室(例如脑或淋巴系统)的那些物质。

本发明化合物的药学上可接受的前药包括但不限于酯、氨基酸酯、磷酸酯、金属盐和磺酸酯。

可用于这些药用组合物的药学上可接受的载体包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂；血清蛋白例如人血清白蛋白、缓冲物质例如磷酸盐、甘氨酸、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的部分甘油酯混合物、水、盐或电解质例如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐、硅胶、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素类物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。

可通过口服、肠胃外、吸入喷雾、局部、直肠、鼻、含服、阴道或植入贮库给予本发明组合物。本文中使用的术语“肠胃外”包括但不限于皮下、静脉内、肌内、关节内、滑液内、胸骨内、鞘内、肝内、损害内和颅内注射或输注技术。优选，通过口服、腹膜内或静脉内给予组合物。

无菌注射形式的本发明组合物可以是水或油性混悬液。可按照本领域已知技术，用合适的分散剂或湿润剂和悬浮剂配制这些混悬液。这种无菌注射制剂也可以是用无毒肠胃外可接受的稀释剂或溶剂配制的无菌注射溶液或混悬液，例如用1，3-丁二醇制备的溶液。其中可使用的可接受的溶媒和溶剂是水、林格氏液和等渗氯化钠溶液。另外，无菌非挥发性油通常用作溶剂或悬浮介质。因此，可使用任何非刺激性非挥发油，它们包括合成甘油单酯或甘油二酯。脂肪酸例如油酸及其甘油酯衍生物可用于制备注射剂，天然的药学上可接受的油例如橄榄油或蓖麻油，尤其它们的聚氧乙烯化形式也可用于该制剂。这些油溶液或混悬液也可含长链醇稀释剂或分散剂，例如在药学上可接受的剂型配制中常用的羧甲基纤维素或类似分散剂，这些剂型包括乳剂和混悬剂。在制备药学上可接受的固体、液体或其它剂型中常用的其它常用的表面活性剂例如吐温、司盘和其它乳化剂或生物利用度促进剂也可用于制剂。

可以任何口服可接受的剂型，通过口服给予本发明药用组合物，这些剂型包括但不限于胶囊剂、片剂、水混悬剂或溶液剂。在口服片剂中，常用的载体包括但不限于乳糖和玉米淀粉。通常也可加入润滑剂例如硬脂酸镁。对于口服给予的胶囊形式，有用的稀释剂包括乳糖和干玉米淀粉。当需要口服给予水混悬液时，将活性成分与乳化剂和悬浮剂混合。如果需要，也可加入某些甜味剂、矫味剂或着色剂。

或者，可通过直肠以栓剂形式给予本发明药用组合物。可通过将药物与合适的非刺激性赋形剂混合，制备这些栓剂，所述赋形剂在室温下为固体但在直肠温度下为液体，因此在直肠中融化释放药物。此类物质包括但不限于可可豆脂、蜂蜡和聚乙二醇。

也可局部，尤其当治疗靶标包括易通过局部涂药到达的部位或器官时，给予本发明药用组合物，这些靶标包括发生疾病的眼睛、皮肤或下肠道。可容易地制备用于各这些部位或器官的合适的局部制剂。

可通过直肠栓剂(见以上)或合适的灌肠剂实现用于下肠道的局部给药。也可使用局部透皮贴剂。

为局部给药，可将药用组合物配制成合适的软膏，该软膏含悬浮或溶于一种或多种载体中的活性成分。用于局部给予本发明化合物的载体包括但不限于矿物油、液体凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯化合物、乳化蜡和水。或者，可将药用组合物配制成合适的洗剂或霜剂，它们含有悬浮或溶于一种或多种药学上可接受的载体中的活性成分。合适的载体包括但不限于矿物油、司盘-60、吐温60、十六烷基酯蜡、十六醇十八醇混合物(cetearyl alcohol)、2-辛基十二醇、苯甲醇和水。

可在等渗调pH的无菌盐水中将药用组合物配制成眼用微粉化混悬液，或优选在含或不含防腐剂例如苯扎氯铵的等渗调pH的无菌盐水中配制成眼用溶液。或者，可在软膏例如凡士林中配制眼用药用组合物。

也可通过鼻喷雾剂或吸入给予本发明药用组合物。按照药剂领域中熟知的技术制备此类组合物，可用盐水制备溶液，用苯甲醇或其它合适的防腐剂、增加生物利用度的吸收促进剂、碳氟化合物和/或其它常用稳定剂或分散剂。

可与载体物质组合得到单一剂型的蛋白激酶抑制剂的量取决于所治疗的宿主、具体给药模式而变。优选，应按0.01-100mg抑制剂/kg体重/日剂量给予接受这些组合物的患者，配制组合物。

还应理解，用于任何具体患者的特定剂量和治疗方案取决于多种因素，它们包括所使用的特定化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药时间、排泄速度、联合药物、主治医师的判断和所治疗的具体疾病的严重程度。抑制剂的量还取决于组合物中的具体化合物。

按照另一个实施方案，本发明提供治疗或预防蛋白激酶介导的病症(在某些实施方案中，为PLK介导的病症)的方法，该方法包括给予患者上述药用组合物之一的步骤。本文中使用的术语“患者”表示动物，优选人。

在某些实施方案中，所述方法用于治疗或预防选自以下的病症：增殖疾病如癌症、神经变性疾病、自身免疫性疾病、炎性疾病、免疫介导的疾病。在某些实施方案中，用该方法治疗或预防选自例如以下癌症的病症：乳腺、结肠、前列腺、皮肤、胰腺、脑、泌尿生殖道、淋巴系统、胃、喉的癌症和包括肺腺癌和小细胞肺癌在内的肺癌；中风、糖尿病、骨髓瘤、肝肿大、心肥大、早老性痴呆、囊性纤维变性和病毒性疾病，或上述任何具体疾病。

一般而言，可通过本领域技术人员已知的方法制备本发明化合物。可通过已知方法分析那些化合物，这些方法包括但不限于LCMS(液相色谱质谱)和NMR(核磁共振)。也可按照这些实例测试本发明化合物。应理解，以下所示特定条件仅为实例，而不应限制这些可用于制备、分析或测试本发明化合物的条件的范围。另外，本发明还包括本领域技术人员已知的制备、分析和测试本发明化合物的条件。

实施例

本文中使用的术语＂Rt(分钟)＂是指与化合物有关的HPLC保留时间，以分钟为单位。除另有说明外，得到报道的保留时间所使用的HPLC方法如下：

柱：ACE C8柱，4.6×150mm

梯度：0-100％乙腈+甲醇60:40(20mM三磷酸酯(Trispho sphate))

