CN101249072A

CN101249072A - 熔融法制备含大豆磷脂红景天苷脂质体的方法

Info

Publication number: CN101249072A
Application number: CNA2007103055010A
Authority: CN
Inventors: 李想; 雷菊芳; 苏立宏
Original assignee: LANZHOU QIZHENG HEALTH DAILY NECESSITIES CO Ltd
Current assignee: LANZHOU QIZHENG HEALTH DAILY NECESSITIES CO Ltd
Priority date: 2007-12-22
Filing date: 2007-12-22
Publication date: 2008-08-27

Abstract

本发明提供了一种含大豆磷脂红景天苷(前体)脂质体的制备方法，是将红景天苷与大豆磷脂以1∶0.1～1∶100的重量比混合，加热熔融制成脂质溶液；再将脂质溶液与含有支撑剂的水溶液振荡混合，冷却后经逆相蒸发处理或于10MPa～50MPa下均质处理，得到红景天苷脂质体分散液；然后经冷冻干燥或喷雾干燥，即得含大豆磷脂的红景天苷前体脂质体。在使用前控制加水量，即可配制不同药物含量的脂质体，从而满足不同化妆品配方的需求。本发明含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体，具有良好的稳定性和透皮吸收性能。

Description

熔融法制备含大豆磷脂红景天苷脂质体的方法

技术领域

本发明属于生物制剂和化妆品技术领域，涉及一种红景天苷脂质体，特别涉一种及含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体；本发明还涉及一种制备含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体的方法。

背景技术

红景天苷(Salidroside)具有明显的抗氧化和自由基清除作用，是目前众多抗衰老产品中重要功能性成分之一。研究表明，红景天苷具有如下主要作用：

1、红景天苷抗疲劳、抗衰老

Darbinyan等通过对56名年轻健康者反复使用玫瑰红景天提取液，测试他们在夜班时间中的疲劳状态，结果证明玫瑰红景天能够缓解处在压力状态下的大脑中枢疲劳。

陈氏证实红景天苷可以延长小鼠缺氧存活时间、小鼠转棒耐力时间和游泳持续时间。徐氏研究发现红景天苷通过持续5-HT含量正常化而达到抗中枢疲劳的作用。孙氏研究证实红景天苷对体外培养二倍体成纤维细胞有促进增殖分化和延长代龄的作用。

2、红景天苷免疫调节作用

谢氏等发现高山红景天苷体外显示了显著的丝裂原样效应，且该效应存在明显的剂量依赖性。巨噬细胞能明显杀伤HCa-F小鼠肝癌细胞，杀癌率达2.3％。提示红景天苷能通过非特异性免疫功能的调节促进(PEM)的杀癌效应。李氏等研究了红景天苷对正常小鼠脾淋巴细胞转化的影响，结果表明红景天苷在体外可增强有丝分裂原刺激的小鼠牌淋巴细胞的增殖反应。

3、抗辐射

邓氏等研究了X射线对小鼠脂质及细胞表面电荷的影响和红景天苷对其的干预作用，实验结果提示红景天苷有防护X射线辐射对机体组织和细胞膜的损伤作用，作用机理可能与维生素E相似。提示红景天苷是一种极有价值的抗辐射食用植物。

4、清除自由基

文氏等采用邻苯三酚自氧化法、黄嘌吟-黄嘌吟氧化酶-鲁米诺法观察了红景天苷对超氧阴离子自由基的清除作用；用水杨酸捕获法、丙二醛确定法、phen-CuSO₄-VC-H₂O₂-DNA法检测了红景天苷清除羟自由基的效果。结果表明，红景天提取物具有清除超氧阴离子自由基和羟自由基的作用。蔡氏等用电子顺磁共振(EPR)波谱仪检测了红景天苷及其衍生物体外清除由DMPO自旋捕获Fenton反应产生的羟自由基及DMPO在碱性有氧条件下产生的超氧阴离子自由基的效率，结果表明红景天苷及其衍生物在体外均能清除超氧阴离子自由基和羟自由基，红景天苷苯环上基团及其位置的改变、糖的类型，可以影响清除自由基的能力，其中糖对清除作用的影响最大。

