CN101455648B - 一种葛根素冻干制剂 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种葛根素冻干制剂，它由抗心血管药物葛根素的脂质体和药物可接受的载体组成，所述的抗心血管药物葛根素的脂质体含葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂组成，其中葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂的重量比为1∶5-40∶0.1-1.5∶0.1-1，脂质体成份为双肉豆蔻卵磷脂与胆固醇，其重量比为20-2∶1，表面活性剂为聚山梨酯80，冻干支持剂选用甘露醇。本发明包封率高，稳定性好，有良好的溶解性，且明显降低了葛根素的溶血性不良反应。

Description

一种葛根素冻干制剂

(一)技术领域：

本发明涉及药品制剂，特别提供了一种含抗心血管药物葛根素的脂质体冻干制剂。

(二)背景技术：

葛根素注射液(化学名8-β-D葡萄吡喃糖-4，7-二羟基异黄酮)临床主要用于扩张冠状动脉和脑血管，增加心、脑血流量，降低心率和心肌耗氧量，抑制血小板聚集，改善血液流变，调节血管内皮细胞功能，抗动脉粥样硬化，并具有抗氧化和清除自由基功能。目前临床上葛根素注射液主要应用于：1、治疗稳定型劳累性心绞痛；2、治疗心肌梗死；3、治疗脑出血；4、治疗脑梗死；5、治疗高血压；6、治疗老年人高脂血症等。

由于葛根素溶解度低，目前临床使用以注射剂为主，但为了增加葛根素的溶解度，必须在制剂里加一些助溶剂，如丙二醇、聚乙烯吡咯烷酮等，而这些助溶剂往往增加了葛根素使用中的不良反应。2003年1月1日，国家药品不良反应监测中心对葛根素注射剂可引起急性血管内溶血等相关安全性问题进行了通报。2004年11月，国家食品药品监督管理局发布了“关于修订葛根素注射剂说明书的通知”。通报发布后，在国家药品不良反应监测中心病例报告数据库中，有关葛根素注射剂的新发不良反应病例报告共1006例(不良反应发生时间为2003年1月1日-2005年6月30日)；其中，不良反应发生时间为2005年1月1日-6月30日的243例(要求修订说明书通知发出后)。1006例病例报告中严重不良反应报告30例，其中11例死亡。严重不良反应报告以急性血管内溶血为主，共18例，其中8例死亡(占死亡病例的73％)。由此可见，葛根素的不良反应已严重影响患者的生命安全，开发一种安全有效的葛根素制剂意义重大。

葛根素脂质体研究已有部分开展，研究表明葛根素前体脂质体包封率较高，具有一定的缓释效果，稳定性较好(宋金春，葛根素前体脂质体的质量考察，中国医院药学杂志，2007，第9期，62-64)，脂质体对葛根素口服吸收有显著促进作用(顾一珠，葛根素脂质体的研制及其大鼠口服吸收，中药材，2007，第8期，77-80)。但所有研究中均未涉及葛根素安全性问题。脂质体是一种定向药物载体，属于靶向给药系统的一种新剂型，具有减少药物给药剂量，提高药物口服生物利用度、增加药物的稳定性等特点。通过各种给药途径，它可使所包裹的药物具有打靶作用，准确地击中病变部位、组织和细胞，从而增强药物的疗效。但脂质体的物理和化学稳定性差，内部药物易于渗漏。

(三)发明内容：

本发明的任务是根据葛根素产品本身的特性，筛选出合适的葛根素脂质体材料，提供一种稳定的包封率高的葛根素脂质体冻干制剂，还有良好的溶解性，且明显降低了葛根素的溶血性不良反应。

本发明所述的葛根素冻干制剂，由抗心血管药物葛根素的脂质体和药物可接受的载体组成，所述的抗心血管药物葛根素的脂质体含葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂组成，其中葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂的重量比为1∶5-40∶0.1-1.5∶0.1-1，脂质体成份为双肉豆蔻卵磷脂与胆固醇，其质量比为20-2∶1，表面活性剂为聚山梨酯80，冻干支持剂选用甘露醇。