流速：1.5mL/分钟

检测波长：225nm。

在MicroMass Quattro Micro质谱分光计上分析质谱样品，按电喷雾离子化下的单MS模式操作。用色谱方法将样品引入质谱分光计。

用Bruker DPX 400仪，在400MHz下记录¹H-NMR图谱并且以ppm δ进行报道。如下制备并分析以下式I化合物。

实施例1：

4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(I-1)

方法A：(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶

在110℃搅拌(R)-2-氯-8-环戊基-7-乙基-7，8-二氢蝶啶-6(5H)-酮(100mg，0.357mmol)/三氯氧化磷(3.0mL)3小时，然后在减压下浓缩。将残余物溶解在无水二氯甲烷中并且将其滴加到1.0M肼/THF(3.6mL，3.57mmol)。在室温搅拌该混合物过夜，放入乙酸乙酯，用碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥并且浓缩。将粗制的酰肼的残余物溶解在原甲酸三甲酯(2.0mL)中并且在110℃搅拌90min。在减压下浓缩混合物，并且纯化，通过快速色谱法，在硅胶上，用乙酸乙酯洗脱，而得到(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(68mg，63％)，淡褐色固体；

¹H

NMR(DMSO D⁶)0.75(3H，t)，1.50-1.64(2H，m)，1.80-2.08(8H，m)，4.22-4.33(1H，m)，5.28-5.35(1H，m)，8.68(1H，s)，9.35(1H，s)；MS(ES⁺)305.

方法B：4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(I-1)

向(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(80mg，0.263mmol)/乙醇/水(1/4，5mL)混合物的溶液中添加4-氨基-3-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(72mg，0.394mmol)，随后添加催化量的浓HCl(0.04mL)。在90℃搅拌反应混合物24小时，然后冷却至室温并且用饱和的NaHCO₃水溶液碱化。用乙酸乙酯萃取混合物，干燥(MgSO₄)有机层并且通过快速色谱法纯化残余物而得到标题化合物，无色固体(92mg，78％收率)。

呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.75(3H，t)，1.43-1.60(4H，m)，1.80-2.07(6H，m)，2.80(3H，d)，3.88(3H，s)，4.19(1H，m)，5.38(1H，m)，7.50(1H，d)，7.59(1H，s)，7.83(1H，d)，8.47(1H，m)，8.67(1H，s)，9.31(IH，s)，9.40(1H，br s)；MS(ES⁺)449.

实施例2：

4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基-N-(1-甲基哌啶-4-基)苯甲酰胺(I-2)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.73(3H，t)，1.52-2.11(15H，m)，2.25(3H，s)，2.80-2.92(2H，m)，3.27-3.32(1H，m)，3.72-3.82(1H，m)，4.37-4.47(1H，m)，5.16-5.22(1H，m)，7.46-7.51(2H，m)，7.94(1H，s)，8.12(1H，d)，8.27(1H，d)，8.61(1H，s)，9.25(1H，s)；MS(ES⁺)532.

实施例3：4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-氯苯甲酸(I-3)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

MS(ES⁺)440；(ES-)438.

实施例4

方法C：4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3]蝶啶-7-基氨基)-3-氯-N-甲基苯甲酰胺(I-4)

将4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-氯苯甲酸(I-3)(27mg)溶解在DMF(0.4mL)中并且用羰基二咪唑(12mg，0.077mmol)处理并且混合物在室温下搅拌90min。在冰浴中冷却溶液并且鼓泡入甲胺气体2min。在室温搅拌该混合物2小时，在降低的压力蒸发并且通过色谱法提纯而得到4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-氯-N-甲基苯甲酰胺(15mg)，无色固体。

呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.71(3H，t)，1.37-2.05(10H，m)，2.80(3H，s)，4.12-4.25(1H，m)，5.20-5.31(1H，m)，7.88(1H，d)，8.00(1H，d)，8.05(1H，s)，8.50-8.55(1H，m)，8.60(1H，s)，8.97(1H，br s)，9.35(1H，s)；MS(ES⁺)453，(ES^-)451.

实施例5：

4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3]蝶啶-7-基氨基)-N，N，3-三甲基苯甲酰胺(I-5)

方法D：N，N，3-三甲基-4-硝基苯甲酰胺

用羰基二咪唑(3.22g，1.2Eq.)搅拌3-甲基-4-硝基苯甲酸(3.0g，16.56mmol)/DMF(30ml)90min。在冰浴中冷却反应混合物，添加二甲胺(2M/THF，25mL，3Eq.)。然后允许混合物升温至室温并且搅拌2小时。将混合物倒在冰水(200ml)上并且用EtOAc(X6)萃取。将合并的萃取物用盐水洗涤，用MgSO₄干燥，过滤和蒸发。用醚研磨(Tritration)，随后过滤，得到N，N，3-三甲基-4-硝基苯甲酰胺(2.6g，无色固体)；MS(ES⁺)209。

方法E：4-氨基-N，N，3-三甲基苯甲酰胺

使用H-cube装置氢化N，N，3-三甲基-4-硝基苯甲酰胺(0.6g，2.88mmol)/甲醇(1.2mL/min，室温，大气压力)。45分钟后，完成反应。在真空中除去溶剂得到4-氨基-N，N，3-三甲基苯甲酰胺，无色固体(定量)；MS(ES⁺)179。

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.69(3H，t)，1.25-1.45(4H，m)，1.70-2.05(6H，m)，2.27)3H，s)，2.97(6H，s)，4.08-4.15(1H，m)，5.30-5.37(1H，m)，7.29(1H，d)，7.36(1H，s)，7.46(1H，d)，8.62(1H，s)，9.33(1H，s)，9.75(1H，br s)；MS(ES⁺)447，(ES^-)445.

实施例6：

4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3]蝶啶-7-基氨基)-N，3-二甲基苯甲酰胺(I-6)

N，3-二甲基-4-硝基苯甲酰胺

使用方法D来制备

4-氨基-N，3-二甲基苯甲酰胺

使用方法E来制备，呈现为游离碱。

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.68(3H，t)，1.15-1.35(4H，m)，1.65-2.05(6H，m)，2.26(3H，s)，2.78(3H，s)，4.03-4.17(1H，m)，5.36-5.43(1H，m)，7.52(1H，d)，7.76(1H，d)，7.90(1H，s)，8.52-8.57(1H，m)，8.74(1H，s)，9.39(1H，s)，10.13(1H，s)；MS(ES⁺)433，(ES^-)431.

