CN101411740A - 治疗心脑血管疾病的滴丸及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种滴丸及其制备方法，包括以下重量份的组分：葛根提取物和聚乙二醇；所述的葛根提取物采用以下方法制得：葛根用乙醇回流提取、浓缩、加水冷藏、沉淀水溶、合并的滤液过大孔吸附树脂柱精制，用水洗脱除杂质，再乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至50℃下相对密度1.35～1.40，干燥成干膏，得到该葛根提取物；本发明的滴丸具有解痉止痛、增强脑及冠脉血流量功能，主要用于治疗高血压头晕、头痛、颈项疼痛、冠心病心绞痛等缺血性心、脑血管疾病。

Description

治疗心脑血管疾病的滴丸及其制备方法

技术领域

本发明是有关一种治疗心脑血管疾病的中药制剂及其制备方法，即，本发明是关于一种含有葛根提取物的中药制剂及其制备方法，主要用于治疗心脑血管疾病。

背景技术

心脑血管疾病是一种常见的临床病症，高血压、中风后遗症及冠心病，心绞痛是老年人群中两种常见病，多发病，其发病率随着我国人口老龄化有逐年上升的趋势，严重影响患者的工作和生活质量。世界卫生组织指出：“心脑血管疾病是当今世界上死亡率最高的疾病，每年占世界总死亡人数的1/4，并使千百万人致残，更糟的是，许多人的年龄在65岁以下，属于过早死亡。”我国是心脑血管病的高发国，每年约有近一亿人患上心脑血管疾病；其中新发脑中风约120～150万人，近80万人死亡。心脑血管疾病多见于中老年患者。因此积极开展对本病的治疗，具有一定意义。

西医治疗心脑血管病的药物主要是硝酸酯类等药物，具有较好的疗效，但其副反应也是众所周知的，中药治疗有其自身的特点，可达到标本兼治的目的。病情较轻者单独使用相关的中药即可达到治疗目的，病情较重者与西药配合使用可减少西药的用量，有的中药在治疗一段时间后还可以停减西药的使用，或使心脑供血恢复至正常或大致正常，因而治疗心脑血管病的中药越来越受到广大患者的欢迎，有着非常广阔的前景。

《内经》认为其发病病位在心脑，同时又与肺脾肾肝等脏密切相关，病机是经脉闭阻，血行不畅。如《素问·举痛论篇》“……客于脉外则血少，客于脉中则气不通，故卒然而痛”。东汉张仲景在《金匮要略》中列专篇“胸痹心痛短气病脉证治”论述，认为阴乘阳位，痰浊内阻胸膺以致胸阳不通或者胸阳不振是其主要病机，辛温通阳或者温补阳气为其治疗大法，创制了栝蒌薤白白酒汤、茯苓杏仁甘草汤、橘枳姜汤、薏苡附子散、乌头赤石脂丸等方剂，至今仍然指导临床实践。清代王清任在《医林改错》中提出用血府逐瘀汤治疗胸痹心痛，开创了活血化瘀治疗的新途径。

心脑血管发病主要与寒邪内侵、情志失调、饮食不当、年迈体虚等有关。素体阳衰，胸阳不振，阴寒之邪乘虚侵袭，寒凝气滞，血行不畅，闭阻心脑血脉；忧思伤脾，脾虚气结，运化失司，津液不得输布，聚而为痰；郁怒伤肝，肝失疏泄，肝郁气滞，甚则气郁化火，灼津成痰，气滞或者痰阻均可以使得血行不畅；饮食不节，脾胃受损，运化失健，聚湿成痰，痰阻脉络，心脉闭阻或上闭清窍；年迈体衰，肾阳虚则心阳不振，心脉失于温煦而闭阻不畅，肾阴虚则心阴内耗，心阴亏虚，心火偏旺，逐津为痰，痰热闭阻心脉，都可以导心脑血管病的发病。病机有虚实两方面，虚是心脾肝肾及气血阴阳的亏虚，机能失调；实是寒凝、气滞、血瘀、痰阻、湿遏等，即本虚标实是其主要病机，也产生了的相应的治法和方剂。常见的治法有益气活血、活血化瘀、辛温通阳、豁痰通络、滋阴益肾、疏肝解郁、益气养阴、益气温阳、宣痹通阳等，但临床上多根据病情将不同的治法结合应用，从而达到标本兼治的目的。