本发明所述的脂质体的较优比例为：含葛根素1份，脂质体成份11-33份，聚山梨酯80 0.6～1.2份，甘露醇0.2-0.4份。

本发明所述的脂质体的优选比例为：葛根素1份，双肉豆蔻卵磷脂20份，胆固醇2份，聚山梨酯80 1份，甘露醇0.3份。

本发明所述药物可接受的载体为pH值调节剂，选自磷酸盐缓冲溶液，调节pH值至6.0～8.0。

所述的双肉豆蔻卵磷脂与胆固醇为脂质体的基本组成部分；聚山梨酯80在为表面活性剂，可增加葛根素水溶性，同时可以防止脂质体粒子间相互碰撞时发生融合，增强葛根素脂质体冻干制剂稳定性；甘露醇起冻干时保护作用。

本发明所述的葛根素来自于浙江康恩贝制药股份公司从中药葛根中提取的注射用葛根素原料，批号为20080416，其葛根素含量在99.5％以上，相关物质0.5％以下。

本发明还涉及葛根素冻干制剂的一种制备方法：

1)按处方量称取葛根素、双肉豆蔻卵磷脂、胆固醇、聚山梨酯80，混合，加入适量无水乙醇，将其溶解；

2)将此溶液置于一大的圆底烧瓶中，将烧瓶与旋转蒸发器相连，旋转蒸发，在真空下蒸除有机溶剂，然后将烧瓶浸入30℃的恒温水浴中，旋转使其在器壁形成一层均匀的薄膜；

3)在烧瓶中加入处方量甘露醇及适量磷酸盐缓冲溶液(调节pH至6.0-8.0)，再次将烧瓶连于旋转蒸发器上，不断搅拌，直到器壁上的膜完全溶脱而形成均匀的乳白色分散液为止，即制备得葛根素脂质体溶液；

4)半成品检验；

5)灌装，压半塞；

6)冻干：先将冻干箱降温至-40℃～-50℃，然后放入样品，使其快速冻结，时间为100分钟～150分钟，升华温度为-40℃～-10℃，时间为15～25小时，干燥温度为-10℃～30℃，时间为10～20小时。

本发明所述的葛根素脂质体，其包封率为66％～80％，特别是优选比例的葛根素脂质体包封率为78.6％。

脂质体是一种缓释、延缓药物代谢的新型药物载体。本发明利用脂质体作为葛根素的药物载体，筛选找到了既能使脂质体中葛根素药物持续释放，提高血液浓度、延长药物在血液中循环时间，提高药物的生物利用度，同时又具有很高的包封率，良好的溶液性和稳定性，明显降低葛根素溶血性不良反应的药物配方，制备具有葛根素缓释药理效应的脂质体冻干制剂，用作抗心血管药物，可以静脉给药，提高了药物的疗效，增强了药物的临床使用性。同时葛根素脂质体冻干制剂也增加了葛根素的稳定性及临床使用的方便性。

(四)具体实施方案：

通过实施例可以进一步理解本发明，但不能限制本发明的内容。

实施例1：葛根素冻干制剂的葛根素脂质体的组成和配方

葛根素            50g

双肉豆蔻卵磷脂    1000g

胆固醇            100g

聚山梨酯80        50g

甘露醇            15g

制成1000支

葛根素冻干制剂的制备方法：

1)按处方量称取葛根素、双肉豆蔻卵磷脂、胆固醇、聚山梨酯80，混合，加入适量无水乙醇，将其溶解；

2)将此溶液置于一大的圆底烧瓶中，将烧瓶与旋转蒸发器相连，旋转蒸发，在真空下蒸除有机溶剂，然后将烧瓶浸入30℃的恒温水浴中，旋转使其在器壁形成一层均匀的薄膜；

3)在烧瓶中加入处方量甘露醇及适量磷酸盐缓冲溶液(pH6.0-8.0)，再次将烧瓶连于旋转蒸发器上，不断搅拌，直到器壁上的膜完全溶脱而形成均匀的乳白色分散液为止，即制备得葛根素脂质体溶液；

4)半成品检验；

5)灌装，压半塞；

6)冻干：先将冻干箱降温至-40℃～-50℃，然后放入样品，使其快速冻结，时间为100分钟～150分钟，升华温度为-40℃～-10℃，时间为15～25小时，干燥温度为-10℃～30℃，时间为10～20小时。

