CN101268082A - 作为flt-3激酶抑制剂的噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶衍生物 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及式I和式II噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶化合物,其中R1、R3、B、Z、Q、p、q和X如本文所定义,并涉及这样的化合物作为蛋白质酪氨酸激酶调节剂尤其是FLT3抑制剂的用途,这样的化合物降低或抑制细胞或受治疗者中FLT3激酶活性的用途,以及这样的化合物用于预防或治疗受治疗者的细胞增生性疾病和/或FLT3相关疾病的用途。本发明进一步涉及包含本发明化合物的药物组合物和用于治疗诸如癌症和其它细胞增生性疾病等病症的方法。
Description
相关申请的交叉引用
本申请要求于2005年6月10日提交的美国专利临时申请第60/689,710和于2006年5月10日提交的美国专利临时申请第60/746,941号的优先权,其全部内容在此整体引作参考。
发明领域
本发明涉及作为蛋白质酪氨酸激酶调节剂起作用的新颖化合物。更具体地说,本发明涉及作为FLT3抑制剂起作用的新颖化合物。
发明背景
本发明涉及作为酪氨酸激酶(包括FLT3)抑制剂的噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶。已报道具有有用治疗特性的噻吩和其它化合物包括:WO2004/016576(heterocyclic moiety-containing fused benzenederivatives as androgen receptor modulators(作为雄激素受体调节剂的含杂环部分稠合苯衍生物));WO2002/070510和US 2004082798(aminodicarboxylic acids for the treatment of cardiovascular diseases);WO 9605828((2R,4R)-4-Aminopyrrolidine-2,4-dicarboxylic acidderivatives as metabotropic glutamate receptor antagonists(作为代谢型谷氨酸受体拮抗剂的(2R,4R)-4-氨基吡咯烷-2,4-二羧酸衍生物));WO9852906、US 5932765、US 6043281、US 2003069312、US 6559185和US 2003171422(nitromethyl ketones for use as aldose reductaseinhibitors(用作醛糖还原酶抑制剂的硝基甲基酮));WO 9937304、WO 2000032590和US 2004102450(substituted piperazinone derivativesand other oxoazaheterocyclyl compounds useful as factor Xa inhibitors(用作因子Xa抑制剂的取代哌嗪酮衍生物和其他氧代氮杂杂环化合物));WO 2003088967和US 2004097483(1-(4-piperidinyl)benzimidazoles as histamine H3 antagonists(作为组胺H3拮抗剂的1-(4-哌啶基)苯并咪唑));WO 9209567(hydroxamic acidderivatives as potential antiinflammatory compounds(作为潜在抗炎化合物的异羟肟酸衍生物))。
蛋白激酶为信传导途径的酶成分,其催化末端磷酸根从ATP转移到蛋白质的酪氨酸、丝氨酸和/或苏氨酸残基的羟基上。因此,抑制蛋白激酶功能的化合物是用于评估蛋白激酶活化的生理学结果的有用工具。哺乳动物中正常或突变的蛋白激酶的过表达或不适当表达一直是广泛的研究主题,并业已证明其在很多疾病的进展中起着显著的作用,这些疾病包括糖尿病、血管新生、牛皮癣、再狭窄、眼部疾病、精神分裂症、风湿性关节炎、动脉粥样硬化、心血管疾病和癌症。也一直在研究抑制激酶的强心好处。总而言之,蛋白激酶抑制剂在治疗人类和动物疾病中具有特别的效用。
Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)配体(FLT3L)是影响多种造血细胞谱系发育的细胞因子之一。这些影响通过FLT3L结合于FLT3受体(也称为胎肝激酶-2(flk-2)和STK-1(在造血干细胞和祖细胞上表达的受体酪氨酸激酶(RTK))而发生。FLT3基因编码膜结合RTK,其在正常血细胞生成过程中的细胞增殖、分化和细胞凋亡中起着重要作用。FLT3基因主要由早期髓系祖细胞和淋巴祖细胞表达。参见McKenna,Hilary J.等Mice lacking flt3 ligand have deficient hematopoiesis affectinghematopoietic progenitor cells,dendritic cells,and natural killer cells(缺乏flt3配体的小鼠具有影响造血祖细胞、树突细胞和天然杀伤细胞的缺陷型血细胞生成).Blood.Jun 2000,95:3489-3497;Drexler,H.G.和H.Quentmeier(2004),″FLT3:receptor and ligand(FLT:受体和配体)″.Growth Factors 22(2):71-3。
FLT3配体由髓性基质细胞和其它细胞表达,与其它生长因子协同刺激干细胞、祖细胞、树突细胞和天然杀伤细胞的增殖。
造血系统疾病是这些系统恶化前病症,包括例如骨髓增殖性疾病,例如血小板增多症、原发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生、髓纤维变性(MF)、髓增生异常性髓纤维变性(MMM)、慢性特发性髓纤维变性(IMF)和真性红细胞增多症(PV)、血细胞减少症和恶化前骨髓增生异常综合征。参见Stirewalt,D.L.和J.P.Radich(2003),″The role of FLT3 in haematopoietic malignancies(FLT3在造血恶性肿瘤中的作用)″.Nat Rev Cancer 3(9):650-65;Scheijen,B.和J.D.Griffin(2002),″Tyrosine kinase oncogenes in normal hematopoiesis andhematological disease(正常血细胞生成和血液系统疾病中的酪氨酸激酶癌基因)″.Oncogene 21(21):3314-33。
血液系统恶性肿瘤为机体血液形成系统和免疫系统、骨髓和淋巴组织的癌症。然而,在正常骨髓中,FLT3表达限于早期祖细胞,在血液系统恶性肿瘤中,FLT3以高水平表达,或FLT3突变引起FLT3受体和下游分子途径不受控制的诱导,可能是Ras活化。血液系统恶性肿瘤包括白血病、淋巴瘤(非霍奇金氏淋巴瘤)、霍奇金氏病(也叫霍奇金氏淋巴瘤)和骨髓瘤--例如急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、急性前髓细胞白血病(APL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓细胞样白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、未分化急性白血病(AUL)、退行发育大细胞性淋巴瘤(ALCL)、前淋巴细胞白血病(PML)、青少年粒单核细胞白血病(JMML)、成人T细胞ALL、急性髓细胞白血病伴骨髓三系病态造血(trilineagemyelodysplasia)(AML/TMDS)、混合谱系白血病(MLL)、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增殖性疾病(MPD)、多发性骨髓瘤(MM)和髓样肉瘤。参见Kottaridis,P.D.,R.E.Gale,等(2003),″Flt3 mutations andleukaemia(Flt3突变和白血病)″.BrJ Haematol 122(4):523-38。髓样肉瘤也与FLT3突变有关。参见Ansari-Lari,Ali等FLT3 mutations inmyeloid sarcoma(髓样肉瘤中的FLT3突变).British Journal ofHaematology.2004 Sep.126(6):785-91。
在约30%急性髓性白血病患者和少量急性淋巴细胞白血病或骨髓增生异常综合症患者中业已检测到FLT3突变。FLT3突变的患者往往预后差,且缓解时间缩短和无病生存率降低。有两种已知类型的FLT3的活化突变。一种是该受体近膜区(ITD突变)内的4-40个氨基酸重复(25-30%患者),另一种为激酶区的点突变(5-7%患者)。突变大部分涉及受体近膜区内氨基酸的短串联重复,导致酪氨酸激酶活性。鼠骨髓细胞中突变型FLT3受体的表达引起致命的骨髓增生异常综合征,初步研究(Blood.2002;100:1532-42)表明,突变型FLT3与其它白血病癌基因协作而赋予侵袭性更强的表型。
总之,综合这些结果提示,单独的激酶FLT3的特异性抑制剂提供了治疗造血系统疾病和血液系统恶性肿瘤的有吸引力的靶。
本领域已知的FLT3激酶抑制剂包括AG1295和AG1296;Lestaurtinib(也称为CEP 701,原来为KT-5555,Kyowa Hakko,许可给Cephalon);CEP-5214和CEP-7055(Cephalon);CHIR-258(ChironCorp.);EB-10和IMC-EB10(ImClone Systems Inc.);GTP 14564(Merk Biosciences UK);Midostaurin(也称为PKC 412 Novartis AG);MLN 608(许可给Millennium USA);MLN-518(原来为CT53518,COR Therapeutics Inc.,millennium Pharmaceuticals Inc.);MLN-608(Millennium Pharmaceuticals Inc.);SU-11248(Pfizer USA);SU-11657(Pfizer USA);SU-5416和SU 5614;THRX-165724(TheravanceInc.);AMI-10706(Theravance Inc.);VX-528和VX-680(VertexPharmaceuticals USA,Novartis得到批准(Switzerland),Merck&CoUSA);和XL 999(Exelixis USA)。以下的PCT国际专利申请和美国专利申请公开了另外的激酶调节剂(包括FLT3调节剂):WO2002032861、WO 2002092599、WO 2003035009、WO 2003024931、WO 2003037347、WO 2003057690、WO 2003099771、WO2004005281、WO 2004016597、WO 2004018419、WO 2004039782、WO 2004043389、WO 2004046120、WO 2004058749、WO2004058749、WO 2003024969和美国专利申请第20040049032。
也参见Levis,M.,K.F.Tse等2001″A FLT3 tyrosine kinaseinhibitor is selectively cytotoxic to acute myeloid leukemia blastsharboring FLT3 internal tandem duplication mutations(FLT3酪氨酸激酶抑制剂对带有FLT3内部串联重复突变的急性髓性白血病未成熟细胞有选择性细胞毒性)″.Blood 98(3):885-7;Tse KF等Inhibition ofFLT3-mediated transformation by use of a tyrosine kinase inhibitor(应用酪氨酸激酶抑制剂抑制FLT3介导的转化).Leukemia.Leukemia.2001 Jul;15(7):1001-10;Smith,B.Douglas等Single-agent CEP-701,a novel FLT3 inhibitor,shows biologic and clinical activity in patientswith relapsed or refractory acute myeloid leukemia(单一药剂 CEP-701-一种新的FLT3抑制剂在复发性或难治性急性髓性白血病患者中显示出生物活性和临床活性).Blood,May 2004;103:3669-3676;Griswold,Ian J.等Effects of MLN518,A Dual FLT3 and KIT Inhibitor,on Normal and malignant Hematopoiesis(FLT和KIT双重抑制剂MLN518对正常和恶性血细胞生成的影响).Blood,Jul 2004;[在印刷之前电子出版];Yee,Kevin W.H.等SU5416 and SU5614 inhibitkinase activity of wild-type and mutant FLT3 receptor tyrosine kinase(SU5416和SU5614抑制野生型和突变型FLT3受体酪氨酸激酶的激酶活性).Blood,Sep 2002;100:2941-294;O′Farrell,Anne-Marie等SU11248 is a novel FLT3 tyrosine kinase inhibitor with potent activity invitro and in vivo(SU11248是一种在体外和体内有有效活性的新的FLT酪氨酸激酶抑制剂).Blood,May 2003;101:3597-3605;Stone,R.M.等PKC 412 FLT3 inhibitor therapy in AML:results of a phase IItrial(AML的PKC 412 FLT3抑制剂治疗:II期试验结果).Ann Hematol.2004;83 Suppl 1:S89-90;和Murata,K.等Selective cytotoxicmechanism of GTP-14564,a novel tyrosine kinase inhibitor in leukemiacells expressing a constitutively active Fms-like tyrosine kinase 3(FLT3)(新的酪氨酸激酶抑制剂GTP-14564在表达组成型活性Fms样酪氨酸激酶3(FLT3)的白血病细胞中的选择性细胞毒性机理).J Biol Chem.2003 Aug 29;278(35):32892-8;Levis,Mark等Novel FLT3 tyrosinekinase inhibitors(新的FLT3酪氨酸激酶抑制剂).Expert Opin.Investing.Expert Opin.Investing.Drugs(2003)12(12)1951-1962;Levis,Mark等Small molecule FLT3 Tyrosine Kinase Inhibitors(小分子FLT3酪氨酸激酶抑制剂).Current Pharmaceutical Design,2004,10,1183-1193。
发明概述
本发明提供作为蛋白质酪氨酸激酶调节剂、尤其是FLT3抑制剂的新颖噻吩并嘧啶和噻吩并吡啶(式I和式II化合物),提供这样的化合物降低或抑制细胞或受治疗者中FLT3激酶活性的用途,以及这样的化合物用于预防或治疗受治疗者的细胞增生性疾病和/或FLT3相关疾病的用途。
本发明例证为包含式I或式II化合物和药学上可接受载体的药物组合物。本发明另外的例证为通过使任一式I和式II化合物和药学上可接受载体混合而制备的药物组合物。
根据以下本发明详细说明和权利要求,本发明的其它特征和优点将是显而易见的。
发明详述
定义
本文所用以下术语意欲具有以下含义(需要时在本说明书全文中提供另外的定义):
无论是单独使用或作为取代基的部分使用,术语“烯基”例如“C1-4烯基(芳基)”,指具有至少一个碳-碳双键的部分不饱和支链或直链单价烃基,此处双键来自于从母体烷基分子的2个相邻碳原子各移走一个氢原子,所述基团通过从单个碳原子移走一个氢原子来衍生。原子可以顺式(Z)或反式(E)构象的双键来定向。典型的烯基包括但不限于乙烯基、丙烯基、烯丙基(2-丙烯基)、丁烯基等等。实例包括C2-8烯基或C2-4烯基。
术语“Ca-b”(其中a和b为关于指定的碳原子数的整数)指含有a-b个碳原子的烷基、烯基、炔基、烷氧基或环烷基,或其中烷基作为前缀词根的基团的烷基部分。举例而言,C1-4表示含有1、2、3或4个碳原子的基团。
无论是单独使用或作为取代基的部分使用,术语“烷基”指饱和支链或直链单价烃基,其中该基团通过从单个碳原子移走一个氢原子而衍生。除非明确指出(例如通过使用限制性术语例如“末端碳原子”),否则可将取代基变量置于任何碳链原子上。典型的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基等等。实例包括C1-8烷基、C1-6烷基和C1-4烷基。
术语“烷氨基”指通过从烷基胺(例如丁胺)的氮上移走一个氢原子形成的基团,术语“二烷氨基”指通过从仲胺(例如二丁胺)的氮上移走一个氢原子形成的基团。在这两种情况下,可预见与该分子其余部分的连接点是氮原子。
无论是单独使用或作为取代基的部分使用,术语“炔基”指具有至少一个碳-碳三键的部分不饱和支链或直链单价烃基,此处三键来自于从母体烷基分子的2个相邻碳原子各移走2个氢原子,该基团通过从单个碳原子移走一个氢原子来衍生。典型的炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基等等。实例包括C2-8炔基或C2-4炔基。
术语“烷氧基”指通过从母体烷烃、烯烃或炔烃的羟基氧取代基上移走氢原子而衍生的饱和或部分不饱和支链或直链单价烃醇基。当意指特定饱和水平时,术语“烷氧基”、“烯氧基”和“炔氧基”以与烷基、烯基和炔基的定义一致来使用。实例包括C1-8烷氧基或C1-4烷氧基。
术语“烷氧基醚”指通过从羟基醚上的羟基氧取代基移走氢原子而衍生的饱和支链或直链单价烃醇基。实例包括1-羟基-2-甲氧基-乙烷基团和1-(2-羟基-乙氧基)-2-甲氧基-乙烷基团。
术语“芳烷基”指含有芳基取代基的C1-6烷基。实例包括苯甲基、苯乙基或2-萘甲基。其意指与该分子其余部分的连接点是所述烷基。
术语“芳香族的”指具有不饱和共轭π电子系统的环烃环系统。
术语“芳基”指通过从环系统的单个碳原子上移走一个氢原子而衍生的芳香族环烃环基。典型的芳基包括苯基、萘基、芴基、茚基、薁基、蒽基等等。
术语“芳氨基”指被芳基(例如苯基)取代的氨基(例如氨)。可以预见与该分子其余部分的连接点通过氮原子。
术语“苯并稠合环烷基”指双环稠合环系统基团,其中环之一为苯基,另一个为环烷基或环烯基环。典型的苯并稠合环烷基包括茚满基、1,2,3,4-四氢-萘基、6,7,8,9-四氢-5H-苯并环庚烯基、5,6,7,8,9,10-六氢-苯并环辛烯基等等。苯并稠合环烷基环系统为芳基子集。
术语“苯并稠合杂芳基”指双环稠合环系统基团,其中环之一为苯基,另一个为杂芳基环。典型的苯并稠合杂芳基包括吲哚基、二氢吲哚基、异吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、2,3-二氮杂萘基、喹唑啉基等等。苯并稠合杂芳基环为杂芳基子集。
术语“苯并稠合杂环基”指双环稠合环系统基团,其中环之一为苯基,另一个为杂环基环。典型的苯并稠合杂环基包括1,3-苯并二氧基(也称为1,3-亚甲二氧苯基)、2,3-二氢-1,4-苯并二喔星基(也称为1,4-亚乙二氧苯基)、苯并-二氢-呋喃基、苯并-四氢-吡喃基、苯并-二氢-噻吩基等等。
术语“羧烷基”指烷基化羧基,例如叔丁氧羰基,其中连接到该分子其余部分的点是羰基。
术语“环杂二酮基(cyclic heterodionyl)”指荷有2个羰基取代基的杂环化合物。实例包括噻唑烷二酮基、噁唑烷二酮基和吡咯烷二酮基。
