CN101206225A - 化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 - Google Patents
化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101206225A CN101206225A CNA2006101304033A CN200610130403A CN101206225A CN 101206225 A CN101206225 A CN 101206225A CN A2006101304033 A CNA2006101304033 A CN A2006101304033A CN 200610130403 A CN200610130403 A CN 200610130403A CN 101206225 A CN101206225 A CN 101206225A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- ctnt
- monoclonal antibody
- horseradish peroxidase
- detection
- ami
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 23
- 210000004165 myocardium Anatomy 0.000 title claims description 8
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 4
- 239000011575 calcium Substances 0.000 title claims description 4
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 title claims description 4
- 102100033130 T-box transcription factor T Human genes 0.000 title claims description 3
- 101710086566 T-box transcription factor T Proteins 0.000 title claims description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 title description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title description 4
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 claims description 7
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 claims description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- -1 silicic acid-p-iodophenol Chemical compound 0.000 claims description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 2
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 2
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 241001597008 Nomeidae Species 0.000 claims 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims 1
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 abstract description 6
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 abstract description 6
- 102000004903 Troponin Human genes 0.000 abstract description 3
- 108090001027 Troponin Proteins 0.000 abstract description 3
- 102100026893 Troponin T, cardiac muscle Human genes 0.000 abstract 1
- 101710165323 Troponin T, cardiac muscle Proteins 0.000 abstract 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 10
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 10
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 101100537532 Rattus norvegicus Tnni3 gene Proteins 0.000 description 6
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 5
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 5
- 206010000891 acute myocardial infarction Diseases 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 230000036651 mood Effects 0.000 description 3
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 102000004420 Creatine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108010042126 Creatine kinase Proteins 0.000 description 2