实施例2：葛根素冻干制剂的葛根素脂质体的组成和配方

葛根素            50g

双肉豆蔻卵磷脂    500g

胆固醇            200g

聚山梨酯80        30g

甘露醇            10g

制成1000支

葛根素冻干制剂的制备方法同实施例1。

实施例3：葛根素冻干制剂的葛根素脂质体的组成和配方

葛根素            50g

双肉豆蔻卵磷脂    1500g

胆固醇            500g

聚山梨酯80        60g

甘露醇            20g

制成1000支

葛根素冻干制剂的制备方法同实施例1。

实施例4：葛根素冻干制剂的葛根素脂质体的组成和配方

葛根素            50g

双肉豆蔻卵磷脂    1000g

胆固醇            250g

聚山梨酯80        20g

甘露醇            40g

制成1000支

葛根素冻干制剂的制备方法同实施例1。

实施例5：本发明葛根素冻干制剂的葛根素脂质体包封率测定

用HPLC加标准曲线方程法测定上述实施例的脂质体包封率。其中色谱条件：色谱柱为Kromasil-C18色谱柱(150mmX4.6mm，5μm)；流动相为甲醇-0.1％柠檬酸(25∶75)；测定波长250nm；流速1ml·min^-1；柱温为室温。用100000的超滤膜，将含药脂质体混悬液进行超滤后测定游离葛根素含量，结果上述4个实施例葛根素的包封率分别为78.6％，68.6％，70.4％，75.5％。

实施例6：本发明葛根素冻干制剂的体外溶血试验比较

根据《中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》中的分光光度法对上述实施例制备的葛根素冻干制剂与常规制备的葛根素注射剂进行了体外溶血试验的比较。共5组，每组各进行了20次试验，结果本发明制备的4种葛根素注射剂无一例溶血率超过5％，而常规方法制备的葛根素注射制有3例溶血率超过5％，溶血发生率达15％。

实施例7：本发明葛根素冻干制剂的动物体内溶血试验比较

根据《中药、天然药物刺激性和溶血性研究的技术指导原则》对上述实施例1制备的葛根素冻干制剂与常规制备的葛根素注射剂进行了体外溶血试验的比较。

将20只雄性家兔，体重2-2.2kg，随机分为2组：A：葛根素冻干制剂组；B：普通葛根素注射剂组。给药方式为兔耳缘静脉给药，每只动物每天给药1次，给药后血样被收集分析，用红细胞计数法分析溶血现象。采用自身与组间对照，结果发现，接受普通售葛根素注射剂给药的家兔组在给药20天后红细胞数，红细胞压积水平和红细胞渗透脆性显著下降，说明葛根素注射剂组家兔体内出现血管内溶血，而在停止给药后，家兔体内红细胞数，血红蛋白水平，红细胞压积水平在一周末恢复正常，说明家兔体内的溶血反应随着葛根素注射剂的停药而消失，因此家兔体内发生的血管内溶血是由葛根素注射剂诱导的；而在葛根素冻干制剂组，至试验结束(至45天)，也未见有溶血现象发生。

以上试验表明，与普通葛根素注射液相比，本发明制备的葛根素冻干制剂极大的减轻了溶血不良反应，具有更大的安全性，使得葛根素更为安全有效。

Claims (3)

1.一种葛根素冻干制剂，其特征在于：它由抗心血管药物葛根素的脂质体和药物可接受的载体组成，所述的抗心血管药物葛根素的脂质体含葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂组成，其中葛根素、脂质体成份、表面活性剂和冻干支持剂的重量比为1∶11-33∶0.1-1.5∶0.1-1，脂质体成份为双肉豆蔻卵磷脂与胆固醇，其重量比为2-20∶1，表面活性剂为聚山梨酯80，冻干支持剂选用甘露醇。

2.根据权利要求1所述的葛根素冻干制剂，其特征在于：聚山梨酯和甘露醇与葛根素的重量比为：所述的脂质体含葛根素1份，聚山梨酯800.6～1.2份，甘露醇0.2-0.4份。

3.根据权利要求1所述的葛根素冻干制剂，其特征在于：所述的脂质体含葛根素1份，双肉豆蔻卵磷脂20份，胆固醇2份，聚山梨酯80 1份，甘露醇0.3份。