术语“环烯基”指通过从含有至少一个碳-碳双键的烃环系统上移走一个氢原子而衍生的部分不饱和环烷基。实例包括环己烯基、环戊烯基和1,2,5,6-环辛二烯基。
术语“环烷基”指通过从单环碳原子上移走一个氢原子而衍生的饱和或部分不饱和单环或双环烃环基团。典型的环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环庚基和环辛基。另外的实例包括C3-8环烷基、C5-8环烷基、C3-12环烷基、C3-20环烷基、十氢萘基和2,3,4,5,6,7-六氢-1H-茚基。
术语“稠环系统”指双环分子,其中2个相邻原子存在于2个环部分的每一个中。任选可存在杂原子。实例包括苯并噻唑、1,3-苯并二氧杂环戊烯和十氢化萘。
用作环系统前缀的术语“杂”指用一个或多个独立选自N、S、O或P的原子取代至少一个环碳原子。实例包括其中1、2、3或4个环成员为氮原子的环;或0、1、2或3个环成员为氮原子和1个成员为氧或硫原子。
术语“杂芳烷基”指含有杂芳基取代基的C1-6烷基。实例包括呋喃甲基和吡啶丙基。意指连接到该分子其余部分的点为烷基。
术语“杂芳基”指通过从杂芳香环系统的环碳原子上移走一个氢原子而衍生的基团。典型的杂芳基包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三噁唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、吲嗪基、吲哚基、异吲哚基、苯并[b]呋喃基、苯并[b]噻吩基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、嘌呤基、4H-喹嗪基、喹啉基、异喹啉基、噌啉基、酞嗪基、喹唑啉基、喹喔啉基、1,8-萘啶基、蝶啶基等等。
术语“稠合杂芳基的环烷基”指双环稠合环系统基团,其中该环之一为环烷基,另一个为杂芳基。典型的稠合杂芳基的环烷基包括5,6,7,8-四氢-4H-环庚烯并(b)噻吩基、5,6,7-三氢-4H-环己烯并(b)噻吩基、5,6-二氢-4H-环戊烯并(b)噻吩基等等。
术语“杂环基”指通过从单个碳或氮环原子上移走一个氢原子而衍生的饱和或部分不饱和单环环基。典型的杂环基包括2H-吡咯、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、1,3-二氧戊环基、2-咪唑啉基(也称作4,5-二氢-1H-咪唑基)、咪唑烷基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、四唑基、哌啶基、1,4-二噁烷基、吗啉基、1,4-二噻烷基、硫代吗啉基、哌嗪基、氮杂环庚烷基、六氢-1,4-二氮杂基等等。
术语“取代的”指其中一个或多个氢原子业已被一个或多个官能团部分取代的核心分子。取代不限于核心分子,其也可发生在取代基上,此处该取代基成为连接基团。
术语“独立选自”指从一组取代基中选择的一个或多个取代基,其中所述取代基可相同或不同。
本发明揭示内容所用的取代基命名如下产生:首先指示拥有连接点的原子,然后是朝向末端链原子从左到右的的连接基团原子,其基本上如下:
(C1-6)烷基C(O)NH(C1-6)烷基(Ph)
或首先指示末端链原子,然后是朝向具有连接点的原子的连接基团原子,其基本上如下:
Ph(C1-6)烷基酰氨基(C1-6)烷基
两种中的任一种都是指下式基团:
从取代基画向环系统的线段表示可连接任何合适环原子的键。
当在式I或式II的任一实施方案中任何变量(例如R4)出现不止一次时,每一次的定义意欲独立。
本文所用术语″包含″、″包括″和″含有″以其开放非限制的含义使用。
命名
除非指出,否则化合物名称用本领域技术人员所熟知的命名规则通过以下方法得到:任一标准IUPAC命名参考文献,例如Nomenclatureof Organic Chemistry,Sections A,B,C,D,E,F和H,(Pergamon Press,Oxford,1979,Copyright 1979 IUPAC)和A Guide toIUPAC Nomenclature of Organic Compounds(Recommendations1993),(Blackwell Scientific Publications,1993,Copyright 1993IUPAC);或市购软件包例如Autonom(brand of nomenclature softwareprovided in the ChemDraw Ultraoffice suite marketed byCambridgeSoft.com);和ACD/Index NameTM(Advanced ChemistryDevelopment,Inc.出售的商业命名软件的商标,Toronto,Ontario)。
缩写
本文所用以下缩写意欲具有以下含义(若需要在说明书全文中提供另外的缩写词):
Boc 叔丁氧羰基
DCM 二氯甲烷
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲亚砜
DIEA 二异丙基乙胺
EDTA 乙二胺四乙酸
EDC 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐
EtOAc 乙酸乙酯
HOBT 1-羟基苯并三唑一水合物
HBTU 六氟磷酸O-苯并三氮唑-1-基-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓
i-PrOH 异丙醇
LC/MS(ESI)液相色谱/质谱(电喷雾电离)
MeOH 甲醇
NMM N-甲基吗啉
NMR 核磁共振
PS 聚苯乙烯
RT 室温
NaHMDS 六甲基二硅氮烷钠
TEA 三乙胺
TFA 三氟乙酸
THF 氢呋喃
TLC 薄层色谱
式I和式II
本发明包括选自式I和式II的化合物和其N-氧化物、其药学上可接受盐和其立体化学异构体:
其中:
q为0、1或2;
p为0或1;
Q为NH、N(烷基)、O或直接键;
X为N或CH;
Z为NH、N(烷基)或CH2;
B为芳基(其中所述芳基优选苯基)、环戊二烯基、环烷基(其中所述环烷基优选环戊基、环己基、环戊烯基或环己烯基)、杂芳基(其中所述杂芳基优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物,最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基)或9-10元苯并稠合杂芳基(其中所述9-10元苯并稠合杂芳基优选苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、异喹啉基或苯并[b]噻吩基);
R1为:
其中n为1、2、3或4;
Ra为氢、任选被R5取代的杂芳基(其中所述杂芳基优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、三唑基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物,最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基、三唑基或吡嗪基)、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的噁唑烷酮基、任选被R5取代的吡咯烷酮基、任选被R5取代的哌啶酮基、任选被R5取代的环杂二酮基、任选被R5取代的杂环基(其中所述杂环基优选吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、硫代吗啉基、硫代吗啉基-1,1-二氧化物、哌啶基、吗啉基或哌嗪基)、-COORy、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SRy、-SORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry、-NRwSO2Rx、-SO3Ry或-OSO2NRwRx;
Rbb为氢、卤素、芳基、杂芳基或杂环基;
R5为1个、2个或3个独立选自以下的取代基:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基、-C(1-4)烷基-OH或烷氨基;
Rw和Rx独立选自:氢、烷基、烯基、芳烷基(其中所述芳烷基的芳基部分优选苯基)或杂芳烷基(其中所述杂芳烷基的杂芳基部分优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物,最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基),或Rw和Rx任选可共同形成5-7元环,任选含有选自以下的杂部分:O、NH、N(烷基)、SO2、SO或S,优选选自:
Ry选自:氢、烷基、烯基、环烷基(其中所述环烷基优选环戊基或环己基)、芳基(其中所述芳基优选苯基)、芳烷基(其中所述芳烷基的芳基部分优选苯基)、杂芳烷基(其中所述杂芳烷基的杂芳基部分优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物,最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基)或杂芳基(其中所述杂芳基优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物,最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基);和
R3为任选存在的一个或多个取代基,其独立选自:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚,羟基、硫基(thio)、硝基、任选被R4取代的环烷基(其中所述环烷基优选环戊基或环己基)、任选被R4取代的杂芳基(其中所述杂芳基优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡喃基、噻喃基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡啶基-N-氧化物或吡咯基-N-氧化物;最优选吡咯基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、吡啶基、嘧啶基或吡嗪基)、烷氨基、任选被R4取代的杂环基(其中所述杂环基优选azapenyl、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、咪唑烷基、噻唑烷基、噁唑烷基、四氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶基、吗啉基或哌嗪基)、任选被R4取代的部分不饱和杂环基(其中所述部分不饱和杂环基优选四氢吡啶基、四氢吡嗪基、二氢呋喃基、二氢噁嗪基、二氢吡咯基或二氢咪唑基)、-O(环烷基)、任选被R4取代的吡咯烷酮、任选被R4取代的苯氧基、-CN、-OCHF2、-OCF3、-CF3、卤化烷基、任选被R4取代的杂芳氧基、二烷氨基、-NHSO2、烷基、硫基烷基或-SO2烷基;其中R4独立选自:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-CO2烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基或烷氨基。
下文所用术语″式I化合物”、“式II化合物”和“式I和式II化合物”意即也包括其N-氧化物、其药学上可接受盐和其立体化学异构体。
式I和式II的实施方案
在本发明的实施方案中:任选N-1或N-3(当X为N时)(对于环数目参见以下图1)的一个或多个上存在N-氧化物。
图1
图1图解本说明书所用标号从1到7的环原子。
本发明的优选实施方案为式I和式II化合物,其中存在以下一种或多种限制:
q为1或2;
p为0或1;
Q为NH、N(烷基)、O或直接键;
X为N;
Z为NH、N(烷基)或CH2;
B为芳基或杂芳基;
R1为:
其中n为1、2、3或4;
Ra为氢、任选被R5取代的杂芳基、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的噁唑烷酮基、任选被R5取代的吡咯烷酮基、任选被R5取代的哌啶酮基、任选被R5取代的环杂二酮基、任选被R5取代的杂环基、-COORy、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SRy、-SORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry、-NRwSO2Rx、-SO3Ry或-OSO2NRwRx;
Rbb为氢、卤素、芳基、杂芳基或杂环基;
R5为1个、2个或3个独立选自以下的取代基:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基、-C(1-4)烷基-OH或烷氨基;
Rw和Rx独立选自:氢、烷基、烯基、芳烷基或杂芳烷基,或Rw和Rx任选可共同形成5-7元环,任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO2、SO或S的杂部分;
Ry选自:氢、烷基、烯基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳烷基或杂芳基;和
R3为任选存在的一个或多个取代基,其独立选自:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、羟基、硫基、硝基、任选被R4取代的环烷基、任选被R4取代的杂芳基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、任选被R4取代的部分不饱和杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的吡咯烷酮、任选被R4取代的苯氧基、-CN、-OCHF2、-OCF3、-CF3、卤化烷基、任选被R4取代的杂芳氧基、二烷氨基、-NHSO2烷基、硫基烷基或-SO2烷基;其中R4独立选自:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-CO2烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基或烷氨基。
本发明的其它优选实施方案为式I和式II化合物,其中存在以下一种或多种限制:
q为1或2;
p为0或1;
Q为NH、O或直接键;
X为N;
Z为NH或CH2;
B为芳基或杂芳基;
R1为:
其中n为1、2、3或4;
Ra为氢、任选被R5取代的杂芳基、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的噁唑烷酮基、任选被R5取代的吡咯烷酮基任、任选被R5取代的哌啶酮基、任选被R5取代的环杂二酮基、任选被R5取代的杂环基、-COORy、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SRy、-SORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry、-NRwSO2Rx、-SO3Ry或-OSO2NRwRx;
Rbb为氢、卤素、芳基、杂芳基或杂环基;
R5为1个、2个或3个独立选自以下的取代基:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基、-C(1-4)烷基-OH或烷氨基;
Rw和Rx独立选自:氢、烷基、烯基、芳烷基或杂芳烷基,或Rw和Rx任选可共同形成5-7元环,任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO2、SO或S的杂部分;
Ry选自:氢、烷基、烯基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳烷基或杂芳基;和
R3为一个或多个任选存在的取代基,其独立选自:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、任选被R4取代的环烷基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的苯氧基、二烷氨基或-SO2烷基;其中R4独立选自:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-CO2烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基或烷氨基。
本发明的另外的优选实施方案为式I和式II化合物,其中存在以下一种或多种限制:
q为1或2;
p为0或1;
Q为NH、O或直接键;
Z为NH或CH2;
B为芳基或杂芳基;
X为N;
R1为:
其中n为1、2、3或4;
Ra为氢、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的杂环基、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry或-NRwSO2Rx;
Rbb为氢、卤素、芳基、杂芳基或杂环基;
R5为1个、2个或3个独立选自以下的取代基:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基、-C(1-4)烷基-OH或烷氨基;
Rw和Rx独立选自:氢、烷基、烯基、芳烷基或杂芳烷基,或Rw和Rx任选可共同形成5-7元环,任选含有选自O、NH、N(烷基)、SO2、SO或S的杂部分;
Ry选自:氢、烷基、烯基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳烷基或杂芳基;和
R3为一个选自以下的取代基:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、任选被R4取代的环烷基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的苯氧基、二烷氨基或-SO2烷基;其中R4独立选自:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-CO2烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基或烷氨基。
本发明尤其优选的实施方案为式I和式II化合物,其中存在以下一种或多种限制:
q为1或2;
p为0或1;
Q为NH、O或直接键;
Z为NH或CH2;
B为苯基或吡啶基;
X为N;
R1为:
其中
Rbb为氢、卤素、芳基或杂芳基;
和
R3为一个选自以下的取代基:烷基、烷氧基、杂环基、-O(环烷基)、苯氧基或二烷氨基。
本发明尤其最优选的实施方案为式I和式II化合物,其中存在以下一种或多种限制:
q为1或2;
p为0;
Q为NH或O;
Z为NH;
B为苯基或吡啶基;
X为N;
R1为:
其中
RbB为氢;
和
R3为一个选自以下的取代基:烷基、-O(环烷基)、苯氧基或二烷氨基。
药学上可接受盐
本发明化合物也可呈药学上可接受盐形式。
为了在医药上应用,本发明化合物的盐指无毒的“药学上可接受盐”。FDA批准的药学上可接受盐形式(Ref.International J.Pharm.1986,33,201-217;J.Pharm.Sci.,1977,Jan,66(1),p1)包括药学上可接受酸性/阴离子或碱性/阳离子盐。
药学上可接受酸性/阴离子盐包括和不限于乙酸盐、苯磺酸盐、苯甲酸盐、碳酸氢盐、酒石酸氢盐、溴化物、依地酸钙、樟脑磺酸盐、碳酸盐、氯化物、柠檬酸盐、二盐酸盐、依地酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、富马酸盐、glyceptate、葡糖酸盐、谷氨酸盐、乙醇酰基阿散酸盐、己基间苯二酚盐、海巴胺、氢溴酸盐、盐酸盐、羟萘甲酸盐、碘化物、伊西酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、溴甲烷,硝酸甲酯、硫酸甲酯、粘酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、泛酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐、聚半乳糖醛酸盐、水杨酸盐、硬脂酸盐、碱式乙酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、单宁酸盐、酒石酸盐、茶氯酸盐、甲苯磺酸盐和三碘化物(trithiodide)。有机或无机酸也包括和不限于氢碘酸、高氯酸、硫酸、磷酸、丙酸、乙醇酸、甲磺酸、羟乙基磺酸、草酸、2-萘磺酸、对甲基苯磺酸、环己烷氨基磺酸、糖二酸或三氟乙酸。
