CN101279084A - 治疗慢性盆腔炎的中药及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种治疗妇科慢性盆腔炎的中药及其制备方法，原料药包括黄柏，当归，川芎，白芍，生地，甘草，干姜，椿根皮，贝母。本发明针对组方药物中有效成分的理化性质，采用正交实验进行优化其工艺参数，极大地提高了其中的有效成分的含量，确保了治疗慢性盆腔炎的有效性。提供的制备方法具有生产简单，有效成分浓度高，产品质量稳定的特点。由于组方中没有使用辅料，所以在药物有效成分中不含没有药效的辅料，减少服用的剂量，便于患者服用；不含糖分，便于患者方便服用不需禁忌。动物试验证明，本发明中药具有显著的抗炎、抗菌、止痛、止痒、改善微循环、提高机体免疫力等多种药理作用，且无明显的毒副作用，可长期服用。对于湿热蕴结、气滞血瘀型的慢性盆腔炎以及阴道炎、宫颈炎、附件炎及尿路感染等相关妇科炎症均有显著的治疗效果。

Description

治疗慢性盆腔炎的中药及其制备方法

技术领域

本发明属于中药的技术领域，具体是一种治疗妇科疾病慢性盆腔炎的中药及其制备方法。

背景技术

盆腔炎(pelvic inflammatory disease，PID)是女性内生殖器及其周围的结缔组织、盆腔腹膜炎症的总称，包括子宫内膜炎、输卵管卵巢炎、盆腔腹膜炎、盆腔结缔组织炎以及盆腔脓肿等病症。其病变可局限于一个部位，也可分布于几个部位，甚至延及整个盆腔脏器，临床上一般分为急性和慢性两种。慢性盆腔炎((chronic pelvic inflammatory disease，CPID)，一般多从急性炎症而来，对急性炎症未能治疗或治疗不彻底，或患者体质较差，病情迁延导致慢性盆腔炎，也有少数无明显急性炎症过程者。临床症状常见下腹隐痛及腰骶部酸痛、白带量增多等；慢性盆腔炎全身症状多不明显，可有低热、乏力等症，疼痛常于劳累、性交后及月经前后加剧，卵巢受损时可有月经失调，输卵管粘连阻塞可致不孕。该病发病年龄多为25～40岁，发病率在30％～60％。近年来，随着我国性传播疾病患病率的上升、各种流产、引产及其它妇科检查、手术操作次数的增加，经期卫生不良或性不洁、避孕措施不当等原因，其发病率呈逐年上升趋势，且性生活越早、生育越多，发病率越高。CPID发病往往是急性盆腔炎未能彻底治疗，或患者体质较差，病情迁延所致。据世界卫生组织估计，性传播疾病泛滥导致全世界每年新增3亿3千多万性病患者，其中有10％～20％将发展为CPID。一些专家和学者称CPID是21个世纪对女性健康的新挑战。

传统的治疗盆腔炎的方法主要采用抗菌消炎药，但临床研究表明，抗菌素虽有控制急性炎症病情的作用但无法根治，同时抗菌药对慢性妇科炎症疗效不明显，且副作用很多。此外，也有不少患者采用物理疗法(如激光、冷冻、电烙烧灼)和外用阴道栓、阴道泡腾片或洗液等方法治疗，但这些方法易增加患者痛苦，引起局部组织疤或易复发，且疗效有限。在现有的技术中有一些专门治疗这类疾病的“盆炎净颗粒”制剂和“金刚藤糖浆”制剂；它对所述疾病有一定的治疗作用；但是它存在了一些问题：这些制剂中添加了蔗糖，淀粉等辅料，对于一些患者服用受到了限制，特别是糖尿病患者显然不能服用；此外，这些制剂不易保存，携带不便，需要解决的问题很多。

发明内容

本发明目的在于：提供一种治疗慢性盆腔炎的中药及其制备方法，可以有效治疗慢性盆腔炎这类妇科常见疾病，且制备工艺简单、可靠，质量稳定，贮藏、携带、服用方便。

本发明的技术方案如下：

治疗慢性盆腔炎的中药，其特征在于：其原料组分的重量比例为：

黄柏1000～2000份，当归1000～2000份，川芎1000～2000份，白芍1000～2000份，生地1000～2000份，甘草500～1000份，干姜500～1000份，椿根皮1000～2000份，贝母1000～2000份。

所述的治疗慢性盆腔炎的中药，其特征在于：其原料组分的重量比例为：

黄柏210份、当归210份、川芎210份、白芍210份、生地210份、甘草105份、干姜105份、椿根皮210份、贝母210份。

所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：将药材粉碎，黄柏、当归、川芎加入浓度65％～85％的乙醇溶液，减压回流提取1～3次，每次加入8～12倍的量，提取1～2小时，滤过，将提取的乙醇液回收乙醇后浓缩至稠膏，真空干燥至恒重备用；白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母与醇提后的药渣合并，加水煎煮提取1～3次，每次加入8～12倍药材的水量，每次煎煮1～2小时，滤过，将水煮后得到的滤液浓缩得浸膏，加入乙醇溶液至乙醇含量为50％～70％，搅匀，静置，滤取上清液，回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥至恒重备用；将两次干浸膏合并粉碎成细粉，搅拌均匀即得。

