CN101363818A - 一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法 - Google Patents
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Abstract
一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法涉及一种对违禁药物的检测方法，特别是采用薄层色谱法对饲料和兽药中违禁药品成分的检测方法。本发明所述的检测方法适用于直接对饲料或者兽药产品中的违禁药物成分-利巴韦林、氯霉素、地西泮、盐酸氯丙嗪、苯甲酸雌二醇、地美硝唑、沙丁胺醇、甲硝唑、呋喃唑酮进行的检测。本发明具有快速、可靠等特点，准确率可达95％以上。从而使人们可以随机对兽药或者饲料产品中残留的有害物质进行检测，实现从生产环节对兽药或者饲料进行质量监督和控制，提高畜禽产品的生产质量，保证了人们对畜禽产品的食用安全。
Description
技术领域
本发明涉及一种对违禁药物的检测方法，特别是采用薄层色谱法对饲料和兽药中违禁药品成分的检测方法
背景技术
随着畜牧业的快速发展，动物集约化养殖生产程度大幅提高，饲料和兽药应用技术广泛普及。然而近些年来，因用药不当引起的动物性产品中兽药残留问题也越来越明显，成为制约畜牧业持续健康发展的重要因素，也使人们的身心健康受到威胁。
为保证动物性产品的质量安全，维护人们的身体健康，2008年4月中国农业部发布了农业部第193号公告《食品动物禁用的兽药及其它化合物清单》，禁止氯霉素等29种兽药用于食品用动物，限制8种兽药作为动物促生长剂使用。但是滥用抗生素和使用违禁药、病毒药的问题仍然存在，也严重制约和影响养殖业的发展。因此如何保证食品安全，完善检测手段成为迫切解决的问题。
目前由于人们对饲料或兽药中是否含有残留有害物质的检测主要是通过使用薄层色谱法对死亡畜禽的肉、肝等组织进行检测，而且所涉及的仪器价格昂贵，致使饲料或者兽药制造工厂不能设置或者不可能具有上述检测环节或者检测手段，无法从畜禽饲养源头的兽药或者饲料产品的生产环节对其进行质量监督和控制，不仅增大了畜禽饲养工厂的生产风险和成本，也给人们的生命健康带了严重的威胁。
发明的技术内容
本发明的目的是，通过提供一种饲料或者兽药中违禁成分的快速检测方法，使人们可以在饲料或者兽药的生产环节实现对产品中残留的有害物质进行随机检测，进而有效的解决了上述背景技术中存在的问题。
本发明所述的检测方法是将薄层色谱法适用于直接对饲料或者兽药产品中的违禁药物成分进行的检测。特别是将薄层色谱法适用于直接对饲料或者兽药产品中的违禁药物成分—利巴韦林、氯霉素、地西泮、盐酸氯丙嗪、苯甲酸雌二醇、地美硝唑、沙丁胺醇、甲硝唑、呋喃唑酮分别进行的检测。
本发明所述的检测方法使用薄层色谱法：
a.在市售的标准薄板或铝箔板表面均匀的涂敷一层常规的吸附剂或支持剂，待室温晾干后，在110℃条件下使用常规的方法活化30分钟，制成活化的标准色谱板待用。
所述的标准薄板或或者铝箔板可以是市售的硅胶G薄层板(以下称“G”板)、硅胶GF254薄层板(以下称“GF254”板)、聚酰胺薄膜板中的一种。
所述的吸附剂或者支持剂可以是浓度为0.2％～0.5％的羧甲基纤维素钠水溶液。所述羧甲基纤维素钠水溶液的配制方法是：将0.2％～0.5％的羧甲基纤维素钠溶解于水中，呈均匀溶液。
b.在上述标准色谱板上按检测浓度点相应的对照品。
c.将饲料或者兽药样品以常规方法，用特定的溶媒溶解，制成样品溶解液待用。
所述样品溶解液的制作方法是：以常规的方法将饲料或兽药用相应的溶媒溶解后，取上清液即为样品溶解液。
所述的溶媒根据检测残留物质的不同，可以分别为市售的甲醇、乙醇、氯仿、丙酮试剂中的一种。所述的试剂可以为分析纯。
d.将样品溶解液在上述a方法制作的标准色谱板上滴加点样，凉干或吹干后，置标准色谱板于盛有展开剂的市售的标准展开槽内。
将样品溶解液于距标准色谱板底边约2cm处用管口平整的毛细管滴加5～20μl点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离为1.0～2.0cm之间即可。将标准色谱板置于盛有展开剂的标准展开槽内的浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。
所述的展开剂可以根据需检测的利巴韦林、氯霉素、地西泮、盐酸氯丙嗪、苯甲酸雌二醇、地美硝唑、沙丁胺醇、甲硝唑、呋喃唑酮中的一种，可以分别依次为以下之一种：按照三氯甲烷:冰醋酸＝13:7配制的展开剂、按照氯仿:甲醇＝85:15配置的展开剂、按照环己烷:醋酸乙酯:三氯甲烷＝6:3:1配制的展开剂、按照环已烷：丙酮：乙二胺＝8:1:1配置的展开剂、按照环已烷:丙酮:乙二胺＝8:1:1配制的展开剂、按照甲醇:水＝8:2配制的展开剂、按照氯仿:异丙醇＝9:1配制的展开剂、按照醋酸乙酯:异丙醇:水:浓氨溶液＝50:30:16:4配制的展开剂、按照氯仿:异丙醇＝8:1配制的展开剂、按照乙酸乙酯:丙酮:水:浓氨＝90:6:2:1配制的展开剂。
上述的各项成分均为分析纯试剂，试剂的比例为体积比。
所述展开剂的配制方法是：按展开剂的比例量取相应的量，置安瓿中混匀后密封。
e.待展开剂前沿离色谱板顶端附近时，将色谱板取出后干燥，在紫外灯下显色。
展开剂前沿离标准色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后在紫外灯下显色。
f.被检测点显示的颜色和位置与对照品点进行比对，颜色和位置相同时，则样品溶解液中含有违禁药物成分。
所述的对照品可以在国家检测机构购买。
本发明所称的展开剂可以根据检测残留物质的不同，分别由以下附表中的不同试剂组分和比例配制：
附表是以下九种有害残留物质的检测条件：
| 违禁药品名 | 色谱板 | 溶媒 | 展开剂 | 浓度×进样量 |
| 利巴韦林 | GF254 | 甲醇 | 三氯甲烷:冰醋酸＝13:7 | 0.1μg/μl×20μl |
| 氯霉素 | GF254 | 乙醇 | 氯仿:甲醇＝85:15 | 10μg/μl×20μl |
| 地西泮 | GF254 | 氯仿 | 环己烷:醋酸乙酯:三氯甲烷＝6:3:1 | 0.04μg/μl×5μl |
| 盐酸氯丙嗪 | GF254 | 甲醇 | 环已烷:丙酮:乙二胺＝(8:1:1) | 0.1μg/μl×10μl |
| 苯甲酸雌二醇 | GF254 | 乙醇 | 甲醇:水＝8:2 | 1μg/μl×10μl |