药学上可接受碱性/阳离子盐包括和不限于铝盐、2-氨基-2-羟甲基-丙-1,3-二醇(也称为三(羟甲基)氨基甲烷、tromethane或“TRIS”)、氨、苄星(benzathine)、叔丁胺、钙盐、葡糖酸钙、氢氧化钙、氯普鲁卡因、胆碱、胆碱碳酸氢盐、氯化胆碱、环己胺、二乙醇胺、乙二胺、锂盐、LiOMe、L-赖氨酸、镁盐、甲葡胺、NH3、NH4OH、N-甲基-D-葡糖胺、哌啶、钾盐、叔丁醇钾、氢氧化钾(含水)、普鲁卡因、奎宁、钠盐、碳酸钠、2-乙基己酸钠(SEH)、氢氧化钠、三乙醇胺(TEA)或锌盐。
前药
本发明在其范围内包括本发明化合物的前药。一般而言,这样的前药应为所述化合物的功能衍生物,其在体内易于转化为活性化合物。因此,在本发明治疗方法中,术语“给予”应包括用具体公开的化合物,或虽然对于某些本发明化合物具体公开揭示但其明显包含在本发明范围内的化合物或其前药,来治疗、改善或预防本文所述综合症、病况或疾病的手段。用于选择和制备合适的前药衍生物的常规方法阐述于例如“Design of Prodrugs”,H.Bundgaard编辑,Elsevier,1985中。
立体化学异构体
本领域技术人员应认识到,式I和式II化合物在其结构中可具有一个或多个不对称碳原子。本发明在其范围中意欲包括化合物的单对映体形式、外消旋混合物和其中存在过剩对映体的对映体混合物。
本文所用术语″单对映体″定义式I和式II化合物和其N-氧化物、加成盐、季胺或生理学上的功能衍生物的可能具有的纯手性形式。
通过应用本领域中已知的原则可得到立体化学纯异构体形式。可通过物理分离方法(例如分步结晶和色谱技术)分离非对映异构体,通过用光学活性酸或碱选择性结晶非对映异构体盐,或通过手性色谱,可将对映体彼此分离。也可从合适的立体化学纯原料或通过使用立体选择性反应合成制备纯立体异构体。
术语“异构体”指具有相同的组成和分子量但物理和/或化学性质不同的化合物。这样的物质具有相同数目和种类的原子,但结构不同。结构差异可为构造差异(几何异构体)或偏振光平面旋转能力差异(对映体)。
术语“立体异构体”指其原子的空间排列不同的具有同样构造的异构体。对映体和非对映异构体为立体异构体的实例。
术语“手性”指使其不能与其镜子影像重叠的分子结构特性。
术语“对映体”指一对彼此为镜像不能重叠的分子物质之一。
术语“非对映异构体”指不是镜子影像的立体异构体。
符号″R″和″S″代表手性碳原子周围取代基的构象。
术语“外消旋物”或“外消旋混合物”指由等摩尔量的两种对映体物质组成的组合物,其中该组合物没有旋光性。
术语“纯手性”指对映体纯度状态。
术语“旋光性”指纯手性分子或手性分子的非外消旋混合物旋转偏振光平面的程度。
术语“几何异构体”指取代基原子相对于碳-碳双键、环烷基环或桥联双环系统定向不同的异构体。碳-碳双键每一边的取代基原子(不是H)可为E或Z构象。在“E”(对侧)构象中,取代基相对于碳-碳双键而言在对侧;在“Z”(同侧)构象中,取代基相对于碳-碳双键而言定位在同一侧边。连接到碳环环的取代基原子(并非氢)可为顺式或反式构象。在“顺式”构象中,取代基相对于环平面而言是在同一侧;在“反式”构象中,取代基相对于环平面而言是在对侧。具有“顺式”和“反式”混合物的化合物被称为“顺式/反式”。
应该理解,用于制备本发明化合物的各种取代基立体异构体、几何异构体和其混合物可市购,可从市购原料合成制备,或可制备为异构体混合物然后用本领域一般技术人员所熟知的技术得到拆分的异构体。
本文所述异构体描述符“R”、“S”、“E”、“Z”、“顺式”和“反式”用作指示相对于核心分子的原子构象,其意欲如文献(IUPACRecommendations for Fundamental Stereochemistry(Section E),PureAppl.Chem.,1976,45:13-30)所定义来使用。
通过异构体特异性合成或从异构体混合物拆分,可将本发明化合物制备为单个异构体。常规拆分技术包括用光学活性的盐形成异构体对的每一异构体的游离碱(接着分步结晶和再生游离碱)、形成异构体对的每一异构体的酯或酰胺(接着色谱分离并除去手性辅助剂)或用制备性TLC(薄层色谱)或手性HPLC柱拆分原材料或终产物的异构体混合物。
多晶型
此外,本发明化合物可具有一种或多种多晶型或无定形结晶形式,其同样意欲包括在本发明范围中。另外,某些化合物可与水(即水合物)或常用机溶剂形成溶剂化物,这样的溶剂化物也意欲包括在本发明范围中。
N-氧化物
按照本领域已知的将三价氮转化为其N-氧化物形式的方法,可将式I和式II化合物转化为相应的N-氧化物形式。所述N-氧化反应通常可通过使式I(或式II)的原料与合适的有机或无机过氧化物反应来进行。合适的无机过氧化物包括例如过氧化氢、碱金属或碱土金属过氧化物,例如过氧化钠、过氧化钾;合适的有机过氧化物可包含过氧酸,例如过氧苯甲酸或卤素取代的过氧苯甲酸(例如3-氯过氧苯甲酸)、过氧链烷酸(例如过氧乙酸)、烷基氢过氧化物(例如叔丁基氢过氧化物)。合适的溶剂为例如水、低级醇(例如乙醇等等)、烃(例如甲苯)、酮(例如2-丁酮)、卤化烃(例如二氯甲烷)和这样的溶剂的混合物。
互变异构形式
某些式I和式II化合物也可以其互变异构形式存在。尽管在本申请书中没有明确指出,但这样的形式意欲包括在本发明范围内。
本发明化合物的制备
在制备本发明化合物的任何过程中,可能必须和/或理想的是保护任一有关分子的敏感基团或反应基团。这可通过借助常规保护基来完成,例如在以下文献中阐述的保护基:Protecting Groups,P.Kocienski,Thieme Medical Publishers,2000;和T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis,第三版,Wiley Interscience,1999。用本领域已知方法可在方便的后续阶段除去保护基。
通用反应流程
通过本领域技术人员已知方法可制备式I或II化合物。以下反应流程仅意即描绘本发明实例,无意限制本发明。
可如流程1所述通用合成路线所概述来合成式I化合物,其中Q为O,p、q、B、X、Z、R1和R3如式I所定义。用合适的存于溶剂例如异丙醇的羟基环胺IV在50℃-150℃温度处理合适的4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶III,能提供中间体V。用碱例如存于溶剂(例如四氢呋喃(THF))的氢化钠处理中间体V,接着加入合适的酰化剂VI,其中LG为合适的离去基团(例如氯化物、对硝基苯氧基或咪唑),能提供终产物I。4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶III可市购,或可通过已知方法制备(WO9924440);羟基环胺IV可市购,或可用已知方法衍生(JOC,1961,26,1519;EP314362)。酰化试剂VI可市购,或可如流程1所述制备。在碱例如三乙胺存在下,用合适的酰化试剂例如碳酰二咪唑或氯甲酸对硝基苯酯处理合适的R3BZH(其中Z为NH或N(烷基)),能提供VI。多种R3BZH试剂可市购,或可通过多种已知方法制备(例如Tet Lett 1995,36,2411-2414)。用合适的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶,通过与流程1所述相同的方法,可制备对应的式II的化合物。
流程1
作为选择,可如流程2所述的通用合成路线所概述来合成式I化合物,其中Q为O,Z为NH或N(烷基),p、q、B、X、R1和R3如式I所定义。用酰化剂例如碳酰二咪唑或氯甲酸对硝基苯酯(其中LG可为氯化物、对硝基苯氧基或咪唑)处理如流程1所述制备的醇中间体v,能提供酰化中间体VII。用合适的R3BZH(其中Z为NH或N(烷基))处理VII,能提供终产物I。 用合适的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶,通过与流程2所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程2
制备式I化合物(其中Q为O,Z为NH,p、q、B、X、R1和R3如式I所定义)的替代方法如流程3所阐述。在碱例如三乙胺存在下,用合适的异氰酸酯处理如流程1所述制备的醇中间体V,能提供终产物I。异氰酸酯可市购,或可通过已知方法制备(J.Org Chem,1985,50,5879-5881)。用合适的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程3所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程3
制备式I化合物(其中Q为NH或N(烷基),p、q、B、X、Z、R1和R3如式I所定义)的方法可如流程4所述的通用合成路线所概述。用存于溶剂例如异丙醇的N受护的氨基环胺VIII(其中PG为本领域技术人员已知的氨基保护基)在50℃-150℃温度处理合适的4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶III,能提供中间体IX。在本领域已知的标准条件下除去氨基保护基(PG),能提供化合物X。在碱例如二异丙基乙胺存在下,合适的试剂VI(其中Z为NH或N(烷基),LG可为氯化物、对硝基苯氧基或咪唑,或当Z为CH2时,用标准偶联试剂例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)或1-羟基苯并三唑(HOBT)经由与合适的R3BCH2CO2H偶联)使X的酰化,能提供终产物I。氨基环胺可市购,或通过已知方法得到(US 4822895;EP 401623)。酰化试剂VI可市购,或可如流程1所述制备。另外,通过用合适的异氰酸酯处理中间体X,可得到式I化合物,其中Z为NH。异氰酸酯可市购,或可通过已知方法制备(J.Org Chem,1985,50,5879-5881)。用合适的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程4所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程4
制备式I化合物(其中Q为直接键,Z为NH或N(烷基),而p、q、B、X、R1和R3如式I所定义)的方法通过如流程5所述通用合成路线来概述。用存于溶剂例如异丙醇的环氨基酯XI在50℃-150℃温度下与合适的4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶III反应,接着碱水解酯官能度,能提供中间体XII。用标准偶联试剂例如1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(EDC)或碳酰二咪唑,让合适的R3BZH(其中Z为NH或N(烷基))与XII偶联,能提供最终化合物I。用合适的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程5所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程5
也可如流程6所述来制备式I化合物,其中R1为Rbb,RbB为芳基或杂芳基,Q、p、q、B、X、Z和R3如式I所定义。用流程1-5所述反应次序,其中用XIII代替II从已知的6-溴-4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶XIII(WO9924440)可制备合适的溴代噻吩并嘧啶/溴代噻吩并吡啶XIV。在存于溶剂例如甲苯的钯催化剂例如二氯化双(三苯基膦)合钯存在下,于50℃-200℃温度用合适的芳基硼酸或芳基硼酸酯(其中R为H或烷基)处理溴化物XIV,能提供终产物I。硼酸/硼酸酯可市购,或通过已知方法制备(Synthesis 2003,4,469-483;Organicletters 2001,3,1435-1437)。用合适的6-溴代-4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程6所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程6
也可如流程7所述来制备式I化合物,其中R1为-CHCH(CH2)nRa,Q、p、q、B、X、Z和R3如式I所定义。用流程1-5所述反应次序,其中用XIII代替II,从已知的6-溴-4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶XIII(WO9924440)可制备合适的溴代噻吩并嘧啶/溴代噻吩并吡啶XIV。在存于溶剂例如二甲基甲酰胺的钯催化剂例如双(三苯基膦)二氯化钯存在下,于25℃-150℃温度用合适的乙烯基锡烷XV处理XIV,能提供烯基醇XVI。将醇XVI转化为本领域技术人员已知的合适离去基团例如甲磺酸盐,接着用合适的亲核杂环、杂芳基、胺、醇、磺酰胺或硫醇与XVII进行SN2取代反应,能提供最终化合物I。通过相同的方法用合适的顺式乙烯基锡烷可制备式I对应的顺式烯烃异构体。若Ra亲核试剂为硫醇,则进一步氧化硫醇能提供对应的亚砜和砜。若Ra亲核试剂为氨基,则用合适的酰化剂或磺酰化剂来酰化氮,能提供对应的酰胺、氨基甲酸酯、脲和磺酰胺。若所期需的Ra为COORy或CONRwRx,则这些可从对应的羟基衍化。在本领域已知条件下,将羟基氧化为酸接着形成酯或酰胺,能提供其中Ra为COORy或CONRwRx的实例。在本领域已知条件下,通过还原烯烃从对应的烯烃可得到具有R1为(CH2)nRa的式I化合物。用合适的6-溴代-4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程7所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程7
也可如流程8所述来制备式I化合物,其中R1为-CC(CH2)nRa,Q、p、q、B、X、Z和R3如式I所定义。用流程1-5所述反应次序,其中用XIII代替II,从已知的6-溴-4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶或吡啶XIII(WO9924440)可制备合适的溴代噻吩并嘧啶/溴代噻吩并吡啶XIV。在钯催化剂例如二氯化双(三苯基膦)合钯、铜催化剂例如碘化铜(I)、碱例如二乙胺和溶剂例如二甲基甲酰胺存在下,于25℃-150℃温度用合适的炔基醇处理XIV,能提供炔基醇XVIII。将醇XVIII转化为本领域技术人员已知的合适离去基团例如甲磺酸盐,接着用合适的亲核杂环、杂芳基、胺、醇、磺酰胺或硫醇与XIX进行SN2取代反应,能提供最终化合物I。若Ra亲核试剂为硫醇,则进一步氧化硫醇能提供对应的亚砜和砜。若Ra亲核试剂为氨基,则用合适的酰化剂或磺酰化剂来酰化氮,能提供对应的酰胺、氨基甲酸酯、脲和磺酰胺。若所期需的Ra为COORy或CONRwRx,则这些可从对应的羟基衍生。在本领域已知条件下,将羟基氧化为酸接着形成酯或酰胺,能提供其中Ra为COORy或CONRwRx的实例。用合适的6-溴代-4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶或吡啶通过与流程8所述相同的方法可制备对应的式II化合物。
流程8
代表性化合物
通过前述方法合成的本发明代表性化合物如下所示。具体化合物的合成实施例如下文所示。优选化合物为第5、9、11、15、18、19、25和26号化合物;尤其优选第5、9、11、25和26号化合物。
实施例1
(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯
a.1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-醇
用4-羟基哌啶(50.6mg,0.501mmol)处理存于异丙醇(2mL)的4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶(85.3mg,0.502mmol)溶液。于100℃过夜搅拌后,将反应物冷却到RT,在DCM(20mL)和H2O(20mL)之间分配。经Na2SO4干燥有机相并真空浓缩,得到固态标题化合物(67.8mg,58%),其无需进一步纯化或表征而用于下一步。
b.(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯
向存于DCM(1mL)的1,1’-碳酰二咪唑(23.5mg,0.145mmol)溶液中加入4-异丙基苯胺(19.6mg,0.145mmol)。于0℃搅拌2h后,加入如前述步骤制备的1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-醇(34.1mg,0.145mmol),并于RT搅拌。2h后加入DMAP(17.7mg,0.145mmol),在85℃搅拌过夜。然后将反应物冷却到RT,在DCM(10mL)和H2O(10mL)之间分配。有机相经Na2SO4干燥并真空浓缩。通过制备性薄层色谱(1∶1己烷/EtOAc)纯化,得到标题化合物,为淡棕色固体(9.8mg,17%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.7(br s,1H),7.46(br m,1H),7.30(m,3H),7.17(m,2H),6.65(br s,1H),5.10(m,1H),4.18(m,2H),3.75(m,2H),2.88(七重峰,1H),2.12(m,2H),1.87(m,2H),1.23(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值为396.2,实测值为397.2[M+1]+。
实施例2
(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯
向存于DCM(1mL)的1,1’-碳酰二咪唑(23.3mg,0.144mmol)溶液中加入4-异丙氧基苯胺(21.7mg,0.144mmol)。于0℃搅拌2h后,加入如实施例1a所制备的1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-醇(33.7mg,0.143mmol)并于RT搅拌。2h后加入DMAP(17.6mg,0.144mmol)并于85℃搅拌过夜。然后将反应物冷却到RT,在DCM(10mL)和H2O(10mL)之间分配。经Na2SO4干燥有机相并真空浓缩。通过制备性薄层色谱(1∶1己烷/EtOAc)纯化,得到标题化合物,为淡绿色固体(8.4mg,14%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ 8.7(br s,1H),7.44(br m,1H),7.29(m,3H),6.85(m,2H),6.56(br s,1H),5.09(m,1H),4.48(七重峰,1H),4.17(m,2H),3.75(m,2H),2.11(m,2H),1.87(m,2H),1.31(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值412.2,实测值413.2[M+1]+。
实施例3
(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
a.(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯
向存于DCM(40mL)和吡啶(10mL)的4-异丙基苯胺(3.02g,22.3mmol)溶液中分次加入氯甲酸对硝基苯酯(4.09g,20.3mmol),且搅拌约30秒,用冰浴短暂冷却。于rt搅拌1h后,用DCM(100mL)稀释该均相溶液,并用0.6M HCl(1×250mL)、0.025M HCl(1×400mL)、水(1×100mL)和1 M NaHCO3(1×100mL)洗涤。干燥(Na2SO4)有机层并浓缩,得到标题化合物,为浅桃色固体(5.80g,95%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.28(m,2H),7.42-7.32(m,4H),7.23(m,2H),6.93(br s,1H),2.90(h,J=6.9Hz,1H),1.24(d,J=6.9Hz,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值300.1,实测值601.3(2MH)+。
