CN101125149B - 眼科手术专用有色灌注液 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种眼科手术专用有色灌注液。本发明所述的眼科手术专用有色灌注液，包括常规的眼用平衡盐液，其特点是还含有0.001-0.1mg/ml的荧光素钠。本发明首次提出眼内有色灌注液和有色手术的概念，其优点是：可充填于前房、玻璃体和晶状体囊袋等腔隙，与眼内透明的、半透膜的组织如角膜、晶状体囊膜、玻璃体以及视网膜等形成反差，使术者更易辨认这些结构，使不易辨别的组织变为可视，从而使手术变得容易、操作准确、缩短时间、保护视网膜、晶状体囊膜等主要结构，减少手术并发症，以达到更好的手术效果。另外改变并克服了以往局部染色的方法中局部染色法费时、需要冲洗，手术过程复杂、操作比较麻烦；无法对周围的组织进行差异显示，即范围太小等问题。

Description

眼科手术专用有色灌注液

技术领域

本发明涉及一种眼科手术专用有色灌注液。

背景技术

随着现代显微手术器械的发展，眼科手术普遍使用显微器械，内眼手术技术已日趋完善和成熟。在各级医院白内障摘除术已经普遍开展，玻璃体视网膜手术也开始在大中型医院逐步开展，其数量逐年增加，挽救了许多失明或者接近失明的眼睛。眼科手术中灌注液直接和眼内的角膜内皮、晶状体囊膜以及视网膜等组织接触，从而对于手术用灌注液有严格的要求，包括灌注液的成份和酸碱度等，使其尽量减少其对眼组织的损伤，特别是手术时间较长的手术。眼用平衡盐溶液是眼科常用的内眼手术灌注液，无色透明，含有多种盐离子，其成份、浓度、酸碱度和眼内的前房水接近，可以用于较长时间的手术，是目前公认的手术用溶液，实践证明眼用平衡盐无毒、副作用少。但平衡盐溶液是无色透明的，在手术时很难和眼内透明组织如角膜内皮、晶状体囊膜以及视网膜内界膜等形成明显的界面，手术医生空间感觉不强，容易造成误伤。

现代内眼手术，尤其是超声乳化手术和玻璃体切除手术，在一个狭小的空间里进行着复杂的操作，超声能量、玻璃体切割头以及其他手术器械均可损伤眼内组织，引起医源性的并发症，导致术后视力不佳，甚至眼球萎缩。产生手术并发症的原因一是医生的手术技巧和手术知识、以及经验的不足，二是眼球组织固有的特点所致。眼球的许多组织是透明的，如角膜、晶状体和视网膜等，这些组织又均为手术密切接触的组织。在常规的手术显微镜下，医生的立体感觉特别是深度感觉不明显，对于有一定颜色的组织可以避免直接接触，但是对于透明组织，损伤常无法避免。例如，在白内障手术中即使有良好的眼底红光反射，也不能清楚地辨认角膜内皮层；玻璃体视网膜手术多数没有良好的背景，即使非常有经验的医生也常常会判断失误、操作不到位，或者器械直接损伤眼组织的现象，从而导致手术时间延长、并发症增加、甚至手术失败，这也是造成这两大常规手术并发症较多，并且难以在基层医院普及的原因之一。

