CN101204466B - 一种抗糖尿病药物 - Google Patents
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Abstract
本发明属于药物领域,特别涉及一种抗糖尿病新药,它以野生植物翻白草和茶叶为原料,以1∶1~1∶10或10∶1的比例经八步工艺步骤制取的原药干粉,溶解在生理盐水中从而制得抗糖尿病新药口服液,原药干粉还可与可药用载体或赋形剂按传统方法制成抗糖尿病片剂、冲剂、胶囊、滴丸制剂,其口服液用于动物试验发现能有效地降低链脲佐菌素诱发实验性II型糖尿病小鼠的摄食量、体重、血糖和血液中糖化血红蛋白的含量,提高葡萄糖耐受性,并能显著降低四氧嘧啶诱导的I型糖尿病小鼠模型血糖水平。
Description
技术领域:
本发明属于药物领域,特别涉及一种抗糖尿病药物。
背景技术:
糖尿病是由于遗传和环境因素相互作用,引起胰岛素绝对或相对分泌不足以及靶组织细胞对胰岛素敏感性降低,引起蛋白质、脂肪、水和电解质等一系列代谢紊乱综合征,其中以高血糖为主要标志。临床典型病例可出现多尿、多饮、多食、消瘦等表现,即“三多一少”症状,糖尿病是最常见的慢性病之一,随着人们生活水平的提高,人口老龄化以及肥胖率的增加,糖尿病的发病率呈逐年上升趋势。糖尿病在中国的发病率达到2%,据统计,中国已确诊的糖尿病患者达4000万,并以每年100万的速度递增。其中,I型糖尿病患者占10%,II型糖尿病患者占90%。I型糖尿病患者在确诊后的5年内很少有慢性并发症的出现,而II型糖尿病患者在确诊之前就已经有慢性并发症发生。据统计,有50%新诊断的II型糖尿病患者已存在一或种一种以上的慢性并发症,有些患者是因为并发症才发现患糖尿病的。
1985年全球糖尿病患者估计约3000万人。到1995年该数字突破13500万。目前WHO预测2025年将上升到惊人的30000万。该现状使专用于糖尿病的健康护理资源不断增加(www.wh0.int)。美国大约有1570万人患有糖尿病,占人口总数5.9%,其中2/3患II型糖尿病。每天约有2200人被诊断为糖尿病。2001年大约有798,000人被诊断患有糖尿病(American Diabetes Association, www.diabetes.org)。在美国,糖尿病是疾病导致死亡的第六大原因。根据死亡证明资料,1996年因糖尿病导致198140人死亡。在美国,糖尿病是花费最多的健康问题之一。与糖尿病治疗直接相关的健康护理和其它花费,以及丧失生产力的代价,每年达98亿美元。1999年全球抗糖尿病药物销售总计约12.7亿美元,预期每年增长率为15%,因此,研制这一种有效的预防和治疗糖尿病的药物,在世界范围内扼制糖尿病的发生迫在眉睫。原有治疗糖尿病使用的胰岛素、磺酰脲类、双胍类药物,虽降糖作用明显,但存在诸多副作用,而且价格昂贵,耐药性强。
发明内容:
本发明针对糖尿病药物存在的不足,研制和开发选择性强,无副作用,高效价廉抗糖尿病药物。
本发明是这样实现的:我们利用遍及全国各地,广泛分布于我国东北地区的野生草药翻白草,将翻白草和茶叶以1∶1~1∶10或10∶1的比例由下面步骤制得;
a、将翻白草洗狰、晒干、切片,并粉碎过筛至25~50目;
b、在蒸馏水中浸泡0.5~16小时;
c、加热煮沸10~120分钟;
d、冷却至室温并保持3小时~5小时后以常法浸提;
e、将浸提液用多层纱布过滤;
f、将所得过滤液在25℃~4℃条件下,冷浸泡茶叶1-24小时;
g、以常法浸提后用多层纱布过滤茶叶渣;
h、将所得过滤液经真空冷冻干燥至-140℃~-150℃得产品原药干粉;
其中蒸馏水用量以翻白草50克,蒸馏水3000ml量计算。
将原药干粉溶解在25%的生理盐水中,经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌,制得抗糖尿病药物口服液。
抗糖尿病原药干粉可作为糖尿病药物的原料药,与可药用载体或赋形剂制成抗糖尿病片剂、冲剂、胶囊制剂、滴丸制剂。
本发明的优点及积极效果:经动物试验发现本发明口服液能极为有效地降低链脲佐菌素诱发实验性II型糖尿病小鼠的摄食量、体重、血糖和血液中糖化血红蛋白的含量(P<0.01),并提高葡萄糖耐受性,同时,本发明口服液极为显著地降低四氧嘧啶诱导的I型糖尿病小鼠模型血糖水平,这些结果显示本发明抗I型糖尿病和II型糖尿病的能力明显优于翻白草热水提取液或茶叶冷水浸泡提取液,并且还发现翻白草和茶叶联合使用具有强大的协同性抗糖尿病作用。
附图说明:
图1为抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对II型糖尿病小鼠小鼠血糖的影响的对比图;
图2为抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对小鼠糖耐量的影响对比曲线图;