脂质体是由脂质(主要是磷脂和胆固醇)构成多层或双分子层的亲水性囊泡。磷脂普遍存在于动植物细胞的原生质和生物膜中，是构成细胞膜的主要成分之一。而双层或多层的脂质体原则上与天然细胞膜一样，所以脂质体又曾为人工生物膜。脂质体具有提高被包封药物的稳定性、促进药物透皮吸收，延长药物作用时间以及对局部病变部位的靶向作用和降低药物毒副作用等特点。因此，脂质体作为药物载体已广泛应用于药物制剂及化妆品。红景天苷脂质体可提高药物的稳定性、提高药物穿透皮肤的能力、提高药物的水溶性。但是，通常红景天苷脂质体为脂质体混悬液，其稳定性存在明显的不足。原因如下：

1、脂质体作为胶体微粒是一种热力学不稳定系统，在水溶液中易发生聚集、融合、沉降，磷脂的氧化分解，包封药物的渗漏等，从而导致脂质体的不稳定；

2、红景天苷结构的不稳定性使药物在水溶液中更不稳定；

3、红景天苷脂质体混悬液其药物的含量一般是牢固的，而不同化妆品中对红景天苷的含量要求不同，造成红景天苷脂质体混悬液在含有红景天苷化妆品的配制不灵活。

由于上述原因，同时由于皮肤自身的保护作用，使红景天苷中的水冲性成分不能经皮肤吸收，极大的限制了红景天苷的开发和应用。

发明内容

本发明的目的在于针对红景天苷以及普通红景天苷脂质体的不足，提高红景天苷和脂质体的稳定性，并使其在化妆品配制时更灵活、方便，提供一种含大豆磷脂红景天苷脂质体和前体脂质体。

本发明含大豆磷脂的红景天苷前体脂质体的制备，包括以下步骤：

①红景天苷脂质溶液的制备：将红景天苷与大豆磷脂以1∶0.1～1∶100的重量比混合，加热熔融制成脂质溶液；

②将红景天苷与大豆磷脂总量1～80％的支撑剂充分溶于磷酸缓冲液充分溶解，形成支撑剂溶液；

③将所述脂质溶液与支撑剂溶液振荡混合，冷却后经逆相蒸发处理或于10MPa～50MPa下均质处理，得到红景天苷脂质体分散液；

④将红景天苷脂质体分散液经冷冻干燥或喷雾干燥，即得含大豆磷脂的红景天苷前体脂质体。

步骤①中还加入红景天苷重量0.1～20％的脂质成分；该脂质成分为胆固醇，神经酰胺，蛋黄卵磷脂，氢化卵磷脂，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二棕榈酰磷脂酰胆碱，泊洛沙姆，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱或苄泽类非离子型表面活性剂中的至少一种。

步骤②所述的支撑剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖、海藻糖、氯化钠及聚乙烯吡咯烷酮中的任何一种。

本发明制备的红景天苷前体脂质体为颗粒状、冻干状的固体制剂。临用前加入红景天苷前体脂质体重量5％～95％的水，经水合，振荡，得含大豆磷脂红景天苷脂质体。

本发明的红景天苷(前体)脂质体结构中大豆磷脂的含量为0.1％～20％(W/W)；红景天苷含量为0.2～40％(W/W)；加水回复后，红景天苷在脂质体中含量为0.1～20％(W/W)，大豆磷脂的含量为0.1％～20％(W/W)。

本发明含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体与普通脂质体相比具有以下优点：

1、提高了红景天苷脂质体的稳定性

由于本(前体)脂质体是固体制剂，能克服普通脂质体的聚集、沉降、融合和渗漏等不稳定缺陷，提高了红景天苷脂质体的稳定性，可长期放置稳定。

稳定性实验：将上述含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体、红景天苷普通脂质体(干燥前的脂质体悬液)于温度40℃、相对湿度75％条件可放置。放置0、1、2、3min后分别用高效液相色谱法测定(前体)脂质体和普通脂质体中红景天苷含量，以0min时(前体)脂质体和普通脂质体中红景天苷含量为100％，其它各时间含量与之分别作比较，可得出药物含量随时间变化百分率。

表1为红景天苷在(前体)脂质体和普通脂质体中稳定性比较结果。

	红景天苷变化百分率(％)
	红景天苷变化百分率(％)				时间(min)	0	1	2	3
普通脂质体	100.00	92.38	88.13	81.50	时间(min)	0	1	2	3
普通脂质体	100.00	92.38	88.13	81.50	(前体)脂质体	100.00	99.86	99.83	99.76

