CN101395171B

CN101395171B - 作为类固醇硫酸酯酶抑制剂的甾族化合物

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Publication number: CN101395171B
Application number: CN2007800074234A
Authority: CN
Inventors: B·V·L·波特; M·J·里德; L·W·L·吴; A·普罗希特; P·富斯特
Original assignee: Strix Ltd
Current assignee: Richter Gedeon Nyrt
Priority date: 2006-03-01
Filing date: 2007-02-28
Publication date: 2012-10-31
Anticipated expiration: 2027-02-28
Also published as: US7968561B2; JP5144543B2; RU2008138165A; US20090182000A1; JP2009528334A; CA2636431C; NZ570094A; HK1126225A1; GB0604142D0; WO2007099304A1; BRPI0708499A2; CN101395171A; MX2008011292A; AU2007220359B2; IL192689A0; KR20140090696A; KR20080100470A; EP1996604B1; CA2636431A1; AU2007220359A1

Abstract

本发明提供了能够抑制类固醇硫酸酯酶的式(I)化合物，其中G是氟碳基，R¹是氨基磺酸酯基、膦酸酯基、硫代膦酸酯基、磺酸酯基或磺酰胺基中的任何一个。

Description

作为类固醇硫酸酯酶抑制剂的甾族化合物

发明领域

本发明涉及一种化合物。具体地，本发明提供能够抑制类固醇硫酸酯酶的化合物。

发明背景

乳腺癌是一种危害性极大的疾病，一直为大多数西方国家中女性死亡的主要原因。据估计，每年全球约有一百万名女性患上此病。¹

英国是全世界乳腺癌死亡率最高的国家之一，每年有超过35,000名女性被确诊，几乎占所有癌症病例的五分之一。据估计，在英国活到85岁年龄的女性中有十分之一会在其生命过程中发展乳腺癌。虽然现代治疗方法以及该病的早期检测已经大大提高了存活率，但乳腺癌仍然是35～54岁女性死亡的主要原因。²

所有女性均有患上乳腺癌的风险，虽然许多危险因子已经被确定。其中绝大多数与女性的激素和生育史以及她们的疾病家族背景有关。具有较高风险的女性通常是具有明显家族病史、月经初潮开始早、绝经晚或在30岁以后首次足月妊娠的那些女性。²

在乳腺癌的最早阶段，手术似乎是治疗选择。在绝大多数情况下，采用乳腺保留手术技术(如乳腺肿块局部切除)而非乳房切除术。为了防止疾病复发，常常采取放疗，尤其在采用了乳房保留技术的情况下。³放疗还可以用于将大的肿瘤减小至可手术的大小，以便进行保留手术。⁴

对于晚期乳腺癌，当肿瘤已经扩散或者复发时，治疗的目的不再是治愈，而是达到姑息性控制。当肿瘤转移灶已达到诸如骨骼、皮肤、淋巴、结节或脑时，情况就是如此。治疗根据患者的激素状态(不管是绝经前还是绝经后的女性)和肿瘤的类型而改变。某些肿瘤事实上已经被证明其生长与发展依赖于雌激素，形成所谓的激素依赖型乳腺癌(HDBC，参见I-1)。当非HDBC采用化疗来治疗时，其目的是使用细胞毒剂的组合杀死分化肿瘤细胞，⁵预计HDBC对内分泌治疗会有响应。

激素依赖型肿瘤的概念出现于20世纪60年代早期，当时首次引入雌激素作用模型。⁶为了使雌激素调节人体细胞的生长和功能，必须存在一种叫做人雌激素受体(hER)的特异性蛋白，⁷该蛋白位于细胞核内，与雌激素相互作用，导致结合络合物(complex)的形成。该结合络合物通过激活从特异性基因产生m-RNA而用作转录因子，所述特异性基因的一种或多种可能是肿瘤细胞有效生长所必需的。

具有可测定量受体蛋白水平的患者被分类为雌激素受体阳性(ER+)，与其相对的是雌激素受体阴性(ER-)。大约50％的绝经前女性和75％的绝经后女性属于ER+组⁸，其中，乳腺癌的发展可能与雌激素的存在直接相关。已经证明内分泌治疗(其中药物的使用导致去除雌激素对细胞的刺激)是治疗HDBC的有效方法。最初，开发了响应不同策略的两类药物：抗雌激素药物和芳化酶抑制剂。

作为雌激素受体拮抗剂的抗雌激素药物已经是考虑用于HDBC的首选治疗之一。它们的作用依赖于它们竞争性地结合特异性受体蛋白hER的能力，因此，防止内源性雌激素进入它们的特异性结合部位。所以，天然激素不能维持肿瘤生长。

在通常用于乳腺癌治疗的抗雌激素药物中，它莫昔芬(见下文)由于具有十分低的分子毒性概况而得到最广泛的使用。虽然它莫昔芬具有非甾体骨架，但它具有激动剂-拮抗剂的混合活性，这制约了它的治疗潜力。⁹另外，已报告患者在长期使用它莫昔芬治疗之后出现某些形式的耐药性。¹⁰

已经发现了新型纯抗雌激素药物(如以下的ICI164384)与他莫昔芬相比效力有损失，这表明需要设计更有效的目标。¹¹

近年来出现了一类新型抗雌激素药物，它结合了雌激素对靶组织(如骨骼或肝)的激动作用与对生殖组织(如乳腺或子宫)的拮抗和/或最低激动作用。¹²这些设计为选择性雌激素受体调节剂(SERMs)的化合物，不仅在降低患者的乳腺癌风险上具有潜在效果，而且它们还显示出提高骨矿物质密度并预防绝经后女性的骨质疏松。雷洛昔芬是第一种在临床上使用的该类化合物。¹³许多SERMs目前处于临床试验阶段，这些分子某一天可能取代它莫昔芬而成为治疗患有HDBC的女性的一线药物。

抑制类固醇生物合成途径的一种或几种酶的治疗剂的使用，代表了另一控制雌激素依赖性肿瘤发展的重要策略。¹⁴芳化酶将雄激素C19类固醇转化为雌激素C18类固醇，已经成为降低雌激素水平的主要靶标。这种含有细胞色素P450血蛋白的酶络合物催化雄激素A环的芳构化，随后脱除C19甲基，产生雌激素。

氨鲁米特(见下文)是第一种用于治疗乳腺癌的芳化酶抑制剂。然而，它显示了许多不合意的副作用，因其广谱抑制作用施加于其它P450-依赖型酶，改善初始结构的尝试已使许多非类固醇化合物进入临床试验。¹⁵所开发的最新一代化合物(如来曲唑)结合了对该酶的高效和高选择性，并且也具有良好耐受性。

不同类型的芳化酶抑制剂的结构。第I代：氨鲁米特，AG；第III代：来曲唑。

传统上，芳化酶抑制剂保留为的晚期HDBC患者的二线治疗药物，所述患者的疾病不再受它莫昔芬控制。然而，由于一些最新的芳化酶抑制剂具有极好的毒性特性，所以最近进行了一些临床试验来评价其作为HDBC的一线治疗药物的适宜性。

过去的十年中，生化和临床上的有力证据表明，单独抑制芳化酶不能有效减少雌激素对HDBC的刺激，理由是其它途径涉及雌激素生物合成。现在认为硫酸酯酶途径是乳腺肿瘤雌激素合成的主要途径，因为发现硫酸酯酶活性所提供的雌酮比芳化酶活性的高10倍。¹⁶

在硫酸酯酶途径中，雌激素经由两种酶(方案如下)：将雌酮硫酸酯水解为雌酮的雌酮硫酸酯酶(STS)和将雌酮还原为雌二醇的17β-羟基类固醇脱氢酶(17β-HSD)，由高度可利用的前体雌酮硫酸酯合成而来。这两种酶代表了雌激素缺失策略的最新目标。

正常和肿瘤乳腺细胞中的雌激素来源。AR，芳化酶；ST：类固醇磺基转移酶；STS，类固醇硫酸酯酶；17β-HSD，17β-羟基类固醇脱氢酶；3β-IS，3β-羟基类固醇脱氢酶Δ⁵，Δ⁴-异构酶；ER，雌激素受体。

已经鉴定了几种有效的雌酮硫酸酯酶的抑制剂。它们都具有取代芳环的共同结构，所述共同结构模拟了酶底物雌酮硫酸酯的酚式A环。在开发类固醇抑制剂时，在C3位置引入了各种化学基团，其中发现3-O-氨基磺酸酯对于雌酮分子是最有效的。所得化合物雌酮-3-O-氨基磺酸酯(下文)使芳基-O-氨基磺酸酯结构被鉴定为有效抑制STS所需的活性药效基团。已经表明，EMATE以时间和浓度依赖方式抑制类固醇硫酸酯活性¹⁷，并具有口服体内活性。¹⁸然而，已经披露它具有高度雌激素活性，这提高了设计缺乏对hER激动剂活性的STS抑制剂的需求。

为了避免与活性甾核有关的问题，已经合成了非类固醇型抑制剂。其中活性药效基团被保留的香豆素氨基磺酸酯如4-甲基香豆素-7-O-氨基磺酸酯(见下文，COUMATE)就属于第一批被鉴定的这类抑制剂。¹⁹虽然COUMATE的效力低于EMATE，但它的优点是非雌激素性。²⁰已经开发了某些基于三环香豆素的氨基磺酸酯，它们被证明比COUMATE更有效，同时保持其非雌激素特性。²¹667COUMATE的体外效力比EMATE高大约3倍，现正处于临床试验的临床前开发阶段。²²

类固醇硫酸酯酶抑制剂EMATE、COUMATE和667COUMATE的结构。

PCT/GB92/01587教导了用于治疗雌酮依赖型肿瘤(特别是乳腺癌)的新型类固醇硫酸酯酶抑制剂和包含它们的药物组合物。这些类固醇硫酸酯酶抑制剂是氨基磺酸酯，例如N，N-二甲基雌酮-3-氨基磺酸酯，优选雌酮-3-氨基磺酸酯(EMATE)。已知EMATE是有效的E1-STS抑制剂，因为在0.1mM下，它显示出对完整MCF-7细胞中E1-STS活性的抑制超过99％。EMATE还以时间和浓度依赖方式抑制E1-STS酶，这表明它用作有效的位点定向的灭活剂。虽然EMATE最初设计用于抑制E1-STS，但它还抑制脱氢表雄酮硫酸酯酶(DHA-STS)，人们认为该酶调节雌激素类固醇雄烯二醇的生物合成的关键作用。还有，现有证据表明，雄烯二醇可能作为乳腺肿瘤生长的促进剂可能具有更大重要性。EMATE在体内也具有活性，当它通过口服或皮下给药时，几乎完全抑制大鼠肝E1-STS(99％)和DHA-STS(99％)。另外，已经表明，EMATE对大鼠具有记忆增强作用。对小鼠的研究提示在DHA-STS活性与部分免疫应答的一部分的调节之间具有相关性。据认为，这种情况也可能在人类中出现。EMATE中的氨基磺酸酯结构部分的桥接O原子对于抑制活性具有重要意义。因此，当3-O-原子被其它杂原子置换时，如在雌酮-3-N-氨基磺酸酯和雌酮-3-S-氨基磺酸酯的情况下，这些类似物是较弱的非时间依赖型钝化剂。

虽然EMATE可能获得了最佳的E1-STS抑制效力，但有可能在硫酸酯酶的抑制过程中可能释放雌酮，EMATE及其雌二醇同源物可能具有雌激素活性。

17β-HSD(催化雌激素和雄激素生物合成中的最后一步)也成为雌激素缺失策略的靶标。该酶负责类固醇类的氧化形式(低活性)与还原形式(高活性)的相互转化。它的活性直接支持雌激素依赖型肿瘤的生长和发展，因为它优先将雌酮还原为雌二醇²⁵，并且在一个次要的方面，将雄激素DHEA转化为雄烯二醇(Adiol)，而雄烯二醇最近已经被证明具有雌激素特性，能够与雌激素受体结合。²⁶

17β-HSD属于同工酶家族，迄今已经鉴定和克隆了11种。²⁷每一类具有选择性底物亲合力和定向活性，这意味着必须要达到药物作用的选择性。1型17β-HSD是催化雌酮和雌二醇相互转化的同种型。

不同于STS抑制剂，仅报道了少数几种17β-HSD抑制剂。绝大多数1型17β-HSD的类固醇抑制剂共有D环改性结构。含有在16α位置上携带良好的离去基团的侧链的雌二醇衍生物已经表明是一类有效的抑制剂。具体地，发现其中侧链表现出对酶活性部位中的亲核性氨基酸残基的高度反应性的16α-(溴烷基)-雌二醇²⁸是有前景的不可逆性抑制剂。具体地，在16位置上含有短溴烷基部分的类似物16α-(溴丙基)-雌二醇显示出最高活性，依次是16α-(溴丙基)-雌二醇和16α-(溴丁基)-雌二醇，即最有效的系列(3和4)。然而，它们被证明是雌激素受体的纯激动剂。

1型17β-HSD抑制剂：16α-(溴丙基)-雌二醇，3；

16α-(溴丙基)-雌二醇，4和黄酮衍生物，芹黄素。

在消除有效抑制剂的固有雌激素活性(oestrogenicity)和可能同时将抗雌激素性能设置到分子中的尝试中，合成了几种具有抗雌激素药物ICI164384的C7α烷基酰胺链的16α-(广义上)-雌二醇衍生物。²⁹然而，获得了相当差的1型17β-HSD抑制，并且其中雌激素和抗雌激素性能分别没有完全消除或分别或引入。

同样，已经设计了1型17β-HSD的非类固醇抑制剂。类黄酮在结构上类似于雌激素，能够与雌激素受体结合，具有雌激素或抗雌激素活性。³⁰它们对芳化酶活性的作用在许多文献中被证实，在最近的研究中，发现它们可减少由1型17β-HSD催化的雌酮向雌二醇的转化。³1从SAR研究中发现黄酮衍生物，例如芹黄素(图6)，为对1型17β-HSD具有一定的抑制活性的有前景化合物，并且其在该抑制浓度下没有雌激素性质。³²

Ahmed等(Biochem Biophys Res Commun1999年1月，27；254(3):811-5)报告了STS的类固醇和非类固醇抑制剂的结构-活性关系研究。

类固醇脱氢酶(DH)(如雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶(E2HSD))具有调节与雌激素受体相互作用的配体的利用率的重要作用。I型E2HSD将雌酮(E1)还原为生物活性的雌激素，即雌二醇(E2)，而II型E2HSD通过催化E2氧化为E1而使E2失活。因此，鉴定具有DH抑制活性的化合物，尤其是I型E2HSD的抑制剂在抑制E2形成中具有治疗价值。

WO03/033518公开了下式的化合物：

其中G是H或取代基。这些化合物尤其具有类固醇硫酸酯酶抑制剂活性。

发明概述

本发明提供能够起有效类固醇硫酸酯酶抑制剂作用的新化合物。本发明鉴定，本申请的化合物是有效的类固醇硫酸酯酶抑制剂。

图1示出了涉及从雌酮硫酸酯和雌二醇原位合成雌酮的一些酶。“STS”表示雌酮硫酸酯酶，“I型E2DH”表示I型雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶或1、3、5和/或7型雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶，“II型E2DH”表示II型雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶或2和/或8型雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶。

