CN101385872A - 一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,包括:(1)配制10%~20%(g/ml)聚合物纺丝溶液;(2)利用静电纺丝技术将配制好的溶液在参数控制下,制备纳米纤维丝;(3)采用滚筒接收装置收集,作为管状支架。本发明制备方法简单,耗时短,制备的人工血管移植人体内后生长活性好,平滑肌细胞可以顺着纤维生长且能钻入。
Description
技术领域
本发明属人工血管支架的制备领域,特别是涉及一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法。
背景技术
组织、器官的缺损及功能异常是常见的疾病,通常解决方法是器官移植,但存在供体短缺,易引发免疫疾病等问题。20世纪90年代Robert Langer和Joseph P Vacanti提出组织工程(Tissue engineering)概念后,为众多的组织缺损、器官功能衰竭病人的治疗带来了曙光。新兴的组织工程可以利用生物学、工程学原理制备出替代受损伤的组织、器官或恢复其部分功能的代用品,以达到治疗的目的。方法是将体外分离和培养的细胞种植到具有一定三维空间结构的支架上,在体外生物反应器中或者植入体内继续培养,通过细胞与支架间的相互作用,细胞不断的增殖、分化和分泌细胞外基质,从而形成具有一定结构和功能的组织或器官。
仿细胞外基质的方法已经被广泛的应用于组织工程,伤口愈合,药物缓释系统,基因治疗等方向。仿细胞外基质的关键因素是有构建三维多孔支架,并赋予支架合适的降解速率和必要的力学强度。制备纳米纤维支架的方法有静电纺丝,自组装及相分离,其中静电纺是最简单和高效的技术。目前,采用电纺技术已经能够成功制备各种合成和天然材料的纳米纤维,如PCL,明胶,P(LLA-CL)等,但是这些材料在临床应用上存在着生物相容性不好,降解时间不理想等问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,本发明的人工血管移植人体内后生长活性好,平滑肌细胞可以顺着纤维生长且能钻入,而且该血管能随宿主情况进行适应性调整,不易导致栓塞。
本发明的一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,包括:
(1)溶液的制备:将需纺丝的聚酯-酰胺PEA溶于二甲基甲酰胺与氯仿的混合溶剂中,经过充分搅拌至完全溶解,得浓度为10%—20%(g/ml)的聚酯-酰胺PEA溶液;
(2)静电纺丝制备支架:将上述溶液在电压为15-23kv,电场距离为70-300mm,纺丝速率为0.5-1.5ml/h的条件下,制备纳米纤维丝,采用滚筒接收装置收集,作为管状支架的内层;
(3)采用生物种植技术,在支架内层种植人内皮细胞,在支架外层种植人平滑肌细胞,经细胞培养后,血管支架制备完毕。
所述步骤(1)中的聚合物为生物可降解聚合物;
所述的生物可降解聚合物为聚L-乳酸/聚ε-已内酯共聚物[P(LLA-CL)]、聚ε-已内酯PCL、聚酯酰胺、壳聚糖、胶原蛋白中的一种或几种;
所述步骤(1)中的二甲基甲酰胺与氯仿的体积比为1:2;
所述步骤(1)中的用于静电纺丝的材料为聚酯-酰胺PEA
所述步骤(2)中的纳米纤维丝粒径范围是50nm-3um;
本发明采用的聚酯-酰胺PEA(Polyester-amide)是一种可降解生物材料,其造价便宜,PEA分子中既含有酯基,又含有具有良好生物相容性的天然氨基酸(苯丙氨酸),PEA在合成时还加入了含有具有生物活性的氧化亚氨自由基,因此在生物相容性和降解性上有优异的表现,并且在相同酶促降解条件下,PEA对酶的反应要比PDLLA灵敏得多,同时PEA还表现出良好的熔融纺丝性能。
有益效果
(1)本发明将聚酯-酰胺PEA用静电纺丝的方法制备出纳米纤维,并做成人造血管支架;
(2)本发明的人工血管移植人体内后生长活性好,平滑肌细胞可以顺着纤维生长且能钻入,而且该血管能随宿主情况进行适应性调整,不易导致栓塞。
具体实施方式
