CN101401802A - 一种治疗脑中风的药物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用一种血管粘附蛋白的抑制剂治疗或预防脑中风及其它神经科疾病/障碍，具有重要的临床应用前景。

Description

一种治疗脑中风的药物

技术领域

本发明涉及脑中风的治疗，具体涉及用LJP1207治疗脑中风或其他神经科疾病/障碍。

背景技术

脑中风是一组好发于中、老年人的急性脑血管病，其特点是发病率高、死亡率高、致残率高、并发症多，因此又称“三高一多”症，是严重威胁人类健康的疾病。有关数据统计，目前全国共约有515-745万人患中风，即在我国每年每10万人口中就有185-219例。统计显示，中风发病率随年龄增加而增长，在每10万人口中70％左右的是65岁以上的老年人首次发生中风，患病率在每10万人口中约有430-615例，中风的死亡率为每年每10万人口中有116-140例，中风存活后的病人约60-80％有不同程度的残疾，严重者甚至丧失正常生活能力。另外，有中风病史的患者，约25-80％可能在2-5年内复发。多数患者由于偏瘫致残丧失劳动力和生活自理能力，精神和肉体蒙受着极大的痛苦，同时也给社会和家庭带来了沉重的负担。所以，积极有效的治疗中风及其后遗症，减少中风患者的致残率，可以解除患者病痛，同时也为社会和家庭减轻负担，它是摆在医药工作者面前的一项严峻挑战，具有重大的现实意义。

但是，迄今为止，临床上缺乏有效的治疗中风的方法和药物，世界上公认的溶栓疗法仅限于中风发生三小时内，可多数病人送到医院救治时，已超过溶栓疗法的有效作用时间。另外，大多数针对急性中风治疗(即神经保护)的治疗剂主要涉及靶向谷氨酸受体及其已知参与急性细胞死亡的下游信号传导途径。然而，在临床试验中已经证明这些策略是不成功的，它们经常与剂量局限性副作用有关。

另一方面，近年来的大量研究表明，脑中风后的神经病理损伤与脑血管白细胞的粘附与渗出有关(1)，脑中风后炎症反应在中风引起的脑损害中起着重要作用。

血管粘附蛋白-1(VAP-1/SSAO)是一种内皮唾液酸糖蛋白，其细胞表面表达受炎症条件诱导。先前已显示它能调节再循环淋巴细胞以L选择蛋白非依赖方式与人外周淋巴结血管内皮细胞的结合。VAP-1是一种有双重功能的新型粘着分子。伴随适当的糖基化，和恰当的炎症环境，在调节淋巴细胞粘着位点中的管腔内皮细胞表面上表达的VAP-1使其作为与淋巴细胞归巢有关的一种粘着受体而发挥功能。VAP-1在其它位点的主要功能可取决于其内在胺氧化酶的活性。VAP在促进白细胞的粘附与迁移中起重要作用。因此，研究抑制VAP-1的表达的药物，寻找选择性的VAP-1抑制剂成为治疗包括脑中风在内炎症相关疾病一条新途径(2)。

发明内容

本发明推出的治疗脑中风药物具有如下主要特征：以LJP1207[N’-(2-phenyl-allyl)-hydrazine hydrochloride]为有效成份。本发明所涉及的LJP1207是一种小分子化合物，包含一个肼功能基团，分子量为184.67。LJP1207是VAP-1的强效、高选择性抑制剂。在对其药理学特性的研究表明，LJP1207对于大鼠VAP-1/SSAO的IC50值为7.5nM，对于人VAP-1/SSAO的IC50值为17nM，而对于其它胺氧化酶，如MAO-A和MAO-B的IC50值分别为225uM和100uM，因此，LJP1207对于VAP-1结合力至少是其它胺氧化酶的1000到10000倍，具有很好的选择性(3)。

本发明旨在推出一种以LJP1207为有效成分的抗缺血/出血及再灌注损伤药物，并将其用于脑中风的治疗或预防。该药物也可用于治疗或预防其它神经科疾病包括创伤性脑损伤，脊髓损伤，阿尔茨海默病，额颞痴呆(tau蛋白病)，周围神经科疾病，帕金森病，亨廷顿舞蹈病和多发性硬化。

药理研究表明，LJP1207是一种优良的炎性渗出抑制剂，能显著抑制急慢性炎症反应，对于降低脑血管急慢性损伤后导致的炎性损伤和肿胀反应具有重要意义。该作用注射与口服给药均有效。