为了减少眼组织的损伤，辨别某些眼内组织，做到准确操作，眼科手术中常常使用一定的染色剂对眼内组织进行局部染色，方法是在手术特定的部位注入染色剂，暂时使用后迅速去除，可以增加组织的辨认程度，提高手术效率。但是，这样使用也有其缺点，局部高浓度的药物对眼内组织特别是神经组织造成一定的损伤，有的药物的副作用甚至持续半年以上。染色剂在眼科的应用可以追溯到上世纪40年代前后，到60年代，白内障内眼手术开始使用染色剂，主要用于晶状体前囊膜和皮质的染色，有利于去除有计划的去除囊膜和晶状体皮质。1969年，Kutscher向玻璃体腔注射专利兰，使视网膜着色，协助寻找视网膜裂孔。染色剂在现代内眼手术中的研究和应用是近10年前后开始报道，目前可用于内眼手术的染色剂有吲哚氰绿、台盼兰、次氰绿、专利兰和荧光素钠等，研究的目的是观察染色剂在手术中的作用的有效性和安全性。1993年Hoffer首次提出将荧光素钠注入晶状体囊膜下使成熟白内障囊膜可见的设想，研究人员通过静脉注释荧光素来观察前房内荧光素的代谢时间，其后Freitz将荧光素钠应用于临床。以后又有引哚氰绿、胎盘兰等染色剂应用于白内障手术，主要应用于晶状体前囊膜的撕囊。2004年国际上首次提出染色玻璃体切除术，现已成为玻璃体视网膜手术的重要技巧之一。目前的研究证实，染色剂可以使晶状体囊膜、晶状体皮质、玻璃体组织、视网膜前膜、视网膜内界膜和新生血管膜等不容易辨认的靶组织清晰可见，手术变得容易，切除部位更准确，大大缩短手术时间，减少了并发症。可用于各种原因的黄斑裂孔、黄斑前膜、糖尿病视网膜病变、玻璃体黄斑牵拉综合征、黄斑囊样水肿等病例，或识别嵌顿于巩膜切口的玻璃体。在常用的染色剂中，对吲哚氰绿、荧光素、台盼兰和曲安奈德的研究和报道较多且深入。研究发现引哚氰绿、胎盘兰对眼内组织特别是视网膜有毒性作用，与接触时间和浓度相关，同时有其它的副作用。曲安奈德在眼内存留可以造成眼压升高、晶状体混浊和眼内感染等并发症。目前发现荧光素的副作用较少，研究认为荧光素钠与玻璃体组织亲和力高，但临床报道较少，未见毒性报道。

荧光素于1871年，由德国化学家AdolfBaeryer初次合成。Maclean和Maumenee(1955)最先利用生物显微镜和钴蓝滤光片，并向人体内静脉注射10％荧光素5ml，对脉络膜血管瘤和脉络膜黑色素瘤作鉴别诊断。1960年，Novotny和Alvis发展了荧光素血管造影法；这种方法目前被广泛应用于脉络膜视网膜疾病的研究和治疗方面。荧光素的分子量376.28，目前主要应用其钠盐，pH 7.14时荧光最强，体内80％和血清蛋白结合(主要是和白蛋白)。在细胞内外空间内快速扩散，在24～36小时内使得皮肤与黏膜着染，自由弥散通过脉络膜毛细血管、Bruch’s膜、视神经和巩膜，无法通过视网膜血管、视网膜色素上皮、大的脉络膜血管等，在24～36小时后通过肝、肾快速代谢排出。目前荧光素钠主要应用于眼底血光造影技术，还没有在眼内灌注液中应用的报道。

综上所述，目前的文献检索研究表明，为达到增加眼内组织可视度目的国内外现有的文献都是关于内眼手术中染色剂的研究而没有关于灌注液方面的研究。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明提供一种带有一定颜色的灌注液在眼科手术中使用，以达到增加眼内组织可视度的目的。

本发明所述的眼科手术专用有色灌注液，包括常规的眼用平衡盐液，其特点是还含有0.001-0.1mg/ml的荧光素钠。

按照人体注射用液体的配制要求，根据不同的使用目的、不同制剂，在不同盐离子成分的眼用平衡液中添加不同剂量的荧光素钠即制成眼科手术专用有色灌注液，也称荧光素钠有色灌注液。该灌注液可以代替常规的眼内灌注液也即常规的眼用平衡盐液，广泛应用于晶状体手术、玻璃体视网膜手术、虹膜手术等，既可在手术中全程使用，也可以阶段性应用，在手术结束时置换常规的透明灌注液。

本发明除了具有一般平衡盐溶液的作用外，首次提出眼内有色灌注液和有色手术的概念，其不同于常规的无色眼科手术用溶液的优点是：可充填于前房、玻璃体和晶状体囊袋等腔隙，与眼内透明的、半透膜的组织如角膜、晶状体囊膜、玻璃体以及视网膜等形成反差，使术者更易辨认这些结构，使不易辨别的组织变为可视，从而使手术变得容易、操作准确、缩短时间、保护视网膜、晶状体囊膜等主要结构，减少手术并发症，以达到更好的手术效果。可以大大提高手术可视度、减少手术损伤、缩短手术时间，提高手术效率。新型灌注液改变并克服了以往局部染色的方法中局部染色法费时、需要冲洗，手术过程复杂、操作比较麻烦；无法对周围的组织进行差异显示，即范围太小等问题；另外以往的局部染色的方法染料还有组织毒性问题没有解决，本发明经过毒性检测确认没有毒性问题。