- 206010061216 Infarction Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 2
- 125000005077 diacylhydrazine group Chemical group 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 230000007574 infarction Effects 0.000 description 2
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 2
- HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N luminol Chemical compound O=C1NNC(=O)C2=C1C(N)=CC=C2 HWYHZTIRURJOHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003387 muscular Effects 0.000 description 2
- 230000003680 myocardial damage Effects 0.000 description 2
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000012744 reinforcing agent Substances 0.000 description 2
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 16-Epiaffinine Natural products C1C(C2=CC=CC=C2N2)=C2C(=O)CC2C(=CC)CN(C)C1C2CO PXFBZOLANLWPMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 206010002388 Angina unstable Diseases 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N DEAE-cellulose Chemical compound OC1C(O)C(O)C(CO)O[C@H]1O[C@@H]1C(CO)OC(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-WFVLMXAXSA-N 0.000 description 1
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical class CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 208000029549 Muscle injury Diseases 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 206010068676 Pneumoretroperitoneum Diseases 0.000 description 1
- 208000005727 Retropneumoperitoneum Diseases 0.000 description 1
- 102000013394 Troponin I Human genes 0.000 description 1
- 108010065729 Troponin I Proteins 0.000 description 1
- 102000004987 Troponin T Human genes 0.000 description 1
- 108090001108 Troponin T Proteins 0.000 description 1
- 208000007814 Unstable Angina Diseases 0.000 description 1
- XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N [3-(3'-methoxyspiro[adamantane-2,4'-dioxetane]-3'-yl)phenyl] dihydrogen phosphate Chemical compound O1OC2(C3CC4CC(C3)CC2C4)C1(OC)C1=CC=CC(OP(O)(O)=O)=C1 XYIPYISRNJUPBA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007675 cardiac surgery Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000004217 heart function Effects 0.000 description 1
- 238000005286 illumination Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 201000004332 intermediate coronary syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 239000011049 pearl Substances 0.000 description 1
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 1
- 208000037920 primary disease Diseases 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012205 qualitative assay Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000009183 running Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
一种用化学发光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白T(cTnT)的分析方法。
Description
技术领域