LJP1207对于炎症的抑制，与其对于VAP-1/SSAO介导的细胞粘附的抑制有关。LJP1207在阻断VAP-1的胺氧化酶的催化位点时，也降低了该分子的粘附，而且，这种作用是呈剂量依赖性的。此外，在暂时性局灶性脑缺血模型上还观察到缺血即刻给予LJP1207抑制了白细胞的渗出，改善了神经功能(2)。口服LJP1207还能显著减轻水肿，降低包括PGE2，TNF-a在内的数种局部炎症介质的表达(3)。

本发明所述的LJP1207的首次使用可在中风发生当时至发生1月内，较优的选择是发生当时至发生72小时内。首次注射后每隔24小时给药一次，连续给药3到7天。与溶栓疗法相比，LJP1207的治疗时间窗更为宽广，治疗效果显著，具有重要的临床应用价值。

本发明所述药物的特征在于给药途径以口服给药为主，也可采用注射给药，包括静脉滴注、静脉注射，或可采用肌肉、腹腔注射。药物剂型以口服剂型为主，也包括注射剂型。制备这些剂型的方法在药剂学中是已知的，该领域的技术人员根据需要可以理解和实施。

本发明所述药物的特征还在于在组成上包括有效剂量的LJP1207和药学上可以接受的载体、辅料和(或)其它药物。

有关LJP1207的合成已公布，见参考文献(4)。

以下是本发明的实施例，该叙述的目的是为了更好地说明本发明如何实施及其效果。目的仅在于说明，而并不以任何形式限制本发明。实施例中所使用的LJP1207按照上述公布的方法合成。

实施例1

LJP1207对脑缺血后白细胞粘附和渗出的影响

选用SD大鼠，用含1.2％异氟烷-70％笑气-30％氧气的麻醉混合气体麻醉SD大鼠，颅窗制备及微循环观测如下，固定大鼠，右侧颅顶部皮肤切开，暴露颅骨。以矢状缝外2mm、冠状缝下2mm处为中心，用牙科钻打一个圆孔，揭去颅骨，暴露脑膜。将大鼠头部固定在立体定位仪上，置于显微镜下，以冷光源照射。应用微循环显微镜及其图像分析系统观察大鼠右侧软脑膜小动脉和小静脉管径(AD、VD)的动态变化。给予大鼠右侧前脑缺血，具体方法如下；夹闭右侧颈总动脉，同时从锁骨下静脉抽血，使得皮层脑血流降到基础值的20％(用激光多普勒检测)，30分钟后松开动脉夹，将抽出的血液回输入大鼠体内。脑缺血手术后，进行颅窗观察，将一直径为0.8mm的激光多普勒探针置于右顶叶皮层，固定在颅窗上。使用能过滤罗丹明的数码照像记录系统，该系统与显微镜相连。静脉注射1ml罗丹明，继以1ml/h的速度连续输入罗丹明。白细胞被罗丹明标记，用MetaMorph软件系统存取图像。分别在缺血再灌注后2，4，6，8和10小时记录白细胞的动力学变化。实验结果显示，再灌注同时至10小时内静脉给予LJP1207(30mg/kg)，显著抑制了缺血引起的白细胞的粘附及渗出。

实施例2

LJP1207对脑缺血所致的缺血梗塞灶的影响。

使用大脑中动脉缺血模型，方法如下：采用含1.2％异氟烷-70％笑气-30％氧气的混合气体麻醉SD大鼠，应用恒温仪使直肠温度保持在37℃，分离右侧颈外、颈内、颈总动脉，结扎桥动脉(连接颈内、颈外动脉的小动脉，位于颈内颈外动脉的分叉处)，结扎颈外动脉远离颈总动脉的一端，在其另一端剪一小口，将带有硅胶的尼龙线从小口插向颈总动脉，在小口处剪断颈外动脉，将与颈总动脉相连的颈外动脉残端往下拉直至与颈内动脉成一直线，尼龙线沿颈内动脉方向插入长度为19-20mm，阻断大脑中动脉血流60min后，将尼龙线撤出，进行再灌注。实验过程中脑血流用多普勒光纤探头进行监测，探头位置为囟门旁开5mm，后1mm，只有脑血流值降低到基础值的10-15％，再灌注血流恢复到90％以上为梗死再灌注模型成功。在各实验组中，分别在再灌注后2小时，6小时及12小时给予LJP1207(30mg/kg，口服)，每隔24小时重复给药一次，直至再灌后72小时。再灌3天时，断头取脑，脑组织被切成1mm厚脑片，立即应用2％氯化三苯氮唑染色，应用显像分析系统区分梗死区和非梗死区并计算梗塞灶体积。

实验结果显示，与对照组梗塞体积(222±74mm³)相比，使用LJP1207各组的梗塞体积均显著下降，其中，再灌后2小时给予LJP1207的梗塞体积(104±43mm³，p＜0.01)，6小时组为(84±69mm³，p＜0.01)，再灌后12小时给予LJP1207的梗塞体积(91±57mm³，p＜0.01)。