在本发明通过视光学方法筛选最佳视觉浓度后，经细胞学毒性检测、动物实验和初期的临床试验来观察有色灌注液的安全性和有效性，确认是一种可用于眼内手术术中染色的灌注液，达到了提高眼内透明组织的可辨认度，缩短手术时间，简化手术操作和减少眼内组织损伤的目的，对玻璃体视网膜手术和白内障手术技术带来新的技术进步，同时产生显著的社会与经济效益。

其中关于选取多少剂量的荧光素钠加入眼用平衡盐液中，是通过检测不同浓度的溶液的对比度和透光度，绘制吸光度和对比度曲线。兼顾对比度和透光度，在可能的交叉点选择一定浓度的有色灌注液，进行活体动物眼内手术实验，根据光学检测和实验结果来选择最佳视觉效果的浓度，0.001-0.1mg/ml的荧光素钠眼用平衡盐溶液透光度较良好，对比度较适中能使用于眼内显微手术；更为理想的浓度范围是0.004-0.04mg/ml，该范围内的荧光素钠眼用平衡盐溶液透光度最为良好，对比度最为适中能使用于眼内显微手术，当然稍偏离该浓度范围的荧光素钠眼用平衡盐溶液也是可以的。

所述的常规的眼用平衡盐液其成份、浓度和酸碱度和眼内的前房水接近，在此基础上本发明的优选的眼用平衡盐液其成份为：

氯化钠：6.0mg/ml-6.6mg/ml

氯化钾：0.30mg/ml-0.38mg/ml

氯化钙：0.18mg/ml-0.20mg/ml

硫酸镁：0.25mg/ml-0.35mg/ml

碳酸氢钠：1.7mg/ml-2.1mg/ml

余量：蒸馏水

这样成份的眼用平衡盐液更加适合本发明的眼科手术专用有色灌注液即荧光素钠眼用平衡盐溶液的配制，需要说明的是其中部分的成份也可以由同样性质与特性的盐代替，例如碳酸氢钠就可以由乳酸钠代替等等。

在此基础上本发明的进一步设置是：根据不同的手术方式和不同的疾病进行选择性添加其它组份，即本发明的眼科手术专用有色灌注液还包括有葡萄糖：1.5-4.0mg/ml，特别适用于合并有糖尿病的患者的玻璃体视网膜手术。

本发明的另一方面设置是：还包括有肾上腺素：0.0002mg/ml-0.0016mg/ml，肾上腺素的作用是维持瞳孔扩大状态。

在本发明的眼科手术专用有色灌注液中还包括有地塞米松：0.004mg/ml-0.008mg/ml，或用庆大霉素等代替地塞米松，地塞米松或庆大霉素等的加入是为了消除或减少炎症。

实施方式

实施例1：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.6mg/ml即1650mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.18mg/ml即45mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，荧光素钠：1mg/250ml。规格：250ml，500ml。

实施例2：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.6mg/ml即1650mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.18mg/ml即45mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，荧光素钠：10mg/250ml。规格：250ml，500ml

实施例3：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.6mg/ml即1650mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.18mg/ml即45mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，荧光素钠：2.5mg/250ml。规格：250ml，500ml。

实施例4：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.6mg/ml即1650mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.18mg/ml即45mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，荧光素钠：0.25mg/250ml。规格：250ml，500ml。

实施例5：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.6mg/ml即1650mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.18mg/ml即45mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，荧光素钠：25mg/250ml。规格：250ml，500ml。

实施例1-5配方的眼科手术专用有色灌注液特别适用于一般的玻璃体视网膜疾病的玻璃体手术与白内障患者的手术治疗，特别是成熟期、过熟期白内障，部分外伤性白内障。

实施例6：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.0mg/ml即1500mg/250ml，氯化钾：0.38mg/ml即95mg/250ml，氯化钙：0.20mg/ml即50mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，葡萄糖：1.5mg/ml，肾上腺素：0.5mg/250ml，荧光素钠：2.5mg/250ml。规格：250ml，500ml。