b.(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
于80℃将吡咯烷-3-醇(15.3mg,176μmol)、4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶(30.3mg,178μmol)(Maybridge)、DIEA(32μL,194μmol)和DMSO-d6(117μL)的混合物搅拌1h。然后使反应物冷却到rt,加入如前述步骤制备的(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(68.1mg,227μmol),接着加入NaH(干燥)(5.4mg,225μmol)。于rt将该混合物搅拌(松开盖)5分钟,直至大部分气体散出平息下来,然后于80℃搅拌20分钟。使反应物冷却到rt,用2.0M K2CO3(1×2mL)振荡,用DCM(2×2mL)萃取,且通过离心力分离各相。合并有机层,干燥(Na2SO4)并浓缩。让残留物通过快速色谱(3∶1 EtOAc/己烷),得到标题化合物,为灰白色粉末(49.1mg,72%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.47(s,1H),7.46(d,1H),7.28(m,2H),7.22(d,1H),7.16(m,2H),6.67(br s,1H),5.53(m,1H),4.12-3.90(m,4H),2.86(七重峰,1H),2.43-2.22(m,2H),1.22(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值382.2,实测值383.2(MH)+。
实施例4
(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
a.(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯
除了省略用水和1M NaHCO3洗涤外,基本上如实施例3a所述使用4-异丙氧基苯胺来制备。得到标题化合物为浅白紫色固体(16.64g,98%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.26(m,2H),7.40-7.28(m,4H),6.98(br s,1H),6.87(m,2H),4.50(七重峰,J=6.0Hz,1H),1.33(d,J=6.0Hz,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值316.1,实测值633.2(2MH)+。
b.(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
除了在80℃进行1h的SNAr反应和使用1.6当量的NaH外,基本上如实施例3b所述用4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶(Maybridge)和(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(在前述步骤中制备)来制备。用快速色谱(3∶1 EtOAc/己烷)得到标题化合物,为灰白色粉末(44.3mg,73%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.47(s,1H),7.46(d,J=6.1Hz,1H),7.28-7.21(m,3H),6.83(m,2H),6.55(br s,1H),5.52(m,1H),4.47(七重峰,J=6.1Hz,1H),4.14-3.90(m,4H),2.43-2.20(m,2H),1.31(d,J=6.1Hz,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值398.1,实测值399.2(MH)+。
实施例5
(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
除了在80℃进行1h SNAr反应外,基本上如实施例3b所述用4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Maybridge)和(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(在实施例3a中制备的)来制备。用快速色谱(3∶4己烷/丙酮)得到标题化合物(38.5mg,59%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),7.75(d,1H),7.42(d,1H),7.28(m,2H),7.16(m,2H),6.74(br s,1H),5.53(m,1H),4.21-3.92(m,4H),2.87(七重峰,1H),2.43-2.22(m,2H),1.22(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值382.2,实测值383.2(MH)+。
实施例6
(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
除了在80℃进行1h SNAr反应外,基本上如实施例3b所述用4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶(Maybridge)和(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(在实施例4a中制备的)来制备。用快速色谱(3∶4己烷/丙酮)得到标题化合物(43.1mg,69%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.54(s,1H),7.76(d,1H),7.43(d,1H),7.25(m,2H),6.83(m,2H),6.60(br s,1H),5.52(m,1H),4.48(七重峰,1H),4.22-3.92(m,4H),2.43-2.22(m,2H),1.31(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值398.1,实测值399.2(MH)+。
实施例7
(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯
除了使用1.4当量的NaH外,基本上如实施例3b所述用4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Maybridge)、4-羟基哌啶(Acros,低于1%水,K.F.)和(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(在实施例3a中制备的)来制备。用快速色谱(1∶4己烷/EtOAc)得到标题化合物(23.7mg,31%)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ8.60(s,1H),7.75(d,1H),7.46(d,1H),7.35-7.25(m,2H),7.18(m,2H),6.60(br s,1H),5.10(m,1H),4.36-4.25(m,2H),3.92-3.80(m,2H),2.88(七重峰,1H),2.20-2.07(m,2H),1.93-1.80(m,2H),1.23(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值396.2,实测值397.2(MH)+。
实施例8
(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯
除了使用1.7当量的NaH外,基本上如实施例3b所述用4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Maybridge)、4-羟基哌啶(Acros,低于1%水,K.F.)和(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(在实施例4a中制备的)来制备。用快速色谱(1∶4己烷/EtOAc)得到标题化合物(42.1mg,62%)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ8.60(s,1H),7.74(d,1H),7.44(d,1H),7.29(m,2H),6.85(m,2H),6.59(br s,1H),5.09(m,1H),4.49(七重峰,1H),4.35-4.21(br m,2H),3.91-3.79(m,2H),2.17-2.05(m,2H),1.92-1.78(m,2H),1.32(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值412.2,实测值413.2(MH)+。
实施例9
1-(4-异丙基-苯基)-3-(1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
向4-氯-噻吩并[2,3-d]嘧啶(Maybridge)(25.4mg,149μmol)、3-(叔丁氧羰基氨基)吡咯烷(TCI America)(27.1mg,146μmol)和DIEA(27.5μL,166μmol)的混合物中加入DMSO(100μL),于100℃将反应物搅拌20分钟。使反应溶液冷却到rt,一次性加入TFA(230μL,2.98mmol),于100℃将该反应物搅拌5分钟。冷却到rt后,用DCM(2mL)和2.5M NaOH(2mL)分配该反应物,收集有机层,不干燥而浓缩,得到中间体吡咯烷基胺,其无需进一步纯化或表征立即用于下一步。向该中间体中加入如实施例3a中所述制备的(4-异丙基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(58.8mg,196μmol)和CH3CN(100μL),在100℃将反应物加热15分钟。冷却到rt后,用DCM(2mL)和2M K2CO3(2mL)分配该反应物,用DCM(1×2mL)萃取水相,合并有机层,干燥(Na2SO4)并浓缩。用硅胶快速色谱(1∶1己烷/丙酮)纯化,得到标题化合物(26.3mg,47%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.28(s,1H),7.26-7.21(m,3H),7.13(m,2H),7.09(d,1H),7.00(br s,1H),6.25(br d,1H),4.60(m,1H),3.96-3.79(m,4H),2.84(七重峰,1H),2.30-2.14(m,2H),1.20(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值381.2,实测值382.2(MH)+。
实施例10
1-(4-异丙氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
基本上如实施例9所述用如实施例4a所制备的(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯来制备。用快速色谱(1∶1己烷/丙酮),得到标题化合物(25.8mg,45%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ8.31(s,1H),7.29(d,1H),7.19(m,2H),7.11(d,1H),6.81(m,2H),6.75(br s,1H),5.90(br d,1H),4.59(m,1H),4.46(七重峰,1H),4.02-3.90(m,1H),3.89-3.76(m,3H),2.32-2.15(m,2H),1.30(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值397.2,实测值398.2(MH)+。
实施例11
1-(4-异丙基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
基本上如实施例9所述用4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Maybridge)来制备。用快速色谱(1∶2己烷/丙酮),得到标题化合物(17.2mg,30%)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ8.32(s,1H),7.71(d,1H),7.36(br s,1H),7.34(d,1H),7.27(m,2H),7.12(m,2H),6.76(br d,1H),4.62(m,1H),3.87-3.66(m,4H),2.84(七重峰,1H),2.32-2.15(m,2H),1.20(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值381.2,实测值382.2(MH)+。
实施例12
1-(4-异丙氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
基本上如实施例9所述用4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(Maybridge)和如实施例4a所制备的(4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯来制备。用快速色谱(1∶2→1∶3己烷/丙酮),得到标题化合物(23.3mg,39%)。1HNMR(300MHz,CDCl3)δ8.34(s,1H),7.71(d,1H),7.34(d,1H),7.22(m,2H),7.14(br s,1H),6.81(m,2H),6.48(br d,1H),4.60(m,1H),4.45(七重峰,1H),3.94-3.74(m,4H),2.27-2.16(m,2H),1.30(d,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值397.2,实测值398.2(MH)+。
实施例13
1-(4-苯氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
a.(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-氨基甲酸叔丁酯
将存于异丙醇(10mL)的4-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(400mg,2.35mmol)、吡咯烷-3-基-氨基甲酸叔丁酯(436mg,2.35mmol)、二异丙基乙胺(285mg,2.82mmol)的溶液加热到100℃ 1hr。让得到的混合物冷却到RT,倒入乙酸乙酯(50mL)中,用水(25mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层,浓缩,通过硅胶色谱(5%MeOH/EtOAc)纯化,得到标题化合物(645mg,86%产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.34(s,1H),8.02(d,1H),7.32(d,1H),4.23(m,1H),4.18-3.92(m,3H),3.78(m,1H),2.26(m,1H),2.04(m,1H),1.42(s,9H)。LC/MS(ESI):质量计算值320.1,实测值321.2(MH)+。
b.1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐
将(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-氨基甲酸叔丁酯(645mg,2.02mmol)、2M HCl/Et2O(4mL)和CH2Cl2(20mL)的溶液于RT搅拌16h。过滤得到的固体,用EtOAc洗涤,得到标题化合物,为灰白色固体(491mg,95%)。LC/MS(ESI):质量计算值220.1,实测值221.1(MH)+。
c.1-(4-苯氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
向存于CH2Cl2(0.5mL)的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐(21mg,0.082mmol)和二异丙基乙胺(17.3mg,0.172mmol)的溶液中加入异氰酸酯4-苯氧基苯(21mg,0.99mmol)。于RT将得到的溶液搅拌16h,然后倒入1M HCl(5mL)中,用CH2Cl2(10mL)萃取。经无水硫酸钠干燥有机层,浓缩并通过硅胶色谱(2%MeOH/CH 2 Cl 2 )纯化,得到标题化合物(17mg),为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.36(s,1H),8.05(d,1H),7.35-7.28(m,5H),7.05(m,1H),6.92(m,4H),4.49(m,1H),4.22-3.98(m,3H),3.87(m,1H),2.36(m,1H),2.11(m,1H)。LC/MS(ESI):质量计算值431.1,实测值432.1(MH)+。
实施例14
1-(4-吗啉-4-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
a.(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯;盐酸盐
将存于THF(2.0mL)中的氯甲酸对硝基苯酯(798mg,3.96mmol)溶液在空气中经约10秒通过注射器迅速加入到存于THF(8.8mL)中的搅拌过的4-吗啉-4-基-苯基胺(675mg,3.79mmol)溶液中,且“即刻”形成大量灰色沉淀。立即盖上反应物,在“rt”搅拌30分钟(小瓶自然升温),然后过滤。用干THF(2×10mL)洗涤灰色滤饼,在高真空下于80℃干燥,得到标题化合物,为灰色粉末(1.361g,95%)。一部分用CDCl3和0.5M柠檬酸三钠水溶液分配产生可溶的CDCl3-游离碱:1H-NMR(300MHz,CDCl3)δ8.28(m,2H),7.42-7.31(m,4H),6.95-6.88(m,3H),3.87(m,4H),3.14(m,4H)。
b.1-(4-吗啉-4-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
将如实施例13b所述制备的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐(15mg,0.059mmol)、二异丙基乙胺(12.4mg,0.123mmol)、(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(22.2mg,0.059mmol)和乙腈(0.5mL)的溶液于90℃加热2h。将得到的溶液倒入CH2Cl2(10mL)中,序贯用1M NaOH(5mL)和H2O(5mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层,浓缩并通过硅胶色谱(2%MeOH/CH2Cl2)纯化,得到标题化合物(15mg),为白色固体。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.35(s,1H),8.04(d,1H),7.34(d,1H),7.23(m,2H),6.90(m,2H),4.48(m,1H),4.22-3.97(m,3H),3.87-3.79(m,5H),3.03(m,4H),2.35(m,1H),2.10(m,1H)。LC/MS(ESI):质量计算值424.2,实测值425.1(MH)+。
实施例15