可以看出，涉及雌激素的外周合成(peripheral synthesis)的两种酶是雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶和雌酮硫酸酯酶。

雌激素的原位合成被认为对肿瘤中的高雌激素水平起着重要作用，因此雌激素生物合成的特异性抑制剂具有治疗内分泌依赖型肿瘤的潜在价值。

另外，即使经由硫酸酯酶途径在恶性乳腺和子宫内膜组织中形成雌激素是造成高雌激素浓度的主要原因，但仍然存在有助于体内合成雌激素的其它酶促途径。

因此，迫切需要开发新的治疗剂用于治疗这些癌症。

本发明因此寻求克服一个或多个与治疗乳腺癌和子宫内膜癌的现有技术方法有关的问题。

因此一方面，本发明提供化合物在制备药物中的用途，该药物能够影响(例如实质上抑制)雌酮硫酸酯酶途径(该途径将雌酮和雌二醇相互转化)和/或影响(例如实质上抑制)类固醇脱氢酶途径(该途径将雌酮和雌二醇相互转化)。

本发明的该方面是有利的，因为通过给与一种化合物，可能阻断由雌酮或E1S合成雌二醇。因此，本发明提供了具有可观的治疗优点，尤其是可用于治疗乳腺癌和子宫内膜癌的化合物。

本发明化合物可以包含其它取代基。这些其它取代基例如可以进一步提高本发明化合物的活性和/或增加稳定性(体外和/或体内)。

发明详述

根据本发明的一个方面提供了式I的化合物：

式I

其中G是氟碳基(fluorocarbyl group)。

根据本发明的一个方面提供了一种药物组合物，其包含与药学上可接受的载体、稀释剂、赋型剂或佐剂混合的式I化合物：

式I

其中G是氟碳基。

根据本发明的一个方面提供了用于药物的式I化合物：

式I

其中G是氟碳基。

根据本发明的一个方面提供了式I化合物在制备用于治疗与类固醇硫酸酯酶(STS)相关的病症或疾病的药物中的用途：

式I

其中G是氟碳基。

根据本发明的一个方面提供了式I化合物在制备用于治疗与有害的STS水平相关的病症或疾病的药物中的用途：

式I

其中G是氟碳基。

根据本发明的一个方面提供了式I化合物在制备用于抑制类固醇硫酸酯酶(STS)活性的药物中的用途：

式I

其中G是氟碳基。

本发明的一个方面提供对有此需要的主体抑制类固醇硫酸酯酶(STS)活性的方法，该方法包括给与式I的化合物：

式I

其中G是氟碳基。

本发明的一个方面提供式I化合物在制备用于调节和/或停滞和/或抑制细胞周期的药物和/或用于调节和/或诱导细胞凋亡的药物中的用途：

式I

其中G是氟碳基。

为了方便参考，下面在适当的章节标题下论述本发明的这些和其它方面。然而，每一章节的教导并不必须局限于每一特定章节。

优选的方面

环体系

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式II结构：

式II

其中G是氟碳基，R¹是-OH、氨基磺酸酯基、膦酸酯基、硫代膦酸酯基、磺酸酯基或磺酰胺基中的任何一个。

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式III结构：

式III

在本发明的一些方面中，该化合物优选地具有式IV结构：

式IV

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式V结构：

式V

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式VI结构：

式VI

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式VII结构：

式VII

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式VIII结构：

式VIII

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式IX结构：

式IX

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式X结构：

式X

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式XI结构：

式XI

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式XII结构：

式XII

在本发明的一些方面中，该化合物优选具有式XIII结构：

式XIII

十分高度优选下式的化合物或其药学上可接受的盐或酯形式

如本领域中所熟知的，经典的类固醇环结构具有以下通式：

在上式中，已按常规方式标记各环。

生物等排体的实例为当环A、B、C和D中的任何一个或多个为杂环，且/或当环A、B、C和D中的任何一个或多个被取代，且/或当环A、B、C和D中的任何一个或多个被改性；但其中生物等排体具有类固醇特性。

在这方面，本发明的环体系类似于类固醇环结构，可以是类固醇环结构的生物等排体。

本发明多环结构的结构可以表示为：

其中环A’、B’和C’各自独立地表示杂环或非杂环，且其中每个环可以独立地为取代或未取代的、饱和或不饱和的。

举例而言，环A’、B’、C’和D’中的任何一个或多个可以独立地被适合的基团取代，所述基团例如为烷基、芳基、羟基、卤素基团、烃基(hydrocarbyl)、含氧烃基(oxyhydrocarbyl group)等。

A’、B’和C’中至少一个可以是杂环基(杂环)或非杂环基。

A’、B’、C’和D’中至少一个可以是饱和环结构或不饱和环结构(例如芳基)。

优选的是，A’、B’、C’和D’中至少一个是芳环。

优选地，该化合物(包括所有取代基在内)将含有不超过约50个碳原子，更通常不超过约30～40个碳原子。

D’的实例是五元环或六元环。

可作为本发明化合物的基础的优选甾核环A’-D’包括下列化合物的环A～D：

雌酮类和取代雌酮类，即：

雌酮 16β-OH-雌酮

4-OH-雌酮 17-脱氧雌酮

6α-OH-雌酮 2-OH-雌酮

7α-OH-雌酮 2-MeO-雌酮

16α-OH-雌酮雌酮

雌二醇类和取代雌二醇类，即：

4-OH-17β-雌二醇 16β-OH-17β-雌二醇

6α-OH-17β-雌二醇 17α-雌二醇

7α-OH-17β-雌二醇 17β-雌二醇

4-OH-17α-雌二醇 17α-乙炔基-17β-雌二醇

6α-OH-17α-雌二醇 17β-乙炔基-17α-雌二醇

7α-OH-17α-雌二醇 17-脱氧雌二醇

16α-OH-17α-雌二醇 2-OH-17α-雌二醇

16α-OH-17β-雌二醇 2-OH-17β-雌二醇

16β-OH-17α-雌二醇 2-MeO-17α-雌二醇

2-MeO-17β-雌二醇

雌三醇类和取代雌三醇类，即：

雌三醇 17-脱氧雌三醇

4-OH-雌三醇 2-OH-雌三醇

6α-OH-雌三醇 2-MeO-雌三醇

7α-OH-雌三醇

脱氢表雄酮类和取代脱氢表雄酮类，即：

脱氢表雄酮 16α-OH-脱氢表雄酮

6α-OH-脱氢表雄酮 16β-OH-脱氢表雄酮

7α-OH-脱氢表雄酮 5-雄烯二醇

基团G

基团G是氟碳基。本文所使用的术语“氟碳基”是指至少含有碳和氟原子的基团。

在一个实施方案中，基团G是全氟烷基。更优选地，基团G是C1-10全氟烷基。

本文所使用的术语“全氟烷基”是指其中所有氢原子均被氟取代的烷基。全氟烷基的实例是三氟甲基、五氟乙基、七氟丙基等。

在另一优选实施方案中，基团G至少包含碳、氟和一个其它元素。更优选地，基团G至少包含碳、氟和氢。更优选的是，基团G仅仅包含碳、氟和氢。

优选的是，基团G包含1～10个碳原子，更优选包含1～6个碳原子，更优选包含1～3个碳原子。

优选的是，基团G具有式-A-B结构，其中A是1～9个碳原子的直链、支链或环状亚烷基，B是1～10个碳原子的直链、支链或环状全氟烷基。优选的是，A是式-(CH₂)_n-的基团，其中n是1～9的整数。优选的是，A具有两个碳原子。优选地，B是式-(CF₂)_mCF₃的基团，其中m是0或1～9的整数。优选地，B具有一个碳原子。

优选地，基团B具有式-(CH₂)_n(CF₂)_mCF₃结构，其中n是1～9的整数，m是0或1～9的整数。优选地，n+m是1～10。n优选是2。m优选是0。

最优选的是，基团G是3，3，3-三氟丙基(-CH₂CH₂CF₃)。

R¹基团

本发明化合物的基团R¹是-OH、氨基磺酸酯基、膦酸酯基、硫代膦酸酯基、磺酸酯基或磺酰胺基中的任何一个。

在一个优选方面中，R¹优选是氨基磺酸酯基。

R¹或所述氨基磺酸酯基可以是下式的氨基磺酸酯基：

其中R⁴和R⁵独立地选自H、烷基、环烷基、烯基和芳基或其组合，或者一起表示亚烷基，其中所述或每个烷基或环烷基或烯基或任选含有一个或多个杂原子或基团。

在另一优选实施方案中，R¹是-OH。

在本发明的一些方面中，优选地，R⁴和R⁵中至少一个是H。

在本发明的一些方面中，优选地，R⁴和R⁵均为H。

取代基

本发明的化合物可以具有除了这里所示环体系的那些取代基以外的取代基。此外，这里的环体系以通式给出，并且应该照此来解释。给定环成员上没有任何具体显示的取代基，则表明该环成员可以被任何部分取代，其中H仅仅是一个例子。该环体系可以含有一个或多个不饱和度，例如在某些方面，该环体系的一个或多个环是芳族环。该环体系可以是碳环或者可以含有一个或多个杂原子。

本发明化合物，尤其本发明的环体系化合物可以含有除本文所示的那些取代基以外的取代基。举例而言，这些其它取代基可以是下列之中的一个或多个：一个或多个氨基磺酸酯基，一个或多个膦酸酯基，一个或多个硫代膦酸酯基，一个或多个磺酸酯基，一个或多个磺酰胺基，一个或多个卤素基团，一个或多个O基，一个或多个羟基，一个或多个氨基，一个或多个含硫的基团，一个或多个烃基(例如含氧烃基)。

通常，本发明化合物的环体系A’B’C’D’可含有各种非干扰(non-interfering)取代基。尤其环体系A’B’C’D’可含有一个或多个羟基、烷基(尤其是低级(C₁-C₆)烷基，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基和其它戊基异构体以及正己基和其它己基异构体)、烷氧基(尤其是低级(C₁-C₆)烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基等)、炔基(例如乙炔基)或卤素(例如氟取代基)。

对于一些本发明化合物，优选地，该环体系被烃基硫烷基(hydrocarbylsulphanyl)取代。更优选地，环系统的A’环被烃基硫烷基取代。术语“烃基硫烷基”是指至少包含烃基(如本文所定义的)和硫的基团，优选-S-烃基，更优选-S-烃。该硫基可以任选被氧化。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，至少该环体系的A’环的2位被烃基硫烷基取代。

优选地，该烃基硫烷基是-S-C₁-₁₀烷基，更优选-S-C₁-₅烷基，更优选-S-C₁-₃烷基，更优选-S-CH₂CH₂CH₃、-S-CH₂CH₃或-SCH₃。

对于本一些发明化合物，非常优选的是，该环体系的A’环被烷氧基取代。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，至少该环体系的A’环的2位被烷氧基取代。

所述烷氧基优选是甲氧基。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，至少该环体系的A’环被烃基取代。

对于一些本发明化合物，非常优选地，至少该环体系的A’环的2位被烷基取代。

所述烷基优选是乙基。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，该化合物包含至少两个或更多个氨基磺酸酯基、膦酸酯基、硫代膦酸酯基、磺酸酯基或磺酰胺基。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，该化合物包含至少两个氨基磺酸酯基。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，该化合物包含至少两个氨基磺酸酯基，其中所述氨基磺酸酯基不是在同一环上。

对于一些本发明化合物，非常优选的是，该环体系的A’环包含至少一个氨基磺酸酯基，且其中该环体系的D’环包含至少一个氨基磺酸酯基。

在本发明的一些方面中，A’环优选含有烷氧基取代基和烷基取代基中的一个或多个。因此根据本发明的一个方面，提供了式XIII的化合物：

式XIII

其中R²和R³独立地选自H和烃基，R²和R³中至少一个是烃基。

在本发明的优选方面，提供选自式XIV～XIX的化合物的化合物：

式XIV

式XV

式XVI

式XVII

式XVIII

式XIX

其中R²和R³独立地选自H和烃基，其中R²和R³中的至少一个是烃基。

优选地，R²和R³中的至少一个是烷基。优选地，R²和R³中的至少一个是C₁-C₁₀烷基，优选C₁-C₆烷基，优选C₁-C₃烷基。优选地，R²和R³中的至少一个是-CH₃或-CH₂CH₃。

在一个方面中，优选地，R²是烃基，且R³是H。

在另一个优选方面中，R²和R³中的至少一个是烷氧基。优选R²和R³中的至少一个是甲氧基。

高度优选的本发明化合物可以选自以下化合物：

其中：

R＝(CH₂)₂CF₃ 且R₂＝H

R₂＝OMe

R₂＝-S-Me

其它方面

根据本发明的一个方面，提供了用于药物的本发明化合物。

根据本发明的一个方面，提供了药物组合物，其包含任选与药学上可接受的载体、稀释剂、赋型剂或佐剂混合的本发明化合物。

根据本发明的一个方面，提供了本发明化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与STS相关的病症(condition)或疾病。

根据本发明的一个方面，提供了本发明化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与有害的STS水平相关的病症或疾病。

对于一些应用，优选地，所述化合物没有或具有最小的雌激素效应。

对于一些应用，优选地，所述化合物具有雌激素效应。

对于一些应用，优选地，所述化合物具有可逆作用。

对于一些应用，优选地，所述化合物具有不可逆作用。

在一个实施方案中，本发明化合物用于治疗乳腺癌。

本发明化合物可以是盐的形式。

本发明还涵盖了用于制备本发明化合物的新颖中间体。例如，本发明涵盖了用于化合物的新颖醇前体。又例如，本发明涵盖了用于化合物的双保护前体。本文提供这些前体中的每一种的实例。本发明还包括了用这些前体的每一种或两者合成本发明化合物的方法。

我们还已经鉴定，在本发明的一些方面，本发明化合物还可以抑制类固醇脱氢酶(HSD)的活性。

所谓类固醇脱氢酶或HSD是指17β羟基类固醇脱氢酶。一方面中，17β羟基类固醇脱氢酶是EC1.1.1.62。

HSD优选是1、3、5和/或7型。HSD优选将雌酮(酮)转化为雌二醇(羟基)。

HSD优选是2型和/或8型。HSD优选将雌二醇(羟基)转化为雌酮(酮)。

因此，在其它方面中，本发明提供：

·本发明化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与类固醇脱氢酶相关的病症或疾病。

·本发明化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与有害的类固醇脱氢酶水平有关的病症或疾病。

·本发明的化合物在制备用于抑制类固醇脱氢酶活性的药物中的用途。

一种方法，其包括(a)用一种或多种本发明候选化合物进行类固醇脱氢酶试验；(b)测定所述一种或多种候选化合物是否能够调节类固醇脱氢酶活性；以及(c)选择能够调节类固醇脱氢酶活性的一种或多种所述候选化合物。

一种方法，其包括(a)用一种或多种本发明候选化合物进行类固醇脱氢酶试验；(b)测定所述一种或多种候选化合物是否能够抑制类固醇脱氢酶活性；以及(c)选择能够抑制类固醇脱氢酶活性的一种或多种所述候选化合物。