中药葛根含异黄酮成分葛根素、葛根素木糖甙、大豆黄酮、大豆黄酮甙及尿囊素、β-谷甾醇、胡萝卜甙、6，7-二甲氧基香豆素、5-甲基海因、花生酸、葛根醇、葛根藤素及异黄酮甙和多量淀粉(新鲜葛根中含量为19％～20％，甘葛藤的干根含淀粉37％)、色氨酸衍生物及其糖甙、氨基酸。

葛根功效为输肌以促进气血流通而散诸邪(寒毒、热毒、痰浊、瘀血、湿浊等)，升精(气、血、津、精等精微)以养而助精微营养所需之处。可促进机体气血流通而驱邪，促进津液运行以散邪，升清助运化，故可治疗火、湿等浊邪壅滞，脾胃精微运化不足，郁而不通、气机不畅所致的脉络不通的心脑血管疾病。

目前，有效治疗心脑血管疾病的中药制剂并不多见，因此，开发研制这方面的药物制剂是业内工作者的紧迫责任。

发明内容

鉴于目前中药治疗心脑血管疾病的现状，本申请的发明人经过几年的实验摸索，对特定的传统处方制剂进行了大胆的创新，开发了一种疗效确切，更易于被广泛施用的滴丸的新剂型。

本发明的目的在于提供一种治疗心脑血管疾病的滴丸，该滴丸疗效确切，易于被病人接受。

本发明的目的还在于根据该滴丸和病症的特点筛选并提供一种治疗心脑血管疾病的中药滴丸，该滴丸服用、携带、贮藏等较方便，更易于被广泛施用。

本发明的目的还在于提供一种治疗心脑血管疾病的滴丸的制备方法，经过该制备方法得到的治疗心脑血管疾病的滴丸，疗效确切，且服用、携带、贮藏等较方便，更易于被广泛施用。

本发明的预期目的和有益效果是通过以下技术方案实现的。

本发明提供了一种治疗心脑血管疾病的滴丸，包括以下重量比为1：0.3-0.8的葛根提取物和聚乙二醇；所述的葛根提取物为中药材葛根的乙醇提取物。

滴丸剂通过舌下粘膜吸收起效，避免了肝脏解毒的受过效应，起效迅速，可直达心脑血管疾病病所。疗效卓著，故近年在心脑血管疾病药物研制中多选择滴丸剂。

滴丸基质一般多选择聚乙二醇，聚乙二醇是一类制备难溶性药物的固态分散体的基质，其优点主要在于：有机药物的分子量大多低于400或500，而聚乙二醇分子量为1500～8000，因而可形成间质性固态溶液；当聚乙二醇--药物溶解后迅速冷却药物形成核晶非常困难，由于低温时介质粘度很大形成固化时间很短，故溶质可形成微晶；聚乙二醇在可见光和紫外线范围中透明，因此在含量测定和溶出试验中可以直接用可见光或紫外线检出；聚乙二醇为结晶性水溶聚合物，分子中每一单位内有两个单位的螺旋线，当小分子类药物固化时，在此螺旋形间质空间中能包含多量的药物，作为基质时能使蕴含物的溶出速率很快。

综上所述，本发明采用滴丸剂作为含有葛根提取物的制剂的剂型。

本发明所述的滴丸中的葛根提取物可以采用以下方法制得：

葛根用乙醇回流提取，浓缩、加水冷藏、沉淀水溶、合并的滤液过大孔吸附树脂柱，用水洗除杂质，再乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至50℃下相对密度1.35～1.40，干燥成干膏，得到该葛根提取物。

上述回流用乙醇优选浓度为70-90％(wt)，更优选浓度大约80％(wt)的乙醇回流用；洗脱用乙醇优选浓度为50-95％(wt)，更优选浓度大约55％(wt)以上的乙醇洗脱用。

在本发明的优选实施例中，该葛根用80％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml 60％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，即可得到适合本发明的该葛根提取物。