实施例7：

4-((R)-5-环戊基-6-乙基-5，6-二氢咪唑并[1，2)蝶啶-3-基氨基)-3-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(I-7)

方法F：(R)-2-氯-8-环戊基-7-乙基-7，8-二氢蝶啶-6-胺

加热(R)-2-氯-8-环戊基-7-乙基-7，8-二氢蝶啶-6(5H)-酮(200mg，0.714mmol)/POCl₃(6mL)至100℃达4.5小时。在真空中除去溶剂，并且用干燥甲苯共沸两次。将残余物溶解在干燥CH₂Cl₂(1.5mL)中并且滴加到THF(5ml)并且在液体NH₃(4.2g)中。在室温搅拌反应混合物过周末。将反应混合物倒在冰水上并且用EtOAc萃取X3。在真空中浓缩合并的有机萃取物而得到(R)-2-氯-8-环戊基-7-乙基-7，8-二氢蝶啶-6-胺，棕色油(181mg)。MS(ES⁺)280，(ES^-)278.

方法G：(R)-3-氯-5-环戊基-6-乙基-5，6-二氢咪唑并[1，2-f]蝶啶

用50％氯乙醛水溶液(131μL，1.3Eq.)处理(R)-2-氯-8-环戊基-7-乙基-7，8-二氢蝶啶-6-胺(177mg，0.64mmol)/MeOH(1.5mL)并且加热反应混合物来回流6小时。添加另一部分的50％氯乙醛水溶液(400μL，3.0Eq.)，将反应混合物加热到68℃过夜。添加NaHCO₃(饱和水溶液)和EtOAc，进一步用EtOAc萃取该水溶液。用MgSO₄干燥合并的有机萃取物，过滤，在真空中浓缩。

MS(ES⁺)304。

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR(DMSO D⁶)0.66(3H，t)，1.55-2.13(10H，m)，2.79(3H，d)，3.94(3H，s)，4.35-4.48(1H，m)，4.98-5.07(1H，m)，7.13(1H，s)，7.45-7.53(2H，m)，7.79(1H，s)，7.86(1H，s)，8.25-8.38(2H，m)，8.45(1H，s)；MS(ES⁺)448，MS(ES^-)446.

实施例8：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-环丙基-3-甲氧基苯甲酰胺(I-8)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.56-0.59(2H，m)，0.68-0.73(5H，m)，1.55-2.10(10H，m)，2.82(1H，m)，3.92(3H，s)，4.42(1H，m)，5.21(1H，m)，7.46-7.48(2H，m)，7.95(1H，s)，8.26(1H，d)，8.35(1H，d)，8.59(1H，s)，9.25(1H，s)；HPLC rt(min)：8.91；MS(ES⁺)475，(ES^-)474.

实施例9：

4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基-N-((R)-四氢呋喃-3-基)苯甲酰胺(I-9)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.71(3H，t)，1.55-2.20(12H，m)，3.60(1H，dd)，3.72(1H，m)，3.87(2H，m)，3.94(3H，s)，4.40-4.53(2H，m)，5.22(1H，m)，7.51-7.54(2H，m)，7.96(1H，s)，8.30(1H，m)，8.42(1H，d)，8.60(1H，s)，9.25(1H，s)；HPLC rt(min)：8.63；MS(ES⁺)505.

实施例10：

(R)-N-环戊基-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基苯甲酰胺(I-10)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.71(3H，t)，1.48-1.65(6H，m)，1.67-2.09(12H，m)，3.93(3H，s)，4.21-4.26(1H，m)，4.42(1H，quin)，5.20-5.22(1H，m)，7.49-7.51(2H，m)，7.95(1H，s)，8.16(1H，d)，8.29(1H，d)，8.59(1H，s)，9.25(1H，s)；HPLC rt(min)：9.76；MS(ES⁺)503，(ES-)501.

实施例11：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-环丙基苯甲酰胺(I-11)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.53-0.57(2H，m)，0.63-0.73(5H，m)，1.59-1.99(9H，m)，2.06-2.15(1H，m)，2.79-2.83(1H，m)，4.48-4.55(1H，m)，5.21(1H，dd)，7.737.80(4H，m)，8.26(1H，d)，8.60(1H，s)，9.25(1H，s)，9.65(1H，s)；HPLC rt(min)：8.36；MS(ES⁺)445，(ES^-)443.

实施例12：

(4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧苯基)((S)-3-氟代吡咯烷-1-基)甲酮(I-12)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，t)，1.50-1.62(2H，m)，1.69-2.23(10H，m)，3.53-3.84(4H，m)，3.90(3H，s)，4.38(1H，t)，5.20(1H，dd)，5.40(1H，dd)，7.15(1H，d)，7.20(1H，d)，7.99(1H，s)，8.20(1H，s)，8.57(1H，s)，9.25(1H，s)；HPLC rt(min)：8.94；MS(ES+)507，(ES-)505.

实施例13：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-1-甲基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-环丙基-3-甲氧基苯甲酰胺(I-13)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.55-0.60(2H，m)，0.69-0.78(5H，m)，1.55-2.10(10H，m)，2.68(3H，s)，2.82(1H，m)，3.93(3H，s)，4.48(1H，quint)，5.01(1H，dd)，7.46-7.49(2H，m)，7.94(1H，s)，8.30(1H，d)，8.35(1H，d)，8.45(1H，s)；HPLC rt(min)：9.12；MS(ES⁺)490，(ES^-)488.

实施例14：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-环丙基-3-氟苯甲酰胺(I-14)

使用方法C来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.55-0.59(2H，m)，0.67-0.73(5H，m)，1.46-1.95(10H，m)，2.84(1H，m)，4.30(1H，quint)，5.18(1H，dd)，7.64-7.70(2H，m)，7.91(1H，t)，8.41(1H，d)，8.55(1H，s)，9.02(1H，s)，9.24(1H，s)；HPLC rt(min)：8.58；MS(ES⁺)464，(ES^-)462.

实施例15：

(R)-5-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-环丙基噻吩-2-甲酰胺(I-15)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.48-0.54(2H，m)，0.63-0.74(5H，m)，1.65-1.95(10H，m)，2.74(1H，m)，4.83(1H，brs)，5.24(1H，dd)，7.58(1H，d)，7.47(1H，d)，8.14(1H，d)，8.63(1H，s)，9.24(1H，s)，10.83(1H，br s)；HPLC rt(min)：8.17；MS(ES⁺)452，(ES^-)450.