·通过上述方法鉴定的化合物，其在药物中的用途以及包含任选与药学上可接受的载体、稀释剂、赋型剂或佐剂混合的所述化合物的药物组合物。

在本发明的一些方面，类固醇脱氢酶优选是I型类固醇脱氢酶。

在本发明的一些方面，类固醇脱氢酶优选是II型类固醇脱氢酶。

HSD优选是2和/或8型。HSD优选将雌二醇(羟基)转化为雌酮(酮)。

我们也已经确定，在一些方面，为抑制类固醇脱氢酶(HSD)的活性，本发明化合物并非必须被氨基磺酸酯基、膦酸酯基、硫代膦酸酯基、磺酸酯基或磺酰胺基之一取代。因此，在一些方面，本发明提供了如本文所定义的化合物，其中R¹是任意取代基。在这方面，R¹优选为H、OH或烃基，更优选为OH。

因此，在其它方面，本发明提供：

·下式的化合物：

其中G是氟碳基。

·所述化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与类固醇脱氢酶相关的病症或疾病。

·所述化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与有害的类固醇脱氢酶水平有关的病症或疾病。

·所述化合物在制备用于抑制类固醇脱氢酶活性的药物中的用途。

一种方法，其包括(a)用一种或多种上式的候选化合物进行类固醇脱氢酶试验；(b)测定所述一种或多种候选化合物是否能够调节类固醇脱氢酶活性；以及(c)选择能够调节类固醇脱氢酶活性的一种或多种所述候选化合物。

一种方法，其包括(a)用一种或多种上式的候选化合物进行类固醇脱氢酶试验；(b)测定所述一种或多种候选化合物是否能够抑制类固醇脱氢酶活性；以及(c)选择能够抑制类固醇脱氢酶活性的一种或多种所述候选化合物。

通过上述方法鉴定的化合物，其在药物中的用途以及包含任选与药学上可接受的载体、稀释剂、赋型剂或佐剂混合的所述化合物的药物组合物。一些优点

本发明的一个重要优点是，本发明化合物能用作STS抑制剂。

本发明化合物的另一个优点是，它们在体内可能是有效的。

一些本发明化合物可以是非雌激素性化合物。这里，术语“非雌激素性”是指不表现雌激素活性或基本上没有雌激素活性。

另一个优点是，一些化合物不能代谢为显示或诱导激素活性的化合物。

一些本发明化合物的优点还在于它们具有口服活性。

与已知的STS抑制剂相比，一些本发明化合物改善了体内作用持续时间。

一些本发明化合物可用于治疗癌症(例如乳腺癌)以及(或者)非恶性病症，例如预防自身免疫病，当需要从较早的年龄给与药物时尤其如此。

因此相信一些本发明化合物具有除治疗内分泌依赖型癌症(endocrine-dependent cancers)以外的治疗用途，例如治疗自身免疫病。

类固醇硫酸酯酶

类固醇硫酸酯酶(有时称为steroid sulphatase或steryl sulphatase或简称为STS)水解数种硫酸酯化(sulphated)类固醇，如雌酮硫酸酯，脱氢表雄酮硫酸酯和胆固醇硫酸酯。STS已经被指定为酶编号EC3.1.6.2。

已克隆和表达STS。例如，参见Stein等(J.Biol.Chem.264：13865-13872(1989))和Yen等(Cell 49：443-454(1987))的报道。

STS是与许多疾病状况有关的酶。

例如，研究人员已发现，STS的全面缺乏STS产生鱼鳞癣。根据一些研究人员，STS缺乏在日本相当普遍。相同的研究人员(Sakura等，J Inherit Metab Dis1997Nov；20(6)：807-10)还报道了过敏性病(如支气管哮喘、过敏性鼻炎或特应性皮炎)可能与类固醇硫酸酯酶缺乏有关。

除了由于STS活性总体缺乏引起的疾病以外，增高的STS活性水平也可能引起疾病。例如，如上所述，存在着支持STS在乳腺癌生长和转移中起作用的强力证据。

STS还已经牵涉其它疾病。例如，Le Roy等(Behav Genet1999Mar；29(2)：131-6)已经确定，在类固醇硫酸酯酶浓度与小鼠攻击行为的启动之间可能存在遗传相关。作者得出结论，类固醇的硫酸酯化可能是复杂网络的原动力，所述复杂网络包括牵涉突变引起攻击的基因。

STS抑制

据信，与STS活性相关的某些疾病病况归因于无活性的硫酸酯化雌酮转化为活性的非硫酸酯化雌酮。在与STS活性相关的病况中，人们希望抑制STS活性。

这里，术语“抑制”包括减小和/或消除和/或屏蔽和/或防止STS的有害作用。STS抑制剂

根据本发明，本发明化合物能用作STS抑制剂。

这里，本文所使用的关于本发明化合物的术语“抑制剂”是指能够抑制STS活性(例如减小和/或消除和/或屏蔽和/或防止STS的有害作用)的化合物。STS抑制剂可以起拮抗剂作用。

可使用完整MCF-7乳腺癌细胞或胎盘微粒体来评价化合物抑制雌酮硫酸酯酶活性的能力。另外，可以使用动物模型。有关合适的试验规程的细节在下面的章节中提供。应注意，可以使用其它试验来测定STS活性以及STS抑制。例如，还可以参考WO-A-99/50453的教导。

优选地，对于一些应用，该化合物进一步表征为这样的特征：如果氨基磺酸酯基被硫酸酯基取代而形成硫酸酯衍生物，那么该硫酸酯衍生物可被具有类固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2)活性的酶水解(即，当与类固醇硫酸酯酶EC3.1.6.2在pH7.4于37℃下孵育时)。

一个优选实施方案中，如果化合物的氨基磺酸酯基被硫酸酯基置换而形成硫酸酯化合物，那么硫酸酯化合物可被具有类固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2)活性的酶水解，当与类固醇硫酸酯酶EC3.1.6.2在pH7.4于37℃下孵育时，获得的Km值低于200mmol，优选低于150mmol，优选低于100mmol，优选低于75mmol，优选低于50mmol。

一个优选实施方案中，如果化合物的氨基磺酸酯基被硫酸酯基置换而形成硫酸酯化合物，那么随后硫酸酯化合物可被具有类固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2)活性的酶水解，当与类固醇硫酸酯酶EC3.1.6.2在pH7.4于37℃下孵育时，获得的Km值低于200mmol，优选低于150mmol，优选低于100mmol，优选低于75mmol，优选低于50mmol。

一个优选实施方案中，本发明化合物不能被具有类固醇硫酸酯酶(E.C.3.1.6.2)活性的酶水解。

对于一些应用，优选地，本发明化合物对所需靶标(如STS)具有至少约100倍的选择性，优选对所需靶标具有至少约150倍的选择性，优选对所需靶标具有至少约200倍的选择性，优选对所需靶标具有至少约250倍的选择性，优选对所需靶标具有至少约300倍的选择性，优选对所需靶标具有至少约350倍的选择性。

应注意，本发明化合物除了抑制STS活性的能力以外，可具有其它有益特性，或者具有两者之一。

类固醇脱氢酶

类固醇脱氢酶或“DH”(简称)可以被分类为两种类型：I型和II型。酶(例如雌二醇17β-羟基类固醇脱氢酶(E2HSD))的这两种类型在调节与雌激素受体相互作用的配体有效性方面起重要作用。I型将雌酮(E1)还原为生物活性的雌激素，即雌二醇(E2)，而II型E2HSD通过催化E2氧化为E1而使E2失活。

DH抑制

据认为，与DH活性有关的一些疾病病况归因于无活性的雌酮转化为活性的雌二醇。在与DH活性相关的病况中，人们希望抑制DH活性。

这里，术语“抑制”包括减小和/或消除和/或屏蔽和/或防止DH的有害作用。

根据本发明，本发明化合物能用作DH抑制剂。

这里，本文所使用的关于本发明化合物的术语“抑制剂”是指能够抑制DH活性(例如减小和/或消除和/或屏蔽和/或防止DH的有害作用)的化合物。DH抑制剂可以起拮抗剂作用。

可以使用具有充足I型E2HSD活性的T47D乳腺癌细胞或用于II型抑制剂研究的MDA-MB-231细胞来评价化合物抑制类固醇脱氢酶活性的能力。在两种细胞系中，产物的形成与时间和细胞数线性相关。适合的试验规程的细节在实施例章节中提供。

应指出，本发明化合物可具有除了抑制DH活性的能力以外的其它有益特性，或者具有代替抑制DH活性的能力的其它有益特性。

氨基磺酸酯基

在一个实施方案中，环X具有氨基磺酸酯基作为取代基。本文所使用的术语“氨基磺酸酯”包括氨基磺酸的酯或氨基磺酸的N-取代衍生物的酯，或它们的盐。

如果R¹是氨基磺酸酯基，那么本发明的化合物称为氨基磺酸酯化合物。

通常，氨基磺酸酯基具有以下结构式：

(R⁴)(R⁵)N-S(O)(O)-O-

其中优选R⁴和R⁵独立地选自H、烷基、环烷基、烯基和芳基或它们的组合，或者一起表示亚烷基，其中所述或每个烷基或环烷基或烯基或任选含有一个或多个杂原子或基团。

当被取代时，本发明的N-取代化合物可以含有一个或两个N-烷基、N-烯基、N-环烷基或N-芳基取代基，优选含有或各自含有最多10个碳原子。当R⁴和/或R⁵是烷基时，优选值(values)是其中R⁴和R⁵各自独立地选自含有1～6个碳原子的低级烷基的那些，即甲基、乙基、丙基等。R⁴和R⁵可以均为甲基。当R⁴和/或R⁵是芳基时，典型值是苯基和甲苯基(PhCH₃；o)。在R⁴和R⁵表示环烷基的情况下，典型值为环丙基、环戊基、环己基等。当结合在一起时，R⁴和R⁵通常表示亚烷基，其提供4～6个碳原子的链，任选被一个或多个杂原子或基团打断，以例如提供五元杂环(例如吗啉代、吡咯烷基(pyrrolidino)或哌啶基)。

在这些值内，包括含有一个或多个不干扰所述化合物的硫酸酯酶抑制活性的基团作为取代基的烷基、环烷基、烯基和芳基取代的基团。示例性非干扰取代基包括羟基、氨基、卤素、烷氧基、烷基和芳基。

在一些实施方案中，氨基磺酸酯基可以通过与基团X内或基团X上的一个或多个原子稠合(或连接)而形成环结构。

在一些实施方案中，可以存在多于一个的氨基磺酸酯基。例如，可以有两个氨基磺酸酯基(即，双-氨基磺酸酯化合物)。如果这些化合物以甾核为基础，优选第二个氨基磺酸酯基(或其它氨基磺酸酯基中的至少一个)位于甾核的17位上。这些基团不必是相同的。

在一些优选的实施方案中，R⁴和R⁵中至少一个是H。

在一些进一步优选的实施方案中，R⁴和R⁵各自是H。膦酸酯基

如果R¹是膦酸酯基，那么本发明的化合物称为膦酸酯化合物。

通常，膦酸酯基具有以下结构式：

(R⁶)-P(O)(OH)-O-

其中优选R⁶为H、烷基、环烷基、烯基和芳基或它们的组合，其中所述或每一个烷基或环烷基或烯基或任选含有一个或多个杂原子或基团。

当被取代时，本发明的N-取代化合物可以含有一个或两个N-烷基、N-烯基、N-环烷基或N-芳基取代基，优选含有或各自含有最多10个碳原子。当R⁶是烷基时，R⁶可以是含有1～6个碳原子的低级烷基，即甲基、乙基、丙基等。例如，R⁶可以为甲基。当R⁶是芳基时，典型的值是苯基和甲苯基(PhCH₃；o)。在R⁶表示环烷基的情况下，典型的值为环丙基、环戊基、环己基等。R⁶甚至可以包括亚烷基，其提供4～6个碳原子的链，任选被一个或多个杂原子或基团打断，以例如提供五元杂环(例如吗啉代、吡咯烷基或哌啶子基)。

在含有不干扰所述化合物的硫酸酯酶抑制活性的一种或多种基团作为取代基的值内，包括烷基、环烷基、烯基和芳基取代基。示例性非干扰取代基包括羟基、氨基、卤素、烷氧基、烷基和芳基。

在一些实施方案中，膦酸酯基可以通过与基团X内或基团X上的一个或多个原子稠合(或结合)而形成环结构。

在一些实施方案中，可以存在多于一个的膦酸酯基。例如，可以有两个膦酸酯基(即，双-膦酸酯化合物)。如果这些化合物以甾核为基础，优选第二个膦酸酯基(或其它膦酸酯基中的至少一个)位于甾核的17位上。这些基团不必是相同的。

硫代膦酸酯基

如果R¹是硫代膦酸酯基，那么本发明的化合物称为硫代膦酸酯化合物。

通常，硫代膦酸酯基具有具有以下结构式：

(R⁷)-P(S)(OH)-O-

其中R⁷优选是H、烷基、环烷基、烯基或芳基或它们的组合，其中所述或每一个烷基或环烷基或烯基或任选含有一个或多个杂原子或基团。

当被取代时，本发明的N-取代化合物可以含有一个或两个N-烷基、N-烯基、N-环烷基或N-芳基取代基，优选含有或各自含有最多10个碳原子。当R⁷是烷基时，R⁷可以是含有1～6个碳原子的低级烷基，即甲基、乙基、丙基等。例如，R⁷可以为甲基。当R⁷是芳基时，典型值是苯基和甲苯基(PhCH₃；o)。在R⁷表示环烷基的情况下，典型值为环丙基、环戊基、环己基等。R⁷甚至可以包括亚烷基，其提供4～6个碳原子的链，任选被一个或多个杂原子或基团打断，以例如提供五元杂环(例如吗啉代、吡咯烷基或哌啶子基)。

在一些实施方案中，硫代膦酸酯基可以通过与基团X内或基团X上的一个或多个原子稠合(或结合)而形成环结构。

在一些实施方案中，可以存在多于一个的硫代膦酸酯基。例如，可以有两个硫代膦酸酯基(即，双-硫代膦酸酯化合物)。如果这些化合物以甾核为基础，优选第二个硫代膦酸酯基(或其它膦酸酯基中的至少一个)位于甾核的17位上。这些基团不必是相同的。

磺酸酯基

如果R¹是磺酸酯基，那么本发明的化合物称为磺酸酯化合物。

通常，磺酸酯基具有以下结构式：

(R⁸)-S(O)(O)-O-

其中R⁸优选是H、烷基、环烷基、烯基或芳基或它们的组合，其中所述或每一个烷基或环烷基或烯基或任选含有一个或多个杂原子或基团。

当被取代时，本发明的N-取代化合物可以含有一个或两个N-烷基、N-烯基、N-环烷基或N-芳基取代基，优选含有或各自含有最多10个碳原子。当R⁸是烷基时，R⁸可以是含有1～6个碳原子的低级烷基，即甲基、乙基、丙基等。例如，R⁸可以为甲基。当R⁸是芳基时，典型值是苯基和甲苯基(PhCH₃；o)。在R8表示环烷基的情况下，典型值为环丙基、环戊基、环己基等。R⁸甚至可以包括亚烷基，其提供4～6个碳原子的链，任选被一个或多个杂原子或基团打断，以例如提供五元杂环(例如吗啉代、吡咯烷基或哌啶子基)。