下面结合具体实施例,进一步阐述本发明。应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解,在阅读了本发明讲授的内容之后,本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。
实施例1
(1)用电子天平称取1g PEA,溶解于5ml的氯仿/二甲基二酰胺体积比为2/1的混合溶剂中,搅拌振荡至溶解完全,分别得到浓度为20%(g/ml)的PEA溶液;
(2)静电纺丝所配制的溶液,电压为20kv,注射泵推进速度为1.2ml/h,接收距离为15cm,选用7号针头,铝箔接地,采用滚筒接收装置连接3mm的钢管进行收集,得到平均直径为150nm左右的静电纺PEA纳米纤维,作为管状支架;
(3)采用生物种植技术,在支架内层种植内皮细胞,在支架外层种植平滑肌细胞,经过10天的细胞培养,血管支架制备完毕。
实施例2
(1)用电子天平称取1g PEA,溶解于8ml的氯仿/二甲基二酰胺体积比为2/1的混合溶剂中,搅拌振荡至溶解完全,得到浓度为12.5%(g/ml)的PEA溶液;
(2)静电纺丝所配制的溶液,电压为22kv,注射泵推进速度为1.5ml/h,接收距离为15cm,选用7号针头,铝箔接地,采用滚筒接收装置连接3mm的钢管进行收集,得到平均直径为150nm左右的静电纺PEA纳米纤维,作为管状支架;
(3)采用生物种植技术,在支架内层种植内皮细胞,在支架外层种植平滑肌细胞,经过10天的细胞培养,血管支架制备完毕。
实施例3
(1)用电子天平称取1g PEA,溶解于10ml的氯仿/二甲基二酰胺体积比为2/1的混合溶剂中,搅拌振荡至溶解完全,得到浓度为10%(g/ml)的PEA溶液;
(2)静电纺丝所配制的溶液,电压为15kv,注射泵推进速度为0.8ml/h,接收距离为15cm,选用7号针头,铝箔接地,采用滚筒接收装置连接3mm的钢管进行收集,得到平均直径为150nm左右的静电纺PEA纳米纤维,作为管状支架;
(3)采用生物种植技术,在支架内层种植内皮细胞,在支架外层种植平滑肌细胞,经过10天的细胞培养,血管支架制备完毕。
Claims (6)
1.一种采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,包括:
(1)溶液的制备:将需纺丝的聚酯-酰胺PEA溶于二甲基甲酰胺与氯仿的混合溶剂中,经过充分搅拌至完全溶解,得浓度为10%~20%的聚酯-酰胺PEA溶液;
(2)静电纺丝制备支架:将上述溶液在电压为15-23kv,电场距离为70-300mm,纺丝速率为0.5-1.5ml/h的条件下,制备纳米纤维丝,采用滚筒接收装置收集,作为管状支架的内层;
(3)采用生物种植技术,在支架内层种植人内皮细胞,在支架外层种植人平滑肌细胞,经细胞培养后,血管支架制备完毕。
2.根据权利要求1所述的采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的聚合物为生物可降解聚合物。
3.根据权利要求2所述的采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,其特征在于:所述的生物可降解聚合物为聚L-乳酸/聚ε-已内酯共聚物[P(LLA-CL)]、聚ε-已内酯PCL、聚酯-酰胺PEA、壳聚糖、胶原蛋白中的一种或几种。
4.根据权利要求1所述的采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的二甲基甲酰胺与氯仿的体积比为1:2。
5.根据权利要求1所述的采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,其特征在于:所述步骤(1)中的用于静电纺丝的材料为聚酯-酰胺PEA。
6.根据权利要求1所述的采用静电纺制备可吸收生物材料人工血管支架的方法,其特征在于:所述步骤(2)中的纳米纤维丝粒径范围是50nm-3um。
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