实施例16：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-氟-N-甲基苯甲酰胺(I-16)

使用方法C来制备，呈现为甲磺酸盐。

方法H：甲磺酸盐形成

将游离碱(38.2mg，0.088mmol)溶解在热甲醇(3ml)中并且用甲烷磺酸(5.68μL，0.088mmol)处理，在降低的压力蒸发并且用二乙醚共沸3次。用醚研磨残余物并且过滤而得到甲烷磺酸盐(50.4mg)。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.35-1.55(4H，m)，1.70-2.0(6H，m)，2.33(3H，s)，2.79(3H，d)，4.24(1H，quint)，5.25(1H，dd)，7.69-7.73(2H，m)，7.84(1H，t)，8.48(1H，q)，8.57(1H，s)，9.28(1H，s)，9.39(1H，s)；HPLC rt(min)：8.07；MS(ES⁺)438，(ES^-)436.

实施例17：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-(3，3-二氟环丁基)-3-甲氧基苯甲酰胺(I-17)

使用方法B来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，t)，1.42-1.70(4H，m)，1.75-2.04(6H，m)，2.33(3H，s)，2.70-2.85(2H，m)，2.90-3.20(2H，m)，3.92(3H，s)，4.32(2H，m)，5.33(1H，dd)，7.52-7.56(2H，m)，7.99(1H，d)，8.59(1H，s)，8.78(1H，d)，8.98(1H，brs)，9.30(1H，s)；HPLC rt(min)：9.35；MS(ES⁺)526，(ES^-)524.

实施例18：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-乙基-3-甲氧基苯甲酰胺(I-18)

使用方法B来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，t)，1.14(3H，t)，1.45-1.67(4H，m)，1.77-2.30(6H，m)，2.31(3H，s)，3.31(2H，quint)，3.91(3H，s)，4.32(1H，quint)，5.32(1H，dd)，7.52(1H，dd)，7.56(1H，d)，7.98(1H，br d)，8.47(1H，t)，8.58(1H，s)，8.85(1H，br s)，9.29(1H，s)；HPLC

rt(min)：8.94；MS(ES⁺)463，(ES^-)461.

实施例19：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-N-乙基-3-氟苯甲酰胺(I-19)

使用方法C来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，t)，1.13(3H，t)，1.38-1.55(4H，m)，1.75-2.00(6H，m)，2.32(3H，s)，3.29(2H，quint)，4.23(1H，quint)，5.27(1H，dd)，7.70-7.77(2H，m)，7.83(1H，t)，8.51(1H，t)，8.57(1H，s)，9.29(1H，s)，9.45(1H，br s)；HPLC rt(min)：8.64；MS(ES⁺)452，(ES^-)450.

实施例20：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-20)

使用方法B来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，m)，1.35-1.45(4H，m)，1.73-2.00(6H，m)，2.38(3H，s)，4.16(1H，quint)，5.31(1H，dd)，7.63(1H，d)，7.81(1H，d)，7.91(1H，t)，8.62(1H，s)，9.34(1H，s)，9.85(1H，br s)；HPLC rt(min)：10.44；MS(ES⁺)448，(ES^-)446.

实施例21：

方法I：(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶 -7-基氨基)-N-甲基-3-(三氟甲基)苯甲酰胺(I-21)

在微波中在150℃搅拌(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(100mg，0.329mmol)、4-氨基-3-三氟甲基-N-甲基苯甲酰胺、乙酸钯(6mg)、碳酸铯(214mg，0.658mmol)和xanthphos(20mg)/二氧杂环己烷(4mL)的混合物1小时。用乙酸乙酯稀释混合物并且用碳酸氢钠水溶液洗涤，用硫酸镁干燥和浓缩。纯化残余物，通过色谱，在硅胶上，用0-12％甲醇/乙酸乙酯洗脱，而得到4-((R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-三氟甲基-N-甲基苯甲酰胺，为无色玻璃状(70mg，46％)。

呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.67(3H，t)，0.96-1.35(4H，m)，1.60-2.00(6H，m)，2.34(3H，s)，2.83(3H，d)，3.90-4.03(1H，m)，5.25-5.32(1H，m)，7.82(1H，d)，8.19(1H，d)，8.26(1H，s)，8.57(1H，s)，8.75(1H，d)，9.30(1H，s)，9.46-9.66(1H，br s)；HPLC rt(min)：8.94；MS(ES⁺)487.

实施例22：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-苯基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-22)

使用方法B来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69-0.73(3H，m)，1.59(2H，m)，1.66-1.91(7H，m)，2.06(1H，m)，4.48(1H，m)，5.18(1H，m)，6.94(1H，m)，7.25-7.28(2H，m)，7.69-7.71(2H，m)，8.55(1H，s)，9.23(1H，s)，9.37(1H，s)；HPLC rt(min)：9.75；MS(ES⁺)362，(ES^-)360.

实施例23：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(吡啶-4-基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-23)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.70-0.74(3H，m)，1.62-1.63(2H，m)，1.72-1.93(7H，m)，2.11(1H，m)，4.54(1H，m)，5.23(1H，m)，7.72(2H，d)，8.33(2H，d)，8.64(1H，s)，9.27(1H，s)，9.83(1H，s)；HPLC rt(min)：8.70；MS(ES⁺)363，(ES)361.

实施例24：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-(二氟甲基)-N-甲基苯甲酰胺(I-24)

使用方法I来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.17-1.34(4H，m)，1.71-1.89(6H，m)，2.33(3H，s)，2.81(3H，d)，4.07-4.11(1H，m)，5.27-5.29(1H，m)，7.25(1H，t)，7.70(1H，d)，8.04(1H，d)，8.15(1H，s)，8.59(1H，s)，8.63-8.65(1H，m)，9.31(1H，s)，9.60-9.64(1H，m)；HPLCrt(min)：8.28；MS(ES⁺)469，(ES^-)467.

实施例25：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(吡啶-3-基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-25)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69-0.73(3H，m)，1.57-1.58(2H，m)，1.71-1.90(7H，m)，2.07(1H，m)，4.48(1H，m)，5.20(1H，m)，7.30(1H，m)，8.113-8.15(2H，m)，8.58(1H，m)，8.87(1H，d)，9.25(1H，s)，9.55(1H，s)；HPLC rt(min)：8.50；MS(ES⁺)363，(ES^-)361.