在一些实施方案中，磺酸酯基可以通过与基团X内或基团X上的一个或多个原子稠合(或结合)而形成环结构。

在一些实施方案中，可以存在多于一个的磺酸酯基。例如，可以有两个磺酸酯基(即，双-磺酸酯化合物)。如果这些化合物以甾核为基础，优选第二个磺酸酯基(或其它磺酸酯基中的至少一个)位于甾核的17位上。这些基团不必是相同的。

磺酸酯/膦酸酯/硫代膦酸酯/氨基磺酸酯的组合

对于本发明的一些化合物，可以存在一个如本文所定义的磺酸酯或膦酸酯或硫代膦酸酯或氨基磺酸酯中的；以及另一个如本文所定义的磺酸酯或膦酸酯或硫代膦酸酯或氨基磺酸酯。例如，本发明化合物可以包含一个氨基磺酸酯基和一个膦酸酯基。

如果本发明的这些化合物以甾核为基础，优选所述另一个基团位于甾核的17位上。

烃基

本文所使用的术语“烃基”是指至少包含C和H的基团，并且可以任选包含一个或多个其它适合的取代基。此类取代基的实例包括卤素、烷氧基、硝基、烷基、环状基团等。除了取代基可能是环状基团以外，取代基可以结合形成环状基团。如果烃基含有多于一个的C，那么这些碳不必相互连接。例如，至少两个碳可以通过适合的元素或基团连接。因此，该烃基可以含有杂原子。适合的杂原子对于本领域技术人员来说显而易见，例如包括硫、氮和氧。烃基的非限制性实例是酰基。

典型的烃基是烃基团。这里使用的术语“烃”是指烷基、烯基、炔基或芳基中的任何一种，所述烷基、烯基和炔基可以是直链、支链或环状的。术语烃还包括任选被取代的那些基团。如果该烃是其上具有取代基的支链结构，那么该取代可以是在烃主链上或在支链上；或者，所述取代可以既在烃主链上，又在支链上。

含氧烃基

本文所使用的术语“含氧烃基”是指至少包含C、H和O的基团，并且可以任选包含一个或多个其它适合的取代基。此类取代基的实例包括卤素、烷氧基、硝基、烷基、环状基团等。除了取代基可能是环状基团以外，取代基可以结合形成环状基团。如果烃基含有多于一个的C，那么这些碳不必相互连接。例如，至少两个碳可以通过适合的元素或基团连接。因此，该烃基可以含有杂原子。适合的杂原子对于本领域技术人员来说显而易见，例如包括包括硫和氮。

在本发明的一个实施方案中，该含氧烃基是烃氧基(oxyhydrocarbon group)。

这里，术语“烃氧基”是指烷氧基、烯氧基、炔氧基或芳氧基中的任何一个，所述烷氧基、烯氧基和炔氧基可以是直链、支链或环状的。术语烃氧基还包括任选被取代的那些基团。如果烃氧基是其上具有取代基的支链结构，那么该取代可以是在烃主链上或在支链上；或者，所述取代可以既在烃主链上，又在支链上。

通常，该含氧烃基具有结构式C_1-6O(例如C_1-3O)。

使用癌细胞测定STS活性的试验

(规程1)

MCF-7细胞中类固醇硫酸酯酶活性的抑制

使用完整的MCF-7人乳腺癌细胞在体外测定类固醇硫酸酯酶的活性。该激素依赖型细胞系广泛用于研究对人乳腺癌生长的控制。它具有显著的类固醇硫酸酯酶活性(Maclndoe等，Endocrinology，123，1281-1287(1988)；Purohit & Reed，Int.J.Cancer，50，901-905(1992))，可以从美国典型培养物保藏中心(AmericanType CultureCollection)(ATCC)和英国(例如皇家癌症研究基金会(The Imperial Cancer ResearchFund))获得。

细胞保存在含有20mM HEPS、5％胎牛血清、2mM谷氨酰胺、非必需氨基酸和0.075％碳酸氢钠的最低必需培养基(MEM)(Flow Laboratories，Irvine，Scotland)中。使用以上培养基以大约1×10⁵细胞/瓶的量对至多30份平行的25cm²组织培养瓶进行接种。细胞生长至80％融合，每3天更换培养基。

在一式三份25cm²组织培养瓶内的完整单层MCF-7细胞用Earle’s平衡盐溶液(EBSS购自英国ICN Flow，High Wycombe)洗涤，于37℃下，用无血清MEM(2.5ml)中的5pmol(7×10⁵dpm)[6，7-3H]雌酮-3-硫酸酯(比活性60Ci/mmol，购自美国马萨诸塞州波士顿市New England Nuclear)连同雌酮-3-氨基磺酸酯(11种浓度：0；1fM；0.01pM；0.1pM；1pM；0.01nM；0.1nM；1nM；0.01mM；0.1mM；1mM)孵育3～4小时。孵育后，将每一培养瓶冷却，用移液管将培养基(1ml)转移到含有[14C]雌酮(7×10³dpm)(比活性97Ci/mmol，购自Amersham Interantional Radiochemical Centre，Amersham，英国)的独立试管内。将该混合物与甲苯(5ml)彻底振荡30秒钟。实验表明，通过这种处理，>90％的[14C]雌酮和<0.1％的[3H]雌酮-3-硫酸酯从水相中被去除。移出一部分(2ml)有机相，蒸发，闪烁光谱测定法测定残留物中的3H和14C含量。由所获得的3H计数(校正所使用的培养基和有机相的体积以及所添加的[14C]雌酮的回收率)和底物的比活性来计算水解的雌酮-3-硫酸酯的质量。每一批实验包括对由硫酸酯酶阳性的人胎盘(阳性对照)制备的微粒体以及没有细胞的烧瓶(以评价底物的表观非酶促水解)进行孵育。在用Zaponin处理细胞单层之后，使用库尔特计数器测定每一瓶的细胞核的数目。使用每一批中的一个烧瓶，利用台盼蓝排斥法(Phillips，H.J.(1973)In：Tissue culture and applications，[eds：Kruse，D.F.& Patterson，M.K.]；第406-408页；Academic Press，New York)评价细胞膜状态和生存力。

类固醇硫酸酯酶活性的结果表示为对106个细胞计算的在孵育期(20小时)中形成的总产物(雌酮+雌二醇)的平均值±1S.D.，相对不含雌酮-2-硫酸酯酶的孵育其减低(抑制)百分率显示统计学显著性。使用非成对学生t检验(Unpaired Student’st-test)来检验结果的统计显著性。

使用胎盘微粒体测定STS活性的试验

(规程2)

胎盘微粒体中类固醇硫酸酯酶活性的抑制

用剪刀将得自正常足月妊娠的硫酸酯酶阳性的人胎盘充分剪碎，用冷的磷酸盐缓冲液(pH7.4，50mM)洗涤一次，然后再悬浮于冷的磷酸盐缓冲液(5ml/g组织)。采用被2分钟的冰浴冷却期隔开的三个10秒钟爆发，用Ultra-Turrax匀浆机进行匀浆。通过以2000g离心(4℃)30分钟，除去核与细胞碎片，20℃下储存上清份样(各2ml)。通过Bradford的方法(Anal.Biochem.，72，248-254(1976))测定上清的蛋白质浓度。

使用如下条件进行孵育(1ml)：蛋白质浓度为100mg/ml、底物浓度为20mM[6，7-3H]雌酮-3-硫酸酯(比活性60Ci/mmol，购自美国马萨诸塞州波士顿市NewEngland Nuclear)，孵育时间为20分钟，在37℃下孵育。如果必要，使用8种化合物浓度：0(即对照)；0.05mM；0.1mM；0.2mM；0.4mM；0.6mM；0.8mM；1.0mM。孵育后，将各个样本冷却，用移液管将培养基(1ml)移入到含有[14C]雌酮(7×10³dpm)(比活性97Ci/mmol，购自Amersham Interantional Radiochemical Centre，Amersham，英国)的独立试管内。将该混合物与甲苯(5ml)彻底振荡30秒钟。实验表明，通过这种处理，>90％的[14C]雌酮和<0.1％的[3H]雌酮-3-硫酸酯从水相中被去除。移出一部分有机相(2ml)，蒸发，闪烁光谱测定法测定残留物中的3H和14C含量。由所获得的3H计数(校正所使用的培养基和有机相的体积以及所添加的[14C]雌酮的回收率)和底物的比活性来计算水解的雌酮-3-硫酸酯的质量。

用于测定STS活性的动物试验模型

(规程3)

雌酮硫酸酯酶活性的体内抑制

可使用动物模型，尤其使用卵巢切除的大鼠来研究本发明化合物。在该模型中，雌激素性化合物刺激子宫生长。

口服给与大鼠该化合物(10mg/Kg/天，总共5天)，而另一组大鼠仅仅接受载体(丙二醇)。还有一组皮下接受10μg/天的量的化合物EMATE，共计5天。在研究结束时，获取肝组织的样本，如前所述，使用3H雌酮硫酸酯作为底物分析雌酮硫酸酯酶的活性(参见PCT/GB95/02638)。

用于测定雌激素活性的动物试验模型

(方案4)

体内雌激素活性的缺乏

口服给与大鼠该化合物(10mg/Kg/天，总共5天)，而另一组大鼠仅仅接受载体(丙二醇)。还有一组皮下接受10μg/天的量的雌激素化合物EMATE，共计5天。在研究结束时，获取子宫，称重，结果表示为子宫重量/总体重×100。

对子宫生长没有显著影响的化合物不具有雌激素性。

治疗

本发明化合物可用作治疗剂—即，在治疗应用中。

术语“治疗”包括治愈效果、缓解效果和预防效果。

治疗可以针对人或动物，优选雌性动物。

药物组合物

在一个方面中，本发明提供药物组合物，它包含根据本发明的化合物和任选的药学上可接受的载体、稀释剂或赋型剂(包括它们的组合)。

该药物组合物可以在人和兽医中用于人或动物用途，通常包含药学上可接受的稀释剂、载体或赋型剂中的任何一种或多种。治疗用途的可接受的载体或稀释剂在制药领域中是众所周知的，例如描述于Remington＇s Pharmaceutical Sciences，MackPublishing Co.(A.R.Gennaro edit.1985)中。可以根据预期给药途径和标准药学实践来选择药用载体、赋型剂或稀释剂。该药物组合物可以包含任何适合的粘结剂、润滑剂、混悬剂、包衣剂、增溶剂作为所述载体、赋型剂或稀释剂，或者除了所述载体、赋型剂或稀释剂以外包括任何适合的粘结剂、润滑剂、混悬剂、包衣剂、增溶剂。

该药物组合物中可以具有防腐剂、稳定剂、染料，甚至矫味剂。防腐剂的实例包括苯甲酸钠、山梨酸和对羟基苯甲酸酯类。还可以使用抗氧化剂和混悬剂。

根据不同的递送体系可以有不同的组成/配制要求。例如，可将本发明的药物组合物配制成使用微型泵递送，或通过粘膜途径递送，例如作为鼻喷雾剂或吸入用气溶胶或可摄入的溶液；或者胃肠外给药，该组合物配制为可注射形式，例如通过静脉内、肌内或皮下途径递送。或者，该制剂可以设计为通过两种途径递送。

在该药物经粘膜途径通过胃肠粘膜递送的情况下，它应该在通过胃肠道递送期间保持稳定。例如，它应该抵抗蛋白水解的降解，在酸性pH下稳定，抵抗胆汁的去污剂(detergent)效应。

适当时，所述药物组合物按下列方式施用：吸入形式；栓剂或阴道栓的形式；以洗液、溶液、霜、软膏或扑粉的形式局部施用；使用皮肤贴片；以含有诸如淀粉或乳糖的赋型剂的片剂、或者在单独或与赋型剂混合于胶囊或微囊(ovules)内、或者以含有矫味剂或着色剂的酏剂、溶液或混悬液的形式口服；或者它们可以胃肠外注射，例如静脉内、肌内或皮下注射。对于胃肠外施用，该组合物可最好以无菌水溶液的形式使用，该无菌水溶液可以含有其它物质，例如足够的盐或单糖，以便使该溶液与血液等渗。对于口含或舌下施用，所述组合物可以片剂或锭剂的形式施用，能够以常规方式配制所述片剂或锭剂。

联合药物

本发明化合物可以与一种或多种其它活性剂(例如一种或多种其它药物活性剂)联合使用。

例如，本发明化合物可以与以下物质联合使用：其它STS抑制剂和/或其它抑制剂(如芳化酶抑制剂(例如4-羟基雄烯二酮(4-OHA))和/或类固醇(如天然存在的sterneurosteroids脱氢表雄酮硫酸酯(DHEAS)和孕烯醇酮硫酸酯(PS))和/或其它结构类似的有机化合物。其它STS抑制剂的实例可以在以上参考文献中找到。例如，用于本发明的STS抑制剂包括EMATE，以及类似于这里提到的化合物5的2-乙基17-脱氧化合物和/或2-甲氧基17-脱氧化合物。

另外，或者作为替代方案，本发明化合物可以与生物反应调节剂结联合使用。

术语生物反应调节剂(“BRM”)包括细胞因子、免疫调节剂、生长因子、造血调节因子、集落刺激因子、趋化因子、溶血因子和溶栓因子、细胞表面受体、配体、白细胞粘附分子、单克隆抗体、预防和治疗性疫苗、激素、细胞外基质组分、纤维粘连蛋白等。对于某些应用，优选的生物反应调节剂是细胞因子。细胞因子的实例包括：白介素(IL)，例如IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-19；肿瘤坏死因子(TNF)，例如TNF-α；干扰素α、β和γ；TGF-β。对于某些应用，细胞因子优选为肿瘤坏死因子(TNF)。对于某些应用，TNF可以是任何类型的TNF，例如TNF-α、TNF-β，包括它们的衍生物或混合物。更优选的细胞因子是TNF-α。关于TNF的教导可以在现有技术中找到，例如WO-A-98/08870和WO-A-98/13348。

给药

一般地，主治医师决定最适合于个体对象的实际剂量，并且该剂量随着年龄、体重和具体患者的反应而变化。以下剂量是平均情形的示例。当然，可以有适用更高或更低剂量范围的个别情况。

本发明的组合物可以通过直接注射给药。组合物可以配制成胃肠外、粘膜、肌内、静脉内、皮下、眼内或透皮给药。根据需要，药物可以按0.01～30mg/kg体重，例如0.1～10mg/kg体重，更优选0.1～1mg/kg体重的剂量给药。

又例如，本发明的药物可以根据每天1～4次(优选每天1次或2次)的方案给药。用于任何具体患者的具体的剂量水平和剂量频率可以变化，并且将取决于各种因素，包括所用的具体化合物的活性，该化合物的代谢稳定性和作用时间长短、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、给药方式和时间、排泄率、药物组合、具体病症的严重程度和接受治疗的主体。

除了上述典型的递送方式以外，术语“给药”还包括通过诸如脂质介导的转染、脂质体、免疫脂质体、脂质转染(lipofectin)、阳离子表面两亲物(CFAs)以及它们的组合等技术递送。此类递送机制的途径包括但不限于粘膜、鼻、口、胃肠外、胃肠、局部或舌下途径。