所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：所述的黄柏、当归、川芎提取稠膏真空干燥时，真空度0.08～0.09Mpa，温度40℃；含有白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母提取成分的稠膏真空干燥条件为：真空度0.08～0.09Mpa，温度80℃。

所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：取黄柏、当归、川芎，加10倍量75％乙醇溶液减压回流提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度40℃，减压干燥至恒重备用；白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母以及醇提后的黄柏、当归、川芎粗粉渣，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.0，加入乙醇溶液至含乙醇量为60％，搅匀，静置24-48小时，滤取上清液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度80℃减压干燥至恒重备用；将两次干浸膏合并，粉碎至细粉，搅拌均匀制成所需剂型。

本发明浸膏可以用于制备胶囊剂，也可制成其它剂型。

一、本发明药物方解与功能主治

1.本发明方解：慢性盆腔炎属于中医的妇科带下病。主要病机是由于湿热流注下焦或直犯阴中，累及任带二脉。湿热留恋日久则阻遏气血运行，故可见带下量多，色黄或黄白相间，质粘稠。其气腥臭，外阴瘙痒，小腹坠胀或下腹压痛，腰骶疼痛，小便短少涩痛，舌红苔黄腻等症。本证型是由于湿热下注，气滞血瘀所致，故治疗应以清热利湿，活血化瘀为主，使湿化而热清，气行血畅，诸症自然消除。方中黄柏苦寒清热燥湿、泻火解毒，是为君药；臣以归、芎、芍、地滋阴清热、凉血活血，祛邪不伤阴，活血不留瘀；椿皮清热燥湿、收涩止带，与黄柏同用，清湿热之功更宏；干姜辛热，温中散寒，健脾益胃；川贝母清热润肺，化痰；生甘草清热解毒，和中，均为佐使药。全方合用，共奏清热利湿、活血化瘀之功。

2.本发明的功能主治：本发明药物具有清热利湿，活血化瘀之功效，用于湿热下注，气滞血淤型慢性盆腔炎以及阴道炎、宫颈炎、附件炎及尿路感染等见有上述症状者。

3、本发明组方药物的药性与作用

(1)、黄柏  味苦、性寒、归肾、膀胱经。能清热燥湿，泻火解毒，消肿祛腐。临床上用于治疗湿热泻痢、黄疸、带下、热淋、痔漏、盗汗、遗精、骨蒸劳热等症。动物实验表明，黄柏具有抗菌、抗病毒、抗炎、解热、降血糖、降血压等作用。

(2)、当归  味甘辛，性温，归肝、心、脾经。有补血、活血、调经、润燥、滑肠、补血活血，调经止痛，润肠通便等作用。用于治疗血虚萎黄，眩晕心悸，月经不调，经闭痛经，虚寒腹痛，跌扑损伤，痈疽疮疡等症。药理实验证明，当归具有抗炎、镇痛、抗凝血、抗血栓、抗氧化、抗衰老和提高免疫力等作用。

(3)、川芎  味辛微苦，性温，归肝、胆、心包经。具有活血行气，祛风止痛之功效。主治血瘀气滞所致月经不调，痛经，闭经，难产，产后瘀腹痛，胁肋作痛；肝郁气滞而致血行不畅的胸胁疼痛，头痛，风寒湿痹，跌打肿痛等疾病。临床主要用于治疗头痛、冠心病、缺血性脑中风、泌尿系统感染及妇科方面的疾病。药理学研究证明，川芎具有抑制血小板聚集、抗血栓、降低血粘度，改善血液流变、增加冠脉流量，改善心肌缺氧等作用。

(4)、白芍  性微寒，味苦酸，归肝、脾经。具有养血柔肝、缓中止痛、凉血消肿功能，临床上用于治疗头晕目眩、胁腹疼痛、妇女月经不调，经期不畅、四肢挛痛等症。动物实验研究证实，白芍具有抗炎、抑制血小板聚集、抗血栓、抗菌、镇静、镇痛等作用。

(5)、生地黄  味甘苦、性寒，归心、肝、肾经。具有清热凉血，养阴生津、止血功效，临床上用于热风伤阴、热病烦渴、发斑疹、尿血、崩漏下血、阴虚内热等症。药理学研究表明，地黄具有抗炎、抗衰老、降血糖、抗骨质疏松和提高免疫力等作用。