本发明经过大量的研究，最终选择滴丸，目的之一在于滴丸内的药物成分直接被人体吸收通过舌下静脉进入血液循环，避免了其他口服药物经过消化系统吸收必经肝脏代谢因此不可避免药物活性成分受到损失以及药物成分经过全身循环从而起效时间延后的缺陷，而且起效迅速，生物利用度高，适合该药物适应症病患的特点。

但是含有中药提取物成分的滴丸很难研制，原因可能是中药提取物成分复杂，物理性质不适于制作油溶性的滴丸所导致。

一般的滴丸制备工艺为：将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至熔融后，加入药物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，在密闭并保温下滴出，得到滴丸。一般滴丸滴制工艺的关键点在于：根据药物性质而进行的聚乙二醇配比的选择，决定了滴丸成形工艺与溶解吸收；聚乙二醇与药物混合物在滴丸滴制中，储液器能否很好地保温保匀，否则，温度的变化与药物性质、辅料性质均可造成预滴液均匀性改变，从而出现分层，造成药物成分不均匀，影响产品质量和疗效；滴丸滴制过程中，从滴出到滴丸完全固化，是一个混合物液滴在自身表面张力、自身重力与冷却剂综合作用下的过程，处理不好，不仅滴丸丸形不好，而且还会出现拖尾、变形、粘连等现象，影响丸重、形状、含量，最终影响患者服用量的准确性。

本发明的滴丸采用葛根提取物和辅料聚乙二醇，经过以下工艺制得：

将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，葛根提取物和聚乙二醇的比例为1：0.3-0.8，转移至贮液瓶中，密闭并保温在大约85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入逐渐冷却的甲基硅油中，即可得到本发明的滴丸。

本发明的上述方法制成的滴丸采用逐渐冷却的方法，其置备过程中，冷却剂是装置在一柱形容器中，该柱形容器可使冷却剂温度自上而下的逐渐降低，冷却剂上部的温度与环境等温，而后每下降1cm，温度降低0.5℃。避免了现有技术骤冷带来的滴丸外周凝固但是中心部分还是液态的缺陷，并且成型后的滴丸丸型圆润，不会产生托尾的现象。

上述聚乙二醇可以是4000、6000、8000或者其任意混合物，其作用是作为制备难溶性药物的固态分散体的基质，其优点主要在于：有机药物的分子量大多低于400或500，而聚乙二醇分子量为1500～8000，因而可形成间质性固态溶液；当聚乙二醇--药物溶解后迅速冷却药物形成核晶非常困难，由于低温时介质粘度很大形成固化时间很短，故溶质可形成微晶；聚乙二醇在可见光和紫外线范围中透明，因此在含量测定和溶出试验中可以直接用可见光或紫外线检出；聚乙二醇为结晶性水溶聚合物，分子中每一单位内有两个单位的螺旋线，当小分子类药物固化时，在此螺旋形间质空间中能包含多量的药物，作为基质时能使蕴含物的溶出速率很快

本发明所述的滴丸优选用以下方法制得：

将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入甲基硅油中，得到滴丸。

本发明还提供了一种含有葛根提取物的滴丸的制备方法，该方法包括：

将聚乙二醇4000、6000、8000或者其任意混合物置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入冷却剂中，得到滴丸；该冷却剂为甲基硅油、液体石蜡、棕榈油或其混合物；葛根提取物和聚乙二醇的重量比例为1：0.3-0.8。

上述制备方法具体包括：

(1)制备葛根提取物：葛根用乙醇回流提取、浓缩、加水冷藏、沉淀水溶、合并的滤液过大孔吸附树脂柱，用水洗脱除去杂质，再乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，即可得到该葛根提取物的醇溶液；回收乙醇，浓缩至50℃下相对密度1.35～1.40，减压干燥成干膏，即可得到该葛根提取物；

(2)将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，葛根提取物和聚乙二醇的重量比例为1：0.3-0.8，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入冷却剂中，得到滴丸；该冷却剂为甲基硅油、液体石蜡、棕榈油或其混合物。

上述回流用的乙醇优选浓度为70-90％wt，更优选浓度大约80％wt；洗脱用乙醇优选浓度为50-95％wt，更优选浓度大约55％wt以上的乙醇。

本发明上述滴丸所采用的滴丸辅料优选为聚乙二醇6000，或聚乙二醇6000与8000的1：0.3的混合物或聚乙二醇4000、6000、8000的等比混合物，更优选聚乙二醇6000。