实施例26：

方法J：(R)-5-环戊基-N-环丙基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-26)

在140℃在微波中在密封管中加热(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(70mg，0.23mmol)、环丙胺(0.5mL，7.18mmol)、DIPEA(0.16mL，0.918mmol)/ⁿBuOH(2ml)90分钟。在真空中浓缩反应混合物，通过反相制备HPLC纯化[Waters Sunfire C18，10μM，100柱，梯度10％-95％B(溶剂A：0.05％TFA/水；溶剂B：CH₃CN)，在16分钟内，在25mL/min下]，得到标题化合物，为灰白色粉末状。使用碳酸氢盐树脂，形成游离碱，将其冷冻干燥而得到标题化合物，无色固体(25.6mg，34％收率)

呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.46(2H，m)，0.62-0.63(2H，m)，0.67-0.71(3H，m)，1.49(2H，m)，1.60-2.00(8H，m)，2.64(1H，m)，4.22(1H，br s)，5.11(1H，m)，7.17(1H，m)，8.38(1H，s)，9.16(1H，s)；HPLC rt(min)：9.15；MS(ES⁺)326，(ES^-)324.

实施例27：

方法K：(R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-27)

在微波辐射下在140℃加热(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢 -[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(500mg，1.64mmol)/氢氧化铵(10ml)溶液30分钟。在减压下除去溶剂并且添加冷水(5ml)。在真空条件下过滤所得的浅棕色固体并且用冷水洗涤而得到标题化合物(170mg，36％收率)。

呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.48-2.01(10H，m)，4.40(1H，dt)，5.06(1H，dd)，6.40(2H，s)，8.35(1H，s)，9.15(1H，s)；HPLC rt(min)：7.43；MS(ES⁺)286.

实施例28：

方法L：(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(吡啶-3-基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-28)

在0℃向(R)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(50mg，0.175mmol)/DMF(1mL)中添加氢化钠(60％，在矿物油中，7.7mg，0.193mmol)。搅拌反应混合物10分钟，然后添加氯甲酸甲酯(13.6μL，0.175mmol)。允许反应升温至室温并且搅拌18小时。添加氯化铵(5mL，饱和水溶液)并且用EtOAc萃取(3X10mL)。将合并的有机物用盐水(10ml)洗涤，MgSO₄干燥，过滤并且在真空条件下除去溶剂。通过反相制备HPLC纯化粗产物[Waters Sunfire C18，10μM，100柱，梯度10％-95％B(溶剂A：0.05％TFA/水；溶剂B：CH₃CN)，在16分钟内，在25mL/min下]，得到标题化合物，为灰白色粉末状(25mg，31％)。

呈现为三氟乙酸盐。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.47-1.63(2H，m)，1.78-2.18(8H，m)，3.70(3H，s)，4.28(1H，dt)，5.30(1H，dd)，8.58(1H，s)，9.34(1H，s)，10.69(1H，br s)；HPLC rt(min)：7.62；MS(ES⁺)344，(ES^-)342.

实施例29：

(R)-4-(5-环丁基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-甲氧基-N-甲基苯甲酰胺(I-29)

使用方法B来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.72(3H，t)，1.63-1.87(4H，m)，2.10-2.50(4H，m)，2.31(3H，s)，2.80(3H，d)，3.92(3H，s)，4.47(1H，quint)，5.32(1H，dd)，7.50-7.55(2H，m)，8.11(1H，br d)，8.43(1H，br q)，8.59(1H，s)，8.82(1H，brs)，9.30(1H，s)；HPLC rt(min)：8.32；MS(ES⁺)435，(ES^-)433.

实施例30：

(R)-4-(5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-基氨基)-3-(甲氧基甲基)-N-甲基苯甲酰胺(I-30)

使用方法I来制备，呈现为甲磺酸盐(方法H)。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.31-1.50(4H，m)，1.72-2.03(6H，m)，2.33(3H，s)，2.79(3H，d)，3.32(3H，s)，4.09-4.20(1H，m)，4.52(2H，s)，5.28-5.35(1H，m)，7.80-7.87(2H，m)，7.90(1H，s)，8.41-8.49(1H，m)，8.58(1H，s)，9.20-9.35(1H，br s)，9.30(1H，s)；HPLCrt(min)：8.39；MS(ES⁺)463，(ES^-)461.

实施例31：

(R)-N-苄基-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-31)

使用方法J来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.65-0.69(3H，m)，1.48(2H，m)，1.64-1.89(8H，m)，4.10(1H，m)，4.45(2H，m)，5.07(1H，m)，7.20(1H，m)，7.28(4H，m)，7.57(1H，br s)，8.38(1H，s)，9.14(1H，s)；HPLC rt(min)：9.77；MS(ES⁺)376，(ES^-)374.

实施例32：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-32)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.70-0.72(3H，m)，1.56(2H，m)，1.74-2.02(8H，m)，2.23(3H，s)，2.50(4H，m)，3.06(4H，m)，4.43(1H，m)，5.15(1H，m)，6.86(2H，d)，7.50(2H，d)，8.49(1H，s)，9.10(1H，s)，9.20(1H，s)；HPLC rt(min)：9.02；MS(ES⁺)460，(ES^-)458.

实施例33：

(R)-5-环戊基-N-(4-(二氟甲氧基)苯基)-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-33)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.75(3H，m)，1.59(2H，m)，1.76-1.89(8H，m)，2.07(1H，m)，4.48(1H，m)，5.18(1H，m)，7.11(2H，d)，7.72(2H，d)，8.55(1H，s)，9.23(1H，s)，9.44(1H，s)；HPLC rt(min)：9.70；MS(ES⁺)428，(ES^-)426.

实施例34：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(4-吗啉代苯基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-34)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69-0.72(3H，m)，1.57(2H，m)，1.71-1.89(7H，m)，2.00(1H，m)，2.54(4H，m)，3.72-3.75(4H，m)，4.43(1H，m)，5.16(1H，m)，6.87(2H，d)，7.52(2H，d)，8.50(1H，s)，9.12(1H，s)，9.21(1H，s)；HPLC rt(min)：9.12；MS(ES⁺)447，(ES^-)445.

实施例35：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(4-氟苯基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-35)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69-0.72(3H，m)，1.60(2H，m)，1.73-1.90(7H，m)，2.06(1H，m)，4.46(1H，m)，5.19(1H，m)，7.09(2H，m)，7.67-7.70(2H，m)，8.54(1H，s)，9.23(1H，s)，9.38(1H，s)；HPLC rt(min)：9.78；MS(ES⁺)380，(ES^-)378.