(6)、贝母  味甘苦，性寒，归心、肺经。能清热润肺、化痰止咳，临床上多用于外感咳嗽、肺虚久咳、痰多胸闷、瘰疬疮痈肿毒及乳痈等症。药理学研究证明，贝母具有抗血小板聚集、降低血粘度、抑菌、平喘、镇咳和祛痰等作用。

(7)、椿皮  味苦、性寒，归大肠、胃、肝经。具有清热燥湿、收涩止带、止泻、止血等功效，用于赤白带下、湿热泻痢、久泻久痢、便血和崩漏。药理学研究证明，椿皮有抗菌、抗原虫、抗肿瘤等作用。

(8)、甘草  味甘，性平，归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气、清热解毒、缓急止痛、祛痰止咳、调和诸药功效。用于脾胃虚弱、倦怠乏力、心悸气短、咳嗽痰多和缓解药物毒性。药理学研究表明，甘草具有抗菌、抗病毒、抗炎、抗肝纤维化、解毒、解痉、镇痛等作用。

(9)、干姜  味辛，性热，归脾、胃、肾、心、肺经，可温中散寒、回阳通脉、燥湿消痰。主要用于脘腹冷痛，呕吐泄泻，肢冷脉微，痰饮喘咳的治疗。药理学研究证明，干姜具有抗血小板聚集、抗菌抗炎、扩张血管，促进血液循环、强心、抗氧化、抗衰老、解毒、抗肿瘤和增强免疫等作用。

二、制备方法的研究：

(一)原料药材的粉碎

由于现代生产都使用多功能提取罐提取，内部压力较大，药材有效成分较易溶出，但易于煮烂，药材粉末过细不易于过滤工序操作且提高生产成本，故采取适度粉碎，投料以净药材计算。

(二)提取工艺条件的选择

依据本品中9味药材中主要药效成分的理化性质，将黄柏、当归和川芎3味进行乙醇提取，考虑到有效成分阿魏酸和川芎嗪的稳定性采取37℃，真空度0.08～0.09Mpa的减压回流提取；其它6味及醇提后药渣合并采用水提醇沉的工艺。

1、醇提工艺条件的选择

以醇提物中有效成分小檗碱作为评价标准，采用正交试验对醇提工艺中的乙醇浓度，提取时间和提取次数等工艺参数进行考察。

分别按照配方比例称取药材9份，每份63.0g(黄柏21.0g、当归21.0g、川芎21.0g)进行正交试验，正交因素水平表及结果如下：

                正交因素水平表

        正交实验表及盐酸小檗碱提取量评价结果

注：盐酸小檗碱的测定

色谱条件：色谱柱：Diamonsil(TM)钻石C18(250x4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-1％三乙胺磷酸溶液(PH＝3)(25∶75)；柱温：27℃；流速：1.0ml/min；检测波长：280nm

对照品溶液制备：盐酸小檗碱标准品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号110713-200208)加甲醇配制成0.068mg/ml浓度的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密称取一定量提取并干燥好的9种醇提物，用流动相定容至10ml，摇匀，用0.45μm的滤膜过滤，保留续滤液作为供试品溶液。

测定方法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪(Aglient1100Series高效液相色谱仪，美国Aglient公司)测定。

        盐酸小檗碱提取量方差分析表

F_0.05(2，18)＝3.55；F_0.01(2，18)＝6.01

结果表明：以盐酸小檗碱为指标，各因素主次为C＞A＞B＞D，因素C有极显著影响，因素A有显著影响，以A₂B₂C₃工艺最佳。

2、水提醇沉工艺条件的选择

根据水提醇沉后的固形物量，拟确定水提滤液浓缩至相对密度为1.2，加入乙醇至含醇量为60％，静置24小时后，回收乙醇，浓缩，减压干燥至干浸膏。以水提物中有效成分芍药苷作为评价标准，拟采用正交试验对水提醇沉工艺中的提取时间、提取次数和水提用量等工艺参数进行考察。

分别按照配方比例称取药材9份，每份105.0g(白芍21g、生地21.0g、甘草10.5g、贝母21.0g、干姜10.5g、椿根皮21.0g)与醇提后的三种药渣合并提取，进行正交试验，正交因素水平表及结果如下：

                    正交因素水平表

        正交实验表及芍药苷提取量评价结果

注：芍药苷的测定

色谱条件：色谱柱：Diamonsil(TM)钻石C18(250x4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-0.3％磷酸溶液(16∶84)；柱温：27℃；流速：1.0ml/min；检测波长：230nm

对照品溶液制备：芍药苷标准品(中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号110736-200526)加甲醇配制成0.045mg/ml浓度的溶液，即得。

供试品溶液的制备：精密称取一定量提取并干燥好的9种水提醇沉后产物，用流动相定容至10ml，摇匀，用0.45μm的滤膜过滤，保留续滤液作为供试品溶液。

测定方法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪(Aglient1100Series高效液相色谱仪，美国Aglient公司)测定。