此配方或还包括有微量的地塞米松或庆大霉素等，该眼科手术专用有色灌注液适用于玻璃体发生不完全后脱离，或玻璃体已发生增殖但时间较短，特别视网膜表面增殖膜未成形，极不易与视网膜区分的玻璃体视网膜疾病的玻璃体手术中，如一些需玻璃体手术的PVR C3期的孔源性视网膜脱离、增生性糖尿病性视网膜病变等；还适用于玻璃体混浊非常严重的病例，如眼内炎、眼外伤、玻璃体积血等；以及黄斑部疾病，如黄斑裂孔、前膜，特别是高度近视合并黄斑裂孔性视网膜脱离的病例。

实施例7：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.0mg/ml即1500mg/250ml，氯化钾：0.30mg/ml即75mg/250ml，氯化钙：0.20mg/ml即50mg/250ml，乳酸钠：3.1mg/ml  即775mg/250ml，葡萄糖：3mg/ml即750mg/250ml，肾上腺素：2mg/250ml，荧光素钠：2.5mg/250ml。规格：250ml，500ml。

此配方特别适用于合并有糖尿病的患者的玻璃体视网膜手术。

实施例8：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.0mg/ml即1500mg/250ml，氯化钾：0.38mg/ml即95mg/250ml，氯化钙：0.20mg/ml即50mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，葡萄糖：3mg/ml即750mg/250ml，肾上腺素：0.5mg/250ml，地塞米松：2mg/250ml，荧光素钠：2.5mg/250ml。规格：250ml，500ml。

此配方适用于严重眼内炎症和增殖的眼，外伤性视网膜脱离的患者，儿童及青少年患者，合并牵拉孔源性视网膜脱离的增生性糖尿病性视网膜病变。

实施例9：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.0mg/ml即1500mg/250ml，氯化钾：0.38mg/ml即95mg/250ml，氯化钙：0.20mg/ml即50mg/250ml，硫酸镁：0.3mg/ml即75mg/250ml，碳酸氢钠：2.1mg/ml即525mg/250ml，葡萄糖：2mg/ml即500mg/250ml，肾上腺素：5mg/250ml，庆大霉素：0.2～0.4mg mg/250ml，荧光素钠：1mg/250ml。规格：250ml，500ml。

此配方适用于眼内炎的患者，或有感染倾向的患者。

实施例10：眼科手术专用有色灌注液包括有氯化钠：6.0mg/ml即1500mg/250ml，氯化钾：0.36mg/ml即90mg/250ml，氯化钙：0.20mg/ml即50mg/250ml，乳酸钠：3.1mg/ml  即775mg/250ml，肾上腺素：0.5mg/250ml，地塞米松：2mg/250ml，荧光素钠：2.5mg/250ml。规格：250ml，500ml。

此配方也适用于眼内炎的患者，或有感染倾向或者眼外伤行玻璃体视网膜手术的患者。

将实施例所获得的不同组份眼科手术专用有色灌注液均进行细胞毒性实验，目的是观察灌注液的细胞毒性。其方法是：将相应浓度的染色剂加入培养的视网膜色素上皮细胞、观察染色剂对培养的形态、生长曲线有无影响以及细胞内代谢过程等。结果是：在视网膜色素上皮细胞培养液中加入以上各浓度的物质，30分钟、1小时、3小时和24小时后观察发现细胞的形态、活性以及显微镜下结构和正常细胞无明显差别。

将实施例所获得的不同组份眼科手术专用有色灌注液均进行动物试验观察，目的是：通过配制应用于眼科手术的眼科手术专用有色灌注液，观察其对兔眼内组织毒性及组织相容性，验证其在手术操作中的有效性、安全性、优越性。其方法是：

选取健康成年日本大耳白兔40只，普通级，体重2.0～2.5kg，雌雄不限。20只兔为超声乳化组，行超声乳化术，20只为玻璃体手术组，行玻璃体切除联合晶状体切除手术，一眼为实验眼，另眼为对照眼。实验眼使用常规眼科平衡盐溶液，对照眼使用眼科手术专用有色灌注液。术前对所有眼行裂隙灯显微镜观察并照相、角膜内皮镜检查、眼压测量、视网膜电图(ERG)检查，术后定期观察术眼，并予以抗生素滴眼液、糖皮质激素滴眼液和睫状肌麻痹剂等点眼。术后6小时、24小时、7d、1m、3m时裂隙灯显微镜观察并照相，角膜内皮镜检查、眼压测量、视网膜电图(ERG)检查。术后3月时处死动物，摘除眼球制作标本，对角膜、视网膜行光学显微镜检查，对角膜内皮细胞行扫描电子显微镜检查，视网膜组织行透射电子显微镜检查。对实验数据应用统计学软件SPSS 12.0进行方差分析，收集资料并进行分析的结果是：