本发明属于临床血液免疫分析领域，建立了化学发光免疫分析法检测心肌肌钙蛋白T以早期、敏感、特异地诊断急性心肌梗死。此外本发明也可用于实验室作生理、病理、药理等多项研究。
技术背景
心血管疾病是常见病和多发病，是威胁人类健康的首要疾病。急性心肌梗死(acutemyocardial infarction，AMI)是常见的心血管疾病，正确诊断及时救治对挽救濒死心肌，改善预后降低急性期病死率和死亡率具有重要意义。在AMI的生化诊断方面，肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)等是目前常用的心肌酶谱。但是心肌酶谱并非心脏所特有，在正常人骨骼肌中也有少量存在。非心脏手术或骨骼肌损伤患者CK-MB也可升高，且CK-MB在AMI发病后4-8小时才开始升高，持续时间又短(48-72小时)，因而临床应用受到限制。1987年英国Cummins等首先报告用测定周围血中心肌钙蛋白(cTn)浓度来诊断AMI(Cummins，et al.infarction Am heart J，1987，113：1333-1334)。1991年Katus等人最早报道了cTnT对诊断AMI具有高度敏感性和特异性(clin.chem.1991；83：902-912.)。近年来研究表明，心肌肌钙蛋白(Cardiac Troponin)是心肌特异的调节蛋白，其亚单位肌钙蛋白T(cTnT)和肌钙蛋白I(cTnI)在AMI时释放入血是心肌损伤的特异性标志物，并具有灵敏度高，在血中出现时间早，诊断窗口时间长等优点。此外cTnT在预测梗塞面积，评价溶栓疗效，AMI预后心功能判定，不稳定心绞痛预后评估，围手术期心肌损伤的判定等方面均具有重要的临床价值。
以往学者们对cTnT诊断AMI的特异性有些争论。1991年katus发现cTnT与骨骼肌有1％-2％交叉反应(clin.Chem.1991；83：902-912.)。但也有学者认为cTnT与骨骼肌的基因编码不同，两者在结构和免疫原方面有很大差别。在检测cTnT的方法改进后，用两种均为心肌特异的单克隆抗体检测cTnT时，与骨骼肌交叉反应阳性率＜0.5％(Katus HA.etal.Clin.chem.1992，38：386)。Baum等人对75名无心脏病的骨骼肌患者(其中33名Duchenne病，42例马拉松运动员长跑后)用改进后的检测方法检测cTnT，未发现一例阳性反应(BodorGS.etal.Clin.chem.1992，38：2203.)。由此可以认为，在无心脏病的骨骼肌中及运动员血浆中未发现cTnT存在，所以cTnT对诊断急性心肌梗死与cTnI同样具有心肌特异性。然而当发生AMI时，cTnT在升高倍数和持续时间上优于cTnI，因为cTnT在正常人血清中含量很低，在心肌细胞中含量高，一旦少量释放入血浆，cTnT即可升高30-200倍，而cTnI仅升高10-20倍(杨振华：中华医学杂志。1992，72(1)51-52)。另外cTnT在血液和淋巴液中消除速率慢，AMI时cTnT升高可持续2-3周，较cTnI持续时间长。
因为cTnT在血中正常含量很低，测定方法需有很低的可测限和较高的灵敏度。最初建立检测血清cTnT的ELISA方法是基于亲和纯的一种多抗和一种单抗建立起来的，以后又发展了更敏感特异的ELISA单抗一步法，整个反应90分钟完成，检测范围0.1-15μg/L。由于全部采用单抗，检测结果重复性较高，与骨骼肌交叉反应性率＜0.5％(Katus HA.etal.Clin.chem.，1992，38：386)。快速定性测定方法采用金免疫层析法(郑佐娅，陶义训，上海医学检验杂志，1996，11，57-58。)。
1977年Arakawe创建了化学发光免疫分析(Chemiluminescent immunoassay，CLIA)。该方法可以使检测范围达到6个数量级，并且敏感度可达10的负18次方摩尔水平。
同化学发光免疫分析方法相比，酶免疫分析法和金免疫层析法在敏感度上要低得多。
发明内容
亲合素-生物素双单抗夹心一步法检测cTnT方法：该方法需要两种同cTnT反应具有不同结合位点的单抗。需制备单抗(1)同生物素的复合物，单抗(2)同酶的复合物，将链霉亲合素固化于固相载体上。当单抗(1)同生物素的复合物、单抗(2)同酶的复合物和样品(或标准品)一起加入反应池后，通过一步法生成复合物：固相载体-链霉亲合素-生物素-单抗(1)-cTnT-单抗(2)-酶，经过洗涤后加入底物、氧化剂、增强剂便可法光。
竞争法检测cTnT的方法只需用一种单抗。首先制备cTnT-链霉亲合素的复合物，酶-生物素的复合物，将单抗固化于固相载体上。当样品(或标准品)同cTnT-链亲合素复合物、酶-生物素复合物一起加入反应池，经过反应、洗涤后加入酶的底物、氧化剂、增强剂便可发光。
若底物是二酰基肼的衍生物，则单抗(2)所结合的酶为辣根过氧化物酶；若底物是环1，2-二氧乙烷衍生物(AMPPD)，则单抗(2)所结合的酶为碱性磷酸酶。
酶促化学发光免疫分析法可采用全自动检测仪，也可采用半自动发光仪。根据需要，固相载体可选用多孔板或磁微粒。
单克隆抗体同酶或生物素的结合已有多处报道，现已成常规方法：
1、J.Immunological Methods，1979，31：231-236。
2、J.Histochem.Cytochem，1979，22：1084-1091。
3、尹伯元、王仁芝、李振甲、许以平等编著《标记免疫学》：41-50页。
4、Peters JH，Baumgarten H eds.Monoklonale.1988：1349-53。
具体实施方式
实施例1
cTnT的提取、纯化及其单克隆抗体的制备。参照文献〔Jin J-P，J.Biol.Chem.1988，263(15)：7309；傅朝平等细胞与分子免疫学杂志，1996，12(1)：39；周国华等，中国生理学杂志，2004，6(2)：198；张海珠等，郑州大学学报(医学版)，2003年，03期；李志梁、傅朝平等，生物化学与生物物理进展，1996，第五期〕，将新鲜无心脏病的心肌组织无盐匀浆，70℃高盐萃取，硫酸铵盐析，DEAE纤维素柱层析，获得cTnT纯品。100g心肌组织获得4.5mg cTnT。经凝胶电泳cTnT为一条带，经免疫印迹鉴定证实DEAE纤维柱层析第二峰为cTnT的活性峰。
cTnT免疫BALB/c小鼠。首次用35μg cTnT同等体积不完全佐剂混合(含2.0mg卡介苗)腹腔注射，以后每周脾内注射cTnT 35μg，共免疫3次。第4次为加强免疫，cTnT 50μg脾内注射，3-5天内进行融合。