术语“给药”包括但不限于粘膜途径递送，例如作为鼻喷雾剂或吸入气溶胶或作为可摄取溶液；胃肠外途径递送(通过可注射形式递送)，例如静脉内、肌内或皮下途径。

因此就给药而言，本发明的STS抑制剂可按任何适合的方式，采用常规药物配制技术和药用载体、佐剂、赋型剂、稀释剂等进行配制，并且通常用于胃肠外给药。近似有效剂量率可以是1～1000mg/天，例如10～900mg/天，或甚至100～800mg/天，取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。优选和更有效的化合物的更常用剂量率是200～800mg/天，更优选200～500mg/天，最优选200～250mg/天。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单日剂量率。但此类有效日剂量根据活性成分的固有活性和患者体重而变化，此类变化属于主治医师的技术和判断范畴内。

低给药频率(dosing frequency)

根据一个非常优选的方面，本发明化合物可以按频率低于每日给药的给药方案来给药。令人惊奇的是，已发现相比于已知的类固醇硫酸酯酶抑制剂，本发明化合物显示格外长的作用持续时间。

因此，本发明提供了本发明化合物的给药方法，其包括剂量给药间隔选自每周一次给药(dosing)、每周两次给药、每两周一次给药、每月两次给药和每月一次给药的连续给药方案。

此外，本发明提供了本发明化合物的给药方法，其包括给药周期为大约每3天一次到大约每16天一次的连续给药方案。

优选地，维持该连续给药方案直到获得所需的治疗效果。

所谓每周一次给药是指，每周给与一次单位剂量的本发明化合物，即，在7天的期间内给药一次，优选在每一周的同一天给药。在每周一次给药方案中，通常大约每7天给与单位剂量。每周一次给药方案的一个非限制性实例要求每个星期天给与单位剂量的本发明化合物。优选地，该单位剂量不是在连续日给药，但每周一次给药方案能够包括其中在分属两个不同的周周期(weekly period)的两个连续日给与单位剂量的给药方案。

近似有效剂量率可以是1～1000mg/周，例如10～900mg/周，或甚至100～800mg/周，这取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。对于优选且活性更高的化合物，更常用的剂量率是200～800mg/周，优选200～500mg/周，更优选200～250mg/周。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单周剂量率。

所谓每周两次给药是指，每周给与两次单位剂量的本发明化合物，即，在7天的期间内给药2次，优选在每个周周期的相同两天给药。在每周两次给药方案中，每个单位剂量通常大约每3～4天给与。每周两次给药方案的一个非限制性实例要求每个星期日和星期三给与单位剂量的本发明化合物。优选地，所述单位剂量不是在同一天或连续与给与，但每周两次给药方案能够包括其中单位剂量在一个周周期或不同的周周期之内的两个连续日给与单位剂量的给药方案。

近似有效剂量率可以是1～1000mg/每周两次，例如10～900mg/每周两次，或甚至100～800mg/每周两次，这取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。对于优选且活性更高的化合物，更常用的剂量率是200～800mg/每周两次，优选200～500mg/每周两次，更优选200～250mg/每周两次。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单个每周两次剂量率。

所谓每两周一次给药是指，在2周期间给与一次单位剂量的本发明化合物，即，在14天的期间内给药一次，优选在每个两周周期的同一天给药。在一周两次给药方案中，每一单位剂量通常大约每14天给与。每两周一次给药方案的一个非限制性实例要求每隔一个星期日给与一个单位剂量的本发明化合物。优选地，该单位剂量不在连续日给药，但每两周一次给药方案能够包括其中在两个不同的两周周期之内的两个连续日给与该单位剂量的给药方案。

近似有效剂量率可以是1～1000mg/两周，例如10～900mg/两周，或甚至100～800mg/两周，这取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。对于优选且活性更高的化合物，更常用的剂量率是200～800mg/两周，优选200～500mg/两周，更优选200～250mg/两周。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单个每两周一次剂量率。

所谓每月两次给药是指，在一个月历(monthly calendar period)期间两次给与单位剂量的本发明化合物。在每月两次给药方案中，优选在每一个月的相同两个日期投给剂量。在每月两次给药方案中，每一单位剂量通常大约每14～16天给药。每月两次给药方案的一个非限制性实例要求在该月的第一天或大约第一天以及在该月的第15日或大约第15日(即中点)剂量给药。优选地，不在同一天或连续日给与单位剂量，但每月两次给药方案能够包括其中在一个月内或不同月内的两个连续日给与单位剂量的给药方案。每月两次方案这里定义为不同于，并且不包括两周一次给药方案，因为这两个方案具有不同的周期性，导致在长时间内给与不同的剂量数。例如，在一年内，根据每月两次方案，给与共计约24个剂量(因为一年有12个日历月份)，而根据两周一次给药方案，给与共计约26个剂量(因为在一年内有大约52周)。

近似有效剂量率可以是1～1000mg/每月两次，例如10～900mg/每月两次，或甚至100～800mg/每月两次，这取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。对于优选且活性更高的化合物，更常用的剂量率是200～800mg/每月两次，优选200～500mg/每月两次，更优选200～250mg/每月两次。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单个每月两次剂量率。

所谓每月一次给药是指，在一个月历期间给与一次单位剂量的本发明化合物。在每月一次方案中，优选在每一个月的同一日期投给剂量。在每月一次给药方案中，每一单位剂量通常大约每28天到32天给药。

近似有效剂量率可以是1～1000mg/月，例如10～900mg/月，或甚至100～800mg/月，这取决于所讨论化合物的单独活性，并针对平均体重(70Kg)的患者而言。对于优选且活性更高的化合物，更常用的剂量率是200～800mg/月，优选200～500mg/月，更优选200～250mg/月。它们可以按单剂量方案、分剂量方案和/或多剂量方案持续给药数天。对于口服给药，它们可以配制为单位剂量含有100～500mg化合物的片剂、胶囊、溶液或混悬剂。或者优选将化合物配制于适合的胃肠外给药用载体中，用于胃肠外给药，并且提供200～800mg，优选200～500mg，更优选200～250mg的单月剂量率。

根据一个高度优选的实施方案，本发明提供了对哺乳动物治疗与类固醇硫酸酯酶相关的病症或疾病的方法，所述方法包括按照给药间隔大于每天一次的时间表，对所述哺乳动物给与单位剂量形式的将药学有效量的本发明化合物。优选地，该给药间隔选自每周一次给药、每周两次给药，两周一次给药，每月两次给药和每月一次给药。十分优选地，该给药间隔是每周一次给药。

根据另一非常优选的实施方案，本发明提供了对哺乳动物治疗与有害的STS水平有关的病症或疾病的方法，所述方法包括按照给药间隔大于每天一次的时间表，对所述哺乳动物给与单位剂量形式的药学有效量的本发明化合物。优选地，该给药间隔选自每周一次给药、每周两次给药，两周一次给药，每月两次给药和每月一次给药。十分优选地，该给药间隔是每周一次给药。

根据另一非常优选的实施方案，本发明提供了对有此需要的哺乳动物治疗癌症的方法，所述方法包括按照给药间隔大于每天一次的时间表，对所述哺乳动物给与单位剂量形式的药学有效量的本发明化合物。优选地，该给药间隔选自每周一次给药、每周两次给药，两周一次给药，每月两次给药和每月一次给药。十分优选地，该给药间隔是每周一次给药。所述癌症优选自内分泌依赖型癌症。更优选地，所述癌症选自乳腺癌、子宫内膜癌或前列腺癌，最优选乳腺癌。

根据另一非常优选的实施方案，本发明提供了对有此需要的哺乳动物治疗乳腺癌的方法，所述方法包括按照给药间隔为每周一次的时间表，对所述哺乳动物给与单位剂量形式的药学有效量的下式化合物：

治疗试剂盒

在其它实施方案中，本发明涉及用于方便而有效地实施本发明方法的试剂盒。这种试剂盒尤其适用于递送固体口服剂型，如片剂或胶囊。这种试剂盒优选包括若干单位剂量。这种试剂盒可以包含具有以它们的预期使用顺序排列的剂量的卡片。这种试剂盒的一个实例是“泡眼包装(blister pack)”。泡眼包装在包装工业中是众所周知的，广泛用于包装药物单位剂型。如果需要，可以提供例如数字、字母或其它标记形式的记忆辅助工具，或者插入日历，指出治疗计划表中能够给予剂量的日期。或者，可以包含与双膦酸酯的剂型相似或不同的安慰剂或钙或饮食补充剂，以提供每日给药剂量的试剂盒。

药学上可接受的盐

当本发明化合物含有碱性部分时，可从有机酸和无机酸形成药学上可接受的盐，所述酸例如是乙酸、丙酸、乳酸、柠檬酸、酒石酸、丁二酸、富马酸、马来酸、丙二酸、扁桃酸、苹果酸、邻苯二甲酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、萘磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、樟脑磺酸和类似的已知可接受的酸。当本发明化合物含有酸性部分时，还可从有机碱和无机碱形成盐，优选碱金属盐，例如钠盐、锂盐或钾盐。

细胞周期

本发明化合物可用于治疗细胞周期紊乱的方法。

如“分子细胞生物学(Molecular Cell Biology)”第3版，Lodish等，第177-181页中所述，不同的真核细胞能以非常不同的速率生长和分裂。例如酵母细胞能够每120分钟分裂一次，而海胆和昆虫的真核细胞中受精卵的第一次分裂仅需要1530分钟，因为一个大的原有(pre-existing)细胞发生再分裂。然而，大多数生长的植物和动物细胞花费10～20小时来达到数目增倍，一些以慢得多的速率复制。成人的许多细胞，如神经细胞和横纹肌细胞根本不分裂；其它细胞，如有助于伤口愈合的成纤维细胞在需要时生长，但在其它时候处于静止。

还有，每一个分裂的真核细胞必须容易地将同样的遗传物质赋予两个子细胞。真核细胞中的DNA合成不会贯穿整个细胞分裂周期中发生，而是局限于细胞分裂之前的一部分周期。

用全部能够生长和分裂的哺乳动物细胞的培养物彻底分析了真核细胞DNA合成与细胞分裂之间的关系。发现与细菌相反，真核细胞仅花费其一部分时间用于DNA合成，并且在细胞分裂(有丝分裂)之前数小时完成DNA合成。因此，在DNA合成之后和细胞分裂之前出现了时间间隙；发现在分裂之后和下一轮DNA合成之前存在另一间隙。该分析得出了这样的结论，真核细胞周期由M(有丝分裂)期、G₁期(第一间隙)、S(DNA合成)期、G₂期(第二间隙)并返回M期组成。在有丝分裂之间的各期(G₁、S和G₂)统称为间期。

组织中的许多非分裂细胞(例如所有静止成纤维细胞)在有丝分裂之后和刚好在DNA合成之前使该周期暂停；这种“静息”细胞据说已经从细胞周期中退出并处于G₀状态。

通过使用荧光激活细胞分拣器(FACS)来测定它们的相对DNA含量，有可能在细胞处于细胞周期的三个间期阶段之一时对其进行鉴定：处于G₁(DNA合成之前)的细胞具有规定量为x的DNA；在S期间(DNA复制)，它具有x到2x的DNA；而在G₂(或M)期，它具有2x的DNA。

动物细胞中有丝分裂和胞质分裂的阶段如下所示：

(a)间期。间期的G₂阶段刚好在有丝分裂开始之前。染色体DNA在S期中已经复制并与蛋白质结合，但染色体仍然没有作为明显的结构看到。核仁是在光学显微镜下可见的唯一的核亚结构。在DNA复制之前的二倍体细胞中，每一类具有两种形态染色体，该细胞被称为2n。在DNA复制之后的G₂期中，该细胞是4n。每一个染色体DNA具有四个拷贝。由于姐妹染色体还没有相互分离，所以它们被称为姐妹染色单体。

(b)早前期。每个中心粒与新形成的子中心粒一起开始向细胞的相反极移动；染色体可以作为长丝被看到。核膜开始解聚为小泡。

(c)中和晚前期。染色体凝聚已完成；每一个可见的染色体结构由在其着丝粒处结合在一起的两个染色单体组成。每一染色单体含有两个新复制的子DNA分子之一。微管纺锤体开始从紧邻中心粒的区域放射，向它们的两极移动靠近。一些纺锤丝从一个极到达另一个极；大多数达到染色单体并附着在着丝粒。

(d)中期。染色体向细胞的赤道移动，在那里它们排列于赤道面。姐妹染色单体仍然没有分离。

(e)后期。两个姐妹染色单体分离为独立的染色体。各自含有着丝粒，所述着丝粒通过纺锤丝连接至其移向的一极。因此，每一染色体的一个拷贝被赋予每一子细胞。同时，细胞延伸，而极对极纺锤体也延伸。当卵裂沟开始形成时，胞质分裂开始。

(f)末期。在子细胞核的周围形成新膜；染色体展开，变得不太清楚，核仁再次变得可见，并在每一子细胞核的周围形成核膜。胞质分裂几乎完成，当微管和其它纤维解聚时，纺锤体消失。在整个有丝分裂过程中，在每一极的“子”中心粒生长直至达到其全长。在末期，每一初始中心粒的复制完成，在下一个间期中将产生新的子中心粒。

(g)间期。胞质分裂一经完成，细胞进入细胞周期的G₁期，在沿周期再次进行。

应了解，细胞周期是极其重要的细胞过程。偏离正常的细胞周期能够导致许多内科疾病。增加和/或不受限制的细胞周期可以导致癌症。减少的细胞周期可以导致退行性病症。本发明化合物的使用可提供治疗这类紊乱和病症的手段。

因此，本发明化合物可适用于治疗细胞周期紊乱，如癌症，包括激素依赖型癌症和非依赖激素的癌症。

可用本发明的化合物、组合物和方法治疗的癌症包括、但不限于：心脏：肉瘤(血管肉瘤、纤维肉瘤、横纹肌肉瘤、脂肪肉瘤)、粘液瘤、横纹肌瘤、纤维瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺：支气管癌(鳞状上皮细胞癌、未分化的小细胞癌、未分化的大细胞癌、腺癌)、肺泡(细支气管)癌、支气管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、软骨瘤样错构瘤、间皮瘤；胃肠道：食道(鳞状细胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(导管腺癌、胰岛瘤、胰升血糖素瘤、胃泌素瘤、类癌瘤、舒血管肠肽瘤(vipoma))、小肠(腺癌、淋巴瘤、类癌瘤肿瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、纤维神经瘤、纤维瘤)、大肠(腺癌、管式腺瘤、绒毛状腺瘤、错构瘤、平滑肌瘤)、结肠、结肠直肠、直肠；生殖泌尿道：肾(腺癌、维耳姆斯瘤[肾母细胞瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鳞状细胞癌、移行细胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原细胞瘤、畸胎瘤、胚胎性癌、畸胎癌、绒毛膜癌、肉瘤、间质细胞癌、纤维瘤、纤维腺瘤、腺瘤样瘤、脂肪瘤)；肝脏：肝癌(肝细胞癌)、肝胆管型肝癌、肝母细胞瘤、血管肉瘤、肝细胞性腺瘤、血管瘤；骨：骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纤维肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、软骨肉瘤、尤文氏肉瘤、恶性淋巴瘤(网状细胞肉瘤)、多发性骨髓瘤、恶性巨细胞脊索瘤、骨软骨瘤(osteochronfroma)(骨软骨性外生骨疣)、良性软骨瘤、成软骨细胞瘤、软骨粘液纤维瘤、骨样骨瘤和巨细胞瘤；神经系统：颅骨(骨瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄瘤、畸形性骨炎(osteitis deformans)、脑膜(脑膜瘤、脑脊膜肉瘤(meningiosarcoma)、神经胶质瘤病(gliomatosis))、脑(星形细胞瘤、髓母细胞瘤、神经胶质瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤[松果体瘤]、成胶质细胞瘤多态、少突神经胶质瘤、许旺氏细胞瘤、视网膜母细胞瘤、先天性肿瘤)、脊髓纤维神经瘤、脑膜瘤、神经胶质瘤、肉瘤)；妇科：子宫(子宫内膜癌)、宫颈(宫颈癌、肿瘤前期子宫颈非典型增生)、卵巢(卵巢癌[浆液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分类癌]、颗粒细胞-泡膜(granulosa-thecal)细胞肿瘤、塞-莱二氏细胞瘤、无性细胞瘤、未成熟畸胎瘤)、外阴(鳞状细胞癌、上皮内癌、腺癌、纤维肉瘤、黑色素瘤)、阴道(透明细胞癌、鳞状细胞癌、葡萄样肉瘤(胚胎性横纹肌肉瘤)、输卵管(癌)；血液：血液(粒细胞性白血病[急性和慢性]、急性淋巴母细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、脊髓发育不良综合征)、肉芽肿性淋巴瘤病、非霍奇金氏淋巴瘤[恶性淋巴瘤]；皮：黑素肉瘤、皮肤基底细胞癌、鳞状细胞癌、卡波西肉瘤、发育不良痣(moles dysplastic nevi)、脂肪瘤、血管瘤、皮肤纤维瘤、瘢痕瘤、银屑病；和肾上腺：神经母细胞瘤。因此，这里所述的术语“癌细胞”包括罹患上述任何病症的细胞。