1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
a.2-环丁氧基-5-硝基-吡啶
将存于THF(30mL)中的2-氯-5-硝基吡啶(7.12g,45.0mmol)和环丁醇(3.40g,47.2mmol)的混合物于0℃剧烈搅拌,同时在空气中经约10-20秒分三次加入NaH(1.18g,46.7mmol)(小心:有大量气体产生)。用另外的THF(5mL)漂洗反应残留物,接着在氩气正压下于冰浴中搅拌1-2分钟以上的时间。然后移走冰浴,于“rt”将棕色均相溶液搅拌1h。减压下于80℃浓缩反应物,将其溶于0.75M EDTA(四钠盐)(150mL)中,用DCM(1×100mL,1×50mL)萃取。干燥(Na2SO4)合并的有机层,浓缩,溶于MeOH(2×100mL)中,减压下于60℃浓缩,得到标题化合物,为稠厚的暗琥珀色油状物,其静置时结晶(7.01g,80%)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ9.04(dd,J=2.84和0.40Hz,1H),8.33(dd,J=9.11和2.85Hz,1H),6.77(dd,J=9.11和0.50Hz,1H),5.28(m,1H),2.48(m,2H),2.17(m,2H),1.87(m,1H),1.72(m,1H)。
b.6-环丁氧基-吡啶-3-胺
将氩气轻轻充入含有10%w/w Pd/C(485mg)的烧瓶,同时沿着烧瓶侧边慢慢加入MeOH(50mL),接着以约5mL分批加入存于MeOH(30mL)中的如前述步骤所制备的2-环丁氧基-5-硝基-吡啶(4.85g,25mmol)的溶液。(小心:在空气存在下向Pd/C中大量加入挥发性有机物可能引起火灾。)然后一次性排空烧瓶中的气体,在H2气囊压力下于rt搅拌2h。然后过滤反应物,浓缩清澈的琥珀色滤出液,溶于甲苯(2×50mL)以除去残留的MeOH,减压下浓缩,得到粗标题化合物,为带有微弱甲苯气味的半透明的深棕色油状物(4.41g,“108%”粗产率)。1H NMR(300MHz,CDCl3)δ7.65(d,J=3.0Hz,1H),7.04(dd,J=8.71和2.96Hz,1H),6.55(d,J=8.74Hz,1H),5.04(m,1H),2.42(m,2H),2.10(m,2H),1.80(m,1H),1.66(m,1H)。LC-MS(ESI):质量计算值164.1,实测值165.2(MH+)。
c.(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯
用存于甲苯(28mL)的氯甲酸对硝基苯酯(5.54g,27.5mmol)均相溶液于rt一次性处理如前述步骤所制备的6-环丁氧基-吡啶-3-胺(4.41g,推测25mmol)和CaCO3(3.25g,32.5mmol)(10微米粉末)的混合物,于“rt”搅拌(反应物自然升温)2h。然后直接将反应混合物上样到快速硅胶柱(95∶5 DCM/MeOH→9∶1 DCM/MeOH)上,得到5.65g物质,其通过用热甲苯(1×200mL)研磨进一步纯化,得到标题化合物(4.45g,54%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.28(m,2H),8.12(d,1H),7.81(m,1H),7.39(m,2H),6.85(br s,1H),6.72(d,1H),5.14(m,1H),2.45(m,2H),2.13(m,2H),1.84(m,1H),1.68(m,1H)。LC-MS(ESI):质量计算值329.1,实测值330.1(MH+)。
d.1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
除了用(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯代替(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基苯酯盐酸盐外,其基本上如实施例14所述来制备。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.35(s,1H),8.05(m,2H),7.71(dd,1H),7.33(d,1H),6.68(d,1H),5.02(m,1H),4.47(m,1H),4.22-3.97(m,3H),3.85(m,1H),2.47-2.31(m,3H),2.08(m,3H),1.82(m,1H),1.69(m,1H)。LC/MS(ESI):质量计算值410.2,实测值411.1(MH)+。
实施例16
1-(4-环己基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
a.(4-环己基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯
除了用4-环己基苯胺代替4-异丙基苯胺外,其基本上如实施例3a所述来制备。1H NMR(DMSO-d6)δ10.37(br,1H),8.30(d,J=9.30Hz,2H),7.52(d,J=9.00Hz,2H),7.41(d,J=8.10Hz,2H),7.18(d,J=8.70Hz,2H),1.18-1.82(11H)。
b.1-(4-环己基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
用(4-环己基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯代替(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基苯酯盐酸盐,其基本上如实施例14所述来制备。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ8.36(s,1H),8.05(d,1H),7.34(d,1H),7.23(m,2H),7.09(m,2H),4.48(m,1H),4.22-3.98(m,3H),3.86(m,1H),2.46-2.32(m,2H),2.10(m,1H),1.84-1.71(m,5H),1.47-1.22(m,5H)。LC/MS(ESI):质量计算值421.2,实测值422.1(MH)+。
实施例17
1-(4-溴代-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
用异氰酸4-溴代苯酯代替异氰酸4-苯氧基苯酯,其基本上如实施例13所述来制备。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.36(s,1H),8.05(d,1H),7.38-7.29(m,5H),4.48(m,1H),4.22-3.98(m,3H),3.87(m,1H),2.37(m,1H),2.12(m,1H)。LC/MS(ESI):质量计算值417.0,实测值419.9(MH)+。
实施例18
1-(4-二乙氨基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐
将存于DCM(30mL)中的N,N-二乙基-苯-1,4-二胺(2.21g,13.5mmol)溶液在空气中经2分钟迅速逐滴加入到存于DCM(7.4mL)中的搅拌过的氯甲酸对硝基苯酯(2.86g,14.2mmol)溶液(其置于rt水浴冷却的敞口烧杯中)中。于rt将得到的混合物搅拌30分钟,然后过滤。用研钵和杵将滤饼弄成粉末,用DCM(20mL)振荡1分钟,过滤,如前将滤饼弄成粉末,得到标题化合物,为易处理的米色粉末(4.037g,82%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.77(br s,1H),10.85(br s,1H),8.33(m,2H),7.81(m,2H),7.72(m,2H),7.57(m,2H),3.52(m,4H),1.04(t,6H)。
b.1-(4-二乙氨基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
将如实施例13b所述制备的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐(48mg,190μmol)、TEA(58μL,414μmol)、CHCl3(300μL)和(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(77mg,210μmol)的溶液于80℃搅拌20分钟,然后用DCM(2mL)和2.5M NaOH(2mL)分配。用DCM(1×2mL)萃取水相,合并有机层,干燥(Na2SO4)并浓缩。用C18HPLC,接着通过硅胶快速色谱柱(EtOAc洗脱液)纯化残留物,得到标题化合物(14.7mg,19%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(s,1H),7.72(d,1H),7.38(d,1H),7.05(br m,2H),6.61(br m,2H),6.19(br s,1H),5.10(br s,1H),4.61(br s,1H),4.13(m,1H),3.91(m,2H),3.71(m,1H),3.32(br m,4H),2.31(m,1H),2.03(m,1H),1.13(t,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值410.2,实测值411.1(MH)+。
实施例19
1-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
a.(4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐
于室温向存于70mL无水THF中的搅拌过的4.9g(30.4mmol)4-吡咯烷-1-基-苯基胺溶液中逐滴加入存于16mL无水THF的6.4g(32mmol)氯甲酸对硝基苯酯溶液。加完后将该混合物搅拌1h,然后过滤。首先用无水THF(2x10mL)然后用无水DCM(3x10mL)洗涤沉淀物,真空干燥,得到10g灰白色固体。1H-NMR(300MHz,CD3OD):10.39(s,1H),8.32(d,2H),7.73(d,2H),7.60(d,2H),7.48(d,2H),3.86-3.68(bs,4H),2.35-2.24(bs,4H)。LC/MS(ESI):328(MH)+。
b.1-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲
基本上如实施例18所述用如前述步骤所述的(4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐代替(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐来制备。如下纯化:过滤合并的有机层,用DCM(1×2mL)洗涤滤饼,得到粉状标题化合物(11mg;14%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.40(s,1H),8.20(d,1H),7.90(br s,1H),7.40(d,1H),7.15(m,2H),6.44(m,2H),6.41(br s,1H),4.33(m,1H),4.15-3.80(br m,3H),3.74(br m,1H),3.15(m,4H),2.23(m,1H),1.96(m,1H),1.91(m,4H)。LC/MS(ESI):质量计算值408.2,实测值409.1(MH)+。
实施例20
1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
a.(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯
将存于异丙醇(10mL)的4-氯噻吩并[3,2-d]嘧啶(400mg,2.35mmol)、哌啶-4-基-氨基甲酸叔丁酯(470mg,2.35mmol)、二异丙基乙胺(285mg,2.82mmol)的溶液加热到100℃ 2hr。让得到的混合物冷却到RT,倒入乙酸乙酯(50mL)中,用水(25mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层,浓缩并通过硅胶色谱(3%MeOH/EtOAc)纯化,得到标题化合物(672mg,86%产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.34(s,1H),8.02(d,1H),7.36(d,1H),4.76(m,2H),3.72(m,1H),3.38(m,2H),2.02(m,2H),1.58-1.42(m,2H),1.42(s,9H)。LC/MS(ESI):质量计算值334.2,实测值335.2(MH)+。
b.1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-胺
将(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-氨基甲酸叔丁酯(672mg,2.01mmol)、TFA(5mL)和CH2Cl2(10mL)的溶液于RT搅拌16h。浓缩反应混合物,然后用CH2Cl2(100mL)稀释,序贯用1N NaOH(50mL)和盐水(50mL)洗涤。经无水硫酸钠干燥有机层并浓缩,得到标题化合物,为油状物(290mg,62%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.58(s,1H),7.72(d,1H),7.42(d,1H),4.74(m,2H),3.23(m,2H),3.02(m,1H),2.02(m,2H),1.42(m,4H),1.42(s,9H)。LC/MS(ESI):质量计算值234.1,实测值235.1(MH)+。
c.1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
用如前述步骤所述制备的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-胺代替1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐,并用(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(实施例15c)代替(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐,基本上如实施例18b所述来制备。也用600μL 95∶5 CHCl3/MeOH代替300μL CHCl3以改进反应成分的溶解度。如下所述纯化:用DCM(2mL)稀释粗反应物并过滤。用DCM(1×2mL)洗涤滤饼并干燥,得到固态标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,1H),8.26(br s,1H),8.21(d,1H),8.07(d,1H),7.74(dd,1H),7.44(d,1H),6.67(d,1H),6.25(d,1H),5.03(p,1H),4.57(m,2H),3.85(m,1H),3.40(m,2H),2.35(m,2H),2.06-1.93(m,4H),1.75(m,1H),1.61(m,1H),1.45(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值424.2,实测值425.1(MH)+。
实施例21
1-(4-环己基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
用如实施例20b所述制备的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-胺代替1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐,并用(4-环己基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(实施例16a)代替(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐,基本上如实施例18所述来制备。如实施例20c所述纯化标题化合物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(s,1H),8.24(br s,1H),8.21(d,1H),7.45(d,1H),7.27(m,2H),7.06(m,2H),6.16(d,1H),4.56(m,2H),3.85(m,1H),3.41(m,2H),2.39(m,1H),1.98(m,2H),1.80-1.65(m,5H),1.45(m,2H),1.34(m,4H),1.21(m,1H)。LC/MS(ESI):质量计算值435.2,实测值436.1(MH)+。
实施例22
1-(4-苯氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
将异氰酸4-苯氧基苯酯(35mg,170μmol)加入到存于DCM(300μL)中的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-胺(35mg,150μmol)(实施例20b)溶液中。于rt将该溶液搅拌过夜,此时其成为浆液。然后用DCM(2mL)和2.0M K2CO3(2mL)分配反应物,用9∶1 DCM/MeOH(2×2mL)萃取水相,过滤合并的有机层。干燥(Na2SO4)该清澈的滤出液,浓缩并通过C18 HPLC接着通过碳酸氢盐固相萃取柱纯化,得到标题化合物(46.6mg,70%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.57(s,1H),7.72(d,1H),7.42(d,1H),7.33(m,2H),7.22(m,2H),7.10(m,1H),6.97(m,4H),6.19(br s,1H),4.76(m,2H),4.54(d,1H),4.08(m,1H),3.30(m,2H),2.16(m,2H),1.45(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值445.2,实测值446.1(MH)+。
实施例23
1-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
用1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-胺(实施例20b)代替1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-胺盐酸盐,并用(4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(实施例19a)代替(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐,基本上如实施例18所述来制备。另外,反应溶剂为用DMSO-d6(300μL)代替CHCl3(300μL)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),7.71(d,1H),7.41(d,1H),7.03(m,2H),6.49(m,2H),5.85(br s,1H),4.70(m,2H),4.40(d,1H),4.05(m,1H),3.32-3.22(m,6H),2.10(m,2H),2.00(m,4H),1.37(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值422.2,实测值423.1(MH)+。
实施例24
1-(4-吗啉-4-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲
除了用(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(实施例14a)代替(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯外,其基本上如实施例20c所述来制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.56(s,1H),7.71(d,1H),7.41(d,1H), 7.13(m,2H),6.86(m,2H),6.07(br s,1H),4.73(m,2H),4.51(d,1H),4.06(m,1H),3.85(m,4H),3.28(m,2H),3.12(m,4H),2.13(m,2H),1.41(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值438.2,实测值439.1(MH)+。
实施例25
(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
a.1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-醇
将4-氯-噻吩并[3,2-d]嘧啶(0.985g,5.78mmol)加入到外消旋的3-吡咯烷醇(0.527g,6.06mmol)、DIPEA(1.10mL,6.31mmol)和DMSO(1.5mL)的混合物中。于“rt”将混合物搅拌2分钟,在此期间自然升温并成为几乎均相的溶液。然后于100℃将反应物搅拌10分钟,使得到的均相深棕红色溶液冷却到rt,然后在用EtOAc(1×20mL)萃取前用水(约17mL)振荡。用4M NaCl(1×20mL)洗涤有机层,干燥(Na2SO4)并浓缩,得到约150mg标题化合物。另外的标题化合物如下获得:合并水相(约40mL),用EtOAc(1×300mL)萃取,干燥有机层(Na2SO4)并浓缩,得到粉状物。合并两次有机萃取得到的粉状物,得到911mg标题化合物(71%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(s,1H),8.18(d,1H),7.39(d,1H),5.12(br s,1H),4.43(br s,1H),4.05-3.68(br m,4H),2.12-1.90(m,2H)。
b.(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
将(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯(79mg,240μmol)(实施例15c)加入到如前述步骤所制备的1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-醇(44mg,200μmol)、DIPEA(108μL,620μmol)和DMSO(200μL)的均相rt溶液中。在100℃将得到的混合物搅拌20分钟,得到均相溶液,使其冷却到rt。然后用2M K2CO3(2mL)和DCM(2mL)分配反应物,用DCM(1×2mL)萃取水相,干燥(Na2SO4)合并的有机层并浓缩。通过C18 HPLC纯化残留物,接着通过碳酸氢盐柱萃取固相,得到标题化合物(23.0mg,28%)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.53(s,1H),8.04(s,1H),7.78(d,1H),7.74(d,1H),7.41(d,1H),6.83(br s,1H),6.68(d,1H),5.52(m,1H),5.10(p,1H),4.16(m,2H),4.11-3.91(m,2H),2.49-2.24(m,3H),2.11(m,2H),1.82(m,1H),1.65(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值411.1,实测值412.1(MH)+。
实施例26
(4-苯氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
除了用异氰酸4-苯氧基苯酯代替(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯并用1.1eq DIPEA(38μL)代替3.1eq DIPEA外,基本上如实施例25所述来制备,在100℃搅拌20分钟前于rt将反应物搅拌1hr。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.54(s,1H),7.75(d,1H),7.41(d,1H),7.38-7.29(m,4H),7.08(m,1H),6.98(m,4H),6.81(br s,1H),5.54(m,1H),4.17(m,2H),4.04(m,2H),2.35(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值432.1,实测值433.1(MH)+。
实施例27
(4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
基本上如实施例25所述用(4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(实施例19a)代替(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯来制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.55(s,1H),7.75(d,1H),7.41(d,1H),7.20(m,2H),6.51(m,2H),6.37(br s,1H),5.52(m,1H),4.21-3.95(m,4H),3.25(m,4H),2.32(m,2H),1.99(m,4H)。LC/MS(ESI):质量计算值409.2,实测值410.1(MH)+。
实施例28
(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
用(4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(实施例14a)代替(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯,其基本上如实施例25所述来制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.54(s,1H),7.75(d,1H),7.41(d,1H),7.28(m,2H),6.87(m,2H),6.63(br s,1H),5.52(m,1H),4.21-3.93(m,4H),3.85(m,4H),3.10(m,4H),2.41-2.24(m,2H)。LC/MS(ESI):质量计算值425.1,实测值426.1(MH)+。
实施例29
(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯
用(4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯盐酸盐(实施例18a)代替(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸4-硝基-苯酯,其基本上如实施例25所述来制备。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.53(s,1H),7.73(d,1H),7.40(d,1H),7.19(m,2H),6.63(m,3H),5.51(m,1H),4.19-3.90(m,4H),3.31(q,4H),2.40-2.21(m,2H),1.12(t,6H)。LC/MS(ESI):质量计算值411.2,实测值412.2(MH)+。
生物学活性
在测定本发明范围内的化合物的生物学活性中实施以下代表性测定。其以非限制性方式用于阐明本发明。
将抑制FLT3酶活性、MV4-11增殖和Baf3-FLT3磷酸化作为特异性抑制FLT3酶和依赖于FLT3活性的细胞过程的例证。抑制Baf3细胞增殖用作对本发明范围化合物的FLT3非依赖性细胞毒性的检验。本文所有实施例都显示出显著的特异性抑制FLT3激酶和FLT3依赖性细胞反应。本发明化合物也能渗透细胞。
FLT3荧光偏振激酶测定
FLT3 FP测定使用荧光标记的磷酸肽和抗磷酸酪氨酸抗体,后两者包含在Invitrogen供应的Panvera磷酸酪氨酸激酶试剂盒(Green)中。当FLT3使聚Glu4Tyr磷酸化时,磷酸化聚Glu4Tyr从抗磷酸酪氨酸抗体上取代荧光标记的磷酸肽,由此降低FP值。在以下条件下让FLT3激酶反应物在室温温育30分钟:存于DMSO中的10nM FLT3571-993、20ug/mL聚Glu4Tyr、150uM ATP、5mM MgCl2、1%化合物。通过加入EDTA终止激酶反应。加入荧光标记的磷酸肽和抗磷酸酪氨酸抗体,在室温温育30分钟。
所有数据点皆为三份平行样品的平均值。用GraphPad Prism、用多参数S形剂量-反应(可变斜率)公式来进行非线性回归拟合,进行抑制和IC50数据分析。激酶抑制的IC50代表与DMSO溶媒对照比较,导致激酶活性受到50%抑制的化合物的剂量。
MV4-11和Baf3细胞的生长抑制
在白血病细胞系MV4-11(ATCC编号:CRL-9591)中测量FLT3特异性生长抑制。MV4-11细胞来自儿童期急性髓单核细胞白血病患者,其伴有导致MLL基因重排的11q23易位并含有FLT3-ITD突变(AML亚型M4)(1,2)。当没有活性FLT3ITD时,MV4-11细胞不能生长和存活。
将IL-3依赖性鼠b细胞淋巴瘤细胞系Baf3用作对照,以通过测量本发明化合物引起的非特异性生长抑制来确证本发明化合物的选择性。
为了测量试验化合物的增殖抑制,使用基于荧光素酶的CellTiterGlo试剂(Promega)。在100ul含有青霉素/链霉素、10%FBS和对于MV4-11和Baf3细胞分别含1ng/ml GM-CSF或1ng/ml IL-3的RPMI培养基中以每孔10,000个细胞来进行细胞接种。
将化合物稀释液或0.1%DMSO(溶媒对照)加入到细胞中,使细胞在标准细胞生长条件(37℃,5%CO2)下生长72小时。总细胞生长以第0天的细胞数目的发光计数(相对光单位RLU)与第3天(生长和/或化合物处理72小时)的总细胞数目的发光计数比较的差异来量化。100%的生长抑制定义为等于第0天的RLU读数。0%抑制定义为生长的第三天DMSO溶媒对照的RLU信号。所有数据点皆为三份平行样品的平均值。生长抑制的IC50代表导致DMSO溶媒对照第3天的总细胞生长受到50%抑制的化合物的剂量。用GraphPad Prism、用多参数S形剂量-反应(可变斜率)公式来进行非线性回归拟合,进行抑制和IC50数据分析。
MV-411细胞表达FLT3内部串联重复突变,因此其生长完全依赖FLT3活性。预期对MV4-11细胞有强活性是本发明的理想特性。相比之下,Baf3细胞增殖为细胞因子IL-3所驱动,这些细胞用作试验化合物的非特异性毒性对照。本发明所有化合物实施例在3uM剂量时显示<50%抑制(数据未包括),提示化合物无细胞毒性并对FLT3具有良好的选择性。
基于细胞的FLT3受体Elisa
从Michael Heinrich博士(Oregon Health and Sciences University)获得过表达FLT3受体的细胞。通过用野生型FLT3稳定转染亲代Baf3细胞(依赖细胞因子IL-3生长的鼠B细胞淋巴瘤细胞系)来制造Baf3FLT3细胞系。根据在缺乏IL-3和存在FLT3配体时其生长能力来选择细胞。
在含10%FCS、青霉素/链霉素和10ng/mL FLT配体的RPMI 1640中于37℃、5%CO2维持Baf3细胞。为了测量对野生型FLT3受体活性和磷酸化作用的直接抑制,开发了夹心ELISA方法,其和为其它RTK开发的方法相似(3,4)。将200ul Baf3FLT3细胞(1x106/ml)接种于96孔盘中的含0.5%血清和0.01ng/ml IL-3的RPMI1640中16小时,然后加入化合物或DMSO溶媒孵育1小时。用100ng/ml Flt配体(R&DSystems,产品目录号308-FK)在37℃处理细胞10分钟。沉淀细胞,洗涤,在补充磷酸酶(Sigma,产品目录号P2850)和蛋白酶抑制剂(Sigma,产品目录号P8340)的100ul HNTG缓冲液(50mM Hepes、150mM NaCl、10%甘油、1%Triton-X-100、10mM NaF、1mM EDTA、1.5mM MgCl2、10mM焦磷酸钠)中裂解。通过在4℃以1000xg离心5分钟来澄清裂解液。将细胞裂解物转移到用50ng/孔抗FLT3抗体(Santa Cruz,产品目录号sc-480)包被的96孔微量滴定(Costar#9018)板的白孔中,用SeaBlock试剂(Pierce,产品目录号37527)封闭。在4℃让裂解物温育2小时。用200ul/孔PBS/0.1%triton-X-100洗涤3次板。然后用1∶8000的缀合HRP的抗磷酸酪氨酸抗体(Clone 4G10,Upstate Biotechnology,产品目录号16-105)稀释液与板在室温温育1小时。用200ul/孔PBS/0.1% triton-X-100将板洗涤3次。用Berthold的微孔板发光计按照厂商用法说明用Super Signal Pico试剂(Pierce,产品目录号37070)进行信号检测。所有数据点皆为三份平行样品的平均值。将在0.1%DMSO对照存在下Flt配体刺激的FLT3磷酸化的总相对光度单位(RLU)定义为0%抑制,100%抑制是基态裂解物的总RLU。用GraphPad Prism、用多参数S形剂量-反应(可变斜率)公式来进行非线性回归拟合,进行抑制和IC50数据分析。
生物学方法参考文献
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3.Sadick,MD,Sliwkowski,MX,Nuijens,A,Bald,L,Chiang,N,Lofgren,JA,Wong WLT. Analysis of Heregulin-Induced ErbB2Phosphorylation with a High-Throughput Kinase Receptor ActivationEnzyme-Linked Immunsorbent Assay(用高通量激酶受体活化酶联免疫吸附测定分析调蛋白诱导的ErbB2磷酸化),Analytical Biochemistry.1996;235:207-214.
4.Baumann CA,Zeng L,Donatelli RR,Maroney AC.Developmentof a quantitative,high-throughput cell-based enzyme-linkedimmunosorbent assay for detection of colony-stimulating factor-1 receptortyrosine kinase inhibitors(用于检测集落刺激因子-1受体酪氨酸激酶抑制剂的基于细胞的高通量定量酶联免疫吸附测定的发展).J BiochemBiophys Methods.2004;60:69-79.
生物学数据
FLT3的生物学数据
本发明代表性化合物的活性如下表所示。所有活性以μM表示,其具有以下不确定性:FLT3激酶:±10%;MV4-11和Baf3-FLT3:±20%。
序号 | 化合物名称 | FLT3激酶(μM) | MV4-11(μM) | BaF3ELISA(μM) |
1 | (4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯 | 0.102 | 7.200 | nd |
2 | (4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯 | 2.09 | >10 | nd |
3 | (4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | 0.227 | 2.4 | nd |
4 | (4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | 0.761 | >10 | nd |
5 | (4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | 0.064 | 1.3 | 0.022 |
6 | (4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | 0.208 | 6.5 | nd |
7 | (4-异丙基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯 | 0.14 | 4.3 | nd |
8 | (4-异丙氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基酯 | 3.03 | 3.6 | nd |
9 | 1-(4-异丙基-苯基)-3-(1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | 0.041 | 1.3 | 0.055 |
序号 | 化合物名称 | FLT3激酶(μM) | MV4-11(μM) | BaF3ELISA(μM) |
10 | 1-(4-异丙氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[2,3-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | 0.365 | 3.6 | nd |
11 | 1-(4-异丙基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | 0077 | 0.671 | 0.108 |
12 | 1-(4-异丙氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | 0296 | 2.5 | nd |
13 | 1-(4-苯氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 0.881 | >5 |
14 | 1-(4-吗啉-4-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | >5 | nd |
15 | 1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 0.983 | 1.9 |
16 | 1-(4-环己基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 5.2 | nd |
17 | 1-(4-溴代-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 1.9 | nd |
18 | 1-(4-二乙氨基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 0.757 | 0.895 |
19 | 1-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基)-脲 | nd | 0.85 | 2.9 |
20 | 1-(6-环丁氧基-吡啶-3-基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲 | nd | 1.5 | nd |
21 | 1-(4-环己基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲 | nd | 1.4 | nd |
22 | 1-(4-苯氧基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲 | nd | 3.8 | nd |
23 | 1-(4-吡咯烷-1-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲 | nd | 3.9 | nd |
24 | 1-(4-吗啉-4-基-苯基)-3-(1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-哌啶-4-基)-脲 | nd | >5 | nd |