1.手术结果：

含荧光素钠的眼科手术专用有色灌注液在兔眼内透光度良好，对比度适中。过高浓度的荧光素影响显微镜光线的穿透，过低的浓度则在介质中和晶状体囊膜、玻璃体和视网膜组织等的反差小，显微镜下不易产生差别。

(1)平均手术时间：

超声乳化组：实验眼：3m，对照眼5m；

玻璃体手术组：实验眼：33m，对照眼41m

(2)术中组织意外损伤次数(包括后囊膜破裂、前囊膜裂开、虹膜损伤和视网膜损伤等)：

超声乳化组：实验眼：0次，对照眼3次；

玻璃体手术组：实验眼：1次，对照眼6次

(3)显微镜下，实验眼明显比对照眼溶液和晶状体囊膜、玻璃体&视网膜表明的反差明显，组织的分辨速度快，组织意外损伤机会小，手术速度快。

2、裂隙灯显微镜检查结果：

超声乳化组各组术后24h内结膜充血、角膜伤口处轻度水肿，3d后充血与水肿消退，两组无明确差异。玻璃体手术组在术后2～3天结膜混合充血明显，角膜轻度水肿；术后5～7天逐渐减轻，术后7～10天结膜充血消退，角膜透明；早期有一过性的前房炎性反应，术后5天内消失。

3、角膜内皮镜检查结果：

①角膜内皮细胞数目(CD)  两组术后检查结果较术前无明显改变(P＞0.05)，两组实验眼和对照眼比较，术后各个时间段的差别无统计学意义(P＞0.05)。

②六边形细胞百分率(6A％)  各组术后检查结果较术前均有降低，但是无统计学意义(P＞0.01)；

③细胞面积变异系数(CV)  各组术后检查结果较术前均无明显改变(P＞0.05)，术后1月及3月时各组间差别无统计学意义(P＞0.05)。

4、眼压：

术后1月及3月各组眼压情况较术前均无明显变化(P＞0.05)，术后各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05)。

5、视网膜电图(ERG)：

各组视网膜电图情况较术前均无明显变化(P＞0.05)，术后1月、3月时各组之间比较无明显差异(P＞0.05)。

6、光学显微镜检查：

两组：术后3月光镜下角膜及视网膜组织各层结构清晰，无明显病理性改变；

7、电子显微镜检查：

透射电镜观察眼内组织包括视网膜组织各层结构均无明显病理性改变。

结论是：使用含荧光素钠的眼科手术专用有色灌注液进行内眼手术，眼内组织反差大，术中意外损伤少，手术速度明显比使用常规溶液快，术中使用安全，是一种良好的新型眼科手术材料。

Claims (8)

1.一种眼科手术专用有色灌注液，包括常规的眼用平衡盐液，其特征是还含有0.001-0.1mg/ml的荧光素钠。

2.按照权利要求1所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：含有0.004-0.04mg/ml的荧光素钠。

3.按照权利要求1或2所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于眼用平衡盐液其成份为：

氯化钠：6.0mg/ml-6.6mg/ml

氯化钾：0.30mg/ml-0.38mg/ml

氯化钙：0.18mg/ml-0.20mg/ml

硫酸镁：0.25mg/ml-0.35mg/ml

碳酸氢钠：1.7mg/ml-2.1mg/ml

余量：蒸馏水。

4.按照权利要求3所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：还包括有葡萄糖：1.5-4.0mg/ml。

5.按照权利要求3所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：还包括有肾上腺素：0.0002mg/ml-0.0016mg/ml。

6.按照权利要求4所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：还包括有肾上腺素：0.0002mg/ml-0.0016mg/ml。

7.按照权利要求3所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：还包括有地塞米松：0.004mg/ml-0.008mg/ml。 

8.按照权利要求4或5或6所述的眼科手术专用有色灌注液，其特征在于：还包括有地塞米松：0.004mg/ml-0.008mg/ml。