另外，本发明化合物可适于治疗癌症，例如乳腺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、肉瘤、黑色素瘤、前列腺癌、胰腺癌等和其它实体肿瘤。

在一个优选实施方案中，本发明化合物用于治疗内分泌依赖型癌症。优选的内分泌依赖型癌症是乳腺癌、子宫内膜癌、前列腺癌和卵巢癌。

对于一些应用，细胞周期被抑制和/或阻止和/或阻滞，优选其中细胞周期被阻止和/或阻滞。在一个方面，可以在G₂/M期抑制和/或阻止和/或阻滞细胞周期。在一个方面，细胞周期可以被不可逆地阻止和/或抑制和/或阻滞，优选其中细胞周期被不可逆地阻止和/或阻滞。

术语“不可逆地阻止和/或抑制和/或阻滞”是指在应用本发明的化合物后，该化合物的效果，即阻止和/或抑制和/或阻滞细胞周期的效果，在该化合物除去时仍然可见。更具体地，术语“不可逆地阻止和/或抑制和/或阻滞”是指，当按照本文所述的细胞周期试验规程分析时，用感兴趣的化合物处理的细胞在规程I的阶段2之后的生长弱于对照细胞。该规程的细节在下文提供。

因此，本发明提供了具有以下作用的化合物：通过阻止和/或抑制和/或阻滞细胞周期而体外抑制雌激素受体阳性(ER+)和ER阴性(ER-)乳腺癌细胞的生长；和/或使完整动物(即，不切除卵巢)中的亚硝基甲脲(NMU)诱发的乳腺肿瘤退化，和/或阻止和/或抑制和/或阻滞癌细胞的细胞周期；和/或通过阻止和/或抑制和/或阻滞细胞周期而在体内起作用和/或起细胞周期激动剂(cell cycling agonist)的作用。

细胞周期试验

(规程5)

程序

阶段1

以105细胞/孔的密度将MCF-7乳腺癌细胞接种到多孔培养板中。使细胞附着并生长，直到大约30％融合，此时对它们进行如下处理：

对照—不处理

感兴趣的化合物(COI)20μM

使细胞在含有COI的生长培养基中生长6天，每3天更换培养基/COI。在该时期结束时，使用库尔特细胞计数器计数细胞数。

阶段2

在用COI处理细胞6天之后，以10⁴细胞/孔的密度对细胞再接种。不增加进一步的处理。在生长培养基的存在下，使细胞继续生长另外6天。在该时期结束之后，再次计数细胞数。

使用癌细胞测定DH活性的试验

(规程6)

分别在T47D和MDA-MB-231乳腺癌细胞的完整细胞单层中测定雌酮至雌二醇(E1→E2，I型E2DH)以及雌二醇至雌酮(E2→E1，II型E2DH)的转化率。在烧瓶内培养细胞，直到它们达80～90％融合。在2.5ml培养基中不存在(对照)或存在各种试验化合物(10μM)的条件下，将³H-E1或³H-E2(6pmol，约90Ci/mmol)加入到每一烧瓶内。还在没有细胞的烧瓶内加入底物，并且平行孵育(空白)。

在37℃下，与T47D细胞孵育30分钟或与MDA细胞孵育3小时之后，将2ml的培养基加入到分别含有¹⁴C-E2或¹⁴C-E1(约500cpm)和50μg E2或E1的试管内。用二乙醚(4ml)从水性培养基中萃取类固醇。在固体二氧化碳-甲醇混合物中冰冻水相之后，将醚相滗析到独立试管内，在40℃和空气流下将醚蒸发至干燥。将残留物溶解在少量的二乙醚中，施加于含有荧光指示剂的TLC板上。使用DCM-乙酸乙酯(4：1v/v)通过TLC将E1和E2分离。在UV光下进行造影之后，在TLC板上标记来自每一孵育烧瓶的产物的位置。切取标记的区域，放入含有甲醇(0.5ml)的闪烁管内，以洗脱产品。在用闪烁光谱法测定之后，计算所形成的³H-产物的和所回收的¹⁴C-E2或¹⁴C-E1的量。所形成的产物的量根据程序损耗和每一烧瓶内的细胞数进行校正。

癌症

如上所述，本发明的化合物可用于治疗细胞周期疾病。一种特定的细胞周期疾病是癌症。

癌症一直是大多数西方国家的主要死亡原因。迄今开发的癌症疗法包括阻断激素的作用或合成以抑制激素依赖型肿瘤的生长。然而，目前使用攻击性较强的化疗来治疗非依赖激素的肿瘤。

因此，开发用于抗癌治疗激素依赖型肿瘤和/或非依赖激素的肿瘤，且不产生与化疗有关的一些或全部副作用的药物，代表了主要的治疗进展。

已知，雌激素在其合成后经历了许多羟基化和缀合反应。直到最近认为，这些反应是代谢过程的一部分，最终使雌激素呈水溶性并增强它们从体内清除。现已明确，一些羟基代谢物(例如2-羟基和16α-羟基)和缀合物(例如雌酮硫酸酯，E1S)在确定雌激素在体内的一些复杂作用中具有重要意义。

研究人员已经调查了2-和16-羟基化雌激素的形成与改变罹患乳腺癌风险的条件之间的关系。现有证据表明，提高2-羟化酶活性的因素与降低的癌症风险有关，而增加16α-羟基化的那些因素可能提高乳腺癌的风险。有关2-甲氧基雌二醇为具有抗有丝分裂性能的内源性代谢物的证据的不断增多，已激起了对雌激素代谢物的生物作用的进一步兴趣。通过儿茶酚雌激素甲基转移酶由2-羟基雌二醇(2-OHE2)形成2-MeOE2，所述酶是广泛分布于人体的一种酶。

研究人员指出，通过皮下注射Meth A肉瘤、B16黑色素瘤或MDA-MB-435雌激素受体阴性(ER-)乳腺癌细胞发现，体内2-MeOE2抑制肿瘤的生长。它还抑制内皮细胞增殖和迁移以及体外血管生成。因此提出，2-MeOE2体内抑制肿瘤生长的能力可能归因于其能够抑制肿瘤诱导的血管生成，而非直接抑制肿瘤细胞的增殖。

2-MeOE2发挥其有效抗有丝分裂和抗血管生成作用的机制仍然有待阐明。有证据表明，在高浓度下，它能够抑制微管聚合，并对秋水仙碱与微管蛋白的结合具有弱抑制剂的作用。但最近，在阻断有丝分裂的浓度下，细胞内的微管蛋白纤丝没有发现发生解聚，而是具有在紫杉醇处理后所见到的相同形态。因此，像紫杉醇(用于乳腺癌和卵巢乳腺癌治疗的药物)一样，2-MeOE2通过稳定微管动力学来起作用。

虽然确将2-MeOE2鉴定为癌症的新治疗剂代表着重要的进展，但是，口服施用的雌激素的生物利用度很低。此外，它们在其第一次通过肝脏期间会经历广泛的代谢。作为开发用于治疗乳腺癌的类固醇硫酸酯酶抑制剂的研究计划的一部分，雌酮-3-O-氨基磺酸酯(EMATE)被鉴定为有效的定向活性位点的(active site-directed)抑制剂。出乎意料的是，EMATE证明具有强力的雌激素性能，它在大鼠中的口服亲子宫活性(oral ulterotrophic activity)比雌二醇高100倍。其增强的雌激素活性被认为归因于它被红血细胞(rbcs)吸收，红血细胞防止其在通过肝脏期间发生失活，并起到储库的作用，使其缓慢释放，持续延长的时期。合成并测试了许多A环改性的类似物，包括2-甲氧基雌酮-3-O-氨基磺酸酯。虽然该化合物作为类固醇硫酸酯酶抑制剂与EMATE等效，但它缺乏雌激素活性。

我们相信，本发明的化合物提供了用于治疗癌症(尤其乳腺癌)的手段。

另外，或者作为备选(or in the alternative)，本发明的化合物可用于阻断包括白血病和实体肿瘤(例如乳腺、子宫内膜、前列腺、卵巢和胰腺肿瘤)在内的癌症的生长。

治疗相关的雌激素

我们相信，本发明的一些化合物可用于控制体内(尤其女性体内)的雌激素水平。因此，一些化合物可以用于提供控制生育的手段—例如口服避孕药片、丸剂、溶液或锭剂。或者，该化合物可以植入物的形式或作为贴片使用。

因此，本发明的化合物可用于治疗与雌激素有关的激素病症。

另外或者作为备选，本发明的化合物可用于治疗与雌激素相关的那些病症以外的激素病症。因此，本发明的化合物还能够影响激素活性，还能够影响免疫应答。神经变性疾病

我们认为，本发明的一些化合物可用于治疗神经变性疾病和类似病症。

例如，据认为，STS抑制剂可用于增强患有健忘症、头部损伤、阿尔茨海默氏病、癫痫性痴呆、早老性痴呆、外伤后痴呆、老年性痴呆、血管性痴呆和中风后痴呆之类的疾病的患者的记忆功能或用于增强另外寻求记忆增进的个体的记忆功能。TH1

我们认为，本发明的一些化合物可用于TH1问题(implications)。

例如，据认为，STS抑制剂在巨噬细胞或其它抗原呈递细胞内的存在可以导致致敏T细胞发动TH1(高IL-2、IFNγ，低IL-4)应答的能力降低。其它类固醇(如糖皮质激素)的正常调节作用因此占优势。

炎症性疾病

我们相信，本发明的一些化合物可用于治疗炎症性疾病，例如与以下的任何一种或多种有关的疾病：自身免疫，例如包括类风湿关节炎、I和II型糖尿病、系统性红斑狼疮、多发性硬化症、重症肌无力、甲状腺炎、血管炎、溃疡性结肠炎和克罗恩氏病；皮肤病，例如银屑病和接触性皮炎；移植物抗宿主病；湿疹；哮喘和器官移植后排斥反应。

例如，据认为，STS抑制剂可以防止DHEA或相关类固醇对免疫和/或炎症反应的正常生理效应。

本发明的化合物可用于制备显示内源性糖皮质激素样效应的药物。

其它治疗

还应理解，本发明的化合物/组合物可以具有其它重要医学意义。

例如，本发明的化合物或组合物可用于治疗WO-A-99/52890中所列举的疾病，即：

另外，或者作为备选，本发明的化合物或组合物可用于治疗WO-A-98/05635中所列举的病症。为了方便参考，现提供该列表的一部分：癌症、炎症或炎性疾病、皮肤病、发烧、心血管活动、出血、凝血和急性期反应、恶病质、厌食、急性传染、HIV感染、休克状态、移植物抗宿主反应、自身免疫病、再灌注损伤、脑膜炎、偏头痛和阿斯匹林依赖性抗血栓形成；肿瘤生长、侵袭和扩散、血管生成、转移、恶性病、腹水和恶性胸膜腔积液；脑局部缺血、缺血性心脏病、骨关节炎、类风湿性关节炎、骨质疏松症、哮喘、多发性脑硬化症、神经变性、阿尔茨海默氏病、动脉粥样硬化、中风、血管炎、克罗恩氏病和溃疡性结肠炎；牙周炎、齿龈炎；银屑病、特异性皮炎、慢性溃疡、大疱性表皮松解；角膜溃疡形成、视网膜病和手术伤口愈合；鼻炎、变应性结膜炎、湿疹、过敏症；再狭窄、充血性心力衰竭、子宫内膜异位症、动脉粥样硬化或内硬化(endosclerosis)。

另外，或者作为备选，本发明的化合物或组合物可用于治疗WO-A-98/07859中所列举的病症。为了方便参考，现提供该列表的一部分：细胞因子和细胞增殖/分化活性；免疫抑制剂或免疫刺激剂活性(例如用于治疗免疫缺陷，包括人免疫缺陷病毒感染；调节淋巴细胞生长；治疗癌症和多种自身免疫病，以及防止移植排斥或诱导肿瘤免疫性)；调节造血，例如治疗脊髓或淋巴疾病；促进骨、软骨、腱、韧带和神经组织的生长，例如用于治愈伤口、治疗烧伤、溃疡和牙周病以及神经变性；抑制或活化促卵泡激素(调节生育力)；趋化/化学趋向活性(例如为使特异性细胞类型移动到损伤或感染部位)；止血和血栓溶解活性(例如用于治疗血友病和中风)；抗炎活性(用于治疗例如脓毒性休克或克罗恩氏病)；用作抗微生物剂；例如新陈代谢或行为的调节剂；用作镇痛药；治疗特定营养缺乏病；在人医或兽医学中用于治疗例如银屑病。