图3为抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对小鼠糖化血红蛋白的影响对比曲线图。
具体实施方式:
为了更进一步描述本发明,下面用具体实施例来说明。
实施例1
1、配料:翻白草:50克
茶叶:50克
2、制备:
将新采集的生长在湖北省的翻白草洗净,晒干,切片并粉碎,粉碎过筛至25~50目。取50克粉碎后的翻白草加3000毫升的蒸馏水浸泡0.5小时,然后将其煮沸30分钟,之后慢慢冷却到室温状态并保持3小时以常法浸提,浸提完毕后经8层沙布过滤除翻白草药渣得滤过液2000毫升。然后在4℃条件下用2000毫升滤液浸泡50克茶叶10小时,浸提完毕后用2层沙布过滤除茶叶渣。将所得过滤液经真空冷冻干燥-140℃得1克本发明抗糖尿病原药干粉。将抗糖尿病原药干粉溶解在25%生理盐水中,经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌,从而制备成抗糖尿病药物口服液。其浓度每毫升含40毫克的干重物。
药效实验:
1、对比药液的制备:
a、翻白草水提口服液:药物原材料采集生长在湖北省的翻白草。翻白草洗净,晒干,切片和粉碎,粉碎后各样本达25-50目。取50克粉碎后的翻白草加3000毫升的蒸馏水浸泡0.5至16小时(本试验为半小时),然后将其煮沸10至120分钟(本试验为30分钟),之后慢慢冷却到室温状态并保持3小时浸提。浸提完毕后多层沙布过滤除翻白草药渣(本试验为8层沙布)得滤过液2000毫升。将所得滤 过液经真空冷冻干燥(-140℃)得0.5克翻白草水提口服液原药干粉。将翻白草水提口服液原药干粉溶解在25%生理盐水中,经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌,从而制备成翻白草水提口服液。其浓度每毫升含
20毫克的干重物。
b、茶叶水提物口服液:药物原材料采集生长在广东省的茶叶在25℃至4℃(本试验为4℃)条件下用这2000毫升蒸馏水冷浸泡50克茶叶1至24小时(本试验为10小时),浸提完毕后用2层沙布过滤除茶叶药渣。将所得滤过液经真空冷冻干燥(-140℃)得0.5克茶叶水提物口服液原药干粉。将茶叶水提物口服液原药干粉溶解在25%生理盐水中,经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌,从而制备成茶叶水提物口服液。其浓度每毫升含20毫克的干重物。
2、药效对比试验及试验结果分析:
a、抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对小鼠的急性毒性研究:
取六组8周龄的昆明小鼠(购买于南方医科大学动物研究中心),第一组和第二组各10只(5只雄性和5只雌性),分别以单次剂量2g/kg和多次剂量0.4g/kg(QD X15)盛泰九号抗糖尿病口服液灌胃给予水提取物口服液,然后分别观察1周和4周。第三组和第四组各10只(5只雄性和5只雌性),分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QD X15)翻白草水提口服液,然后分别观察1周和4周。第五组和第六组各10只(5只雄性和5只雌性),分别以单次剂量1g/kg和多次剂量0.2g/kg(QD X15)茶叶水提物口服液灌胃给予水提取物口服液,然后分别观察1周和4周。在此试验中,每两天称体重。试验结束后,将受试小鼠处死,进行病理分析。
结果表明:在此试验中,均未观察到毒性,所有受试小鼠生长良好,无一死亡。
b、抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对链脲佐菌素诱导II型糖尿病小鼠的影响研究:
II型糖尿病小鼠模型的建立:26~28克体重的小鼠(购买于南方医科大学实验动物中心)先以普通饲料喂养1周以适应环境,从中随机选取足够数量生长正常的小鼠80只,饲喂高脂高糖饲料4周,然后腹腔注射购买于Sigma公司的链脲佐菌素(STZ),每只小鼠的注射量分别为100mg/kg(链脲佐菌素稀释在0.05mol/L的柠檬酸注射溶液中),同时继续饲喂高脂高糖饲料4周(高糖高脂饲料:基础饲料中加入10%蛋黄粉、10%熟猪油、1%胆固醇、0.5%脱氧胆酸钠),模型对照组注射0.05mol/L的柠檬酸溶液,每周监测小鼠血糖值,以第4周测得值为准,选取血糖达到糖尿病级数并具有相似血糖水平的小鼠作为II型糖尿病模型小鼠,将模型小鼠随机分为A、B、C、D四组,每组10只,其中A组为模型对照组,每天每只小鼠灌胃0.2ml生理盐水,B、C、D三组分别每天每只灌胃0.2ml抗糖尿病口服液(0.4g/kg体重),翻白草水提口服液(0.2g/kg体重)或茶叶水提物口服液(0.2g/kg体重)。各组小鼠连续灌胃36天,然后禁食过夜(15h),眼球取血,测定各小鼠的血糖和糖化血红蛋白含量。在灌胃11天后,各组小鼠禁食过夜,眼内眦取血,测定血糖,然后各组小鼠按2g/kg体重腹腔注 射葡萄糖水溶液,分别于注射后0、10、30、60、90、120分钟测定小鼠的血糖值,测定小鼠葡萄糖耐受性。