结果表明，红景天苷普通脂质体中药物含量随时间明显降低，而(前体)脂质体中药物含量变化不大，说明本发明磷脂的红景天苷(前体)脂质体能明显提高药物的稳定性。

2、提高红景天苷的稳定性：

由于本(前体)脂质体是固体制剂，使不稳定性药物在固体状态下比液体状态更稳定。

3、能提高红景天苷透皮吸收：

由于本脂质体结构中含有大豆磷脂，具有明显促进药物透皮吸收的作用，同时延长药物的作用时间。

由于本发明含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体的稳定性和良好的透皮吸收性能，使含有红景天苷化妆品的配制更为简单、方便。故本发明制备的含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体可应用于化妆品的生产中。

一般含有脂质体的化妆品，其中脂质体所占体积百分率有一定的范围，超过范围会影响化妆品的有关性质，如粘度、流动性、稠度、活性成分的含量等，而且不同的化妆品对红景天苷的含量要求也有不同。本发明含大豆磷脂的红景天苷(前体)脂质体可根据需要，在使用前控制加水量，即可配制不同药物含量的脂质体，从而满足不同化妆品配方的需求。

具体实施方式

实施例1：

取红天苷120克，大豆磷脂40克，蛋黄卵磷脂40克，胆固醇80克，蔗糖120克，PH7.4磷酸缓冲液加至1000ml。

将上述组方中红景天苷、大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、胆固醇置三角烧瓶中，加热熔融，置于80℃恒温水浴中备用。用PH7.4磷酸缓冲液800ml将处方量的蔗糖溶解，过滤，将滤液水浴加热至与脂质溶液相同温度，将水溶液与脂质溶液振荡混合，冷却，用PH7.4磷酸缓冲液将混合液体加至1000ml，经高压均质处理(高压50MPa，低压10MPa)，即得到含大豆磷脂的红景天苷脂质体水分散液。

将红景天苷脂质体分散液喷雾干燥，所得的粉末即为红景天苷前体脂质体。喷雾于燥条件如下：喷嘴直径0.45mm，喷嘴温度150c℃，雾化空气压力0.65MPa，进料速度10ml/min，气流速率1.2m³/h。

使用前，取上述制备的红景天苷前体脂质体5克，加入95克水，制备成含红景天苷脂质体5％的水分散液，即为大豆磷脂红景天苷前体脂质体。

实施例2：

取红景天苷1克，大豆磷脂40克，蛋黄卵磷脂50克，胆固醇90克，葡萄糖150克，PH7.4磷酸缓冲液加至1000ml。

将上述组中红景天苷、大豆磷脂、蛋黄卵磷脂、胆固醇置三角烧瓶中，加热熔融，置于80℃恒温水浴中备用。用PH7.4磷酸缓冲液700ml将处方量的葡萄糖溶解，过滤，将滤液水浴加热至与脂质溶液相同温度，将水溶液与脂质溶液振荡混合，冷却，用PH7.4磷酸缓冲液将混合液体加至1000ml，经逆相蒸发处理，得到脂质体混悬分散液。

将苷脂质体混悬分散液喷雾干燥，所得粉末即为红景天苷前体脂质体。喷雾干燥条件如下：喷嘴直径0.45mm，喷嘴温度150c℃，雾化空气压力0.65MPa，进料速度10ml/min，气流速率1.2m³/h。

Claims

1、一种熔融法制备含大豆磷脂红景天苷前体脂质体的方法，包括以下工艺步骤：

②将红景天苷与大豆磷脂总量1～80％的支撑剂充分溶于磷酸缓冲液中充分溶解，形成支撑剂溶液；

2、如权利要求1的含大豆磷脂红景天苷前体脂质体的制备方法，其特征在于：步骤①中还加入红景天苷重量0.1～20％的脂质成分；该脂质成分为胆固醇，神经酰胺，蛋黄卵磷脂，氢化卵磷脂，二硬脂酰磷脂酰胆碱，二棕榈酰磷脂酰胆碱，泊洛沙姆，二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱或苄泽类非离子型表面活性剂中的至少一种。

3、如权利要求1的含大豆磷脂红景天苷前体脂质体的制备方法，其特征在于：步骤②所述的支撑剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、蔗糖、乳糖、海藻糖、氯化钠及聚乙烯吡咯烷酮中的任何一种。

4、如权利要求1所述方法制备的含大豆磷脂红景天苷前体脂质体。

5、如权利要求1所述方法制备的含大豆磷脂红景天苷前体脂质体中，加入红景天苷前体脂质体重量5％～95％的水，经水合，振荡，得含大豆磷脂红景天苷脂质体。