                    芍药苷提取量方差分析表

F_0.05(2，18)＝3.55；F_0.01(2，18)＝6.01

结果表明：以芍药苷为指标，各因素主次为B＞A＞C，因素B和因素A有显著影响，以A₂B₃C₃工艺最佳。

(三)制剂成型工艺的研究

1、规格的确定：依据以上试验，醇提工艺的干浸膏(固形物)得率为30％左右，水提醇沉后干浸膏得率为10％左右。药材共计168g，提取干燥后的干浸膏应约为42.54g，可制成100粒胶囊，每粒0.4212g，考虑到药材质量的波动性，确定本发明提供的产品规格为每粒0.4g(每粒相当于原药材1.68g)。

2、干浸膏粉的制备

按上述选定的提取工艺，取5倍处方量药材(共计840g)，其中黄柏105g、当归105g、川芎105g进行乙醇减压回流提取，回收乙醇，浓缩至稠膏(温度在40℃以下)，减压干燥(真空度0.08～0.09Mpa，35～40℃)得干浸膏；白芍105g、生地105g、贝母105g、甘草52.5g、干姜52.5g、椿根皮105g，进行提取浓缩至稠膏，减压干燥(真空度0.08～0.09Mpa，75～80℃)得干浸膏；合并两种干浸膏，粉碎，过100目筛，结果如下：

3、充填试验

(1)胶囊的选择：依据经验，每粒0.4g规格一般应选择用0号胶囊，经充填试验，装量稳定符合要求，结果如下：

药粉量(g)	212
		装量规格(g/粒)	0.4
充填胶囊量(粒)	523
		装量差异	0.423～0.388
平均粒重(g)	0.406

(2)分装环境要求：根据本品要求分装环境温度应控制在20℃以下，湿度不超过50％。

本发明针对组方药物中有效成分的理化性质，采用正交实验进行优化其工艺参数，极大地提高了其中的有效成分的含量，确保了治疗慢性盆腔炎的有效性。提供的制备方法具有生产简单，有效成分浓度高，产品质量稳定的特点。由于组方中没有使用辅料，所以在药物有效成分中不含没有药效的辅料，减少服用的剂量，便于患者服用；不含糖分，便于患者方便服用不需禁忌。动物试验证明，本发明中药具有显著的抗炎、抗菌、止痛、止痒、改善微循环、提高机体免疫力等多种药理作用，且无明显的毒副作用，可长期服用。对于湿热蕴结、气滞血瘀型的慢性盆腔炎以及阴道炎、宫颈炎、附件炎及尿路感染等相关妇科炎症均有显著的治疗效果，是一种安全、有效、质量可控的治疗慢性盆腔炎的中药新药，值得临床推广应用。

具体实施方式

一、治疗慢性盆腔炎的中药处方：

其原料组分的重量比例为：

黄柏210份、当归210份、川芎210份、白芍210份、生地210份、甘草105份、干姜105份、椿根皮210份、贝母210份。

二、制备方法：

取黄柏、当归、川芎，加10倍量75％乙醇溶液减压回流提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度40℃，减压干燥至恒重备用；白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母以及醇提后的黄柏、当归、川芎粗粉渣，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.0，加入乙醇溶液至含乙醇量为60％，搅匀，静置24～48小时，滤取上清液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度80℃减压干燥至恒重备用；将两次干浸膏合并，粉碎至细粉，搅拌均匀制成胶囊。

三、本发明药效学研究

下述为本发明胶囊剂的药效试验所需的条件：

1、受试物与试剂

本发明药物胶囊剂，规格：0.4g/粒。临用前用蒸馏水配制成所需浓度的药液供动物给药用。鹿角菜胶，中科院上海药物研究所；巴豆油混合致炎剂的配制：2％巴豆油、20％无水乙醇、5％蒸馏水和73％乙醚；醋酸(分析纯)，成都化学试剂一厂；酵母，湖北安琦酵母股份有限公司；妇科千金片，湖南株洲千金药业有限公司；金鸡胶囊，广西灵峰药业有限公司；菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌和白色念珠菌均为安徽医科大学附属医院检验科临床分离菌株；盐酸肾上腺注射液，上海禾丰制药有限公司；盐酸左氧氟沙星，江苏豪森药业有限公司。

2、动物

昆明种小鼠，体重18～22g，由安徽医科大学实验动物中心提供，合格证为皖医动准第01号。SD大鼠，体重140～170g，由安徽医科大学实验动物中心提供，合格证为皖医动准第03号。

3、仪器

AEG-220型电子分析天平，日本岛津公司；50ul微量移液器，北京青云卓立精密设备有限公司；JY601型小鼠秤，上海良平仪器仪表有限公司；椎板式R-80型全自动血液粘度仪，北京中勤世帝公司；KX-21型全自动血液分析仪，日本Sysmex公司；TXL-b型体外血栓形成血小板粘附两用仪，无锡石塘湾兴卫医用仪器厂

