CN101139305B

CN101139305B - 4'-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物

Info

Publication number: CN101139305B
Application number: CN2006100861805A
Authority: CN
Inventors: 张喜全; 顾红梅; 徐宏江; 付辉; 李宝林; 郭键; 赖宜天; 王伟
Original assignee: Jiangsu Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Co Ltd; Shaanxi Normal University
Current assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd; Shaanxi Normal University
Priority date: 2006-09-08
Filing date: 2006-09-08
Publication date: 2011-09-14
Anticipated expiration: 2026-09-08
Also published as: CN101139305A

Abstract

本发明涉及具有全新结构的4′-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物及其制备方法，还涉及它们在抗肿瘤领域的用途。

Description

4'-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物

技术领域

本发明涉及具有全新结构的4＇-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物及其制备方法，还涉及它们在抗肿瘤领域的用途。

背景技术

白藜芦醇(3，4＇，5-三羟基二苯乙烯)是早期发现的存在于葡萄等食物之中的植物抗毒素，这种具有二苯乙烯母核的化合物后来发现具有预防心脏病，抑制血小板凝聚，调控脂质和脂蛋白代谢，抗氧化及对肿瘤的治疗等作用(Philippe deMedina，Robert Casper，Jean-Francüois Savouret，et.al.J.Med.Chem.2005，48，287-291；Marinella Roberti，Daniela Pizzirani，Daniele Simoni，et al.J.Med.Chem.2003，46，3546-3554；A Gosslau，M Chen，Ci-T Ho，KY Chen.British Journal ofCancer2005，92，513-521)。近年来，以白藜芦醇为先导化合物或以二苯乙烯为母核已设计合成得到了一系列具有重要生理活性的二苯乙烯化合物，这类化合物通过局部外用或全身给药均表现出对良性、恶性肿瘤的预防和治疗作用。M.Cushman等人曾报道具有二苯乙烯母核的E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基二苯乙烯表现出抗肿瘤活性(Mark Cushman，Dhanapalan Nagarathnam，D.Gopal，et al.J.Med.Chem.1991，34，2579-2588)，同篇文献报道当这个化合物的4＇-氨基上两个氢原子被甲基取代后抗肿瘤活性大幅度增强，这可能是氨基上氢被甲基取代后改变了化合物的分配系数，使生物利用度增加的结果。考虑到给氨基上引入酰基也可能会增加其脂溶性改变其分配系数，本发明以4＇-胺基二苯乙烯的烷氧基衍生物为原料，通过给这类化合物的4＇-氨基上引入酰基得到了一系列4＇-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物。当对这些新化合物进行抗肿瘤活性研究时，发明人发现新的衍生物表现出与E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基二苯乙烯相当的抗肿瘤活性，但其对正常细胞的毒副作用却明显地低于E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基二苯乙烯和阳性对照物紫杉醇。这说明本发明所得到的4＇-酰胺基二苯乙烯的烷氧基衍生物是一类毒副作用更低的新抗癌物质。

发明内容

本发明的目的在于提供一系列4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物。

本发明的另一个目的在于提供这些4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物的制备方法。

本发明的再一个目的在于提供以4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物为活性成分的药物组合物。

本发明的还一个目的在于提供这些4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物在抗肿瘤领域中的用途。

本发明提供具有结构式如下所示的二苯乙烯类新化合物：

其中R₁、R₂、R₃可以相同或不同，为H原子或C₁～C₁₀的烷氧基，且R₁、R₂、R₃其中两个不能同时为H原子，其中C₁～C₁₀的烷氧基可以是直链、支链或环状的烷氧基；

优选R₁、R₂、R₃相同，为C₁～C₁₀的烷氧基，或；

R₁、R₂相同，为C₁～C₁₀的烷氧基，R₃为H；

更优选R₁、R₂、R₃相同且均为甲氧基，或；

R₁、R₂相同且均为甲氧基，R₃为H。

R为结构式如下的基团：

其中R₄为C₁～C₉的烷基

最优选如下的化合物：

1.E-3，4，5-三甲氧基-4＇-乙酰胺基-1，2-二苯乙烯(A)

2.E-3，4，5-三甲氧基-4＇-丙酰胺基-1，2-二苯乙烯(B)

3.E-3，4-二甲氧基-4＇-壬酰胺基-1，2-二苯乙烯(C)