实施例36：

方法M：(R)-5-环戊基-4-乙基-N-甲基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-36)

在包含(R)-7-氯-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶(70mg，0.23mmol)的小瓶中添加甲胺/乙醇(2mL，2M溶液)溶液。密封容器，然后在50℃加热18小时。冷却后，在减压下除去溶剂并且通过反相制备HPLC纯化粗产物[Waters Sunfire C18，10μM，100柱，梯度10％-95％B(溶剂A：0.05％TFA/水；溶剂B：CH₃CN)，在16分钟内，在25mL/min下]。通过使TFA盐/乙腈/水通过碳酸盐筒而获得游离碱，得到标题化合物，为白色粉末状(42mg，61％收率)。

呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.68(3H，t)，1.47-2.03(10H，m)，2.77(3H，d)，4.24-4.32(1H，m)，5.09(1H，d)，6.86(1H，bs)，8.38(1H，s)，9.15(1H，s)；HPLC rt(min)：8.57；MS(ES⁺)300，(ES^-)298.

实施例37：

(R)-5-环戊基-N，4-二乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-37)

使用方法M来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.10(3H，t)，1.47-1.99(10H，m)，3.26(2H，dt)，4.27(1H，br s)，5.09(1H，d)，6.94(1H，br s)，8.37(1H，s)，9.15(1H，s)；HPLC rt(min)：9.14；MS(ES⁺)314，(ES^-)312.

实施例38：

(R)-N，5-二环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-38)

使用方法J来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69(3H，t)，1.43-2.00(18H，m)，4.07-4.17(1H，m)，4.17-4.34(1H，m)，5.08(1H，bs)，6.98(1H，bs)，8.36(1H，s)，9.14(1H，s)；HPLC rt(min)：10.2；MS(ES⁺)354，(ES-)352.

实施例39：

(R)-N-(4-(1H-吡唑-1-基)苯基)-5-环戊基-4-乙基-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-39)

使用方法I来制备，呈现为三氟乙酸盐。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，m)，1.58-1.59(2H，m)，1.75-2.07(7H，m)，2.33(1H，m)，4.48(1H，m)，5.22(1H，m)，6.52(1H，s)，7.71-7.81(5H，m)，8.42(1H，m)，8.58(1H，s)，9.26(1H，s)，9.64(1H，s)；HPLC rt(min)：9.32；MS(ES⁺)428，(ES^-)426.

实施例40：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-40)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.70(3H，m)，0.70-0.74(3H，m)，1.60-1.63(2H，m)，1.71-1.92(7H，m)，2.08(1H，m)，4.51(1H，m)，5.22(1H，m)，7.82(1H，d)，8.42(1H，d)，8.64(1H，s)，9.03(1H，m)，9.27(1H，s)，9.98(1H，s)；HPLC rt(min)：9.70；MS(ES⁺)431，(ES^-)429.

实施例41：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡啶-3-基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-41)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.68-0.72(3H，m)，1.53(2H，m)，1.69-1.97(8H，m)，2.23(3H，s)，2.42(4H，m)，3.40(4H，m)，4.35(1H，m)，5.14(1H，m)，6.80(1H，d)，7.79(1H，m)，8.32(1H，m)，8.48(1H，s)，9.04(1H，s)，9.20(1H，s)；HPLC rt(min)：8.70；MS(ES⁺)461，(ES^-)459.

实施例42：

(R)-5-环戊基-4-乙基-N-(4-(吡咯烷-1-基)苯基)-4，5-二氢-[1，2，4]三唑并[4，3-f]蝶啶-7-胺(I-42)

使用方法I来制备，呈现为游离碱。

¹H NMR DMSO D⁶0.69-0.72(3H，m)，1.54(2H，m)，1.60-1.81(8H，m)，1.89-1.94(4H，m)，3.19(4H，m)，4.38(1H，m)，5.13(1H，m)，6.47-6.52(2H，m)，7.42(2H，d)，8.46(1H，s)，8.91(1H，s)，9.19(1H，s)；HPLC rt(min)：10.44；MS(ES⁺)431，(ES^-)429.

实施例43：PLK1测定

可用以下测定评价作为人PLK激酶抑制剂的本发明化合物。

Plk1抑制测定：

用放射性磷酸盐结合测定筛选具有抑制Plk1能力的化合物。在25mM HEPES(pH7.5)，10mM MgCl₂和1mM DTT的混合物中进行测定。底物终浓度为50μM[γ-33P]ATP(136mCi 33P ATP/mmolATP，Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals)和10μM肽(SAM68蛋白Δ332-443)。在25℃下，在15nM Plk1(A20-K338)的存在下进行测定。制备含除ATP和目的试验化合物外的上列所有试剂的测定贮备缓冲液。将30μL贮备液放入96孔板中，然后按一式两份(终DMSO浓度为5％)，加入2μL含系列稀释浓度的试验化合物的DMSO贮备液(通常起始浓度为10μM终浓度，按2倍稀释倍数进行系列稀释)。将板在25℃下预温育10分钟，然后通过加入8μL[γ-33P]ATP(终浓度50μM)起动反应。

60分钟后，通过加入100μL 0.14M磷酸使反应终止。用100μL 0.2M磷酸将多网(multiscreen)磷酸纤维素过滤器96孔板(Millipore，分类号MAPHN0B50)预处理，然后加入125μL终止反应的测定混合物。将板用4×200μL 0.2M磷酸漂洗。干燥后，将100μLOptiphase‘SuperMix′液体闪烁混合物(Perkin Elmer)加入孔中，然后进行闪烁计数(1450Microbeta液体闪烁计数器，Wallac)。

将所有数据点的平均背景值扣除后，通过用Prism软件包(Macintosh，GraphPad Software的GraphPad Prism 3.0cx版本，SanDiego California，USA)对初始速率数据进行非线性回归分析，计算Ki(app)数据。

Plk1抑制测定：

用放射性磷酸盐结合测定筛选具有抑制Plk1能力的化合物。在25mM HEPES(pH 7.5)，10mM MgCl₂，0.1％BSA和2mM DTT的混合物中进行测定。底物终浓度为150μM(350μM，用于确定<1nM的值)[γ-33P]ATP(115mCi 33P ATP/mmol ATP，Amersham PharmaciaBiotech/Sigma Chemicals)和300μM(450μM，用于确定<1nM的值)肽(KKKISDELMDATFADQEAK)SEQ.ID No.1。在25℃下，在4nM(1nM，用于确定<1nM的值)Plk1的存在下进行测定。制备含除ATP 和目的试验化合物外的上列所有试剂的测定贮备缓冲液。将30μL贮备液放入96孔板中，然后按一式两份(终DMSO浓度为5％)，加入2μL含系列稀释浓度的试验化合物的DMSO贮备液(通常起始浓度为10μM终浓度，按2倍稀释倍数进行系列稀释)。将板在25℃下预温育10分钟，然后通过加入8μL[γ-33P]ATP(终浓度150μM(350μM，用于确定<1nM的值))起动反应。