4、统计方法

采用SPSS13.0统计软件包进行处理，多组间比较采用单因素方差分析(One-Way-ANOVA)。多组间两两比较，方差齐性采用S-N-K法(q检验)，方差不齐采用Dunett’s T3法。各组数据均用

表示。

试验例1本发明药物胶囊剂抗炎作用

1、对鹿角菜胶所致大鼠足肿胀的影响

取体重140～170g大鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组，阳性对照组(指妇科千金片或金鸡胶囊，以下均同)，高剂量组，中剂量组，低剂量组，每组10只。各组灌胃给予相应受试物，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组分别灌胃给予6.0g生药/kg，3.0g生药/kg，1.5g生药/kg，阳性对照组给予妇科千金片混悬液(6.0g/kg)，空白对照组给予等体积的蒸馏水，每天给药1次，连续给药7天。第7天致炎前预先用自制软窄尺测量正常右后爪周长(以后每次测量均固定位置)，末次给药30min，于各鼠足跖腱膜下注射1％鹿角菜胶0.05ml/只致炎，分别于致炎后0.5、1、2、3、4、5小时测量各鼠右后足爪周长，以致炎前的周长之差为肿胀度，结果见表1。

表1  本发明药物胶囊剂对大鼠鹿角菜胶性足肿胀的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，与空白对照组比较，阳性对照组和本发明药物高、中、低剂量组对鹿角菜胶所致大鼠足肿胀有不同程度的抑制(P＜0.05或P＜0.01)。用药后1小时即可出现明显抗炎作用，其抑制肿胀作用持续5小时以上。

2、对巴豆油所致的小鼠耳廓肿胀的影响

取小鼠50只，体重18～22g，随机分为空白对照组，阳性对照组，高剂量组，低剂量组，每组10只。各组灌胃给予相应受试物，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组分别灌胃给予12.0g生药/kg，6.0g生药/kg，3.0g生药/kg，阳性对照组给予妇科千金片混悬液(12.0g/kg)，空白对照组给予等体积的蒸馏水，每天给药1次，连续给药7天。末次给药后30min，用巴豆油混合致炎剂(内含2％巴豆油、20％无水乙醇、5％蒸馏水和73％乙醚)涂于小鼠左耳前后两面0.05ml/只。4h后处死小鼠，剪下两耳，用直径9mm打孔器分别在同一部位打下圆耳片称重，每小鼠左右耳片重量差即为肿胀程度，取各给药组耳肿程度的均数与对照组作比较，计算各给药组对耳肿胀的抑制率，结果见表2。

抑制率＝(空白对照组耳肿程度-给药组耳肿程度)/空白对照组耳肿程度×100％

表2本发明药物胶囊剂对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，与空白对照组比较，阳性对照组及本发明药物高、中剂量组对巴豆油所致小鼠耳廓肿胀有不同程度的抑制(P＜0.05或P＜0.01)。其中本发明药物高剂量组效果最好，本发明药物高、中、低剂量组呈量效关系。

3、对棉球所致大鼠肉芽肿模型的影响

取体重140～170g大鼠50只，雌雄各半，随机分为空白对照组，阳性对照组，高剂量组，低剂量组，每组10只。于实验前1天，大鼠在乙醚麻醉下，将25mg消毒棉球植入大鼠腋下，两侧各1个，手术在无菌条件下进行，自手术后第一日起，各组灌胃给予相应受试物，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组分别灌胃给予6.0g生药/kg，3.0g生药/kg，1.5g生药/kg，阳性对照组给予妇科千金片混悬液(6.0g/kg)，空白对照组给予等体积的蒸馏水，每天给药1次，连续给药7天。末次给药后24h处死动物，剥离肉芽肿称取湿重。置80℃烤箱内烘1h后再称其干重，结果见表3。

表3  本发明药物胶囊剂对大鼠棉球肉芽肿的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，与空白对照组比较，阳性对照组及本发明药物高、中、低剂量组棉球肉芽肿重量均有明显的差异(P＜0.05或P＜0.01)。其中本发明药物高剂量组效果最好，本发明药物高、中、低剂量组呈一定量效关系，且中剂量组效果与6.0g/kg的妇科千金片作用相当。

试验例2本发明药物胶囊剂镇痛作用

对醋酸所致小鼠扭体反应的影响(扭体法)

取小鼠50只，体重18～22g，雌雄各半，按体重分层随机分为空白对照组，阳性对照组，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组，每次分别灌胃给予生物盐水0.2ml/10g，千金片混悬液0.2ml/10g(相当于12.0g/kg)，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量0.2ml/10g(分别相当于12.0g生药/kg，6.0g生药/kg，3.0g生药/kg)，均每日给药1次，连续给药5天，末次给药1h，分别腹腔注射0.6％醋酸(0.2ml/只)。观察15min内出现扭体反应的动物数及扭体次数，计算镇痛率，结果见表4。