见图1,结果表明:抗糖尿病口服液组(B组),翻白草水提口服液组(C组)和茶叶水提物口服液组(D组)与模型对照组(A组)相比较发现,A组小鼠血糖有轻微的增加,但喂食前后差异无显著性(P>0.05);B、C、D三组小鼠喂食前后血糖浓度有显著降低(P<0.01),且B组较C、D组小鼠血糖下降更低,之间有显著差异(P<0.01)。
见图2,结果表明:小鼠注射葡萄糖后120分钟内,B、C、D三组小鼠血糖浓度显著低于A组(P<0.01),且B组最低。
见图3,结果表明:B、C、D三组小鼠糖化血红蛋白的含量均显著低于A组(P<0.01),而且B组最低(P>0.05)。
c.抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液对链四氧嘧啶诱导I型糖尿病小鼠的影响研究:
第一步:实验动物I型糖尿病模型的建立:26~28克体重的小鼠(购买于南方医科大学实验动物中心),禁食16h,准备给予四氧嘧啶造模。四氧嘧啶溶液临用前配制,浓度为12mg/ml。给药方式为腹腔注射,剂量120mg/(kg体重),一周后,于第8天断食3小时后,眼眶内眦采血,离心取上层血清在24小时内用葡萄糖氧化酶法测定血糖。取血糖值>12mmol/L的糖尿病模型小鼠分组进行翻白草降血糖实验。
第二步:实验动物分组及处理:取血糖值>12mmol/L的糖尿病模型小鼠40只,将模型小鼠随机分为A、B、C、D四组,每组10只,其中A组为模型对照组,每天每只小鼠灌胃0.2ml生理盐水,B、C、D三组分别每天每只灌胃0.2ml盛泰九号抗糖尿病口服液(0.4g/kg体重),翻白草水提口服液(0.2g/kg体重)和茶叶水提物口服液(0.2g/kg体重)。正常小鼠10只作为对照组。给药方式为灌胃,每天1次,时间30天。30天后,测血糖值,条件和方法同前。30d内每周称各组小鼠空腹体重,观察体重变化。
见表1抗糖尿病药物口服液组,翻白草水提口服液组和茶叶水提物口服液组与糖尿病模型组比较,血糖降低差异有统计学意义(P<0.01),而且抗糖尿病口服液组降血糖能力最强。实验期间,通过对动物体重的观察可知,糖尿病模型组动物体重增长缓慢,其余各组动物体重均稳定增长,但各组之间比较差异无统计学意义(P>0.05),可认为翻白草各部分对糖尿病小鼠的体重没有影响。
表1为抗糖尿病口服液,翻白草水提口服液和茶叶水提物口服液
对链四氧嘧啶诱导I型糖尿病小鼠的影响(X±S)对比列表
组别 | 动物数 | 实验前 | 实验后 |
正常对照组 | 10 | 7.5±1.1 | 8.5±1.8 |
糖尿病模型组(A) | 10 | 16.9±3.2 | 15.4±2.6 |
抗糖尿病药物口服 液(B) | 10 | 17.1±2.7 | 8.7±1.5 |
翻白草口服液 | 10 | 16.8±2.8 | 11.5±2.3 |
茶叶口服液 | 10 | 16.5±3.1 | 12.8±1.5 |
Claims (3)
1.一种抗糖尿病药物,其特征在于:将野生植物翻白草和茶叶以1∶1的比例由下面步骤制得;
a、将翻白草洗净、晒干、切片,粉碎过筛至25~50目;
b、在蒸馏水中浸泡0.5~16小时;
c、加热煮沸10~120分钟;
d、冷却至室温并保持3小时~5小时后以常法浸提;
e、将浸提液用多层纱布过滤;
f、将所得过滤液在25℃~4℃条件下,浸泡茶叶1~24小时;
g、以常法浸提后用多层纱布过滤茶叶渣;
h、将所得过滤液经真空冷冻干燥至-140℃~-150℃得产品原药干粉;
其中蒸馏水用量以翻白草50克,蒸馏水3000ml量计算。
2.根据权利要求1所述的一种抗糖尿病药物,其特征在于:将原药干粉溶解在25%的生理盐水中,经0.2微米孔径滤膜过滤灭菌,得口服液。
3.根据权利要求1所述的一种抗糖尿病药物,其特征在于:原药干粉可作为糖尿病药物的原料药与可药用载体或赋形剂制成抗糖尿病片剂、冲剂、胶囊制剂、滴丸制剂。
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崔荣军等.翻白草对2型糖尿病大鼠血糖的影响.中国临床康复第9卷 第11期.2005,第9卷(第11期),第84,85页. |
崔荣军等.翻白草对2型糖尿病大鼠血糖的影响.中国临床康复第9卷 第11期.2005,第9卷(第11期),第84,85页. * |
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