90分钟(240分钟，用于确定<1nM的值)后，通过加入100μL0.14M磷酸将反应终止。用100μL0.2M磷酸将多网磷酸纤维素过滤器96孔板(Millipore，分类号MAPHN0B50)预处理，然后加入125μL终止反应的测定混合物。将板用4×200μL 0.2M磷酸漂洗。干燥后，将100μL Optiphase‘SuperMix′液体闪烁混合物(Perkin Elmer)加入孔中，然后进行闪烁计数(1450Microbeta液体闪烁计数器，Wallac)。

一般而言，本发明化合物均可有效抑制Plk1。以下化合物在放射性结合测定中显示的Ki为低于10nM：I-1、I-2、I-4、I-5、I-6、I-7、I-8、I-9、I-10、I-11、I-12、I-13、I-14、I-15、I-16、I-17、I-18、I-19、I-20、I-21、I-22、I-23、I-24、I-25、I-29、I-30、I-32、I-33、I-34、I-35、I-39、I-41、I-42。以下化合物在放射性结合测定中显示的Ki为10nM-100nM：I-31、I-40。以下化合物在放射性结合测定中显示的Ki为100nM-4μM：I-26、I-27、I-28、I-36、I-37、I-38。

Plk2抑制测定：

用放射性磷酸盐结合测定筛选具有抑制Plk2能力的化合物。在25mM HEPES(pH 7.5)，10mM MgCl₂，0.1％BSA和2mM DTT的混合物中进行测定。底物终浓度为200μM[γ-33P]ATP(57mCi 33PATP/mmol ATP，Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals)和300μM肽(KKKISDELMDATFADQEAK)SEQ.ID No.2。在25℃下，在25nM Plk2的存在下进行测定。制备含除ATP和目的试验化合物外的上列所有试剂的测定贮备缓冲液。将30μL贮备液放入96孔板中，然后按一式两份(终DMSO浓度为5％)，加入2μL含系列稀释浓度的试验化合物的DMSO贮备液(通常起始浓度为10μM终浓度，按2倍稀释倍数进行系列稀释)。将板在25℃下预温育10分钟，然后通过加入8μL[γ-33P]ATP(终浓度200μM)起动反应。

90分钟后，通过加入100μL 0.14M磷酸将反应终止。用100μL 0.2M磷酸将多网磷酸纤维素过滤器96孔板(Millipore，分类号MAPHN0B50)预处理，然后加入125μL终止反应的测定混合物。将板用4×200μL 0.2M磷酸漂洗。干燥后，将100μL Optiphase‘SuperMix′液体闪烁混合物(Perkin Elmer)加入孔中，然后进行闪烁计数(1450Microbeta液体闪烁计数器，Wallac)。

Plk3抑制测定：

用放射性磷酸盐结合测定筛选具有抑制Plk3能力的化合物。在25mM HEPES(pH 7.5)，10mM MgCl₂和1mM DTT的混合物中进行测定。底物终浓度为75μM[γ-33P]ATP(60mCi 33P ATP/mmolATP，Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals)和10μM肽(SAM68蛋白Δ332-443)。在25℃下，在5nM Plk3(S38-A340)的存在下进行测定。制备含除ATP和目的试验化合物外的上列所有试剂的测定贮备缓冲液。将30μL贮备液放入96孔板中，然后按一式两份(终DMSO浓度为5％)，加入2μL含系列稀释浓度的试验化合物的DMSO贮备液(通常起始浓度为10μM终浓度，按2倍稀释倍数进行系列稀释)。将板在25℃下预温育10分钟，然后通过加入8μL[γ-33P]ATP(终浓度75μM)起动反应。

60分钟后，通过加入100μL0.14M磷酸将反应终止。用100μL0.2M磷酸将多网磷酸纤维素过滤器96孔板(Millipore，分类号MAPHN0B50)预处理，然后加入125μL终止反应的测定混合物。将板用4×200μL0.2M磷酸漂洗。干燥后，将100μL Optiphase‘SuperMix′液体闪烁混合物(Perkin Elmer)加入孔中，然后进行闪烁计数(1450Microbeta液体闪烁计数器，Wallac)。

将所有数据点的平均背景值扣除后，通过用Prism软件包 (Macintosh，GraphPad Software的GraphPad Prism 3.0cx版本，SanDiego California，USA)对初始速率数据进行非线性回归分析，计算Ki(app)数据。

Plk4抑制测定：

用放射性磷酸盐结合测定筛选具有抑制Plk4能力的化合物。在8mM MOPS(pH 7.5)，10mM MgCl₂，0.1％BSA和2mM DTT的混合物中进行测定。底物终浓度为15μM[γ-33P]ATP(227mCi 33PATP/mmol ATP，Amersham Pharmacia Biotech/Sigma Chemicals)和300μM肽(KKKMDATFADQ)SEQ.ID No.3。在25℃下，在25nM Plk4的存在下进行测定。制备含除ATP和目的试验化合物外的上列所有试剂的测定贮备缓冲液。将30μL贮备液放入96孔板中，然后按一式两份(终DMSO浓度为5％)，加入2μL含系列稀释浓度的试验化合物的DMSO贮备液(通常起始浓度为10μM终浓度，按2倍稀释倍数进行系列稀释)。将板在25℃下预温育10分钟，然后通过加入8μL[γ-33P]ATP(终浓度15μM)起动反应。

180分钟后，通过加入100μL 0.14M磷酸将反应终止。用100μL 0.2M磷酸将多网磷酸纤维素过滤器96孔板(Millipore，分类号MAPHN0B50)预处理，然后加入125μL终止反应的测定混合物。将板用4×200μL 0.2M磷酸漂洗。干燥后，将100μL Optiphase‘SuperMix′液体闪烁混合物(Perkin Elmer)加入孔中，然后进行闪烁计数(1450Microbeta液体闪烁计数器，Wallac)。