表4  本发明药物胶囊剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，与空白对照组比较，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组对醋酸所致的小鼠扭体反应次数均有不同程度的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01)，并呈一定的量效关系。

试验例3本发明药物胶囊剂清热作用

对干酵母所致大鼠全身性发热的影响

取体重140～170g大鼠70只，用体温计测大鼠正常肛内温度，一日2次，连续3d。实验前，禁食14h(但可自由饮水)。实验日再同法测定每只鼠肛温2～3次。选取体温变动不超过0.3℃的大鼠50只，随机分为空白对照组，阳性对照组，高剂量组，低剂量组，每组10只。各组灌胃给予相应受试物，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组分别灌胃给予6.0g生药/kg，3.0g生药/kg，1.5g生药/kg，阳性对照组给予妇科千金片混悬液(6.0g/kg)，空白对照组给予等体积的蒸馏水。实验前灌胃给药1h后，立即于大鼠背部皮下注射20％干酵母悬液10ml/Kg，然后4、6、8、10及12h各测大鼠肛温一次，统计肛温变化，结果见表5。

表5  本发明药物胶囊剂对酵母所致大鼠全身性发热的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，与空白对照组比较，阳性对照组及本发明药物高、中、低剂量组对酵母所致大鼠全身性发热有不同程度的解热作用(P＜0.05或P＜0.01)。本发明药物胶囊剂在服药6h即有显著的解热效果，其作用时间可维持6h以上。

试验例4本发明药物胶囊剂对慢性盆腔炎常见治病菌体外抑菌作用

1、体外最小抑菌浓度(MIC)的测定试验

采用试管连续二倍稀释法，取灭菌小试管48支，分为4组每组12支，分别为清白胶囊药物组(清白胶囊大肠杆菌组、金黄色葡萄球菌组、绿脓杆菌组和白色念珠菌组)，于每管中先加入葡萄糖酚红肉汤培养基5ml，然后每组第1支试管中加入5ml浓度为2g/ml(生药含量)的本发明药物胶囊剂肉汤培养基供试液，则每组第1管起始浓度为1g/ml，混匀后吸取5ml加入第2管中，同法稀释至第10管。每组第11管不加药物作对照，以便观察培养基是否适合细菌生长，第12管中加受试液5ml，混匀后取出5ml，弃去，不加细菌，以观察受试物是否有污染，第13管以左氧氟沙星(配制25ug/ml试液，灭菌备用)作为阳性对照组。经湿热灭菌，最后除每组第12管外，以上每管加入备妥的对应稀释10^-6的新鲜菌液0.1ml。4组试管放于37℃摇床培养24h，观察结果确定最小抑菌浓度(MIC)，结果见表6。

2、体外最小杀菌浓度(MBC)的测定试验

分别将上述无肉眼可见细菌生长试管中的肉汤划线接种于营养琼脂培养基平皿上，放于37℃生化培养箱内培养24h后取出观察，以平皿上无菌落生长的最低药物浓度(最高稀释度)作为本发明药物胶囊剂对应此菌的MBC，结果见表6。

表6本发明药物胶囊剂对四种慢性盆腔炎致病菌的抑菌作用

注：“+”表示有菌生长；“-”表示无菌生长；“*”表示该浓度为MIC；“△”表示该浓度为MBC；最后两栏中的数值单位为“g生药/ml”

由上表可见，本发明药物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有抑菌作用，最小抑菌浓度(MIC)分别为0.0625g生药/ml、0.0625g生药/ml和0.0313g生药/ml，最小杀菌浓度(MBC)分别为0.25g生药/ml、0.125g生药/ml和0.0313g生药/ml，相对其他三种常见盆腔炎治病菌本发明药物对白色念珠菌的抑菌效果不是很明显，其MIC、MBC分别为0.25g生药/ml和0.5g生药/ml。

试验例5本发明药物胶囊剂小鼠体内抗大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染试验

大肠杆菌和金黄色葡萄球菌以平板划线法接种于营养琼脂培养基平皿内，37℃培养过夜。次日挑选典型单个菌落，于10ml肉汤培养基中，37℃恒温振摇16h，以此菌液用生理盐水作10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5倍稀释。用不同浓度的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌感染小鼠，每个浓度10只小鼠，测出各试验菌株引起小鼠100％死亡的最小致死菌量(100％minimum lethal dose of bacterial，MLD)大肠杆菌MLD为2.0×10⁸CFU/mL，金黄色葡萄球菌的MLD为1.0×10⁸CFU/mL。