4.E-3，4，5-三甲氧基-4＇-壬酰胺基-1，2-二苯乙烯(D)

上述二苯乙烯衍生物可按如下方法制备：

本发明以4＇-胺基二苯乙烯的烷氧基衍生物为原料，分别与C₂～C₁₀的羧酸、酸酐或酰卤进行反应，合成得到了在4＇-位为C₂～C₁₀的酰胺基二苯乙烯类的新化合物。

其化学反应式如下：

反应所用的4＇-氨基二苯乙烯的烷氧基衍生物中R₁、R₂、R₃可以相同或不同，为H原子或C₁～C₁₀的烷氧基，且R₁、R₂、R₃中两个不同时为H原子，其中C₁～C₁₀的烷氧基可以是直链、支链或环状的烷氧基；优选R₁、R₂、R₃相同，为C₁～C₁₀的烷氧基，或R₁、R₂相同，为C₁～C₁₀的烷氧基，R₃为H；更优选R₁、R₂、R₃相同且均为甲氧基，或R₁、R₂相同且均为甲氧基，R₃为H；X为卤素，如氯、溴或碘。反应中所用的酰基化试剂可以是C₂～C₁₀的酸酐、羧酸或酰卤(如酰氯、酰溴或酰碘)，反应条件可以按公知的反应条件进行。

本发明得到的4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物可以与药物可接受的载体制备成为药物组合物，所述的组合物包括口服药物组合物、注射药物组合物和局部给药药物组合物。

动物实验显示，本发明得到的4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物在表现出优良的抗肿瘤活性的同时，相比于已有的4’-氨基二苯乙烯烷氧基衍生物具有更低的细胞毒性。这些结果预示着本发明的4’-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物将在抗肿瘤领域具有良好的应用前景。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细说明，但本发明不限于这些实施例。

实施例中所用的E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基-1，2-二苯乙烯、E-3，4-二甲氧基-4＇-氨基-1，2-二苯乙烯分别以3，4，5-三甲氧基苯甲醛、3，4-二甲氧基苯甲醛及对硝基甲苯为原料合成，具体合成方法参考中国发明专利CN1539805A，其它所用试剂均为分析纯。化合物结构确定所用的核磁共振仪为Bruker AM-300超导核磁共振仪，TMS作为内标；红外光谱采用Nicolet170SX FT-IR红外光谱仪测定；熔点采用WRS-113数字熔点测定仪测定(熔点未进行校正)；元素分析在Vario ELIII元素分析仪(德国元素分析系统公司)上进行测定。

实施例1：E-3，4，5-三甲氧基-4＇-乙酰胺基-1，2-二苯乙烯(A)

在50mL三颈烧瓶中加入0.85mL浓盐酸，20mL水，2.85g E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基-1，2-二苯乙烯，1.2mL乙酸酐，0.89g乙酸钠，搅拌下反应半小时，抽滤得固体粗产品。将粗产品在无水乙醇中重结晶得白色疏松固体2.63g，产率80.4％，m.p：189～191℃。

¹HNMR(300MHz，丙酮-d6)δ(ppm)：2.08(s，3H，-CH₃)，3.74(s，3H，-OCH₃)，3.87(s，6H，-OCH₃)，6.90(s，2H，2，6-Ar-H)，7.11(d，J＝16.2Hz，1H，-CH＝CH-)，7.14(d，J＝16.2Hz，1H，-CH＝CH-)，7.51(d，J＝8.1Hz，2H，3`，5`-Ar-H)，7.64(d，J＝8.1Hz，2H，2`，6`-Ar-H)。

¹³C NMR(75MHz，丙酮-d6)δ(ppm)：168.1(s，C＝O)，153.7(s)，138.9(s)，138.3(s)，133.4(s)，132.6(s)，127.5(d，-CH＝CH-)，127.3(d，-CH＝CH-)，126.7(d)，119.2(d)，104.0(d)，59.7(q，-OCH₃)，55.6(q，-OCH₃)，23.3(q，-NHCOCH₃)。

IR v^KBr _maxcm^-1：3289(NH)，1658(C＝O)，1583，1521，1463(ArH)，1243(Ar-O)，953(反式烯键)。

元素分析(C₁₉H₂₁NO₄)实测值(计算值)(％)：C：70.02(69.71)，H：6.41(6.47)，N：4.58(4.28)，O：18.99(19.55)。