细胞融合及单抗产生：小鼠脾细胞同Sp2/0骨髓瘤细胞按1∶5进行融合。克隆化培养，3次间接ELISA筛选阳性杂交瘤细胞珠。接种BALB/c：成年小鼠基础免疫用0.2ml降植烷和不完全佐剂腹腔注射，1周后腹腔注射杂交瘤细胞悬液，10-12天处死接种小鼠，收集腹水，其效价在1.5×10的负6次至1.0×10的负7次方。经硫酸铵分级沉淀、透析、浓缩后加甘油置-20℃保存。。相加试验证实，A3、D6可识别cTnT不同位点。该单抗不与cTnI及骨骼肌反应。A3称为单抗(1)，D6称为单抗(2)。
实施例2
辣根过氧化物酶发光体系的配制方法：发光底物二酰基肼的衍生物(优选鲁米诺)浓度为1.0mMol/L。复合氧化剂：过硼酸钠-H2O2各为1.0mMol/L。复合增强剂：对羟基肉硅酸-对碘酚各为0.05mMol/L。用0.1Mol/L，pH8.60的Tris-HCl缓冲液调整pH。
实施例3
亲合素-生物素双单抗夹心一步法检测cTnT化学发光免疫分析方法的建立：
1、按前述文献制备单抗(1)同生物素的复合物，单抗(2)同辣根过氧化物酶的复合物，将链霉亲合素结合于Nunc板上。
2、建立亲合素-生物素双单抗夹心一步法检测cTnT的CLIA法。将待测血清(或cTnT的标准品)、单抗(1)同生物素的复合物、单抗(2)同辣根过氧化物酶的复合物各50μl加入经链霉亲合素包被的Nanc板孔中，37℃温育60分钟，用PBST洗涤3次，加入鲁米诺底物溶液(具体配制见实施例2)，用化学发光免疫分析仪检测425nm发光值，由微机软件算出样品含量。该方法的灵敏度经测定(Bo+2SD)为0.005ng/ml，检测范围0.01-1.50ng/ml。
实施例4
正常人与AMI患者血液内cTnT含量测定。正常人51例，AMI患者19例，正常人组cTnT的含量为0.02±0.01ng/mL，AMI组为0.95±0.22ng/mL。
Claims (3)
1.心肌钙蛋白T(cTnT)化学发光免疫分析方法，其特征在于用辣根过氧化物酶促化学发光体系。
2.根据权利要求1所述免疫分析方法，其特征在于用双单抗夹心法和/或竞争法检测cTnT。
3.根据权利要求1所述辣根过氧化物酶促化学发光体系，其特征在于用二酰基肼衍生物作为发光底物，过氧硼酸钠-H2O2作为复合氧化剂，对羟基肉硅酸-对碘酚作为复合增强剂，辣根过氧化物酶作为酶促催化剂。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2006101304033A CN101206225A (zh) | 2006-12-19 | 2006-12-19 | 化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CNA2006101304033A CN101206225A (zh) | 2006-12-19 | 2006-12-19 | 化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101206225A true CN101206225A (zh) | 2008-06-25 |
Family
ID=39566585
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CNA2006101304033A Pending CN101206225A (zh) | 2006-12-19 | 2006-12-19 | 化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101206225A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102183657A (zh) * | 2011-02-24 | 2011-09-14 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种依赖聚苯乙烯纳米粒大幅度增加化学发光磁酶免疫灵敏度的方法 |
| CN102692508A (zh) * | 2012-04-28 | 2012-09-26 | 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 | 一种快速定量检测肌钙蛋白t的免疫荧光试纸条组件及其制成的检测卡组件和制备方法 |
| CN103703373A (zh) * | 2011-04-15 | 2014-04-02 | 西特斯特有限公司 | 利用igfbp片段确定心血管事件的风险的方法 |
| CN105527419A (zh) * | 2014-12-11 | 2016-04-27 | 北京新华联协和药业有限责任公司 | 遗传性血管水肿的检测试剂盒及其制备方法 |
-
2006
- 2006-12-19 CN CNA2006101304033A patent/CN101206225A/zh active Pending
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102183657A (zh) * | 2011-02-24 | 2011-09-14 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种依赖聚苯乙烯纳米粒大幅度增加化学发光磁酶免疫灵敏度的方法 |
| CN102183657B (zh) * | 2011-02-24 | 2014-02-05 | 南京基蛋生物科技有限公司 | 一种依赖聚苯乙烯纳米粒大幅度增加化学发光磁酶免疫灵敏度的方法 |
| CN103703373A (zh) * | 2011-04-15 | 2014-04-02 | 西特斯特有限公司 | 利用igfbp片段确定心血管事件的风险的方法 |
| US10191066B2 (en) | 2011-04-15 | 2019-01-29 | Hytest Ltd. | Method for determining the risk of cardiovascular events using IGFBP fragments |
| CN102692508A (zh) * | 2012-04-28 | 2012-09-26 | 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 | 一种快速定量检测肌钙蛋白t的免疫荧光试纸条组件及其制成的检测卡组件和制备方法 |
| CN102692508B (zh) * | 2012-04-28 | 2014-12-17 | 广州鸿琪光学仪器科技有限公司 | 一种快速定量检测肌钙蛋白t的免疫荧光试纸条组件及其制成的检测卡组件和制备方法 |