取18～22g昆明种小鼠200只，雌雄各半，随机分为10组，每组20只，即空白对照组(大肠，金葡)共2组，阳性对照组(大肠，金葡)共2组，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组，每组灌胃容量为0.2ml/10g，阳性对照组金鸡胶囊混悬液剂量为6.0g药粉/kg，高、中、低剂量分别为12.0g生药/kg、6.0g生药/kg和3.0g生药/kg，均每日给药1次，连续灌胃给药4天，末次给药1h后，每只小鼠分别腹腔注射上述浓度的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌悬液0.5ml/只，再连续灌胃给药3天，观察腹腔注射菌液后72h内各组小鼠死亡只数，结果见表6、7。

表6本发明药物胶囊剂对小鼠腹腔注射大肠杆菌死亡情况的影响

由表可见，本发明药物灌胃给药对小鼠腹腔注射大肠杆菌感染所致的死亡情况保护作用明显，生存率高剂量达65％、中剂量达50％、小剂量达40％，并呈一定量效关系。

表7本发明药物胶囊剂对小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌死亡情况的影响

由上表可见，本发明药物灌胃给药对小鼠腹腔注射金黄色葡萄球菌感染所致的死亡情况保护作用明显，生存率高剂量达60％、中剂量达45％、小剂量达40％，并呈一定量效关系。

试验例6本发明药物胶囊剂对血瘀模型大鼠血液流变学改善的作用

取SD大鼠48只，体重140～170g，雌雄各半，按体重分层随机分为6组，每组8只，分别为正常组，空白对照组，阳性对照组，本发明药物胶囊剂高、中、低剂量组。阳性对照组金鸡胶囊混悬液灌胃剂量为6.0g药粉/kg，高、中、低剂量分别为6.0g生药/kg、3.0g生药/kg和1.5g生药/kg，正常组和空白对照组灌胃同体积的生理盐水，连续给药14d。末次给药后1h，除正常组外皮下注射盐酸肾上腺素(Adr)0.8mL·kg^-1，共2次，间隔4h，中间将大鼠浸入冰水内冷浴5min，以造成急性血瘀模型，如此处置后将各组大鼠禁食不禁水。次日晨给药1h后腹腔注射2％戊巴比妥钠2ml·kg^-1麻醉，打开腹腔用一次性注射器自腹主动脉采血，K₂EDTA、肝素钠真空采血管抗凝。取抗凝血，用R-80全自动粘度仪测定(高、中、低切变率下)全血粘度、(高、低切变率下)全血相对粘度、血浆粘度；用STAGO-STA型全自动血凝仪测定血浆纤维蛋白原含量；用KX-21全自动血液分析仪测定血细胞比容，以上指标测定由医院检验科专人操作。取1.8ml非抗凝血进行体外血栓形成试验，即按照Chandler体外法，立即注入内径为4mm的硅胶管内，迅速封闭，置于TXL-b型体外血栓形成血小板粘附两用仪上，37℃下转动15min，倾出血栓，生理盐水洗涤，滤纸吸去表面血液测量长度并称量湿重，将血栓条置于64℃烘箱内烘取20min后称其干重；用旋转玻璃球法进行血小板粘附试验，将1ml抗凝血加入玻璃球内，置于TXL-b型体外血栓形成血小板粘附两用仪的转动装置上，旋转15min，用KX-21全自动血液分析仪测定血液在玻璃球内转动前后血小板的数量，从而计算血小板的粘附率，结果见表8、9、10。

表8本发明药物胶囊剂对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

表9本发明药物胶囊剂对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表8、9可见，空白对照组全血高中低切应力粘度、血浆粘度、纤维蛋白原含量及血细胞比容均明显升高，与正常组比较，差异十分显著(P＜0.05或P＜0.01)，提示急性血瘀大鼠血液呈“粘、浓、聚、凝”状态。而预先给予本发明药物胶囊剂14天的三个剂量组都能不同程度地改善上述急性血瘀大鼠血液流变学指标的变化，表明本发明药物胶囊剂有改善急性血瘀大鼠血液流变性的作用。

表10本发明药物胶囊剂对急性血瘀模型大鼠血小板粘附率及血栓形成的影响

注：与空白对照组比较，^*P＜0.05  ^**P＜0.01

由表可见，空白对照组大鼠体外血栓长度、血栓湿重和干重与正常组相比较均明显增加(P＜0.05或P＜0.01)，血小板粘附率和粘附值与正常组相比较显著升高(P＜0.01)。本发明药物胶囊剂三个剂量均能不同程度地使体外血栓长度、血栓湿重和干重及血小板粘附率和粘附值明显降低，与模型组相比(P＜0.05或P＜0.01)，表明本发明药物胶囊剂具有降低急性血瘀大鼠血小板粘附性和体外血栓形成的作用。