| 地美硝唑 | GF254 | 氯仿 | 氯仿:异丙醇＝9:1 | 0.01μg/μl×10μl |
| 沙丁胺醇 | G | 甲醇 | 醋酸乙酯:异丙醇:水:浓氨溶液＝50:30:16:4 | 0.1μg/μl×10μl |
| 甲硝唑 | GF254 | 丙酮 | 氯仿:异丙醇＝8:1 | 10μg/μl×10μl |
| 呋喃唑酮 | GF254 | 氯仿 | 乙酸乙酯:丙酮:水:浓氨＝90:6:2:1 | 5μg/μl×2μl |
本发明方法上述各项化学成分均为分析纯试剂；试剂比例为体积比；浓度×进样量为最小检出量。
本发明使用的色谱板、展开槽的形式及规格均为市售产品。
本发明采用薄层色谱法检测，具有快速、可靠等特点，准确率可达95％以上，完全可用于饲料和兽药产品中的违禁药物—利巴韦林、磺胺二甲嘧啶钠、苯甲酸雌二醇、己烯雌酚、甲硝唑、地美硝唑、氯霉素、盐酸氯丙嗪、地西泮、呋喃唑酮的快速检测。从而使人们可以对产品中残留的有害物质进行随机检测，实现从生产环节对兽药或者饲料的进行随机的质量监督和控制，提高畜禽产品的生产质量，保证了人们对畜禽产品的食用安全。
实施方式
下面结合本发明的实施例对本发明的检测方法做出具体描述。
实施例1
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物利巴韦林时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.5％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以甲醇为溶媒制作的浓度为0.1μg/μl的样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加20μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照三氯甲烷:冰醋酸＝13:7配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物利巴韦林。
实施例2
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物氯霉素时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.2％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以乙醇为溶媒制作的浓度为10μg/μl的样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加20μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照氯仿:甲醇＝85:15配制的展开剂的10cm×10cm的展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物氯霉素。
实施例3
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物地西泮时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.28％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以氯仿为溶媒制作的浓度为0.04μg/μl的样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加5μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照环己烷:醋酸乙酯:三氯甲烷＝6:3:1配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有地西泮。
实施例4
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物盐酸氯丙嗪时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.5％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以甲醇为溶媒制作的浓度为0.1μg/μl的样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加10μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照环已烷:丙酮:乙二胺＝8:1:1配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物盐酸氯丙嗪。
实施例5
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物苯甲酸雌二醇时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.3％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以乙醇为溶媒制作的浓度为1μg/μl样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加10μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照甲醇:水＝8:2配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物苯甲酸雌二醇。
实施例6
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物地美硝唑时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.35％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以氯仿为溶媒制作的浓度为0.01μg/μl样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加10μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照氯仿:异丙醇＝9:1配制的展开剂的10cm×10cm的展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物地美硝唑。
