CN101463095A - 肝素生产新工艺 - Google Patents

Abstract

本发明为一种肝素生产新工艺，首先制作鲜胰浆，然后将猪小肠粘膜通过生物酶解，得到含有肝素的溶液，再通过D254离子交换树脂，吸附、洗脱，最后经过沉淀、脱盐、脱水干燥等步骤，即得肝素粗品。本发明具有生产周期短、节约原辅材料、耗能低、纯度高、效价高、不污染环境的特点，产品的收率在效价为75－85U时，可达0.8－1g。

Description

肝素生产新工艺

技术领域

本发明涉及一种肝素生产工艺，特别是一种用生物酶解法制备肝素的新工艺。

背景技术

肝素作为一种生物医药中间体，是一种天然抗凝血药物，具有抗凝血和防止血栓形成的作用，临床上广泛用于肾病患者的渗血、急性心肌梗塞、输血时预防血液凝固和保存鲜血等方面。肝素广泛分布于哺乳动物组织中，例如肠粘膜、肺、肝中，特别是猪小肠粘膜中含量最高。传统的肝素生产工艺是盐解法，即用碱性食盐水与肠粘膜发生初级生物化学反应，制得肝素。但是这种生产工艺生产周期长，水解不完全、不彻底，制得的肝素、纯度低、收率低、效价低、产生大量的废渣、废水严重污染环境。

发明内容

本发明的目的是提供一种用生物酶酶解法生产肝素的新工艺，它具有生产周期短、收率高、成本低、耗能低、纯度高、效价高、不污染环境的特点。

本发明的目的由以下技术方案来实现，其生产工艺包括以下步骤：

1)鲜胰浆的配制

①首先配制生石灰水，将生石灰与水按1:3的比例混合，搅匀沉淀待用；

②将新鲜胰脏除去结蒂组织、油脂、杂物，铰碎成糊状；

③将沉淀好的生石灰上层清液与铰碎的胰脏糊状，按1:2—3的比例混合成胰浆；

④用30-40％氢氧化钠溶液调PH值至8.0，搅匀静置2h，激活后即可使用；

2)酶解

①首先将收集的肠粘膜投入反应锅中，加入0.1-0.3％的抑菌剂，并按每0.8kg小肠粘膜加5-8kg水的比例配制成酶解液；

②加热升温至30-50℃时，用30-40％的氢氧化钠溶液PH值至7-10，按与酶解液1:20的比例加入鲜胰浆，继续加热升温，进行搅拌酶解反应；

③当锅内料温升至40-60℃时，停止加热升温，保温2-6小时，查看料温在55-65℃时，复查调PH值7-10，用盐度计测盐度为1.5-4.5；

④继续加热升温至70-85℃，保温30-60min，即刻过滤，收集过滤液用于吸附，无废渣；

3)吸附

①将收集待用的过滤液移入吸附罐内，除去上层油膜；

②待料液温度降至60-50℃，按0.8kg小肠粘膜加入20-30g D254专用吸附树脂，搅拌吸附4-8h；

③过滤收集树脂用于洗脱，过滤液弃去；

4)洗脱

①将收集的树脂用水清洗干净后，移入洗脱桶内，按树脂2-3倍量加入18-25％的氯化钠溶液；

②在30-50℃的保温条件下搅拌洗脱4-6h；

③过滤收集过滤液用于沉淀待用，收集树脂用于第二遍洗脱；

④按树脂1-2倍量加入18-25％的氯化钠溶液，在保温30-50℃条件下搅拌进行第二遍洗脱2-4h；

⑤过滤收集过滤液用作下一次洗脱时的第一遍洗脱液，收集树脂再生处理待用；

5)沉淀

①将收集的第一遍洗脱液过滤移入沉淀缸中，加入含量为85％以上的乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到30-50％，调PH值至7-8.0，搅匀密封沉淀6-24h；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱盐待用；

6)脱盐

①将收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量为75％以下的低浓度乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到30-50％，调PH值至7-8.0，搅匀密封沉淀24h以上；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱水干燥待用；