上述药效学试验说明，大鼠灌胃本发明药物胶囊剂6.0g、3.0g、1.5g生药/kg，小鼠灌胃本发明药物胶囊剂12.0g、6.0g、3.0g生药/kg，每日1次，连续7天，对鹿角菜胶所致大鼠足肿胀，对巴豆油所致的小鼠耳廓肿胀和对棉球所致大鼠肉芽肿均有不同程度的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01)，并呈一定的量效关系，说明本发明药物胶囊剂有明显的抗炎作用；小鼠灌胃本发明药物胶囊剂12.0g、6.0g、3.0g生药/kg，每日1次，连续5天，对醋酸所致的小鼠扭体反应次数均有不同程度的抑制作用(P＜0.05或P＜0.01)，高、中、低剂量并呈一定的量效关系，说明本发明药物胶囊剂有明显的镇痛作用；大鼠灌胃本发明药物胶囊剂6.0g、3.0g、1.5g生药/kg，灌胃1次，1h后注射干酵母悬液，本发明药物组对酵母所致大鼠全身性发热有不同程度的解热作用(P＜0.05或P＜0.01)，在服药6h即有显著的解热效果，其作用时间可维持6h以上，说明本发明药物胶囊剂具有明显的清热作用；体外抑菌实验结果显示：本发明药物胶囊剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有抑菌作用，最小抑菌浓度(MIC)分别为0.0625g、0.0625g、0.0313g生药/ml，最小杀菌浓度(MBC)分别为0.25g、0.125g、0.0313g生药/ml，对白色念珠菌抑菌效果不是很明显，说明本发明药物胶囊剂在体外能明显抑制大部分盆腔炎常见致病菌的生长；体内抑菌试验显示：小鼠灌胃本发明药物胶囊剂12.0g、6.0g、3.0g生药/kg，每日1次，连续7天，能明显降低腹腔注射大肠杆菌和金黄色葡萄球菌所致小鼠死亡率，高、中、低剂量组生存率有一定量效关系，说明本发明药物胶囊剂在体内有明显抗大肠杆菌和金黄色葡萄感染的作用；大鼠灌胃本发明药物胶囊剂6.0g、3.0g、1.5g生药/kg，每日1次，连续14天，高、中、低剂量组不同程度地改善急性血瘀模型大鼠血液流变学指标的变化(P＜0.05或P＜0.01)，且不同程度地使体外血栓长度、血栓湿重和干重及血小板粘附率和粘附值明显降低(P＜0.05或P＜0.01)，说明本发明药物胶囊剂能有效改善血液流变学异常，抗血小板粘附和抗血栓形成的作用。

上述的药效学试验说明，本发明药物胶囊剂服用剂量少，质量稳定、可控，治疗妇科慢性盆腔炎，具有明显的抗菌、抗炎、镇痛、清热及活血化瘀的作用。

Claims (5)

1、治疗慢性盆腔炎的中药，其特征在于：其原料组分的重量比例为：

黄柏1000～2000份，当归1000～2000份，川芎1000～2000份，白芍1000～2000份，生地1000～2000份，甘草500～1000份，干姜500～1000份，椿根皮1000～2000份，贝母1000～2000份。

2、根据权利要求1所述的治疗慢性盆腔炎的中药，其特征在于：其原料组分的重量比例为：黄柏210份、当归210份、川芎210份、白芍210份、生地210份、甘草105份、干姜105份、椿根皮210份、贝母210份。

3、根据权利要求1或2所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：将药材粉碎，黄柏、当归、川芎加入浓度65％～85％的乙醇溶液，减压回流提取1～3次，每次加入8～12倍的量，提取1～2小时，滤过，将提取的乙醇液回收乙醇后浓缩至稠膏，真空干燥至恒重备用；白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母与醇提后的药渣合并，加水煎煮提取1～3次，每次加入8～12倍药材的水量，每次煎煮1～2小时，滤过，将水煮后得到的滤液浓缩得浸膏，加入乙醇溶液至乙醇含量为50％～70％，搅匀，静置，滤取上清液，回收乙醇浓缩至稠膏，真空干燥至恒重备用；将两次干浸膏合并粉碎成细粉，搅拌均匀即得。

4、根据权利要求3所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：所述的黄柏、当归、川芎提取稠膏真空干燥时，真空度0.08～0.09Mpa，温度40℃；含有白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母提取成分的稠膏真空干燥条件为：真空度0.08～0.09Mpa，温度80℃。

5、根据权利要求3所述的治疗慢性盆腔炎的中药的制备方法，其特征在于：取黄柏、当归、川芎，加10倍量75％乙醇溶液减压回流提取3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度40℃，减压干燥至恒重备用；白芍、生地、甘草、干姜、椿根皮、贝母以及醇提后的黄柏、当归、川芎粗粉渣，加12倍量水煎煮3次，每次1.5小时，滤过，合并滤液浓缩至相对密度1.0，加入乙醇溶液至含乙醇量为60％，搅匀，静置24-48小时，滤取上清液，回收乙醇至稠膏，真空度0.08～0.09Mpa，温度80℃减压干燥至恒重备用；将两次干浸膏合并，粉碎至细粉，搅拌均匀制成所需剂型。