上述的冷却剂优选甲基硅油，该甲基硅油也可以用液体石蜡或棕榈油等植物油或上述甲基硅油、液体石蜡、棕榈油的混合物替代，其作用是作为滴丸的冷却塑形剂。

其制备过程中，该冷却剂为装置在柱形容器中，该柱形容器使冷却剂温度以自上而下的次序逐渐降低，冷却剂上部的温度与环境等温，之后，每下降1cm，温度降低0.5℃。

本发明的滴丸为棕黄色滴丸，味微苦。丸重量可在20-60mg/丸，每丸中含有葛根提取物15-40mg。

本发明的滴丸具有解痉止痛、增强脑及冠脉血流量功能，主要用于治疗高血压头晕，头痛，颈项疼痛，冠心病心绞痛等缺血性心、脑血管疾病。

一、葛根提取工艺的研究

(一)提取溶媒的研究

根据葛根中有效成分的性质，考虑到生产实际，采用热回流的提取方法，具体操作方法是：提取葛根加10倍量的50％、70％、80％、90％的乙醇作提取溶媒，提取三次，每次4小时考察葛根素的溶出率，结果见表1。

表1 提取溶媒的选择

根据以上实验结果70％～90％乙醇提取效果相近，最优选80％的乙醇为提取溶媒。

(二)提取工艺的选择

1.提取次数的选择

取葛根粗粉，加入10倍量80％的乙醇回流提取4小时，滤过，回收乙醇，减压浓缩、干燥、即得。考察提取次数对葛根素溶出率的影响，结果见表2

表2 提取次数对葛根素溶出率的影响

由以上结果可以看出，热回流次数对葛根素的溶出率有一定的影响，提取次数以三次为宜。

2.提取溶媒用量，提取时间及浸泡时间的选择

本实验采用正交设计法，考察提取时间、次数、溶媒用量对葛根素浸出含量的影响，考察因素水平见表3。

表3 因素水平表

正交表的选择及结果：选择L₉(3⁴)正交表进行试验9份，按各实验要求进行，以1号实验为例，详见如下操作。

取葛根粗粉50g，加80％乙醇回流提取三次，第一次加溶媒400ml，第二、三次300ml，各提取3小时。滤过，回收乙醇，减压干燥。测定干膏中葛根素的含量，结果见正交表4-1、4-2。

表4-1 L₉(3⁴)正交实验表

表4-2 方差分析表

 

方差来源	离差平方和	自由度	方差	F比	显著性
						A	7.0630889	2	3.531544	37.07874	*
B	14.928689	2	7.464344	78.37039	*
						C	1.3984889	2	0.699244	7.341577
D	0.1904889	2	0.095244	1

F_0.01(2，2)＝99.00    F_0.05(2，2)＝19.00

方差分析表明：因素A、B对葛根素含量结果有显著影响，因素C对结果影响不显著，以A₂B₃C₂为最佳提取条件。即：浸泡1小时；第一次加溶媒500ml，第二、三次加溶媒400ml；第一次提取4小时，第二、三次各提取3小时。

(三)大孔吸附树脂柱层析

根据葛根异黄酮的理化性质，本实验为了尽可能除去一些杂质，采用了将葛根醇提取后水沉，取沉淀加水溶解后通过大孔吸附树脂柱，以乙醇洗脱，以得到较高纯度葛根黄酮的方法。

1.大孔吸附树脂预处理

本实验所用大孔吸附树脂均购自天津南开大学国家高分子化学重点实验室，型号为F8(粒度20～40p)。

取大孔吸附树脂500g，加入500ml水，湿法装柱(柱长100cm，内径3.5cm)，以95％乙醇洗脱，至醇洗脱液在水中不产生混浊为止。

2.大孔吸附树脂柱容量的测定

取葛根醇提干浸膏20g，加10倍量的水溶解，滤过，滤液中加入100g F8大孔吸附树脂，振摇，搅拌，放置，滤过，测定滤液中葛根素的减少量，结果每100g大孔吸附树脂能够吸附葛根素2.81克。