另外，或者作为备选，本发明的组合物可用于治疗WO-A-98/09985中所列举的病症。为了方便参考，现提供该列表的一部分：巨噬细胞抑制和/或T细胞抑制活性和由此的抗炎活性；抗免疫活性，即对细胞和/或体液免疫应答(包括与炎症无关的应答)的抑制效应；抑制巨噬细胞和T细胞粘附于细胞外基质组分和纤维粘连蛋白的能力，以及增量调节fas受体在T细胞中的表达；抑制不想要的免疫反应和包括关节炎在内的炎症，包括类风湿性关节炎，与过敏症有关的炎症，过敏反应，哮喘，系统性红斑狼疮，胶原病和其它自身免疫病，与动脉粥样硬化有关的炎症，动脉硬化，动脉粥样硬化性心脏病，再灌注损伤，心跳停止，心肌梗塞，血管炎症性疾病，呼吸困难综合征或其它心肺疾病，与系消化性溃疡有关的炎症，溃疡性结肠炎和其它胃肠道疾病，肝纤维化，肝硬化或其它肝病，甲状腺炎或其它腺体疾病，肾小球肾炎或其它肾脏和泌尿科疾病，耳炎或其它耳鼻喉科疾病，皮炎或其它皮肤疾病，牙周病或其它牙科疾病，睾丸炎或副睾-睾丸炎，不育，睾丸外伤(orchidal trauma)或其它免疫相关性睾丸疾病，胎盘功能紊乱，胎盘功能不全，习惯性流产，子痫，先兆子痫和其它免疫和/或炎症性相关性妇科疾病，后葡萄膜炎，中间体眼色素层炎，前葡萄膜炎，结膜炎，脉络膜视网膜炎，葡萄膜视网膜炎(uveoretinitis)，视神经炎，眼内炎症(例如视网膜炎或黄斑囊样水肿)，交感性眼炎，巩膜炎，色素性视网膜炎，退行性眼底病(degenerative fondus disease)的免疫和炎症性部分，眼外伤的炎症性部分，由感染引起的眼炎，增殖性玻璃体视网膜病变，急性缺血性视神经病，过大的伤疤(例如在青光眼滤过手术后)，对眼植入物的免疫和/或炎症反应以及其它免疫和炎症相关性眼科疾病，与自身免疫病有关的炎症(其中在中枢神经系统(CNS)或任何其它器官中，免疫和/或炎症抑制是有益的)，帕金森氏病，由治疗帕金森氏病所产生的并发症和/或副作用，爱滋病相关的痴呆合并症，HIV-相关性脑病，视神经脊髓炎(devic’s disease)，薛登汉氏舞蹈病，阿尔茨海默氏病和其它退行性疾病，CNS疾病或病症，斯托克斯病的炎症性部分，脊髓灰质炎后综合症，精神障碍的免疫和炎症性部分，脊髓炎，脑炎，亚急性硬化性全脑炎，脑脊髓炎，急性神经病，亚急性神经病，慢性神经病，格林-巴利综合症，薛登汉氏舞蹈症(chora)，重症肌无力，假性脑瘤，唐氏综合症，亨廷顿病，肌萎缩性侧索硬化，CNS压迫或CNS外伤或CNS感染的炎症性部分，肌萎缩和营养不良的炎症性部分，以及中枢和周围神经系统的免疫和炎症相关性疾病，外伤后炎症，脓毒性休克，传染病，手术的炎症并发症或副作用，骨髓移植或其它移植并发症和/或副作用，基因治疗的炎症和/或免疫并发症和副作用，例如，由于感染病毒载体，或者与AIDS有关的炎症，用于压低或抑制体液和/或细胞免疫应答，用于通过减少单核细胞或淋巴细胞的量而治疗或改善单核细胞或白细胞增殖性疾病，例如白血病，在移植天然或人工细胞、组织和器官(如角膜、骨髓、器官、晶状体、起搏器)、天然或人造皮肤组织的情况下用于预防和/或治疗移植排斥。

氨基磺酸酯化合物的制备

可通过使适当的醇与适合的氯化物反应来制备本发明的氨基磺酸酯化合物。例如，可通过使适当的醇与式R⁴R⁵NSO₂Cl的合适氨磺酰氯反应来制备本发明的氨基磺酸酯化合物。

用于实施反应的典型条件如下所述。

在0℃下，将氢化钠和氨磺酰氯加入到搅拌的醇的无水二甲基甲酰胺溶液中。随后，将反应液加热到室温，此后继续搅拌另外24小时。将反应混合物倒入冷的碳酸氢钠饱和溶液中，所得水相用二氯甲烷萃取。合并的有机萃取物用无水MgSO₄干燥。过滤，随后真空蒸发溶剂，并与甲苯共蒸发，得到粗残留物，其进一步通过快速色谱纯化。

优选地，在与氨磺酰氯反应之前使所述醇适当衍生化。如果需要，可按已知方式保护醇中的官能团，并在反应结束时脱除该一个或多个保护基。

优选地，按照Page等的教导(1990 Tetrahedron 46；2059-2068)制备氨基磺酸酯化合物。

可通过适当结合Page等(1990 Tetrahedron 46；2059-2068)与PCT/GB92/01586的教导来制备膦酸酯化合物。

可通过适当修改Page等(1990 Tetrahedron 46；2059-2068)与PCT/GB92/01586的教导来制备磺酸酯化合物。

可通过适当修改Page等(1990 Tetrahedron 46；2059-2068)与PCT/GB91/00270的教导来制备硫代膦酸酯化合物。

优选的制备方法也在下文中描述。

总结

总之，本发明提供了用作类固醇硫酸酯酶抑制剂和/或类固醇脱氢酶抑制剂的化合物及其药物组合物。

实施例

下面仅通过举例的方式来说明本发明。

实施例

概述

乳腺癌是一种在欧洲和北美至关重要的疾病。在英国，乳腺癌致死的人数比任何其它类型癌症都要多。激素依赖型乳腺癌占绝经后女性病例的约三分之二；它对应于肿瘤的生长和发生依赖于雌激素的一类乳腺癌。

内分泌治疗，通过使用抑制雌激素生物合成中的一种或几种酶促途径的药物来控制雌激素循环水平，其针对HDBC。可以考虑不同的靶标，大多数的工作围绕抗雌激素药物和芳化酶抑制剂进行。类固醇硫酸酯酶和1型17β-HSD后来作为有效的靶标出现。

虽然已经开发了几种有效的STS抑制剂，但1型17β-HSD没有引起同样多的关注，仅报道了很少的活性分子。根据EMATE的D环衍生物是有效的1型17β-HSD抑制剂的这一事实，我们着手设计和合成具有减低的雌激素活性的EMATE的类似物。这样得到了一系列其中D环为哌啶二酮部分且N原子携带各种侧链的化合物。

在乳腺癌细胞上进行了抗STS的生物学试验，揭示了携带丙基或吡啶甲基侧链的衍生物具有极高的活性。它们的效力比EMATE高很多，IC₅₀为1nM。

实验

1—一般方法

所有化学品购自Aldrich Chemical Co.(Gillingham，Dorset，UK)或LancasterSynthesis(Morecambe，Lancashire，UK)。所有有机溶剂(分析纯级)由Fisons pic(Loughborough，U.K.)供应。无水N，N-二甲基甲酰胺(DMF)和N，N-二甲基乙酰胺(DMA)分别用于所有N-烷基化和氨磺酰化反应，购自Aldrich，使用之后在N₂正压下保存。氨磺酰氯通过采用Apel和Berger⁴⁸的方法来制备，并按Woo等人所述¹⁶，以甲苯溶液形式保存。紧邻使用之前，将适量的该溶液在真空中浓缩。

E1S和E1购自Sigma Chemical Co.(Poole，UK)。[6，7-³H]E1S(比活性，50Ci/mmol)和[4-¹⁴C]E1(比活性，52mCi/mmol)购自New England Nuclear(Boston，MA)。[6，7-³H]E1(比活性，97Ci/mmol)得自the Amersham InternationalRadiochemical Centre(Amersham，U.K.)。

在预涂板(Merck TLC铝片硅胶60F₂₅₄，Art.No.5554)上进行薄层色谱(TLC)。产物和起始原料(SM)通过在紫外光下观测来检测或用磷钼酸的甲醇溶液处理后加热来检测。在硅胶(Sorbsil C60)上进行快速柱色谱。以KBr片，使用Perkin-ElmerSpectrum RXI FT-IR测定红外光谱，峰位置按cm^-1表示。¹H NMR和DEPT-edited¹³C NMR光谱用JMN-GX400NMR光谱仪记录，化学位移按相对于内标四甲基硅烷(TMS)的百万分率(ppm，δ)记录。使用以下缩写来描述¹H NMR和¹³C NMR谱的共振：br，宽峰；s，单峰；d，双重峰；t，三重峰；q，四重峰；m，多重峰；及其组合，例如dd，两个双重峰。AB系统的化学位移(δ_A和δ_B)通过取每一个双重峰的中值和标记为J_AB或J_BA的相应耦合常数来约计。例如，根据在化合物21的附录2中所示的化学式计算δ_A和δ_B。在配备Waters 996 PDA检测器的WatersMillenium³²仪器上进行HPLC分析。在2mL/min的甲醇/水梯度洗脱下，经WatersRadialpackC18，8×100cm柱记录痕量物质(traces)。在Bath大学的the MassSpectrometry Service Center记录质谱。使用间硝基苄醇(NBA)作为基质来进行FAB-MS，由Bath大学的the Microanalysis Service完成元素分析。使用Reichert-JungThermo Galen Kofler block测定熔点，未经校正。

3-苄氧基-雌酮

在N₂气氛下，于0℃将氢化钠(60％矿物油分散体，0.68g，20.34mmol)加入到搅拌的雌酮(5.0g，18.49mmol)的无水DMF(50mL)溶液中，将所得悬浮液搅拌1小时。然后加入苄基溴(2.42mL，20.34mmol)，将该反应混合物在80℃下加热4小时。将所得溶液倒入冰/水中，将所分离的有机级分萃取到乙酸乙酯(150mL)中，用水(4×50mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，在真空中蒸发。所得浅黄色粗产物从异丙醇中重结晶，获得白色片状晶体3-苄氧基-雌酮(4.73g，71％)：mp129-131℃[文献²⁶(石油醚)132-134℃]。IR(KBr)v_max3100，2950-2840，1730，1600，1500cm^-1。¹H NMR(CDCl₃)δ0.91(3H，S，C-18-H₃)，1.41-2.54(13H，m)，2.86-2.93(2H，m，C-6-H₂)，5.04(2H，s，OCH₂Ar)，6.73(1H，d，J＝2.5Hz，C-4-H)，6.80(1H，dd，J＝8.6Hz and J＝2.5Hz，C-2-H)，7.20(1H，d，J＝8.6Hz，C-1-H)和7.30-7.44(5H，m，C₆H₅)。

3-苄氧基-马连酸

将碘(7.6g，29.94mmol)在95mL MeOH中的溶液和KOH(13.7g)在27mL水和61mLMeOH中的溶液交替地滴加到2-苄氧基雌酮(3.8g，10.54mmol)的MeOH(1L)搅拌溶液中，以使该混合物的颜色保持橙色/棕色。加样进行45分钟，将所得浅黄色溶液在氮气氛下于室温搅拌过夜。然后将该混合物浓缩，倒入水(800mL)中。在用5M HCl酸化后，将有机级分萃取到醚(600mL)中，用硫代硫酸钠水溶液(4×100mL)、水(4×100mL)洗涤，干燥(MgSO₄)，过滤，并真空蒸发。然后将所得黄色泡沫(4.54g)溶于KOH(7.6g)在MeOH/H₂O1:2(228mL)中的溶液中，加热至回流保持4小时。将最终的棕色混合物倒入水中(800mL)中，在用5M HCl酸化之后，将有机物萃取到乙酸乙酯(300mL)中。在用盐水(4×200mL)洗涤后，对有机层进行干燥(MgSO₄)，过滤，真空蒸发，获得黄色残留物(4.32g)。将它从氯仿/己烷5:3中重结晶，获得奶油色粉末状3-苄氧基-马连酸(3.25g，75％)：mp212-215℃[文献¹⁸(甲醇水溶液)226-227℃]IR(KBr)v_max3050-2650，1700，1600-1500cm^-1。¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.02(3H，s，C-18-H₃)，1.20-2.78(11H，m)，2.72-2.76(2H，m，C-6-H₂)，5.05(2H，s，OCH₂Ar)，6.68(1H，d，J＝2.5Hz，C-4-H)，6.75(1H，dd，J＝8.7Hz和J＝2.5Hz，C-2-H)，7.18(1H，d，J＝8.7Hz，C-1-H)，7.30-7.42(5H，m，C₆H₅)和12.14(2H，s，CO₂H)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ15.4(q)，25.8，26.5，29.7，35.8，36.1(全部t)，40.7，41.8，42.5(全部d)，46.2(s)，68.9(t)，112.3，114.0，126.3，127.3(2x)，127.5，128.2(2x)(全部d)，131.6，137.2(2x)，156.0，173.9和178.6(全部s)。MSm/z(FAB+)408.2[41，M+]，91.1[100，(CH₂Ar)⁺]。HRMS m/z(FAB+)C₂₅H₂₈O₅的计算值：408.1937；实测值408.1940。

3-苄氧基-16，17-裂环(seco)-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺

在氮气氛下，于180℃将3-苄基-马连酸(3.25g，7.96mmol)和尿素(3.25g，54.11mmol)加热45分钟。将所得棕色残留物破碎，加入丙酮(200mL)，获得棕色悬浮液。将该混合物浓缩至大约100mL，加入硅胶，去除溶剂。将所得粉末转移到快速色谱柱上。用氯仿/丙酮(96:4)洗脱，获得白色固体状3-苄氧基-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(2.75g，89％)。为了分析，将样品从EtOH中重结晶，获得无色针状物：mp225-226℃。IR(KBr)v_max3260，2900-2870，1720，1700，1600-1500cm^-1。¹H NMR(DMSO-d₆)δ1.09(3H，s，C-18-H₃)，1.20-2.72(11H，m)，2.76-2.80(2H，m，C-6-H₂)，5.05(2H，s，OCH₂Ar)，6.72(1H，d，J＝2.5Hz，C-4-H)，6.76(1H，dd，J＝8.7Hz和J＝2.5Hz，C-2-H)，7.19(1H，d，J＝8.7Hz，C-1-H)，7.31-7.44(5H，m，C6H5)和10.63(1H1s，NH)；¹³C NMR(DMSO-d₆)δ16.2(q)，25.1，25.2，29.2，32.4，32.7(全部t)，37.8，40.3(全部d)，40.5(s)，41.9(d)，68.9(t)，112.2，114.1，126.0，127.3(2x)，127.4，128.2(2x)(全部d)，131.5，137.0，137.1，156.0，172.1和178.9(全部s)。MSm/z(FAB+)390.2[58，(M+H)⁺]，91.1[100，(CH₂Ar)⁺]。HRMSm/z(FAB+)C₂₅H₂₈NO₃的计算值：390.2069。实测值：390.2059。C₂₅H₂₇NO₃的分析计算值：C，77.09；H，6.99；N，3.60。实测值：C，76.90；H，6.99；N，3.73。

3-苄氧基-N-(3，3，3-三氟丙基)-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(CMS01179)C₂₈H₃₀F₃NO₃MW485.54

向3-苄氧基-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(2.0g，5.14mmol)的无水乙腈(250mL)溶液中加入碳酸钾(0.780g，5.66mmol，1.1eq)、碘化钾(0.1g)、3-溴-1，1，1-三氟丙烷(1.61g，10.3mmol，2eq)和18-冠醚(crown)-6(2.98g，11.31mmol，2.2eq)，将该反应液在82℃下加热24小时。在冷却和蒸发乙腈后，将所得的橙色泡沫再溶解于乙酸乙酯(220mL)中，用盐水(2×200mL)洗涤，经硫酸镁干燥，蒸发。急骤层析法(200g二氧化硅，使用5cmφ柱子，用20％乙酸乙酯/己烷冲洗)洗脱得到标题化合物(1.36g，54％)，为白色结晶固体；

mp180-182℃；

R_f：0.52(20％乙酸乙酯/己烷)；

¹H NMR(270MHz，CDCl₃)δ1.38(3H，s，18-CH₃)，1.10-2.00(6H，m)，2.20-2.50(6H，m)，2.80-2.90(2H，m)，2.97(1H，dd，J＝4.7和8.3Hz)3.90-4.20(2H，m，CH2-CF₃)，5.02(2H，s，O-CH₂)6.71(1H，d，J＝2.7Hz，4-CH)，6.79(1H，dd，J＝2.7和8.5Hz，2-CH)和7.20(1H，d，J＝8.5Hz，1-CH)和7.30-7.50(5H，m，5x ArH)；