| CN105527419A (zh) * | 2014-12-11 | 2016-04-27 | 北京新华联协和药业有限责任公司 | 遗传性血管水肿的检测试剂盒及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Zhao et al. | Ultrasensitive chemiluminescence immunoassay with enhanced precision for the detection of cTnI amplified by acridinium ester-loaded microspheres and internally calibrated by magnetic fluorescent nanoparticles | |
| EP3258270B1 (en) | Cardiac troponin i ultra-sensitive detection reagent kit, and ultra-sensitive detection method therefor | |
| Rabitzsch et al. | Immunoenzymometric assay of human glycogen phosphorylase isoenzyme BB in diagnosis of ischemic myocardial injury | |
| EP0150999A2 (en) | Methods of Assay | |
| CN101226200A (zh) | 吖啶酯和碱性磷酸酶化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t超敏感方法 | |
| AU2009275875B2 (en) | Method for the in vitro diagnosis of stroke | |
| CN101271108A (zh) | 心肌梗塞早期诊断液相芯片及其制备方法 | |
| Siboo et al. | A fluorescent immunoassay for the quantification of C-reactive protein | |
| WO2016011852A1 (zh) | 膀胱肿瘤相关抗原检测试剂盒 | |
| CN102539784A (zh) | 一种检测心肌肌钙蛋白i的方法及其应用 | |
| Pelley et al. | Purified antigen radioimmunoassay in serological diagnosis of schistosomiasis mansoni | |
| Vaidya | Myoglobin | |
| WO2010012834A1 (en) | Method for the in vitro diagnosis of stroke | |
| CN101206225A (zh) | 化学发光免疫分析检测心肌钙蛋白t的方法 | |
| Matthews et al. | Muscle-specific receptor tyrosine kinase autoantibodies—a new immunoprecipitation assay | |
| FI88546C (fi) | Nytt foerfarande foer bestaemning av stabilt glukohemoglobin | |
| CN102735849A (zh) | 一种人心肌脂肪酸结合蛋白酶促化学发光免疫检测方法和试剂盒 | |
| De Alwis et al. | Reversibly immobilized glucose oxidase in the amperometric flow-injection determination of glucose | |
| CN109298178A (zh) | 基于免疫磁珠的心脏肌球蛋白结合蛋白C（cMyBP-C）时间分辨荧光免疫分析试剂盒 | |
| Ohe et al. | Radioimmunoassay of glycosylated albumin with monoclonal antibody to glucitol-lysine | |
| Kitajima et al. | Production of antibodies to calmodulin in rabbits and enzyme immunoassays for calmodulin and anti-calmodulin | |
| Barbarakis et al. | Observation of" hook effects" in the inhibition and dose-response curves of biotin assays based on the interaction of biotinylated glucose oxidase with (strept) avidin | |
| De Boever et al. | Direct solid-phase chemiluminescence immunoassay for salivary progesterone. | |
| Jørgensen et al. | Analytical evaluation of a sensitive enzyme immunoassay for determinations of creatine kinase isoenzyme MB | |
| JP3998245B2 (ja) | 酸化アポリポタンパク質ａｉ及びそれを含有する酸化リポタンパク質の測定法及びキット |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C57 | Notification of unclear or unknown address | ||
| DD01 | Delivery of document by public notice |
Addressee: Su Dianjie Document name: Written notice of preliminary examination of application for patent for invention |
|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20080625 |