CN101477077B - 重金属驱除药物体外的初筛方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种重金属驱除药物体外的初筛方法,它是将测定重金属含量的装置应用到重金属驱除药物体外的初筛上,溶液中处于游离状态的重金属离子,当在电极中施加一定的负电压时,重金属离子在汞电极上还原并被吸附在石墨表面上的汞薄膜中富集,通过改变电极电势,将吸附于汞电极的重金属氧化解析溶出,溶出过程的电流与样品中含量成正比,进而测定出样品中重金属含量。如果待筛选药物能与重金属离子药物结合,则溶出分析仪值会变小;否则值不变。本发明的优点是:设备简单、成本低、操作容易;筛选周期短;结果直观。
Description
技术领域
本发明涉及重金属驱除药物的方法,具体是重金属驱除药物体外的初筛方法。
背景技术
人类在推动生产力高度发展的同时,不可避免导致环境污染,其中包括重金属的污染。这些重金属通过各种途径进入人体后,难于排泄出体外,便会长期蓄积人体内,最终导致机体中毒,因而,驱除体内蓄积的重金属,这对于保护人群健康非常必要。目前驱除体内重金属的主要手段是利用药物具有与重金属结合的特性,将重金属随尿液等排除体外。目前,对于这类药物的开发首先是进行动物试验,成功后,再进行临床观察。这样一来,开发驱除重金属药物的周期就很长,而且效率低、费用高;此外,目前应用于临床的经典驱除体内重金属的药物有依地酸二钠钙、二巯基丙醇及二巯基丁二酸钠等。虽然它们药效明显,但也有较强的副作用,因而建立快速及廉价的药物筛选方法,寻找其他高效低毒的驱除重金属药物成为目前急需解决的问题。
发明内容
本发明的目的是公开一种利用阳极溶出伏安法电化学原理,而建立一套在体外能初步观察待选化学物质与重金属结合情况的快速而价廉的重金属驱除药物体外的初筛方法。
本发明重金属驱除药物的初筛方法是把原测定重金属含量的装置应用到重金属驱除药物初筛上,原装置由测定池、溶出分析仪、旋转电机、参比电极、工作电极和辅助电极组成,参比电极、辅助电极、工作电极、旋转电机分别与溶出分析仪连通,工作电极安装在旋转电机上,三电极系统均插入到测定池中。
一种重金属驱除药物体外的初筛方法步骤如下:
1、在测定池中加入3.0ml的镀汞液,由溶出分析仪提供一定的电压对工作电极镀汞,镀汞参数根据不同重金属进行设置;
2、在测定池中加入3.0ml的底液及100-500μL的1-100nM/L重金属溶液,测定参数根据不同重金属进行设置,检测溶出分析仪值;
3、测定池中加入一定量的待筛选药物,检测溶出分析仪值;
4、对比2和3的溶出分析仪值,如值变小,表示待筛选药物能与重金属离子药物结合,如果值不变,表示待筛选药物不与重金属离子药物结合,而不能作为驱除重金属药物使用。
重金属溶液的配置方法:根据具体情况分别配置1-100(nM/L)重金属溶液。
镀汞液的配置方法:342.62毫克HgNO3.H2O,25.3克KNO3,0.63毫升浓硝酸,用超纯水定容至1000毫升。
底液的配置方法:10毫升冰乙酸,加超纯水至500毫升。
所述的镀汞和测定参数为:
镀汞 | 测量 |
搅拌时间:60S | 清洗时间:10-40S |
原点电位:-0.9V | 清洗电位:0.05V-0.1V |
终点电位:-0.2V | 搅拌时间:40-90S |
还原电位:-1.10V | 原点电位:-0.9V |
灵敏度:1-5 | 终点电位:-0.2V |
镀汞次数:4-5 | 还原电位:-1.1V |
灵敏度:5-10 | |
溶出能力:3-5 |
本发明体外初筛法的原理是:
溶液中处于游离状态的重金属离子,当在电极中施加一定的负电压时,重金属离子在汞电极上还原并被吸附在石墨表面上的汞薄膜中富集,通过改变电极电势,将吸附于汞电极的重金属氧化解析溶出,溶出过程的电流与样品中含量成正比,进而测定出样品中重金属含量。
当加入一定量能与重金属结合的物质后,游离状态的重金属离子变为结合状态,而失去电荷,此时这部分重金属离子无法在电场的作用下富集在汞电极,使得在测定时表现出溶液中重金属离子含量“下降”的现象。与重金属离子的结合量与浓度“下降”的程度成正比关系。根据此原理,我们可以判断出待测物质是否具有与重金属结合的能力。具备这种能力的物质,才有可能在体内具有驱除重金属的能力,可以作为驱重金属动物试验的检测物质。