实施例2：E-3，4，5-三甲氧基-4＇-丙酰胺基-1，2-二苯乙烯(B)

在25mL单口瓶中加入1.43g E-3，4，5-三甲氧基-4＇-氨基-1，2-二苯乙烯，2.5mL丙酸，少量锌粉，油浴120℃反应两小时。升温至180℃，蒸出过量的丙酸。给残留物中加水后抽滤得棕色固体。将滤饼分别用稀氢氧化钠和稀盐酸溶液洗涤后再用水洗至冼脱液至中性。将所得固体物溶于乙醇中用活性炭脱色后得粗产品。粗产品用乙醇/水的混合液重结晶后得白色松散固体0.74g，产率43.5％，m.p：178～180℃。

¹HNMR(300Hz，丙酮-d6)δ(ppm)：1.17(t，3H，-CH₃)，2.39(q，2H，-CH₂-)，3.76(s，3H，-OCH₃)，3.88(s，6H，-OCH₃)，6.91(s，2H，2，6-Ar-H)，7.11(d，1H，J＝16.2Hz，-CH＝CH-)，7.14(d，1H，J＝16.2Hz，-CH＝CH-)，7.52(d，2H，J＝8.1Hz，3`，5`-Ar-H)，7.68(d，2H，J＝8.1Hz，2＇，6＇-Ar-H)。

¹³C NMR(75MHz，丙酮-d6)δ(ppm)：171.9(s，C＝O)，153.7(s)，138.9(s)，138.2(s)，133.4(s)，132.6(s)，127.5(d，-CH＝CH-)，127.3(d，-CH＝CH-)，126.7(d)，119.2(d)，104.0(d)，59.8(q，-OCH₃)，55.6(q，-OCH₃)，29.8(t)，23.3(q)。

IRv^KBr _maxcm^-1：3316，(NH)，1658(C＝O)，1581，1510，1452(ArH)，1244(Ar-O)，955(反式双键)。

元素分析(C₂₀H₂₃NO₄)实测值(计算值)(％)：C：71.19(70.36)，H：6.75(6.79)，N：4.45(4.10)，O：17.61(18.75)。

实施例3：E-3，4-二甲氧基-4＇-壬酰胺基-1，2-二苯乙烯(C)

在50mL三口圆底烧瓶中，加入1.25克3，4-二甲氧基-4＇-胺基-1，2-二苯乙烯、10mL壬酸及0.1克锌粉，装上蒸馏装置在160℃下反应，TLC跟踪，至原料点消失。反应4小时后，冷却到室温。加入30mL乙醇，1.5克活性碳，回流10分钟后，乘热抽滤，滤液冷却到室温后，加入适量的水，有大量的固体析出，抽滤，得到白色的固体1.25克，产率65％，m.p：160～163℃。

¹H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：0.88(t，3H，-CH₃)，1.27(m，10H，-CH₂)，1.73(m，2H，-CH₂)，2.35，2.351.73(t，2H，-CH₂)，3.89(3H，-OCH₃，s)，3.94(3H，-OCH₃，s)，6.84-7.19(m，5H)，7.45(d，2H，J＝8.2Hz)，7.52(d，2H，J＝8.2Hz)

¹³C NMR(75MHz，CDCl₃)δ(ppm)：14.0(q)，22.6(t)，25.6(t)，29.1(t)，29.2(t)，29.3(t)，31.8(t)，37.9(t)，55.8(q，-OCH₃)，55.9(q，-OCH₃)，108.9(d)，111.4(d)，119.8(d)，120.0(d)，126.2(d)，126.8(d)，127.7(d)，130.6(s)，137.1(s)，148.9(s)，149.2(s)；

IR v^KBr _maxcm^-1：3314(-NH)，1661(C＝O)，1591，1521，1495(ArH)，1258(Ar-O)，960(trans-RCH＝CHR)。

元素分析(C₂₅H₃₃NO₃)实测值(理论值)(％)：C：75.89(75.91)，O：12.25(12.14)，H：8.34(8.41)，N：3.54(3.54)。

实施例4：E-3，4，5-三甲氧基-4＇-壬酰胺基-1，2-二苯乙烯(D)