3.大孔吸附树脂柱洗脱液用量的选择

取葛根醇提干膏50g，加10倍量的水溶解，滤过，滤液加入到已制备好的大孔吸附树脂柱中，弃去水液，然后以60％的乙醇液洗脱，滴速4ml/分钟，考察不同量洗脱液中葛根素的含量以确定洗脱液的用量，结果表明，洗脱液用量500ml以上时，葛根素的含量不再增加，可视为洗脱完全。

表5 洗脱液用量的选择

4.柱洗脱流速的选择

取葛根醇提干膏五份各50g，加10倍量的水溶解，滤过，滤液加入到已备好的大孔吸附树脂柱中，弃去水液，然后以600ml 70％乙醇进行洗脱至完全，调节不同的滴速，考察不同流速对葛根素含量的影响。

由测定数据可以看出，当流速为6ml/分钟时，各根素含量有了明显的降低，考察到洗脱时间等因素，选择洗脱流速4～5ml/min为宜。

5.柱洗脱

本实验以60％乙醇为洗脱剂，滴速4～5ml/分钟，具体操作如下：取大孔吸附树脂500g，湿法装柱(柱长100cm，内径3.5cm)，备用，取葛根醇浸干膏50g，加500ml水溶解，滤过，滤液加入已备好的大孔吸附树脂柱中，弃去水液，然后以50％、85％乙醇洗脱至柱中不残留葛根黄酮，洗脱液回收乙醇，减压干燥即得，结果见表6.1-6.2。

表6.1 大孔吸附树脂柱洗脱考察实验50％

表6.2 大孔吸附树脂柱洗脱考察实验85％

由结果可以看出，通过大孔吸附树脂柱后，葛根素的含量有了明显的提高。

因此，本发明提供了优选的葛根提取物的提取方法：

葛根用80％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml 60％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，即可得到适合本发明的该葛根提取物。

本发明的上述滴丸的制备方法是通过以下方法筛选得到的：

滴丸制备工艺的研究

1.实验材料和设备

葛根乙醇提取物    自制，过100目筛

聚乙二醇1540         上海合成洗涤剂二厂

聚乙二醇4000、6000、8000  天津天泰精细化学品有限公司

甲基硅油             市售进口分装

菜仔油               市售

液体石蜡             北京市新光化学试剂厂，分析纯

设备等               自制简易滴丸设备装置

2.试验内容及结果

①滴丸基质的选择

按表7设计实验，基质加药粉7:3比例混熔后滴制，冷凝柱长80cm。

表7 基质的选择

对比各项指标，认为PEG6000、PEG4000：6000＝1：0.3、PEG4000：6000：8000＝1：1：1作基质较好。

②冷却剂的选择

按表8设计实验，将葛根的乙醇提取物加至熔融的PEG6000中，熔解，再滴入到柱长80cm的不同冷却剂中，记录沉降时间，观察滴丸外观。

表8 冷却剂的选择

由以上结果可见，选择甲基硅油作冷却剂为宜。

③基质与葛根提取物比例的筛选

将不同配比的PEG6000和葛根提取物的熔融混合液滴入甲基硅油中，结果见表9。

表9 基质与药粉配比的选择

由以上实验结果可知，当选择基质：提取物为7:3的比例时，得到的滴制效果最好。

④滴制条件的筛选

对滴丸圆整度影响较大的因素除配方、基质、冷却剂以外，还和滴速、料温、滴口内/外径等因素有关，我们以甲基硅油为冷却剂、PEG6000为基质，基质与葛根提取物的配比为7:3，采用正交设计法研究了滴速、料温、滴口内/外径对滴丸圆整度的影响。

为了确定滴丸圆整度量化的测试方法，我们采用肉眼观察和从30℃倾斜玻璃板上下滑相结合的方法，将滴丸外观质量分为4等，A：圆整度好，表面光滑无凹陷和拖尾等，90％以上滴丸能从玻璃板上沿直线滑下；B：圆整度较好，无拖尾，表面光洁度稍差，80％以上能从玻璃板上沿直线滑下；C：圆整度稍差，表面凹凸不平，有拖尾，50％以上滴丸能从玻璃板上沿直线滑下；D：圆整度差，表面不平，50％以上不能从玻璃板上沿直线滑下，结果见表10、表11。