7)脱水干燥

①将收集的沉淀物滤干或用白涤良布吊干脱水；

②将脱水后的沉淀物移入烘箱烘干或用蒸汽蒸干或使用石灰块干燥，即得肝素粗品。

所述抑菌剂是苯酚或高锰酸钾或三氯钾烷。

本发明的优点是：

①弥补了盐解法提取肝素的不足，更彻底全面地溶解肠粘膜，提高肝素收率30％左右，提高产品质量纯度，杂质少，效价高；

②解决了盐碱提取法溶解不彻底的缺点，无废气、废渣、废水排出污染环境；

③节约原辅材料30％以上，提高了经济效益，符合国家节能降耗减排的政策；

④使用该工艺生产无毒、无害、生物环保、并可大规模工业化生产；

⑤省工省时、省力、减轻劳动强度40％以上；

⑥节约煤、电能源20％以上，做到低成本，高产出，实现了效益最大化。

具体实施方式

以下通过实施例进一步阐述本发明。

实施例1：

本发明的生产工艺包括以下步骤：

1)鲜胰浆的配制

①首先配制生石灰水，将生石灰与水按1:3的比例混合，搅匀沉淀待用；

②将新鲜胰脏除去结蒂组织、油脂、杂物，铰碎成糊状；

③将沉淀好的生石灰上层清液与铰碎的胰脏糊状，按1:2—3的比例混合成胰浆；

④用30-40％氢氧化钠溶液调PH值至8.0，搅匀静置2h，激活后即可使用；

2)酶解

①将收集的100kg肠粘膜投入反应锅中，加入0.2kg的苯酚溶液，并加700kg水的比例配制成酶解液；

②加热升温至45℃时，用45％的氢氧化钠溶液调PH值至8.5，加入20kg的鲜胰浆，继续加热升温，进行搅拌酶解反应；

③当锅内料温升至50℃时，停止加热升温，保温3小时，查看料温在60℃时，复查调PH值8，用盐度计测盐度为3；

④继续加热升温至65℃，保温45min，即刻过滤，收集过滤液用于吸附，无废渣；

3)吸附

①将收集待用的过滤液移入吸附罐内，除去上层油膜；

②待料液温度降至55℃，加入D254专用吸附树脂2kg，搅拌吸附6h；

③过滤收集树脂用于洗脱，过滤液弃去；

4)洗脱

①将收集的树脂用水清洗干净后，移入洗脱桶内，加入18-25％的氯化钠溶液3kg；

②在45℃的保温条件下搅拌洗脱5h；

③过滤收集过滤液用于沉淀待用，收集树脂用于第二遍洗脱；

④加入18-25％的氯化钠溶液15kg，在保温40℃条件下搅拌进行第二遍洗脱2-4h；

⑤过滤收集过滤液用作下一次洗脱时的第一遍洗脱液，收集树脂再生处理待用；

5)沉淀

①将收集的第一遍洗脱液过滤移入沉淀缸中，加入含量为85％以上的乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到40％，调PH值至8.0，搅匀密封沉淀15h；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱盐待用；

6)脱盐

①将收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量为75％以下的低浓度乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到30-50％，调PH值至7-8.0，搅匀密封沉淀24h以上；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱水干燥待用；

7)脱水干燥

①将收集的沉淀物滤干或用白涤良布吊干脱水；

②将脱水后的沉淀物移入烘箱烘干或用蒸汽蒸干或使用石灰块干燥，即得100g肝素粗品，产品效价为75～85U。

Claims (2)

1、一种肝素生产新工艺，其特征在于：其生产工艺包括以下步骤：

1)鲜胰浆的配制

①首先配制生石灰水，将生石灰与水按1:3的比例混合，搅匀沉淀待用；

②将新鲜胰脏除去结蒂组织、油脂、杂物，铰碎成糊状；

③将沉淀好的生石灰上层清液与铰碎的胰脏糊状，按1:2—3的比例混合成胰浆；

④用30-40％氢氧化钠溶液调PH值至8.0，搅匀静置2h，激活后即可使用；

2)酶解

①首先将收集的肠粘膜投入反应锅中，加入0.1-0.3％的抑菌剂，并按每0.8kg小肠粘膜加5-8kg水的比例配制成酶解液；

②加热升温至30-50℃时，用30-40％的氢氧化钠溶液PH值至7-10，按与酶解液1:20的比例加入鲜胰浆，继续加热升温，进行搅拌酶解反应；

③当锅内料温升至40-60℃时，停止加热升温，保温2-6小时，查看料温在55-65℃时，复查调PH值7-10，用盐度计测盐度为1.5-4.5；

④继续加热升温至70-85℃，保温30-60min，即刻过滤，收集过滤液用于吸附，无废渣；

3)吸附

①将收集待用的过滤液移入吸附罐内，除去上层油膜；

②待料液温度降至60-50℃，按0.8kg小肠粘膜加入20-30g D254专用吸附树脂，搅拌吸附4-8h；

③过滤收集树脂用于洗脱，过滤液弃去；

4)洗脱

①将收集的树脂用水清洗干净后，移入洗脱桶内，按树脂2-3倍量加入18-25％的氯化钠溶液；

②在30-50℃的保温条件下搅拌洗脱4-6h；

③过滤收集过滤液用于沉淀待用，收集树脂用于第二遍洗脱；

④按树脂1-2倍量加入18-25％的氯化钠溶液，在保温30-50℃条件下搅拌进行第二遍洗脱2-4h；

⑤过滤收集过滤液用作下一次洗脱时的第一遍洗脱液，收集树脂再生处理待用；

5)沉淀

①将收集的第一遍洗脱液过滤移入沉淀缸中，加入含量为85％以上的乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到30-50％，调PH值至7-8.0，搅匀密封沉淀6-24h；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱盐待用；

6)脱盐

①将收集的沉淀物移入沉淀缸中，加入含量为75％以下的低浓度乙醇，使沉淀液中的乙醇含量达到30-50％，调PH值至7-8.0，搅匀密封沉淀24h以上；

②虹吸上层清液用于回收乙醇，收集沉淀物用于脱水干燥待用；

7)脱水干燥

①将收集的沉淀物滤干或用白涤良布吊干脱水；

②将脱水后的沉淀物移入烘箱烘干或用蒸汽蒸干或使用石灰块干燥，即得肝素粗品。

2、根据权利要求1所述的肝素生产新工艺，其特征在于：所述抑菌剂是苯酚或高锰酸钾或三氯钾烷。