序列表

<110>Vertex

<120>可用作蛋白激酶抑制剂的四氢蝶啶

<130>125805/00281

<140>US 11/786,578

<141>2007-04-12

<150>US 60/791,327

<151>2006-04-12

<150>US 60/838,720

<151>2006-08-18

<160>3

<170>PatentIn version 3.3

<210>1

<211>19

<212>PRT

<213>人工

<220>

<223>Plk 1

<400>1

Lys Lys Lys Ile Ser Asp Glu Leu Met Asp Ala Thr Phe Ala Asp Gln

1 5 10 15

Glu Ala Lys

<210>2

<211>19

<212>PRT

<213>人工

<220>

<223>Plk 1

<400>2

Lys Lys Lys Ile Ser Asp Glu Leu Met Asp Ala Thr Phe Ala Asp Gln

1 5 10 15

Glu Ala Lys

<210>3

<211>11

<212>PRT

<213>人工

<220>

<223>Plk 1

<400>3

Lys Lys Lys Met Asp Ala Thr Phe Ala Asp Gln

1 5 10

Claims

1.式I的化合物：

或其药学上可接受的盐，其中

环A是三唑环或咪唑环，其各自任选地且独立地被以下基团取代：C_1-6烷基；

X¹是-NR⁸-；

R¹是H、C_1-10脂族基团、C_3-10环脂族基团、C_6-10芳基、或5-10元杂芳基，其中所述R¹任选地被0-5个J¹取代；

每一个R²和R³独立地是H或C_1-10脂族基团；

R⁴是C_3-10环脂族基团；

R⁸是H或-C(O)OR；

每一个J¹独立地是卤素、Q或-Z-Q；

每一个Z独立地是C_1-6脂族基团，其中所述C_1-6脂族基团中的0-3个-CH₂-单元任选地被替换为-NR-、-O-、或-C(O)-；

每一个Q独立地是H、C_1-6脂族基团、或3-8-元芳族或非芳族的具有0-3个独立地选自O、N和S的杂原子的单环，其中每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代；

每一个J^Q独立地是-M或-Y-M；

每一个Y独立地是未被取代的C_1-6脂族基团，其中所述C_1-6脂族基团中的0-3个-CH₂-单元任选地被替换为-O-；

每一个M独立地是H、C_1-6脂族基团、C_3-6环脂族基团、卤代(C_1-4脂族基团)、O(卤代C_1-4脂族基团)、3-6元杂环基、卤素或CO₂H；和

每一个R独立地是H或未被取代的C_1-6脂族基团。

2.权利要求1的化合物，其中R⁸是H。

3.权利要求1的化合物，其中R⁸是-C(O)OC_1-6烷基。

4.权利要求3的化合物，其中R⁸是-C(O)OCH₃。

5.权利要求1的化合物，其中R¹选自H、C_6-10芳基、或5-10 元杂芳基。

6.权利要求5的化合物，其中R¹是H。

7.权利要求5的化合物，其中每一个R¹是C_6-10芳基。

8.权利要求5的化合物，其中R¹是5-10元杂芳基。

9.权利要求7的化合物，其中C_6-10芳基是任选地在对位被-C(O)N(R)-Q取代并且任何剩余位置被-O-Q、卤素或Q取代的苯基，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

10.权利要求8的化合物，其中杂芳基被-C(O)N(R)-Q取代并且任何剩余位置被-O-Q或Q取代，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代。

11.权利要求9的化合物，其中-C(O)N(R)-Q中的Q是H、C_1-4脂族基团、C_1-4卤代脂族基团、C_3-7环脂族基团、C_3-7杂环脂族基团、C_1-6烷氧基、或(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基。

12.权利要求11的化合物，其中苯基在任何剩余位置任选地被卤素、C_1-4脂族基团、C_1-4卤代脂族基团、C_3-7环脂族基团、C_3-7杂环脂族基团、C_1-6烷氧基、(C_1-6烷氧基)C_1-6烷基或C_1-6卤代烷氧基取代。

13.权利要求1的化合物，其中-C(O)N(R)-Q的Q是甲基、乙基、1-甲基哌啶-4-基、环丙基、环戊基、3-呋喃基、3-氟代吡咯烷-1-基或3，3-二氟环丁基。

14.权利要求1的化合物，其中R¹是C_1-6烷基或C_3-7环烷基。

15.权利要求13的化合物，其中R¹是H、乙基、环丙基或环戊基。

16.权利要求1的化合物，其中R¹是苯基并且在苯基的对位上的一个取代基是Q。

17.权利要求16的化合物，其中在对位的取代基是氟、羧基、三氟甲基、4-甲基哌嗪-1-基、二氟甲氧基、吗啉-1-基、吡唑-1-基或吡咯烷-1-基。

18.权利要求8的化合物，其中R¹是噻吩-2-基、吡啶-3-基或吡啶-4-基。

19.权利要求1的化合物，其中R²和R³中的每一个是C_1-3烷基。

20.权利要求1的化合物，其中R²是H和R³是C_1-3烷基。

21.权利要求20的化合物，其中R³是乙基。

22.权利要求1的化合物，其中R⁴是环戊基。

23.权利要求1的化合物，由式II表示；

其中

R¹是任选地且独立地在对位被-C(O)N(R)-Q取代并且任何剩余位置被-O-Q、卤素或Q取代的苯基，其中，Q、-C(O)N(R)-Q和-O-Q中的每一个Q独立地任选被0-5个J^Q取代；和

每一个R²和R³独立地是H或C_1-3烷基；

R⁴是环戊基；和

J^A是H或C_1-4烷基。

24.选自以下的化合物：

25.一种组合物，所述组合物包含权利要求1或24中任一项的化合物和药学上可接受的载体。

26.权利要求1或24中任一项的化合物在制备用于在患者中抑制蛋白激酶活性的药物中的用途。

27.权利要求26的用途，其中所述蛋白激酶是PLK。

28.权利要求27的用途，其中所述蛋白激酶是PLK1。

29.一种用于非治疗目的的在体外生物样品中抑制蛋白激酶活性的方法，所述方法包括使所述生物样品与权利要求1或24中任一项的化合物接触。

30.权利要求1或24中任一项的化合物在制备用于在患者中治疗增殖病症、神经变性病症、自身免疫性病症、炎性病症或免疫介导的病症的药物中的用途。

31.权利要求1或24中任一项的化合物在制备用于在患者中治疗黑素瘤、骨髓瘤、白血病、淋巴瘤、成神经细胞瘤或癌症的药物中的用途，所述癌症选自结肠癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、中枢神经系统(CNS)癌、肾癌、前列腺癌、膀胱癌或胰腺癌。

32.权利要求1或24中任一项的化合物在制备用于在患者中治疗癌症的药物中的用途。