表10 因素水平表

表11 正交试验表L₉(3⁴)

由正交试验结果可以得出最佳工艺条件为料温90℃、滴速24滴/分、滴口内/外径0.25/0.39，此时能得到较理想的圆整度的滴丸。

因此，本发明提供了一种治疗心脑血管疾病的滴丸的最优选的制备方法，该制备方法包括：

取葛根用80％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml 60％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，备用。

将聚乙二醇6000置铝锅中，于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在90℃，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入逐步冷却的甲基硅油中，得滴丸1000丸，将成型的滴丸沥尽并擦除甲基硅油，分装，即得。

该1000丸中含有的有效成分折合葛根中药材的量大约为350g。

值得一提的是，本发明优选的滴丸制备工艺是含有中药提取物成分的滴丸工艺，其完全不同于其他中药制剂工艺，是一种释药迅速的特殊丸剂和特殊工艺，该工艺保证了本发明滴丸的丸重均匀、丸形圆整、成分均匀，从而有效保证了服用剂量的准确均匀，对本领域技术人员来说，筛选适合某种特定中药处方的滴丸剂型，包括工艺、制剂的辅料及其配比，其难度远远大于其他改良剂型的的处方工艺、辅料及其配比的筛选难度。

本发明的药效学研究：

以本发明的实施例1得到的滴丸(滴丸)为测试滴丸。

本发明的滴丸对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞及相关冠脉血流量、心肌耗氧量和血液生化指标的影响。

实验结果表明，本发明的滴丸具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(∑-ST)；缩小经N-BT染色所显示的梗塞区；显著增加缺血心脏的冠脉血流量；抑制心肌缺血及心肌梗塞引起的血清乳酸脱氢酶(LDH)的释放，并对肌酸磷酸激酶(CK)活性升高有一定抑制作用；降低血浆TXB₂水平；

还表明其可促进侧枝循环开放和建立，同时增加心肌的供氧；

还表明其可明显抑制犬实验性心肌损伤时血清CPK、LDH的溢出，降低血清CPK、LDH的活性。

以及，可抑制缩血管物质TXB₂活性。

通过以上指标对本发明的滴丸和愈风宁心片进行比较观察，临床等效剂量时，两者作用相近，而在增加冠脉血流量的起效时间、对缺血心肌的保护作用(CK的释放)等方面，本发明的滴丸的作用优于愈风宁心片。

本实验还观察了实施例1制得的滴丸对正常麻醉犬心脏血流动力学、心肌耗氧量的影响，用硫氮酮口服片做为阳性对照药，证实试验方法及所取指标的可靠及灵敏性。

本发明的滴丸1g/kg剂量组舒张压明显下降，2g/kg剂量组心率减慢。药后动物标准II心电图PR间期、QRS间期、QT间期及T波等参数均无明显变化。

2g/kg剂量的本发明的滴丸有显著增加冠脉血流量的作用，药前值为102.01±39.23ml/100g·min^-1，药后10min冠脉血流量开始增加，10、20、30、45、60、90、120min时的冠脉流量分别是114.57±45.37、116.53±48.70、117.45±45.47、114.59±45.47、120.03±43.73、120.98±43.91、117.36±40.29ml/100g·min^-1，与药前及对照组比较有显著差异(P<0.05～0.01)；同时降低冠脉阻力。本发明的滴丸1g/kg组在20～90min时间段内可显著降低冠脉阻力，30min时最明显；对冠脉血流量没有明显影响。0.5g/kg剂量组动物冠脉血流量和冠脉阻力变化不显著。在此实验剂量下，愈风宁心片组冠脉血流量和冠脉阻力变化不显著。钙拮抗剂硫氮酮可明显增加冠脉血流量和降低冠脉阻力。

本发明的滴丸2g/kg剂量组可显著降低心肌收缩力，由给药后20min持续到90min，降低百分率分别为9.81±7.11、20.61±13.14、25.20±10.70和32.19±18.43％。本发明的滴丸0.5g/kg、1g/kg两个剂量组及愈风宁心片组动物，药后动物左室收缩力、左室作功未见明显变化。