实施例3

LJP1207对脑缺血后神经功能恢复的作用

大脑中动脉缺血模型，各实验分组同实施例2。脑缺血后神经功能评估实施如下：从缺血后第一天起，每日一次，直至缺血后三天。神经功能评价分为六项，包括感觉和运动功能评估：(1)意识知觉，0正常；1不安；2怠惰，不愿动；3昏迷；4癫痫；5死亡(2)走路，0正常；1前肢内收；2运动减弱；3朝偏瘫侧转圈；4不能站起(3)平台攀爬运动，0爬上平台；1后肢上提，肢体悬吊平台达5秒；2肢体悬吊平台达5秒；3肢体悬吊平台少于5秒；4无法抓住平台(4)翻转运动，0翻转180°，四肢抓住翻转平台的时间超过5秒；1翻转180°，四肢抓住翻转平台的时间少于5秒；3翻转90°，四肢抓住翻转平台的时间超过5秒；；4翻转90°，无法抓住平台，摔下(5)肢体肌张力，0正常/对称；1一侧下降(6)疼痛反射，0反应正常；1反应下降。各项得分高表明神经损伤重，得分低表明功能恢复好。

研究结果如下，与对照组相比(24±4)，使用LJP1207各组的神经功能评分显著下降，神经功能显著恢复，其中，再灌后2小时给予LJP1207的神经功能评分(15±4，p＜0.01)，6小时组为(14±3，p＜0.01)，再灌后12小时给予LJP1207的神经功能评分(14±2，p＜0.01)。

结论

1.LJP1207可抑制脑中风引起的细胞粘附及渗出，进而减轻中风所致的炎症，起到治疗中风的作用。

2.脑中风后给予LJP1207可以缩小梗塞灶，促进中风后神经功能的恢复，而且，LJP1207具有较宽广的治疗窗，从中风发生当时至发生至少12小时内，均有治疗效果。

以上提示，LJP1207对于脑中风的治疗有显著的效果，具有重要的临床应用价值。

以上尽管我们描述了本发明的实施方案与效果，显然并不意味着仅限于此。实际上，本发明的实施方案可以进行许多改变以充分利用本发明的用途而不超出本发明的范围和精神。因此应该理解，本发明的保护范围应当由所附权利要求书来限定，而不是由实施例方式表示的特定实施方案来限定。

参考文献

1.Frijns CJ and Kappelle LJ(2002)Inflammatory cell adhesionmolecul es in ischemic cerebrovascular disease.Stroke 33：2115-2122

2.Xu HL et al.(2006)Vascular adhesion protein-1 plays an importantrole in postischemic inflammation and neuropathology in diabetic，estrogen-treated ovariectomized female rats subjected totransient forebrain ischemia.J Pharmacol Exp Ther.317：19-29

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4.Wang EYetal.(2006)Design，Synthesis，and Biological Evaluationof Semicarbazide-Sensitive Amine Oxidase(SSAO)Inhibitors withAnti-inflammatory Activity.J.Med.Chem.，49：2166-2173

Claims (7)

1.一种治疗或预防人的中风或其他神经科疾病/障碍的药物，其特征在于(1)以LJP1207[N’-(2-phenyl-allyl)-hydrazine hydrochloride]为有效成份，(2)不但具有显著的抗缺血性或出血性脑损伤的作用，还具有显著的抗再灌注损伤作用(3)是血管粘附蛋白-1(VAP-1)的选择性抑制剂。

2.一种治疗或预防人的中风或其他神经科疾病/障碍的方法，所述的方法包括给予有需要的病人有效量的权利要求1中的药物，所述的病人患有中风或其它神经科疾病或者处于发生所述疾病的危险之中。

3.根据权利要求1-2，所述的药物和方法用于脑中风或其他神经科疾病/障碍的治疗或预防，其中所述其它神经科疾病包括创伤性脑损伤，脊髓损伤，阿尔茨海默病，额颞痴呆(tau蛋白病)，周围神经科疾病，帕金森病，亨廷顿舞蹈病和多发性硬化。

4.根据权利要求1或2，所述药物的可用于脑中风发生当时到发生1月内，较优的选择是发生当时至发生72小时内。

5.根据权利要求1或2，所述药物的特征在于给药途径以口服给药为主，也可采用注射给药，包括静脉滴注、静脉注射，或可采用肌肉、腹腔注射。

6.根据权利要求1，2或5，所述药物的特征在于剂型以口服剂型为主，也包括注射剂型。

7.根据权利要求1或2，所述药物的特征在于在组成上包括有效剂量的LJP1207和药学上可以接受的载体、辅料和(或)其它药物。