本发明的优点是:
1、设备简单、成本低、操作容易;
2、筛选周期短;
3、结果直观。
附图说明
图1为本发明重金属驱除药物初筛装置的结构示意图;
图2为本发明依地酸二钠钙与铅离子结合试验曲线图。
图中:1.溶出分析仪、2.旋转电机、3.工作电极、4.参比电极、5.辅助电极、6.测定池
具体实施方式
本发明重金属驱除药物的初筛方法是把原测定重金属含量的装置应用到重金属驱除药物初筛上。
本发明重金属驱除药物体外初筛装置由测定池6、溶出分析仪1、旋转电机2、参比电极4、工作电极3和辅助电极5组成。参比电极4、辅助电极5、工作电极3、旋转电机2分别与溶出分析仪1连通,工作电极3安装在旋转电机2上,三电极系统均插入到测定池6中。
所述的工作电极3为汞电极与非汞电极,其功用是用于探测待测重金属在工作电极上的电位变化,该电位与待测重金属在测定池中的含量成正比;
所述的旋转电机2与工作电极相连,其作用是使工作电极按一定速度旋转;
所述的参比电极4是指在温度、压力一定的条件下,其电极电位准确已知,且不随待测溶液中离子浓度的变化而改变,采用饱和甘汞电极,其作用就是给工作电极设一个零点,好让我们知道工作电极的电位值是相对于哪个零点而言的;
所述的辅助电极5为铂电极,其功用是在整个测试中形成一个可以让电流通过的回路,只有一个电极外电路上是不可能有稳定的电流通过的。这就好比电路里面必须要有火线和零线一样;
所述的溶出分析仪1为市售各种溶出分析仪,其功用是程序化控制测定过程中的一些测定参数,并将工作电极的电位变化以一定形式表现出来。测定参数包括镀汞参数和重金属测定参数。
下面以临床上经典驱铅药物依地酸二钠钙为例,检验本发明的可靠性:
1、在测定池6中加入3.0ml的镀汞液,由溶出分析仪1提供一定的电压对工作电极镀汞,镀汞参数设置:搅拌时间:60S,原点电位:-0.9V,终点电位:-0.2V,还原电位:-1.10V,灵敏度:1-5,镀汞次数:5;测铅参数设置:清洗时间:10S,清洗电位:0.05伏,搅拌时间:40S,原点电位:-0.9伏,终点电位:-0.2伏,还原电位:-1.1伏,灵敏度:5,溶出能力:3;
2、在测定池6中加入3.0ml的底液及500μL的10nM/L硝酸铅溶液,检测溶出分析仪值H1=250;
3、测定池6中加入10μL的0.2μM/L的依地酸二钠钙,检测溶出分析仪值H2=130;
4、对比2和3的溶出分析值,如图2所示。从溶出曲线图可以看出,加500μL的10nM/L铅时溶出分析仪值为250,而在同样的测定池加入10μL的0.2μM/L的依地酸二钠钙时溶出分析仪值为120,溶出分析仪值减少了130,表示依地酸二钠钙能与铅离子结合,可作为驱铅药物使用,此结果与目前的化学螯合理论及临床螯合治疗用药情况相符,本发明的结论可靠。
Claims (2)
1.一种重金属驱除药物体外的初筛方法,其特征是:它是将由测定池、溶出分析仪、旋转电机、参比电极、工作电极和辅助电极组成的用于测定重金属含量的装置应用到重金属驱除药物体外的初筛中,其方法步骤如下:
(1)在测定池中加入3.0ml的镀汞液,由溶出分析仪提供电压对工作电极镀汞,镀汞参数根据不同重金属进行设置;
(2)在测定池中加入3.0ml的底液及100-500mL的1-100nM/L重金属溶液,测定参数根据不同重金属进行设置,检测溶出分析仪值;
(3)在测定池中加入一定量的待筛选药物,检测溶出分析仪值;
(4)对比(2)和(3)的溶出分析仪值,如值变小,表示待筛选药物能与重金属离子药物结合;如果值不变,表示待筛选药物不与重金属离子药物结合,不能作为驱除重金属药物使用。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征是:
所述的镀汞参数为:搅拌时间60S;原点电位-0.9V;终点电位:-0.2V;还原电位:-1.10V;灵敏度:1-5;镀汞次数:4-5;
所述的测量参数为:清洗时间:10-40S;清洗电位:0.05V-0.1V;搅拌时间:40-90S;原点电位:-0.9V;终点电位:-0.2V;还原电位:-1.1V;灵敏度:5-10;溶出能力:3-5。
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