本发明的滴丸0.5g/kg剂量组动物心肌耗氧量在不同时间点有不同程度降低。1g/kg及2g/kg剂量组动物心肌耗氧量在给药后有所增加，2g/kg剂量的愈风宁心滴丸能降低氧利用率和耗氧指数，愈风宁心片与硫氮酮均能降低氧利用率，从而使冠状动脉保持较高的氧含量。

实验结果显示，本发明实施例1的滴丸对正常麻醉犬血流动力学的影响，主要表现在：可明显增加冠脉血流量，扩张冠脉血管、增加冠状静脉窦血氧含量，降低心肌耗氧指数，改善心肌的供血供氧，对心血管系统起到调整和改善作用，为临床治疗缺血性心脏病提供了实验依据。

本发明还观察本发明实施例1的滴丸对大鼠血小板聚集及血液粘度的影响。结果表明：连续7天灌胃给药，本发明实施例1的滴丸7.0g生药/kg及3.5g生药/kg均明显降低二磷酸腺苷(ADP)诱导的大鼠血小板聚集率(P<0.05～0.01)；7.0g生药/kg明显降低切变率为200S^-1、100S^-1及5S^-1时大鼠的全血粘度(P<0.05～0.01)，3.5g生药/kg明显降低切变率为5S^-1时大鼠的全血粘度(P<0.05)。提示本发明实施例1的滴丸具有抑制血小板聚集及降低血液粘度的作用。

由北京中医药大学东直门医院为组长单位，中国中医研究院广安门医院及北京中医医院为参加单位，进行了上述滴丸治疗高血压(头痛)及冠心病心绞痛的临床验证，共观察高血压(头痛)患者151例，其中试验组51例，对照组50例，开放组50例。

结果表明：本发明的滴丸治疗高血压试验组显效率27.5％，总有效率70.6％；头痛证候显效率29.4％，总有效率84.3％。与对照组比较p值皆>0.05，与对照组之间差异无显著意义。开放组高血压显效率26.0％，总有效率78.0％；头痛证候显效率32.0％，总有效率为84.0％，与试验组比较差异无显著意义，P皆>0.05。总试验组高血压显效率为26.7％，总有效率为74.3％；头痛证候显效率30.4％，总有效率为84.2％，与对照组比较P皆>0.05。冠心病心绞痛患者150例，其中试验组50例，对照组50例，开放组50例。结果表明：本发明的滴丸治疗心绞痛试验组显效率46.0％，总有效率90.0％，心电图显效率18.0％，总有效率58.0％。与对照组比较p<0.05，优于对照组。总试验组心绞痛显效率为47.0％，总有效率90.0％，与对照组比较P>0.05；心电图显效率为19.0％，总有效率60.0％，与对照组比较P<0.05。

广安门医院、天津中医学院第二附属医院、辽宁中医学院附属医院进行了本发明的滴丸与愈风宁心片对照治疗神经性头痛(血瘀证)随机、双盲、多中心临床试验，疗效结果：两组在神经性头痛疗效、中医证候疗效、中医单项症状疗效、头痛症状评分、头痛总积分、中医症状总积分、疗后舌脉等方面无统计学意义，两组相当。

安全性结果：两组无不良事件发生，安全性评价为I级。

结论：本发明的滴丸治疗神经性头痛(血瘀证)，安全有效。

临床应用表明，本品对人体无毒，无副作用，应用安全。是治疗心脑血管疾病的安全有效滴丸。

具体实施方式

以下结合实施例详细说明本发明，但不限定本发明的实施范围。

实施例1

处方：葛根350g。

制法：取葛根用80％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml60％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，备用。

将聚乙二醇6000置铝锅中，于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并匀浆保温在90℃，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入逐步冷却的甲基硅油中，得滴丸1000丸，将成型的滴丸沥尽并擦除甲基硅油，分装，即得。

性状：本品为棕黄色滴丸，味微苦。

规格：每丸重33mg。

实施例2

处方：葛根400g。

制法：取葛根用70％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml70％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，备用。