序号 | 化合物名称 | FLT3激酶(μM) | MV4-11(μM) | BaF3ELISA(μM) |
25 | (6-环丁氧基-吡啶-3-基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | nd | 0.345 | 1.6 |
26 | (4-苯氧基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | nd | 0.953 | 0.39 |
27 | (4-吡咯烷-1-基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | nd | nd | nd |
28 | (4-吗啉-4-基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | nd | 2.1 | nd |
29 | (4-二乙氨基-苯基)-氨基甲酸1-噻吩并[3,2-d]嘧啶-4-基-吡咯烷-3-基酯 | nd | nd | nd |
治疗/预防方法
在本发明的另外方面,本发明化合物可用于在细胞或受治疗者中抑制酪氨酸激酶活性(包括Flt3活性),或降低激酶活性(包括Flt3活性),或治疗在受治疗者中与FLT3激酶活性或表达相关的疾病。
在这方面的一个实施方案中,本发明提供用于降低或抑制细胞中FLT3激酶活性的方法,其包括让细胞与式I或式II化合物接触的步骤。本发明也提供用于降低或抑制受治疗者中FLT3激酶活性的方法,其包括将式I或式II化合物给予所述受治疗者。本发明进一步提供在细胞中抑制细胞增殖的方法,其包括让细胞与式I或式II化合物接触的步骤。
通过为本领域所知方法,例如本文所述的FLT3激酶测定,可测定细胞或受治疗者中的FLT3激酶活性。
本文所用术语“受治疗者”指业已成为治疗、观察或实验对象的动物,优选哺乳动物,最优选人。
本文所用术语“接触”指将化合物加入到细胞以便化合物为细胞所吸收。
在这方面的其它实施方案中,本发明提供用于治疗处于发生细胞增生性疾病或FLT3相关疾病风险中(或易患病的)的受治疗者的预防性方法和治疗性方法。
在一个实施例中,本发明提供用于预防受治疗者的细胞增生性疾病或FLT3相关疾病的方法,其包括将预防有效量的包含式I或式II化合物和药学上可接受载体的药物组合物给予所述受治疗者。可在细胞增生性疾病或FLT3相关疾病特征性的症状表现之前给予所述预防药物,以使疾病或病况得到预防,或作为选择延迟其进展。
在另外实施例中,本发明涉及用于治疗受治疗者的细胞增生性疾病或FLT3相关疾病的方法,其包括将治疗有效量的包含式I或式II化合物和药学上可接受载体的药物组合物给予所述受治疗者。可在疾病特征性症状表现的同时给予所述治疗药物,以使所述治疗药物用作治疗药以代偿细胞增生性疾病或FLT3相关疾病。
术语“预防有效量”指抑制或延迟受治疗者的疾病发作的活性化合物或药物的量,其由研究者、兽医、医生或其它临床医生来探索。
本文所用术语“治疗有效量”指在受治疗者中引起生物学或医学反应的的活性化合物或药物的量,其由研究者、兽医、医生或其它临床医生来探索,所述反应包括缓解待治疗的疾病或病症的症状。
用于确定本发明药物组合物的治疗和预防有效剂量的方法为本领域所知。
本文所用术语“组合物”意欲包括包含特定组分的特定量的产物,以及直接或间接来自特定组分的特定量的组合的任何产物。
本文所用术语“FLT3相关疾病”或“FLT3受体相关疾病”或“FLT3 受体酪氨酸激酶相关疾病”应包括与FLT3活性(例如FLT3过度活跃)有关或与其有牵连的疾病和伴随这些疾病的病症。术语“FLT3过度 活跃”指1)在正常不表达FLT3的细胞中表达FLT3;2)由正常不表达FLT3的细胞表达FLT3;3)导致有害的细胞增殖的增加的FLT3表达;或4)导致FLT3组成型活化的突变。“FLT3相关疾病”实例包括由于FLT3的异常高量或FLT3突变所致的FLT3刺激而引起的疾病,或由于异常高量的FLT3或FLT3突变所致的FLT3活性异常高量而引起的疾病。已知FLT3过度活跃牵涉到多种疾病的发病机理,包括下列细胞增生性疾病、肿瘤和癌症。
术语“细胞增生性疾病”指多细胞生物体内一种或多种细胞亚群的有害的细胞增殖,其导致对该多细胞生物体造成伤害(即不适或降低生命期望)。细胞增生性疾病可发生于不同类型的动物和人类中。例如,本文所用“细胞增生性疾病”包括肿瘤性和其它细胞增生性疾病。
本文所用“肿瘤性疾病”指因异常或不受控制的细胞生长引起的肿瘤。肿瘤性疾病实例包括但不限于血液系统疾病,例如骨髓增殖性疾病,例如血小板增多症、特发性血小板增多症(ET)、特发性髓样化生、髓纤维变性(MF)、髓增生异常性髓纤维变性(MMM)、慢性特发性髓纤维变性(IMF)和真性红细胞增多症(PV)、血细胞减少症和恶化前骨髓增生异常综合征;癌症,例如神经胶质瘤、肺癌、乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、胃癌、食道癌、结肠癌、胰腺癌、卵巢癌;和血液系统恶性肿瘤,包括脊髓发育不良、多发性骨髓瘤、白血病和淋巴瘤。血液系统恶性肿瘤实例包括例如白血病、淋巴瘤(非霍奇金氏淋巴瘤)、霍奇金氏病(Hodgkin’s disease)(也叫霍奇金氏淋巴瘤)和骨髓瘤--例如急性淋巴细胞白血病(ALL)、急性髓性白血病(AML)、急性前髓细胞白血病(APL)、慢性淋巴细胞白血病(CLL)、慢性髓细胞样白血病(CML)、慢性中性粒细胞白血病(CNL)、未分化急性白血病(AUL)、退行发育大细胞性淋巴瘤(ALCL)、前淋巴细胞白血病(PML)、青少年粒单核细胞白血病(JMML)、成人T细胞ALL、急性髓性白血病伴骨髓三系病态造血(AML/TMDS)、混合谱系白血病(MLL)、骨髓增生异常综合征(MDS)、骨髓增殖性疾病(MPD)和多发性骨髓瘤(MM)。
其它细胞增生性疾病实例包括但不限于动脉粥样硬化(Libby P,2003,“Vascular biology of atherosclerosis:overview and state of the art(动脉粥样硬化的血管生物学:综述和本领域现状)”,Am J Cardiol91(3A):3A-6A);移植诱导的血管病变(Helisch A,Schaper W.2003,Arteriogenesis:the development and growth of collateral arteries(动脉生成:动脉侧支的发育和生长).Microcirculation,10(1):83-97);黄斑变性(Holz FG等2004,“Pathogenesis of lesions in late age-related maculardisease(晚期年龄相关性黄斑变性中病灶的发病机理)”,Am JOphthalmol.137(3):504-10);内膜增生和再狭窄(Schiele TM等,2004,“Vascular restenosis-striving for therapy(血管再狭窄-为治疗而努力).”Expert Opin Pharmacother.5(11):2221-32);肺纤维化(ThannickalVJ等,2003,“Idiopathic pulmonary fibrosis:emerging concepts onpharmacotherapy(特发性肺纤维化:药物治疗的新概念)”,Expert OpinPharmacother.5(8):1671-86);肾小球性肾炎(Cybulsky AV,2000,“Growth factor pathways in proliferative glomerulonephritis(增生性肾小球性肾炎中的生长因子途径)”,Curr Opin Nephrol Hypertens”9(3):217-23);肾小球硬化(Harris RC等,1999,“Molecular basis of injury andprogression in focal glomerulosclerosis(局灶性肾小球性肾炎中损害和进展的分子基础)”Nephron 82(4):289-99);肾发育不良和肾纤维化(Woolf AS等,2004,“Evolving concepts in human renal dysplasia(人类肾发育不良中的新概念)”,J Am Soc Nephrol.15(4):998-1007);糖尿病性视网膜病(GrantmB等,2004,“The role of growth factors in thepathogenesis of diabetic retinopathy(生长因子在糖尿病性视网膜病发病机理中的作用)”,Expert Opin Investig Drugs 13(10):1275-93);和类风湿性关节炎(Sweeney SE,Firestein GS,2004,Rheumatoid arthritis:regulation of synovial inflammation(类风湿性关节炎:滑膜炎症的调节),Int J Biochem Cell Biol.36(3):372-8)。
在这方面的另外实施方案中,本发明包括用于治疗或抑制受治疗者的细胞增生性疾病或FLT3相关疾病的发病的联合治疗。联合治疗包括给予受治疗者治疗或预防有效量的式I或式II化合物和一种或多种其它抗细胞增殖治疗,包括化学治疗、放射治疗、基因治疗和免疫治疗。
在本发明实施方案中,本发明化合物可与化学治疗联合给予。本文所用化学治疗指涉及化疗剂的治疗。在本文所揭示的联合治疗方法中可使用多种化疗剂。作为例子预期的化疗剂包括但不限于:铂化合物(例如顺铂、卡铂、奥沙利铂);紫杉烷类化合物(例如紫杉醇、多西他赛);喜树碱化合物(伊立替康、托泊替康);长春碱类(例如长春新碱、长春碱、长春瑞滨);抗肿瘤核苷衍生物(例如5-氟尿嘧啶、左亚叶酸、吉西他滨、卡培他滨);烷化剂(例如环磷酰胺、卡莫司汀、洛莫司汀、塞替派);表鬼臼毒素/鬼臼毒素(例如依托泊苷、替尼泊苷);芳香化酶抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、依西美坦);抗雌激素化合物(例如他莫昔芬、氟维司群)、抗叶酸剂类(例如培美曲唑二钠(premetrexeddisodium));低甲基化剂(hypomethylating agent)(例如阿扎胞苷);生物制剂(例如吉姆单抗、西妥昔单抗、利妥西单抗、帕妥珠单抗(pertuzumab)、曲妥单抗、贝伐单抗、埃罗替尼(erlotinib));抗生素/蒽环霉素(例如伊达比星、放线菌素D、博来霉素、柔红霉素、多柔比星、丝裂霉素C、更生霉素(dactinomycin)、洋红霉素、道诺霉素);抗代谢物(例如氨喋呤、氯苯吩嗪(clofarabin)、阿糖胞苷、甲氨蝶呤);微管蛋白结合剂(例如考布他汀、秋水仙碱、诺考达唑);拓扑异构酶抑制剂(例如喜树碱)。另外有用的药物包括维拉帕米,这是一种钙拮抗剂,发现其可用于与抗肿瘤药物联合,以在对公认化疗剂有抗性的肿瘤细胞中建立化学敏感性,并加强这样的化合物在药物敏感性恶性病中的功效。参见Simpson WG,The calcium channel blocker verapamil andcancer chemotherapy(钙通道阻滞剂维拉帕米和癌症化疗).CellCalcium.1985 Dec;6(6):449-67。另外,也涵盖可用于与本发明化合物联合使用的尚未出现的化疗剂。
在本发明另外的实施方案中,本发明化合物可与放射治疗联合给予。本文所用“放射治疗”指包括让需要治疗的对象与辐射接触的治疗。这样的治疗为本领域技术人员所知。合适的放射治疗流程将与临床治疗中已经采用的其中单用放射治疗或与其它化学治疗联合应用的那些流程相似。
在本发明另外的实施方案中,本发明化合物可与基因治疗联合给予。本文所用“基因治疗”指靶向涉及肿瘤发生的特定基因的治疗。可能的基因治疗策略包括修复缺陷型抑癌基因、用对应于编码生长因子和其受体的基因的反义DNA来转导或转染细胞、基于RNA的策略(例如核酶、RNA诱杀剂、反义信使RNA和小干扰RNA(siRNA)分子)和所谓的“自杀基因”。
在本发明其它实施方案中,本发明化合物可与免疫治疗联合给予。本文所用“免疫治疗”指经由特异性针对这样的蛋白质的抗体靶向涉及肿瘤发生的特定蛋白质的治疗。举例而言,针对血管内皮生长因子的单克隆抗体业已用于治疗癌症。
当除了本发明化合物外还使用第二种药物时,可同时(例如以分开或单一组合物)给予这两种药物,或在大约相同时间或以分开的给药时间以任意次序序贯给予。在后一种情况下,应以足以确保达到有益或协同效果的时间、量和方式来给予这两种化合物。应该了解,优选的给药方法和次序和联合的每种成分的各自剂量和方案,应视与本发明化合物联合给予的特定化疗剂、它们的给药途径、待治疗的具体肿瘤和待治疗的具体宿主而定。
如本领域一般技术人员所理解,化疗剂的合适剂量通常与其中单独给予的或与其它化疗药物联合给予的临床治疗中所已经采用的剂量相似或少于该量。
用常规方法并根据本文所示资料,本领域技术人员可易于确定最佳给药方法和给药次序和剂量和方案。
仅为了举例,每个疗程可将铂化合物以每平方米体表面积1-500mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如50-400mg/m2,具体对于顺铂以约75mg/m2的剂量,对于卡铂以约300mg/m2的剂量给予。顺铂不经口吸收,因此必须经由静脉内、皮下、肿瘤内或腹膜内注射给药。
仅为了举例,每个疗程可将紫杉烷类化合物以每平方米体表面积50-400mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如75-250mg/m2,具体对于紫杉醇以约175-250mg/m2的剂量,对于多西他赛以约75-150mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,每个疗程可将喜树碱化合物以每平方米体表面积0.1-400mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如1-300mg/m2,具体对于伊立替康以约100-350mg/m2的剂量,对于托泊替康以约1-2mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,每个疗程可将长春碱类以每平方米体表面积2-30mg(mg/m2)的剂量有利地给予,具体对于长春碱以约3-12mg/m2的剂量,对于长春新碱以约1-2mg/m2的剂量,对于长春瑞滨以约10-30mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,可将抗肿瘤核苷衍生物以每平方米体表面积200-2500mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如700-1500mg/m2。5-氟尿嘧啶(5-FU)通常以200-500mg/m2(优选3-15mg/kg/天)的剂量经由静脉内给药而应用。吉西他滨以每个疗程约800-1200mg/m2的剂量有利地给予,卡培他滨以每个疗程约1000-2500mg/m2有利地给予。
仅为了举例,每个疗程可将烷化剂以每平方米体表面积100-500mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如120-200mg/m2,具体对于环磷酰胺以约100-500mg/m2的剂量,对于苯丁酸氮芥以约0.1-0.2mg/kg体重的剂量,对于卡莫司汀以约150-200mg/m2的剂量,对于洛莫司汀以约100-150mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,每个疗程可将鬼臼毒素衍生物以每平方米体表面积30-300mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如50-250mg/m2,具体对于依托泊苷以约35-100mg/m2的剂量,对于替尼泊苷以约50-250mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,每个疗程可将蒽环霉素衍生物以每平方米体表面积10-75mg(mg/m2)的剂量有利地给予,例如15-60mg/m2,具体对于多柔比星以约40-75mg/m2的剂量,对于柔红霉素以约25-45mg/m2的剂量,对于伊达比星以约10-15mg/m2的剂量给予。
仅为了举例,每个疗程可将抗雌激素化合物以每天约1-100mg的剂量有利地给予,其视具体作用剂和待治疗的病况而定。他莫昔芬以每天2次5-50mg、优选10-20mg的剂量经口有利地给予,继续治疗足够的时间以达到和保持治疗效果。托瑞米芬以每天一次约60mg的剂量经口有利地给予,继续治疗足够的时间以达到和保持治疗效果。阿那曲唑以每天一次约1mg的剂量经口有利地给予。屈洛昔芬以每天一次约20-100mg的剂量经口有利地给予。雷洛昔芬以每天一次约60mg的剂量经口有利地给予。依西美坦以每天一次约25mg的剂量经口有利地给予。
仅为了举例,可将生物制剂以每平方米体表面积1-5mg(mg/m2)的剂量或若不同以本领域所知的剂量有利地给予。例如每个疗程曲妥单抗以1-5mg/m2尤其是2-4mg/m2的剂量有利地给予。
举例而言,可以每疗程一次、2次或更多次给予剂量,其可例如每7、14、21或28天重复。
可将本发明化合物全身性给予受治疗者,例如静脉内、经口、皮下、肌肉内、皮内或胃肠外给予。也可将本发明化合物局部给予受治疗者。局部给药系统的非限制性实例包括使用腔内医疗器械,其包括血管内药物递送导管、金属丝、药物支架和和腔内涂膜术(endoluminal paving)。本发明化合物可进一步与靶向剂联合给予受治疗者,以使目标位点达到局部高化合物浓度。另外,本发明化合物可调配用于快速释放或慢速释放,目的是在数小时到数周的时间范围内保持药物或作用剂与靶组织接触。
本发明也提供包含与药学上可接受载体联合的式I或式II化合物的药物组合物。药物组合物可含有约0.1mg-1000mg、优选约100-500mg的化合物,其可组成适于所选择的给药方式的任何形式。
片语“药学上可接受”指当将其给予动物或如合适为人类时,不产生不利的、过敏的或其它有害的反应的分子实体和组合物。兽医应用同样包括在本发明范围内,“药学上可接受”制剂包括用于临床用途和/或兽医用途的两种情况下的制剂。
载体包括必不可少和惰性的药物赋形剂,其包括但不限于粘合剂、悬浮剂、润滑剂、矫味剂、甜味剂、防腐剂、染料和包衣。适于口服给药的组合物包括固态形式,例如丸剂、片剂、囊片、胶囊剂(每一种都包括即释、控释和缓释制剂)、颗粒剂和粉剂;和液态形式,例如溶液剂、糖浆剂、酏剂、乳剂和混悬剂。用于胃肠外给药的形式包括无菌溶液剂、乳剂和混悬剂。
本发明药物组合物也包括缓慢释放本发明化合物的药物组合物。所述组合物包含缓慢释放载体(典型的为聚合载体)和本发明化合物。
缓慢释放生物可降解载体为本领域所熟知。这些是可形成颗粒的材料,所述颗粒其中捕获有活性化合物并在合适的环境(例如水性、酸性、碱性等等)缓慢降解/溶解,并藉此将其中的活性化合物降解/溶解于体液中并释放所述活性化合物。颗粒优选纳米粒子(即范围介于约1-500nm直径,优选约50-200nm直径,最优选约100nm直径)。
本发明也提供制备本发明药物组合物的方法。按照常规药物混合技术,让作为活性组分的式I或式II化合物与药物载体紧密混合,其中载体可采用多种形式,其视给药(例如口服或胃肠外例如肌肉内)所期需制剂的形式而定。在制备口服剂型的组合物中,可采用任何常规药物介质。因此,对于液态口服制剂,例如混悬剂、酏剂和溶液剂而言,合适的载体和添加剂包括水、二醇类、油类、醇类、矫味剂、防腐剂、着色剂等等;对于固态口服制剂,例如粉剂、胶囊剂、囊片、胶囊锭(gelcaps)和片剂而言,合适的载体和添加剂包括淀粉、糖类、稀释剂、粒化剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等等。因为其易于给予,所以片剂和胶囊剂代表了最有利的口服剂量单位形式,在此情况下显然采用固态药物载体。若需要,片剂可通过标准技术进行糖包衣或肠溶包衣。对于胃肠外给药,载体通常包含无菌水,尽管例如为了助溶目的或为了保存目的可包括其它组分。也可制备可注射混悬剂,在此情况下可采用合适的液态载体、悬浮剂等等。在用于缓慢释放的制剂中,首先将缓慢释放的载体(典型的为聚合载体)和本发明化合物溶于或分散于有机溶剂。然后将得到的有机溶液加入到水溶液中以得到水包油型乳剂。优选水溶液包含表面活性剂。随后让有机溶剂从水包油型乳剂蒸发掉,得到含有缓慢释放载体和本发明化合物的颗粒的胶状混悬剂。