在25mL单口瓶中加入1.43gE-3，4，5-三甲氧基-4＇-胺基-1，2-二苯乙烯，2.0mL壬酸，少量锌粉，油浴150℃反应四小时。给反应混合物中加水后抽滤得棕色固体，滤饼分别用稀盐酸和稀氢氧化钠溶液洗涤，再用水洗至中性。将此固体溶于丙酮中用活性炭脱色后，蒸除丙酮得粗产物。粗产物在无水乙醇中重结晶得白色固体0.96g，产率41.7％。

¹HNMR(300Hz，丙酮-d6)δ(ppm)：0.87(t，3H，-CH₃)，1.29(m，10H，-CH₂-)，1.66(q，2H，-CH₂-)，2.38(t，2H，-CH₂-)，3.74(s，3H，-OCH₃)，3.88(s，6H，-OCH₃)，6.91(s，2H，2，6-Ar-H)，7.11(d，1H，J＝16.2Hz，-CH＝CH-)，7.14(d，1H，J＝16.2Hz，-CH＝CH-)，7.52(d，2H，J＝8.1Hz，3＇，5＇-Ar-H)，7.67(d，2H，J＝8.1Hz，2＇，6＇-Ar-H)。

¹³C NMR(75MHz，丙酮-d6)δ(ppm)：171.9(s，C＝O)，153.7(s)，138.9(s)，138.2(s)，133.4(s)，132.6(s)，127.5(d，-CH＝CH-)，127.3(d，-CH＝CH-)，126.7(d)，119.2(d)，104.0(d)，59.8(q，-OCH₃)，55.6(q，-OCH₃)，36.8(t)，31.6(t)，29.2(t)，29.1(t)，29.0(t)，25.4(t)，22.4(t)，13.4(q)。

实施例5：抗癌活性试验

1.受试化合物A～D

2.细胞株

人早幼粒细胞白血病细胞HL-60

人宫颈癌细胞Hela

人肝癌细胞Hep G2

人肺癌细胞A549

人低分化胃腺癌细胞BGC-823

3.方法

3.1取处于指数生长期状态良好的细胞一瓶，加入0.25％胰蛋白酶消化液，消化使贴壁细胞脱落，计数2～4×10⁴个/mL，制成细胞悬液。

3.2取细胞悬液接种于96孔板上，180μL/孔，置恒温CO₂培养箱中培养24小时。

3.3换液，加入受试药物，20μL/孔，培养48小时。

3.4将MTT加入96孔板中，20μL/孔。培养箱中反应4小时。

3.5吸去上清液，加入DMSO，150μL/孔，平板摇床上振摇5分钟。

3.6用酶联免疫检测仪在波长为570nm处测定每孔的吸光值(OD值)，并计算细胞抑制率。以相应溶媒作阴性对照，以长春瑞宾(Vinorelbine，VBI)或紫杉醇(taxol，TAX)为阳性对照。

3.7抗肿瘤活性判断标准(NCI)，具体见表1

表1.抗肿瘤活性判断标准(NCI)

4.实验结果

实验结果(见表2)表明受试化合物A～D对所用肿瘤细胞的增殖均有抑制活性。这表明二苯乙烯烷氧基衍生物4＇-位的酰胺基对该类化合物的抗肿瘤活性起了重要的作用。实验数据表明4＇-酰胺基二苯乙烯烷氧基衍生物是一类新的二苯乙烯类抗肿瘤化合物。

表2.受试物对肿瘤细胞增殖的影响(n＝3，重复1次)

Claims

1.结构式如下的化合物：

其中R₁、R₂、R₃相同且均为甲氧基，或R₁、R₂相同且均为甲氧基，R₃为H；

R为结构式如下的基团：

其中R₄为C₁～C₉的烷基。

2.权利要求1所述的化合物，具体为：

a.E-3，4，5-三甲氧基-4′-乙酰胺基二苯乙烯；

b.E-3，4，5-三甲氧基-4′-丙酰胺基二苯乙烯；

c.E-3，4-二甲氧基-4′-壬酰胺基二苯乙烯；

d.E-3，4，5-三甲氧基-4′-壬酰胺基二苯乙烯。

3.权利要求1所述化合物的制备方法，包括：

将4′-氨基二苯乙烯的烷氧基衍生物，经如下化学反应，

得到4′-位为C₂～C₁₀的酰胺基二苯乙烯类的化合物；

X为卤素；R₄为C₁～C₉的烷基。

4.一种药物组合物，含有权利要求1或2任一项所述的化合物和药物可接受的载体。

5.权利要求1或2任一项所述的化合物或权利要求4所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物中的用途。