将聚乙二醇6000：8000＝1：1置铝锅中，于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在90℃，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入逐步冷却的甲基硅油与液体石蜡混合液中，得滴丸1000丸，将成型的滴丸沥尽并擦除甲基硅油和液体石蜡，分装，即得。

性状：本品为棕黄色滴丸，味微苦。

规格：每丸重38mg。

实施例3

处方：葛根300g。

制法：取葛根用90％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加10倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml85％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，备用。

将聚乙二醇8000：6000：4000＝1：1：1置铝锅中，于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在90℃，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入液体石蜡中，得滴丸1000丸，将成型的滴丸沥尽并擦除液体石蜡，分装，即得。

性状：本品为棕黄色滴丸，味微苦。

规格：每丸重27mg。

实施例4

处方：葛根500g。

制法：取葛根用85％乙醇加热回流三次，第一次4小时，第二、三次各3小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至无醇味，加12倍量的水，冷藏24小时，滤过，残渣加8倍量的水溶解，滤过，合并滤液，过大孔吸附树脂柱，弃去水液，用600ml50％的乙醇洗脱吸附柱上的葛根黄酮，收集洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.35～1.40(50℃)，减压干燥成干膏，备用。

将聚乙二醇6000置铝锅中，于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在90℃，调节滴液定量阀门，由上往下，滴入逐步冷却的甲基硅油中，得滴丸1000丸，将成型的滴丸沥尽并擦除甲基硅油，分装，即得。

性状：本品为棕黄色滴丸，味微苦。

规格：每丸重42mg。

Claims (10)

1.一种治疗心脑血管疾病的滴丸，包括以下重量比为1：0.3-0.8的葛根提取物和聚乙二醇；所述的葛根提取物为中药材葛根的乙醇提取物。

2.如权利要求1所述的滴丸，其中，所述的葛根提取物采用以下方法制得：

葛根用乙醇回流提取，浓缩、加水冷藏、沉淀水溶、合并的滤液过大孔吸附树脂柱，用水洗除杂质，再乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至50℃下相对密度1.35～1.40，干燥成干膏，得到该葛根提取物。

3.如权利要求2所述的滴丸，其中，所述的回流用的乙醇浓度为70-90％wt。

4.如权利要求2所述的滴丸，其中，所述的洗脱用乙醇浓度为50-95％wt。

5.如权利要求1所述的滴丸，其中，该滴丸用以下方法制得：

将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入甲基硅油中，得到滴丸。

6.权利要求1所述的滴丸的制备方法，该方法包括：

将聚乙二醇4000、6000、8000或者其任意混合物置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入冷却剂中，得到滴丸；该冷却剂为甲基硅油、液体石蜡、棕榈油或其混合物；葛根提取物和聚乙二醇的重量比例为1：0.3-0.8。

7.如权利要求6所述的制备方法，其中，该方法包括：

(1)制备葛根提取物：葛根用乙醇回流提取、浓缩、加水冷藏、沉淀水溶、合并的滤液过大孔吸附树脂柱，用水洗脱除去杂质，再乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液，即可得到该葛根提取物的醇溶液；回收乙醇，浓缩至50℃下相对密度1.35～1.40，减压干燥成干膏，即可得到该葛根提取物；

(2)将聚乙二醇置容器中于水浴上加热至90～100℃，待全部熔融后，加入葛根提取物搅拌至溶散均匀，葛根提取物和聚乙二醇的重量比例为1∶0.3-0.8，转移至贮液瓶中，密闭并保温在85-95℃，调节贮液瓶的滴液定量阀门，由上往下，使含有葛根提取物的聚乙二醇溶液以10～50滴/分钟的速度滴入冷却剂中，得到滴丸；该冷却剂为甲基硅油、液体石蜡、棕榈油或其混合物。

8.如权利要求6所述的制备方法，其中，所述的聚乙二醇为聚乙二醇6000。

9.如权利要求6所述的制备方法，其中，所述的冷却剂为装置在柱形容器中，该柱形容器使冷却剂温度以自上而下的次序逐渐降低，冷却剂上部的温度与环境等温，之后，温度降低0.5℃/下降1cm。

10.权利要求1所述的滴丸在制备治疗缺血性心、脑血管疾病的药物中的应用。