每剂量单位(例如片剂、胶囊剂、粉剂、注射剂、一茶匙容量等等)本文药物组合物将含有递送上述有效剂量所必需量的活性组分。每剂量单位(例如片剂、胶囊剂、粉剂、注射剂、栓剂、一茶匙容量等等)本文药物组合物将含有约0.01mg-200mg/kg体重/天。优选该范围为约0.03-约100mg/kg体重/天,最优选约0.05-约10mg/kg体重/天。可以每天1到5次的方案给予所述化合物。然而,剂量可视患者的需要、待治疗病症的严重程度和待用的化合物而变化。可采用每日给药或周期给药(post-periodic dosing)。
优选这些组合物呈单位剂型,例如片剂、丸剂、胶囊剂、粉剂、颗粒剂、无菌胃肠外溶液剂或混悬剂、计量气雾剂或液态喷雾剂、滴剂、安瓿、自我注射装置或栓剂;用于口服、胃肠外给药、鼻内给药、舌下给药或直肠给药或用于通过吸入或吹入给药。或者,组合物可呈适于每周一次或每月一次给药的形式;例如,可用活性化合物的不溶性盐例如癸酸盐,得到用于肌内注射的贮库型制剂。为了制备固态组合物例如片剂,让主要活性组分与药物载体(例如常规制片组分,例如玉米淀粉、乳糖、蔗糖、山梨醇、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、磷酸二钙或树胶和其它药物稀释剂例如水)混合,以形成含有本发明化合物或其药学上可接受盐的均一混合物的固态预配制组合物。当提及这些预配制组合物为均相时,其意即活性组分为均匀分散在整个组合物中,以使组合物能容易地再分到相等效能的剂型例如片剂、丸剂和胶囊剂中。然后将这种预配制组合物再分到含有0.1-约500mg本发明活性组分的上述类型单位剂型中。新颖组合物的片剂或丸剂可被包衣或另外混合,以得到提供延长作用优点的剂型。举例而言,片剂或丸剂可包含内部配药和外部配药成分,后者呈前者的包膜形式。这两种成分可通过肠溶层分开,肠溶层在胃中起抗降解的作用,使得内部成分可完整通过到达十二指肠或得到延迟释放。多种材料可用作这样的肠溶层或包衣,这样的材料包括多种聚合酸,且这样的材料例如为紫胶、鲸蜡醇和醋酸纤维素。
其中掺入式I或式II化合物的用于口服给药或注射给药的液态形式包括水性溶液剂、适当调味的糖浆剂、水性或油性混悬剂和用食用油(例如棉籽油、芝麻油、椰子油或花生油)调味的乳剂以及酏剂和相似药物溶媒。用于水性混悬剂的合适的分散剂或悬浮剂包括合成和天然树胶,例如西黄蓍胶、阿拉伯树胶、藻酸盐、右旋糖苷、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮或明胶。适当矫味的悬浮剂或分散剂的液态形式也包括合成和天然树胶,例如西黄蓍胶、阿拉伯树胶、甲基纤维素等等。对于胃肠外给药,需要无菌混悬剂和溶液剂。当需要静脉内给药时,采用通常含有合适防腐剂的等渗制剂。
有利情况为式I或式II化合物可以单日剂量给予,或整个日剂量可以每天2次、3次或4次的分开剂量给予。另外,本发明化合物可以鼻内形式经由局部使用合适的鼻内溶媒给予,或经由本领域一般技术人员所熟知的透皮皮肤贴剂给予。为了以透皮递送系统形式给予,在整个剂量方案中给予的剂量当然是连续的而不是间歇的。
例如,为了以片剂或胶囊剂形式口服给药,可让活性药物成分与口服无毒药学上可接受惰性载体(例如乙醇、甘油、水等等)结合。此外,当需要或必须时,也可将合适的粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。合适的粘合剂包括但不限于淀粉、明胶、天然糖类例如葡萄糖或β-乳糖、玉米甜味剂、天然和合成树胶(例如阿拉伯树胶、西黄蓍胶)或油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等等。
本发明制品的日剂量可在每天每个成年人1-5000mg的大范围内变化。对于口服给药,优选以片剂形式提供组合物,所述片剂其含有0.01、 0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、200、250和500毫克活性组分,用于给予待治疗的患者以调整症状。所述药物的有效量通常以每天约0.01mg/kg-约200mg/kg体重的剂量水平提供。特别是,所述范围为每天约0.03-约15mg/kg体重,更特别是,每天约0.05-约10mg/kg体重。本发明化合物可以每天高达4或更多次数的方案给予,优选每天1-2次。
最佳给药剂量可易于由本领域技术人员确定,其随所用特定化合物、给药方式、制剂的强度、给药方式和疾病状态进展而变化。另外,与待治疗的具体患者有关的因素包括患者年龄、体重、饮食和给药时间,其导致需要调整剂量。
本发明化合物也可以脂质体递送系统形式给予,例如小单层脂质体、大单层脂质体和多层脂质体。脂质体可由多种脂类形成,包括但不限于亲水脂类,例如磷脂酰胆碱、鞘磷脂、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、心磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酸、磷脂酰肌醇、二酰基三甲基铵丙烷(diacyl trimethylammnoim propanes)、二酰基二甲基铵丙烷(diacyl dimethylammnoim propanes)和硬脂胺;中性脂,例如甘油三酯;和其组合。其可含有胆固醇或可不含胆固醇。
本发明化合物也可局部给予。可使用任一递送装置,例如血管内给药导管、金属丝、药物支架和腔内涂膜术。用于这样装置的递送系统可包含将化合物以可由给药者控制的速率递送的局部灌输导管。
本发明提供包含腔内医疗器械(优选支架)和治疗剂量的本发明化合物的给药器械。
术语“支架”指任何能由导管递送的装置。支架常规用于预防由于物理异常的血管闭合,例如由于外科手术创伤引起的有害的血管组织向内生长。其通常具有管状伸展的点阵型(lattice-type)结构,适于留在管道内腔里以减轻阻塞。支架具有接触内腔壁的表面和暴露于内腔的表面。接触内腔壁表面为管子的外表面,暴露于内腔的表面为管子的内表面。支架可为聚合物支架、金属支架或聚合物和金属支架,其可任选为生物可降解。
通常将支架以未膨胀形式插入内腔,然后自动或借助于原位的第二种器械膨胀。典型的膨胀方法通过使用安在导管上的血管成形气囊而发生,其在变狭窄的脉管或机体通道内膨胀,以剪切和破坏与脉管壁成分有关的阻塞,并获得扩大的内腔。也可使用阐述于US 6,776,796(Falotico等)号的自我膨胀支架。支架与预防炎症和增殖的药物、作用剂或化合物组合,可提供对血管成形术后再狭窄的最有效的治疗。
可将本发明化合物以多种方式并使用任何数量的生物相容性材料掺入到支架里或附着到支架上。在一个例示性实施方案中,可将化合物直接掺入聚合基质(例如聚吡咯聚合物),随后涂覆在支架的外表面。所述化合物通过经聚合物扩散而从基质洗脱出。本领域详细论述了用于支架和将药物涂覆在支架上的方法。在另外的例示性实施方案中,首先将支架涂上包含所述化合物、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物和聚甲基丙烯酸丁酯溶液的底层。然后,进一步将支架涂上仅包含聚甲基丙烯酸丁酯的外层。该外层起扩散屏障的作用,以防止化合物过快洗脱并进入周围组织。外层或面层(topcaot)的厚度决定了其中所述化合物从基质洗脱的速率。用支架和于涂药的方法详述于WIPO公开号WO9632907、美国专利申请公开第2002/0016625号和其中揭示的参考文献中。
可将本发明化合物和生物相容性材料/聚合物的溶液以多种方式掺入到支架里或支架上。举例而言,可将溶液喷雾到支架上,或可将支架浸入到溶液中。在优选实施方案中,将溶液喷雾到支架上,然后让其干燥。在另外的例示性实施方案中,可让溶液充电为一种极性,支架充电为相反极性。以该方式,溶液和支架将彼此吸引。在使用这种类型的喷雾法时,可减少浪费并达到更好地控制涂层厚度。优选所述化合物仅附于与一种组织接触的支架外表面。然而,对于某些化合物,可涂覆整个支架。施用到支架的化合物的剂量和控制该药物释放的聚合物涂层的组合对该药物的效力很重要。优选所述化合物在支架上保留至少3天到长达大约6个月,更优选7-30天。
可将任意数量的不易蚀性生物相容性聚合物与本发明化合物联合使用。重要的是要注意不同聚合物可用于不同支架。例如,上述乙烯-乙酸乙烯酯共聚物和聚甲基丙烯酸丁酯基质能很好地用于不锈钢支架。其它聚合物可能用于由其它材料形成的支架更有效,这些材料包括表现出超弹性的材料,例如镍和钛的合金。
将支架引入到机体内腔的方法众所周知,涂有本发明化合物的支架优选用导管引入。如本领域一般技术人员所了解,基于支架植入的位置,方法可稍有不同。对于冠脉支架植入,将荷有支架的球囊导管插入冠状动脉,将支架定位于所期需的位点。球囊膨胀,撑开支架。当支架撑开时,支架与内腔壁接触。一旦将支架定位,则收缩球囊并取出。支架留适当的位置,荷有化合物的内腔接触表面直接接触内腔壁表面。若需要,支架植入可伴随抗凝血治疗。
用于本发明支架的递送所述化合物的最佳条件可随所用的不同局部递送系统以及所用化合物的特性和浓度而变化。可优化的条件包括例如化合物浓度、递送体积、递送速率、插入的管壁深度、最接近的膨胀压力、穿孔数量和大小和递药导管球囊的配合。可优化条件,以便抑制损伤位点的平滑肌细胞增殖,使得不发生由再狭窄引起的明显动脉阻塞,这可例如通过平滑肌细胞的增殖能力,或通过血管阻力或内腔直径的变化来测量。可用常规计算方法基于从动物模型研究得到的数据来确定最佳条件。
给予本发明化合物的其它替代方法可为通过使所述化合物与靶向剂缀合来实施,靶向剂将缀合物导向其起作用的目的位点,即血管内皮细胞或肿瘤细胞。既可使用抗体又可使用非抗体靶向剂。因为靶向剂和其对应的结合配偶体之间的特异性相互作用,可在目标位点或其附近给予局部高浓度的本发明化合物,藉此更有效地治疗目标位点的疾病。
抗体靶向剂包括结合到肿瘤细胞、肿瘤脉管系统或肿瘤基质的可靶向或可及的成分的抗体或其抗原结合片段。肿瘤细胞、肿瘤脉管系统或肿瘤基质的“可靶向或可及的成分”优选表面表达的、表面可及的或定位于表面的成分。抗体靶向剂也包括结合从坏死肿瘤细胞释放的胞内成分的抗体或其结合抗原片段。优选这样的抗体为单克隆抗体或其结合抗原片段,其结合在可诱导而成为可通透的细胞、或基本上所有肿瘤细胞和正常细胞的空细胞中存在、但在哺乳动物的正常活细胞外部不存在或不可及的不溶性胞内抗原。
本文所用术语“抗体”意欲泛指任何免疫结合剂,例如IgG、IgM、IgA、IgE、F(ab’)2、单价片段例如Fab’、Fab、Dab以及工程抗体例如重组抗体、人源抗体、双特异性抗体等等。抗体可为多克隆或单克隆抗体,尽管优选单克隆抗体。有大批本领域已知的对实质上任何实体瘤类型细胞表面具有免疫特异性的抗体(参见Thorpe等,US5,855,866中的Summary Table on monoclonal antibodies for solid tumors(用于实体瘤的单克隆抗体概述表))。本领域技术人员已知生产和分离抗肿瘤抗体的方法(参见Thorpe等美国专利第5,855,866号和Thorpe等美国专利第6,34,2219号)。
将治疗部分与抗体缀合的技术众所周知。(例如参见Amon等″Monoclonal Antibodies For Immunotargeting Of Drugs In CancerTherapy(用于癌症治疗中药物免疫靶向的单克隆抗体)″,MonoclonalAntibodies And Cancer Therapy,Reisfeld等(编辑),pp.243-56(Alan R.Liss,Inc.1985);Hellstrom等″Antibodies For Drug Delivery(用于药物递送的抗体)″,Controlled Drug Delivery(第二版),Robinson等(编辑),pp.623-53(Marcel Dekker,Inc.1987);Thorpe,″Antibody Carriers OfCytotoxic Agents In Cancer Therapy:A Review(癌症治疗中细胞毒性要的抗体载体:综述)″,Monoclonal Antibodies′84:Biological And ClinicalApplications,Pinchera等(编辑),pp.475-506(1985))。相似的技术也可用于将本发明化合物与非抗体靶向剂连接。本领域技术人员应知道或能够确定与非抗体靶向剂例如小分子、寡肽、多糖或其它聚阴离子化合物形成缀合物的方法。
尽管在血液中适度稳定的任何连接部分都可用于将本发明化合物和靶向剂连接,但优选生物可释放的键和/或可选择性裂解的间隔子或接头。“生物可释放的键”和“可选择性裂解的间隔子或接头”仍在循环中具有适度的稳定性,但仅在或优先在某些条件(即在某些环境中或与特定作用剂接触)下可释放、裂解或水解。这样的键包括例如二硫键和三硫键和酸不稳定键(其如美国专利第5,474,765号和第5,762,918号所述)和对酶敏感的键(包括肽键、酯、酰胺、磷酸二酯和糖苷,其如美国专利第5,474,765号和第5,762,918号所述)。这样的选择性释放设计特色有利于所述化合物在计划目标位点从缀合物持续释放。
本发明提供包含有效量的与靶向剂缀合的本发明化合物和药学上可接受载体的药物组合物。
本发明进一步提供治疗与FLT3有关病症尤其是肿瘤的方法,其包括将治疗有效量的与靶向剂缀合的式I或式II化合物给予受治疗者。
当将蛋白质(例如抗体或生长因子)或多糖用作靶向剂时,优选将其以可注射组合物形式给予。可注射抗体溶液将经2分钟-约45分钟、优选10-20分钟给予到静脉、动脉或脊髓液中。在某些情况下,对于局限在靠近特定皮肤区域和/或特定体腔的肿瘤来说,皮内和腔内给药有利。另外,鞘内给药可用于位于脑部的肿瘤。
与靶向剂缀合的本发明化合物的治疗有效剂量视个体、疾病类型、疾病状态、给药方法和其它临床变量而定。用从动物模型得到的数据易于确定有效剂量。在将其转化为临床环境之前,荷有实体瘤的实验动物经常用于优化合适的治疗剂量。已知这样的模型在预测有效抗癌策略时很可靠。例如,荷有实体瘤的小鼠广泛用于临床前试验,以确定提供有益抗肿瘤效果而具有最小毒性的治疗药物的工作范围。
尽管前述说明书教导了本发明的原理,且为阐明目的提供了实例,但应该理解,本发明的实施包括以下权利要求和其等同物范围内的所有惯常的变化、改变和/或修改。
Claims (44)
1.一种选自式I和式II化合物和其N-氧化物、其药学上可接受盐和其立体化学异构体:
其中:
q为0、1或2;
p为0或1;
Q为NH、N(烷基)、O或直接键;
X为N或CH;
Z为NH、N(烷基)或CH2;
B为芳基、环烷基、杂芳基或9-10元苯并稠合杂芳基;
R1为:
其中n为1、2、3或4;
Ra为氢、任选被R5取代的杂芳基、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的噁唑烷酮基、任选被R5取代的吡咯烷酮基、任选被R5取代的哌啶酮基、任选被R5取代的环杂二酮基、任选被R5取代的杂环基、-COORy、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SRy、-SORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry、-NRwSO2Rx、-SO3Ry或-OSO2NRwRx;
Rbb为氢、卤素、芳基、杂芳基或杂环基;
R5为1个、2个或3个独立选自以下的取代基:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基、-C(1-4)烷基-OH或烷氨基;
Rw和Rx独立选自:氢、烷基、烯基、芳烷基或杂芳烷基,或Rw和Rx任选可共同形成5-7元环,任选含有选自以下的杂部分:O、NH、N(烷基)、SO2、SO或S;
Ry选自:氢、烷基、烯基、环烷基、芳基、芳烷基、杂芳烷基或杂芳基;和
R3为任选存在的一个或多个取代基,其独立选自:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、羟基、硫基、硝基、任选被R4取代的环烷基、任选被R4取代的杂芳基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、任选被R4取代的部分不饱和杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的吡咯烷酮、任选被R4取代的苯氧基、-CN、-OCHF2、-OCF3、-CF3、卤化烷基、任选被R4取代的杂芳氧基、二烷氨基、-NHSO2烷基、硫基烷基或-SO2烷基;其中R4独立选自:卤素、氰基、三氟甲基、氨基、羟基、烷氧基、-C(O)烷基、-CO2烷基、-SO2烷基、-C(O)N(烷基)2、烷基或烷氨基。
3.权利要求1的化合物,其中
q为1或2;
X为N;和
B为芳基或杂芳基。
4.权利要求3的化合物,其中
Q为NH、O或直接键;
Z为NH或CH2;和
R3为任选存在的一个或多个取代基,其独立选自:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、任选被R4取代的环烷基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的苯氧基、二烷氨基或-SO2烷基。
5.权利要求4的化合物,其中
R1为:
Ra为氢、羟基、烷氨基、二烷氨基、任选被R5取代的杂环基、-CONRwRx、-N(Ry)CON(Rw)(Rx)、-N(Rw)C(O)ORx、-N(Rw)CORy、-SO2Ry、-NRwSO2Ry或-NRwSO2Rx;和
R3为一个选自以下的取代基:烷基、烷氧基、卤素、烷氧基醚、任选被R4取代的环烷基、烷氨基、任选被R4取代的杂环基、-O(环烷基)、任选被R4取代的苯氧基、二烷氨基或-SO2烷基。
7.权利要求6的化合物,其中
p为0;
Q为NH或O;
Z为NH;
RbB为氢;和
R3为一个选自以下的取代基:烷基、-O(环烷基)、苯氧基或二烷氨基。
11.一种药物组合物,其包含权利要求1-10的化合物和药学上可接受载体。
12.用作药物的权利要求1-10任一项的化合物。
13.权利要求1-10任一项的化合物用于制备治疗细胞增生性疾病的药物的用途。
14.一种用于降低细胞中的FLT3激酶活性的方法,其包括让权利要求1-10的化合物接触所述细胞的步骤。
15.一种用于抑制细胞中的FLT3激酶活性的方法,其包括让权利要求1-10的化合物接触所述细胞的步骤。
16.一种用于降低受治疗者的FLT3激酶活性的方法,其包括将权利要求1-10的化合物给予所述受治疗者的步骤。
17.一种用于抑制受治疗者的FLT3激酶活性的方法,其包括将权利要求1-10的化合物给予所述受治疗者的步骤。
18.一种用于在受治疗者中预防FLT3相关疾病的方法,其包括将预防有效量的包含权利要求1-10的化合物和药学上可接受载体的药物组合物给予所述受治疗者。
19.一种用于在受治疗者中治疗FLT3相关疾病的方法,其包括将治疗有效量的包含权利要求1-10的化合物和药学上可接受载体的药物组合物给予所述受治疗者。
20.权利要求18的方法,其进一步包括给予化疗剂。
21.权利要求18的方法,其进一步包括给予基因治疗。
22.权利要求18的方法,其进一步包括给予免疫疗法。
23.权利要求18的方法,其进一步包括给予放射治疗。
24.权利要求19的方法,其进一步包括给予化疗剂。
25.权利要求19的方法,其进一步包括给予基因治疗。
26.权利要求19的方法,其进一步包括给予免疫疗法。
27.权利要求19的方法,其进一步包括给予放射治疗。
28.一种用于治疗细胞增生性疾病的方法,其包括通过从腔内医疗器械控释给予治疗有效量的权利要求1-10的化合物。
29.一种用于治疗FLT3相关疾病的方法,其包括通过从腔内医疗器械控释给予治疗有效量的权利要求1-10的化合物。
30.权利要求28的方法,其中所述腔内医疗器械包括支架。
31.权利要求29的方法,其中所述腔内医疗器械包括支架。
32.一种药物组合物,其包含有效量的缀合有靶向剂的权利要求1-10的化合物和药学上可接受载体。
33.一种用于治疗细胞增生性疾病的方法,其包括将治疗有效量的缀合有靶向剂的权利要求1-10的化合物给予受治疗者。
34.一种治疗FLT3相关疾病的方法,其包括将治疗有效量的缀合有靶向剂的权利要求1-10的化合物给予受治疗者。
35.化疗剂和权利要求1-10中任一项的化合物的组合。
44.一种药物组合物,其包含通过权利要求36-43的方法制的产物。
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