实施例7
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物沙丁胺醇时，首先在标准G板表面均匀的涂敷一层0.2％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以甲醇为溶媒制作的浓度为0.1μg/μl的样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加10μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照醋酸乙酯:异丙醇:水:浓氨溶液＝50:30:16:4配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物沙丁胺醇。
实施例8
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物甲硝唑时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.3％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以丙酮为溶媒制作的浓度为10μg/μl样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加10μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照氯仿:异丙醇＝8:1配制的展开剂的10cm×10cm的展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物甲硝唑。
实施例9
在检测兽药或者饲料中是否含有违禁药物呋喃唑酮时，首先在标准GF254板表面均匀的涂敷一层0.35％羧甲基纤维素钠水溶液作为吸附剂或支持剂，待室温晾干，在110℃活化30分钟后，制成活化的标准色谱板待用。将以氯仿为溶媒制作的浓度为5μg/μl样品溶解液，用管口平整的毛细管滴加2μl于距色谱板底边约2cm处点样，点样直径为2～4mm之间即可，点间距离一般控制在1.0～2.0cm之间即可。凉干或吹干后置色谱板于盛有按照乙酸乙酯:丙酮:水:浓氨＝90:6:2:1配制的展开剂的10cm×10cm展开槽内，浸入深度为0.5～1.0cm之间即可。待展开剂前沿离色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干并在紫外灯下显色。被检测点的颜色和位置与对照品一致时，说明该批兽药或者饲料中含有违禁药物呋喃唑酮。
Claims (10)
1.一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的检测方法是将薄层色谱法适用于直接对饲料或者兽药产品中的违禁药物成分进行的检测。
2.根据权利要求1所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的检测方法是将薄层色谱法适用于直接对饲料或者兽药产品中的违禁药物成分—利巴韦林、氯霉素、地西泮、盐酸氯丙嗪、苯甲酸雌二醇、地美硝唑、沙丁胺醇、甲硝唑、呋喃唑酮分别进行的检测。
3.一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的方法使用薄层色谱法：
a.在市售的标准薄板或铝箔板表面均匀的涂敷一层常规的吸附剂或支持剂，待室温晾干后，在110℃条件下使用常规的方法活化30分钟，制成标准色谱板待用；
b.在上述标准色谱板上按检测浓度点相应的对照品。
c.将饲料或者兽药样品用特定溶媒溶解，制成样品溶解液待用；
d.将样品溶解液在上述标准色谱板上滴加点样，凉干或吹干后，置标准色谱板于盛有展开剂的市售标准展开槽内；
e.待展开剂前沿至标准色谱板顶端附近时，将标准色谱板取出晾干，在紫外灯下显色；
f.被检测点显示的颜色和位置与对照品点进行对比，颜色和位置相同时，则样品溶解液中含有违禁药物成分。
4.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的标准薄板或铝箔板是市售的硅胶G薄层板、硅胶GF254薄层板、聚酰胺薄膜板中的一种。
5.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的吸附剂或者支持剂是浓度为0.2％～0.5％的羧甲基纤维素钠水溶液。
6.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的溶媒根据检测残留物质的不同分别为市售的甲醇、乙醇、氯仿、丙酮试剂中的一种；所述的试剂为分析纯。
7.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于d所述的方法中，将样品溶解液于距标准色谱板底边约2cm处用管口平整的毛细管滴加5～20μl点样，点样直径为2～4mm，点间距离为1.0～2.0cm。
8.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于d所述的方法是：将标准色谱板置于盛有展开剂的标准展开槽内的浸入深度为0.5～1.0cm。
9.根据权利要求3所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于e所述的方法是：展开剂前沿离标准色谱板顶端约1cm附近时，将色谱板取出，晾干后在紫外灯下显色。
10.根据权利要求3或8或9所述的一种饲料或者兽药中违禁药物成分的快速检测方法，其特征在于所述的展开剂根据需检测的利巴韦林、氯霉素、地西泮、盐酸氯丙嗪、苯甲酸雌二醇、地美硝唑、沙丁胺醇、甲硝唑、呋喃唑酮中的一种，分别依次为以下之一种：按照三氯甲烷:冰醋酸＝13:7配制的展开剂、按照氯仿:甲醇＝85:15配置的展开剂、按照环己烷:醋酸乙酯:三氯甲烷＝6:3:1配制的展开剂、按照环已烷:丙酮:乙二胺＝8:1:1配置的展开剂、按照环已烷:丙酮:乙二胺＝8:1:1配制的展开剂、按照甲醇:水＝8:2配制的展开剂、按照氯仿:异丙醇＝9:1配制的展开剂、按照醋酸乙酯:异丙醇:水:浓氨溶液＝50:30:16:4配制的展开剂、按照氯仿:异丙醇＝8:1配制的展开剂、按照乙酸乙酯:丙酮:水:浓氨＝90:6：2:1配制的展开剂；上述各项成分均为化学纯试剂，试剂比例为体积比。
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