¹³C NMR(67.9MHz，CDCl₃)δ16.8(CH₃)，25.5，25.8和29.7(全部CH₂)，31.9(q，J＝29.3Hz，CH₂CF₃)，33.3，33.5和33.7(全部CH₂)，38.6和40.3(都是CH)，41.6(CH₂)，42.5(CH)，70.0(O-CH₂)，112.8，114.7和126.4(全部CH)，127.5(2xCH)，128.0(CH)和128.7(2xCH)，131.6，137.1，137.5，157.1，171.6和178.2(全部C)；

¹⁹F NMR(376MHz，CDCl₃)δ-65.30(3F，t，J＝10.53Hz CF₃)；

HPLC(CH₃CN的70％H₂O溶液)t_r＝XXX(100％)；

LCMS(AP^-)，m/z394.26(M^-，100％)。

C₂₈H₃₀F₃NO₃的分析计算值：C69.26，H6.23，N2.28。实测值：C，H，N％。3-羟基-N-(3，3，3-三氟丙基)-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(CMS01181，STX1937)

C₂₁H₂₄F₃NO₃MW395.42

在氢气氛下，将3-苄氧基-N-(3，3，3-三氟丙基)-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(1.10g，2.27mmol)与10％Pd/C(0.10g)在甲醇(40mL)和四氢呋喃(40mL)中的溶液搅拌3小时。在通过硅藻土垫过滤去除催化剂之后，蒸发溶剂，获得白色固体。重结晶(二乙醚/己烷)，获得标题化合物(0.870g，97％)，为白色结晶固体；

mp194-196℃；

R_f：0.41(20％乙酸乙酯/己烷)；

¹H NMR(270MHz，CDCl₃)δ1.16(3H，s，18-CH₃)；1.20-1.60(3H，m)，1.65-2.00(3H，m)，2.20-2.50(6H，m)，2.80-2.90(2H，m)，2.96(1H，dd，J＝4.7和8.3Hz)，3.90-4.20(2H，m，CH₂-CF₃)，6.57(1H，d，J＝2.5Hz，4-CH)，6.64(1H，dd，J＝2.5和8.4Hz，2-CH)and7.15(1H，d，J＝8.4Hz，1-CH)；

¹³C NMR(67.9MHz，CDCl₃)δ16.3(CH₃)，25.5，25.7和29.5(全部CH2)，31.9(q，J＝28.7Hz，CH₂CF₃)，33.2(q，J＝3.1Hz，CH₂CH₂CF₃)，33.5和33.7(都是CH₂)，38.6和40.2(都是CH)，41.6(C)，42.4(CH)，113.1和115.0(都是CH)，预计126.0(q，J＝276.8Hz，CF₃)，但不存在，126.5(CH)，131.4，137.4，153.6，171.6和178.4(全部C)；

¹⁹F NMR(376MHz，CDCl₃)δ-65.341(3F，t，J＝10.52Hz，CF₃)；

HPLC(70％CH₃CN水溶液)t_r＝2.58min(95.15％)；

LCMS(AP^-)，m/z394.26(M^-，100％)。

C₂₁H₂₄F₃NO₃的分析计算值：C63.79，H6.12，N3.52。实测值：C，H，N％。

HRMS(ES+)实测值396.1765；C₂₁H₂₅F₃NO₃(M+H)⁺理论值396.1781。

3-氨磺酰(sulfomoyl)氧基-N-(3，3，3-三氟丙基)-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(CMS01188，STX1938)

C₂₁H₂₅F₃N₂O₅S MW474.49

室温下，将0.6M氨磺酰氯的甲苯(5.80mL，3.50mmol，2.5eq.)溶液减压蒸发。将所得白色固体溶于无水N，N-二甲基乙酰胺(2.5mL)中，在氮气下冷却至0℃。向该搅拌溶液中滴加3-羟基-N-(3，3，3-三氟丙基)-16，17-裂环-雌-1，3，5(10)-三烯-16，17-酰亚胺(0.55g，1.39mmol)的N，N-二甲基乙酰胺(2.5mL)溶液，然后除去外部冷却，使反应液温热到室温过夜。所得浅棕色悬浮液用乙酸乙酯(50mL)稀释，用饱和氯化铵水溶液(3×50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后经无水硫酸镁干燥，过滤，减压蒸发。将所得胶溶于最小量的二氯甲烷(5mL)中，加入二乙醚(25mL)，然后按小份加入己烷(100mL)，以引发沉淀。重结晶(二氯甲烷/己烷)，获得标题化合物(0.584g，88％)，为白色结晶固体；

mp192-194℃；

R_f：0.18(20％乙酸乙酯/己烷)；

¹H NMR(270MHz，CDCl₃)δ1.16(3H，s，18-CH₃)，1.20-2.00(6H，m)，2.20-2.50(6H，m)，2.85-2.95(2H，m)，2.96(1H，dd，J＝4.7和8.3Hz)3.92-4.15(2H，m，CH₂-CF₃)，4.97(2H，s，NH₂)，7.05(1H，d，J＝2.5Hz，4-CH)，6.64(1H，dd，J＝2.5和8.5Hz，2-CH)和7.15(1H，d，J＝8.5Hz，1-CH)；

¹³C NMR(67.9MHz，CDCl₃)δ16.3(CH₃)，25.3，25.4and29.3(全部CH₂)，31.9(q，J＝29.1Hz，CH₂CF₃)，33.2(q，J＝3.8Hz，CH₂CH₂CF₃)，33.4和33.5(都是CH₂)，38.0和40.2(都是CH)，41.4(C)，42.6(CH)，119.3和121.8(都是CH)，126.0(q，J＝276.8Hz，CF₃)，126.8(CH)，138.2，138.25，148.1，171.3和178.1(全部C)；

¹⁹F NMR(376MHz，CDCl₃)δ-65.317(3F，t，J＝10.52Hz，CF₃)；

HPLC(90％CH₃CN水溶液)t_r＝1.070s(1.45％)t_r＝1.921s(98.55％)；

LCMS(ES^-)，m/z473.16(M-H^-，100％)。

HRMS(ES+)实测值497.1325；C₂₁H₂₅F₃N₂NaO₅S(M+Na)⁺理论值497.1334。HRMS(FAB⁺)XXX(M)⁺的计算值，实测值；

C₂₁H₂₅F₃N₂O₅S的分析计算值：C53.16，H5.13，N5.90。实测值：C，H，N％。本发明化合物与已知的类固醇硫酸酯酶抑制剂的IC₅₀值比较

在JEG-3细胞中测定STX1938的IC₅₀值。STX1938的IC₅₀值是35pM，而与之相比，在相同分析中所测定的STX213的IC₅₀值是180pM。

示出STX1938和STX213的结构用于比较：

图2示出了单剂量口服STX1938后15天大鼠肝脏的STS活性的抑制率。作为比较，STX213STS活性已经恢复69％，即，仅保持31％抑制率。

STX1938的体内效力

试验程序

MCF-7_STS细胞(超表达STS的细胞)

在含有10％FCS的RPMI中常规培养MCF-7细胞。将STS的cDNAs克隆到含有抗新霉素基因的pCI-NeO载体中，并转染到MCF-7细胞中。使用G418选择稳定的克隆，建立细胞系，评价酶的表达和活性。

小鼠

从Harlan Olac获得切除卵巢的无胸腺雌性MF-1裸鼠(nulnu)(6～8周龄)。在孵育MCF-7_STS细胞之前24小时，给动物皮下注射雌二醇硫酸酯(E2S)。在孵育当天，将5×10⁶MCF-7_STS细胞(50μl，含于Matrigel中)皮下注射到小鼠的右胁腹。在细胞孵育之后，给小鼠注射E2S(100μg/50μl)，24小时后，另一次注射这些类固醇。然后小鼠每周接受3次E2S，直到研究结束为止。当肿瘤已达到大约80mm³时，通过口服给与1mg/kg的化合物(100μl；载体10％THF:90％丙二醇)来起动给药。每周记录肿瘤测量值和动物的体重。在停止剂量给药后的多个时间点采集肿瘤和肝脏组织的样本以及血液样本。

研究1

在研究期内，小鼠每周5/7天口服给与0.1mg/kg、1mg/kg和10mg/kg的STX1938。

研究2

为了比较STX1938与STX64的效力，经口服每周给与小鼠一次1mg/kg的任一(either)化合物，共计7周。

肿瘤

每周测量肿瘤，使用公式长度×宽度²/2来计算它们的体积。

STS活性测定

将肿瘤或肝脏组织的样本在磷酸盐缓冲盐水(pH7.4，含有250mM蔗糖)中匀浆。一式两份的等分试样用由未标记底物(Sigma，Dorset Poole，UK)调至20μM最终浓度的[³H-E1S](53Ci/mmol，2-3nM，Perkin Elmer，Boston MA)孵育4小时。将[4-¹⁴C]雌酮纳入反应混合物中，以监控程序损耗(procedural losses)。在孵育期结束时，通过甲苯分配将产物雌酮从反应混合物中分离出来。除去等份的甲苯，通过液体闪烁光谱法测定³H和¹⁴C的放射性。由检测到的³H计数计算水解的雌酮硫酸酯的质量，按程序损耗进行校正。

血浆雌二醇浓度

通过特异性放射免疫测定程序测定血浆雌二醇浓度。

数据分析

使用学生t检验评价不同组的肿瘤体积差异的显著性。

结果

研究1

给与1mg/kg和10mg/kg的STX1938显著降低了裸鼠中E2S刺激的肿瘤的生长(图3)。1mg/kg和10mg/kg剂量下的肿瘤STS活性几乎完全被抑制(图4)。

研究2

虽然每周一次给药STX1938显著降低了肿瘤的生长，但在该给药时间表下，STX64是无效的(图5)。每周一次给药STX1938导致几乎完全抑制了肿瘤(图7)和肝脏(图6)STS。在给药结束后，该酶的活性继续被抑制达一段延长时间。相反，在该给药时间表下，STX64仅仅将肝脏和肿瘤的STS活性降低25～50％。在停止给药STX1938之后，血浆雌二醇水平显著降低达一段延长时间(图8)。

总结

STX1938是有效的STS抑制剂，在1mg/kg和10mg/kg的剂量下，显著抑制了源自超表达STS的MCF-7乳腺癌细胞的、E2S刺激的异种移植物的生长。肿瘤STS活性几乎完全被STX1938所抑制。

当按每周一次的给药时间表给与STX1938时，其能够阻断源自超表达STS的MCF-7乳腺癌细胞的、E2S刺激的异种移植肿瘤的生长。肿瘤和肝脏STS活性也完全被抑制。当每周一次给药时，STX1938比STX64效力更大，其原因被认为是，STX1938在体内的作用持续时间长于STX64。这表明，STX1938适合开发为每周给药一次的治疗剂。

以上说明书中提到的所有出版物、专利和专利申请通过引用并入本文。

不脱离本发明的精神和范围的各种修改和变型对于本领域技术人员来说是显而易见的。虽然结合具体的优选实施方案描述了本发明，但应理解，要求保护的本发明不应过度局限于这些具体实施方案。事实上，为实施发明而对上述方案所进行的对于化学、生物或相关领域的技术人员来说显而易见的各种修改均落入随附权利要求的范围内。

缩写

埃

Ac 乙酰基

Acc MS 精确质谱

Adiol 雄烯二醇

Adione 雄烯二酮

AG 氨鲁米特(aminogluthethimide)

aq 含水的

Ar 芳基

arom 芳族的

BMA 3-苄基-马连酸

Bn 苄基

br 宽峰

℃ 摄氏度

¹³C NMR 碳核磁共振

ca 大约

cm 厘米

COUMATE 4-甲基香豆素-7-O-氨基磺酸酯

δ 化学位移，ppm

d 双重峰

dd 两个双重峰

DHEA 脱氢表雄酮

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

E1 雌酮

E2 雌二醇

EMATE 雌酮-3-O-氨基磺酸酯

ER 雌激素受体

eq 当量

FAB 快速原子轰击

g 克

h 小时

hER 人雌激素受体

1H NMR 质子核磁共振

HPLC 高压液相色谱

17β-HSD 17β-羟基类固醇脱氢酶

Hz 赫兹

IC₅₀ 50％抑制浓度

IR 红外

J 耦合常数，Hz

λmax 最大吸收波长

Lit. 参考文献

μ 微

m 多重峰

M 摩尔/升

m-NBA 间硝基苄醇

m-RNA 信使核糖核酸

MHz 兆赫兹

min 分钟

mmol 毫摩尔

mol 摩尔

mp 熔点

MS 质谱

m/z 质荷比

NADPH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸

nM 纳摩尔

NMR 核磁共振

ppm 百万分率

Rf 保留因子

r.t. 室温

S.D. 标准偏差

Pd-C 钯-活性炭

TBAF 四丁基氟化铵

TBDMS 叔丁基二甲基甲硅烷基

THF 四氢呋喃

TLC 薄层色谱法

TMS 四甲基硅烷

v 信号的频率，Hz

vs 对

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Claims

1.式XIII的化合物或其药学上可接受的盐：

其中G具有式-(CH₂)_n(CF₂)_mCF₃结构，其中n是1～9的整数，m是0或1～9的整数；R¹具有下式结构：

其中R⁴和R⁵独立地选自H、C₁-C₆烷基。

2.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中n+m是1～10。

3.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中基团G是3，3，3-三氟丙基(-CH₂CH₂CF₃)。

4.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，所述化合物具有下式结构：

5.根据权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴和R⁵中至少一个是H。

6.根据权利要求5所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中R⁴和R⁵为H。

7.具有下式的结构的化合物或其药学上可接受的盐：

8.一种药物组合物，其包含任选与药学上可接受的赋型剂或佐剂混合的根据权利要求1～7中任一项所述的化合物。

9.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与类固醇硫酸酯酶(STS)相关的病症或疾病。

10.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗与有害的STS水平相关的病症或疾病。

11.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于抑制类固醇硫酸酯酶(STS)的活性。

12.根据权利要求10所述的用途，其中所述药物用于治疗与有害的STS水平相关的癌症。

13.根据权利要求12所述的用途，其中所述癌症选自内分泌依赖型癌症。

14.根据权利要求13所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌。

15.根据权利要求1～7中任一项所述的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于对需要其的哺乳动物治疗与类固醇硫酸酯酶相关的病症或疾病，所述治疗包括按照给药间隔大于每天一次的计划表，对所述哺乳动物给与药学有效量的权利要求1～7中任一项所述的化合物。

16.根据权利要求15所述的用途，其中以单位剂量给与所述化合物。

17.根据权利要求15所述的用途，其中所述给药间隔选自每周一次给药，每周两次给药，两周一次给药、每月两次给药和每月一次给药。

18.根据权利要求15所述的用途，其中所述给药间隔是每周一次给药。